Clefyd Cronig yr Arennau yn Cynyddu Microbleedau'r Ymennydd yn Llygoden A Dyn

Cyswllt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Wei Ling Lau1,2 & Ane C. F. Nunes 1 & Vitaly Vasilevko3 & David Floriolli4 & Long Lertpanit 1 & Javad Savoj 1 & Maria Bangash 1 & Zhihui Yao 1,5 & Krunal Shah6 & Sameen Naqvi 1 & Annlia Paganini-Hill6 & Nosratola D. Vaziri 1 & David H Cribbs3 & Mark Fisher6,7

Derbyniwyd: 25 Awst 2018 /Diwygiwyd: 28 Ionawr 2019 /Derbyniwyd: 22 Chwefror 2019 /Cyhoeddwyd ar-lein: 4 May 2019

# Awdur(au) 2019

Cistancheyn gallu lliniaruclefyd yr arennau

Haniaethol

Mae microbleedau'r ymennydd yn cael eu cynyddu yncronigarenclefyd(CKD) ac mae eu presenoldeb yn cynyddu'r risg o ddirywiad gwybyddol a strôc. Buom yn archwilio'r rhyngweithio rhwng microfusnesau CKD a'r ymennydd (yr is-set niwropatholegol o ficrofusnesau) mewn modelau diwylliant llygoden a chelloedd ac yn astudio dilyniant baich microbleed ar ddelweddu ymennydd cyfresol gan bobl. Astudiaethau llygoden: Ymchwiliwyd i ddau fodel CKD: neffritis tiwtor a ysgogwyd gan adenine a neffrectomi llawfeddygol 5/6. Astudiaethau diwylliant celloedd: bEnd.3 llygoden Tyfwyd celloedd endootheliol yr ymennydd i ddrysu, a mesurwyd uniondeb monolayer ar ôl dod i gysylltiad â 5– 15% serum wremig dynol neu grynodiadau cynyddol o wrea. Astudiaethau dynol: Gwerthuswyd dilyniant microbleedau'r ymennydd ar MRI cyfresol o reolaeth, CKD cyn dialysis, a chleifion dialysis. Cynyddodd Microhemorrhages 2–2.5 gwaith yn llygod gyda CKD yn annibynnol ar bwysedd gwaed uwch yn y model neffrectomi 5/6. Cynyddodd staenio IgG mewn anifeiliaid CKD, yn gyson â mwy o athrawsedd rhwystrau gwaed-ymennydd. Cynhyrchodd y celloedd bEnd.3 gyda serum wremig neu wrea uwch ostyngiad sy'n dibynnu ar ddos mewn ymwrthedd trydanol traws-endootheliol. Roedd wrea wedi'i ysgogi gan actin cytoskeleton wedi'i ysgogi a gostyngiad yn y mynegiant claudin-5. Mewn pynciau dynol, roedd nifer yr achosion o ficrofusnesau yn 50% yn y ddwy garfan CKD o'i gymharu â 10% mewn rheolaethau sy'n cyfateb i oedran. Roedd mwy o gleifion yn y garfan dialysis wedi cynyddu microbleedau ar MRI dilynol ar ôl 1.5 mlynedd. Mae CKD yn tarfu ar y rhwystr gwaed-ymennydd ac yn cynyddu microfusnesau'r ymennydd yn llygod a microbleedau mewn pobl. Mae wrea uwch yn newid y cytoskeleton actin a phrotestiadau cyffordd tynn mewn celloedd endootheliol diwylliannol, gan awgrymu bod y mecanwaith hwn yn esbonio (yn rhannol o leiaf) y microhemorrhages a'r microbleedau a welwyd mewn astudiaethau anifeiliaid a dynol.

