Astudiaeth Arbrofol O Wahaniaeth Cyfeiriadol O Fôn-gelloedd Mesenchymal Esgyrn (BMSCs) I Osteoblastau Dan Arweiniad Serwm Sy'n Cynnwys Cistanche Deserticola

ZENG Jian chun, FAN Yue guang＊, LIU Jian ren, ZenG Yi rong, YI Chun zhi, YAN Liang. ＊

Ysbyty Cysylltiedig Cyntaf Prifysgol Meddygaeth Tsieineaidd Traddodiadol Guangzhou, Guangzhou 510405, Guangdong, Tsieina

Cyswllt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Cistancheyn gallu atalosteoporosisahyrwyddoasgwrncell twf

ABSENOLDEB

Amcan: Astudio gwahaniaethu cyfeiriadol BMSCs dan arweiniad DesertlivingCistanche（Herba Cistanches） sy'n bywiogi'r aren. Dulliau: Cafwyd BMSCs cynradd trwy ddiwylliant mêr esgyrn cyfan a'u his-feithrin i'r bedwaredd genhedlaeth trwy dreulio trypsin, ac yna eu brechu yn ddau blât chwe ffynnon ar 5 × 106 cell y mililitr, rhannwyd yr holl blatiau yn tri grŵp fel grŵp gwag, grŵp Dexamethasone (DXM) a grŵp Herba Cistanches, tri ffynnon ym mhob grŵp, newidiwyd y cyfrwng ar ddiwrnod 2. Newidiwyd y grŵp gwag gyda L－DMEM yn cynnwys 10％ FBS. Newidiwyd y grŵp DXM gyda chyfrwng sy'n cynnwys 10 mmol ／ L sodiwm glycerophosphate, 0．1 μmol ／ L DXM, a 50 mg ／ L fitamin C. Yr HerbaCistanchesnewidiwyd y grŵp gyda chyfrwng yn cynnwys 10％ serwm gwaed yn cynnwys Herba Cistanches a L－DMEM. Cafodd un o'r platiau chwe ffynnon ei staenio gan ffosffatase alcalïaidd (AKP) ar y degfed diwrnod, a'r llall wedi'i staenio gan alizarin Bordeaux ar yr ugeinfed diwrnod. Canlyniadau: Ar y degfed diwrnod roedd grŵp DXM a grŵp Herba Cistanches wedi'u staenio'n bositif gan ALKP; o'r 12fed dydd, roedd nodws calsiwm gwyn i'w weld ar wyneb y ffynhonnau; a staeniodd alizarin yn bositif erbyn yr ugeinfed diwrnod.

Casgliad: Y cyfrwng sy'n cynnwys HerbaCistanchesgall arwain BMSCs i wahaniaethu i osteoblast, sy'n addo gobaith ffafriol ar gyfer trin osteoporosis ac anghytundeb torri asgwrn.

GEIRIAU ALLWEDDOLCistancheanialwch; Mêr esgyrn; Bôn-gelloedd mesenchymal; Osteoblasts; Gwahaniaethu cell

Mae bôn-gelloedd mesenchymal (MSCs) yn fath o fôn-gelloedd plwripotent oedolion, a geir yn bennaf mewn mêr esgyrn, ond hefyd mewn meinweoedd extraosseous sy'n deillio o darddiad mesenchymal yn ystod y cyfnod embryonig, megis ffibroblastau croen, bôn-gelloedd adipose, celloedd lloeren cyhyrau ysgerbydol, a pibellau gwaed Celloedd endothelaidd ac yn y blaen. Mae MSCs mêr esgyrn (BM SCs) yn gydrannau o stroma mêr esgyrn. Ar ôl cael eu hynysu a'u diwyllio in vitro, o dan rai amodau cymell, mae ganddynt y gallu i wahaniaethu i osteoblastau, chondrocytes, celloedd nerfol, adipocytes, cardiomyocytes, ac ati. Prif ffynonellau celloedd hadau mewn peirianneg meinwe esgyrn yw osteoblastau a BMSCs. Er bod gan osteoblastau weithgaredd osteogenig da, mae ganddynt ffynonellau cyfyngedig, yn anodd eu gwahanu a'u cael mewn symiau mawr, ac nid oes ganddynt ddigon o botensial ar gyfer ehangu ar raddfa fawr mewn vitro, sy'n anodd diwallu anghenion cymwysiadau clinigol mewn peirianneg meinwe esgyrn. Mae gan BMSCs nid yn unig botensial gwahaniaethu osteoblast da ond hefyd botensial twf uchel. Gall gweithgaredd esgyrn, potensial amlhau cryf, a ffynhonnell gyfleus fodloni peirianneg meinwe hunanlogaidd, a dod yn ffocws ymchwil.

