Mae Glycosidau Cistanche yn Gwella Dysgu A Chof yn y Model Llygoden Fawr O Ddementia Fasgwlaidd

am ragor o wybodaeth:ali.ma@wecistanche.com

J. CHEN1,2, S.-N. ZHOU1, Y.-M. ZHANG2, Y.-L. FENG2, S. WANG2

1 Adran Niwroleg, Ysbyty Qilu Prifysgol Shandong, Jinan, Tsieina. & Sefydliad Ymchwil Gwyddor yr Ymennydd, Prifysgol Shandong, Shandong, Cysylltiadau Cyhoeddus Tsieina

2Adran Niwroleg, Ysbyty Pobl Rhanbarth Ymreolaethol Mongolia Fewnol, Cysylltiadau Cyhoeddus Tsieina

Cyfrannodd Jin Chen a Yan-Mei Zhang yn gyfartal at yr astudiaeth hon

Haniaethol.– AMCAN:Glycosidau o cistanche(GC) yn cael eu tynnu o Xin JiangCistanche, a ddefnyddir yn eang fel perlysiau Tsieineaidd. Nod yr astudiaeth hon yw gwerthuso effeithiau GC ar ddementia fasgwlaidd (VD).

DEUNYDDIAU A DULLIAU: Sefydlwyd y model VD trwy glymu'r rhydweli carotid cyffredin dwyochrog mewn llygod mawr Wistar sy'n oedolion, a oedd yn derbyn gweinyddiad ip dyddiol o halwynog, GC (10 mg/kg pwysau corff/d, ip) neu oxiracetam (450 mg/kg pwysau corff/d, ip) am 14 diwrnod. Roedd prawf Morris Water Maze yn gwerthfawrogi perfformiad gwybyddol y llygod mawr. Cafodd yr hippocampus ei ddyrannu a bu'n destun dadansoddiad proteomeg ac imiwn-histocemegol. CANLYNIADAU: Dangosodd y grŵp GC hwyrni dianc sylweddol is na'r grŵp VD bedwar a phum diwrnod ar ôl llawdriniaeth. Nid oeddent yn dangos unrhyw wahaniaeth arwyddocaol o'u cymharu â'r grŵp a weithredir â ffug a'r grŵp rheoli oxiracetam. Yn yr hippocampus, roedd y 21 smotyn protein yn y grŵp GC yn dangos lefelau mynegiant gwahanol o gymharu â'r grŵp VD. Roedd hyn yn cynnwys y pedwar protein a ddangosodd wahaniaeth sylweddol: tri phrotein uwch-reoledig tebyg i brotein thioredocsin 1, protein penodol wedi'i actifadu â mitogen kinase kinase 1, a phrotein sy'n gysylltiedig â trwyn dihydropyridine 2 (CRMP-2), ac un synthetase glutathione protein is-reoleiddiedig. Dangosodd dadansoddiad imiwnohistocemeg fod lefel protein P-tau yn sylweddol uwch yn y grŵp model VD nag yn y grŵp ffug (p < 0.05).="" ar="" ôl="" triniaeth="" gc,="" dangosodd="" lefel="" protein="" p-tau="" mewn="" llygod="" mawr="" model="" vd="" ostyngiad="" sylweddol="" o'i="" gymharu="" â'r="" grŵp="" vd="" a="" gafodd="" ei="" drin="" â="" halwynog="" (p="">< 0.05).="" casgliadau:="" mae'r="" gc="" yn="" chwarae="" rhan="" hanfodol="" wrth="" amddiffyn="" y="" niwronau="" hippocampal="" yn="" y="" vd,="" trwy="" leihau="" ffosfforyleiddiad="" p-tau="" a="" chynyddu="" lefel="" mynegiant="" crmp-2.="" mae="" triniaeth="" ffarmacolegol="" o="" gc="" yn="" cynnig="" cyfle="" newydd="" ar="" gyfer="" triniaeth="">

Geiriau Allweddol:

Dementia fasgwlaidd, Glycosidau cistanche, Proteomeg, P-tau, protein sy'n gysylltiedig â Dihydropyrimidinase 2.

