Gwerthusiad O Weithgarwch Antimelanogenig A Mecanwaith Galangin yn Silico Ac yn Vivo
Mar 29, 2022
Cyswllt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-bost:audrey.hu@wecistanche.com
Ki Wung Chung, Hyeong Oh Jeong, Eun Kyeong Lee, Su Jeong Kim, Pusoon Chun, bHae Young Chung,*, a Hyung Ryong Moon*, a
Gall pigmentiad annormal oherwydd synthesis melanin gormodol arwain at broblemau difrifol fel brychni haul, smotiau oedran, a melanoma. Mae atalyddion tyrosinase wedi bod yn darged diddorol ar gyfer trin hyperpigmentation oherwydd tyrosinase yw'r ensym sy'n cyfyngu ar gyfraddau mewn synthesis melanin. Arweiniodd y sgrinio ar gyfer atalyddion tyrosinase cryf at ddarganfod y flavonoidgalanin, a ddangosodd effeithiau ataliol nodedig ar tyrosinase madarch. Roedd gwerth IC50 galanin (3.55±0.39 µM) yn is na gwerth asid kojic (48.55 ±1.79 µM), a ddefnyddiwyd fel rheolydd positif. Mewn tocio silico dangosodd efelychiad ac astudiaethau mecanistig fod galanin yn rhyngweithio â safleoedd catalytig tyrosinase ac yn cystadlu â thyrosin. Mewn celloedd melanoma B16F10 a ysgogwyd â hormon ysgogol -melanocyte, roedd galanin yn atal gweithgaredd tyrosinase yn ogystal â chynhyrchu melanin. Er bod dognau uchel ogalaninyn sytotocsig, ni welwyd unrhyw effeithiau sytotocsig ar ddognau isel. Yn ogystal, gwerthuswyd effeithiolrwydd in vivo galanin mewn llygod di-flew gyda melanin HRM2. Fel y'i mesurwyd gan y mynegai gwynnu croen a staenio melanin, cynyddodd amlygiad UVB dro ar ôl tro synthesis melanin croen. Fe wnaeth cymhwyso Galangin leihau melanogenesis yn sylweddol a achosir gan amlygiad UVB. Gyda'i gilydd, mae ein data yn dangos hynnygalaninyn dangos gweithgaredd atal tyrosinase cryf, sy'n awgrymu y gallai fod yn asiant gwynu croen effeithiol.
Geiriau allweddolgalanin; melanogenesis; pigmentiad; tyrosinase
Mae Galangin, cyfansoddyn flavonoid, i'w gael mewn crynodiadau uchel yn Alpinia officinarum a Helichrysum) Mae astudiaethau blaenorol wedi dangos bod gan galangin amrywiol weithgareddau ffarmacolegol, yn amddiffyn planhigion rhag ymbelydredd UV, pathogenau, a llysysyddion, ac yn cyflawni gweithgareddau gwrth-bacteriol a gwrthfeirysol.2– 4) Fodd bynnag, mae ganddo hefyd briodweddau gwrthocsidiol, y gellir eu priodoli i'w effeithiau buddiol.5) Mae Galangin hefyd yn cael effeithiau gwrthganser trwy atal twf y celloedd canser.6,7)
Pigment biolegol yw melanin a geir yn y rhan fwyaf o organebau. Mewn bioleg croen, cynhyrchir melanin trwy ocsidiad tyrosin asid amino. Mewn ffisioleg arferol, mae melanin yn atal anaf i'r croen trwy amsugno ymbelydredd UV niweidiol.8) Dosberthir y melanin wedi'i syntheseiddio mewn melanocytes croen i keratinocytes, lle mae'n cymryd rhan yn bennaf mewn amddiffyniad rhag arbelydru UV niweidiol.8) Fodd bynnag, er gwaethaf rhai manteision, melanin gormodol gall hefyd achosi problemau esthetig a chlefydau croen.9) Mae pigmentiadau annormal, megis brychni haul, smotiau oedran, melasma, a lentigines henaint, yn achosi problemau difrifol i ffisioleg croen arferol.10,11) Felly, mae modiwleiddio melanogenesis yn strategaeth bwysig ar gyfer trin pigmentiad croen gormodol. Mae nifer o ensymau yn cymryd rhan ym mhrosesau melanogenesis. Ymhlith yr ensymau amrywiol hyn, tyrosinase, sy'n cataleiddio prosesau ocsideiddio L-tyrosine i 3,4-dihydroxyphenylalanine (L-DOPA) a L-DOPA i dopaquinone, yw'r pwysicaf.12) Mae'r prosesau hyn a gyfryngir gan tyrosinase yn prosesau cyfyngu ar gyfraddau. O dan amodau annormal, mae gorfywiogi tyrosinase wedi'i ganfod gyda mwy o gynhyrchu melanin.13) Oherwydd ei rôl allweddol mewn melanogenesis, mae tyrosinase yn darged deniadol ar gyfer asiant depigmenting.14) Felly, mae atalyddion tyrosinase amrywiol rhag digwydd yn naturiol a synthetig. ffynonellau wedi'u datblygu. Mae llawer o atalyddion tyrosinase, gan gynnwys hydroxyquinone, asid kojic, ac arbutin, wedi'u defnyddio o'r blaen yn y diwydiannau meddyginiaeth a chosmetig. Er bod nifer o atalyddion tyrosinase wedi'u datblygu'n fasnachol, mae sgîl-effeithiau sytotocsig wedi dod i'r amlwg.12) Felly, mae angen asiantau gwynnu croen effeithiol a diogel.
