Mae Cistanche Tubulosa yn Amddiffyn Niwronau Dopaminergig Trwy Reoliad Apoptosis A Ffactor Niwrotroffig sy'n Deillio o Gelloedd Glial: yn Vivo Ac yn Vitro-Ⅱ

Profion Ymddygiadol

Prawf Nofio (Zhu et al., 2014)

Mesurwyd cydlyniad symudiad y corff mewn llygod trwy brawf nofio. Gosodwyd y llygod yn unigol mewn tanc dŵr (25 cm o uchder a 10 cm mewn diamedr) yn cynnwys 10 cm o ddŵr a'u profi mewn amgylchedd tawel i gofnodi eu hyd llonydd dros 5 munud.

Prawf Maes Agored (Kawai et al., 1998)

Mesurwyd gweithgaredd locomotor gan ddefnyddio'r prawf maes Agored. Profwyd y llygod mewn amgylchedd tawel a golau gwan a'u gosod yn unigol mewn cynhwysydd acrylig tryloyw 30 cm × 30 cm × 15 cm gyda grid gwahanu 6 cm × 6 cm ar y gwaelod. Rhoddwyd 10 munud i'r llygod i addasu i'r amgylchedd ac yna mesurwyd ambulation y rhif grid ac amlder magu llygod unigol bum gwaith yn olynol i gael gwerthoedd cymedrig.

TUBULOSA CISTANCHE NATURIOL AR GYFER GWELLA SWYDDOGAETH RHYWIOL PHGS75% ECH 30% DEDDF 12%

Samplu Meinwe'r Ymennydd

Cyn samplu meinwe, cafodd y llygod eu bwydo ad libitum gyda mynediad am ddim i ddŵr a derbyn ymyriad cyffuriau am 14 diwrnod yn olynol. Dewiswyd pedwar o lygod ym mhob grŵp a'u dihysbyddu'n gyflym. Cafodd yr SN (Bregma: −2.75 mm −2.92 mm) o bob anifail ei ynysu a'i osod ar rew. Cafodd meinweoedd yr ymennydd eu rinsio â 0.9% o hydoddiant sodiwm clorid oer-iâ i dynnu unrhyw waed a'u sychu ar bapur hidlo cyn eu storio ar −80◦C. Anestheteiddiwyd pedwar llygod o bob grŵp yn fewnperitoneol ac agorwyd eu cistiau. Yna gosodwyd nodwydd trwyth yn fentrigl chwith pob anifail. Er mwyn tynnu gwaed yn y system gylchrediad gwaed, torrwyd yr atodiad atrïaidd cywir a thrwythwyd yr anifail â halwynog arferol 4◦C nes i'r afu droi'n welw i sicrhau darlifiad olynol. Unwaith y daeth elifiant yr atriwm cywir i'r amlwg, cafodd pob anifail ei ddarlifo â sefydlogydd paraformaldehyd 4%. Ar ôl y darlifiad, cafodd meinwe ymennydd pob anifail ei rannu'n ofalus a'i ôl-osod mewn paraformaldehyde 4% am 24 h. Yna cafodd meinweoedd sefydlog yr ymennydd eu rinsio o dan ddŵr rhedeg, eu dadhydradu mewn cyfres raddedig o hydoddiannau ethanol, a'u clirio mewn hydoddiant xylene. Dilynwyd hyn gan drochi a gwreiddio paraffin.

Newidiadau mewn Meintiau DA Mesurir gan HPLC

Rhoddwyd yr SN nano-owder o bob grŵp mewn baddon iâ yn cynnwys 0.9% hydoddiant sodiwm clorid (cymhareb 1:9). Cafodd meinwe'r ymennydd ei homogeneiddio gan ddefnyddio aflonyddwr celloedd ultrasonic a'i allgyrchu ar 1200 rpm am 20 munud ar 4◦C i gael yr uwchnatydd. Ar gyfer HPLC, defnyddiwyd colofn Hypersil AA-ODS (2.1 mm × 200 mm, 5 µm) ar dymheredd colofn 30◦C. Perfformiwyd canfod fflworoleuedd ar 280 nm λex a 340 nm λem. Cyfaint y pigiad oedd 10 µL.

