Gwanhau Uveitis Autoimiwn Arbrofol Mewn Llygod Mawr Lewis Gan Betaine
Jul 20, 2022
Cysylltwchoscar.xiao@wecistanche.comam fwy o wybodaeth
Mae uveitis awtoimiwn arbrofol (EAU) yn fodel anifail o uveitis awtoimiwn dynol a nodweddir gan ymdreiddiad celloedd T awtoimiwn gyda chynnydd cydamserol mewn cytocinau pro-llidiol a rhywogaethau ocsigen adweithiol. Nod yr astudiaeth hon oedd asesu a yw betaine yn rheoleiddio dilyniant EAU mewn llygod mawr Lewis. Ysgogwyd EAU trwy imiwneiddio gyda'r protein rhyng-ffotoreceptor sy'n rhwymo retinoid (IRBP) a rhoi naill ai cerbyd neu betaine (100 mg / kg) ar lafar am 9 diwrnod yn olynol. Cafodd dueg, gwaed, a retinas eu samplu o'r llygod mawr arbrofol ar adeg yr aberth a'u defnyddio ar gyfer assay amlhau celloedd T, dadansoddiad serolegol, adwaith cadwyn polymeras amser real, ac imiwn-histocemeg. Datgelodd asesiad amlhau celloedd T nad oedd betaine yn cael fawr o effaith ar amlder celloedd T splenig yn erbyn yr antigen IRBP mewn assay in vitro ar ddiwrnod 9 ar ôl imiwneiddio. Dangosodd y dadansoddiad serolegol fod lefel y serum superoxide dismutase wedi cynyddu yn y grŵp sy'n cael ei drin â betaine o'i gymharu â'r grŵp sy'n cael ei drin â cherbyd.dyfyniad cistanche tubulosaCadarnhawyd effaith gwrthlidiol betaine gan is-reoleiddio moleciwlau sy'n gysylltiedig â llid sy'n gysylltiedig â llid, gan gynnwys moleciwl adlyniad celloedd fasgwlaidd I a interleukin-1 yn retinas llygod mawr ag EAU. Roedd y canfyddiadau histopatholegol yn cytuno â rhai moleciwl addasydd sy'n rhwymo calsiwm ïoneiddio l immunohistochemistry, gan wirio ymhellach bod llid yn y cyrff retina a ciliaraidd wedi'i atal yn sylweddol yn y grŵp a driniwyd â betaîn o'i gymharu â'r grŵp a driniwyd gan gerbydau. Mae canlyniadau'r astudiaeth bresennol yn awgrymu bod betaine yn ymwneud â lliniaru EAU trwy weithgareddau gwrth-ocsidiad a gwrthlidiol.
Geiriau allweddol:Gwrth-llid, Gwrth-ocsidiad, Betaine, Uveitis awtoimiwn arbrofol, Retina
Rhagymadrodd
Mae cartrefu celloedd T awtweithiol ac ymdreiddiad celloedd llidiol, megis monocytes, uveitis sbardun a retinitis yn EAU [6]. Mae'r retina'n cael ei niweidio gan lid wrth i gelloedd glial actifadu sy'n mynd trwy straen ocsideiddiol[7].
Mae Betaine, a elwir hefyd yn trimethylglycine (CH: NO :), yn sylwedd naturiol alcaloid a diwenwyn o Fructus Lycia, ac yn sylwedd gwrthocsidiol cynrychioliadol [8]. Mae Betaine yn gwella llid sy'n gysylltiedig ag oedran mewn llygod mawr trwy gynnwys ffactor niwclear-kB trwy kinase sy'n ysgogi ffactor niwclear / I kappa B kinase a kinases protein-activated mitogen [9], clefyd cardiofasgwlaidd dynol trwy atal cytocinau llidiol, gan gynnwys interleukin (IL){{ 6}} a ffactor necrosis tiwmor-a (TNF-a) [10], a dextran sylffad tumorigenesis colon a achosir gan sodiwm [11].adolygiadau cistanche tubulosa,Yn ogystal, roedd betaine yn atal angiogenesis / neofasgwlaidd patholegol mewn llygod mawr â retinitis diabetig [12] ac yn amddiffyn celloedd ganglion retinol i gynyddu craffter gweledol mewn model anifail o glawcoma [13]. Fodd bynnag, ychydig sy'n hysbys am yr union fecanweithiau sy'n sail i effeithiau betaine mewn uveitis.
