Cyswllt:jerry.he@wecistanche.com

Ana Merino‑Ribas1,2,3,4 · Ricardo Araujo4 · Ioana Bancu1,2 · Fredzzia Graterol1,2 · Andrea Vergara5 · Marc Noguera‑Julian5 · Roger Paredes5 · Jordi Bonal2 · Benedita Sampaio‑Maia4,6

Derbyniwyd: 23 Mehefin 2021 / Derbyniwyd: 8 Rhagfyr 2021

© Yr Awdur(on) 2021

Gall cistanche wella gweithrediad yr arennau

Haniaethol

Pwrpas Profwyd bod microbiome y perfedd yn cael ei newid mewn cleifion â chronigarenclefyd. Mae hyn yn cyfrannu at lid cronig ac yn cynyddu risg cardiofasgwlaidd a marwolaethau, yn enwedig yn y rhai sy'n cael hemodialysis. Gall rhwymwyr ffosffad achosi newidiadau yn eu microbiom. Nod y treial hwn oedd cymharu'r newidiadau ym microbiome perfedd cleifion haemodialysis sy'n cael eu trin â chalsiwm asetad â'r rhai sy'n cael eu trin ag oxyhydroxide sucroferric.

Dulliau Dosbarthwyd deuddeg o gleifion hemodialysis i dderbyn calsiwm asetad neu swcroferric oxyhydroxide am 5 mis. Casglwyd samplau gwaed (ar gyfer dadansoddiad biocemegol) a samplau carthion (ar gyfer dadansoddiad microbiome) ar waelodlin, 4, 12, ac 20 wythnos ar ôl cychwyn y driniaeth. Echdynnwyd DNA fecal ac adeiladwyd llyfrgell ddilyniannu rRNA 16S yn targedu'r rhanbarthau gor-amrywiol V3 a V4.

Canlyniadau O ran newidynnau clinigol a pharamedrau labordy, ni welwyd unrhyw wahaniaethau ystadegol arwyddocaol rhwng grwpiau calsiwm asetad neu swcroferric oxyhydroxide. Wrth ddadansoddi samplau carthion, canfuom fod pob claf yn wahanol (p=0.001) ymhlith ei gilydd a chadwyd y gwahaniaethau hyn ar hyd yr 20 wythnos o driniaeth. Roedd y dadansoddiad clystyru mewn proffiliau microbaidd yn grwpio samplau o'r un claf yn annibynnol ar y driniaeth a ddilynwyd a chyfnod y

triniaeth.

Casgliad Mae'r canlyniadau hyn yn awgrymu nad oedd triniaeth 5-mis gyda naill ai calsiwm asetad neu sucroferric oxyhydroxide wedi addasu amrywiaeth gwaelodlin na chyfansoddiad bacteriol gwaelodlin mewn cleifion haemodialysis, hefyd am broffiliau amrywioldeb uchel microbiome'r perfedd a geir ymhlith y cleifion hyn.

Geiriau allweddol Microbiome perfedd · Clefyd cronig yn yr arennau · Hemodialysis · Rhwymwyr ffosffad · Sucroferric oxyhydroxide ·

Asetad calsiwm

Rhagymadrodd

CronigarenMae clefyd (CKD) yn broblem iechyd y cyhoedd ledled y byd, gyda chyffredinolrwydd cynyddol, baich economaidd uchel, a morbidrwydd a marwolaethau uwch [1].

Mewn cleifion CKD, mae patholeg gardiofasgwlaidd yn chwarae rhan bwysig. Mae'r cleifion hyn yn cyflwyno risg uwch o ddatblygu clefyd cardiofasgwlaidd (CVD) a chyfradd marwolaethau cardiofasgwlaidd 30 gwaith yn uwch na'r boblogaeth gyffredinol [2]. Heblaw am y ffactorau risg cardiofasgwlaidd traddodiadol y mae'r rhan fwyaf o'r amser yn fwy cyffredin mewn cleifion y mae CKD yn effeithio arnynt nag yn y boblogaeth gyffredinol, gellid esbonio'r rhyng-gysylltiad rhwng CKD a CVD gan bresenoldeb anhwylderau esgyrn a mwynau, statws hydradiad, a infamation. bod ein cleifion yn datblygu.

