Ceulad, Derbynyddion Proteas, A Chlefyd yr Arennau Diabetes: Gwersi O Lygod Diffygiol ENOS

Mae diet braster uchel a diffyg eNOS yn cynyddu TF mewn llygod diabetig yn synergyddol

Mae llawer o astudiaethau wedi dangos cysylltiad rhwng gordewdra a thrombosis (Samad a Ruf 2013). Ar gyfer arholiadple, uwchraddio'r llwybr TLR4-NF-kB o danclefyd metaboligamodau yn cynyddu lefelau TF (Lv et al. 2009; Owens et al. 2012; Rogero a Calder 2018). Ymhellach, mae palmitate asid brasterog dirlawn yn achosi rhyddhau histone H3 trwy fecanweithiau llwybr-ddibynnol ROS a JNK ac histones allgellog, sy'n cynyddu mynegiant TF mewn monocytes (Shrestha et al. 2013). Canolbwyntio ar y berthynas rhwng ceulo, eNOS, adyslipidemia, mae ein hastudiaeth flaenorol wedi dangos effeithiau cyfunol diffyg eNOS a diet braster uchel ar fynegiant TF (Li et al. 2010). Yn yr astudiaeth, cafodd llygod eNOS-null eu trin â STZ dos isel i ddatblygu DM a chawsant eu bwydo â diet braster uchel. Roedd diffyg mynegiant eNOS yn cynyddu ysgarthiad albwmin wrinol aanafiadau histolegol, a waethygwyd ymhellach gan ddeiet braster uchel. Cynyddwyd mynegiant a gweithgaredd TF yn arennau'r llygoden oherwydd diffyg mynegiant eNOS a diet braster uchel mewnmodd synergaidd. Yn ddiddorol, dangosodd arbrofion colleoli gyda marciwr monocyte/macrophage glomerwlaidd gynnydd yn lefel y TF imiwn-adweithiol.

Niwtraleiddio Gwrthgyrff yn erbyn Llid Lleddfol TF mewn Arennau Diabetig mewn Llygod eNOS-Knockout

Mae cynnydd mewn ceulo sy'n ddibynnol ar TF yn gysylltiedig â llid cynyddol (Witkowski et al. 2016). Gwahardd y system geulo sy'n ddibynnol ar TFfafiechydon llidiol, megis sepsis a achosir gan LPS (Pawlinski et al. 2010). Er mwyn egluro'r cysylltiad achosol rhwng llid a TF mewn DKD, gwnaethom archwilio effaith tymor byr niwtraleiddio gwrthgyrff yn erbyn TF ar lid y clefyd.arennau diabetigmewn llygod eNOS-ddiffygiol (Li et al. 2010). Dangosodd y canlyniadau fod rhoi gwrthgyrff gwrth-TF wedi lleihau'n sylweddol lefelau mynegiant arennol genynnau sy'n gysylltiedig â llid a ffibrosis fel Tnfa, Ccl2, Tgfb, a Col4 mRNA yn arennau'r llygoden bedwar diwrnod ar ôl niwtraliad TF.

CLICIWCH YMA I GAEL DYFYNIAD O'R CYLCH ORGANIG NATURIOL GYDA 25% ECHINACOSIDE A 9% ACTEOSIDE AR ​​GYFER SWYDDOGAETH YR AREN

Gwasanaeth Cefnogol Wecistanche - Yr allforiwr cistanche mwyaf yn Tsieina:

E-bost:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Ffôn:+86 15292862950

Siop Am Fwy o Fanylion:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop

Ceulad FXa Atalydd yn Lliniaru Anafiadau Arennau Mewn Llygod Diabetig Yn Ddiffyg eNOS

