Nodweddion y CYP3A4 Potensial Atal Ensran o Flavonoidau a Ddewiswyd Rhan 1
Apr 24, 2022
Cliciwchoscar.xiao@wecistanche.comam fwy o wybodaeth
Haniaethol:Acacetin, apigenin, chrysin, a pinocembrin yw aglyconau flavonoid a geir mewn bwydydd fel persli, mêl, seleri, a the siampên. Gall Flavonoidau weithredu fel is-setiau a swildod o ensyn CYP3A4, ensym sy'n cynnwys cywarch sy'n gyfrifol am metabolaeth traean o gyffuriau ar y farchnad. Nod yr astudiaeth hon oedd ymchwilio i effaith lesol y fflavonoidau a ddewiswyd ar ensyn CYP3A4, y cinetig o ataliad, y posibilrwydd o rwymo'r ataliwr i'r ensym, ac a all fflavonoidau weithredu fel swildod ffug-na ellir ei wrthdroi. Er mwyn penderfynu ar ginetiau atal, defnyddiwyd ocsid nifedipine fel adwaith marcio. Defnyddiwyd prawf hemo-cromosomaidd i asesu'r rhwymol cofalent posibl i'r cywarch, a defnyddiwyd deori gyda dialysis er mwyn asesu'r gallu i wrthdroi'r ataliad. Roedd yr holl fflavonoidau a brofwyd yn llesteirio gweithgaredd ensym CYP3A4. Chrysin oedd yr ataliwr mwyaf grymus IC50 =2.5±0.6 μM, K;=2.4± 1.0 uM,k; mact =0.07 ±0.01 min-1, kmad/K;=0.03 min-1 μM-1. Chrysin a achosodd y gostyngiad uchaf mewn cywarch (94.5±0.5%crynodiad gweddilliol). Nid oedd yr un o'r fflavonoidau a brofwyd yn dangos ataliad ffug-na ellir ei wrthdroi. Er bod diffyg gweithredu ensyn CYP3A4 yn cael ei achosi gan ryngweithio â'r cywarch, ni ellid dal yr atodiadau i'r cywarch. Mae'r canlyniadau hyn yn dangos bod gan fflavonoidau y potensial i atal y CYP3A4enzyme a rhyngweithio â chyffuriau a meddyginiaethau eraill. Fodd bynnag, rhaid asesu rhyngweithiadau posibl â chyffuriau bwyd yn glinigol.
Allweddeiriau: acacetin; apigenin;chrysin; pinocembrin; atal; CYP3A4;flavonoid-rhyngweithio â chyffuriau
1. Cyflwyniad
Mae cysylltiad uniongyrchol rhwng bwyd ac iechyd a lles cyffredinol pobl. Metabolau planhigion eilaidd yw Flavonoidau sy'n cael eu defnyddio drwy lysiau, ffrwythau, tethi, adenydd, propolis, planhigion meddyginiaethol, ac yn y blaen. Mae'r cyfansoddion hyn yn cynorthwyo nodweddion organoleptig bwydydd (e.e., lliw a blas te a gwin) ac maent o ddiddordeb oherwydd eu heiddo biolegol sy'n effeithio ar iechyd pobl [1,2]. Fel maetholion nad ydynt yn hanfodol, maent wedi cael llawer o sylw yn ystod y degawdau diwethaf. Mae gan bob fflavonoidau strwythur moleciwlaidd tebyg—ffenylbenzo-Y-pyrone (cylchoedd A, B, ac C)—y mae grwpiau hydroxyl wedi'u rhwymo iddynt, a gellir trefnu'r grwpiau hydroxyl hyn a'u glycosyleiddio [3]. Yn seiliedig ar wahanol awduron ac amcangyfrifon, mae o 4000 i 8000 o fflavonoidau hysbys ar hyn o bryd y gellir eu dosbarthu'n is-grwpiau gwahanol yn seiliedig ar strwythur cylch C (fel baneri, baneri, fflagiau, a fflagiau)[4]. Mae'r defnydd o fflavonoidau o fwydydd yn amrywio rhwng cymdeithasau a gwledydd, h.y. mae gan Ffrainc gyfradd defnydd uchel (1193 mg/dydd)o gymharu â'r Deyrnas Unedig (182 mg/dydd)[5,6].
