Dadansoddiad Cydran A Gweithgaredd Gwrthocsidiol Polysacaridau O Cistanche Deserticola

Haniaethol: yn y papur hwn, mae polysacaridau yn cael eu tynnu oCistanche deserticola, Cistanche deserticolacraipolysacaridMae CLP yn cael ei buro gan gromatograffeg colofn cellwlos DEAE, a cheir siwgr niwtral CLP a siwgr asidig CLP2 o Cistanche deserticola, Mae cynnwys cyfanswm siwgr, asid wronig a phrotein ynCistanche deserticola polysacarid craiCLP, Cistanche deserticola siwgr niwtral CLPl asiwgr asidig Cistanche deserticolaMae CLP2 yn cael ei bennu gan sganio sbectrol UV, a phennir pwysau moleciwlaidd a chyfansoddiad monosacarid polysacaridau. Ar yr un pryd, dadansoddir cynhwysedd scavenging radical DPPH a chyfanswm gallu gwrthocsidiol CLP polysacarid crai deserticola, siwgr niwtral Cistanche deserticola CLP1 a siwgr asidig Cistanche deserticola Cl.P2. Mae'r data mesuredig yn dangos bod y cydrannau o Cistanche deserticola crai polysacarid CLP, Cistanche deserticola siwgr niwtral CLP1 a Cistanche deserticola siwgr asidigCLP2 yn debyg, ond mae gwahaniaethau mawr yn eu cynnwys, Gellir cael copaon elution lluosog pan Cistanche deserticola siwgr niwtral CLP1 a Cistanche Mae siwgr asidig deserticola CLP2 yn cael eu gwahanu a'u puro gan golofn cromatograffig cellwlos DEAE, a'r dosbarthiad pwysau moleciwlaidd yw 0~10 000 Da, sy'n nodi mai prif gydrannau polysacaridau deserticola Cistanche yw siwgrau moleciwlaidd bach. Mae canlyniadau penderfyniad monosacarid siwgr niwtral Cistanche deserticola CLPl yn dangos bod y monosacaridau mewn siwgr niwtral Cistanche deserticola CLP1 yn bennaf yn mannose, asid galacturonic, glwcos, galactos, ac arabinose, Mae canlyniadau penderfyniad monosacarid siwgr asidig Cistanche deserticola CLP2 yn dangos bod y monosacaridau yn Cistanchedeserticola mae siwgr asidig ClP2 yn bennaf rhamnose, asid galacturonig, glwcos a galactos, Mae canlyniadau arbrawf sborionu radical DPPH a chyfanswm arbrawf gallu gwrthocsidiol polysacaridau o Cistanche deserticola yn dangos bod cynhwysedd gwrthocsidiol siwgr niwtral Cistanche deserticolaCLPl yn uwch na chynhwysedd polysacarid crai Cistanche deserticola siwgr asidig CLP a Cistanche deserticola CLP2.

Geiriau allweddol:Cistanche deserticola; polysacaridau; dadansoddi cydrannau;gweithgaredd gwrthocsidiol; amsugnedd.

Cael Detholiad Cistanche Tubulosa Ar Gyfer Effaith Dargedu

Cistancheyn blanhigyn parasitig llysieuol sy'n cynnwys nifer fawr oglycoside ffenoligs, biosynthesis,glycosidau ffenylethanoid, siwgrau, ac alcoholau. Mae'r glycanau yn bennaf ar ffurf polysacaridau. Mae gan polysacarid cistanche swyddogaeth reoleiddio gweithgaredd imiwnedd cryf [1-2].

Fel metabolion canolradd mewn gweithgareddau bywyd dynol, mae radicalau rhydd mewn cyflwr sefydlog ansefydlog ac mae ganddynt ddwysedd uchel o weithgaredd ocsideiddiol, a all achosi macromoleciwlau biolegol, felly, y defnydd o gwrthocsidiol naturiol Felly, mae'r defnydd o sylweddau gwrthocsidiol naturiol i ysbeilio radicalau rhydd wedi dod yn brif gyfeiriad ymchwil bwyd cyfredol. Mae cyfansoddiad polysacarid oCistanchemae ganddo allu gwrthocsidiol cryf, a all hyrwyddo sborionu radicalau rhydd yn y corff dynol. Mae gan gyfansoddiad polysacarid Cistanches allu gwrthocsidiol cryf a gall hyrwyddo sborionu radicalau rhydd yn y corff dynol [3].