Keywords Clefyd cronig yr arennau. Microbleedau. Model llygoden. Diwylliant celloedd endotheliol. BrainMRI

i leddfu'rcronigarenclefyd gydacistanche

Cyflwyniad

Un o'r darganfyddiadau niwroleg strôc mwyaf arwyddocaol yn ystod y blynyddoedd diwethaf yw ymddangosiadcronigarenclefydcael effaith sy'n mynd ymhell y tu hwnt i ffactorau risg traddodiadol fel gorbwysedd a diabetes [10, 11]. O ystyried yr achosion uchel (tua 50%) o ficrofusnesau'r ymennydd a nam gwybyddol mewn cleifion â CKD uwch [2–4, 6, 7], mae'r berthynas hon yn haeddu astudiaeth bellach.

Mae microbleedau'r ymennydd yn foci bach o hemosiderin-haearn yn amlwg ar ddelweddu cyseiniant magnetig (MRI), credir ei fod yn adlewyrchu microhemorrhages serebral sylfaenol [12, 13], ac yn arwydd o risg uwch ar gyfer strôc, cyworfa ac isgemeg [9, 14]. Dengys dilyniannau MRI penodol (adleisio graddiant a delweddu wedi'i bwysoli)y canolbwynt hyn o golli signalau mewn parenchyma'r ymennydd sy'n mesur ≤ 10 mm [12, 15]. Mae microbleedau'r ymennydd yn ddibynnol ar oedran, gyda nifer yr achosion yn agosáu at 20% erbyn 65 oed [16]. Yn ogystal ag oedran, gorbwysedd ac angiopathi amyloid yr ymennydd yw'r ffactorau risg a ddisgrifir orau ar gyfer datblygu microbleedau [13, 17]. Ar ddiwedd y cyfnod CKD, mae microbleeds yn bresennol mewn hyd at 50% o'r boblogaeth [2–4].

Ar yr un pryd, mae nam gwybyddol yn fwy cyffredin ac yn fwy difrifol ar lefelau is oarenswyddogaeth[18], gan gyrraedd nifer yr achosion o 30–70% mewn cleifion dialysis cronig [6, 7]. Mewn dadansoddiad trawsadrannol o 338 o gleifion hemodialysis 55 oed a hŷn gyda rheolaethau sy'n cyfateb i oedran, roedd gan 34% o gleifion dialysis nam gwybyddol difrifol o gymharu â 12% o reolaethau [6]. Roedd gan 35% arall o'r garfan dialysis nam gwybyddol cymedrol [6].

Mae sawl astudiaeth mewn carfannau nad ydynt yn CKD wedi dangos cysylltiad cryf rhwng microbleedau'r ymennydd a swyddogaeth wybyddol sy'n dirywio [19–22]. Mae data Epidemiolegol yn cefnogi cydfodolaeth baich microbleed MRI a chamweithrediad gwybyddol mewn cleifion clefyd arennol diwedd cyfnod (ESRD) [8, 23]. At hynny, dangosodd adroddiad diweddar o 28 o gleifion dialysis cronig ag MRI ymennydd cyfresol gysylltiad rhwng microbleedau newydd a gostyngiad yn sgôr arholiad y wladwriaeth fach (MMSE) [4]. At hynny, mae gan gleifion ESRD gyfradd uwch o 3 i 4 gwaith yn fwy o achosion o strôc isgemeg a hemorrhagig o'i gymharu â'r boblogaeth gyffredinol [5]. Mewn carfan o gleifion hemoffalysis Japan a oedd yn rhydd o strôc ar y llinell sylfaen, roedd presenoldeb microbleedau'r ymennydd yn rhagfynegydd annibynnol o gywair ymwthiol yn ystod cyfnod dilynol o 5 mlynedd [9].

Yma rydym yn adrodd am ganlyniadau astudiaethau yn llygod ac mewn cleifion CKD. Gwelsom fwy o ficrofusnesau'r ymennydd yn CKD llygod ac yn disgrifio cyffyrdd tynn endootheliol amhariad ac aflonyddwch cytoskeleton fel mecanweithiau posibl ar gyfer ffurfio microfusnesau yn y milwyr CKD. Cadarnhaodd dadansoddiad ôl-weithredol o MRI yr ymennydd cyfresol o bynciau nad ydynt yn CKD, cyn dialysis, a hemoffalysis cronig ESRD fel ffactor risg sylweddol ar gyfer dilyniant baich microbledig.