Cliciwch i Cistanche a cistanche deserticola ma ar gyfer gwella cof

Rhagymadrodd

Dementia fasgwlaidd (VD) yw'r ail ddementia henaint blaenllaw ac mae'n cael ei achosi'n bennaf gan glefyd serebro-fasgwlaidd isgemia. Mae VD yn arwain at nam gwybyddol heterogenaidd, ac mae angen cyffuriau therapiwtig effeithiol newydd sy'n trin neu'n atal datblygiad VD1. Fodd bynnag, nid oes perlysiau Tsieineaidd effeithiol o hyd ar gyfer gwella nam gwybyddol a achosir gan isgemia yr ymennydd.

Mae glycosidau cistanche (GC) wedi'u defnyddio'n helaeth fel perlysiau gydag effeithiau niwro-amddiffynnol. Her- ba Cistanches Extract yn mwyhau ydysgu a chofllygod trwy hyrwyddo gwahaniaethu celloedd niwronaidd, twf niwrit, a ffurfio synaps2. Gall glycosidau cistanche atal apoptosis mewn niwronau gronynnau cerebellar a chael effaith gwrth-apoptosis trwy atal actifadu caspase-3 a caspase-83. Mae Echinacoside, un o brif gydrannau gweithredol Herba Cistanches, yn ddigon i amddiffyn celloedd niwronaidd rhag rheithgor rotenone trwy actifadu signalau Trk4. Fodd bynnag, mae'r mecanweithiau y mae GC yn eu defnyddio i wella nam gwybyddol mewn VD yn anhysbys i raddau helaeth o hyd.

Mae protein Tau yn brotein sy'n gysylltiedig â microtiwbyn niwronaidd sy'n sefydlogi microtiwbwlau niwronaidd. Mae ffosfforyleiddiad protein tau (P-tau) yn effeithio ar ei allu i ryngweithio â microtiwbiau ac yn effeithio ar drosglwyddo synaptig. Mae croniad tanglau niwroffibrilaidd (NFTs) yn cynnwys protein P-tau ac mae'n un o brif nodweddion clefyd Alzheimer (AD)5. Mae'n hysbys mai VD ac AD yw'r ddau glefyd dementia mwyaf cyffredin. Maent yn rhannu cydberthynas gyffredin â ffactorau risg fasgwlaidd, megis pwysedd gwaed uchel, diabetes mellitus, a hypercholesterolemia. Felly, gall P-tau hefyd fod yn gysylltiedig â VD.

Fe wnaethom werthuso effeithiau CGs arswyddogaeth dysgu-cofmewn model llygod mawr o VD a pherfformiodd proteomeg a dadansoddiad imiwn-histocemegol ar hippocampus llygod mawr VD i roi cipolwg ar effeithiau niwro-amddiffynnol GC. Dangosodd ein canlyniadau fod GCgwell dysgu a chofmewn llygod mawr VD, a newidiodd lefelau proteinau fel P-tau mewn llygod mawr VD.

Defnyddiau a Dulliau

Anifeiliaid

Darparwyd llygod mawr Wistar gwrywaidd chwe mis oed (pwysau 230- 270 g) gan ganolfan anifeiliaid arbrofol Talaith Hubei, Tsieina. Cynhaliwyd yr holl weithdrefnau anifeiliaid arbrofol yn unol â Chanllawiau Gofal Anifeiliaid a Rheoliadau Moesegol Lleol Ysbyty Rhif 1 Wuhan, Tsieina. Y rhif cymeradwyo moeseg yw 00014834. Cafodd anifeiliaid eu cartrefu ar wahân mewn grwpiau o 4 y cawell ar 25 gradd gyda chylch o 12-awr golau/12-awr dywyll a mynediad am ddim i fwyd a dŵr. Cafodd anifeiliaid (n{9}}) eu haseinio ar hap i bedwar grŵp: grŵp model (n=12), grŵp a weithredir â ffug (n=11), grŵp a driniwyd gan GC (n{{14}) }), a grŵp rheoli wedi'i drin ocsiracetam (n=10).