O dan amodau arferol, mae llid yn ymateb amddiffynnol a ffisiolegol i wahanol ysgogiadau anffafriol. Fodd bynnag, mewn nifer o anhwylderau gwanychol, megis CKD, mae llid yn dod yn niweidiol ac yn barhaus [3]. Mae'n hysbys bod statws gwaradwyddus parhaus yn cyd-fynd â CKD [4, 5]. Mae haint yn debygol o ganlyniad i etioleg aml-ffactoraidd ac mae'n rhyngweithio â sawl ffactor sy'n dod i'r amlwg pan fydd tocsinau uremig yn cronni ac sydd wedi'i ddisgrifio fel rhagfynegydd o farwolaethau cardiofasgwlaidd a chyfanswm [6]. Ar ben hynny, mae tystiolaeth gynyddol yn cefnogi presenoldeb camweithrediad rhwystr berfeddol a newidiadau yng nghyfansoddiad microbiota'r perfedd yn CKD, y cyfeirir ato'n gyffredin fel dysbiosis perfedd [7-9]. Mae'r cyflwr dysbiotig hwn ar yr un pryd yn cynhyrchu sgil-gynhyrchion gwenwynig ac yn cyfrannu at statws cronig straen ocsideiddiol a llid yn y cleifion hyn [10-12].

Mae sawl ffactor yn cyfrannu at ddysbiosis microbaidd y perfedd mewn cleifion â CKD datblygedig. Mae cronni wrea mewn ffidiau corff a'i ymlediad i'r llwybr gastroberfeddol yn arwain at ehangu bacteria sy'n meddu ar urease. Hefyd, mae hydrolysis wrea yn cynhyrchu cynhyrchion sy'n diraddio'r gyffordd dynn epi- thelial, a thrwy hynny hwyluso trawsleoliad endotoxin a darnau microbaidd i'r systemig circu- lation [7, 8, 10, 13-15]. Mae argymhellion dietegol mewn CKD gan gynnwys cymeriant cyfyngedig o botasiwm, ffosffad, sodiwm, a phroteinau yn arwain at gymeriant isel o garbohydradau eplesu a gallai hyn arwain at ehangu rhywogaethau proteolytig a chenhedlaeth gynyddol o docsinau bacteriol [12, 13, 16]. Ar ben hynny, mae cleifion â CKD yn aml yn gysylltiedig â chyflyrau comorbid eraill, megis diabetes, clefydau hunanimiwn, a gorbwysedd. Mae'r holl gyd-forbidrwydd hyn fel y cyfryw yn arwain at addasiadau microbiota per se [17, 18].

Ffactor pwysig iawn sy'n ffafrio dysbiosis yw cyffuriau. Mae'n hysbys bod cleifion â CKD datblygedig yn aml-feddyginiaethu fel arfer. Dangoswyd bod ychwanegiad haearn neu wrthfiotigau, a ddefnyddir yn aml yn ein cleifion, yn newid microbiome y perfedd [19-21]. Fodd bynnag, mae effeithiau cyffuriau eraill a ddefnyddir yn eang mewn cleifion CKD ar ficrobiome perfedd yn parhau i fod yn anhysbys.

Mae'r rhan fwyaf o gleifion haemodialysis yn dueddol o gyflwyno hyperffosffatemia ac mae angen dosau uchel o wahanol fathau o rwymwyr ffosffad arnynt i gywiro'r cyflwr hwn. Gellir dosbarthu rhwymwyr ffosffad fel rhwymwyr ffosffad calsiwm a heb fod yn seiliedig ar galsiwm. Disgrifiwyd y gall y ddau grŵp o gyfryngau sy'n rhwymo ffosffad gynhyrchu newidiadau yng nghyfansoddiad y microbiome [22-25].

