Effaith Gwrth-Heneiddio Oligosaccharid Chitosan ar Heneiddio Tanllyd a Achosir gan D-Galactos mewn LlygodⅡ

3. Trafodaeth

Mae wedi’i dderbyn yn eang bod y model llygoden heneiddio tan-aciwt a achosir gan D-gal a ddefnyddir yn ein hastudiaeth bresennol yn fodel heneiddio a fabwysiadwyd fel arfer yn seiliedig ar ddamcaniaeth metabolig heneiddio, y mae ei symptomau’n debyg i’r broses heneiddio naturiol. Mae D-gal yn faetholyn arferol sy'n bodoli'n naturiol yn y corff (21). Gan fod dos penodol o D-gal yn cael ei chwistrellu i'r llygod o fewn cyfnod o amser, bydd ei grynodiad mewn celloedd yn rhy uchel i'w gatalysio gan galactose ocsidas i aldos a hydrogen perocsid yn olaf yn cynhyrchu anionau superoxide (22). Mae'rocsidiad yn y corffyn cynhyrchu nifer fawr o radicalau rhydd, sydd y tu hwnt i allu scavenging y corff ac yn arwain atperocsidiad lipid; yn y cyfamser, gall y cynhyrchion dadelfennu terfynol (fel MDA) gyfuno'n uniongyrchol neu'n anuniongyrchol â phroteinau asidau niwclëig, ffosffolipidau, a sylweddau eraill, nid yn unig yn dinistrio strwythur cemegol sylweddau bywyd mewngellol ac yn amharu ar swyddogaeth celloedd ond hefyd yn niweidio celloedd meinwe arferol, yn ogystal fel sy'n effeithio ar y pwysau osmotig arferol, sy'n arwain ymhellach at anhwylderau metabolaidd organau hanfodol ac yn y pen draworganeb yn heneiddio(23,24). Felly,Heneiddio is-aciwt a achosir gan D-gal in mae llygod wedi'u dewis yn ein hastudiaeth gyfredol i ymchwilio i'reffeithiau gwrth-heneiddio posibl COSaarchwilio'r mecanwaith sylfaenol, Yn yr astudiaeth bresennol, datgelodd y canlyniadau fod gan y llygod grŵp model wahaniaeth sylweddol yn eu hymddygiad dyddiol o gymharu ag ymddygiad llygod grŵp arferol. Yn ogystal, fe wnaeth dueg a thymws llygod model atroffi'n sylweddol, tra bod mynegeion eu dueg a'u thymws yn sylweddol is na rhai llygod arferol. Ar ben hynny, bywiogrwydd oensymau gwrthocsidiol, fel GSH-Px, CAT, a SOD yn yr afu a'r aren o lygod model eu lleihau, tra bod y gwrthwyneb yn wir ar gyfer lefel MDA. Mae'r canlyniadau hyn yn cyd-fynd ag astudiaethau blaenorol (6,7,22-24), sy'n dangos bod y mewn llygod wedi'i sefydlu'n llwyddiannus yn ein hastudiaeth bresennol.