Clymiad Rhydweli Carotid Cyffredin dwyochrog (2-VO)

O dan anesthesia dwfn gyda hydrad cloral 10 y cant (adweithydd Ffatri Adweithydd Cemegol Tianjin Damao, Tianjin, Tsieina) (pwysau corff 350 mg / kg,

ip), cafodd rhydwelïau carotid cyffredin dwyochrog (CCA) eu gwahanu'n ofalus o'r meinweoedd cyfagos, ac yna eu clymu'n dynn â'r pwyth. Ar ôl hynny, cafodd y croen ei ail-greu a chafodd llygod mawr eu cynnal ar dymheredd yr ystafell a'u dychwelyd i gawell y cartref nes iddynt gael eu dadebru. Roedd llygod mawr rheoli ffug yn destun yr un weithdrefn lawfeddygol heb ligation CCA. Cafodd llygod mawr VD eu trin â GC (10 mg / kg pwysau corff / d, ip) neu oxiracetam (450 mg / kg pwysau corff / d, ip) yn syth ar ôl llawdriniaeth am 14 diwrnod yn olynol. Chwistrellwyd y grŵp model â'r un cyfaint o halwynog arferol.

Prawf Drysfa Ddŵr Morris

Perfformiwyd y prawf MWM yn unol â dull a ddisgrifiwyd eisoes7. Roedd yr ardal brofi yn cynnwys pwll crwn wedi'i lenwi â dŵr (25 ± 1 gradd ), wedi'i wneud yn afloyw â llaeth fel nad oedd y llygod mawr yn gallu gweld llwyfan tanddwr 1 cm o dan wyneb y dŵr. Rhannwyd y pwll yn bedwar cwadrant (wedi'u labelu parthau I, II, III, a IV) a chafodd platfform ei foddi ym mharth II. Gosodwyd ciwiau gweledol ar wal yr ystafell brofi. Rhoddwyd yr anifeiliaid yn y dŵr yn un o'r pedwar pwynt cwadrant cychwyn, a gafodd ei amrywio ar hap trwy gydol y treialon. Rhoddwyd 2 funud i'r llygod mawr ddod o hyd i'r platfform ac eistedd arno am 15 s. Roedd llygod mawr a fethodd â dod o hyd i'r lleoliad o fewn amser penodol yn cael eu tywys yn ysgafn i'r platfform a chaniatawyd iddynt aros arno am 15 eiliad. Defnyddiwyd system olrhain awtomatig i gofnodi'r llwybr nofio, hwyrni, pellter nofio, ac amser ym mhob parth. Cafodd yr holl lygod mawr eu haberthu bythefnos ar ôl y prawf MWM ar gyfer y dadansoddiad dilynol.

Echdynnu Protein

O dan anesthesia dwfn gyda hydrad cloral o 10 y cant, cafodd yr holl lygod mawr a oedd yn destun y prawf MWM eu dad-gyfrifo. Cafodd y meinweoedd hippocampal eu cynaeafu'n gyflym ar rew, ac yna eu rhewi ar unwaith mewn nitrogen hylifol. Cafodd yr holl feinweoedd eu homogeneiddio o dan nitrogen hylifol gan ddefnyddio morter a pestl a'u casglu mewn byffer lysis (7 M wrea, 2 M thiourea, 2 y cant CHAPS, 20 mM Tris). Tynnwyd gronynnau anhydawdd trwy allgyrchiad ar 12,000 rpm am 20 munud ar 4 gradd . Amharwyd ar asidau niwclëig halogedig yn y samplau gan osgiliad sonig ysbeidiol am 5 munud. Casglwyd y supernatants ar ôl centrifugation yn yr un cyflwr ag a ddisgrifir uchod. Mesurwyd y crynodiad protein yn y supernatants gan Bradford assay, a chafodd y supernatants eu storio ar 80 gradd.