Mae meddygaeth Tsieineaidd yn credu bod yr aren yn rheoli'r esgyrn ac yn cynhyrchu mêr. Mae astudiaethau ffarmacolegol modern wedi dangos bod gan gyffuriau sy'n tonyddu arennau raddau amrywiol o gyffro i'r system pituitary-adrenal-gonadal, a'u bod yn perthyn yn agos i metaboledd esgyrn. Mae estrogen yn cael yr effaith o wella osteogenesis.

Mae meddygaeth Tsieineaidd yn credu bod yr aren yn rheoli'r esgyrn ac yn cynhyrchu mêr. Mae astudiaethau ffarmacolegol modern wedi dangos bod gan gyffuriau sy'n tonyddu arennau raddau amrywiol o gyffro i'r system pituitary-adrenal-gonadal, a'u bod yn perthyn yn agos i metaboledd esgyrn. Gall estrogen wella ffurfiant esgyrn, a gall androgen hyrwyddo synthesis protein, hyrwyddo cynnydd matrics esgyrn, a dyddodiad calsiwm a ffosfforws. effaith.Cistanches(HerbaCistanches) yn cynnwys cyfanswm glycosidau alcohol phenethyl, glycosidau ergot, a betaine i gyd yn cael effeithiau tebyg i androgen. Bwriad yr arbrawf hwn yw astudio effaith y feddyginiaeth Tsieineaidd draddodiadol sy'n tonhau'r arennauCistanche-yn cynnwys serwm ar wahaniaethu BMSCs yn osteoblastau.

Trafodaeth

Cistancheserwm meddyginiaethol yn achosi BMSCs. Mae cistanche yn cael effeithiau maethu'r canol, bywiogi'r afu, maethu'r aren, cryfhau yang, lleithio'r coluddion, a charthydd. Mae astudiaethau ffarmacolegol modern wedi dangos bod gan gyffuriau sy'n tonyddu arennau raddau amrywiol o gyffro i'r system pituitary-adrenal-gonadal, a'u bod yn perthyn yn agos i metaboledd esgyrn. Gall estrogen wella ffurfiant esgyrn, a gall androgen hyrwyddo synthesis protein, hyrwyddo cynnydd matrics esgyrn, a dyddodiad calsiwm a ffosfforws. Rôl [1]. Mae cyfanswm y glycosidau ffenylethanoid, ergosteroside, a betaine yn Cistanche yn cael effeithiau tebyg i androgen. Canfu'r arbrawf hwn fod y serwm meddyginiaethol oCistancheGall gymell BMSCs i wahaniaethu i osteoblastau. Er bod meddyginiaeth Tsieineaidd sengl neu feddyginiaeth Tsieineaidd gyfansawdd wedi'i defnyddio i gymell BMSCs i wahaniaethu i osteoblastau, nid yw'r mecanwaith moleciwlaidd penodol wedi'i adrodd eto. Gall ymchwil proteomeg ddadansoddi'r gwahaniaethau mewn proteomeg gysylltiedig yn y broses hon a sefydlu proteomeg swyddogaethol, gyda'r bwriad o ddehongliad newydd o ddamcaniaeth asgwrn llywodraethu'r arennau.