Mynegiant o TH, GDNF, GFR 1 a Ret Wedi'i Ddarganfod gan Immunohistochemistry

Cafodd darnau paraffin (5 µm o drwch) o feinwe unigol yr ymennydd eu hynysu oddi wrth bob anifail a'u rhoi mewn baddon dŵr cynnes 40◦C ar gyfer gwastatáu a chadw at sleidiau gwydr. Deorwyd yr holl sleidiau meinwe mewn popty 60◦C am 3-6 h, ac yna gwlitho xylene, dadhydradu ethanol graddiant, ac adalw antigen trwy ddeor mewn byffer asid citrig a gwresogi mewn microdon am 20 munud. Yna cafodd y sleidiau meinwe eu deor mewn hydoddiant H2O2 3% ar dymheredd ystafell am 10 munud. Ar ôl cael eu golchi deirgwaith yn PBS, cafodd y sleidiau meinwe eu deor â serwm arferol mewn siambr gaeedig ar dymheredd ystafell am 20 munud. Cynhaliwyd staenio imiwnohistocemegol yn unol â chyfarwyddiadau'r gwneuthurwr. Defnyddiwyd dadansoddwr delwedd Motic Med 6.0 i gyfrifo gwerth dwysedd optegol integredig yn y celloedd â staen cadarnhaol.

Dadansoddiad Blotiau Gorllewinol mewn Meinweoedd Ymennydd Llygod

Asesodd yr astudiaeth hon fynegiant protein tyrosine hydroxylase (TH), GDNF, GFR 1, Ret, Bcl2, a Bax. Cafodd y lysate ymennydd o bob grŵp ei homogeneiddio am 3{{10}} munud ar rew, ac yna allgyrchiant tymheredd isel, 20,000 rpm, ar 4 ◦C ar gyfer 5 mun i gasglu'r supernatant. Gwahanwyd y samplau protein o dan bwysau cyson gan ddefnyddio gel 10% SDS-PAGE fel y disgrifir uchod. Y crynodiad gwrthgyrff cynradd: TH 0.15 mg/ml, GDNF 0.5 mg/ml, GFR 1 0.8 mg/ml, Ret 0.63 mg/ml, Bcl-2 0.34 mg/ml, a Bax 0.11 mg/ml. Yr un oedd y drefn ag uchod.

TUBULOSA CISTANCHE NATURIOL AR GYFER GWRTH HENEIDDIO PHGS GWRTH-ALZHEIMER 75% ECH 30% DEDDF 12%

Dadansoddiad Ystadegol

Defnyddiodd yr astudiaeth hon feddalwedd ystadegol SPSS 20.0 ar gyfer prosesu a dadansoddi data. Mynegwyd gwerthoedd paramedr fel cymedr ± gwyriad safonol (¯x ± S). Defnyddiwyd ANOVA ar gyfer dadansoddi data un ffactor. Defnyddiwyd LSD neu'r prawf Gemau-Howell i gymharu'r grwpiau. P< 0.05 (or P < 0.01) was considered as a statistically significant difference.

CANLYNIADAU

Cydrannau Gweithredol C. tubulosa Nanopowder

Yn yr ystod o sganio 200-400 nm, roedd gan ECH yn C. tubulosa a VER yn 330 nm y brig amsugno uchaf, a ymddangosodd o fewn 20 munud. Roedd gan ICA uchafbwynt amsugno ar 270 nm ac ymddangosodd ar ôl 20 munud (Ffigur 1A). Dangosodd y canlyniadau nad oedd y samplau negyddol yn ymyrryd â'r canfod (Ffigur 1B). Roedd gan y samplau a'r rheolaeth yr un brigau cromatograffig ac nid oedd gan y sampl negyddol ddim. Dangosodd hyn nad oedd y cynhwysion eraill yn y sampl yn ymyrryd â'r gydran a oedd yn cael ei mesur. Ar ben hynny, gall y tair cydran a'r brigau cyfagos gyrraedd y llinell sylfaen gwahanu ac roedd y radd gwahanu yn fwy na 1.5.

C. tubulosa NanoPowder MPP wedi'i Leihau+ -Sytowenwyndra Anwythol mewn Celloedd MES23.5

Lleihawyd hyfywedd celloedd MES23.5 yn sylweddol gyda chrynodiadau cynyddol o MPP+. Mae Ffigur 2F yn dangos sytowenwyndra sylweddol gwahanol grynodiadau o MPP+.