Mae ceulo FXa, sydd wedi'i leoli i lawr yr afon o TF / VIIa, hefyd yn cyfrannu at lid trwy'r llwybr sy'n ddibynnol ar PAR. Mae ei rôl yn DKD wedi'i dangos mewn sawl model anifeiliaid. Mae Sumi et al. (2011) bod fondaparinux, atalydd FXa, wedi lleihau lefelau protein wrinol, hypertroffedd glomerwlaidd, a dyddodiad ffibrin mewn llygod db / db. Dangoswyd effaith therapiwtig ataliad FXa mewn llygod DKD heb eNOS gan ein grŵp (Oe et al. 2016). Rhoddwyd Edoxaban (50 mg / kg / dydd), atalydd FXa llafar, i eNOS-/-; Ins2Akita/+ llygod am dri mis, ac roedd y canlyniadau'n dangos bod anafiadau histolegol wedi gwella, megis amlhau matrics mesangial. Gostyngwyd lefelau mynegiant genynnau llidiol yn yr arennau gan edoxaban (Tabl 1). Mae FXa yn actifadu PAR1 a PAR2. Er mwyn egluro mecanwaith anaf arennau wedi'i gyfryngu gan FXa, gwnaethom ddangos bod effeithiau gwrthlidiol atalyddion FXa yn debyg i'r rhai a geir yn PAR2-/- llygod a PAR2-/- llygod ag atalyddion FXa . Roedd y canfyddiadau hyn yn awgrymu bod FXa yn debygol o achosi llid trwy fecanwaith dibynnol PAR yn DKD. Mewn cyferbyniad, ni wnaeth y gwaharddiad rhydocs wella anaf glomerwlaidd yn eNOS +/+; Llygod Ins2Akita/+, gan awgrymu bod effaith therapiwtig ataliad FXa yn gysylltiedig â hypercoagulability eNOS-ddibynnol mewn math Illygod diabetig.

Ffactorau Ceulo Eraill yn DKD

Oherwydd bod thrombin yn targedu PAR1, sy'n symud ymlaenllid fasgwlaidd(Chen a Dorling 2009),mae thrombin yn debygol o waethygu DKD. Fodd bynnag, mae rolau amddiffynnol neu niweidiol thrombin mewn pathogenesis DKD wedi'u dangos; thrombin dos isel (50 pM) wedi'i atal, tra bod thrombin dos uchel (20 nM) wedi'i waethygu,apoptosis a achosir gan glwcosmewn podocytes (Wang et al. 2011b). Dylid egluro effeithiau atalyddion thrombin fel dabigatran ar lygod diabetig sydd heb eNOS yn y dyfodol.

Mae ffibrinogen yn ymwneud ag amrywiolstatws llidiol. Yn ddiddorol, roedd gostyngiad rhannol neu absenoldeb ffibrinogen yn fuddiol i fodelau isgemia-atlifiad arennol neu ffibrosis rhwystrol yr arennau (Sörensen et al. 2011; Craciun et al. 2014). Oherwydd bod dyddodiad ffibrin glomerwlaidd yn cynyddu mewn llygod diabetig heb eNOS (Nakagawa et al. 2007; Li et al. 2010; Wang et al. 2011a), gan egluro ei rôl ynpathogenesis DKDyn haeddu ymchwil pellach.

Mynegiad o PAR1 a PAR2 mewn Llygod Diabetig Diffyg eNOS

Mae mynegiant cynyddol o PARs yn gysylltiedig ag anaf i'r arennau. Rydym ni ac eraill wedi dangos bod lefelau mynegiant Par1 a/neu Par2 mRNA wedi cynyddu mewn modelau anifeiliaid â neffropathi diabetig, anaf i'r arennau a achosir gan adenin, ffibrosis arennol rhwystrol, ac anaf arennau a achosir gan cisplatin (Chung et al. 2013; Hayashi et al. al. 2016; Oe et al. 2016; Watanabe et al. 2019). At hynny, cynyddwyd lefelau protein glomerwlaidd PAR2 mewn llygod db/db, model o DM math II (Sumi et al. 2011). Fe wnaethom ddangos y cysylltiad rhwng mynegiant PAR a diffyg eNOS mewn llygod diabetig (Oe et al. 2016). Roedd lefel mynegiant Par1 mRNA yn sylweddol uwch yn eNOS -/ -; Ins2Akita/+ llygod nag yn eNOS−/−; Ins2Akita/+ a llygod di-DM. Yn yr un modd, roedd mynegiant Par2 yn sylweddol uwch yn eNOS−/-; Ins2Akita/+ llygod nag mewn llygod di-DM. Mewn cyferbyniad, nid oedd lefelau mRNA Par4 yn wahanol rhwng y genoteipiau. Mae diffyg eNOS yn gwaethygu llid yn DKD (Wang et al. 2011a). Oherwydd dywedir bod cytocinau pro-llidiol yn cynyddu PARs (Nystedt et al. 1996), mae llid uchel a achosir gan ddiffyg eNOS yn debygol o achosi mynegiant Pars arennol yn DKD. Gyda'i gilydd, awgrymodd canlyniadau ein hastudiaethau fod lefelau mynegiant PAR1 a PAR2, yn debyg i achos TF, wedi cynyddu mewn arennau diabetig pan oedd diffyg eNOS (Ffig. 2).

