Effeithiau Cistanche Deserticola Polysacarid ar Gelloedd Imiwnedd A Gweithgaredd Telomerase mewn Llygod sy'n Heneiddio

Zhang Hongquan, Li Yuan, Song Yuanyuan (Sefydliad Meddygaeth, Prifysgol Yangzhou, Yangzhou 225001, Jiangsu)

Haniaethol: Amcan Astudio effeithiau polysacarid Cistanche deserticola (PCD) ar gynnwys malondialdehyde (MDA), gweithgaredd telomerase, a swyddogaeth imiwnedd ym meinwe llygod heneiddio is-aciwt. Dulliau Cafodd y model heneiddio is-aciwt o lygod ei achosi gan D-galactos. Canfuwyd cynnwys MDA gan liwimetreg asid thiobarbitwrig; Canfuwyd gweithgaredd Telomerase gan PCR-ELISA; Mesurwyd yr adwaith amlhau lymffocyte gan y dull MTT; Mesurwyd swyddogaeth phagocytic macrophages peritoneol llygoden trwy brawf coch niwtral; Cafodd cynnwys IL-2 mewn serwm ei bennu gan assay imiwnosorbent sy'n gysylltiedig ag ensymau (ELISA). Canlyniadau Cynyddodd cynnwys MDA yn y galon, yr afu a'r ymennydd yn y grŵp model yn sylweddol, tra bod gweithgaredd telomerase, adwaith amlhau lymffocyt, ffagocytosis macrophage peritoneol, a chynnwys IL-2 mewn gwaed ymylol wedi gostwng yn sylweddol. Ar ôl gweinyddu PCD, gostyngwyd y cynnwys MDA yn y galon, yr afu, ac ymennydd llygod yn sylweddol, ac mae gweithgaredd telomerase ym meinwe'r galon a'r ymennydd, adwaith amlhau lymffocyt, ffagocytosis macrophage peritoneol a chynnwys IL-2 yn cynyddwyd gwaed ymylol yn sylweddol. Casgliad Gall PCD wrthwynebu difrod radical rhydd, gwella gweithgaredd telomerase ym meinwe'r galon a'r ymennydd a swyddogaeth imiwnedd llygod sy'n heneiddio, a gwella'r heneiddio a achosir gan D-galactos.

Geiriau allweddol: Cistanche deserticolapolysacarid; Malondialdehyde; Telomerase;Imiwneiddio; byddwch yn henaint

Atodiad Cistanche yn fy ymyl—Gwella imiwnedd

Cliciwch yma i weld cynhyrchion Gwella Imiwnedd Cistanche

【Ask for more】 Email: xue122522@foxmail.com /  Whats App:  0086 18599088692 /  Wechat:  18599088692

Dosbarthiad Llyfrgell Tsieineaidd Rhif.: R284 Cod Dogfen: A Erthygl Rhif: 1001-2494 (2011) 14-1081-05

Mae Cistanche deserticola yn goesyn cigog sych gyda dail ffosfforws o Cistanche deserticola, sydd â'r swyddogaeth o toneiddio'r afu a'r arennau a bod o fudd i'r hanfod a qi [1]. Mae polysacarid Cistanche deserticola yn polysacarid crai wedi'i wahanu oddi wrth Cistanche deserticola, sy'n cael ei dynnu o amhureddau moleciwlaidd bach sy'n hydoddi mewn dŵr, wedi'i ddadproteinio gan ddull Sevag, a'i drin dro ar ôl tro â dŵr ac alcohol i gael PCD [2]. Mae'r arbrawf hwn yn dechrau gyda theori imiwnedd a thelomere theori heneiddio ac yn mabwysiadu model llygoden heneiddio D-galactose i arsylwi effaith PCD ar gynnwys malondialdehyde (MDA) a gweithgaredd telomerase yn y galon, yr afu a'r ymennydd, ac archwilio'n rhagarweiniol. ei fecanwaith.

1.Deunydd a dulliau

1.1 Anifeiliaid, cyffuriau, adweithyddion ac offer

3-llygod ICR mis oed, gradd lân, 26-32g, hanner gwryw a hanner benywaidd [Canolfan Anifeiliaid Arbrofol Prifysgol Yangzhou, Rhif Tystysgrif Ansawdd Anifeiliaid Arbrofol: SCXK (Su) 2002-0009] . Tymheredd yr ystafell yw 20 ~ 25 gradd, y goleuadau naturiol, ac mae'r amgylchedd yn addas i'w fwydo am wythnos cyn yr arbrawf. Darperir PCD gan Sefydliad Ymchwil Bywyd Gwyllt Nanjing a'i hydoddi mewn dŵr distyll; D-galactos (D-Gal, Ffatri Ail Adweithydd Shanghai); Pecyn prawf gweithgaredd Telomerase (Cwmni MB, UDA); Pecyn canfod MDA a phecyn llygoden IL-2 ELISA (Sefydliad Ymchwil Peirianneg Biolegol Nanjing Jiancheng). Marciwr ensym ELX800UV (BIO-TEK, UDA); homogenizer meinwe PT-MR3100D (Polytron, y Swistir); Centrifuge rhewi bwrdd gwaith MODEL550 (Eppendorf, yr Almaen); Graddfa electronig BP110S (Sartorius, yr Almaen).