Electrofforesis Gel Dau-ddimensiwn

Addaswyd y cyfanswm protein (120 µg) gyda byffer ailhydradu (7 M wrea, 2 M thiourea, 4 y cant CHAPS, 1 y cant gyda DTT/cyfrol DTT, 0.5 y cant byffer IPG, a olion bromophenol glas) mewn cyfaint o 350 µL. Perfformiwyd canolbwyntio isoelectrig (IEF) mewn stribedi IPG (pH 4-7, maint 22 cm) ar 300 V am 12 munud, 700 V am 18 munud, 1500 V am 1.5h, 9900 V ar gyfer 3 h, 9990 V am 6.5 h, ac yna 600 V am 20 h ar system Ettan IPGphor II (GE ETTAN IPGPHOR3). Ar ôl y rhaglen IEF, cafodd y stribedi eu cydbwyso mewn byffer cydbwysedd IPG I (6 M wrea, 2 y cant SDS, 30 y cant glyserol, 0.375M Tris, pH 8.8, 20 mg/ml DTT, ac olion glas bromophenol), a yna ei alkylated (25 mg/ml iodoacetamide yn lle DTT mewn byffer ecwilibration) am 15 munud. 2-Perfformiwyd DE ar geliau polyacrylamid 12.5 y cant SDS (24 cm × 19.5 cm × 1.0 mm) gyda glud selio agarose 0.5 y cant, gan ddefnyddio system electrofforesis Ettan DALT Six (GE ETTAN DALTsix, PA, UDA). Cynhaliwyd electrofforesis ar 2 W am 45 munud, ac yna gwahaniad ar 17 W am bedair awr nes bod y glas bromophenol bron â chyrraedd gwaelod y geliau. Delweddwyd y smotiau protein trwy staenio arian (Ffatri Adweithydd Cemegol Tianjin Damao) mewn geliau dadansoddol. 2-Golchwr DE wedi'i ffurfio'n driphlyg ac o dri echdyniad protein annibynnol ar gyfer pob grŵp.

Electrofforesis Gel Paratoadol

Rhoddwyd 2-DE ar samplau protein (600 µg) o bedwar grŵp o lygod mawr gan ddilyn y dull a ddisgrifiwyd uchod. Delweddwyd y smotiau protein trwy staenio glas gwych Coomassie (Ffatri Adweithydd Cemegol Tianjin Damao) mewn geliau paratoadol.

Caffael a Dadansoddi Delwedd

Cafodd y delweddau gel eu dal ar system Sganio Delweddau {{0}DE (UMAX Powerlook1100, VT, USA) a'u dadansoddi gan feddalwedd Image Master 2D Platinum 5.0 (GE, PA, UDA). Cafodd y smotiau protein eu canfod yn awtomatig ac yna eu golygu â llaw i gael gwared â rhediadau, brychau ac arteffactau.

Ïoneiddiad Laser gyda chymorth matrics - Sbectrometreg Màs Amser Hedfan (MALDI-TOF-MS)

Ar gyfer olion bysedd màs peptid a dadansoddiad dilynol, cafodd geliau eu sleisio, a chafodd smotiau â lliw Coomassie eu cadw a'u golchi â 10 0 mM amoniwm bicarbonad ac asetonitrile, wedi'i leihau â DTT ar 60 gradd am 40 munud, ac yna'n cael ei alkylated gan IAA am 30 munud yn y tywyllwch. Cafodd y gel ei gynnwys mewn 50 µL o hydoddiant trypsin wedi'i addasu 12 ng/µl mewn bicarbonad amoniwm 50 mM (pH 8.6) ar 37 gradd dros nos. Echdynnwyd peptidau o'r plwg gel gydag 1 y cant o asid ffurfig/2 y cant acetonitrile a'u crynhoi gan ddefnyddio C-18 Zip-Tips. Gwelwyd crynhoadau (pedwar atgynhyrchiad) ar darged MALDI gan ddefnyddio asid hydroxy cinnamig a-cyano (2 mg/ml mewn 50 y cant o asetonitrile, 0.1 y cant TFA yn cynnwys deg mM amoniwm ffosffad) fel matrics. Prynwyd sbectra ar sbectromedr màs MALDI TOF/TOF 4700 (Applied Biosystems, NY, UDA), a'u dadansoddi gan feddalwedd GPS Explorer TM (Applied Biosystems).