Yn yr astudiaeth hon, gwerthuswyd effeithiolrwydd betaine wrth leddfu EAU. Fe wnaethom ymchwilio i effaith gwrthlidiol betaine yn EAU yn seiliedig ar archwiliad histopatholegol a mesuriadau cytocin. At hynny, aseswyd mecanwaith penodol betaine fel gwrthocsidydd mewn llygod mawr ag EAU.
DEUNYDDIAU A DULLIAU
Anifeiliaid
Cafodd y ddau ryw o lygod mawr Lewis (7 ~ 9 wythnos oed; Orient Bio Inc, Gyeonggi-do, Korea) eu cartrefu yn ein cyfleuster o dan amodau labordy (12-h cylch golau/tywyll, tymheredd 23±2 gradd). Perfformiwyd yr holl weithdrefnau arbrofol gan ddilyn Canllawiau ar gyfer Gofalu a Defnyddio Anifeiliaid Labordy Prifysgol Genedlaethol Jeju (rhif caniatâd:2020-0012). Roedd yr holl brotocolau anifeiliaid yn cydymffurfio â chyfreithiau rhyngwladol a pholisïau NIH, gan gynnwys y Care and Use of Laboratory Animals (rhif cyhoeddiad NIH.85-23,1985, adolygwyd 1996).
Sefydlu EAU
Cafodd y llygod mawr eu himiwneiddio â 200 ul o emwlsiwn cymysg a oedd yn cynnwys cyfaint cyfartal o brotein rhwymol retinoid rhyngffotoreceptor buchol (IRBP)(I mg/ml; PTARSVGAADGSS-WEGVGVVPDV, Komabiotech, Seoul, Gweriniaeth Corea) a chynorthwyydd cyflawn Freund (CFA). ) wedi'i ategu â mi mg/mL Mycobacterium tuberculosis H37Ra (Difco Laboratories Inc., Detroit, MI, UDA) ar badiau troed eu coesau ôl.
Grwpiau arbrofol
I asesu effeithiau betaine (Ffig.1A) ar EAU, dynodwyd pedwar grŵp arbrofol fel a ganlyn: rheolaeth arferol (n=8); Rheolaeth CFA (n=8); EAU plws Cerbyd (n=8); ac EAU plws Betaine(n=8). Y dos yn y driniaeth i brofi effaith therapiwtig betaine(1 0 mg/kg pwysau corff/dydd, B2629, Sigma-Aldrich, St.Louis, MO, UDA) yn seiliedig ar astudiaeth flaenorol [14]. Cafodd y llygod mawr eu trin ar lafar 9 â betaine o ddiwrnod 0 ôl-imiwneiddio tan ddiwrnod 9 ôl-imiwneiddio.
Paratoi meinwe
Aberthwyd y llygod mawr o dan anesthesia dwfn trwy fewnanadlu nwy CO2 ar ddiwrnod 9 ar ôl imiwneiddio.cistanche DURoedd y meinweoedd ar gyfer yr archwiliad histopatholegol wedi'u mewnosod mewn cwyr paraffin a'u torri
gyda microtome (RM 2135; Leica, Nussloch, yr Almaen) i drwch o 5 um a'i staenio â hematocsilin ac eosin. Roedd gwaed a retinas yn cael eu storio ar -80 gradd ar gyfer y dadansoddiad serwm a dadansoddiad adwaith cadwyn polymeras (PCR) amser real.
Assay amlhau celloedd T
Cafodd celloedd mononiwclear dueg o'r anifeiliaid ym mhob grŵp eu datgysylltu a'u hatal fel y disgrifiwyd yn ein hastudiaeth flaenorol [15]. Yna, ychwanegwyd 10 ug/ml IRBP (crynodiad terfynol) at y ffynhonnau. Ar ôl 48 h o ysgogiad gyda IRBP, deorwyd y celloedd mewn 1 μCi o 'thymidin H-methyl (gweithgaredd penodol 42 Ci / mmol; Amersham, Arlington Heights, IL, UDA) am 18 h. Yna, cynaeafwyd y celloedd i fesur ymgorffori thymidin.