Cistanche deserticola—Gwella imiwnedd

1.2 Grwpio anifeiliaid, paratoi modelau, a gweinyddu

Paratowyd y model llygoden sy'n heneiddio yn ôl y dull yn y llenyddiaeth [3]. Paratowyd 10 y cant D-Gal â dŵr i'w chwistrellu, a chwistrellwyd 10 mL · kg-1 yn isgroenol i wddf a chefn llygod unwaith y dydd am 6 wythnos. Rhannwyd y llygod ar hap yn bum grŵp: y grŵp rheoli arferol, y grŵp rheoli model, grwpiau PCD25, 50 a 100mg · kg-1 (grwpiau PL, PM, PH), gyda 12 llygod ym mhob grŵp. Sefydlwyd y llygod yn y grŵp model a'r grŵp gweinyddu PCD yn unol â'r gyfraith, a rhoddwyd PCD25, 50, a 100 mg · kg-1 gyda chyfaint o 20 mL · kg-1 trwy gavage bob dydd. Chwistrellwyd llygod y grŵp rheoli arferol â'r un cyfaint o ddŵr i'w chwistrellu a rhoddwyd yr un cyfaint o halwynog arferol trwy lif.

1.3 Pennu cynnwys MDA a gweithgaredd telomerase

24 awr ar ôl y weinyddiaeth ddiwethaf, tynnwyd pelen y llygad a chymerwyd gwaed, lladdwyd y llygod, tynnwyd y galon, yr afu a'r ymennydd yn gyflym, a pherfformiwyd homogenad meinwe ffres o dan dymheredd isel, centrifugation, a chymerwyd y supernatant. Pennwyd cynnwys MDA gan liwimetreg asid thiobarbitwrig. Canfuwyd y gweithgaredd telomerase gan PCR-ELISA. Cynhaliwyd y camau gweithredu yn unol â'r cyfarwyddiadau ar y pecyn. Mesurwyd y gwerth A ar 450nm o farciwr yr ensym.

1.4 Pennu adwaith amlhau lymffocytau [4]

Tynnwch ddueg y llygoden yn aseptigol yn y fainc waith uwch-lân, paratowch ataliad cell dueg y llygoden, ac addaswch ddwysedd y gell i 1 × 109 · L-1, cafodd concanavalin A (ConA) ei feithrin fel symbylydd in vitro ar gyfer 48 awr, a mesurwyd yr adwaith amlhau celloedd trwy ddull MTT. Mesurwyd gwerth A ar y donfedd o 570 nm a fesurwyd gan y cysylltydd ensym, a mynegwyd y canlyniad fel gwerth cymedrig tri thwll cymhleth A.

1.5 Penderfynu swyddogaeth ffagocytig macroffagau peritoneol trwy'r dull coch niwtral

Buddion gwrywaidd Cistanche—Improfi imiwnedd

24 awr ar ôl y weinyddiaeth ddiwethaf, cafodd y llygod eu dihysbyddu a'u lladd. Mae hylif peritoneol y llygod wedi casglu'n aseptigol ac wedi'i centrifugio ar 1000r · min-1, golchwyd y celloedd â hydoddiant Hanks dair gwaith, a pharatowyd yr ataliad cell gyda datrysiad diwylliant 1640. Cymerwch 3mL a'i roi mewn dysgl diwylliant, diwylliant ar 37 gradd a 5 y cant CO2 am 2h. Mae Macrophages yn cadw at wyneb y cynhwysydd, yn chwythu a sugno gyda hydoddiant Hanks 4 gradd, yn casglu celloedd ymlynol, yn cyfrif ar y plât cyfrif celloedd gwaed, ac yn addasu dwysedd y gell i 2 × 109 o gelloedd · L-1, wedi'i feithrin yn deorydd 37 gradd am 2 awr, taflwyd y celloedd supernatant ac anlynol. Cymerwch macroffagau ymlynol, ychwanegwch 0.1 y cant saline ffisiolegol coch niwtral, parhewch i'r diwylliant ar 37 gradd am 30 munud, taflu coch niwtral, golchi macroffagau dro ar ôl tro gyda PBS ar 37 gradd, gwanhau â 50 y cant asid asetig a 50 y cant ethanol yn ôl cyfaint, a mesur gwerth A.

