Mae Cistanche Rb1 yn Gwanhau Nam Fasgwlaidd sy'n Gysylltiedig ag Oedran Trwy Fodwleiddio'r Llwybr Nwy6

Roedd canlyniadau Rb1 yn lleddfu heneiddedd yn aortas llygod sy'n heneiddio

Er mwyn nodi effaith gwrth-senescence Rb1, fe wnaethom ymchwilio gyntaf i heneiddedd cellog, a nodweddir gan fynegiant proteinau sy'n ymwneud ag ataliad cylchred celloedd ac ataliad twf di-droi'n-ôl (Yang et al. 2019). Gan fod y canlyniadau imiwn-histocemeg yn cael eu dangos yn Ffigur 1(A,B), o'u cymharu â'r rhai yn y grŵp Young, dangosodd llygod grŵp Hen þ fod heneiddio yn cyflymu'r broses o ddadreoleiddio p21Cip1 a p16INK4a mewn celloedd aorta thorasig. Fodd bynnag, roedd triniaeth Rb1 yn lleddfu heneiddedd cellog mewn pibellau gwaed, yn enwedig yn y grŵp Old þ Rb1-20. Yn ogystal, roedd canlyniadau blot y Gorllewin yn unol â'rcanlyniadau immunohistochemistry. Fel y dangosir yn Ffigur 1(C), cynyddwyd mynegiant protein p21Cip1 a p16INK4a yn sylweddol gan tua 2-plyg yn yr aortas thorasig o lygod oedrannus o gymharu â llygod ifanc. Ar ôl triniaeth gyda 20 mg/kg Rb1, roedd lefelau protein p21Cip1 a p16INK4a newydd gynyddu 41.92 y cant a 37.52 y cant o gymharu â rhai'r grŵp Young, a oedd yn sylweddol is na rhai'r grŵp Hen Gerbydau Plws. Yn ogystal, nid oedd unrhyw wahaniaeth arwyddocaol yn y mynegiant o p21Cip1 neu p16INK4a rhwng llygod ifanc gyda thriniaeth Rb1 a hebddo.

Ffigur 1. Effaith Rb1 ar henebrwydd yr aorta thorasig. Delweddau o'r staenio imiwn-histocemegol (400 ) o p21Cip1 (A) a p16INK4a (B) mewn croestoriadau aorta thorasig llygoden. (C) Dadansoddiad anharddu'r gorllewin o fynegiant aortig thorasig y llygoden p21Cip1 a p16INK4a. Mynegir y data fel y cymedr ± SD. p < 0.01 vs. y grwp Young; # p < 0.05 yn erbyn y grŵp Hen Gerbydau.

Rb1 adweithedd fasgwlaidd wedi'i leddfu mewn llygod oedrannus

Defnyddiwyd arbrawf cylch fasgwlaidd i werthuso fasodilatiad sy'n ddibynnol ar endotheliwm. Fel y dangosir yn Ffigur 2, ym mhob modrwy aortig thorasig llygoden, arweiniodd gweinyddu Ach at vasorelacation. Mewn crynodiadau uchaf (10-5 môl/L), ysgogodd Ach tua 88.84 y cant ± 1.20 y cant a 58.35 y cant ± 2.50 y cant vasorelacation yn y grŵp Young a'r grŵp Old þ Vehicle, yn y drefn honno, gan ddangos bod heneiddio yn gysylltiedig â nam adweithedd fasgwlaidd. Fodd bynnag, arweiniodd triniaeth 10 a 20 mg / kg Rb1 at ymlacio oddeutu 70.48 y cant ± 2.20 y cant ac 80.90 y cant ± 3.24 y cant, yn y drefn honno, mewn cylchoedd aortig thorasig llygoden sy'n heneiddio mewn ymateb i 10 5 mol / L Ach.

