Penderfynu ar gyffuriau sy'n gwella rhyw a ychwanegir yn anghyfreithlon mewn cynhyrchion gofal iechyd gan TLC-NIS Technoleg Gyfun

Haniaethol:I sefydlu'r model canfod ocyffuriau sy'n gwella rhywYchwanegwyd yn anghyfreithlon gan y cromatograffeg haen denau (TLC) a thechnoleg gyfun sbectrosgopeg bron-is-goch (Cyfnodau Cyfnodol), ar gyfer y dadansoddiad ansoddol a meintiol cyflym o gyffuriau a ychwanegir yn anghyfreithlon yn anghyfreithlonCynhyrchion Gofal Iechyd． Gyda thE Cynnwys cyffuriau cemegolMewn gofal iechyd mae cynhyrchion yn cael ei bennu gan y dull HPLC fel gwerth cyfeirio． Defnyddiwyd TLC yn yr astudiaeth． Defnyddiwyd trichloromethan-methyl alcohol-amoniwm hydrocsid (1 0 ∶ 1 ∶ 0． 1) fel y toddydd sy'n datblygu a chanfuwyd y plât o dan lamp uwchfioled． Casglwyd sbectrwm y mannau cydran cemegol ar TLC gan NIｒs． Sefydlwyd y model ansoddol a meintiol cyflym o gyffuriau cemegol trwy ddefnyddio'r dadansoddiad atchweliad sgwariau lleiaf rhannol (PLS) ynghyd â dull traws -ddilysu． A'i ddilysu ar gyfer model． Sefydlodd y dull dadansoddi HPLC gyda gwell gradd gwahanu ac ystod linellol eang． Sefydlodd y modelau dadansoddi TLC-NISS o sildenafil a noracetildenafil gydag ystod linellol eang, a'r canlyniadau sefydlog a rhagweledig gwell． Y cyfernod cydberthynas (ｒ2), gwall sgwâr cymedrig gwreiddiau dilysu graddnodi (ｒMSECV) a gwall rhagfynegiad sgwâr cymedrig gwreiddiau (ｒMSEP) oedd {{1 {0}}． 984, 0． 0 85 a 0． 081; 0． 982,0． 098 a 0． 087, yn y drefn honno． Gan ddefnyddio'r model TLC-NIS, canfuwyd bod 9 swp o 10 swp o gynhyrchion sy'n gwella rhyw yn cael eu hychwanegu sildenafil a chyfradd ddiamod o 90%, gwyriad cymharol cyfartalog cynnwys sildenafil a noracetildenafil a ragwelwyd oedd 1． oedd 1． 86%, 1． 96%, yn y drefn honno． Dangosodd y canlyniadau y gellir defnyddio'r modelau dadansoddi TLC-NISS ar gyfer penderfyniad cyflym uchod cydrannau cemegol mewn cynhyrchion sy'n gwella rhyw． Y dull gyda． penodol a syml． A ddarparodd y syniadau ar gyfer penderfynu cyflym ar gyffuriau anghyfreithlon ychwanegol mewn cynhyrchion gofal iechyd．

 

Atchwanegiadau llysieuol cistanche naturiol ar gyfer perfformiad rhywiol

 

Geiriau allweddol: Cynhyrchion Gofal Iechyd; Ychwanegwyd yn anghyfreithlon; Tlc-nics; HPLC; Cynnyrch sy'n gwella rhyw

 