Yn ddiweddar, mae cyfryngau newydd sy'n rhwymo ffosffad nad ydynt yn seiliedig ar galsiwm wedi'u cymeradwyo ar gyfer trin hyperffosffademia mewn pynciau haemodialysis. Mae rhai o'r asiantau newydd hyn, megis sucroferric oxyhydroxide (SFO) a citrad fferrig, yn dal haearn yn eu cyfansoddiadau. Credir, o ystyried rôl hanfodol haearn mewn twf microbaidd a firws, y gallai'r llwyth haearn mawr a weinyddir gyda'r cyffuriau hyn, newid cyfansoddiad microbiomau perfedd [26, 27]. Serch hynny, prin yw'r dystiolaeth o hyd am effeithiau'r rhwymwyr ffosffad newydd hyn ar ficrobiom y perfedd [25].

O ystyried pwysigrwydd y microbiome perfedd wedi'i newid mewn cleifion CKD a'i gyfraniad at eu cyflwr gwaradwyddus, a'r diffyg gwybodaeth am effeithiau'r cyffuriau hyn a ddefnyddir yn eang y dyddiau hyn ar ficrobiome perfedd, penderfynasom fonitro a chymharu'r newidiadau ar ficrobiome'r perfedd. o gleifion sy'n cael haemodialysis sy'n cymryd SFO neu rwymwr ffosffad calsiwm asetad calsiwm (CA).

Defnyddiau a dulliau

Recriwtio

Deuddeg claf ar haemodialysis yn Ysbyty Universitari Almaenwyr Trias i Pujol eu gwahodd i gymryd rhan yn ein hastudiaeth gyda 5-mis dilynol. Recriwtiwyd yr holl bynciau o Adran Hemodialysis yr Ysbyty Universitari Germans Trias i Pujol, yn Badalona, ​​Sbaen. Roedd pob claf dros 18 oed ac wedi bod ar haemodialysis am o leiaf blwyddyn (4 awr, 3 sesiwn yr wythnos). Cymeradwywyd yr astudiaeth hon gan Bwyllgor Moeseg Ymchwil Clinigol yr Ysbyty Universi- tari Germans Trias i Pujol (PI-16-169, NCT5551048) ac roedd yn cydymffurfio â'r egwyddorion a amlinellwyd yn Natganiad Helsinki. Recriwtiwyd yr holl gyfranogwyr yn wirfoddol ar ôl derbyn gwybodaeth fanwl am brotocol yr astudiaeth. Cafwyd caniatâd gwybodus ysgrifenedig gan bob claf.

Roedd y meini prawf gwahardd yn cynnwys anallu i roi caniatâd gwybodus, hanes o glefyd gastroberfeddol, ysbyty, a chymeriant gwrthfiotigau yn ystod y 3 mis diwethaf.

Casglwyd gwybodaeth glinigol a demograffig berthnasol ar gyfer pob unigolyn ar y llinell sylfaen. Y nodweddion clinigol a gasglwyd oedd: rhyw, oedran, etioleg CKD, hanes pwysedd gwaed uchel, diabetes mellitus, dyslipidemia, clefyd cardiofasgwlaidd (clefyd fasgwlaidd ymylol, cardiomyopathi isgemig neu strôc), a chanser.

Fe wnaethom hefyd gasglu gwybodaeth am eu mynediad fasgwlaidd, a'u triniaeth flaenorol â rhwymwr ffosffad ar ddechrau'r astudiaeth (derbyniodd naw asetad calsiwm, derbyniodd un galsiwm carbonad, ac ni chafodd dau driniaeth flaenorol am hyperffosffademia).

Fe wnaethom rannu cleifion yn ddau grŵp, a gwnaethom newid eu triniaeth ar gyfer hyperffosffademia: gosodwyd 5 claf mewn grŵp CA (4 therapi CA parhaus ac 1 claf yn newid o therapi calsiwm carbonad) a newidiwyd 7 i SFO (5 yn newid o therapi CA a 2). dechrau triniaeth rhwymo ffosffad).

Casgliad sampl

Casglwyd samplau fecal gan 12 o gleifion haemodialysis sy'n derbyn rhwymwyr ffosffad, 5 yn y grŵp CA a 7 yn y grŵp SFO. Rydym hefyd yn casglu samplau gwaed o'r gwiriadau arferol a gyflawnwyd yn ein huned haemodialysis. Casglwyd y samplau (samplau gwaed a fecal) mewn 5-mis dilynol: ar y llinell sylfaen, 4, 12, ac 20 wythnos ar ôl dechrau'r driniaeth.