Cliciwch Yma I Gael Mwy o Wybodaeth am Cistanche ForEffeithiau Gwrth-heneiddio

Efo'rcynnydd mewn oedran, y system imiwneddo'r corff yn dioddef newidiadau dirywiol sydd nid yn unig yn lleihau'r ymateb imiwn i antigen tramor-benodol ond sydd hefyd yn cyflwyno anghydbwysedd cyffredinol o ran swyddogaeth imiwnedd, a arweiniodd o'r diwedd at achosion amrywiol o glefydau (25). Felly mae rheoleiddio imiwnedd y corff yn un o'r prif ddulliau yn yr astudiaeth gwrth-heneiddio. Yn ogystal, mae'r thymws a'r ddueg yn ddwy organ imiwn bwysig yn y corff, y gall mynegeion yr organau adlewyrchu cryfder system imiwnedd amhenodol i ddechrau, ac sydd hefyd yn fynegeion rhagarweiniol i amcangyfrif swyddogaeth imiwnedd amhenodol y corff. corff (26,27. Dangosodd y canlyniadau presennol, o gymharu â'r grŵp arferol, fod yr organau imiwn, megis thymws a dueg llygod yn y grŵp model a chwistrellwyd â D-gal am wyth wythnos, yn amlwg wedi crebachu, a'r thymws a roedd mynegeion dueg wedi gostwng yn amlwg.O'u cymharu â'r grŵp model, er, ar gyfer triniaeth, nid oedd unrhyw effaith hyrwyddo amlwg i'r lleihad hwn a achosir gan D-gal o thymws a mynegeion dueg, mynegeion y ddwy organ hyn yn y COS isel-canol- cynyddodd grwpiau dos uchel yn raddol (yn enwedig ar gyfer mynegai dueg), gan nodi y gallai COS wella mynegeion ansawdd dueg a thymws llygod henaint, atal dirywiad yr organau imiwnedd, ac yn y pen draw gwella'r imiwnedd amhenodol i ryw raddau. Ar y llaw arall, fel un o ffactorau imiwnedd amhenodol y corff, mae'r system gwrthgorff yn chwarae rhan bwysig yn ymateb imiwn y corff ac addasu imiwnedd, tra bod imiwnoglobwlin (lg) yn ddangosydd a ddefnyddir yn gyffredin o statws imiwnedd humoral ({{12) }}]. Mae serwm lg yn cynnwys lgG, IgM, IgA, IgD, ac IgE, y mae lgG ac IgM ohonynt yn brif gydrannau gwrthgyrff serwm, oherwydd gall eu cynnwys adlewyrchu gallu ymateb imiwn ac imiwnedd humoral y corff (31]. Dangosodd canlyniadau'r astudiaeth bresennol fod lefelau serwm lgG yn y llygod grŵp model yn sylweddol is na'r rhai yn y grŵp llygod arferol.O'i gymharu â rhai'r grŵp model, ar gyfer triniaeth VE, nid oedd unrhyw effaith hyrwyddo amlwg ar Gostyngiad a gynhyrchwyd gan yD-gal hwn yn lefelau lgG a lgM mewn serwm llygod, tra bod y lefelau serwm hyn o IgG' andlgM o lygod senescent a gafodd eu trin â COS wedi cynyddu'n sylweddol, gan nodi y gallai COS wella'r gallu ymateb imiwn a gwella swyddogaeth imiwnedd humoral y corff . I grynhoi, mae gan COS rôl reoleiddiol dda ar swyddogaeth imiwn llygod sy'n heneiddio a achosir gan D-gal, sydd i fod i oedi heneiddio.