Dulliau

Arbrofion Llygod

Grwpiau Anifeiliaid a Thriniaeth Arbrofol

Ymchwiliwyd i ddau fodel llygoden CKD. (1) Model neffritis tiwbulointerstitial Adenine: Gwryw C57BL/6J llygod o Labordai Jackson (Bar Harbor, ME) rhwng 10 a 12 wythnos oed yn cael deiet sy'n cynnwys 0. 2% adenine am 18 diwrnod i ysgogi neffropathi rhyngsefydliadol cronig, wedi'i roi'n ôl ar gow rheolaidd am bythefnos, ac yna'n cael ei ail-amlygu i ddeiet adenine am 1 wythnos i gynnal CKD (Ffig. 1a). Roedd y llygod rheoli'n cael ei gynnal ar gnoi rheolaidd. (2) Model neffrectomi 5/6: Cafodd Gwryw C57BL/6J llygod 10 wythnos oed lawdriniaeth dau gam yn Labordai Jackson a oedd yn cynnwys neffrectomi rhannol ac yna cyfanswm cywir o neffrectomi 1 wythnos yn ddiweddarach. Danfonwyd anifeiliaid i'r labordy 1 wythnos ar ôl y

ail lawdriniaeth. Cafodd y ddau fodel hyn eu defnyddio i bennu effaith gorbwysedd; mae gorbwysedd yn nodwedd o'r model neffrectomi 5/6, tra bod adenine- CKD yn ddi-bwysedd [24].

Roedd anifeiliaid CKD yn cael eu dewis ar hap i ddim pigiadau lipopolysaccharide (LPS) neu LPS. (Mewn astudiaethau peilot, gwnaethom ddad-derfynu bod angen cyfnod hirach o wremia i ganfod baich uwch o ficrofusnesau digymell mewn anifeiliaid CKD nad ydynt yn cael eu trin; llygod ar ddeiet adenine am ddim ond 10 diwrnod y tu hwnt i'r 18 diwrnod cychwynnol roedd gan amlygiad 3.0 ± 0.4 microhemorrhages fesul cm2.)

Bum wythnos ar ôl ymsefydlu cychwynnol CKD ac ar oedran cyfatebol mewn rheolaethau, rhoddwyd pigiadau mewnffordd i llygod (h.y. ) pigiadau LPS (Salmonela enterica seroteip Typhimurium, L6511-10MG, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) i ysgogi microbleedau'r ymennydd. Gweinyddwyd LPS mewn tri dos, 1 mg/kg yn 0, 6, a 24 h [25]. Rhoddwyd hydradu i'r llygod a driniwyd gan LPS gyda phigiadau halwynog iscutaneous ddwy i dair gwaith y dydd am 3 diwrnod ar ôl triniaeth LPS. Mesurwyd pwysedd gwaed (BP) 2 ddiwrnod cyn pigiadau LPS drwy blethysmograffeg cynffon-cuff (aml-sianel CODA-S2, Kent Gwyddonol). Cymeradwywyd yr holl arbrofion gan Brifysgol California, Pwyllgor Gofal Anifeiliaid Sefydliadol Irvine, a'r Pwyllgor Defnydd.

Cynaeafu Meinweoedd a Chemegau Gwaed

Roedd mice wedi'i ewthaneiddio 1 wythnos ar ôl pigiadau LPS neu ar oedran cyfatebol mewn anifeiliaid nad ydynt yn cael eu trin drwy esgusodi gan ddefnyddio pwls cardiaidd o dan anesthesia isoflurane wedi'i anadlu. Defnyddiwyd nodwydd 26-mesur fel cannula a'i fewnosod yn y fenter chwith, a defnyddiwyd datrysiad PBS oer iâ ar gyfradd lif o 7–8 ml/min. Wedi

