Mae polysacaridau cistanche deserticola yn gwanhau neffropathi diabetig mewn llygod trwy effeithio ar y fflora berfeddol ac atal y derbynnydd tebyg i doll 4/llwybr signalau ffactor-κB niwclear ⅱ ⅱ

2.5 Effaith CDPau ar batholeg y colon mewn llygod C57BL/6J

Powdr dyfyniad cistanche deserticola o ddeunyddiau crai o ansawdd uchel

Cliciwch i gael mwy o fanylion

Fel y dangosir yn Ffigur 2, datgelodd staenio H&E fod strwythur meinwe'r colon llygod arferol yn normal, roedd y crypts wedi'u trefnu'n daclus ac yn dynn, roedd y nifer yn fawr, ac nid oedd gan y celloedd epithelial ddirywiad a shedding amlwg. Mewn cyferbyniad, dangosodd llygod DN shedding amlwg o gelloedd epithelial y colon, ymdreiddiad celloedd llidiol, difrod i gelloedd crypt, diflaniad strwythur y chwarren berfeddol, a athreiddedd cynyddol. Ar ôl 4 wythnos o ymyrraeth CDPS, fe adferodd yr amodau patholegol uchod i raddau amrywiol.

Dangosodd canlyniadau staenio AB-PAS, o gymharu â'r grŵp rheoli, bod nifer y celloedd goblet di-drosryd yng ngholon llygod y grŵp model wedi'i leihau'n sylweddol, a chynyddwyd secretion protein mwcws asidig yn sylweddol; Nifer y celloedd goblet di -dâl yng ngholon y grŵp rheoli oedd y mwyaf; O'i gymharu â'r grŵp model, gostyngwyd secretiad protein mwcws asidig colonig yn y grŵp CDPS-H.

Ffig. 2 Effaith CDPau ar newidiadau histopathologig colonig mewn llygod DN fel yr archwiliwyd gan staenio H&E ac AB-PAS

2.6 Effaith CDPS ar fflora berfeddol o lygod C57BL/6J

Dadansoddwyd effeithiau CDP ar ddangosyddion biocemegol a chanlyniadau patholegol llygod DN yn gynhwysfawr, a dewiswyd cynnwys colon llygod yn y grŵp CDPS-H gyda'r effeithiolrwydd cyffredinol gorau ar gyfer ymchwil fflora berfeddol.

2.6.1 Dosbarthiad Amrywiad Dilyniant Amplicon (ASV) Diagram Venn fel y dangosir yn Ffigur 3, o'i gymharu â'r grŵp rheoli, gostyngodd digonedd cymharol rhywogaethau fflora berfeddol yn y llygod grŵp model, a gwellodd y digonedd cymharol ar ôl triniaeth CDPS.

CistancheCity name (optional, probably does not need a

2.6.2 Dadansoddiad Amrywiaeth Alpha Fel y dangosir yn Nhabl 6, o'i gymharu â'r grŵp rheoli, gostyngodd mynegai Chao1 fflora berfeddol llygod y grŵp model. Ar ôl ymyrraeth CDPS, cynyddodd mynegai Chao1, ond nid oedd unrhyw arwyddocâd ystadegol, gan nodi y gallai CDPau newid strwythur y fflora berfeddol trwy gynyddu cyfanswm nifer y rhywogaethau. Mae'r mynegai sylw yn agos at 1, gan nodi y gall y canlyniadau dilyniannu adlewyrchu gwir sefyllfa'r sampl yn y bôn. Nid oedd gwahaniaeth ystadegol arwyddocaol yn Shannon, Simpson, sylw, a mynegai pielou _ e ymhlith y grwpiau, gan nodi bod cyfoeth ac amrywiaeth rhywogaethau ac amrywiaeth y cymunedau amgylcheddol ym mhob grŵp yn dda, a bod sylw'r Wladfa yn gyson ac wedi'u dosbarthu'n gyfartal.

Ffig. 3 Diagram Venn o ddosbarthiad ASV

Tabl 6 Mynegeion alffa-amrywiaeth microbiota berfeddol mewn llygod yn y grwpiau rheoli, model a CDPS (n=6)

2.6.3 Dadansoddiad Amrywiaeth Beta

Fel y dangosir yn Ffigur 4, trwy ddadansoddiad amrywiaeth beta, gall dadansoddiad prif gydran (PCA) wahaniaethu tri grŵp o samplau mewn gofod tri dimensiwn, gan nodi bod gwahaniaethau sylweddol yn fflora berfeddol y tri grŵp hyn o samplau. Mae'r grŵp model a'r grŵp rheoli wedi'u gwahanu ar hyd echel PC2, ac mae'r grŵp CDPS-H rhwng y grŵp model a'r grŵp rheoli, yn agos at y grŵp rheoli.