Yn ogystal, mae'r mewndarddolsystem ensymau gwrthocsidiol, gan gynnwys yn bennafSOD(ensymymroddedig ichwilota radicalau anion superoxidealleihau cynhyrchu perocsidiad lipid), CAT(ensym sy'n ymroddedig i sborionio H2O2 i amddiffynperocsidiad lipid cellfur a lipoproteinau), a GSH-Px (ensym sy'n canolbwyntio ar gataleiddio GSH i GSSG ac ysgogi'r perocsid gwenwyniglleihau i gyfansoddion hydrocsyl diwenwyn), yn system amddiffyn bwysig yn erbyn radical rhydddifrod yn y corff, a'i brif swyddogaeth yw cynnal homeostasis ROS yn y tu mewnamgylchedd ac i gael gwared ar lefelau rhy uchel o ROS [4,5,32,33]. Mae nifer o ddarnau o dystiolaeth yn cael eu harddangosy gall cynhyrchu gormod o ROS mewn systemau biolegol achosi niwed ocsideiddiol i feinweoedd,amharu ar swyddogaethau pilen, effeithio ar metaboledd cellog, a passivate proteinau ac ensymau, yn enwedigyn yr organau â phrosesau metabolaidd cyflym fel yr afu a'r arennau [34–36]. Yn gyson â'r rhainastudiaethau, canfuom fod dro ar ôl troD-gal-chwistrelliad achosi gostyngiad gweladwy yn y gweithgareddau oyr ensymau gwrthocsidiol allweddol hyn (SOD, CAT, a GSH-Px), a pherocsidiad lipid gwaethygol sylweddol,wedi'i amlygu fel croniad o MDA, sy'n dangos bod iawndal ocsideiddiol wedi digwydd yn afu llygodac aren. Ar ben hynny, defnyddir lefelau serwm ALT, AST, ac ALP yn eang i werthuso afuswyddogaethau, lle mae ALP yn chwarae rhan bwysig iawn wrth ddadffosfforyleiddiad ensymau protein,tra mai ALT ac AST yw'r dangosyddion cynharaf a mwyaf sensitif o anaf i'r afu. Yn y cyfamser, AU aCREA yw prif ddangosyddion swyddogaeth arennol, a fydd yn cael eu hidlo allan trwy'r hylif glomerwlaiddi mewn i'r llif gwaed mewn symiau mawr pan fydd niwed arennol yn digwydd yn ystod y broses heneiddio [37,38]. Ynghyd â difrod meinwe ocsideiddiol i iau ac arennau llygod, mae lefelau serwm ALT, AST, aRoedd ALP, yn ogystal â CREA ac UA yn y llygod grŵp model, yn sylweddol uwch na'r rhai arferolllygod grwp. Fodd bynnag, nid yn unig arddangosodd COS, o chitosan cragen berdys gan hydrolysis enzymatigeiddo gwrthocsidiol ffafriol trwy wella gweithgareddau'r gwrthocsidasau hyn a lleihau'rlefel MDA, gan ddangos yr effaith wrthblaid arD-niwed ocsideiddiol a achosir gan gal i iau llygod aaren, ond hefyd wedi lliniaru'r codiadau eithriadol hyn mewn lefelau serwm ALT, AST, ALP, CREA, ac UAi raddau yn is na'r grŵp model, gan ddangos rôl bwysig wrth gadw'r normalswyddogaeth yr afu a'r arennau. Yn y cyfamser, arddangosodd VE hefyd, i raddau, wrthocsidyddeffaith yn bennaf trwy ddwysau gweithgareddau SOD yn iau ac arennau llygod, yn ogystal â lleihaulefelau MDA, i weithredu rhywfaint o effeithiau amddiffynnol ar lygod hepatig a swyddogaethau arennol.Yn ogystal, dangosodd archwiliad histolegol bod lefelau ymdreiddiad celloedd llidiol aNecrosis o hepatocytes, yn ogystal ag atroffi y glomerwlws arennol yn cael eu gwella yn y modelgrŵp, tra bod cymhwyso COS a VE wedi lleddfu'r iawndal hepatig ac arennol hyna achosir gan weinyddiaeth gronig gydaD-gal i raddau, a'r statws histolegol yn yRoedd grŵp COS-H yn debyg iawn i grŵp arferol. Y canlyniadau hyn o asesiadau histolegolyn cyfateb yn dda â'r dadansoddiad biocemegol.

I grynhoi, mae VE, y mae ei fonomer yn cael ei ddefnyddio'n aml fel rheolaeth gadarnhaol ar gyfer yr astudiaethauo heneiddio subacute mewn llygod a achosir ganD-gal, yn fitamin sy'n hydoddi mewn braster adnabyddus gyda rhagorolgweithgaredd gwrthocsidiol [37,39,40]. O ystyried na ddangosodd VE unrhyw effaith hyrwyddo amlwg ar y gostyngiad hwn a gynhyrchwyd gan D-galo ddangosyddion swyddogaeth imiwnedd llygod, roedd yn rhesymol casglu hynnyeffaith amddiffynnol benodol VE ar yr afu a'r arenD-gall llygod heneiddio a achosir gan gal fod yn bennafoherwydd ei ansawdd gwrth-ocsidiad. Yn gymharol, mae COS, yn deillio o gregyn berdys a chregyn crancod yny cefnfor, yn meddu ar amrywiaeth o effeithiau biolegol, megis yr effaith gynyddol ar y gostyngiad hwn a achosir gan D-galo ddangosyddion swyddogaeth imiwnedd llygod, aD-gal-achosi gostyngiadau yn y gweithgareddau o allweddolensymau gwrthocsidiol yn iau ac arennau llygod [12,15–17]. I gloi ein canlyniadau yn gynhwysfawr,gellid ystyried bod COS yn meddu ar effeithiau hepatoprotective a renoprotective arD-gal-ysgogillygod heneiddio subacute i wireddu ei weithgaredd gwrth-heneiddio, a allai fod yn gysylltiedig â'r gwrth-ocsidyddgallu COS, yn ogystal â'i rôl reoleiddiol dda ar swyddogaeth imiwnedd llygod i raddau mwy.