Imiwnohistocemeg

Cafodd adrannau hippocampal coronaidd eu gosod mewn paraformaldehyd 4 y cant cyn eu mewnosod mewn paraffin ac yna eu torri'n adrannau 4-µm o drwch. Cafodd adrannau hippocampal coronaidd terfynol eu prosesu i dorri gweithgaredd perocsidas mewndarddol gan ddefnyddio 3 y cant H2O2 mewn halwynog byffer ffosffad. Cafodd imiwn-ymatebion amhenodol eu rhwystro ar dymheredd yr ystafell am 15 munud. Yna cafodd adrannau eu deor â gwrthgorff P-tau a gwrthgorff eilaidd ar dymheredd ystafell am 30 munud a chawsant eu delweddu yn dilyn adwaith 3,3'-diaminobenzidine tetrahydrochloride (Dako, Tokyo, Japan). Cafodd delweddau eu dal gan ddefnyddio microsgop golau (Olympus, Tokyo, Japan) a'u prosesu gan ddefnyddio meddalwedd Photoshop (fersiwn 7.0, Adobe, San Jose, CA, UDA).

Dadansoddiad Ystadegol

Mynegwyd data meintiol fel modd ± DC. Perfformiwyd dadansoddiad dwy ffordd o amrywiant (ANOVA) gan ddefnyddio meddalwedd dadansoddi SPSS 10.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). p < 0.05="" yn="" cael="" ei="" ystyried="" yn="">

Canlyniadau

Mae GC yn Hyrwyddo Dysgu a Chof mewn llygod mawr VD

Er mwyn gwerthuso effeithiau GC ar swyddogaeth wybyddol y model llygod mawr VD, gwnaethom gynnal y prawf MWM. Yn y prawf MWM, dangosodd y grŵp GC hwyrni dianc sylweddol is na'r grŵp VD ar 4 a 5 diwrnod ar ôl llawdriniaeth ond ni ddangosodd unrhyw wahaniaeth arwyddocaol o'i gymharu â'r grŵp a weithredir â ffug a'r grŵp rheoli oxiracetam (Tabl I). Mae'r data hyn yn awgrymu bod GC yn hyrwyddo dysgu a chof mewn llygod mawr VD. GC yn Newid Proffiliau Proteomig o'r Hippocampus o Llygod Mawr VD.

Trwy ddadansoddiad proteomig o'r hippocampus llygod mawr, canfuom fod 21 o smotiau protein yn y grŵp GC yn dangos lefelau mynegiant gwahanol o gymharu â'r grŵp VD. Yn eu plith, dangosodd pedwar protein wahaniaeth sylweddol yn hippocampus llygod mawr GC (Tabl II): gan gynnwys tri phrotein uwch-reoledig tebyg i thioredoxin protein 1 (TXNL 1), penodoldeb deuol protein mitogen-activated kinase kinase kinase 1 (MAPKK 1), a protein sy'n gysylltiedig â dihydropyrimidinase 2 (DPYSL2); ac un synthetase glutathione protein is-reoleiddiedig (GCL). Dangoswyd y pro-ffeiliau electrofforesis gel dau-ddimensiwn nodweddiadol (2-DE) o DPISL2 yn Ffigur 1.

Mae GC yn Modylu Lefel P-tau yn Hippocampus o Llygod Mawr VD

Drwy ddadansoddi imiwn-histocemeg, canfuom fod lefel protein P-tau yn sylweddol uwch yn y grŵp model VD nag yn y grŵp a weithredir â ffug (p < 0.05).="" ar="" ôl="" y="" driniaeth="" gc,="" dangosodd="" lefel="" protein="" p-tau="" mewn="" llygod="" mawr="" model="" vd="" ostyngiad="" sylweddol="" o'i="" gymharu="" â'r="" grŵp="" vd="" a="" gafodd="" ei="" drin="" â="" halwynog="" (p="">< 0.05)="" ond="" ni="" ddangosodd="" unrhyw="" wahaniaeth="" arwyddocaol="" o'i="" gymharu="" â'r="" grŵp="" rheoli="" oxiracetam="" (ffigur="">