persawr am 5 munud, roedd hemisfe chwith yr ymennydd wedi'i rewi'n snap ar gyfer blot y Gorllewin. Roedd hemisfe'r ymennydd cywir a'r ddwy aren wedi'u gosod dros nos mewn paraffurf 4% ac yna'n cael eu storio mewn PBS oer cyn eu rhannu. Roedd Serum wedi'i aliquotio ar gyfer cemegau gwaed. Mesurwyd nitrogen wrea gwaed (BUN) gan ddefnyddio'r pecyn colorimetrig o BioAssay Systems (Hayward, CA). Mesurwyd serum creatinine gan ddefnyddio electrofforesis capilari yng Nghanolfan Graidd Ymchwil Aren O'Brien (UT Southorllewinol, Dallas, TX).

Canfod Microhemorrhages

Cafodd yr ymennydd ei osod mewn 1.5% o agarose a'i rannu â vibratome i gynhyrchu adrannau coronaidd (40 μm). Casglwyd pob 5ed adran ar gyfer staeniau glas Prussia i ganfod microfusnesau [26]. Perfformiwyd staeniau glas Prussia gan ddefnyddio 5% potasiwm hexacyanoferrate-tri hydradu a 10% o asid hydroclorig a baratowyd yn ffres. Ugain munud yn ddiweddarach, roedd adrannau'n cael eu rinsio mewn dŵr a'u gwrthbwyso â choch cyflym niwclear, wedi'u dadhydradu a'u gorchuddio. Nodwyd microfusnesau yn × 20 chwyddo wrth i adneuon glas porffor a gyfrifwyd gan dri phigiad gael eu rhoi at0,6 a 24h. Rhoddwyd hydradu halwynog iscutaneous am 3 diwrnod ar ôl pigiadau LPS. Mesurwyd pwysedd gwaed tail (BP) cyn pigiadau LPS. Aberthwyd llygod 1 wythnos ar ôl pigiadau LPS. b Adrannau arennau wedi'u staenio H&E sy'n dangos anaf tiwtor a ysgogwyd gan adenine CKD llygod (panel cywir) o'i gymharu â'r arennau arferol o anifail CTL (panel chwith), × 20 chwyddo. Bar graddfa = 100 μm

arsylwyr annibynnol, ac yna cyfrifwyd y cymedr. Casglwyd delweddau o'r adrannau a arsylwyd yn gadarnhaol gan ddefnyddio ffotomicroscope (Nikon Eclipse, Japan) ar gyfer tri anifail fesul grŵp i gyfrifo'r ardal microhemorrhage. Sganiwyd delweddau sleid cyfan a defnyddiwyd y feddalwedd ImageJ am ddim (fersiwn 10.2) o'r Sefydliadau Iechyd Cenedlaethol (www.imagej.nih.gov/ij/) i

cyfrifo cyfanswm arwynebedd arwyneb yr ymennydd. Cafodd nifer y microhemorrhages ei normaleiddio i gyfanswm arwynebedd arwyneb yr ymennydd fesul anifail.

Blotting Gorllewinol

Roedd hemisfeau'r ymennydd ar gyfer dadansoddi protein wedi'u rhewi ar adeg casglu meinweoedd a homogenaidd mewn Reagent Echdynnu Meinweoedd oer I (Thermo Fisher Gwyddonol) wedi'i ategu â coctel atal protease (Roche Gwyddoniaeth Gymhwysol, India napolis, IN). Mesurwyd crynodiadau protein gyda phecyn ymosodiad protein BCA (Thermo Fisher Gwyddonol). Gwnaed electrofforesis gel SDS-PAGE gyda 100 μg o brotein fesul sampl. Trosglwyddwyd proteinau i atgofion PVDF ac yna eu rhwystro ar gyfer