Gall cistanche wella imiwnedd
Mae Acacetin yn fflavone O-methyledig y credir ei fod yn gysylltiedig ag atal clefydau'r galon [7, cyflwyno effeithiau gwrth-chwyddedig [8], gwrth-blasmodial [9], a gwrth-fyw[10,11]ar gelloedd tiwmor yn vitro. Mae gan Apigenin hydroxyl yn hytrach na grŵp methocy yn ei strwythur moleciwlaidd (Ffigur ).powdr echdynnu cistancheMae Apigenin yn fwyaf cyffredin mewn persli—hyd at 45.035 ug/g mewn planhigion sych [12]. Ffynonellau bwyd eraill o apigenin yw siampên, seleri, sbigoglys gwinwydd, artichokes, ac oregano [13]. Dengys Apigenin effeithiau biolegol amrywiol, gan gynnwys gwrthocsidiol [14], gwrth-hyperglycemig [14, a gwrthlidiol [15] i wrth-apoptotig [16]. Mae Chrysin yn 5,7-dihydroxy-flavone (Ffigur 1), ffistocemegol dietegol sy'n bresennol yn helaeth mewn mêl a llawer o ddarnau planhigion (propolis, blodyn angerdd glas)]17l Mae Chrysin yn rhwystr cryf i aromatase (cytochrome P450 19Al ensym)[18], sy'n dangos effeithiau gwrth-chwyddedig [19] a gwrthocsidiol [20], yn ogystal â'r gallu i ysgogi apoptosis o gelloedd canser yn vitro [17]. Mae Pinocembrin yn fflat 5,7-dihydroxy (Ffigur 1), sydd i'w weld yn bennaf mewn ffrwythau, llysiau, cnau, hadau, mêl, perlysiau, sbeisys, blodau, te, a gwin coch [18-20].
Yn gyffredinol, mae'r defnydd o fflavonoidau a bwydydd sy'n gyfoethog mewn fflavonoidau yn gysylltiedig ag effeithiau buddiol ar iechyd pobl [21]. Fodd bynnag, mae perygl posibl y gall fflavonoidau achosi rhyngweithio â gwahanol gyffuriau. Mae rhyngweithio â chyffuriau bwyd yn fater diogelwch difrifol sy'n digwydd pan fydd effaith ffarmacolegol cyffur yn cael ei newid drwy weithredu ychwanegion bwyd a/neu ddeietegol sy'n achosi effeithiau clinigol annisgwyl [22]. Mae rhyngweithiadau cyffuriau yn gyfrifol am fwy na 30% o'r holl ddigwyddiadau cyffuriau andwyol [23] a thua 0.57% o dderbyniadau i'r ysbyty yn Unol Daleithiau America [24]. Gall fflavonoidau achosi rhyngweithio â meddyginiaethau penodol. Un o'r ffyrdd y mae fflavonoidau yn achosi rhyngweithiadau yw drwy atal yr ensau sy'n gyfrifol am metabolaeth cyffuriau fel cytochrome P450 ensau (CYP ensau), a'r mwyaf arwyddocaol ohonynt yw'r ensyn CYP3A4.
Mae ensym CYP3A4 yn gyfrifol am metabolaeth 33% o gyffuriau [25]. Ar wahân i hyn, mae CYP3A4 yn ymwneud â metabolaeth llawer o senoffobiotig, y gall nifer ohonynt weithredu fel rhwystrau neu ysgogwyr ei weithgarwch. Gall rhyngweithio â chyffuriau eraill a ddefnyddir mewn therapi a hyd yn oed ryngweithio clinigol arwyddocaol ddigwydd [26]. Er enghraifft, un o'r rhyngweithiadau sylweddol posibl yw'r defnydd o wort St. John a dulliau atal cenhedlu llafar, lle mae llai o effeithiolrwydd o ran dulliau atal cenhedlu llafar a beichiogrwydd dilynol wedi'u sylwi [27]. Felly, mae'n bwysig iawn gwybod pa gyfansoddion sy'n gallu atal neu ysgogi gweithgarwch ensyn CYP3A4.cistanche genghis khanFel y dangoswyd yn flaenorol, gall acacetin, apigenin, chrysin, a phinocembrin achosi ataliad ystadegol arwyddocaol o CYP3A4 ar grynodiad 1 uM, gan ddefnyddio ceilliau fel is-set farciwr o weithgarwch ensym gweddilliol [28]. Mae'r data hyn yn awgrymu bod gan fflavonoidau y potensial i achosi rhyngweithiadau cyffuriau bwyd pan ddefnyddir bwydydd sy'n gyfoethog mewn fflavonoidau (mêl, propolis) [29]. Gan fod gan CYP3A4 safle gweithredol mawr, awgrymir bod yr holl ymosodiadau atal yn cael eu cynnal gan ddefnyddio o leiaf ddau is-set marcio [30]
Nod yr astudiaeth hon oedd ymchwilio i'r cinetig atal o acacetin, apigenin, chrysin, a pinocembrin gan ddefnyddio nifedipine fel is-set farciwr o weithgarwch ensym CYP3A4. At hynny, nod yr astudiaeth hon oedd ymchwilio i'r posibilrwydd o rwymo fflavonoidau i'r rhan o CYP3A4, yn ogystal â phrofi eu rôl bosibl mewn ataliad ffug-na ellir ei wrthdroi.
2. Canlyniadau
2.1. Cinetig Ensym
O'r holl fflavonoidau a brofwyd, chrysin oedd yr ataliwr mwyaf grymus o CYP3A4 gyda gwerth IC50 o 2.5±0.6uM(Figure2). Roedd gan Pinocembrin, acacetin, ac apigenin werthoedd IC50 o 4.3±1.1,7.5±2.7,and8.4±1.1 uM, yn y drefn honno (Tabl 1).