Gall Cistanche gwrth-heneiddio
Dadansoddiad serolegol
Aberthwyd y llygod mawr ar y dyddiad samplu, a chasglwyd gwaed trwy'r galon. Gwahanwyd samplau gwaed cyfan yn serwm a chelloedd gwaed gan ddefnyddio centrifuge (VS-5500CFN; Vision Scientific, Daejeon, Gweriniaeth Corea). Gwerthuswyd gweithgaredd Superoxide dismutase(SOD) yn y serwm gan ddefnyddio pecyn SOD (ab65354; Abcam, Caergrawnt, DU).
Imiwnohistocemeg
Perfformiwyd imiwnohistocemeg gan ddefnyddio'r un protocol â'r un a ddisgrifiwyd yn ein hastudiaeth flaenorol [16]. Mae'r gwrthgyrff cynradd gan gynnwys moleciwl addasydd sy'n rhwymo calsiwm ïoneiddiedig (Ibal)(1:1,000;019-19741, Wako Pure Chemical Industries, Ltd, Osaka, Japan), CD68 (ED1; 1: 800; MCA341, Serotec, Kidlington, UK), a synthetase glutamine (GS)(1: 5,000; MAB302, Chemicon In -ternational, Temecula, CA, UDA) yn cael eu defnyddio fel marciwr ar gyfer microg-lia, macrophage a cell Müller, yn y drefn honno.
PCR amser real
Cafodd cyfanswm yr RNA ym mheli llygaid ym mhob grŵp (n{0}} fesul grŵp) ei ynysu ag Adweithydd Ynysu TRIzol RNA (Life Technologies, Thermo Fisher Scientific, Carlsbad, CA, UDA), a pharatowyd cDNA gan ddefnyddio All-in CellScript M. -Un Cymysgedd Meistr Synthesis cDNA Safonol Cyntaf 5 (CellSafe, Gyeonggi-do, Gweriniaeth Korea). Rhestrir y wybodaeth preimio yn Nhabl 1. Perfformiwyd PCR gyda beiciwr MIC (BMS, Queensland, Awstralia) gan ddefnyddio 2x SYBR Green (PhileKorea, Seoul, Gweriniaeth Corea) a'r rhaglen ganlynol: 55 cylch dadnatureiddio (5 s,95 gradd ), anelio (20 s, 60 gradd ), ac estyniad (10s, 72 gradd).
Dadansoddiad o blotiau gorllewinol
Perfformiwyd dadansoddiad blot y gorllewin gan yr un protocol â'r un a ddisgrifiwyd yn ein hastudiaeth flaenorol [16].cistanche wirkungMae'r gwrthgyrff sylfaenol yn cynnwys protein sy'n gysylltiedig ag ECH tebyg i Kelch 1 (Keap1)(1:1,000; abl19403, abcam, MA, UDA), a erythroid ffactor niwclear-2-ffactor wedi'i ail-wneud2(Nrf2 )(1:1,000; sc-722,Santa cruz,CA,UDA).
Dadansoddiad ystadegol
Mae pob mesuriad yn cael ei adrodd fel cyfartaledd o dri arbrawf annibynnol. Cyflwynir yr holl werthoedd fel cyfeiliornad safonol cymedrig y cymedr (SEM). Dadansoddwyd y canlyniadau gan ddefnyddio dadansoddiad un ffordd o amrywiant a ddilynwyd gan brawf posthoc Student-Newman-Keuls ar gyfer cymariaethau lluosog. A p-gwerth<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" significance.="" immunostaining="" was="" analyzed="" semi-quantitatively="" based="" on="" the="" positive="" areas="" in="" the="" photographs="" using="" imagej="" software="" (national="" institutes="" of="" health,="" bethesda,="" md,="" usa).eau="" was="" histopathologically="" evaluated="" using="" a="" method="" modified="" from="" a="" previous="" study="" [17].="" antibody-positive="" areas="" were="" measured="" as="" follows:(1)three="" different="" sections="" from="" each="" rat="" (n="3" animals="" per="" group)="" were="" used;="" then,="" (2)="" the="" percentage="" of="" the="" stained="" area="" [(positive="" area/total="" area)x100(%)]="" was="" calculated.="" the="" total="" area="" included="" all="" layers="" of="" the="" retina.="" these="" results="" are="" presented="" as="" the="">
CANLYNIADAU
Betaine had no immunomodulatory function in EAU The T cell proliferation assay was performed to determine whether betaine affected the proliferation of IRBP-specific T cells (Fig.1B). No significant changes were observed between the EAU-induced groups in medium only and those that were IRBP-stim-ulated (medium only, p>0.05 vs.EAU+Vehicle; IRBP stimulation, p>0.05 vs.EAU plws Cerbyd). Mae'r data hyn yn dangos nad oedd betaine yn ymwneud â chelloedd T penodol i IRBP na'u awto-adweithedd.