1 h mewn 5% o laeth sgim sych nad yw'n fraster a baratowyd mewn clustogi TBS-T (10 mM Tris–HCl, 150 mM NaCl, a 0. 1% Tween-20) a'i deori gyda gwrthgyrff sylfaenol sy'n targedu claudin-5 (wedi'i wanhau 1:200, Sigma-Aldrich SAB4502981), occludin (wedi'i wanhau 1:200, Invitrogen 711500, Thermo Fisher Gwyddonol), a'i normaleiddio i reolaeth fewnol GAPDH (wedi'i wanhau 1:10,000, Abcam, Caergrawnt, MA) mewn 5% o laeth nad yw'n fraster TBS-T dros nos mewn 4 o C. Yna, roedd y blotiau'n cael eu deori gyda'r gwrthgyrff gwrth-gwningen neu wrth-lygod priodol am 2 h ar dymheredd ystafell. Ar ôl golchi gyda TBS-T, canfuwyd bandiau gan ddefnyddio'r Dadansoddwr Delwedd Luminescent LAS-3000 (Fujifilm Life Science, Stamford, CT).

Imiwnhistochemistry

Er mwyn canfod gollyngiadau o rwystr gwaed-ymennydd (BBB), roedd adrannau wedi'u deori â gwrthgyrff gwrth-lygoden gwrth-lygod biotinylated IgG am 1:100 am 1 h ar dymheredd ystafell (Labordai Fector, Burlingame, CA, UDA). Ar ôl golchi gyda PBS, roedd adrannau'n cael eu deori am 30 munud gyda chymhleth avidin-biotin-perocsid (Labordai Fector) ar wanhau o 1:200. Datblygwyd staining gan ddefnyddio 3,3 o'r diaminobenzidine (DAB, Labordai Fector) fel chromo- gen. Dadansoddwyd y cant o'r arwynebedd a oedd wedi'i staenio gydag IgG gan ddefnyddio meddalwedd ImageJ mewn ymennydd CTL a CKD nad ydynt yn LPS. Dewiswyd trothwy ar gyfer staenio IgG cadarnhaol drwy werthuso anifail rheoli â llaw ar gyfer staenio IgG, ac yna cadwyd y trothwy hwn yn gyfartal ar gyfer pob anifail a gynhwyswyd [27].

Cistanche deserticola yn atal clefyd yr arennau

Arbrofion Diwylliant Celloedd

Diwylliant Celloedd Endotheliol yr Ymennydd a Thriniaeth Serum

Prynwyd celloedd llygoden wedi'u hanfarwoli bEnd.3 o'r Casgliad Diwylliant Math Americanaidd (ATCC, Manassas, VA). Cadarnhawyd ffenoteip celloedd endotheliol drwy imiwnedd ar gyfer ffactor von Willebrand.

Roedd diwylliannau celloedd wedi'u deori mewn glwcos uchel yn cwblhau cyfrwng Eagle wedi'i addasu gan Dulbecco (DMEM, ATCC 30-2002) sy'n cynnwys glwcos 25 mM wedi'i ategu â serum gwartheg 10% y ffetws (FBS) ac 1% penisilin-streptomycin mewn deorydd digrifwch ar 37 o C mewn awyrgylch o 5% CO2 a 95% o aer. Defnyddiwyd celloedd ar ddarn 5 ar gyfer pob arbrawf. Cafodd y celloedd eu hadu ar ddwysedd 5× 106 ar fewnosodiadau 12-da polyester Transwell (0.4 μm pore, Costar) a chyflawnwyd y dryswch yn 24–48 h. Yna newidiwyd y cyfrwng diwylliant i amlygu celloedd i wahanol grynodiadau o FBS, serum arferol dynol (HNS), neu serum wremig (CKD) o gleifion dialysis. Mesurwyd darlleniadau TEER gan ddefnyddio'r EVOM2 volt/Ohm Meter (Offerynnau Precision y Byd, Sarasota, FL) mewn tri lleoliad yn dda i gael cyfartaledd. Parhaodd arbrofion am 21 diwrnod, a chafodd y cyfrwng diwylliant ei adnewyddu bob 3–4 diwrnod. Roedd y GIG a serum wremig yn dod o samplau a oedd wedi'u bancio'n flaenorol a gafwyd ar ôl cymeradwyaeth IRB a chydsyniad gwybodus.