Roedd C. tubulosa nanopop wedi lleihau'r MPP+-sytowenwyndra a achosir gan y corff a gwella hyfywedd celloedd MES23.5. Mae Ffigur 2G yn dangos bod dosau nanopopwdwr C. tubulosa o 10–250 µg/mL wedi cael effeithiau amddiffynnol a oedd yn dibynnu ar ddos ​​ar y celloedd MES23.5 a gafodd eu trin gan MPP.

Effaith Sytomorffolegol C. tubulosa Nanopowder

Roedd gan gelloedd arferol MES23.5 adlyniad celloedd da ac roeddent yn siâp gwerthyd gyda ffiniau celloedd clir a synapsau. Roedd celloedd MES23.5 a ddifrodwyd gan MPP+-yn dangos adlyniad a chrebachu celloedd gwael, a chafodd llawer eu hatal yn y cyfryngau gyda synapsau dan gontract. Cafodd y celloedd hyn eu hagregu, eu crebachu a'u crwn gyda gwagolau y tu mewn, a chafodd y cnewyllyn eu chwalu neu eu dymchwel. Fe wnaeth C. tubulosa nanopowder mewn gwahanol ddosau wella cytomorffoleg celloedd MES23.5 mewn gwahanol raddau trwy wella adlyniad celloedd a chlirio synaptig y grŵp cerbyd. Dangosodd celloedd MES23.5 yn y grŵp trin C. tubulosa dos uchel morffoleg a oedd yn debyg i'r grŵp rheoli arferol (Ffigurau 2A–E).

Effaith C. tubulosa Nanopowder ar Mynegiant TH ac Apoptosis yn y Celloedd

Mae Ffigur 3 yn dangos gostyngiad sylweddol yn y mynegiant protein TH yn y grŵp cerbydau. Cynyddodd mynegiant protein TH yn wahanol mewn grwpiau a gafodd eu trin â dosau gwahanol o C. tubulosa. Fodd bynnag, dangosodd y prawf LSD nad oedd gwahaniaeth arwyddocaol rhwng y tri grŵp a gafodd eu trin.

Mae Ffigur 4 yn dangos canlyniadau'r asesiad apoptosis gan ddefnyddio cytometreg llif. Roedd cyfradd yr apoptosis yn y grŵp cerbydau yn sylweddol uwch nag yn y grwpiau eraill. Dangosodd celloedd a gafodd eu trin â dosau gwahanol o C. tubulosa nanopopwder wahanol raddau o ddirywiad yn y gyfradd apoptotig o gymharu â'r grŵp cerbydau. Celloedd yn y grŵp triniaeth C. tubulosa dos canolig ac uchel oedd â'r gwelliant mwyaf arwyddocaol yn y gyfradd apoptotig o gymharu â'r grwpiau triniaeth C. tubulosa eraill. Dangosodd prawf LSD nad oedd gwahaniaeth arwyddocaol rhwng y ddau grŵp a gafodd eu trin ond gwahaniaeth sylweddol rhwng y grŵp dos isel hefyd.

Effaith C. tubulosa Nanopowder ar Bcl2/Bax Mynegiant Protein yn y Celloedd

Mae Ffigur 5 yn dangos bod mynegiant protein Bcl2 yng nghelloedd y grŵp cerbyd yn sylweddol is o'i gymharu â'r grŵp rheoli arferol. Mewn cyferbyniad, roedd mynegiant protein Bax yng nghelloedd y grŵp cerbyd yn sylweddol uwch nag yn y grŵp rheoli arferol. Dangosodd grwpiau triniaeth C. tubulosa fynegiant protein Bcl2 uwch a llai o fynegiant protein Bax mewn celloedd MPP a gafodd eu trin MES23.5. Rhwng y tri grŵp a gafodd driniaeth, roedd gwahaniaethau sylweddol yn y prawf LSD. Roedd yr effeithiau hyn yn dibynnu ar ddos.