Cliciwch Yma I Gael Cistanche Ar gyfer Gwrth-Heneiddio

Roedd Rb1 yn lleihau mynegiant moleciwlau adlyniad cellog yn aortas thorasig llygod sy'n heneiddio

Fe wnaethom archwilio mynegiant protein moleciwlau adlyniad celloedd penodol i bennu'rymfflamycholaeffeithiau gwrthlidiolo Rb1 ar lygod oed. Dangosodd y canlyniadau fod mynegiant protein ICAM-1, VCAM-1, a PAI-1 wedi’i gynyddu’n sylweddol gan tua 2-4 plygiad yn aortas thorasig llygod oedrannus o gymharu â’r rheini yn y grŵp Young (Ffigur 3). Mewn cyferbyniad, roedd triniaeth Rb1 yn atal y newidiadau hyn yn sylweddol mewn aortas thorasig llygoden oedrannus ond ni chafodd unrhyw effaith ar y grwpiau llygoden Young. Dangosodd y dadansoddiad meintiol fod triniaeth 20 mg/kg Rb1 wedi arwain at 36.58 y cant, 46.66 y cant, a 49.34 y cant o is-reoleiddio mynegiant protein ICAM-1, VCAM-1 a PAI-1, yn y drefn honno, mewn meinwe aortig thorasig sy'n heneiddio, o'i gymharu â rhai llygod grŵp Hen Plws.

Roedd RB1 yn atal calcheiddio fasgwlaidd a ffibrosis sy'n gysylltiedig ag oedran

Fe wnaethom berfformio staenio AU a staen S coch alizarin i asesu strwythur meinwe aortig a chalchiad medial fasgwlaidd mewn llygod sy'n heneiddio yn y drefn honno. Dangosodd staenio AU y gallai waliau trwchus yr aorta thorasig a achosir gan heneiddio ac anhrefn y matrics allgellog aortig gael eu lleddfu gan driniaeth Rb1 (Ffigur 4(A)). Fel y dangosir yn Ffigur 4(B), datblygodd llygod sy'n heneiddio calcheiddiad meddygol mwy difrifol (ardal lliw coch) na llygod ifanc, tra bod ymyrraeth Rb1 wedi lleihau'r newid patholegol hwn. Yna, fe wnaethom archwilio trawstoriadau aorta thorasig gan staen trichrome Masson i asesu ffibrosis medial fasgwlaidd mewn llygod sy'n heneiddio. Dangosodd y canlyniadau fod cynnydd amlwg mewn dyddodiad colagen (ardal lliw glas) yn y grŵp Hen Gerbyd þ o gymharu â grŵp Young (Ffigur 4(C)), a llesteiriwyd yr effaith hon yn sylweddol gan ymyrraeth Rb1. Ar ben hynny, dangosodd blotio Gorllewinol fod mynegiant colagen I a cholagen III wedi cynyddu'n sylweddol 4.34- a 2.62-plyg yn Hen þ llygod grŵp cerbyd o gymharu â llygod ifanc; fodd bynnag, roedd triniaeth Rb1 yn is-reoleiddio mynegiant colagen I a cholagen III mewn llygod oedrannus (Ffigur 4(D)). Ar ben hynny, ni chafodd triniaeth â Rb1 unrhyw ddylanwad ar raddau calcheiddiad aorta thorasig a ffibrosis mewn llygod ifanc (Ffigur 4(A-D)).

Roedd Rb1 yn rheoleiddio llwybr signalau Gas6

Fe wnaethom ymchwilio ymhellach i p'un a oedd Rb1 yn gweithredu trwy'r llwybr signalau Gas6/Axl i wella nam ar yr aorta thorasig sy'n gysylltiedig ag oedran mewn llygod. Diddymwyd is-reoleiddio mynegiant protein Gas6 gan 41.72 y cant a mynegiant mRNA o 52.73 y cant mewn llygod oedrannus o'i gymharu â llygod ifanc gan driniaeth Rb1 (Ffigur 5(A,B)). Fe wnaethom hefyd bennu mynegiant protein Axl trwy blotio Gorllewinol. Yn ddiddorol, nid oedd gwahaniaeth arwyddocaol mewn mynegiant protein Axl ymhlith y pum grŵp arbrofol (Ffigur 5(A)). Ni wnaethom ychwaith ganfod gwahaniaeth sylweddol yn lefelau mRNA Axl ymhlith y grwpiau (Ffigur 5(B)).