Mewn samplau gwaed, dadansoddwyd y paramedrau canlynol gennym: hemoglobin, ferritin, mynegai dirlawnder transferrin, calsiwm, ffosffad, hormon parathyroid, protein C-adweithiol, cyflymder gwaddodi, ac albwmin.

echdynnu DNA, adeiladu llyfrgell, a dilyniannu

Echdynnwyd DNA fecal gan Powersoil DNA Isolation Kit MoBio, ac adeiladwyd llyfrgell dilyniannu rRNA 16S yn targedu'r rhanbarthau gor-newidiol V3 a V4.

Perfformiwyd dilyniannu ar lwyfan MiSeq (2 × 300). Perfformiwyd adeiladu tabl OTU, aseiniad tacsonomig, a dadansoddiadau disgrifiadol ac ystadegol gan ddefnyddio fersiwn R 3.4.2. a phecynnau gwahanol (DADA 2, vega, ggplot, phyloseq) a chronfa ddata rRNA Greengenes.

Data a dadansoddiad ystadegol

Defnyddiwyd Primer v7 (PRIMER-e, Auckland, Seland Newydd) ar gyfer cyfrifo'r mynegeion amrywiaeth, dadansoddiad canrannau tebygrwydd (SIMPER), a dadansoddiad aml-amrywedd, yn bennaf dadansoddiad o debygrwydd (ANOSIM) dadansoddiad un ffordd a dadansoddiad aml-amrywedd cyfnewidiol o amrywiant ( PER- MANOVA; gan ddefnyddio data gwraidd sgwâr wedi'i drawsnewid, tebygrwydd Bray-Cwrtis a 4999 o drawsnewidiadau gweddilliol o dan fodel llai) a ddefnyddir i brofi arwyddocâd Beta-amrywiaeth. Defnyddiwyd canran y data OTU fesul sampl ar gyfer y dadansoddiadau hyn, wedi'i ddilyn gan ddata â gwreiddiau sgwâr wedi'i drawsnewid, matricsau tebygrwydd o fathau o ddata tebygrwydd, gan ddefnyddio tebygrwydd Bray-Curtis, ychwanegu gwerth ffug, a phrofi 4999 o drynewidiadau. Defnyddiwyd STAMP ar gyfer dadansoddi proffiliau tacsonomig ymhlith grwpiau o samplau a chyfrifo gwahaniaethau ystadegol [28].

Ar gyfer triniaeth ystadegol o'r data clinigol, defnyddiwyd meddalwedd dadansoddi ystadegol Pecyn Ystadegol ar gyfer Gwyddorau Cymdeithasol (SPSS) 26.0 ar gyfer MAC OS. Disgrifiwyd y newidynnau categori-cal trwy amleddau cymharol (y cant) tra disgrifiwyd newidynnau parhaus gan ddefnyddio gwyriad safonol cymedrig ± (SD). Fe wnaethom gymhwyso prawf annibyniaeth Chi-sgwâr pan oedd yn briodol i ddadansoddi damcaniaethau ynghylch y newidynnau categorïaidd a phrawf-t Myfyrwyr ynghylch newidynnau parhaus. Ystyriwyd lefel o 0.05 yn arwyddocaol.

Canlyniadau

Nid oedd y prif baramedrau clinigol yn wahanol rhwng cleifion a neilltuwyd i grwpiau CA neu SFO ar y llinell sylfaen (Tabl 1). Rydym wedi sylwi, yn y grŵp CA, fod mwy o achosion, ond nid yn ystadegol arwyddocaol, yn hanes gorbwysedd rhydwelïol, dyslipidemia, clefyd fasgwlaidd ymylol, strôc, cardiomyopathi isgemig nag yn y grŵp SFO. Roedd y cleifion a neilltuwyd i’r grŵp SFO yn cyflwyno mwy o achosion o gathetr fel mynediad fasgwlaidd, ond nid oedd yn ystadegol arwyddocaol ychwaith.