Profion Ymddygiadol

Roedd canlyniadau'r prawf nofio yn awgrymu bod y llygod yn y grŵp cerbydau wedi aros yn llonydd yn gymharol hir, a oedd yn cynyddu dros amser. Ar ddiwrnod 14, roedd gan y llygod yn y grŵp cerbydau gyfnod llonydd sylweddol hirach na'r llygod yn y grŵp rheoli arferol. Hyd llonydd y llygod yn

y dos iselC. tubulosanid oedd y grŵp triniaeth yn sylweddol wahanol i lygod yn y grŵp cerbydau. Fodd bynnag, roedd hyd llonydd y llygod yn y grŵp trin dos uchel o C. tubulosa yn sylweddol llai na'r cyfnod ar gyfer llygod yn y grŵp cerbydau.

Mae canlyniadau'r prawf maes Agored yn awgrymu, ar ôl difrod a achosir gan MPTP yn y llygod, bod y llygod yn y grŵp cerbydau wedi dangos dirywiad sylweddol yn eu gallu i wneud gweithgaredd digymell fel y dangosir gan yr amlder magu. Ar ôl 14-diwrnod gweinyddu oC. tubulosa nanopopwder, roedd gan y llygod yn y grwpiau trin dos cymedrol ac uchel amlder magu sylweddol uwch o gymharu â'r llygod yn y grŵp cerbydau (Ffigurau 6A, B).

Effaith C. tubulosa Nanopowder ar Gynnwys DA mewn Llygod

Pennwyd newidiadau yng nghynnwys DA yr SN gan HPLC. Canfuwyd bod y cynnwys DA yn ymennydd y grŵp cerbyd wedi'i leihau'n sylweddol. Nid oedd y cynnwys DA yn ymennydd llygod PD yn y grŵp trin C. tubulosa dos isel yn sylweddol wahanol i'r llygod yn y grŵp cerbydau. Fodd bynnag,C. triniaeth tubulosacynyddu'r lefelau DA yn ymennydd llygod PD mewn modd sy'n dibynnu ar ddos. Roedd gan ymennydd llygod PD a gafodd eu trin â dos uchel o C. tubulosa gynnwys DA sylweddol uwch nag ymennydd llygod yn y grŵp cerbydau (Ffigur 6C).

Effaith C. tubulosa Nanopowder ar Mynegiant TH mewn Llygod

Roedd nifer y celloedd TH-positif a lefel mynegiant protein TH yn SN llygod PD a achosir gan MPTP yn is o gymharu â llygod yn y grŵp rheoli. Ar ôl y driniaeth C. tubulosa, cynyddodd nifer y celloedd TH-positif a lefel mynegiant protein TH yn yr SN o lygod PD a achosir gan MPTP, gyda gwahaniaeth sylweddol rhwng y grŵp triniaeth dos uchel C. tubulosa a'r grŵp cerbydau trwy brawf LSD; ac roedd gwahaniaethau sylweddol rhwng y tri grŵp a gafodd driniaeth (Ffigur 7).

Effaith C. tubulosa Nanopowder ar Brotein Mynegiant GDNF a'i Dderbynyddion, GFR 1 a Ret mewn Llygod

Gwerthuswyd mynegiant protein GDNF a'i dderbynyddion, GFR 1 a Ret, yn y celloedd â staen cadarnhaol, gan ddefnyddio immunohistochemistry. Defnyddiwyd dadansoddiad blot gorllewinol i werthuso lefelau mynegiant protein yn SN y gwahanol grwpiau o lygod. Roedd y canfyddiadau ar gyfer y gwahanol grwpiau yn debyg gan ddefnyddio'r ddau ddull canfod. Roedd mynegiant GDNF a'i broteinau derbynnydd, GFR 1 a Ret, mewn celloedd â staen cadarnhaol yn SN y llygod yn y grŵp cerbyd, yn sylweddol is nag yn y llygod yn y grŵp rheoli arferol. Cynyddodd gwahanol ddosau o driniaeth C. tubulosa nifer y celloedd GDNF-, GFR 1-, a Ret-positive (Ffigurau 8A-S).