Ffigur 2. Triniaeth RB1 wedi'i wanhau â nam fasorelaciad endotheliwm-ddibynnol ar oedran mewn cylchoedd fasgwlaidd aorta thorasig. Ffigurau yn dangos canlyniadau'r dadansoddiad. Mynegir y data fel y cymedr ± SD. p < 0.05, p < 0.01 vs. y grŵp Young; # p < 0.05, ##p < 0.01 vs. y grŵp Hen Gerbydau þ.

Ffigur 3. Rb1 llai o fynegiant adlyniad cellog moleciwl mewn aortas thorasig llygoden oed. Dadansoddiad blot gorllewinol o fynegiant ICAM-1, VCAM-1 a PAI-1 ym meinweoedd aorta thorasig. Mynegir y data fel y cymedr ± SD. p < 0.01 vs. y grŵp Young; # p < 0.05, ##p < 0.01 vs. y grŵp Hen Gerbydau.

Trafodaeth

Yn yr astudiaeth bresennol, gwnaethom ddangos bod Rb1 wedi gwellanam fasgwlaidd sy'n gysylltiedig ag oedrantrwy atal calcheiddiad a ffibrosis trwy reoleiddio mynegiant Gas6 ond nid mynegiant Axl, sy'n darparu strategaeth therapiwtig bosibl ar gyfer atal clefyd fasgwlaidd sy'n gysylltiedig ag oedran. Mae'n cael ei dderbyn yn dda y gall heneiddedd celloedd fasgwlaidd, a nodweddir gan gamweithrediad endothelaidd a thrawsnewidiad ffenoteipaidd celloedd cyhyrau llyfn, arwain at fwy o anystwythder fasgwlaidd a thrwch cynyddol o waliau fasgwlaidd (Liu et al. 2019). Mae heneiddedd celloedd fasgwlaidd yn nodwedd gyffredin o amrywiol glefydau cymhleth sy'n gysylltiedig ag oedran, yn enwedig clefydau cardiofasgwlaidd (O'Rourke et al. 2010). Gyda datblygiad heneiddedd celloedd fasgwlaidd, mae swyddogaeth fasgwlaidd yn cael ei amharu (Gong et al. 2014). Mae camweithrediad fasgwlaidd sy'n gysylltiedig ag oedran yn cael ei enghreifftio gan newidiadau pathoffisiolegol, gan gynnwys dirywiad cynyddol mewn fasodilatiad endothe sy'n ddibynnol ar lium (Herrera et al. 2010; Gong et al. 2014). Yn ein hastudiaeth, cadarnhawyd heneiddedd cellog yn aortas thorasig llygod oedrannus, a nodwyd gan fynegiant cynyddol o'r proteinau cysylltiedig ag oedran p21Cip1 a p16INK4a, yn ogystal â dirywiad mewn fasodilatiad sy'n ddibynnol ar endotheliwm. Mae cysondeb ein canlyniadau â'r astudiaethau a grybwyllir uchod yn awgrymu bod rhai mecanweithiau moleciwlaidd pwysig yn gysylltiedig â'r newidiadau mewn pathoffisioleg celloedd fasgwlaidd yn ystod heneiddio. Mae'n debyg y byddai asiantau sy'n gweithredu ar y mecanweithiau hyn yn lleihau ac yn gohirio henebrwydd celloedd fasgwlaidd yn fawr.

Ffigur 4. Roedd triniaeth RB1 yn lleddfu calcheiddiad fasgwlaidd a ffibrosis a achosir gan heneiddio. (A) Staeniad haematocsilin ac eosin (AU) (400 ), (B) staenio Alizarin coch S (400 ), a (C) staen tricrom Masson (400 ) adrannau'r aorta thorasig cynrychioliadol ym mhob grŵp. (D) Dadansoddiad blot gorllewinol o fynegiadau colagen I a cholagen III mewn meinweoedd aorta thorasig. Mynegir y data fel y cymedr ± SD. p < 0.01 vs. y grwp Young; # p < 0.05, ##p < 0.01 vs. y Grŵp Cerbydau Henþ

Ffigur 5. Dylanwad Rb1 ar y llwybr signalau Gas6/Axl. (A) Perfformiwyd blotio gorllewinol i archwilio mynegiant protein Gas6 ac Axl. (B) qPCR ei pherfformio i archwilio'r mynegiant mRNA o Gas6 ac Axl. Mynegir y data fel y cymedr ± SD. p < 0.05, p < 0.01 vs. y grŵp Young; # p < 0.05 yn erbyn y grŵp Hen Gerbydau þ.