4.1. Deunyddiau a Chemegau

roedd yr astudiaeth o radd ddadansoddol.

4.2. Anifeiliaid

cylch goleuo yn ystod y cyfnod arbrofol o wyth wythnos. Gallent gael mynediad at y pelenni safonoldiet a dŵr yfed ad libitum trwy gydol cyfnod yr astudiaeth.

4.3. Paratoi Model Llygoden Heneiddio Is-aciwt a Thriniaeth COS

Ar ôl eu haddasu am wythnos, rhannwyd llygod ar hap yn chwe grŵp o wyth llygod yr unyn ol Tabl3. Er mwyn sefydlu llygoden model heneiddio naturiol,D-gal (250 mg/kg/dydd) oeddwedi'i chwistrellu'n isgroenol i gefn gwddf llygod unwaith y dydd am 56 diwrnod yn olynol. Traroedd llygod yn y grŵp arferol yn derbyn symiau cyfartal o halwynog ffisiolegol unwaith y dydd yn lleD-gal.Ar ôl pigiad subcutaneous oD-gal mewn llygod am awr, llygod yn normal a grwpiau model oeddwedi'i drin â dŵr distyll trwy adwy (20 mL/kg/dydd); yn y cyfamser, cafodd llygod yn y grŵp VE eu tringyda VE trwy gavage (50 mg / kg / dydd) fel rheolaeth gadarnhaol yn ôl adroddiadau diweddar [37,39,40]. Llygodmewn grwpiau COS-L, COS-M, a COS-H eu trin â'r atebion sampl (tri dos gwahanolo COS) y dydd yn ôl gavage, yn y drefn honno, a weinyddwyd yn ddyddiol fel yr amserlen driniaetharddangosir yn Tabl3.

4.4. Arsylwi Llygod yn Ddyddiol

Yn ystod y cyfnod arbrofol, mesurwyd pwysau corff llygod gan gydbwysedd electronigunwaith yr wythnos. Yn ogystal, mae archwaeth, ymddangosiad, cyflwr meddwl, a gweithgaredd ymddygiadol llygodym mhob grŵp yn cael eu harsylwi a'u cofnodi bob wythnos, yn y drefn honno.

4.5. Paratoi Llygod a Chasglu Sampl

cyfrifo fel mynegai organau. Ar ôl hynny, cafodd yr afu a'r aren eu storio ar unwaith−80 ◦C ar gyfery dadansoddiad biocemegol dilynol. Nid oedd unrhyw arwyddion achlysurol nac amlwg o wenwyndra trwy gydol ycwrs yr arbrofion a'r holl lygod dan sylw wedi goroesi.

4.6. Penderfynu Mynegeion Serwm

Gwahanwyd y serwm oddi wrth y gwaed cyfan trwy allgyrchiad ar 4000 rpm am 15 munud am 4◦C ac yna ei storio yn−80 ◦C ar gyfer dadansoddiad biolegol. Dadansoddwr biocemeg awtomatig (MindaryDefnyddiwyd BS-480, Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co., Ltd., Shenzhen, Tsieina) i fesurlefelau ALT, AST, ALP, CREA, UA, IgG, ac IgM yn serwm llygod yn ôl yr assaycyfarwyddiadau cit.

4.7. Mesur y Gweithgaredd Gwrth-Ocsidiad mewn Llygod Afu a'r Arennau

Ar gyfer dadansoddiad biocemegol, roedd meinweoedd organ pob llygoden gan gynnwys yr afu a'r aren yn gyflymtynnu i baratoi 10 y cant (w/v) homogenates mewn hydoddiant NaCl oer-iâ 0.9 y cant, ac yna allgyrchiantar 3000 rpm am 15 munud am 4◦C, ac yna cadwyd y supernatant wedi rhewi yn−70 ◦C tan biocemegoldadansoddi. Mesurwyd y crynodiadau protein gan y dull asid bicinchoninig (BCA) gan ddefnyddio bucholalbwmin serwm fel y safon. Gweithgareddau SOD, CAT, a GSH-Px, yn ogystal â lefelau MDAyn yr afu a'r aren, yn cael eu pennu gan y pecynnau assay.