Yn y papur hwn, mae'rpolysacaridauyn Cistanche stannic eu hechdynnu a'u dosbarthu gan treiddiad gel effeithlonrwydd uchel. Pennwyd pwysau moleciwlaidd polysacaridau yn Cistanche gan gromatograffaeth treiddiad gel perfformiad uchel. Pennwyd pwysau moleciwlaidd polysacaridau Cistanche gan gromatograffaeth treiddiad gel perfformiad uchel, a chyfansoddiad y polysacaridau hefyd Roedd pwysau moleciwlaidd polysacaridau Cistanche yn cael ei bennu gan gromatograffeg treiddiad gel perfformiad uchel, a chyfansoddiad y polysacaridau oedd dadansoddi.

Dadansoddwyd gweithgaredd gwrthocsidiol Cistanche trwy bennu pŵer chwilota radical rhydd a chyfanswm gallu gwrthocsidiol y cydrannau polysacarid. Fe wnaethom hefyd bennu gallu sborion radical rhydd a chyfanswm gallu gwrthocsidiol cydrannau polysacarid Cistanch, a darparu sail ddamcaniaethol ar gyfer datblygu a defnyddio Cistanche a'i werth ychwanegol.

1 Sampl o baratoi ac echdynnu sylweddau polysacarid o Cistanche

Pwyswch 2.5kg o Cistanche, ei sleisio, ychwanegu 12.5L o ddŵr distyll a'i ferwi am 3 awr. Ar ôl berwi am 3h, casglwyd y hidlif trwy hidlo a'i ychwanegu at 75 y cant ethanol, a'i adael i sefyll am 24h. Ar ôl berwi, casglwyd y hidlif trwy hidlo, ei ychwanegu at 75 y cant ethanol a'i adael i sefyll am 24 awr, wedi'i allgyrchu ar 4000r / min am 30 munud, a chasglwyd y gwaddod. Cafodd y gwaddod ei gasglu, ei rewi a'i sychu i gael CLP polysacarid crai Cistanche [4]. Cafodd y gwaddod ei rewi-sychu i gael y CLP polysacarid crai o Cistanche [4]. Cymerwyd cellwlos DEAE, ei socian a'i chwyddo, ei ddadgasio Cafodd ei lwytho ar golofn cyfnewid anion cellwlos DEAE a'i gydbwyso â dŵr distyll a hydoddiant NaCl. Defnyddiwyd dŵr a hydoddiant NaCl ar gyfer ecwilibration. Yn pwyso 100 mg o polysacarid crai o Cistanche tubulosa CLP ei ddiddymu mewn 10 ml o ddŵr distyll, a chasglwyd yr eluate ar ôl elution â dŵr distyll.

Casglwyd yr eluate ar ôl ei ollwng â dŵr distyll a'i rewi-sychu trwy grynodiad i gael y siwgr niwtral CLP1 o Cistanche; Casglwyd yr eluate ar ôl elution gyda hydoddiant NaCl, ac yna ei ganolbwyntio a'i rewi-sychu ar ôl dialysis i gael siwgr asidig Cistanche CLP1. Ar ôl elution gyda hydoddiant NaCl, yr eluate ei gasglu a'i grynhoi gan dialysis a rhewi-sychu i gael siwgr asidig Cistanche CLP2 [5].

Paratowyd y siwgr niwtral CLP1 a siwgr asidig CLP2 o Cistanche tubulosa ar grynodiad o 1 mg/kg, yn y drefn honno. Paratowyd yr hydoddiannau polysacarid ar grynodiad o 1 mg/mL, a dadansoddwyd y polysacaridau gan sbectrosgopeg UV gan ddefnyddio sbectroffotomedr ar 210-600 nm. Sganiwyd y sbectra UV gan ddefnyddio sbectrophotometer ar 210-600 nm, a phan ymddangosodd yr uchafbwynt yn 260-280 nm Pan ymddangosodd y brig yn 260-280 nm, profwyd bod yr hydoddiant yn cynnwys protein ac asid niwclëig [6].