PAR2 Dileu Arennau Diabetig Wedi'i Wella

Anafiadau mewn Llygod gyda Llai o eNOS

Rydym ni ac eraill wedi mynd i'r afael â rôl PAR2 yn DKD mewn astudiaethau blaenorol. Nid oedd dileu Par2 yn effeithio ar anaf glomerwlaidd mewn llygod o fath gwyllt diabetig Akita (Ins2Akita/+) gydag eNOS (Oe et al. 2016). Ymhellach, dangosodd llygod diabetig a achoswyd gan STZ heb PAR2 lai o albwminwria o gymharu â llygod math gwyllt diabetig ond mwy o ehangu nodau cymedrig (Waasdorp et al. 2017). Gyda'i gilydd, mae'r canlyniadau hyn yn dangos nad oes unrhyw effeithiau therapiwtig neu ysgafn o ataliad PAR2 ar anaf i'r arennau ym modelau cynnar ac ysgafn DKD. Mewn cyferbyniad, rydym wedi dangos effeithiau diffyg PAR2 ar DKD mewn llygod Akita diabetig gyda mynegiant llai o eNOS (eNOS +/-; Ins2Akita/+) (Oe et al. 2016). Roedd diffyg PAR2 yn lleihau'n sylweddol lefelau ysgarthiad albwmin wrinol, ehangiad mesangial, a thrwch y GBM. Gostyngwyd lefelau mynegiant genynnau pro-llidiol a ffibrosis, gan gynnwys Tnfa, Tgfb, a Col4, hefyd yn arennau'r llygoden. Mae'r canfyddiadau hyn yn awgrymu nad yw PAR2 yn bathogenig yn gynnar, ond yn yr anaf glomerwlaidd diabetig cymharol ddatblygedig a achosir gan ddiffyg eNOS (Tabl 1).

Rhwystr Deuol o PAR1 a PAR2 mewn Llygod Diabetig gyda Llai o eNOS

Rydym wedi dangos bod PAR1 a PAR2 yn cyfrannu ar y cyd at bathogenesis DKD (Mitsui et al. 2020). Yn yr astudiaeth hon, defnyddiwyd llygod Akita diabetig gwrywaidd math I heterosygaidd ar gyfer eNOS (Ins2Akita/+; eNOS+/-) fel model o DKD. Cafodd y llygod hyn eu trin â cherbyd, antago nist PAR1 (E5555, 60 mg/kg/dydd), antagonist PAR2 (FSLLRY, 3 mg/kg/dydd), neu E5555 + FSLLRY am 4 wythnos. Roedd gweinyddu antagonist PAR1 neu PAR2 yn unig yn gwanhau anaf glomerwlaidd, megis ehangu mesangial a dyddodiad colagen IV, o'i gymharu â gweinyddu cerbyd. Gwelwyd effeithiau therapiwtig synergaidd ataliad PAR1 a PAR2, a gostyngwyd y gymhareb albwmin-i-creatinin wrinol yn sylweddol pan rwystrwyd PAR1 a PAR2 ag E5555 + FSLLRY o'i gymharu â gweinyddiaeth y cerbyd. Ymhellach, roedd rhwystriad deuol o PAR1 a PAR2 gan E5555 + FSLLRY wedi gwella anaf histolegol calli synergaidd, gan gynnwys ehangiad mesangial, ymdreiddiad macrophage glomerwlaidd, a dyddodiad colagen math IV. Gostyngwyd hefyd lefelau mynegiant genynnau sy'n gysylltiedig â llid a ffibrosis yn yr arennau (Tabl 1).

Fe wnaethom ganolbwyntio ar effeithiau pro-llidiol agonyddion PAR1 a PAR2 ar gelloedd endothelaidd dynol (Mitsui et al. 2020). Dangosodd y canlyniadau fod symbyliad gydag agonyddion PAR1 a PAR2 yn cynyddu lefelau mynegiant mRNA MCP1 a PAI1 yn synergyddol. Cafodd effaith gweithydd PAR1 ei rwystro gan atalydd NF-κB, tra bod atalyddion NF-kB a MAPK wedi rhwystro effaith yr agonist PAR2. Gyda'i gilydd, mae PAR1 a PAR2 ar y cyd yn cyfrannu at lid fasgwlaidd a DKD trwy wahanol lwybrau signalau (Ffig. 3).