Lefelau SOD serwm wedi'u huwchreoleiddio Betaine yn EAU
Fe wnaethom werthuso difrod ocsideiddiol yn y serwm, gan ddefnyddio SOD fel marciwr addasu ocsideiddiol. Ni welwyd unrhyw wahaniaeth arwyddocaol rhwng y grwpiau arferol a CFA. Gostyngodd gweithgaredd SOD yn sylweddol yn y grŵp EAU Plus Vehicle, o'i gymharu â lefelau yn y grwpiau rheoli arferol a CFA. Fe wnaeth triniaeth Betaine adfer lefel gweithgaredd SOD yn sylweddol i lefel y grwpiau rheoli arferol a CFA (Ffig. 2). Mae'r canlyniad hwn yn dangos bod y driniaeth betaine wedi atal straen ocsideiddiol mewn llygod mawr ag EAU.
Gostyngodd Betaine ymdreiddiad celloedd Ibal-positif yn y cyrff ciliaraidd a retinas llygod mawr a achosir gan EAU
Y corff ciliaraidd yw'r prif safle ymdreiddiad celloedd llidiol oherwydd y digonedd o bibellau gwaed[18]. Dim ond ychydig o gelloedd math crwn a ganfuwyd yn y cyrff ciliaraidd yn y grwpiau arferol a CFA (Ffig. 3A,3B), tra cadarnhawyd ymdreiddiad rhai celloedd math crwn yn y grwpiau a achosir gan EAU (saethau yn Ffig.3C). ,3D). Roedd y grwpiau arferol (Ffig.3E) a CFA(Ffig.3F) yn dangos canlyniadau tebyg yn gyson i'r rhai a welwyd ar gyfer imiwn-adweithedd Ibal. Cynyddodd imiwn-adweithedd Ibal-positif yn y grwpiau EAU ynghyd â Cherbydau ac EAU ynghyd â Betaine (penawdau saethau yn Ffig.3G, 3H). Fodd bynnag, gostyngodd nifer y celloedd Ibal-positif yn sylweddol yn y grŵp EAU plus Betaine o'i gymharu â'r grŵp EAU Plus Vehicle (Ffig. 3I). Buom hefyd yn dadansoddi lleoleiddio EDI fel dull pellach o werthuso union leoliad ymdreiddiad celloedd llidiol yn y corff ciliaraidd. )grwpiau. Mewn cyferbyniad, canfuwyd nifer o gelloedd positif ED yn y grwpiau EAU plus Vehicle and EAU plus Betaine (pennau saethau dwbl yn Ffig.3L, 3M).bioflavonoids sitrwsCadarnhaodd dadansoddiad lled-feintiol o nifer y celloedd positif ED fod y driniaeth betaine yn atal ymdreiddiad celloedd llidiol yng nghyrff ciliaraidd llygod mawr a achosir gan EAU.