Mae tystiolaeth gronnus wedi datgelu bod Rb1 yn cael ei ystyried yn gyffur addawol ar gyfer atal difrod fasgwlaidd (Zhou et al. 2017, 2019a, 2019b; Zheng et al. 2020). Mae astudiaethau blaenorol wedi datgelu bod Rb1 yn atal heneiddedd celloedd fasgwlaidd ac yn atal calcheiddio fasgwlaidd (Nanao-Hamai et al. 2019; Zhou et al. 2019b; Zheng et al. 2020). Fodd bynnag, mae'n dal yn ansicr a all Rb1 amddiffyn swyddogaethau prifwythiennol rhag heneiddio a'r mecanwaith moleciwlaidd perthnasol. Yma, canfuom fod Rb1 yn lleihau ac yn gohirio henebrwydd rhydwelïol mewn llygod oedrannus, fel y dangoswyd gan fynegiant llai o broteinau cysylltiedig a gwell fasolediad fasgwlaidd, sy'n nodi y gall Rb1 rwystro heneiddedd gormodol mewn aortas thorasig llygoden sy'n heneiddio ac y gellid ei ddefnyddio fel cyfrwng effeithiol i trin neu atal nam rhydwelïol sy'n gysylltiedig ag oedran.

Mae tystiolaeth flaenorol wedi dangos bod llid rhydwelïol gradd isel cronig yn cronni gydag oedran yn datblygu, sy'n cyfrannu at newidiadau strwythurol a swyddogaethol fasgwlaidd sy'n gysylltiedig ag oedran (Wang et al. 2014). Mae astudiaethau ychwanegol wedi nodi bod micro-amgylchedd sydd wedi'i gyfoethogi mewn proffiliau llidiol yn achosi newid ffenoteipaidd mewn VSMCs o'r contractile i'r math synthetig. Nodweddir y newid ffenoteipaidd hwn gan fynegiant gwanedig o broteinau cyfangol sy'n benodol i SMC a secretion cytocinau prolidiol ychwanegol, chemocines, proteinau ECM, a moleciwlau adlyniad celloedd, megis colagen, ICAM-1, VCAM-1 , a PAI-1 (Wang et al. 2011; Lacoley et al. 2018). At hynny, mae moleciwlau adlyniad yn cyfrannu at ailfodelu'r rhydwelïau a achosir gan lid, yn enwedig trwy ad-drefnu rhyngweithiadau ECM-VSMC a dylanwadu ar fodiwleiddio ffenotypig VSMCs (Intengan et al. 1999). Ymhellach, mae astudiaethau wedi dangos bod gan Rb1 effeithiau gwrthlidiol in vivo ac in vitro (Miao et al. 2017; Zhou et al. 2017). Yn yr astudiaeth bresennol, canfuom y gallai triniaeth Rb1 leihau'n sylweddol lefelau mynegiant moleciwlau adlyniad celloedd sy'n gysylltiedig â phrosesau llidiol mewn llygod oedrannus, gan awgrymu y gallai Rb1 weithredu fel cyffur gwrthlidiol ac amddiffyn y fasgwlaidd wrth heneiddio.