Roedd mynegiant protein GDNF, GFR 1, a Ret yn SN y llygod yn y grŵp cerbyd yn sylweddol is nag yn y llygod yn y grŵp rheoli. Cynyddu crynodiadau triniaeth oC. tubulosa nanopowergwella mynegiant y proteinau hyn yn sylweddol. Roedd mynegiant protein GDNF, GFR 1, a Ret yn SN y llygod yn y grŵp trin C. tubulosa dos uchel yn sylweddol uwch nag yn y llygod yn y grŵp cerbydau (P< 0.01; Figures 8T, U). 

Effaith C. tubulosa Nanopowder ar Fynegiant Protein o Bcl2/Bax mewn Llygod

Gostyngwyd mynegiant protein Bcl2 yn sylweddol a chafodd mynegiant protein Bax ei wella'n sylweddol yn SN llygod yn y grŵp cerbydau (P< 0.01) compared with the mice in the normal control group. High-dose C. tubulosa treatment significantly increased Bcl2 protein expression and significantly reduced Bax protein expression in the brains of the vehicle mice (P < 0.01; Figure 9). LSD test showed there was no significant difference between the middle-dose and high-dose groups but a significant difference between the low-dose group. 

TRAFODAETH

PD ac Apoptosis

Mae PD yn anhwylder niwroddirywiol. Yn ôl Zhang et al. (2005), mae nifer yr achosion yn 10.7% yn y boblogaeth Tsieineaidd dros 55 oed ac 1.67% yn y rhai dros 65 oed. Mae nifer y cleifion PD wedi cynyddu'n flynyddol gyda chyflymiad heneiddio byd-eang, gan roi baich ariannol trwm ar deuluoedd cleifion a chymdeithas yn gyffredinol. Yn yr ymennydd, mae niwronau dopaminergig yn ymwneud yn bennaf â synthesis a secretion DA. Maent wedi'u dosbarthu'n eang yn y system nerfol ganolog ac wedi'u lleoli'n bennaf yn yr SN (80%). TH yw'r ensym sy'n cyfyngu ar gyfraddau allweddol ar gyfer synthesis DA. Felly, mae ataliad gweithgaredd TH yn lleihau synthesis DA (Huot a Parent, 2007). Prif newidiadau patholegol a biocemegol PD yw apoptosis o niwronau dopaminergig yn yr SN, gostyngiad sylweddol mewn DA nigrostriatal, a ffurfio cyrff Lewy mewn niwronau dopaminergig (Dexter a Jenner, 2013). Mae etioleg PD yn cynnwys ffactorau genetig cysylltiedig, ffactorau amgylcheddol, a heneiddio'r system nerfol (Allam et al., 2005). Mae pathogenesis PD yn parhau i fod yn aneglur mewn meddygaeth fodern. Ers diwedd y 1960au, mae therapi amnewid levodopa wedi'i ddefnyddio'n llwyddiannus i drin PD ac mae wedi'i gydnabod fel trobwynt mawr mewn triniaeth PD. Fodd bynnag, mae cymhwyso'r therapi hwn yn y tymor hir yn achosi sgîl-effeithiau ac nid yw'r therapi yn trin achosion sylfaenol PD (Del Sorbo ac Albanese, 2008). Felly, mae ymchwil weithredol ar gyfer cyffuriau neu ddulliau triniaeth newydd sy'n targedu amddiffyn niwronau dopaminergig yn hanfodol ar gyfer trin PD.

Mewn astudiaethau cynharach, roedd cymhwyso labelu diwedd nick end dUTP deoxynucleotidyl transferase-median terfynol yn dangos bod 0.6%-4.8% o niwronau dopaminergig yn SN cleifion PD yn dangos apoptosis (Mochizuki et al., 1996). Dangosodd microsgopeg electron nodweddion apoptotig, gan gynnwys anwedd cromatig a chyrff apoptotig mewn celloedd dopaminergig (Anglade et al., 1997). Mae Tompkins et al. (1997) ddadansoddiad uwch-strwythurol o awtopsïau meinwe'r ymennydd gan gleifion â PD, AD, a chlefyd corff gwasgaredig Lewy (DLBD). Daethant o hyd i gyrff apoptotig yn haen drwchus yr SN mewn cleifion PD a DLBD, gan ddarparu tystiolaeth bendant o apoptosis niwronaidd mewn PD a chlefydau cysylltiedig. Felly, mae lleihau neu atal apoptosis mewn niwronau dopaminergig yn sylfaenol ar gyfer triniaeth PD.