Ffig. 4 Amrywiaeth beta fflora berfeddol mewn llygod yn y grwpiau rheoli, model a CDPS (n=6)

2.6.4 Effeithiau CDPau ar fflora berfeddol llygod C57BL/6J

2.6.4.1 lefel ffylwm

Fel y dangosir yn Ffigur 5, o'i gymharu â'r grŵp rheoli, cynyddodd y digonedd cymharol o firmicutes yn y grŵp modelau yn sylweddol, gostyngodd digonedd cymharol bacteroidota a verrucomicrobia yn sylweddol, a gostyngodd y gymhareb digonedd cymharol (b/f) o facteroidetes i firmicutes. O'i gymharu â'r grŵp modelau, cynyddodd CDPau yn sylweddol ddigonedd cymharol bacteroidetes a verrucomicrobia, lleihau digonedd cymharol cadarnhadau, a chynyddu'r gwerth b/f, a oedd yn agosach at werth b/f y grŵp rheoli.

Ffig. 5 Siart bar o ddigonedd cymharol fflora berfeddol ar lefel y ffylwm (n=6)

2.6.4.2 Lefel Genws

Mae histogram cyfansoddiad digonedd rhywogaethau ar y 30 lefel genera uchaf (Ffigur 6) yn dangos bod gwahaniaethau yn fflora berfeddol llygod yn y grŵp model a'r grŵp CDPS-H. Mae 16 genera bacteriol gwahanol rhwng y grŵp model a'r grŵp rheoli; Mae 8 genera bacteriol gwahanol rhwng y grŵp CDPS-H a'r grŵp model; 5 Efallai mai genera bacteriol yn yr ardal sy'n gorgyffwrdd yw'r genera bacteriol y gall CDPau wella neffropathi diabetig (Ffigur 7). Fel y gwelir yn Nhabl 7, ar lefel y genws yn fflora berfeddol y llygoden, o'i gymharu â'r grŵp rheoli, gostyngwyd digonedd cymharol allobaculum yn y grŵp model yn sylweddol, a digonedd cymharol roseburia, romboutsia, ruminococcus {{_ Torques {a rf a rf (p1 a rf<0.05) was increased. ; Compared with the Model group, the relative abundance of Roseburia, Romboutsia, Ruminococcus_torques_group and RF39 (P＜0.05) decreased in the CDPs-H group; the relative abundance of Allobaculum increased (P＜0.05).

Ffig. 6 Siart bar o ddigonedd cymharol fflora berfeddol ar lefel y genws (n=6)

Ffig. 7 Diagram Venn o fflora berfeddol ar lefel y genws (n=6)

Tabl 7 Effeithiau CDPau ar ddigonedd cymharol genera microbaidd perfedd gwahaniaethol rhwng y grwpiau rheoli, model a CDPS (n=6)

2.6.4.3 Effaith CDPS ar fynegiant Zo -1 ac occludin colonig

Fel y dangosir yn Ffigur 8 a Thabl 8, o'i gymharu â'r grŵp rheoli, gostyngwyd lefelau mynegiant cymharol Zo -1 ac occludin ym meinwe colon llygod yn y grŵp model yn sylweddol (p <{0. 01); O'i gymharu â'r grŵp model, gallai ymyrraeth CDPS ar bob dos y gallai lefelau mynegiant cymharol Zo -1 a phroteinau occludin ym meinwe'r colon gynyddu'n sylweddol (P.<0.01).

Ffig. 8 Mynegiad o Zo -1 ac occludin ym meinwe colon llygod o bob grŵp (n=3)

Tabl 8 Lefelau mynegiant cymharol Zo -1 ac occludin ym meinwe'r colon o lygod o bob grŵp (n=3)

Deunyddiau crai cistanche

2.7 Effaith CDPau ar fynegiant protein llwybr signalau TLR4/NF-κB arennol

Fel y dangosir yn Ffigur 9 a Thabl 9, o'i gymharu â'r grŵp rheoli, cynyddwyd mynegiant cymharol protein TLR4 ym meinwe arennau llygod yn y grŵp model a chymarebau P-NF-κBP65/NF-κB p65 a PI κBα/I κBα yn sylweddol. Uchel (t<0.01); compared with the Model group, the relative expression of TLR4 protein and p-NF-κBp65/NF-κB p65 and p-I κBα/I κBα in the kidney tissue of mice in the CDPs-M and CDPs-H groups The ratios were significantly reduced (P＜0.01, P＜0.05).

Ffig. 9 Dadansoddiad blot gorllewinol o fynegiant protein sy'n gysylltiedig â llwybr signalau TLR4/ NF-κB ym meinwe'r arennau o lygod o bob grŵp (n=3)

Tabl 9 Lefelau mynegiant cymharol proteinau sy'n gysylltiedig â llwybr signalau TLR4/NF-κB ym meinwe'r arennau o lygod o bob grŵp (n=3)