Pwrpas yr astudiaeth hon oedd nodweddu galangin fel atalydd tyrosinase cryf gan ddefnyddio amrywiol ddulliau arbrofol. Wrth chwilio am atalyddion tyrosinase o ffynonellau naturiol, canfuom fod galangin yn lleihau gweithgaredd tyrosinase yn sylweddol gyda nerth uchel. Oherwydd bod effeithiau ataliol galanin ar tyrosinase eisoes wedi'u hadrodd, fe wnaethom ganolbwyntio ar y mecanweithiau ataliol a'r nerth mewn arbrofion celloedd ac anifeiliaid.1) Gan ddefnyddio arbrofion mewn silico, in vitro ac in vivo amrywiol, nododd ein data y gallai galangin fod yn asiant gwynu croen pwerus ar gyfer trin pigmentiad croen.
manteision iechyd cistanche tubolosa:croen-gwyno
DEUNYDDIAU A DULLIAU
Defnyddiau
Prynwyd galangin, asid kojic, tyrosinase madarch, L-tyrosine, hormon sy'n ysgogi melanocyte (-MSH), ac adweithyddion cemegol eraill gan Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, UDA).
Mesur Effaith Ataliol Tyrosinase a Mecanwaith Ataliol mewn System Ddi-gell
Er mwyn gwerthuso effeithiolrwydd ataliol a mecanweithiau galangin ar tyrosinase, defnyddiwyd tyrosinase madarch fel y disgrifiwyd yn flaenorol. Yn gryno, diddymwyd 1000 o unedau tyrosinase madarch mewn 20 µL halwynog wedi'i glustogi ffosffad (PBS) a'i ychwanegu at 170 µL o'r cymysgedd assay, a oedd yn cynnwys 1 mM L-tyrosine, byffer ffosffad 50 mM (pH 6.5), a 10 µL o y deunydd prawf. Deorwyd y gymysgedd ar dymheredd ystafell (25 gradd) am 30 munud. Mesurwyd swm y dopacrom a gynhyrchwyd yn sbectroffotometrig ar 492 nm (OD492) mewn darllenydd microplate. Cyfrifwyd yr IC50 o ailadrodd yr arbrawf ar ddosau galangin gwahanol. Er mwyn pennu mecanwaith ataliol galanin, perfformiwyd assay cinetig tyrosinase. Defnyddiwyd crynodiadau amrywiol o L-tyrosine (1, 2, 4, ac 8 mM) ar gyfer y assay ataliad. Ar ôl eu harchwilio, troswyd pob gwerth yn cilyddol yn ôl lleiniau Lineweaver-Burk. Dangosodd y canlyniadau y plot o 1/V yn erbyn 1/[S]. Defnyddiwyd croestoriad pob llain i bennu'r mecanwaith ataliol.