Trafodaeth

Mae VD yn ganlyniad i nam ar y cof a gweithrediad gwybyddol a achosir yn bennaf gan glefydau serebro-fasgwlaidd8,9,10,11. Mae'r model occlusion dau lestr (2VO) yn syml a sefydlog ac yn cael ei gydnabod fel y model safonol o isgemia cerebral. Yn yr astudiaeth hon, defnyddiwyd y model 2VO i sefydlu'r model anifail VD. Yn ôl prawf MWM, canfuom fod y grŵp VD yn dangos llai o allu gwybyddol o'i gymharu â'r grŵp a weithredir â ffug, gan gadarnhau ein bod wedi sefydlu'r model VD yn llwyddiannus. Yn seiliedig ar y model hwn, canfuom fod triniaeth GC wedi gwella gallu gwybyddol gofodol y llygod mawr VD i raddau tebyg ag oxiracetam, rheolaeth gadarnhaol. Mae'r data hyn yn dangos y gallai GC hyrwyddo dysgu gofodol a nam ar y cof mewn VD.

Er mwyn ymchwilio i'r mecanwaith y mae GC yn ei ddefnyddio i roi effeithiau niwro-amddiffynnol ar VD, fe wnaethom ddefnyddio dull proteomig i sgrinio proteinau a fynegir yn wahaniaethol yn hippocampus llygod mawr VD. Canfuom fod nifer o broteinau yn ymwneud â metaboledd egni, plygu protein, llwybr signalau, a cytoskeleton yn dangos gwahanol ymadroddion yn hippocampus y llygod mawr VD a gafodd eu trin â GC o'u cymharu â'r rhai a gafodd eu trin â halwynog fel rheolaeth.

Un o'r proteinau sydd wedi'u mynegi'n wahaniaethol yw DPISL2, a elwir hefyd yn brotein cyfryngwr ymateb collapsin-2 (CRMP-2), sy'n cael ei gyfoethogi yn y rhan bell o acsonau sy'n tyfu mewn niwronau hippocampal cynradd ac sy'n hanfodol ar gyfer gwahaniaethu acsonau. a thwf niwronaidd12,13. Ar ben hynny, mae CRMP{5}} yn hyrwyddo cydosod microtiwb ac yn cyfryngu signalau Ras i wella'r ffurfiant aml-acson a pholaredd niwronaidd14,15. Yn yr astudiaeth hon, cynyddwyd lefel mynegiant protein CRMP-2 2.28 gwaith yn y grŵp GC o'i gymharu â'r grŵp VD, gan awgrymu rôl bwysig i CRMP-2 mewn mecanweithiau atgyweirio posibl o ffurfio rhwydwaith niwral a cynnal polaredd niwronaidd mewn VD.

Ymhellach, yn yr astudiaeth bresennol canfuom P-tau uwch yn y grŵp model VD, ond mynegiant P- tau is ar ôl triniaeth GC. Mae protein Tau yn chwarae rhan allweddol ym morffogenesis niwronau. Mewn rhai sefyllfaoedd patholegol, gall protein P-tau gynhyrchu agregau afreolaidd sy'n wenwynig i niwronau, trwy effeithio ar weithrediad mitocondriaidd15. Mae astudiaethau blaenorol yn awgrymu y gall GC wella metaboledd ynni mitocondriaidd gyda swyddogaeth gwrth-ocsidiad16,17,18. Yn ddiddorol, mae ffosfforyleiddiad CRMP-2 hefyd wedi'i nodweddu fel cyfansoddyn o danglau niwroffibrilaidd mewn AD.

Casgliadau

Mae CRMP2 yn cael ei ffosfforyleiddio'n gyffredin gan kinase protein sy'n ddibynnol ar cyclin-5 (Cdk5) a glycogen synthase kinase-3 (GSK3 ) yn ymennydd cleifion AD, yr un cinesau â phosphorylate tau protein i gynhyrchu NFTs19,20. Mae angen astudiaethau pellach i archwilio a yw GC yn rheoleiddio lefel mynegiant P-tau a CRMP2 mewn VD trwy reoleiddio gweithgaredd Cdk5 a GSK321,22,23. I grynhoi, mae ein data yn awgrymu bod GC yn chwarae rhan hanfodol i amddiffyn niwronau hippocampal o VD, trwy leihau ffosfforyleiddiad P-tau a chynyddu lefel mynegiant CRMP-2. Mae trin GC yn ffarmacolegol yn cynnig cyfle newydd ar gyfer datblygu therapi yn erbyn VD.