Mae dwysedd celloedd yn chwarae rhan bwysig yn y broses o wahaniaethu BMSCs yn osteoblastau. Mae ffurfio nodules esgyrn nid yn unig yn gofyn am gyfryngau osteoinductive ond mae hefyd yn dibynnu ar ddwysedd celloedd wedi'u brechu. Rhaid i ddwysedd y gell gyrraedd dwysedd penodol a gall y celloedd asio. Gwahaniaethu osteoblast. Yn yr arbrawf hwn, pan fydd celloedd y bedwaredd genhedlaeth yn amlhau i gydlifiad mwy na 90 y cant, ychwanegir y inducer ar gyfer diwylliant. Pan fydd dwysedd y gell yn rhy isel, bydd y celloedd yn amlhau'n araf, ac nid oes tueddiad i agregu a thyfu. Yn yr un diwylliant yn dda gyda dwysedd celloedd anwastad, mae gan yr ardal drwchus gell ffiniau celloedd aneglur a strwythur aneglur, ac mae'r celloedd yn agregu'n glystyrau. Mae staenio AKP a staenio coch alizarin yn gadarnhaol, ond nid oes unrhyw ddwysedd celloedd yn yr ardal â dwysedd celloedd is. Cyfunodd y celloedd yn glystyrau, ac roedd staenio AKP a staen Alizarin Red yn negyddol. Felly, mae'r defnydd o ficro-gludwyr mewn peirianneg meinwe esgyrn ynghyd â dulliau diwylliant in vitro mwy effeithiol, megis diwylliant tri dimensiwn (RCCS), i gael mwy o gelloedd yn cael effaith sylweddol ar lwyddiant trawsblannu celloedd.

Arwyddocâd clinigolCistancheserwm meddyginiaethol i gymell BMSCs Mae gan beirianneg meinwe esgyrn ragolygon cymhwyso clinigol eang ac mae wedi dod yn fan cychwyn ymchwil mewn orthopaedeg fodern. BMSCs ar hyn o bryd yw'r celloedd had mwyaf delfrydol ar gyfer peirianneg meinwe esgyrn. Tasg ganolog ymchwil ar eu heffeithiau yw sut i'w gwahaniaethu yn osteoblastau o dan yr amodau symlaf posibl, ac yna eu trawsnewid yn gelloedd esgyrn aeddfed.

Ar hyn o bryd, mae'r inducers a ddefnyddir yn gyffredin ar gyfer gwahaniaethu cyfeiriedig o BMSCs yn cynnwys dexamethasone, fitamin C, a sodiwm -glyseroffosffad. Mae diwylliant in vitro, dexamethasone yn cael effaith ataliol ar amlhau celloedd [2], fel y gwelir yn yr arbrawf hwn, yn glinigol, mae gan dexamethasone adweithiau niweidiol megis haint, osteonecrosis, ac osteoporosis, a fydd yn cyfyngu ar drawsblannu BMSCs. Ar ôl y cais fel inducer yn y corff. Mae cistanche yn cael yr effeithiau o fywiogi'r aren a chryfhau'r esgyrn a'r cyhyrau. Canfu'r arbrawf hwn fod Cistanche yn cael yr effaith o hyrwyddo toreth o BMSCs a chymell gwahaniaethu BMSCs yn osteogenig. Yn y cais clinigol hirdymor, ni welwyd unrhyw adwaith niweidiol o Cistanche, ac mae gan ei ddefnydd fel inducer in vivo ragolygon cais clinigol eang.

Yn fyr, mae'r rhan fwyaf o'r ymchwil gyfredol ar BMSCs fel celloedd had ar gyfer peirianneg meinwe esgyrn yn dal yn y cyfnod arbrofol. Sut i gael digon o BMSCs mewn cyfnod cymharol fyr o amser a defnyddio dulliau syml i'w cymell i wahaniaethu i osteogenig yw ffocws ymchwil gyfredol. Er bod mecanwaith Cistanche cistanche, sydd â'r swyddogaeth o fywiogi'r aren a chryfhau esgyrn a chyhyrau, wrth ysgogi gwahaniaethu osteogenig BMSCs i'w astudio ymhellach, mae ei ddefnydd fel inducer gwahaniaethu BMSCs ar gyfer trin undeb oedi, nonunion. , ac mae gan osteonecrosis toriadau esgyrn gyda thrawsblaniadau MSCs ddyfodol disglair.

Cistancheyn gallu atalosteoporosisa hyrwyddocell asgwrntwf