Casgliad

Yn yr adolygiad hwn, fe wnaethom ganolbwyntio ar y berthynas rhwng y llwybr ceulo protease-PAR a diffyg eNOS mewn llygod diabetig. Mae cynhyrchiant isel o eNOS yn gysylltiedig â hypercoagulability a mwy o signalau PAR, sy'n niweidiol i DKD. Gall y canfyddiadau hyn nodi eu rolau patholegol yng nghyfnod uwch neu ddiweddarach DKD (ee, gyda methiant arennol a/neu broteinwria enfawr). Defnyddir atalyddion FXa llafar yn eang i atal thrombosis (Patel et al. 2011; Robertson et al. 2015). Mae eu defnydd wrth drin DKD yn opsiwn addawol. At hynny, gellir defnyddio rhai antagonyddion PAR1, gan gynnwys atopaxar a vorapaxar, mewn therapi gwrthblatennau i atal syndrom coronaidd acíwt (Goto et al. 2010; Tricoci et al. 2012). Yn ogystal, mae cynnydd rhyfeddol yn natblygiad antagonists PAR2 (Lim et al. 2013; Cheng et al. 2017; Jiang et al. 2018), a gallant fod yn opsiynau therapiwtig newydd i drin cleifion â DKD.

Diolchiadau

Cefnogwyd yr astudiaeth hon gan Gonryo Medical Foundation. Hoffem ddiolch i Editage ( https://www.editage.com ) am olygu Saesneg.

Gwrthdaro Buddiannau Nid yw'r awduron yn datgan unrhyw wrthdaro buddiannau.

Cyfeiriadau

Afkarian, M., Sachs, MC, Kestenbaum, B., Hirsch, IB, Tuttle, KR, Himmelfarb, J. & de Boer, IH (2013) Clefyd yr arennau a risg uwch o farwolaethau mewn diabetes math 2.J. Am. Soc. Nephrol., 24, 302-308. 

Azushima, K., Gurley, SB & Coffman, TM (2018) Modelu neffropathi diabetig mewn llygod.Nat. Nephrol y Parch., 14, 48-56. Brosius, FC, Alpers, CE, Bottinger, EP, Breyer, MD, Coffman, TM, Gurley, SB, Harris, RC, Kakoki,

M., Kretzler, M., Leiter, EH, Levi, M., McIndoe, RA, Sharma, K., Smithies, O., Susztak, K., et al. (2009) Modelau llygoden o neffropathi diabetig.J. Am. Soc. Nephrol., 20, 2503-2512. Camerer, E., Huang, W. & Coughlin, SR (2000) Ffactor meinwe a ffactor X-ddibynnol actifadu derbynnydd proteas-activated 2 gan ffactor VIIa.Proc. Natl. Acad. Sci. UDA, 97, 5255-5260. 

Chen, D. & Dorling, A. (2009) Rolau hanfodol ar gyfer thrombin mewn llid acíwt a chronig.J. Thromb. Haemost., 7 Cyflenwad 1, 122-126. Cheng, H., Wang, H., Fan, X., Paueksakon, P. & Harris, RC (2012) Mae gwella gweithgaredd synthase ocsid nitrig endothelaidd yn arafu dilyniant neffropathi diabetig mewn llygod db/db.Arennau Int., 82, 1176-1183. Cheng, RKY, Fiez-Vandal, C., Schlenker, O., Edman, K., Aggeler, B., Brown, DG, Brown, GA, Cooke, RM, Dumelin, CE, Doré, AS, Geschwindner, S. , Grebner, C., Hermansson, NO, Jazayeri, A., Johansson, P., et al. (2017) Mewnwelediad strwythurol i fodiwleiddio allosteric derbynnydd proteas-acti 2.

Natur, 545, 112-115. Chung, H., Ramachandran, R., Hollenberg, MD & Muruve, DA (2013) Derbynnydd wedi'i actifadu â phroteinase-2 trawsweithredol derbynnydd ffactor twf epidermaidd a thrawsnewid ffactor twf- llwybrau signalau derbynnydd yn cyfrannu at ffibrosis arennol.J. Biol. Cemeg., 288, 37319-37331. Coughlin, SR (2005) Derbynyddion a weithredir gan broteas mewn hemostasis, thrombosis a bioleg fasgwlaidd.J. Thromb. Haemost., 3, 1800-1814. Craciun, FL, Ajay, AK, Hoffmann, D., Saikumar, J., Fabian, SL,

Bijol, V., Humphreys, BD & Vaidya, VS (2014) Pharmaco disbyddu rhesymegol a genetig o ffibrinogen yn amddiffyn rhag ffibrosis yr arennau.Yn. J. Physiol. Ffisiol Arennol., 307, 

F471- 484. Cunningham, MA, Rondeau, E., Chen, X., Coughlin, SR, Hold sworth, SR & Tipping, PG (2000) Mae derbynnydd 1 protease-activated 1 yn cyfryngu llid arennol sy'n ddibynnol ar thrombin, wedi'i gyfryngu gan gelloedd mewn glomerwloneffritis cilgantaidd.J. Exp. Med., 191, 455-462.