Arbrofion Diwylliant Cell Urea

Archwilio effeithiau wrea (y gwenwyn mwyaf cyffredin a gedwir yn CKD), bEnd. 3 celloedd wedi'u deori mewn DMEM glwcos uchel gyda 10% o FBS yn unig neu mewn cyfrwng wedi'i ategu â 42 neu 72 mg/dL (70 neu 120 μm) wrea (Sigma- Aldrich). Mae'r crynodiadau wrea hyn yn brasamcanu'r gwerthoedd cyn ac ar ôl hemodialysis a geir yn gyffredinol mewn cleifion ESRD, ac ystyrir eu bod yn glinigol berthnasol [28]. Ar ddiwedd cyfnod deori 24-h, mesurwyd y TEER a chafodd celloedd eu cynaeafu a'u prosesu ar gyfer dadansoddiad blot y Gorllewin. Ar gyfer delweddu'r cytoskeleton actin, bEnd. 3 roedd celloedd yn cael eu tyfu ar slipiau gorchudd gwydr ac yn agored i'r crynodiadau wrea uchod am 24 h, wedi'u gosod am 10 munud mewn fformalin 4% wedi'u oeri/PBS, ac yna'n cael eu prosesu ar gyfer staenio imiwnedd gan ddefnyddio actistain 488 phalloidin fflworoleuol gyda staen niwclear DAPI (catalog# PHDG1-A, Cytoskeleton Inc. , Denver, CO). Gwnaed sleidiau triplicate fesul grŵp, a chafodd tair ffrâm eu delweddu fesul sleid ar feddalwedd ImageJ i gyfrifo'r ardal o staeniau phalloidin wedi'u normaleiddio i ardal DAPI.

Blotting Gorllewinol

bEnd.3 roedd celloedd o'r arbrofion wrea wedi'u pelenni, ac yna'n cael eu llysio mewn Reagent Echdynnu Meinweoedd I (Thermo Fisher Gwyddonol) wedi'u hategu â coctel atal protease (Roche Gwyddoniaeth Gymhwysol). Mesurwyd crynodiadau protein gyda phecyn ymosodiad protein BCA, a gwnaed blotio Gorllewinol fel y disgrifir uchod gyda chlawdin-5 (wedi'i wanhau 1:500) ac occludin (wedi'i wanhau 1:500) wedi'i normaleiddio i reolaeth fewnol GAPDH (wedi'i wanhau 1:20,000). Ailadroddwyd blotiau'r Gorllewin o leiaf dair gwaith ar gyfer pob sampl.

Astudiaethau Dynol

Adolygiad Siart MRI Ôl-weithredol yr Ymennydd

Sgriniwyd cofnodion meddygol electronig rhwng Ionawr 1, 2008 a Rhagfyr 31, 2014, ym Mhrifysgol California-Irvine Medical Center gan ddefnyddio'r system Brocer Gonest ac UCReX (Cyfnewidfa Ymchwil Prifysgol California) ar ôl cymeradwyaeth IRB. Cyn-ddialysis Nodwyd CKD (n =8) a chleifion hemoffalysis cronig (n =9) a oedd ag o leiaf ddau sgan MRI ymennydd ar adegau ar wahân (o 10 claf hemoffalysis a nodwyd i ddechrau, dilëwyd 1 o'r dadansoddiad terfynol oherwydd delweddau coll yn y system PACS radioleg). Roedd rheolaethau gyda swyddogaeth arferol yr arennau (n = 10) yn cael eu paru â llaw â chleifion CKD hemodialysis yn ôl rhyw ac oedran ± 5 mlynedd.