Efelychu Tocio
Ar gyfer yr efelychiad docio protein-ligand mewn silico, fe wnaethom ddefnyddio AutoDock4.2. Cafwyd rhwymiad llwyddiannus rhwng y protein a'r ligand. Daeth y strwythur tri dimensiwn (3D) o tyrosinase a ddefnyddiwyd yn y strwythur grisial o Agaricus bisporus (PDB ID: 2Y9X) a defnyddiwyd safle rhwymo tyrosin rhagnodedig fel y boced docio.15) Perfformiwyd yr efelychiadau tocio rhwng tyrosinase a galangin / asid kojic. Paratowyd y cyfansoddion ar gyfer efelychu tocio trwy'r camau canlynol: (1) Troswyd strwythurau 2D yn strwythurau 3D; (2) cyfrifwyd taliadau, a (3) ychwanegwyd atomau hydrogen gan ddefnyddio rhaglen ChemOffice. Cafodd y rhagfynegiad o weddillion bondio hydrogen posibl rhwng y cyfansoddion a tyrosinase a chynhyrchu ffarmacofforau ei gyfrifo gan LigandScout 3.0.
System Diwylliant Cell
Defnyddiwyd celloedd melanoma B16F10 Murine a gafwyd o'r Casgliad Diwylliant Math Americanaidd (Rockville, MD, UDA) yn gyntaf i werthuso effeithiau galanin ar ataliad tyrosinase. Cafodd y celloedd eu meithrin yng nghyfrwng addasedig Eagle's Dulbecco (DMEM; WELGENE Inc., Korea, LM001-05) wedi'i ategu gan serwm buchol ffetws o 10 y cant (FBS; WELGENE Inc., S101-01) a phenisilin/streptomycin (100 IU/50 µg/mL; WELGENE Inc., LS202-02) ar 37 gradd mewn awyrgylch llaith sy'n cynnwys 5 y cant o CO2 yn yr aer. Er mwyn gwerthuso effeithiau galangin ar hyfywedd celloedd, cynhaliwyd assay hyfywedd cell gan ddefnyddio pecyn sydd ar gael yn fasnachol (EZ-1000, Dogen Bio, Korea). Yn gryno, cafodd y celloedd eu meithrin mewn 96-blatiau ffynnon a'u trin â chrynodiadau gwahanol o galangin. Ar ôl yr amser a nodwyd, darllenwyd yr amsugnedd ar 450 nm trwy ddefnyddio darllenydd microplate. Perfformiwyd yr holl arbrofion cell o leiaf dair gwaith i sicrhau atgynhyrchu.
Gweithgaredd Tyrosinase
Archwiliwyd gweithgaredd tyrosinase mewn celloedd B16F1{10 trwy fesur cyfradd ocsidiad L-DOPA. Cafodd y celloedd eu platio mewn dysglau 60π-ffynnon, eu deor ym mhresenoldeb neu absenoldeb 1 µM -MSH, ac yna eu trin am 24 h gyda galangin 5 a 10 µM. Defnyddiwyd triniaeth ag asid kojic fel rheolaeth gadarnhaol. Cafodd y celloedd eu rhoi mewn 500 µL o glustogfa sodiwm ffosffad 50 mM (pH 6.8) yn cynnwys 25 µL 1 y cant Triton X-100 a 25 µL 0.1 mM fflworid ffenylmethylsulfonyl ac yna wedi'u rhewi ar −80 gradd am 30 munud. Ar ôl dadmer a chymysgu, cafodd y lysates cellog eu hegluro trwy allgyrchu ar 12000 × g am 30 munud ar 4 gradd. Gosodwyd y supernatants (80 µL) mewn plât ffynnon 96-, ychwanegwyd 20 µL L-DOPA (2 mg/mL), a darllenwyd yr amsugnedd ar 492 nm bob 10 munud am 1 h ar 37 gradd gan ddefnyddio darllenydd plât.
Dyfyniad Cistanche: yn atal mynegiant tyrosinase
Cynnwys Melanin
Yn yr astudiaeth gyfredol, defnyddiwyd y cynnwys melanin fel mynegai melanogenesis. Yn gryno, cafodd celloedd B16 eu platio mewn dysgl 60π a'u deor ym mhresenoldeb neu absenoldeb 1 µM -MSH. Yna cafodd y celloedd eu deor am 24 awr gyda neu heb galangin ar 5 a 10 µM. Defnyddiwyd y driniaeth ag asid kojic fel rheolaeth gadarnhaol. Ar ôl dwy olchi gyda PBS, toddwyd y samplau mewn 500 µL 1 NNaOH, eu deor ar 60 gradd am 1 h, a'u cymysgu i hydoddi'r melanin. Mesurwyd yr amsugnedd ar 405 nm trwy ddefnyddio darllenydd microplate.