Wrth i ymwybyddiaeth y cyhoedd o ofal iechyd gynyddu, mae'r galw am gynhyrchion iechyd yn tyfu, yn enwedig cynhyrchion iechyd sydd wedi'u labelu fel meddygaeth Tsieineaidd draddodiadol. Mae cynhyrchion iechyd yn derm poblogaidd ar gyfer bwydydd iechyd, a elwir yn atchwanegiadau dietegol dramor. Nid cyffuriau ydyn nhw ac mae ganddyn nhw swyddogaeth rheoleiddio swyddogaethau dynol. Fe'u defnyddir gan grwpiau penodol o bobl, ond ni fwriedir iddynt drin afiechydon [1]. Yn wyneb y demtasiwn o elw uchel, mae gwerthwyr anghyfreithlon yn ychwanegu dosau gormodol o ddeunyddiau crai cemegol rhad gyda sgîl -effeithiau amlwg i gynhyrchion iechyd i wella effeithiolrwydd cynhyrchion. Mae hyn wedi tarfu'n fawr ar farchnad cynhyrchion iechyd fy ngwlad ac wedi bygythiad difrifol i iechyd y bobl. Er enghraifft, yn 2009, ychwanegodd cynnyrch iechyd hypoglycemig ategol rhanbarth Xinjiang "gapsiwl tangzhining" dosau gormodol o'r glibenclamid cyffuriau cemegol gwaharddedig, gan achosi llawer o farwolaethau. Yn 2014, ychwanegodd y "capsiwl colli pwysau Xianxian" yn nhalaith Shanxi gyffuriau cemegol gwaharddedig sibutramine a sildenafil, gan beri i lawer o bobl gael adweithiau niweidiol neu hyd yn oed farw. Yn ystod y blynyddoedd diwethaf, wrth archwilio a gwerthuso cynhyrchion iechyd ar hap, canfuwyd bod gweithgynhyrchwyr anghyfreithlon yn ychwanegu dosau gormodol o sildenafil i gynhyrchion iechyd rhywiol a pharatoadau iechyd meddygaeth Tsieineaidd traddodiadol i dwyllo defnyddwyr, gan beryglu iechyd defnyddwyr yn ddifrifol [2,3]; Mae ffenomenau tebyg fel dosau gormodol o gyffuriau cemegol gwaharddedig fel Phenafil, biguanides, furosemide a ffenolffthalein mewn iechyd rhywiol, hypoglycemig a chynhyrchion iechyd colli pwysau wedi dod i'r amlwg mewn nant ddiddiwedd, ac mae cuddio'r ychwanegiad yn dod yn fwyfwy uwch [4,5]; Mae ffenomenau o'r fath hefyd yn aml yn digwydd dramor [6]. Mae'r gweithredoedd anghyfreithlon hyn ag effaith eang a niwed mawr yn haeddu ystyriaeth ddwfn gan awdurdodau rheoleiddio cyffuriau, ac mae'n arbennig o bwysig datblygu dulliau samplu a chanfod marchnad cyflym.

Ar hyn o bryd, mae'r dulliau canfod a ddefnyddir ar gyfer ychwanegu cyffuriau cemegol yn anghyfreithlon mewn meddyginiaethau Tsieineaidd traddodiadol a chynhyrchion iechyd yn cynnwys cromatograffeg haen denau (TLC) [7], cromatograffeg hylif perfformiad uchel (HPLC) [8], sbectrometreg màs cromatograffeg hylifol (LC-MOSS) [LC-MS-MS) [9], nwy-msms, [9], nwy-msms, nwy-msms, nwy-msms, nwy, nwy, nwy, nwy, nwy, nwy, nwy, nwy-msms, [9], yn nwy-mass. Sbectrometreg (IMS) a Raman Spectrometry (RS) [11].
Ymhlith yr amrywiol ddulliau canfod a adroddwyd, astudiwyd LC-MS, GC-MS ac IMS yn fwy, ond oherwydd pris uchel yr offerynnau a'r gweithrediad cymhleth, nid ydynt yn hawdd eu hyrwyddo ac maent yn anodd poblogeiddio mewn ardaloedd trefol a mynyddig sydd â datblygiad economaidd cymharol gefn. TLC yw un o'r pedwar dull traddodiadol ar gyfer adnabod cyffuriau. Mae'n gyflym, yn syml, ac yn cael effeithiau gwahanu da. Fe'i defnyddir yn helaeth wrth adnabod ansoddol a meintiol cyffuriau. Fodd bynnag, ei anfantais yw bod yn rhaid iddo fod â sylweddau cyfeirio cyfatebol neu ddeunyddiau meddyginiaethol cyfeirio [12, 13]. Mae sbectrosgopeg is -goch bron (NIRS) wedi'i ddatblygu yn ystod y blynyddoedd diwethaf. Mae'n casglu gwybodaeth amsugno dirgryniad a chylchdroi'r ch, oh, sh, nh, c=c a c=o grwpiau'r sylwedd a ganfuwyd yn y sbectrwm is -goch agos ar gyfer dadansoddiad ansoddol a meintiol o sylweddau. Fe'i defnyddir yn helaeth mewn amaethyddiaeth, petroliwm, diwydiant cemegol, tybaco a bwyd. Ar hyn o bryd, fe'i cymhwyswyd yn raddol i'r diwydiannau fferyllol a goruchwylio cyffuriau. Mae ganddo botensial datblygu gwych yn y canfod a dadansoddi ansoddol a meintiol cyflym o gyffuriau [14, 15].