Adolygiad o MRI ar gyfer Microbleeds Cerebral

Cyfrifwyd microbleedau gan niwroradiolegydd mynychu (DF) a'u dadansoddi ar gyfer dilyniant dros amser. Brain MRI gyda T2*-wedi'i bwysoli a'i bwysoli im- heneiddio (SWI) a FLAIR (adfer gwrthdroad wedi'i wanhau gan hylif) ar sganwyr 1.5T a 3T MRI. Perfformiwyd trwch haen ar gyfer dilyniannau SWI ar 2 mm, gyda bwlch rhynglayer o 0. Cyfrifwyd microbleedau yn seiliedig ar SWI echel 2-mm. FLAIR oedd per-

wedi'i ffurfio i ganfod briwiau mater gwyn ar drwch sleisen 3 mm, hefyd gyda bwlch rhynglayer o 0.

Dadansoddiad Ystadegol

Nid oedd unrhyw allfrwyr data ar sgrinio gyda phrawf Grubbs (dull gwyro myfyrwyr eithafol, http://graphpad.com/galwadau cyflym/grubbs1/). Cymharwyd gwahaniaethau ymhlith grwpiau yn llygod ac mewn dyn gan brofion chi-sgwâr (union Fisher) ar gyfer newidynnau pendant a phrofion t ac ANOVA ar gyfer newidynnau parhaus. Adroddir bod data parhaus yn golygu ± SEM. Ar gyfer data'r llygoden, gwnaethom berfformio kruskal–Wallis nad yw'n barametrig ac ANOVA un ffordd gyda phrofion HSD Tukey. Defnyddiwyd ANOVA dwy ffordd (CKD-ie/na ac LPS- ie/na) i brofi rhyngweithio CKD. Ystyriwyd bod gwahaniaethau ymhlith grwpiau yn sylweddol pe bai P< 0.05.="" figures="" were="" generated="" using="" graphpad="" prism="" 4="" software="" (graphpad="" software,="" san="" diego="">

Canlyniadau

Goroesi gyda Thriniaeth LPS

Roedd gan CKD llygod a gafodd ei drin â LPS gyfradd oroesi o 80%. Dim ond llygod a oroesodd i 1 wythnos ar ôl i driniaeth LPS gael ei

cynnwys yn y dadansoddiadau terfynol. Goroesodd pob llygod mewn grwpiau eraill tan ddiwedd yr arbrawf.

CKD Wedi Cynyddu'n Sylweddol Microfusnesau'r Ymennydd

Baich ar ôl triniaeth LPS

Dangosodd anifeiliaid â gwerthoedd a ysgogwyd gan adenine a 5/6 neffrosectomi CKD fod nitrogen wrea gwaed (BUN) a gwerthoedd creatinine serum wedi'u codi'n sylweddol o'u cymharu ag anifeiliaid CTL (Tabl 1). Roedd Tail BP yn sylweddol uwch mewn anifeiliaid neffrectomi-CKD o'i gymharu ag anifeiliaid CTL ac adenine-CKD (Table1); fodd bynnag, roedd cyfrifiadau microbled yn y ddau grŵp CKD yn debyg. Cadarnhaodd staenio H&E diwifr a ysgogwyd gan adenine yn y rheithgor yn yr arennau o CKD llygod (Ffig. 1b).

Roedd baich microhemorrhage yr ymennydd yn 2.0 ± 0.5 y cm2 mewn LLYGOD CTL nad yw'n LPS ac fe'i cynyddwyd 2–2.5 gwaith mewn anifeiliaid CKD nad ydynt yn LPS (adenine-CKD llygod 4.5 ± 0.9 y cm2;

neffroectomi-CKD llygod 4.2 ± 1.1 y cm2) (Tabl 1; Ffig. 2a). Ar gyfer y grwpiau nad ydynt yn rhai LPS, roedd cynnydd mewn microfusnesau yn sylweddol ar gyfer adenine-CKD o'i gymharu â CTL ond nid ar gyfer neffrectomi-CKD. Roedd triniaeth LPS yn cynyddu ffurfio microfoesau i'r un graddau mewn anifeiliaid CTL a CKD gan