1.6 Pennu lefel IL-2 serwm

Cymryd gwaed o belen y llygad, centrifuge (3000r · min-1, 10mun) i wahanu'r serwm, a chanfod cynnwys IL-2 yn y serwm trwy assay imiwn-amsugnol sy'n gysylltiedig ag ensymau (ELISA). Mae'r llawdriniaeth benodol yn unol â chyfarwyddiadau'r pecyn. Mae lefel yr IL-2 yn y serwm llygod ym mhob grŵp yn cael ei ganfod ar 450nm o farciwr yr ensym.

1.7 Dadansoddiad ystadegol

Proseswyd y data gyda SPSS11.0, a mynegwyd y data mesur gyda gwyriad safonol cymedrig ± (x ± s), gan ddefnyddio ANOVA unffordd a phrawf-t rhyng-grŵp.

ginseng anialwch -Improfi imiwnedd

2.Canlyniadau

2.1 Effaith PCD ar gynnwys MDA yng nghalon, ymennydd ac afu llygod sy'n heneiddio

Roedd yn sylweddol uwch nag un y grŵp rheoli arferol (P<0.01). After intragastric administration of PCD25, 50 and 100 mg · kg-1, the content of MDA in the heart, brain, and liver of mice decreased in a dose-dependent manner compared with the model group (P<0.01, P<0.05), and the content of MDA in the high-dose group was close to the normal level (Table 1).

2.2 Effaith PCD ar weithgaredd telomerase ar feinweoedd y galon, yr ymennydd a'r iau oherwydd llygod sy'n heneiddio

Compared with the normal control group, the telomerase activity of the heart, liver, and brain tissue in the model group was significantly reduced. After intragastric administration of PCD, the activity of telomerase in heart and brain tissue was increased in a dose-dependent manner, and the level of the high dose group was close to that of the normal control group. There was no significant effect on telomerase activity in the liver tissue of aging mice (P>0.05) (Tabl 2). 2.3 Roedd effeithiau PCD ar adwaith amlhau lymffosyt, ffagocytosis macrophage peritoneol, a chynnwys serwm IL-2 mewn llygod oedrannus yn sylweddol is na'r rhai yn y grŵp rheoli arferol (P<0.01). After intragastric administration of PCD, the lymphocyte proliferation reaction, peritoneal macrophage phagocytosis and serum IL-2 content of aging mice increased in dose dependence, which was significantly different from the model group (P<0.01, P<0.05) (Table 3).

3.Trafodaeth

Mae union fecanwaith heneiddio yn dal yn aneglur. Dros y blynyddoedd, mae ysgolheigion gartref a thramor wedi cyflwyno dwsinau o ddamcaniaethau heneiddio, megis y ddamcaniaeth radical rhydd. Mae ocsigen moleciwlaidd yn angenrheidiol ar gyfer goroesiad organebau, ac mae maetholion mewn organebau yn rhyddhau egni trwy ocsidiad. Mae cyflwr ocsideiddiol celloedd yn chwarae rhan bwysig mewn heneiddio, tiwmor, a datblygiad. Fodd bynnag, bydd radicalau rhydd yn cael eu ffurfio mewn rhai prosesau ocsideiddio, ac mae heneiddio'n gysylltiedig yn agos ag adweithiau radical rhydd annormal. Pan fydd radicalau rhydd yn cronni gormod yn y corff, bydd yn achosi perocsidiad asidau brasterog annirlawn yn y corff, yn enwedig yn y bilen biolegol, gan arwain at newidiadau yn strwythur y gellbilen, difrod i swyddogaeth y bilen, a chynhyrchu MDA a lipofuscin (LPF) [5].

Mae MDA yn asiant trawsgysylltu hynod weithgar. Gall groesgysylltu'n gofalent â phroteinau, ensymau, ac asidau amino rhydd ar asidau niwclëig i ffurfio basau Schiff. Oherwydd ei fondiau annormal, ni ellir ei dreulio gan hydrolase ar ôl cael ei lyncu gan lysosomau, a gall gasglu mewn celloedd i ffurfio lipofuscin, a all wenwyno celloedd, rhwystro trosglwyddiad sylweddau a negeseuon mewn celloedd, ac arwain at gyflymiad niwclear. heneiddio celloedd a marwolaeth.