Felly, mae'r papur hwn yn defnyddio'r offerynnau poblogaidd presennol a'r dulliau prawf i greu technoleg gyfun TLC-NIRS. Gan gymryd cynhyrchion iechyd rhywiol fel enghraifft, sefydlir model canfod ansoddol a meintiol cyffredinol ar gyfer ychwanegu cyffuriau cemegol iechyd rhywiol gwaharddedig yn anghyfreithlon. Gellir ei ddefnyddio'n effeithlon, yn gyflym ac yn syml ar gyfer sgrinio a chanfod ychwanegu cyffuriau cemegol gwaharddedig mewn cynhyrchion iechyd y farchnad, a thrwy hynny leihau'r gost canfod.

1 offeryn a phrawf cyffuriau

1.1 offerynnau

Tensor Trawsnewid Fourier 37 Sbectromedr NIｒ (Bruker, yr Almaen), Opus 5. 0 Meddalwedd dadansoddi; LC -20 ar gromatograff hylif perfformiad uchel (Shimadzu, Japan), gweithfan cromatograffeg datrysiad LC; BS224S Cydbwysedd Dadansoddol Electronig (Sartorius, yr Almaen); Plât haen denau Silica Gel GF254 (Qingdao Ocean Biocemical Co., Ltd.).

 

1.2 Cyffuriau Prawf

Prynwyd sildenafil (510068-201401, 99.9%) a narodenafil (520039-201902, 96.5%) gan Sefydliad Ymchwil Bwyd a Chyffuriau Tsieina, a dangosir y strwythurau yn Ffigur 1. Roedd methanol i gyd yn gromatograffig pur, roedd dŵr yn ddŵr ultrapure pur, a chloroform, a ffyniant. Samplau marchnad oedd samplau iechyd.

 

Ffig. 1 Strwythurau cyffuriau cemegol sy'n gwella rhyw

 

2 ddull a chanlyniadau

2. 1 Paratoi datrysiad cyfeirio a datrysiad sampl

Paratoi Datrysiad Cyfeirnod: Cymerwch oddeutu 25 mg o sildenafil a narendenafil yn y drefn honno, eu pwyso'n gywir, eu rhoi mewn fflasg gyfeintiol 5 ml, a'u toddi mewn methanol i baratoi toddiant stoc cyfeirio cymysg o oddeutu 5 mg/mg yr un; Yna cymerwch oddeutu 5 mg o sildenafil a narendenafil yn y drefn honno, eu pwyso'n gywir, eu rhoi mewn fflasg gyfeintiol 5 ml, a'u toddi mewn methanol i baratoi hydoddiant cyfeirnod adnabod sengl o oddeutu 1 mg/ml yr un.

Paratoi Datrysiad Sampl: Cymerwch ddos ​​y cynnyrch hwn unwaith, rhowch ef mewn fflasg gyfeintiol 5 ml, ychwanegwch fethanol ac ultrasonicate am 3 0 min (100 W, 56 kHz), ei oeri, ychwanegu methanol at y marc, a hidlo i gael yr hidliad. Wrth bennu'r cynnwys, mesurwch 1 ml o bob toddiant sampl yn gywir, ei doddi yn y cyfnod symudol i 25 mL, a'i hidlo â philen hidlo 0.45 μm. Gan fod crynodiadau màs y cydrannau a ganfyddir yn y samplau positif (cynhyrchion iechyd gyda chyffuriau cemegol gwaharddedig yn cael eu hychwanegu) yn amrywio'n fawr, gellir cynyddu'r cyfaint samplu yn briodol neu gellir gwanhau'r toddiant sampl yn briodol i wneud ei grynodiad màs terfynol o fewn yr ystod linellol.
Paratoi Datrysiad Sampl Cadarnhaol: Gan na thynnwyd sampl gadarnhaol ar gyfer naringenfil, cymerwyd sampl wag (capsiwl Huangjingbajitian, bioleg Luoyang Kangti, roedd canlyniad y prawf yn negyddol) unwaith, ac ychwanegwyd datrysiad cyfeirio naringenfil wedi'i wanhau'n briodol. Paratowyd yr hydoddiant sampl positif yn ôl y dull paratoi o dan y datrysiad sampl, fel bod crynodiadau màs Naringenfil yn yr hydoddiant sampl positif oddeutu 5, 7.5, a 10 mg/mL, yn y drefn honno, a 4, 3, a pharatowyd 3 chopi o bob crynodiad màs yn gyfochrog.