Dangosodd astudiaethau blaenorol fod MPTP wedi achosi symptomau tebyg i PD. Mae MPTP yn croesi'r rhwystr gwaed-ymennydd ac yn cael ei fetaboli gan ocsidasau monoamine math B mewn astrocytes. Yna caiff ei drawsnewid yn MPP + gwenwynig, sy'n cronni yn y mitocondria o niwronau dopaminergig trwy gymeriant protein y cludwr DA. Mae felly'n cynhyrchu gormodedd o radicalau rhydd o ocsigen sy'n atal gweithgaredd I cymhleth y gadwyn resbiradol mitocondriaidd a synthesis ATP. Mae'r digwyddiadau hyn ymhellach yn hyrwyddo ffurfiant radical rhydd ac adweithiau straen ocsideiddiol, ac yn y pen draw yn arwain at ddirywiad a marwolaeth niwronau dopaminergig. Felly, defnyddiodd yr astudiaeth hon MPP+ i sefydlu cerbyd in vitro mewn niwronau dopaminergig MES23.5 ac MPTP i gymell llygoden cerbyd ar gyfer cyd-wirio. Yn ôl canlyniadau'r assay MTT, gostyngodd MPP + hyfywedd celloedd MES23.5 yn sylweddol, gan awgrymu bod MPP + yn sytotocsig i niwronau dopaminergig. Dangosodd y canlyniadau hefyd fod C. tubulosa yn gwella mynegiant proteinau gwrth-apoptotig yn effeithiol ac yn atal y cynnydd mewn apoptosis a achosir gan MPP.

PD a GDNF

Mae GDNF yn ffactor niwrotroffig, a gafodd ei ynysu gyntaf gan Lin et al. (1993). Mae Lin et al. (1993) hefyd yn dangos bod GDNF yn cael effeithiau maethol penodol ar niwronau dopaminergig yng nghanol ymennydd llygod mawr. Mae GDNF, neurturin (NTN), persephin (PSP), ac artemin (ART) yn ffurfio'r teulu GDNF. Maent yn broteinau ysgrifenyddol tebyg yn strwythurol ac yn gysylltiedig â swyddogaeth (Kotzbauer et al., 1996; Baloh et al., 1998; Milbrandt et al., 1998; Woodbury et al., 1998).

Mae'r derbynnydd GDNF yn cynnwys dwy gydran. Mae'r gydran gyntaf, GFR , wedi'i gosod ar bilen allanol glycosylphospatidylinositol (GPI) a'i hangori i wyneb connexin. Yr ail gydran yw'r protein Ret. Mae ymchwil wedi dangos bod pedwar math gwahanol o GFR : GFR 1, GFR 2, GFR 3 a GFR 4. Mae GFR 1 yn dderbynnydd affinedd uchel o GDNF (Onochie et al., 2000; Chen et al., 2001; Lindahl et al., 2001). Mae protein ret yn dderbynnydd swyddogaethol o GDNF. Mae moleciwl homodimer GDNF yn rhwymo'n uniongyrchol i GFR 1 i ffurfio cyfadeiladau ac yn rhyngweithio â Ret, gan arwain at leihau ac actifadu Ret. Oherwydd awtoffosfforyleiddiad Ret, mae Ret yn actifadu sawl llwybr signalau TH cyffredin. Yn absenoldeb protein Ret, mae GDNF yn achosi ffosfforyleiddiad protein o MAPK, PI-3, a PLC- , yn ogystal â mynegiant mRNA a gweithgaredd swyddogaethol C-fos trwy ei brotein derbynnydd, GFR 1 (He et al., 2008).