Arbrofion Vivo
Aseswyd effeithiolrwydd debigmentu in vivo galangin mewn arbrofion anifeiliaid. Dyluniwyd yr astudiaethau anifeiliaid gan y Banc Heneiddio Meinwe, a gymeradwywyd gan Bwyllgor Gofal Anifeiliaid Sefydliadol Prifysgol Genedlaethol Pusan, ac fe'u perfformiwyd yn unol â'r canllawiau ar gyfer arbrofi anifeiliaid a gyhoeddwyd gan Brifysgol Genedlaethol Pusan. Cafwyd llygod di-flew HRM2 gwrywaidd chwe wythnos oed sy'n meddu ar lygod di-flew gan Hoshino Laboratory Animals (Yoshino, Saitama, Japan) a'u cadw dan amodau rheoledig (23±1 gradd , 55 y cant ±5 y cant lleithder, 12-h golau / cylch tywyll) gyda mynediad am ddim i ddŵr a diet labordy safonol. Ar ôl cyfnod acclimation o 1 wythnos, rhannwyd y llygod ar hap yn bedwar grŵp o chwe anifail. Paratowyd galangin (10 µM) ac asid kojic (50 µM) mewn hydoddiant a oedd yn cynnwys propylen glycol ac ethanol (3:7). Roedd hydoddiant toddedig (200 µL) neu gerbyd yn cael ei roi ar groen dorsal yr anifail unwaith y dydd. Cafodd yr anifeiliaid eu harbelydru gan UVB o CROSSLINKER (BEX-800, Ultra-Lum Inc., CA, UDA) ar 50 mJ/cm2 yn unol â'r amserlen arbrofion anifeiliaid. Mesurwyd lliwiau safleoedd y croen trwy ddefnyddio sbectrophotometer CR-10 (Konica Minolta Sensing, Inc., Sakai, Osaka, Japan) lle disgrifiwyd y lliwiau gan eu gwerthoedd L*, a*, a b* yn unol â system liw Comisiwn Rhyngwladol de L'Eclairage. Ar ôl i'r anifeiliaid gael eu haberthu, casglwyd y crwyn, eu gosod mewn paraformaldehyd 4 y cant dros nos ar dymheredd yr ystafell, a'u staenio ar gyfer melanin trwy ddefnyddio pecyn staenio Fontana-Masson gan American Master * Tech Scientific, Inc. (Lodi, CA, UDA) yn unol â chyfarwyddiadau'r gwneuthurwr. Yn gryno, cafodd crwyn wedi'u sleisio eu staenio â hydoddiant arian amonia am 60 munud ar 60 gradd, wedi'u deor mewn clorid aur 0.1 y cant, ac yna mewn 5 y cant o sodiwm thiosylffad.
Dadansoddiadau Ystadegol
Defnyddiwyd prawf-t y Myfyriwr i ddadansoddi gwahaniaethau rhwng dau grŵp a defnyddiwyd ANOVA i ddadansoddi gwahaniaethau rhwng grwpiau. Gwerthoedd t<0.05 were="" considered="" statistically="" significant.="" the="" analysis="" was="" performed="" using="" graphpad="" prism="" 5="" (graphpad="" software,="" la="" jolla,="" ca,="">
tubolosa cistanche
CANLYNIADAU
Yn Silico Efelychu Tocio o Galangin ar Tyrosinase
Mae galangin yn ffytocemegol sy'n digwydd yn naturiol ac mae'n cynnwys moiety flavonoid yn ei strwythur (Ffig. 1). I ddechrau, perfformiwyd efelychiad tocio rhwng tyrosinase madarch (strwythur trydyddol) a chyfansoddion (galangin, asid kojic, a tyrosine). Roedd y safle docio yr oedd galangin ac asid kojic yn rhwym iddo wedi'i bennu'n flaenorol fel safle gweithredol tyrosinase.15) Roedd yr efelychiad hwn yn llwyddiannus a chafwyd sgôr sylweddol. Yr egni rhwymol rhwng galangin a tyrosinase oedd −7.67 kcal/mol, fel y'i pennwyd gan ddadansoddiad gan ddefnyddio Autodock4.2. Yr egni rhwymol rhwng tyrosinase ac asid kojic (y rheolaeth bositif) oedd −4.09 kcal/mol, a −5.13 kcal/mol rhwng tyrosinase a'r swbstrad gwreiddiol, tyrosin (Tabl 1). Dangosodd y canlyniadau hyn fod galangin yn rhwymo tyrosinase gyda mwy o affinedd na'r rhyngweithiadau eraill. Yn seiliedig ar y canlyniadau efelychu tocio, buom yn chwilio'r rhyngweithiadau rhwng tyrosinase a chyfansoddion gan ddefnyddio'r rhaglen LigandScout. Gwelsom fod galangin yn rhyngweithio ag ASN-260, VAL-283, ALA-286, a PHE-292, tra bod asid kojic ond yn rhyngweithio ag ASN-260 a MET280 ( Ffig. 2, Tabl 1). Gall y rhyngweithiadau hyn felly fod yn benderfynyddion allweddol gweithgaredd atalyddion a chael effaith bwysig ar sgôr tocio.