Yn ogystal â difrod llidiol, ailfodelu'r wal arterial a nodweddir gan galcheiddiad a ffibrosis yw'r prif newid pathoffisiolegol arall mewn addasiadau fasgwlaidd sy'n gysylltiedig ag oedran ac yn achosi anystwythder fasgwlaidd sy'n cyfrannu at ddirywiad mewn fasodilatiad (McEniery et al. 2005; Iyemere et al. 2006; Kovacic et al. .2011). Mae astudiaethau ar raddfa fawr wedi dangos bod calcheiddiad atherosglerotig coronaidd yn cynyddu gydag oedran (Tesauro et al. 2017). Dangosodd ymchwil arall hefyd bresenoldeb mwy o galcheiddiad gyda heneiddio yn y rhanbarth rhydweli carotid (Wendorff et al. 2015). Yn yr un modd, dangosodd ein canlyniadau fod llygod sy'n heneiddio wedi datblygu calcheiddiad meddygol fasgwlaidd mwy difrifol na llygod ifanc. Roedd ymyrraeth RB1 yn atal y newidiadau hyn yn sylweddol. Roedd y canlyniad hwn yn awgrymu bod gweinyddiaeth Rb1 yn lleddfu gradd y calcheiddiad fasgwlaidd sy'n gysylltiedig ag oedran mewn vivo. Mae tystiolaeth ddigonol wedi dangos bod calcheiddiad fasgwlaidd yn cynnwys amrywiaeth o brosesau pathobiolegol yn hytrach na dyddodiad calsiwm syml, ac ymhlith y rhain mae newid VSMC i gelloedd tebyg i osteoblast yn chwarae rhan hollbwysig (Zhou et al. 2019b). Un cyfyngiad ar ein hastudiaeth yw, er gwaethaf datgelu bod ymyrraeth Rb1 wedi atal calcheiddio fasgwlaidd yn sylweddol mewn aortas thorasig llygod sy'n heneiddio, marcwyr VSMC contractile (fel actin cyhyrau llyfn A a calponin) a marcwyr VSMC osteogenig (fel ffactor trawsgrifio sy'n gysylltiedig â rhediad 2 ) angen archwiliad pellach.

Ar ben hynny, yn yr astudiaeth bresennol, gwelsom hefyd ostyngiad mewn lefelau colagen rhyng-raniadol a llai o fynegiant protein cysylltiedig mewn llygod oedrannus wedi'u trin Rb o'u cymharu â llygod oedrannus a driniwyd gan gerbydau, a awgrymodd y gallai Rb1 gael effaith fuddiol ar swyddogaeth fasgwlaidd. mewn aortas thorasig sy'n heneiddio trwy wella ffibrosis fasgwlaidd a achosir gan oedran. Roedd Harvey et al. (2016) y gallai anystwythder rhydwelïol a achosir gan ffibrosis gormodol a mwy o ddyddodiad colagen arwain at fwy o dôn fasomotor a darlifiad meinwe newidiol. Ystyrir bod asiantau sy'n gwanhau ffibrosis yn amddiffyn rhag clefydau fasgwlaidd sy'n gysylltiedig ag oedran (Kim et al. 2018).

Gellir casglu hynnynam fasgwlaidd sy'n gysylltiedig ag oedranyn broses gymhleth sy'n cynnwys newidiadau annormal amrywiol, gan gynnwys llid, calcheiddiad, a ffibrosis. Yn bwysicach fyth, canfuom fod Rb1 yn gallu atal y newidiadau annormal hysbys hyn yn aortas thorasig llygod oedrannus. Fodd bynnag, nid yw'r mecanwaith sylfaenol yn hysbys o hyd. Nodwyd Gas6 fel y lig ac ar gyfer y teulu derbynyddion TAM, yn enwedig derbynyddion Axl tyrosine kinase (Rothlin et al. 2015). Dangosodd astudiaeth flaenorol rolau Gas6/Axl wrth reoleiddio swyddogaethau cellog lluosog (Chen et al. 2019). Awgrymodd astudiaeth ddiweddar fod Gas6/Axl wedi chwarae rhan hanfodol mewn calcheiddiad fasgwlaidd (Son et al. 2010; Kaesler et al. 2016; Nanao-Hamai et al. 2019) a gallai hefyd fod yn rhan o is-reoleiddio synthesis colagen a achosir gan driniaeth yn VSMCs a meinwe'r galon sy'n heneiddio (Chen et al. 2016; 2019). At hynny, datgelodd astudiaethau blaenorol fod Rb1 wedi ysgogi trawsgrifiad Gas6 ar y safle ARE penodol yn y rhanbarth hyrwyddwr (Son et al. 2010; Nanao-Hamai et al. 2019). Yma, gwnaethom ddangos bod mynegiant protein Gas6 wedi'i isreoleiddio mewn llygod sy'n heneiddio ond cafodd ei wrthdroi gan driniaeth Rb1, sy'n nodi y gallai Gas6 gymryd rhan mewn rheoleiddio trwy gyfrwng Rb o nam rhydwelïol mewn llygod oedrannus. Fodd bynnag, mae ein canlyniadau'n dangos na fu unrhyw newid ym mynegiant protein Axl a mRNA, a oedd yn anghyson ag astudiaeth flaenorol (Chen et al. 2019). Mae'r teulu derbynyddion TAM yn cynnwys Tyro3, ​​Axl a MerTK. Er bod Gas6 yn dangos y cysylltiad cryfaf ag Axl ymhlith y tri aelod (Rothlin et al. 2015), Sun et al. (2019) fod actifadu Gas6 wedi gwanhau anaf llidiol ac apoptosis mewn llygod, ond ni ddigwyddodd unrhyw newidiadau mewn actifadu Axl ymhlith y grwpiau arbrofol. Awgrymodd ymchwil arall nad oedd mynegiant Axl, sy’n atal apoptosis ac felly calcheiddiad fasgwlaidd, wedi’i newid ychwaith mewn llygod Gas6–/– (Kaesler et al. 2016). Roedd ein canlyniadau'n dangos yn glir bod Rb1 yn gwanhau'n benodol ar is-reoleiddio Gas6 sy'n gysylltiedig ag oedran ond nad oedd ganddo unrhyw ddylanwad ar fynegiant Axl, yr adroddwyd mai hwn oedd y prif ddigwyddiad sy'n gyfrifol am galcheiddio fasgwlaidd a ffibrosis, i wella llid fasgwlaidd sy'n gysylltiedig ag oedran a fasodilatiad sy'n dibynnu ar endotheliwm. . Gall mynegiant sefydlog Axl ddeillio o swm digonol cyn actifadu Gas6 neu ddangos bod Gas6 yn gweithredu trwy dderbynyddion eraill. Mae angen ymchwiliad pellach i archwilio effeithiau Rb1 ar TAMs eraill y gallai Gas6 hefyd eu hysgogi, megis Tyro3 a MerTK.