Mae astudiaethau wedi dangos bod GDNF wedi cael yr effaith amddiffynnol gryfaf ar niwronau dopaminergig (Rangasamy et al., 2010; Campos et al., 2012). Mewn cerbydau sy'n defnyddio MPTP a 6-hydroxydopamine (6-OHDA) i achosi niwed mewn niwronau dopaminergig, mae GDNF yn amddiffyn niwronau dopaminergig trwy leihau apoptosis a hyrwyddo twf axonal i gymell gwahaniaethu bôn-gelloedd (Lucas et al., 2012; Littrell et al., 2013). Mae Lin et al. (1993) yn dangos bod GDNF yn hyrwyddo hyfywedd, gwahaniaethu, a thwf axonal niwronau dopaminergig yn benodol i hyrwyddo'r defnydd o DA mewn niwronau. Dangosodd yr astudiaeth hefyd fod GDNF nid yn unig yn atal gwenwyndra acíwt ond hefyd yn lleddfu gwenwyndra hirdymor MPP+ neu 6-OHDA mewn niwronau dopaminergig, gan atal marwolaeth celloedd mewn celloedd dan straen neu ddifrod (Yu et al., 2010). Yn ogystal, hyrwyddodd GDNF amlhau bôn-gelloedd niwral a gwahaniaethu tuag at niwronau dopaminergig yn y midbrain (Lindsay, 1995) i achub niwronau dopaminergig rhag dirywiad yn ôl (Hong-Juan et al., 2011).

Mae astudiaethau wedi dangos bod mynegiant GDNF yn yr SN wedi'i leihau'n sylweddol mewn cerbydau anifeiliaid (Yang et al., 2010). Mae hyn yn awgrymu y gallai fod yn un o fecanweithiau pathogenesis mewn llygod mawr PD. Roedd chwistrellu 5–15 µg/d GDNF i fentrigl ochrol neu striatwm anifail cerbyd a ysgogwyd gan MPTP am dri mis yn olynol yn hyrwyddo atgyweirio nigrostriatal o'r system dopaminergig yn yr anifail cerbyd (Grondin et al., 2002). Mae astudiaethau o driniaeth GDNF ar gyfer PD mewn cerbydau anifeiliaid wedi dangos bod chwistrelliad mewncerebral o GDNF i wahanol ranbarthau'r ymennydd, megis yr SN, cnewyllyn caudate, a fentrigl ochrol, yn gwella anhwylderau symud sy'n gysylltiedig â modelau anifeiliaid PD, gan gynnwys llai o weithgaredd modur, anhyblygedd cyhyrau a cryndod (Grondin et al., 2002). Fodd bynnag, ni all GDNF fynd yn uniongyrchol trwy'r rhwystr gwaed-ymennydd. Felly, mae chwistrelliad cerebral lleol o GDNF yn cynnwys risg sylweddol ac anawsterau wrth gymhwyso clinigol. Mae ceisiadau i gyflwyno GDNF alldarddol trwy ficrosfferau rhyddhau rheoledig, capsiwlau rhyddhau parhaus, a genynnau firaol yn dal i gael eu hastudio (Liang et al., 2010; Yang et al., 2010; Qiao et al., 2012). O ystyried cyfyngiadau amrywiol dechnegau i gyflwyno GDNF alldarddol i'r ymennydd, mae asiantau niwro-amddiffynnol sy'n hyrwyddo rhyddhau GDNF mewndarddol yn arwyddocaol ar gyfer defnydd clinigol.

PD aC. tubulosaNanopowdr

Mae PD yn fwy cyffredin mewn oedolion canol oed a'r henoed. Mae theori TCM yn ystyried bod PD wedi'i leoli'n bennaf yn yr ymennydd a'i fod yn bennaf oherwydd diffyg yr afu a'r arennau, yn ogystal ag egni hanfodol a diffyg gwaed. Yn ôl y ddamcaniaeth hon, dylai triniaeth PD felly ganolbwyntio ar fywiogi mêr yr arennau a'r esgyrn.Roedd Yang et al. (2010)defnyddio treialon clinigol ar hap, dwbl-ddall, a phlasebo a reolir a chanfod bod therapi cyfuniad gan ddefnyddio ryseitiau Madopar a thynhau arennau yn lleddfu camweithrediad echddygol cleifion PD. Roedd canlyniad y driniaeth yn well nag un therapi gan ddefnyddio Madopar. Mae effeithiolrwydd triniaeth monotherapi TCM neu bresgripsiwn cyfansawdd mewn PD wedi'i gadarnhau mewn modelau anifeiliaid PD a chymwysiadau clinigol. Roedd ceisiadau TCM ar gyfer toneiddio arennau a hybu cylchrediad y gwaed yn lleihau'r dos o monotherapi ar gyfer PD gan ddefnyddio Madopar. Mae rhai astudiaethau wedi awgrymu bod TCM wedi gwella symptomau PD a niwronau dopaminergig gwarchodedig, a allai fod wedi bod yn gysylltiedig yn agos â hyrwyddo mynegiant GDNF mewndarddol (Hong-Juan et al., 2011; Qiao et al., 2012).