Nesaf, rydym yn ymchwilio i newidiadau histopatholegol yn y retina (Ffig. 4). Canfuwyd ychydig o gelloedd llidiol mewn retinas gydag EAU, ond nid yn normal a retinas llygod mawr CFA (Ffig.4A ~ 4D). Sgoriwyd y briwiau yn histopatholegol yn ôl difrifoldeb EAU [17], gan ddatgelu rhyddhad o lid y retina (Ffig.4E). Cadarnhawyd actifadu celloedd microglial a Müller sy'n nodi llid y retina yn seiliedig ar imiwn-adweithedd byd-eang (Ffig.4F ~ 4I) a GS (Ffig.4K ~ 4N), yn y drefn honno. Prin iawn oedd lleoleiddio Ibal mewn microglia yn y grwpiau arferol a CFA (penawdau saethau yn Ffig. 4F, 4G, yn y drefn honno). Ataliwyd actifadu microglia mewn llygod mawr EAU (pennau saethau yn Ffig.4H) gan y driniaeth betaine (Ffig.4I, 4J). Roedd y canlyniad imiwn-adweithedd GS-positif yn debyg i ganlyniad byd-eang yn y retina (Ffig.4K~4N). Roedd gan gelloedd Müller actifedig yn y grŵp EAU plus Cerbyd lefelau is-imiwnedd GS (Ffig. 40).
Ataliodd Betaine moleciwl adlyniad a chyfryngwyr pro-llidiol yn EAU
Nesaf, rydym yn archwilio mynegiant moleciwl adlyniad gan ddefnyddio amser real PCR (Ffig. 5 A). Gwelwyd gostyngiad sydyn yn lefel mRNA moleciwl adlyniad celloedd fasgwlaidd 1 (VCAM1) yn y grŵp EAU a Betaine (t<0.05 vs.eau+vehicle).="" the="" mrna="" levels="" of="" serpina3n,interleukin-1β(il-1β),="" tumor="" necrosis="" factor-alpha="" (tnf-a),="" inducible="" nitric="" oxide="" synthase(inos),="" and="" cyclooxygenase="" at-2(cox-2)as="" pro-inflammatory="" mediators,="" were="" assessed="" to="" confirm="" the="" inflammatory="" condition="" (fig.="" 5b).="" the="" mrna="" levels="" of="" serpina3n,="" il-1β,="" tnf-a,="" cox-2="" were="" significantly="" downregulated="" in="" the="" eau+betaine="" group="" compared="" with="" that="" of="" vehicle-treated="" eau="" group="" (fig.5b).="" these="" results="" indicate="" that="" the="" betaine="" treatment="" suppressed="" the="" upregulation="" of="" pro-inflammatory="">
Ail-reoleiddiodd Betaine yr ensymau gwrthocsidiol catalase (CAT) a SODinEAU
Fe wnaeth yr astudiaeth o lefelau difrod ocsideiddiol yn y serwm ein hysgogi i ymchwilio i statws ymateb gwrthocsidiol ensymau gwrthocsidiol, gan gynnwys CAT, SOD1, SOD2, a SOD3 (Ffig.5C). Gwelsom lefelau mynegiant wedi'u huwchreoleiddio'n sylweddol o CAT, SOD1, SOD2, a SOD3 ym mheli llygaid y grŵp EAU a Betaine o'i gymharu â'r grŵp EAU plus Vehicle.
Fe wnaeth Betaine actifadu llwybr Keapl-Nrf2
Er mwyn cefnogi effaith gwrth-ocsidiol betaine, archwiliwyd llwybr Keapl-Nrf2 (Ffig. 6). Mae lefelau protein Keapl (0.75±0.05 plyg yn newid,p<0.05,fig.6a)and nrf2(0.79±0.04fold=""><0.05,fig.6b)in eau+vehicle="" group="" were="">
o'i gymharu â'r rheolaeth arferol. Ar y llaw arall, roedd y Keapl a'r Nrf2 yn dangos naill ai 1.46±0.00 newidiadau plyg neu 1.13±0.34 plyg newidiadau i rai'r grŵp EAU plus Vehide (t<0.01 and=""><0.001,>
TRAFODAETH
Dyma'r astudiaeth gyntaf yn adrodd bod betaine yn lliniaru dilyniant pathogenesis EAU trwy effeithiau gwrthlidiol a gwrth-ocsidydd, ond nid trwy atal amlhau celloedd T (darlun sgematig yn Ffig.7).