Felly, gellir defnyddio MDA fel dangosydd dibynadwy o heneiddio organau a chelloedd. Mae'r ddamcaniaeth telomere yn credu bod hyd y cromosom (telomere) ar frig y cromosom yn perthyn yn agos i heneiddio a hyd oes. Mae hyd y telomere tua 2 i 15 kb. Oherwydd y broblem o ddyblygu terfynol, bydd y DNA telomere yn colli 50 i 200 bp bob tro y caiff y DNA ei gopïo. Gyda'r cynnydd yn nifer y rhaniadau celloedd, bydd y DNA telomere yn byrhau'n raddol. Pan gaiff ei fyrhau i derfyn penodol, ni fydd yn cynnal sefydlogrwydd staenio, a bydd y gell yn colli'r gallu i rannu ac amlhau a marw o heneiddio, Mae'r byrhau hwn yn arwydd o heneiddio [6]. Mae'r gell yn mynd i mewn i'r cam methiant ymledol, ac mae'r gell yn parhau i oroesi ond ni all rannu ac amlhau [7]. Felly, gelwir telomeres hefyd yn "gloc biolegol" celloedd, ac mae heneiddio celloedd yn pennu heneiddio'r corff cyfan. Canfu ymchwil Bryma fod hyd y telomere yn gysylltiedig â gweithgaredd telomerase. Po uchaf yw gweithgaredd telomerase, po hiraf yw'r telomere, y gorau yw sefydlogrwydd a chywirdeb cromosomau, y mwyaf o amserau rhannu celloedd, a'r hiraf yw'r oes.

Ychwanegiad Cistanche yn fy ymyl - Gwella imiwnedd

Mae'r system imiwnedd, fel system gyflawn ac ymreolaethol, yn chwarae rhan bwysig wrth gynnal a chadw ac addasu gweithgareddau bywyd, a dirywiad swyddogaeth imiwnedd yw nodwedd amlycaf heneiddio. Gall camweithrediad imiwnedd gyflymu heneiddio'r corff[8]. Roedd canlyniadau'r arbrawf hwn yn dangos hynnyGallai PCD leihau cynnwys MDA yn sylweddol ym meinweoedd y galon, yr ymennydd a'r afu, cynyddu'r gweithgaredd telomerase ym meinweoedd y galon a'r ymennydd o lygod model sy'n heneiddio, yn ogystal ag adwaith amlhau lymffocyt, ffagocytosis macrophage peritoneol a chynnwys IL{{0 }} mewn gwaed ymylol llygod sy'n heneiddio. Gellir dod i'r casgliad bod gan PCD rôl dda wrth elyniaethu difrod radical rhydd, gall hyrwyddo amlhau lymffocytau, gwella imiwnedd cellog amhenodol a swyddogaeth rheoleiddio imiwnedd y corff, a chwarae rhan wrth ohirio heneiddio'r corff.

CYFEIRIADAU

[1] MAZG.Gwahanol o Cistanche sinensis wedi'i Brosesu G.Beck a Herba Cistanche gan olion bysedd HPLCF[ J] .ChinPharmJ, 2011, 46(12):899-902.

[2] SHIHF, LINAP, ZHANGHQ,etal.Effaith amlsaccgridau Cistanche deserticola YCMa ar syndromratau diffyg dueg[J] .Chin Wild Plant Res, 2000, 19(6):49-51.

[3] XUSY, BIANRL, CHENX.Methodoldgy of Pharmacological Experiments)[ M] .Vol3.Beijing:People's Medical Publishing House, 2002:1465-1466.

[4] LIUYQ, SUW, WUJJ, etal.Effaith echdynnu coccineum cynomorium ar swyddogaeth imiwnedd a metaboledd radical rhydd llygod sy'n heneiddio[ J] .JCell MolI mmunol=, 2009, 25(1):1155-1157 .

[5] YANGHJ, WANGZL, XUESH.Cynnydd mewn astudiaethau o fecanwaith heneiddio[ J] .Chin J Control Endem Dis=, 2008, 23(1):35-37.

[6] YANGJ, ZHANXH, SUNY, etal.Effaith sijunzidecoction ar gynnwys malondialdehyde a thelomeraseactivity yn y galon, yr afu a'r ymennydd llygod model heneiddio a achosir gan waddodD-galactos[J] .ChinJ Integr Tradit Chin West Med=, 2005 (6):531-533.

[7] ZHANGXH, ZHANGJN.Telomere, telomerase, heneiddio a chanser[ J] .IntJGenetics=, 2007, 30(1):69-71.

[8] SONGSX, LVZJ. Cynnydd ymchwil i heneiddedd celloedd T,B a'i hecanwaith mo lecularm[ J] .JCell MolI mmunol, 2002, 18(3):306-308.