Diolchiadau

Cefnogwyd yr astudiaeth hon gan Sefydliad Arbennig Ysgolheigion Taishan a'r Gronfa Genedlaethol Gwyddoniaeth Naturiol (30960520).

Gwrthdaro Buddiannau

Mae'r awduron yn datgan nad oes unrhyw wrthdaro buddiannau.

Cyfeiriadau

1)GORELICK PB, PANToni L. Datblygiadau mewn nam gwybyddol fasgwlaidd. Strôc 2013; 44: 307-308.

2) CHOI JG, MOON M, JEONG HU, KIM MC, KIM SY, OH MS. Mae Cistanches Herba yn gwella dysgu a chof trwy ysgogi ffactorau twf nerfau. Behav Brain Res 2011; 216: 652-658.

3) TIAN XF, PU XP. Mae glycosidau ffenylethanoid o Cistanches salsa yn atal apoptosis a achosir gan 1- methyl-4-ïon ffenylpyridiniwm mewn niwronau. J Ethnopharmacol 2005; 97: 59-63.

4) ZHU M, LU C, LI W. Mae amlygiad dros dro i echinacoside yn ddigon i actifadu signalau Trk ac amddiffyn celloedd niwronaidd rhag rotenone. J Neurochem 2013; 124: 571-580.

5)MEDINA M, AVILA J. Safbwyntiau newydd ar rôl tau yng nghlefyd Alzheimer. Goblygiadau ar gyfer therapi. Biochem Pharmacol 2014; 88: 540-547.

6) NING M, ZHANG Z, CHEN Z, ZHAO T, ZHANG D, ZHOU D, LI W, LIU Y, YANG Y, LI S, AU L. Tystiolaeth genetig bod dementia fasgwlaidd yn gysylltiedig â chlefyd Alzheimer: cysylltiad genetig fod- tween tau polymorphism a dementia fasgwlaidd yn y boblogaeth Tsieineaidd. Oed yn Heneiddio 2011; 40: 125-128.

7) CAIN DP, BOON F. Mae dadansoddiad ymddygiadol manwl yn datgelu strategaethau tasg a namau cof gofodol mewn llygod mawr sy'n cael strôc rhydweli ymennydd canol dwyochrog. Ymennydd Res 2003; 972: 64-74.

8)ZHONG G, WANG Y, ZHANG Y, GUO JJ, ZHAO Y. Mae ysmygu'n gysylltiedig â risg uwch o ddementia: meta-ddadansoddiad o astudiaethau carfan arfaethedig gydag ymchwiliad i addaswyr effaith posibl. PLoS Un 2015; 10: e0118333.

9) NETO E, ALLEN EA, AURLIEN H, NORDBY H, EICHELE T. Mae nodweddion sbectrol EEG yn gwahaniaethu rhwng Alzheimer a dementia fasgwlaidd. Neurol blaen 2015; 6:25.

10) CALABRÒ RS, DE LUCA R, LEO A, BALLETTA T, MARRA A, BRAMANTI P. Hyfforddiant Lokomat mewn dementia fasgwlaidd: gwella echddygol a thu hwnt! Heneiddio Clin Exp Res 2015 Maw 12.

11) UTKAN T, YAZIR Y, KARSON A, BAYRAMGÜRLER D. Mae Etanercept yn gwella perfformiad gwybyddol ac yn cynyddu mynegiant eNOS a BDNF yn ystod dementia fasgwlaidd arbrofol mewn diabetes a achosir gan streptozotocin. Curr Neurovasc Res 2015 Maw 11.