Y cyfansoddyn tonyddu arennau a ddefnyddiwyd yn yr astudiaeth hon,C. tubulosananoowder, yn gynwysedigCistanche, epimedium, aRhizoma polygonati. Mae ymchwil modern yn awgrymu bod cyfansoddiad cemegolCistancheyw ECH, sy'n amddiffyn niwronau dopaminergig yn yr SN yn y llygod PD a achosir gan MPTP ac yn atal lleihau DA a'r cludwr DA (Zhao et al., 2010). Yn ogystal, mae'n atal 6-gostyngiad a achosir gan OHDA mewn DA ac yn amddiffyn niwronau dopaminergig striatal (Chen et al., 2007). Mae Epimedium yn atal actifadu caspase-3 ac yn cyflawni rolau niwro-amddiffynnol (Liu et al., 2011). Mae flavonoids epimedium yn hyrwyddo amlhau bôn-gelloedd niwral a gwahaniaethu yn effeithiol (Yao et al., 2010).

Yn yr astudiaeth hon,C. tubulosaroedd nanopowder yn gwrthdaro â chynnydd MPP+- apoptosis a achosir mewn modd sy'n dibynnu ar ddos. Fe wnaeth wella mynegiant TH yn sylweddol yn yin vitrocerbyd a chafodd effeithiau gwrth-apoptotig sylweddol mewn niwronau dopaminergig. Dangosodd y llygod cerbyd a ysgogwyd gan MPTP anhwylderau ymddygiadol a gostyngodd mynegiant TH yn sylweddol yn y meinweoedd midbrain a lefelau DA, sy'n nodweddion patholegol nodweddiadol PD. Dosau gwahanol oC. tubulosabyrhaodd nanopowder yr hyd llonydd, gwell gweithgareddau ymreolaethol, gwell anhwylderau ymddygiad, lefelau DA uchel yn yr ymennydd, a chynyddu mynegiant TH mewn cerbydau. Roedd y canlyniadau hyn yn awgrymu hynnyC. tubulosacafodd nanopowder effeithiau amddiffynnol mewn niwronau dopaminergig, a thrwy hynny wella anhwylderau ymddygiad cerbydau. Dosau gwahanol oC. tubulosacynyddodd nanopowder fynegiant protein GDNF a'i broteinau derbynnydd yn ymennydd llygod cerbydau. Dos uchelC. tubulosaroedd triniaeth yn uwch-reoleiddio mynegiant Bcl2 yn sylweddol ac yn lleihau mynegiant Bax, a awgrymodd hynnyC. tubulosananoggallai hyrwyddo mynegiant a secretiad GDNF yn ymennydd y llygoden sydd wedi'i niweidio gan MPTP. Yn ogystal, gallai gael effeithiau niwro-amddiffynnol mewn niwronau dopaminergig a lleihau apoptosis niwronaidd trwy rolau cymorth niwrotroffig GDNF.

Roedd yr astudiaeth hon yn dangos hynnyC. tubulosacafodd nanopowder effeithiau amddiffynnol mewn niwronau dopaminergig yn y ddauin vitroayn vivoa mwy o fynegiant TH i wella cynnwys DA. Fe wnaeth hefyd wella anhwylderau ymddygiad mewn llygod cerbydau a achoswyd gan MPTP, mynegiant protein rheoledig GDNF a'i broteinau derbynnydd yn yr SN, a chafodd effeithiau gwrth-apoptotig yn y llygod PD. Y mecanwaith sy'n sail i effeithiau clinigolC. tubulosagall nanopopwdwr mewn PD gynnwys cynyddu cynnwys GDNF mewndarddol yn yr ymennydd a thrwy hynny leihau'r difrod i niwronau dopaminergig.

TUBULOSA CISTANCHE NATURIOL AR GYFER GWELLA SWYDDOGAETH RHYWIOL PHGS75% ECH 30% DEDDF 12