2. 2 Amodau cromatograffig a sbectrol

2. 2. 1 Amodau cromatograffig HPLC

Defnyddiwyd ffenomenex ODS C18 (25 0 mm × 4. 6 mm, 5μm) colofn cromatograffig; Defnyddiwyd 45% methanol (a) -55% 0. 3% Datrysiad dyfrllyd asid ffosfforig (B) fel y cam symudol ar gyfer elution am 30 munud; Y gyfradd llif oedd 1 ml/min, tonfedd canfod oedd 290 nm; Tymheredd y golofn oedd 40 gradd; cyfaint y pigiad oedd 10 μl.

 

2. 2. 2 Amodau cromatograffig TLC

Defnyddiwyd plât cromatograffeg haen denau GEL GEL GF254, a defnyddiwyd amonia clorofform-methanol (1 0: 1: 0. 1) fel y toddydd sy'n datblygu ar gyfer datblygu ac anweddu. Ar ôl sychu mewn sychwr am 1 awr, archwiliwyd y marc o dan lamp uwchfioled 254 nm (gweler Ffigur 2).

 

2. 2. 3 NIRS Caffael Amodau

Defnyddiwyd stiliwr ffibr solet y bruker nirs ar gyfer mesur, gydag ystod rhif ton o 12, 000 i 4, 000 cm -1, 64 sgan, cydraniad o 16 cm -1, tymheredd o 10 i 30 o raddau o 3%, a hyd at hyder, a hyd at estron, a hyd at estron, a hyd at 3 echel, a5%, a5 INY, a 6 INYDEDD, A CHYDWEDDION, A CHYDWEDDION, A THEISION, A THEISION, A THEIST, A THEIST AND BYDYDDIAETH, A BYDYRNDEL A. Defnyddiwyd plât haen denau gel silica gwag GEL GF254 fel cyfeiriad, a chasglwyd y sbectrwm ar ôl tynnu cefndir. Mesurwyd pob man cydran cemegol ochr yn ochr 5 gwaith, ac arbedwyd y wybodaeth NIRS.

 

2.3 Sefydlu Dull Penderfynu Cynnwys HPLC

2.3.1 Ymchwilio i berthynas linellol

Roedd 2. 0 ml o'r datrysiad stoc cyfeirio cymysg (sildenafil 5.25 mg/ml; narcolepsy 5.15 mg/ml) wedi'i amsugno'n gywir a'i wanhau i 1 0 ml gyda methanol, ac yna {{}}}. 1. 0, 1.5, 2. {{2 {0}}, 2. 0, 2.5, 3. {{{3 {0}}}, 3.5, 4.} {34}, 3. 7. {{4 0}}, 8. 0, 9. 0, 1 0. {{5 {{0}}, 11.}}}, 12. 13. 0, 14. {{6 {0}}, 15. 0, 16. 0, 17. 0, 18. 0}}, 19. 2 0. 0, 21. {{8 {0}}, 22. 0, 23. {0, 24. 0}, 25. 26. {0, 27. 0, 28. 0, 29. {{{1 {{{1 {{{1 {{{1 {{0 6}} 4}. 35.0, 36.0, 37.0, 38.0, 39.0, 40.0, 41.0, 42.0, 43.0, 44.0, 5 ml, yn hydoddi yn y cyfnod symudol ac yn gwneud hyd at 5 ml yn y drefn honno, ysgwyd yn dda.
Yn ôl yr amodau cromatograffig o dan "2.2.1", perfformiwyd dadansoddiad sampl, pennwyd yr arwynebedd brig, a chyfrifwyd hafaliad y llinell atchweliad gydag arwynebedd brig pob cydran fel yr ordeiniad (y) a chrynodiad màs y sylwedd cyfeirio fel yr abscissa (x): sildenafil: sildenafil 6}}, r=0. 9989, ystod linellol 0. 0525 ~ 1.05 ug; naphthol yw y=1 × 106x -3 184. 4, r=0. 9999, ystod linellol 0.0515 ~ 1.03 ug. Dangosodd y canlyniadau fod gan y sylweddau cyfeirio uchod linelloldeb da yn eu priod ystodau llinellol.