Credir bod effaith reoleiddiol betaine mewn clefydau hunanimiwn fel y dangosir gan ddefnyddio EAU, prototeip o glefyd hunanimiwn, oherwydd lleihau straen ocsideiddiol a chyfryngwyr pro-llidiol, ond nid amlhau celloedd T, gan betaine [19]. Yn yr un modd, datgelodd yr astudiaeth bresennol nad oedd betaine yn cael fawr o effaith ar amlhau celloedd T a'r proffil cytocin yn yr uwchnatur diwylliant mewn model EAU, gan awgrymu nad yw betaine yn dylanwadu ar ymateb imiwn amlhau celloedd T awtoimiwn yn EAU. Mae'r uvea yn organ darged yn EAU. Mae'r uvea a'r retina yn organau wedi'u hynysu'n imiwnolegol heb lymffatig [20]. Mae'r celloedd T hunanimiwn yn EAU yn cael eu goresgyn trwy gangen o'r rhydwelïau ciliaraidd ac offthalmig [21]. Mae straen ocsideiddiol yn arwydd hanfodol i ddatblygiad ymateb llidiol ac mae'r rhywogaethau ocsigen adweithiol cynyddol yn achosi camweithrediad endothelaidd ac anaf i feinwe [22]. Mae'r celloedd endothelaidd cynhyrfus yn arwain at hyrwyddo symudiad celloedd llidiol a moleciwlau llidiol [22]. Mae cyfryngwyr llidiol a chelloedd yn yr uvea yn cael eu sbarduno yn y celloedd epithelial pigment retinol, sy'n aflonyddu ar y cyffyrdd rhwng celloedd gwialen a chôn a chelloedd epithelial pigmentog, gan arwain at retina ar wahân [23]. Mae'r corff ciliaraidd yn safle mynediad ar gyfer llid llygadol. Mae llid nodweddiadol y retina yn ymwneud ag actifadu microglia preswyl ac ymdreiddiad celloedd llidiol oherwydd bod y rhwystr gwaed-retina yn chwalu [24]. O dan yr amodau niwropatholegol, gan gynnwys tiwmorau ymennydd [25], axotomi [26], a haint firws [27], roedd Ibal yn gwahaniaethu rhwng y macroffagau a'r microglia actifedig. Yn ogystal, mae microglia preswyl actifedig yn ymwneud â'r newidiadau patholegol sy'n digwydd mewn clefydau dirywiol y retina ac yn rhyddhau cyfryngwyr llidiol sy'n gwaethygu'r broses afiechyd [28]. Mae'r canlyniadau hyn yn awgrymu bod betaine yn cael effeithiau gwrthlidiol yn y corff uvea a chiliary, prif dargedau EAU, a gallai leihau straen ocsideiddiol yn y serwm. Fodd bynnag, mae'r union fecanwaith eto i'w astudio.
Microglia wedi'i actifadu yw prif ffynhonnell cytocinau pro-llidiol o dan amodau dirywiol y retina [29]. Mae cytocinau pro-llidiol, gan gynnwys ILs a TNF, wedi'u cysylltu'n gryf â llid llygadol [30] a retinitis [6,29]. Heblaw am y microglia, mae celloedd Müller yn cael eu gweithredu o dan yr holl ddigwyddiadau patholegol sy'n digwydd yn y retina [31]. Mae celloedd Müller actifedig yn ymwneud â'r effaith niwrolidiol yn y retina trwy syntheseiddio a rhyddhau moleciwlau sy'n gysylltiedig â llid [31]. Rydym yn rhagdybio bod betaine yn lliniaru'r ymateb llidiol mewn llygod mawr a achosir gan EAU trwy atal actifadu celloedd microglia a Müller. Mae uwch-reoleiddio VCAml yn ymwneud yn fawr ag ymdreiddiad celloedd llidiol [32]. Mae VCAMl yn cael ei gyflymu i CD4 Tlym-phagocytes trwy groes-siarad ag antigen hwyr-4[3].Yn ogystal, Serpina3n, ensym sy'n cychwyn llid [34], wedi'i ganfod mewn celloedd Müller, astrocytes, ac epithelia pigment retinol o retinas wedi'u difrodi gan olau [35] ac mae