Pennu Effeithiau a Mecanweithiau Gwrth-melanogenig mewn Tyrosinase Madarch
Yn seiliedig ar y canlyniadau mewn silicores a chanlyniadau eraill a adroddwyd yn flaenorol, gwnaethom werthuso'r effeithiau a'r mecanweithiau antimelanogenig gan ddefnyddio tyrosinase madarch. Pan gafodd ei brofi gyda'r tyrosinase madarch yn y system heb gelloedd, roedd effeithiolrwydd ataliol galangin yn gryfach nag asid kojic (Ffig. 3A). Yn ogystal, dos galangin-ddibynnol lleihau gweithgaredd tyrosinase (Ffig. 3 B). Cyfrifwyd gwerthoedd IC50 galangin ac asid kojic ac fe'u cyflwynir yn Nhabl 2. Roedd gwerth isel IC50 galangin (3.55±0.39 µM) yn dangos bod y nerth yn sylweddol uwch na'r hyn a geir ar gyfer kojic asid (48.55±1.79 µM). Gwerthuswyd mecanwaith ataliol galangin ymhellach gan ddefnyddio lleiniau dwyochrog Lineweaver-Burk. Defnyddiwyd crynodiadau amrywiol o L-tyrosine (1, 2, 4, ac 8 mM) a galangin (0, 7.5, a 15 µM) ar gyfer y assay ataliad. Mesurwyd y newidiadau amser-ddibynnol mewn amsugnedd a chafodd y canlyniadau dwyochrog eu plotio (Ffig. 3 C). Dangosodd y canlyniadau fod y plot o 1/V yn erbyn 1/[S] yn cynhyrchu tair llinell wahanol gyda llethrau gwahanol, a oedd yn croestorri ar yr un echelin fertigol. Wrth i grynodiad y cyfansoddyn gynyddu, cynyddodd gwerth Km, ond arhosodd gwerthoedd Vmax yr un fath, a oedd yn awgrymu bod galangin yn atalydd cystadleuol o rwymo tyrosinase. Roedd y data hyn yn cytuno â'r canlyniadau in silico yr oedd galangin yn eu rhwymo i, ac yn atal, safle gweithredol tyrosinase.
Ffig. 1. Adeileddau Galangin, Kojic Acid, a Tyrosine
Gwerthuso Gweithgaredd Debigmentu Galangin mewn Celloedd Melanoma Murine B16F10
Nesaf, gwerthuswyd gweithgaredd depigmenting galangin gan ddefnyddio celloedd melanoma murine B16F10. Yn gyntaf, profwyd effeithiau sytotocsig galangin ar gelloedd melanoma murine B16F10. Fel y dangosir yn Ffig. 4A, gostyngodd galangin hyfywedd celloedd yn sylweddol ar ddosau uwch na 25 µM. Felly, er mwyn osgoi sytowenwyndra, defnyddiwyd galangin 5 µM a 10 µM yn yr arbrofion i werthuso'r effeithiau antimelanogenig. Cafodd celloedd B16F10 eu trin â galangin ym mhresenoldeb 1 µM -MSH. Roedd cyfanswm y synthesis melanin a achosir gan driniaeth -MSH yn weladwy i'r llygad noeth ac yn dangos bod galangin yn atal synthesis melanin wedi'i ysgogi'n sylweddol -MSH (Ffig. 4 B). -Cynyddodd triniaeth MSH yn sylweddol weithgaredd tyrosinase a chynnwys melanin celloedd B16F10 (Ffig. 4C, D). Roedd triniaeth Galangin yn atal melanogenesis cellog, a ychwanegwyd gan -MSH mewn modd dos-ddibynnol (Ffig. 4C, D). Gyda'i gilydd, dangosodd y canlyniadau hyn y gallai galangin fod yn gyfrwng cryf ar gyfer atal melanogenesis trwy atal tyrosinase.