 

2.3. 2 Prawf manwl, sefydlogrwydd, ailadroddadwyedd ac adferiad

Cymerwch y datrysiad cyfeirio cymysg o dan "2.3.1" a'r sampl wag (capsiwl Huangjingbajitian, Luoyang Kangti biolegol, mae canlyniad y prawf yn negyddol) a pharatowch 6 datrysiad sampl sy'n cynnwys sildenafil a nardenafil yn gyfochrog yn ôl y dull o dan "2.1". Yn ôl yr amodau cromatograffig o dan "2.2.1", chwistrellwyd yr ateb cyfeirnod cymysg 6 gwaith yn barhaus er manwl gywirdeb; Chwistrellwyd un o'r datrysiadau sampl yn 0, 3, 6, 9, 12, a 24 awr ar gyfer sefydlogrwydd; Paratowyd 6 datrysiad sampl ochr yn ochr ar gyfer ailadroddadwyedd ac adferiad, a chwistrellwyd pob sampl unwaith. Penderfynwyd ar ardaloedd brig sildenafil a nardenafil, a chyfrifwyd yr adferiad a'i werth RSD. Canlyniadau Cyfraddau adfer cyfartalog sildenafil a nardenafil oedd 100. 16%, 100. 49%; Roedd y gwerthoedd RSD i gyd yn llai na 3% (n=6), gan nodi bod yr offeryn yn fanwl gywir, roedd yr hydoddiant sampl yn sefydlog o fewn 24 h, ac roedd gan y dull adferiad ac ailadroddadwyedd da.

 

2.3.3 Penderfyniad Cynnwys

Mae allsugno pob datrysiad sampl yn gywir, ei chwistrellu a'i ddadansoddi yn ôl yr amodau cromatograffig o dan "2.2.1", mesurwch 3 gwaith ar gyfer pob swp, cofnodwch yr ardal brig, a chyfrifwch y cynnwys. Mae'r canlyniadau'n dangos, ymhlith y 10 swp o samplau iechyd rhywiol, y canfuwyd bod 9 swp yn cynnwys y sildenafil cyffuriau cemegol gwaharddedig, ac roedd y dos ychwanegol yn amrywio'n fawr. Y gyfradd ganfod oedd 90%. Dangosir y canlyniadau yn Nhabl 1 a Ffigur 3.

 

Tabl 1 Canlyniadau Penderfynu Sylweddau Ychwanegwyd yn Anghyfreithlon mewn 10 Cynnyrch sy'n Corffori Rhyw (N=3)

 

Samplant	Wneuthurwr	Pwysau sampl	Cynnwys (mg/amser)
Detholiad Blodau Aur	Prifysgol Amaethyddol Gorllewin Tsieina	1 × 0.88 g	58.79 ± 1.03
Ymlid pryfed	Prifysgol Gwyddoniaeth a Thechnoleg Hong Kong	2 × 0.50 g	73.62 ± 0.21
Chamomile Almaeneg	Biolegol haiyun	2 × 0.50 g	22.47 ± 0.23
Gwlith yn gynnar yn y bore	Prifysgol Gwyddoniaeth a Thechnoleg Hong Kong	2 × 0.50 g	8.90 ± 0.03
Llyngyren	Cynefin UDA	2 × 0.50 g	61.83 ± 0.48
A. Niger	Prifysgol Amaethyddol Gorllewin Tsieina	2 × 0.50 g	45.20 ± 0.04
Edau Aur	Prifysgol Gwyddoniaeth a Thechnoleg Hong Kong	2 × 0.50 g	Heb ei ganfod

 

Ffig. 3 HPLC o 10 cynnyrch sy'n gwella rhyw

 

2.4 Sefydlu model ansoddol TLC-NIRS ar gyfer cyffuriau cemegol iechyd rhywiol

2.4.1 Casgliad Gwybodaeth Sbectrol

Yn ôl yr amodau o dan "2.2.3", casglwyd nirs y smotiau cyfeirio a nodwyd ar ôl eu datblygu ar blât haen denau TLC yn y drefn honno. Cyfeintiau sbot yr hydoddiant cyfeirio cymysg oedd 1, 2, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, a 50 μl, a chyfeintiau sbot yr hydoddiant sampl oedd 2, 5, a 10 μl, yn y drefn honno. Each reference spot of the mixed reference and sample with different spot volumes was collected 5 times, and the NIRs overlay diagram is shown in Figure 4. In the experiment, the spectra of the mixed reference with different spot volumes were selected as the calibration set, and the spectra of the samples with different spot volumes were selected as the verification set to ensure that the spectral information of the verification set was within the range of the spectral information of the calibration Gosod.

Ffig. 4 Sbectra NIｒ gwreiddiol o gyffuriau cemegol