ganddo lefelau sylweddol amrywiol yn y retina Nrl'mouse gyda chelloedd côn â nam [36]. Cynyddir Serpina3n yn EAU llygod mawr â llid difrifol yn y retina ond gostyngodd yn sylweddol yn y grŵp EAU a gafodd ei drin â betaine. Mae canfyddiad tebyg wedi'i adrodd ar gyfer sgitsoffrenia â niwro-fflamiad [34], gan fod murine Serpina3n yn ortholog o Serpina3 dynol [37]. Ymhellach, gwelwyd cynnydd mewn IL-1 mewn anaf i'r retina a achosir gan ffrwctos uchel [38]. Rydym yn rhagdybio bod effaith gwrthlidiol betaine yn gysylltiedig ag is-reoleiddio VCAM1, Serpina3n, ac IL-1 mewn llygod mawr a achosir gan EAU. Defnyddir llwybr Keep-Nrf2 i fonitro straen ocsideiddiol [39]. Roedd Betaine wedi cael ei adnabod fel moleciwl gwrth-ocsidydd, a oedd yn gysylltiedig â llwybr Keapl-Nrf2 yn y model anaf acíwt i'r afu a achosir gan acetaminophen [40]. Yn ogystal, perfformiwyd y proffilio mynegiant genynnau hepatig ar ôl y driniaeth 3H{-1,{{{{{{{{{{{{{{}}}dithiole)-3-{{{{{{{{{{}}}}dithiole-3-){{{{{{{{{{{{{{{{}}})dithiole-3-)triniaeth thione), gyda'r rôl o wella dadwenwyno carcinogenau ac amddiffyn rhag neoplasia [4]. Datgelodd canlyniad y proffilio hwn fod y genyn Keap1-Nrf2 a reoleiddir nrf2-dibynnol 3H-1,2-dithiole-3-thione-inducible genyn, gan gynnwys AF033381, fel betaine homocysteine methyl transferase, ei gynyddu, ac yn ymwneud â'r dadwenwyno a gwrth-ocsidiad [41]. Ysgogwyd yr ymateb llidiol yn EAU gan ymdreiddiad celloedd llidiol, megis celloedd T a macroffagau [42], a chynhyrchu straen ocsideiddiol, yn enwedig mewn mitocondria ffotoreceptor o gyfnod cynnar [43]. Yn ôl y canlyniadau hyn, roedd y driniaeth betaine yn ymgeisydd i leddfu'r difrod meinwe a achosir gan EAU trwy fodiwleiddio llwybr Keap1-Nrf2, fel llwybr allweddol i reoleiddio straen ocsideiddiol.
Mae effaith gwrthocsidiol betaine wedi'i werthuso'n eang mewn modelau anafiadau a achosir gan radical [44]. Yn yr ymennydd difrod ocsideiddiol a achosir gan levodopa, cafodd betaine ei wella i lefelau CAT a SOD, sy'n ensymau gwrthocsidiol cynrychioliadol[4]. Mae SOD1, SOD2, a SOD3 yn cael eu gweithredu gan wahanol fecanweithiau ac maent wedi'u lleoli yn y cytoplasm, mitocondria, a matrics allgellog, yn y drefn honno [45]. Mae Betaine, fel moleciwl gwrth-ocsidiol, yn ymwneud â lleihau difrod ocsideiddiol [46]. Estynnwyd y straen ocsideiddiol llai i ddatrys y llid, a nodir gan macroffagau / microglia Ibal-positif mewn llawer o afiechydon, gan gynnwys clefyd Alzheimer, clefyd Parkinson, a sglerosis ymledol [47]. Cafodd y driniaeth betaine ei uwchreoleiddio i lefelau mRNA o farciwr straen ocsideiddiol, o'i gymharu â'r rhai yn y grŵp EAU plus Vehicle. Mae'r canlyniad hwn yn awgrymu bod y driniaeth betaine wedi lleihau straen ocsideiddiol yn y system gylchrediad gwaed heb ymyrryd ag amlder celloedd T yn organau imiwnedd y model llygod mawr EAU.
Gyda'i gilydd, mae'r astudiaeth bresennol yn awgrymu y gall betaine liniaru llid yn y retinas a chyrff ciliaraidd llygod mawr a achosir gan EAU, o bosibl trwy fecanweithiau gwrth-ocsidiad a gwrth-llid.
Daw'r erthygl hon o https://doi.org/10.5607/en21011