Dibynna gwerthoedd ICs0 ar y setup arbrofol; felly, pennwyd cinetig atal llwyr ar gyfer fflavonoidau unigol gan ddefnyddio crynodiadau gwahanol o fflavonoid wedi'u deori am gyfnodau gwahanol o amser (tor-dyletswydd vide). Dangosodd Chrysin hefyd yr ataliad isaf yn gyson—K; gwerth. Profwyd consolion atal fflavonoidau unigol gan ddefnyddio nifedipine fel is-set marcio, ac ar gyfer acacetin, apigenin, chrysin, a phinocembrin, y K canlynol; pennwyd gwerthoedd 12.1±5.6,20.2±12.7,2.4±1.0, a 5.1±1.6 μM, yn y drefn honno. Y consolion cyfradd diffyg gweithredu cyfatebol oedd: 0.10 ± 0.02 munud-1, 0.11± 0.04 munud-1,0.07 ±0.01 munud-1, a 0.04±0.01 munud-1, yn y drefn honno. Pennwyd yr effeithlonrwydd diffyg gweithredu ar gyfer pob fflavonoid fel cymhareb y gyfradd diffyg gweithredu yn gyson a'r ataliad yn gyson. O'r holl fflavonoidau a brofwyd, chrysin oedd â'r effeithlonrwydd atal uchaf, sef 0.029 munud-1 μM-1 (Tabl 1).
2.2.Hemochrome-Pyridine Ass
Defnyddir yr ymosodiad pyridine hemochrome i bennu rhwymol cofalent cyfryngwyr adweithiol i'r gyfran protoporphyrin o'r cywarch. O dan amodau sylfaenol llai, mae fferrus yn ffurfio cymhleth gyda phyidine. Gwelwyd uchafsymiau amsugno'r cymhleth yn 531 nm a 570nm. Dangosodd deori sy'n cynnwys fflavonoidau fel swildod (acacetin, apigenin, chrysin, a phinocembrin) ostyngiad mewn crynodiad cywarch (Ffigur 3). Yna, cadarnhawyd yr ymosodiadau gan deori ychwanegol gyda chatalase (CAT)a dismutase uwchocsid (SOD) i atal y posibilrwydd o ddinistrio cywarch gan rywogaethau ocsigen adweithiol a ffurfiwyd mewn cylchoedd cytochrome P450 anghynhyrchiol. Cadarnhawyd gostyngiad hefyd yn y crynodiad cywarch (Ffigur 3). Gostyngodd y deori gydag acacetin 51.12%, apigenin o 54.95%, chrysin o 94.5%, a phinocembrin o 74.73%.
Roedd pob fflavonoidau yn lleihau'r crynodiad cywarch yn yr ymosodiad gyda a heb ychwanegu SOD a CAT. Y crynodiad cywarch gweddilliol ar ôl deori gydag acacetin oedd 48.88%, ac, wrth ailbrofi gydag ychwanegu SOD a CAT, roedd yn 63.33%. Y crynodiad cywarch gweddilliol ar ôl deori gydag apigenin oedd 45.05%, ac, ar ôl profi dro ar ôl tro gydag ychwanegu SOD a CAT, roedd yn 55.11%. Y crynodiad cywarch gweddilliol ar ôl deori gyda chrysin oedd 2.9%, ac ar ôl deori gydag ychwanegu SOD a CAT oedd 5.5%. Gwelwyd y gostyngiad ail fwyaf o grynodiad cywarch mewn deori gyda phinocembrin, a oedd yn 25.3% a 35.5%, heb a chydag ychwanegu SOD a CAT, yn y drefn honno (Tabl 2).
Mae'r canlyniadau hyn yn dangos bod diffyg gweithredu'r cytochrome P450 3A4 ensyn yn cael ei gyflawni drwy ffurfio cyfryngol flavonoid adweithiol gyda chyfran cywarch yr ensym. Gan fod y canlyniadau wedi'u cadarnhau gyda'r defnydd o CAT a SOD, gellir dod i'r casgliad nad oedd dinistrio cywarch yn cael ei achosi gan rywogaethau ocsigen adweithiol a gynhyrchwyd mewn cylchoedd nad ydynt yn gynhyrchiol o cytochrome P450.
2.3.Ymosodiadau Atal Pseudo-Di-droi'n-Ôl
Yn yr ymosodiad atal ffug-na ellir ei wrthdroi, roedd samplau'n cael eu deori â fflavonoidau ac yn cael eu trin ag ocsid, ac ar ôl hynny roeddent yn destun dialysis. Yn achos ataliad ffug-na ellir ei wrthdroi, dylid adfer y gweithgaredd ensym. Yn y deori gyda'r holl fflavonoidau a brofwyd, roedd rhwystr sylweddol o weithgarwch ensym ar ôl dialysis gyda a heb driniaeth gydag ocsid (Ffigur 4). Ym mhob un o'r achosion, roedd y gwahaniaeth mewn gweithgarwch ensym gweddilliol rhwng y sampl flavonoid a'r sampl hexacyanoferrate potasiwm yn ystadegol ddibwys (t ≤0.05).
Echdynnir yr erthygl hon o Molecules 2021, 26, 3018. https://doi.org/10.3390/molecules26103018 https://www.mdpi.com/journal/molecules