Casgliadau

Yn yr astudiaeth bresennol, cadarnhawyd gennym fod Rb1 yn atal calcheiddiad fasgwlaidd a ffibrosis ac yn lleihau mynegiant moleciwlau adlyniad cellog, gyda phob un ohonynt wedyn yn lleddfu fasodilatation fasgwlar endotheliwm-ddibynnol ar oedran o leiaf yn rhannol trwy reoleiddio mynegiant Gas6 ond nid mynegiant Axl. Gyda heneiddio na ellir ei reoli, mae dod o hyd i gyfryngau a all atal neu drin nam celloedd fasgwlaidd sy'n gysylltiedig ag oedran yn bwysig iawn. Mae ein hastudiaeth yn darparu tystiolaeth sy'n dilysu effeithiau Rb1 ar anaf fasgwlaidd graddfa amelio mewn llygod sy'n heneiddio.

Datganiad datgelu

Ni soniodd yr awdur(on) am unrhyw wrthdaro buddiannau posibl.

Cyllid Cefnogwyd y gwaith hwn gan grantiau gan Sefydliad Cenedlaethol Gwyddoniaeth Naturiol Tsieina [81370447], Prosiect Cynllunio Gwyddoniaeth a Thechnoleg Talaith Guangdong Tsieina [2016A050502014], Cronfa Adeiladu Disgyblaeth Feddygol Allweddol Shenzhen [SZXK002], a'r Ymchwil Gwyddonol Feddygol Sefydliad Talaith Guangdong Tsieina [A2019079].

Datganiad argaeledd data

Mae data a deunyddiau ar gael ar gais i'r awdur cyfatebol.

Cyfraniadau awdur

Cyfrannodd SYK, DHL a XXQ at y cysyniad a chynllun y gwaith hwn. Cyfrannodd LW, GYS a MW at ddadansoddiadau data. Ysgrifennodd SYK, LW a JMZ y llawysgrif. Darllenodd pob awdur y fersiwn derfynol a'i chymeradwyo.

Cyfeiriadau

Acosta JC, O'Loghlen A, Banito A, Guijarro MV, Augert A, Raguz S, Fumagalli M, Da Costa M, Brown C, Popov N, et al. 2008. Mae signalau chemokine trwy'r derbynnydd CXCR2 yn atgyfnerthu henebrwydd. Cell. 133(6): 1006–1018.