Tabl 1. Sgoriau Tocio a Phrif Weddillion Cyfansoddion Rhyngweithiol
Effeithiau Galangin ar y Pigmentation Croen yn Vivo
Archwiliwyd effeithiau ataliol galangin wedyn mewn llygod di-flew â melanin a gafodd eu trin fel y disgrifir gan yr atodlen yn Ffig. 5A. Mesurwyd lliwiau safleoedd y croen yn gywir trwy ddefnyddio sbectroffotomedr. Arweiniodd amlygiad UVB llygod at ostyngiad yn y gwerth L*, a oedd yn gynrychioliadol o bigmentiad (Ffig. 5B). Roedd y gostyngiadau a achosir gan UVB mewn gwerth L * wedi'u rhwystro'n sylweddol yn yr anifeiliaid a gafodd eu trin â galanin o'u cymharu â'r rhai yn yr anifeiliaid rheoli a gafodd eu trin â cherbyd, a ddangosodd effeithiolrwydd depigmenting cryf galanin (Ffig. 5 B). Mae'r gwerth ΔL * hefyd yn dangos y nerth o galangin yn ystod y cyfnodau arbrofol (Ffig. 5 C). Yn ogystal, roedd y lliwiau croen a ganfuwyd gan y llygad noeth ar ddiwrnod 14 hefyd yn nodi cryfder antimelanogenig galangin (Ffig. 5D). Fontana - Gwiriodd staenio mab Mas, sy'n amlygu melanin, effeithiau galangin. Dangosodd samplau croen anifeiliaid arbelydredig UVB gynnydd mewn smotiau melanin (Ffig. 5E). Mewn cytundeb â'r data rhifiadol o sbectrophotometreg, dangosodd anifeiliaid a gafodd eu trin â galanin ostyngiad yn y smotiau melanin wedi'u staenio o'u cymharu â'r anifeiliaid rheoli wedi'u harbelydru â UVB (Ffig. 5E). Gyda'i gilydd, roedd y data hyn yn awgrymu hynnygalaninyn asiant angiogenig amser effeithiol yn y model melanogenesis in vivo a achosir gan UVB.
Ffig. 2. Y Canlyniadau Efelychu Tocio mewn Silico rhwng Tyrosinase a'r Cyfansoddion Ymgeisydd
TRAFODAETH
Adroddwyd yn flaenorol bod galangin yn cael effeithiau biolegol amrywiol, gan gynnwys cytoprotection. Er bod gweithgaredd gwrth-tyrosinase galangin wedi'i astudio'n flaenorol, ni chafodd y mecanweithiau a'r effeithiolrwydd cywir mewn systemau meithrin celloedd eu disgrifio'n llwyr.1,16) Felly, ein nod oedd archwilio mecanweithiau nerth ac ataliol galangin. Gwerthuswyd effeithiolrwydd ataliol galangin i ddechrau trwy ddefnyddio efelychiad tocio mewn silico. Datgelodd yr efelychiadau tocio fod rhwymo galangin i safle gweithredol tyrosinase yn fwy sefydlog na rhai'r swbstrad gwreiddiol (tyrosine) neu asid kojic (rheolaeth gadarnhaol). Cadarnhawyd yr effeithiolrwydd ataliol a'r mecanweithiau hefyd gan ddefnyddio tyrosinase madarch. Yn olaf, gwerthuswyd effeithiolrwydd ataliol galangin yn erbyn melanogenesis mewn celloedd melanoma murine B16F10 a symbylwyd gan MSH. I grynhoi, nododd yr astudiaeth bresennol galanin fel cyfrwng cryf.