12) ZHOU LS, ZHAO GL, LIU Q, JIANG SC, WANG Y, ZHANG DM. Mae tawelu protein cyfryngwr ymateb cwymp-2 yn ailraglennu ffenoteip macrophage ac yn gwella iachâd cnawdnychiant mewn model cnawdnychiant myocardaidd arbrofol. J Inflamm (Llundain) 2015; 12:11.

13)WILSON SM, KI YEON S, YANG XF, PARK KD, KHANNA R. Rheoleiddio gwahaniaethol o ffosfforyleiddiad cyfryngwr ymateb collapsin 2 (CRMP2) gan GSK3ß a CDK5 yn dilyn anaf trawmatig i'r ymennydd. Neurosci Celloedd Blaen 2014; 8: 135.

14) LIM NK, HUNG LW, PANG TY, MCLEAN CA, LIDDELL JR, HILTON JB, LI QX, WHITE AR, HANNAN AJ, CROUCH PJ. Newidiadau lleol i glycogen synthase kinase-3 a phrotein cyfryngwr ymateb cwymp-2 yn ymennydd Huntington yr effeithir arno gan afiechyd. Hum Mol Genet 2014; 23: 4051-4063.

15) BRUSTOVETSKY T, PELLMAN JJ, YANG XF, KHANNA R, BRUSTOVETSKY N. Mae protein cyfryngwr ymateb Collapsin 2 (CRMP2) yn rhyngweithio â derbynnydd N-methyl-D- aspartate (NMDA) a Na plus /Ca2 plus ex-changer ac yn rheoleiddio eu gweithgaredd swyddogaethol. J Biol Chem 2014; 289: 7470-7482.

16)DONG B, YUAN X, ZHAO Q, FENG Q, LIU B, GUO Y, ZHAO B. Echdyniad dau gam dyfrllyd â chymorth uwchsain o glycosidau ffenylethanoid o goesynnau Cistanche deserticola YC Ma. J Sep Sci 2015 Ion 21. [Epub ymlaen llaw].

17)HU GS, JIA JM, KIM DH. Effeithiau bwydo tyrosin a phenylalanine ar groniad glycosidau ffenylethanoid i ddiwylliant ataliad celloedd deserticola Cistanche. Chin J Nat Med 2014; 12: 367-372.

18) Dong S, GAO R, YANG Y, GUO M, NI J, ZHAO L. Penderfynu ar yr un pryd o glycosidau ffenylethanoid ac aglycones gan electrofforesis parth capilari gyda addasydd byffer rhedeg. Biocemeg rhefrol 2014; 449: 158-163.

19)XIONG WT, GU L, WAN C, SUN HX, LIU X. Effeithiau gwrth-hyperglycemig a hypolipidemig Cistanche tubulosa mewn llygod db/db diabetig math 2. J Ethnopharmacol 2013; 150: 935-945.

20) LIU B, OUYANG J, YUAN X, WANG L, ZHAO B. Priodweddau arsugniad a gwahanu glycosidau ffenylethanoid rhag Cistanche deserticola trwy ddefnyddio resinau macroporous. J Chro- motor B Technol Analyt Biomed Life Sci 2013; 937: 84-90.

21)CALDERÓN-RIVERA A, SANDOVAL A, GONZÁLEZ-RAMÍREZ R, GONZÁLEZ-BILLAULT C, FELIX R. Rheoleiddio sianeli cav3.1 niwronaidd gan kinase 5 sy'n ddibynnol ar seiclin (cdk5). PLoS Un 2015; 10: e0119134.

22) CASTRO-ALVAREZ JF, URIBE-ARIAS A, CARDONA-GÓMEZ GP. Mae targedu Cyclin-Dibynnol Kinase 5 yn atal agregu b-Amyloid sy'n cynnwys glycogen synthase kinase 3b a phosphatases. J Neurosci Res 2015 Chwe 24. [Epub ymlaen llaw].

23)ROUGET R, SHARMA G, LEBLANC AC. Kinase sy'n ddibynnol ar Cyclin 5 Ffosfforyleiddiad Mutants Protein Prion Teuluol Yn Gwaethygu Trosi i Strwythur Amyloid. J Biol Chem 2015; 290: 5759- 5771.