Brandes RP, Fleming I, Busse R. 2005. Heneiddio endothelaidd. Cardiovasc Res. 66(2):286–294.

Chen FF, Song FQ, Chen YQ, Wang ZH, Li YH, Liu MH, Li Y, Song M, Zhang W, Zhao J, et al. 2019. Mae testosteron alldarddol yn lleddfu ffibrosis cardiaidd ac apoptosis trwy lwybr Gas6/Axl mewn llygod senescent. Exp Gerontol. 119:128-137.

Chen YQ, Zhao J, Jin CW, Li YH, Tang MX, Wang ZH, Zhang W, Zhang Y, Li L, Zhong M. 2016. Testosterone yn gohirio henebrwydd celloedd cyhyrau llyfn fasgwlaidd ac yn atal synthesis colagen trwy'r llwybr signalau Gas6/Axl . Oed. 38(3):60.

Fridell YW, Villa J, Attar EC, Liu ET. 1998. GAS6 yn achosi cemotaxis Axl-mediated o gelloedd cyhyrau llyfn fasgwlaidd. J Biol Chem. 273(12): 7123–7126.

Gong X, Ma Y, Ruan Y, Fu G, Wu S. 2014. Mae atorvastatin hirdymor yn gwella camweithrediad endothelaidd sy'n gysylltiedig ag oedran trwy leddfu straen ocsideiddiol a normaleiddio anghydbwysedd eNOS/iNOS mewn aorta llygod mawr. Exp Gerontol. 52:9-17.

Harvey A, Montezano AC, Lopes RA, Rios F, Touyz RM. 2016. Ffibrosis fasgwlaidd mewn heneiddio a gorbwysedd: mecanweithiau moleciwlaidd a goblygiadau clinigol. Can J Cardiol. 32(5):659–668.

Herrera MD, Mingorance C, Rodriguez-Rodriguez R, Alvarez de Sotomayor M. 2010. Camweithrediad endothelaidd a heneiddio: diweddariad. Heneiddio Parch. 9(2):142–152.

Hsu JJ, Lu J, Umar S, Lee JT, Kulkarni RP, Ding Y, Chang CC, Hsiai TK, Hokugo A, Gkouveris I, Tetradis S, et al. 2018. Effeithiau teriparatide ar forffoleg calcheiddiad aortig mewn llygod hyperlipidemig oed. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 314(6):H1203-H1213.

Hurtado B, Abasolo N, Munoz X, Garcia N, Benavente Y, Rubio F, Garcia de Frutos P, Krupinski J, Sala N. 2010. Astudiaeth cysylltiad rhwng polymorphims mewn genynnau GAS6-TAM ac atherosglerosis carotid. Thromb Haemost. 104(3):592-598.

Intengan HD, Thibault G, Li JS, Schiffrin EL. 1999. Mecaneg rhydwelïau ymwrthedd, strwythur, a chydrannau allgellog mewn llygod mawr gorbwysedd digymell: effeithiau antagoniaeth derbynnydd angiotensin a throsi ataliad ensymau. Cylchrediad. 100(22):2267–2275.

Iyemere VP, Proudfoot D, Weissberg PL, Shanahan CM. 2006. Plastigrwydd ffenotypig celloedd cyhyrau llyfn fasgwlaidd a rheoleiddio calcheiddiad fasgwlaidd. J Med Intern. 260(3): 192-210.

Kaesler N, Immendorf S, Ouyang C, Herfs M, Drummen N, Carmeliet P, Vermeer C, Floege J, Kruger T, Schlieper G. 2016. Gas6 protein: ei rôl mewn calcification cardiofasgwlaidd. BMC Nephrol. 17(1):52. Kim EN, Kim MY, Lim JH, Kim Y, Shin SJ, Park CW, Kim YS, Chang YS, Yoon HE, Choi BS. 2018. Effaith amddiffynnol resveratrol ar heneiddio fasgwlaidd trwy fodiwleiddio'r system renin-angiotensin. Atherosglerosis. 270: 123–131. Korshunov VA, Mohan AC, Georger MA, Berk BC. 2006. Mae Axl, derbynnydd tyrosine kinase, yn cyfryngu ailfodelu fasgwlaidd a achosir gan lif. Circ Res. 98(11):1446–1452.