2 Pennu cyfansoddiad sylwedd polysacarid Cistanche

Defnyddiwyd y dull asid ffenol-sylffwrig i bennu cyfanswm y cynnwys siwgr mewn samplau Cistanche. Mesurwyd hydoddiannau glwcos o 0.1 mg/mL, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8 ac 1 mL mewn tiwbiau prawf gwydr, ac ychwanegwyd dŵr distyll i osod y cyfaint i 1 ml. Yna ychwanegwyd 0.5 mL o adweithydd ffenol a 2.5 ml o asid sylffwrig crynodedig gyda chrynodiad o 6 y cant at y tiwbiau prawf, eu hysgwyd yn dda a'u hoeri i dymheredd yr ystafell. Mesurwyd yr amsugnedd ar 490 nm gan ddefnyddio sbectrophotometer, a phlotiwyd y gromlin safonol gyda'r cynnwys siwgr fel y cyfesuryn llorweddol a'r amsugnedd fel y cyfesuryn fertigol, a chyfrifwyd yr hafaliad atchweliad [7-8].

Penderfynwyd ar gynnwys protein y samplau Cistanche gan ddefnyddio dull Komas Brilliant Blue. Mesurwyd cynnwys protein y samplau gan y sbectroffotomedr ar 495 nm a chyfrifwyd y cynnwys protein yn ôl yr hafaliad cromlin safonol [9].

Penderfynwyd ar gynnwys glyoxalate mewn samplau Cistanche gan ddefnyddio'r dull m-hydroxyphenyl. Ychwanegwyd crynodiadau gwahanol o'r safon a 0.4 mL o'r hydoddiant sampl gyda chrynodiad o 0.1 mg/mL i'r tiwb profi gyda 2.5 mL o asid sylffwrig crynodedig, wedi'i ysgwyd

Ychwanegwyd y crynodiad o m-hydroxybiphenyl a 0.5 y cant hydoddiant sodiwm hydrocsid at y tiwb prawf, ysgwyd yn dda a gadael am 30 munud. Mesurwyd yr amsugnedd ar 525 nm gan sbectroffotomedr, a chyfrifwyd faint o glyoxalate yn y sampl yn ôl yr hafaliad cromlin safonol [10-11]. Pennwyd pwysau moleciwlaidd cymharol polysacaridau Cistanche gan gromatograffeg gel perfformiad uchel, a phenderfynwyd cyfansoddiad monosacaridau Cistanche gan gromatograffeg hylif perfformiad uchel. Pennwyd cyfansoddiad monosacarid Cistanche gan gromatograffaeth hylif perfformiad uchel [12].

3 Canlyniadau a dadansoddiad o gyfansoddiad polysacarid Cistanche Tubulosa

O Ffig. 1, gellir gweld bod y siwgr niwtral CLP1 o Cistanche Tubulosa yn dangos uchafbwynt amsugno amlwg ar 280nm, tra nad oedd gan y siwgr asidig CLP2 o Cistanche Tubulosa uchafbwynt amsugno amlwg ar 260-280nm, ond roedd y Roedd sbectrwm amsugno UV yn uwch. Gan fod gan y tryptoffan a'r tyrosin a gynhwysir yn y proteinau werthoedd amsugno uwch ar gyfer UV ar 280 nm, gellid barnu bod siwgr niwtral Cistanche CLP1 yn cynnwys glycoproteinau, ond ni ellid barnu a oedd siwgr asidig Cistanche CLP2 yn cynnwys asidau niwclëig a phroteinau.

Nid yw'n bosibl pennu a yw'r siwgr asidig CLP2 o Cistanche yn cynnwys asidau niwclëig a phroteinau.

Gall dadansoddiad colofn cromatograffaeth cyfnewid ïon cellwlos DEAE adsorbio sylweddau ïonig ac amhureddau ar y golofn i gyflawni gwahanu sylweddau polysacarid, ac ar ôl canolbwyntio a sychu'r eluate dŵr distyll, cafwyd cyfanswm o 34.68 mg o siwgr niwtral Cistanche CLP1, ac ar ôl gan ddefnyddio hydoddiant NaCl i eliwt a chanolbwyntio a sychu, cafwyd cyfanswm o 16.52 mg o siwgr asidig Cistanche CLP2. Yr hafaliad cromlin safonol o gyfanswm cynnwys siwgr, cynnwys protein a hafaliad cromlin safonol glyoxylate. Cafwyd mesuriadau cyfanswm siwgr, protein a glyoxylate Cistanche. Cafodd cyfanswm cynnwys siwgr, protein ac asid glwcwronig Cistanche eu mesur a’u dangos yn Nhabl 1.