4.8. Archwiliad Histolegol ar yr Afu a'r Arennau

Ar ôl aberth, cafodd samplau meinwe organau, gan gynnwys yr afu a'r arennau, eu tynnu'n gyflym, a'u gosod i mewn4 y cant o baraformaldehyd am 24 h, wedi'i ddadhydradu mewn graddau esgynnol o alcohol, yna wedi'i fewnosod mewn paraffin,ac o'r diwedd wedi ei adranu ar drwch o 5µm. Cafodd y samplau hyn eu staenio gan HE i'w harchwilio'n rheolaiddo'r meinweoedd hyn.

4.9. Dadansoddiad Ystadegol

Cyflwynwyd yr holl ddata meintiol fel modd± DC. Dadansoddwyd gwerthoedd arbrofol ganANOVA unffordd. Gwerth op < 0.05 was considered to be statistically signifificant. All analyses were perfformio gan ddefnyddio Meddalwedd Dadansoddi Ystadegol (SPSS 17.0).

Gwrthdaro Buddiannau:Nid yw'r awduron yn datgan unrhyw wrthdaro buddiannau.

Cyfeiriadau

1. Sergiev, PV; Dontsova, OA; Berezkin, GV Damcaniaethau Heneiddio: Maes Sy'n Datblygu Erioed.Acta Nat.2015, 7, 9–18. 

2. Ristow, M.; Schmeisser, S. Ymestyn hyd oes trwy gynyddu straen ocsideiddiol.Radic Rhad. Biol. Med.2011, 51, 327–336. [Croesgyf] [PubMed] 

3. Kuilman, T.; Michaeloglou, C.; Mooi, WJ; Peeper, DS Hanfod heneiddrwydd.Genes Dev.2010, 24, 2463–2479. [Croesgyf] [PubMed]

4. Harman, D. Heneiddio: Damcaniaeth yn seiliedig ar radical rhydd a chemeg ymbelydredd.J. Gerontol.1956, 11, 298–300. [Croesgyf] [PubMed] 

5. Schieber, M.A.; Mae Chandel, NS ROS yn gweithredu mewn signalau rhydocs a straen ocsideiddiol.Curr. Biol.2014, 24, R453–R462. [Croesgyf] [PubMed] 

6. Li, SS; Liu, M.; Zhang, C.; Tian, ​​CY; Wang, XX; Cân, XL; Jing, HJ; Gao, Z. ; Ren, ZZ;Liu, WR; et al. Puro,in vitrogwrthocsidiol ayn vivogweithgareddau gwrth-heneiddio polysacaridau hydawddtrwy echdynnu gyda chymorth ensymau oAgaricus bisporus. Int. J. Biol. Macromol.2018, 109, 457–466. [Croesgyf] [PubMed] 

7. Zhao, HJ; Li, J. ; Zhang, JJ; Wang, XX; Hao, L. ; Jia, L. Puredigaeth,in vitrogwrthocsidiol ayn vivogweithgareddau gwrth-heneiddio exopolysaccharides ganAgrocybe cylindracea. Int. J. Biol. Macromol.2017, 102, 351–357. [Croesgyf] [PubMed] 

8. Deursen, JM Rôl celloedd senescent mewn heneiddio.Natur2014, 509, 439–446. [Croesgyf] [PubMed] 

9. Ginter, E. ; Simko, V. ; Panakova, V. Gwrthocsidyddion mewn iechyd ac afiechyd.Bratisl. Lek. Listy2014, 115, 603–606. [Croesgyf] [PubMed]

10. Jasiulionis, MG Rheoleiddio epigenetig annormal o'r system imiwnedd yn ystod heneiddio.Blaen. Imiwnol.2018, 9, 197. [Croesgyf] [PubMed] 

11. Kim, SK; Rajapakse, N. Cynhyrchu ensymatig a gweithgareddau biolegol oligosacaridau chitosan (COS):Adolygiad.Carbohydrad. Polym.2005, 62, 357–368. [Croesgyf] 

12. Zou, P.; Yang, X. ; Wang, J.; Li, YF; Yu, HL; Zhang, YX; Liu, GY Datblygiadau mewn cymeriadu a biolegolgweithgareddau oligosacaridau chitosan a chitosan.Cemegydd Bwyd.2016, 190, 1174–1181. [Croesgyf] [PubMed]

Gofynnwch am fwy:

E-bost:wallence.suen@wecistanche.com whatsapp: ynghyd â 86 15292862950