Mae efelychiad tocio cyfrifiadurol wedi'i sefydlu fel arf pwerus i sgrinio a gwerthuso asiantau ffarmacolegol newydd.17) Mae canlyniadau efelychu tocio yn darparu nid yn unig y safleoedd rhwymo ond hefyd yr affinedd rhwymol rhwng y cyfansoddyn a'r ensym, sy'n darparu gwybodaeth gychwynnol heb fod angen ffisegol. arbrofion.18) Er nad yw'r rhagfynegiadau bob amser yn gywir a bod angen arbrofion pellach, mae'r efelychiad tocio yn lleihau'r deunyddiau a'r adnoddau sydd eu hangen a gall hefyd gefnogi'r data arbrofol biolegol. Nododd ein hefelychu tocio cyfrifiannol y gallai galangin lynu'n gryfach wrth tyrosinase na thyrosin neu asid kojic. Ar ben hynny, roedd nifer y gweddillion rhyngweithiol rhwng galangin a tyrosinase yn fwy o gymharu â thyrosine neu asid kojic. Dilyswyd y data tocio cychwynnol ymhellach trwy ddefnyddio assay ensym tyrosinase, a ddangosodd fod yr IC50 o galangin yn is nag asid kojic; felly, roedd effeithiau ataliol galangin ar tyrosinase yn fwy grymus nag asid kojic.
Archwiliwyd mecanwaith ataliol galangin ar tyrosinase ymhellach trwy ddefnyddio tyrosinase madarch. Oherwydd bod y data efelychu tocio yn awgrymu bod galangin yn rhwymo i'r un safle gweithredol y mae tyrosinase yn rhwymo iddo, rhagwelwyd y gallai galangin fod yn atalydd cystadleuol tyrosinase. Datgelodd y canlyniadau arbrofol fod y galangin yn gystadleuol yn atal tyrosinase rhag rhwymo ei swbstrad gwreiddiol, tyrosine, a gadarnhaodd y canlyniadau efelychu tocio. Gyda'i gilydd, dangosodd y canlyniadau ddibynadwyedd yr efelychiad tocio cyfrifiannol a'i botensial ar gyfer atalyddion sgrinio.
Gwerthuswyd effeithiolrwydd galangin hefyd mewn celloedd melanoma murine B16F10. Dangosodd Galangin effeithiau sytotocsig sylweddol mewn celloedd B16F10 pan gaiff ei roi ar ddogn uchel. Roedd hyn yn gyson ag adroddiadau blaenorol am weithgarwch gwrthganser galangin mewn sawl llinell gell canser.19,20) Oherwydd yr effeithiau sytotocsig, roedd angen dewis yr amodau'n ofalus ar gyfer yr arbrofion i wirio effeithiau gwrth-felanogenig celloedd. Fodd bynnag, roedd gwerth IC50 galangin yn isel iawn pan gafodd ei brofi mewn system ddi-gell nad oedd yn dangos unrhyw effeithiau sytotocsig. Yn wir, roedd effeithiolrwydd galangin ar gyfer atal melanogenesis yn dderbyniol ar ddognau isel nad oeddent yn defnyddio sytowenwyndra. Roedd dosau isel o galangin i bob pwrpas yn lleihau'r cynnwys melanin, yn ogystal â'r gweithgaredd tyrosinase, yn y system diwylliant celloedd. Ynghyd â'r system ddi-gell,galanindangoswyd bod ganddo effaith ataliol gref ar tyrosinase yn y system meithrin celloedd.
Yn olaf, gwerthuswyd effaith antimelanogenig galangin trwy ddefnyddio llygoden heb wallt HRM2. Darparodd model llygoden heb wallt HRM2 sail ddefnyddiol ar gyfer arbrofion melanogenesis in vivo, gan y gall y llygoden gynhyrchu melanin, yn enwedig o dan straen amgylcheddol.21,22) Yn y model llygoden hwn, dangosodd galangin effaith antimelanogenig sylweddol ar synthesis melanin a achosir gan UVB. Hyd y gwyddom, dyma'r astudiaeth gyntaf i ddangos effeithiolrwydd antimelanogenig galangin gan ddefnyddio model melanogenesis in vivo. Mae'n bwysig sefydlu effeithiolrwydd in vivo oherwydd bod llawer o atalyddion melanogenesis eraill wedi methu â gweithredu in vivo oherwydd eu hanallu i groesi stratum corneum y croen. I grynhoi,galaninei nodi fel asiant angiogenig anifeiliaid cryf in vivo. Daethom i'r casgliad bod yr atalydd tyrosinase galangin yn cynnig ymgeisydd cyffur newydd ar gyfer trin anhwylderau hyperbigmentiad.
capsiwlau cistanche