Dangosir cromlin sganio sbectrwm UV y ffotomedr o 210 i 600 nm yn Ffigur 1.

O Ffig. 1, gellir gweld bod siwgr neutrophilic Cistanche CLP1 yn dangos uchafbwynt amsugno clir ar 280 nm, tra bod siwgr asidig Cistanche CLP2 yn dangos uchafbwynt amsugno ar 260-280 nm. a dangosodd y siwgr asidig CLP2 o Cistanche Tubulosa uchafbwynt amsugno clir ar 260-280 nm. Er nad oedd brig amsugno amlwg yn 260-280 nm, roedd y sbectrwm amsugno UV yn uwch. Gan fod tryptoffan a thyrosin a gynhwysir yn y proteinau â gwerth amsugno mwy ar 280 nm ar gyfer gwerth amsugno UV, gellir barnu bod siwgr niwtroffilig Cistanche CLP1 yn cynnwys glycoproteinau, ond nid oedd yn bosibl pennu a oedd siwgr asidig Cistanche CLP2 yn cynnwys asidau niwclëig a phroteinau. . Ni ellid pennu presenoldeb asidau niwclëig a phroteinau yn Cistanche CLP2.

Gall dadansoddiad colofn cromatograffaeth cyfnewid ïon negyddol cellwlos DEAE arsugniad sylweddau ac amhureddau ïonig i'r golofn. Cyflawnwyd gwahanu sylweddau polysacarid trwy arsugniad y sylweddau ïonig a'r amhureddau ar y golofn. Crynhowyd yr eluate dŵr distyll a'i sychu i gael siwgr niwtral Cistanche Ar ôl canolbwyntio a sychu'r eluate dŵr distyllog, cafwyd cyfanswm o 34.68 mg o CLP1, ac ar ôl canolbwyntio a sychu gyda hydoddiant NaCl, cafwyd y siwgr asidig CLP1. Cafwyd y siwgr asidig CLP2 o Cistanche fel 16.52 mg. Cafwyd yr hafaliad cromlin safonol o gyfanswm cynnwys siwgr, cynnwys protein a chynnwys glyoxylate o Cistanche. a hafaliad cromlin safonol glyoxylate. Cafwyd mesuriadau cyfanswm siwgr, protein a glyoxylate Cistanche. Cafodd cyfanswm cynnwys siwgr, protein ac asid glwcwronig Cistanche eu mesur a’u dangos yn Nhabl 1.

Tabl 1 Cynnwys cyfanswm y siwgr, protein ac asid wronig mewn Cistanche deserticola

Gellir pennu pwysau moleciwlaidd ac arwynebedd brig y sampl safonol, a gellir cael yr hafaliad atchweliad atchweliad trwy amnewid signal allyrru golau y sampl i'w brofi yn yr hafaliad atchweliad. Gellir cael pwysau moleciwlaidd y sampl sydd i'w brofi. Gellir cael pwysau moleciwlaidd y samplau sydd i'w profi trwy roi gwerthoedd signal allyriadau golau y samplau sydd i'w profi yn yr hafaliad atchweliad. Cafwyd y pwysau moleciwlaidd cyfartalog, pwysau moleciwlaidd trwm cyfartalog a chyfernod gwasgariad Cistanche Tubulosa CLP1 a Cistanche Tubulosa CLP2. Pennwyd siwgr niwtral Cistanche CLP1 a Cistanche acidulous CLP2 gan cromatograffaeth treiddiad gel perfformiad uchel. Dangosir canlyniadau'r amser cadw a'r cyfrifiad pwysau moleciwlaidd yn Nhabl 2. Defnyddiwyd cymhareb y pwysau moleciwlaidd cyfartalog trwm i'r nifer pwysau moleciwlaidd cyfartalog i nodi lled y dosbarthiad moleciwlaidd. Defnyddir cymhareb pwysau moleciwlaidd trwm cyfartalog i nifer pwysau moleciwlaidd cyfartalog i nodi lled y dosbarthiad moleciwlaidd.

Gofynnwch am fwy:

E-bost:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Ffôn: ynghyd â 86 15292862950