Ar y gwaelodlin, ni chafodd unrhyw glaf ei drin â SFO, cafodd rhai eu trin â CA yn y ddau grŵp o driniaeth, ac nid oes gan ddau glaf yn y grŵp SFO unrhyw driniaeth sy'n rhwymo ffosffad. Ar yr adeg hon, ni welsom unrhyw wahaniaethau ystadegol arwyddocaol o ran paramedrau labordy, megis hemoglobin, ferritin, mynegai dirlawnder transferrin, calsiwm, ffosffad, hormon parathyroid, protein C-adweithiol, cyflymder gwaddodi, ac albwmin (Tabl 2). Gyda'i gilydd, rydym yn arsylwi yn y grŵp SFO ar waelodlin mynegeion dirlawnder transferrin uwch, a gwerthoedd is o C-adweithiol protein na'r grŵp CA, ond nid oedd y gwahaniaethau hynny yn ystadegol signif- cant. Gwelsom hefyd mewn cleifion a neilltuwyd i'r grŵp CA, duedd gynyddol i hyperffosffademia ar y gwaelodlin, ond nid oedd hyn ychwaith yn ystadegol arwyddocaol.

Yn Nhabl 2, rydym yn cyflwyno esblygiad paramedrau'r labordy dros y gwahanol bwyntiau amser. Yn y grŵp CA, canfuom fod yr 20-wythnos o galsiwm yn uwch nag yn y grŵp SFO gydag arwyddocâd ystadegol (p=0.02). Cynyddwyd cyflymder gwaddodi yn y grŵp CA yn wythnos 12 y driniaeth o'i gymharu â'r grŵp SFO, gyda

Tabl 1 Nodweddiad clinigol cleifion sy'n cael calsiwm asetad (CA) neu swcroferric oxyhydroxide (SFO) fel cyfrwng rhwymo ffosffad

Mae gwerthoedd yn golygu ± SD neu amleddau cymharol ( y cant ). Ni chanfuwyd unrhyw wahaniaethau ystadegol rhwng CA ac SFO

Tabl 2 Data clinigol labordy ar gyfer cleifion sy'n cael calsiwm acetate (CA) neu swcroferric oxyhydroxide (SFO) fel asiant rhwymo ffosffad

Mae gwerthoedd yn fodd ± DC. *Mae gwerthoedd mewn SFO yn sylweddol wahanol i CA

arwyddocâd ystadegol (p {{0}}.04). Hefyd, arsylwyd albwmin is ystadegol arwyddocaol yn y grŵp SFO yn ystod 20-driniaeth wythnos pan fyddwn yn ei gymharu â'r grŵp CA (p < 0.01).="" roedd="" y="" lefelau="" ferritin="" yn="" y="" ddau="" grŵp="" ar="" y="" llinell="" sylfaen="" ac="" ar="" ôl="" 20="" wythnos="" o="" driniaeth="" yn="" uchel="" yn="" y="" ddau="" grŵp,="" ac="" mae'r="" ddau="" grŵp="" yn="" cael="" lefelau="" arferol="" o="" ffosffad="" ar="" 20="" wythnos="" o="" driniaeth,="" heb="" unrhyw="" wahaniaethau="" ystadegol="" arwyddocaol.="" roedd="" lefelau="" mynegeion="" dirlawnder="" transferrin,="" parathormone,="" protein="" c-adweithiol,="" cyflymder="" gwaddodi,="" ac="" albwmin,="" ar="" 20="" wythnos="" o="" driniaeth="" yn="" debyg="" yn="" y="" ddau="">

Casglwyd samplau o'r holl bwyntiau amser (gwaelodlin, wythnos 4, wythnos 12, ac wythnos 20) mewn wyth allan o'r deuddeg unigolyn, mewn cyfanswm o 38 o samplau carthion a gwaed. O'r set gychwynnol o 12 o gleifion, tynnodd claf 7 (grŵp SFO) y gorau oherwydd ei fod yn dod i ysbyty arall oherwydd rhesymau clinigol ac ni allem bellach fonitro'r holl newidynnau sy'n berthnasol i'r astudiaeth, derbyniodd claf 3 (grŵp SFO) aarentrawsblaniad cyn casglu 20-samplau wythnos, bu farw claf 9 (grŵp SFO) cyn casglu 12-samplau wythnos, a dim ond samplau o ansawdd da ar gyfer microbiome perfedd y gallem eu cael o wythnos 12 ac wythnos 20 ar glaf 8 (grŵp SFO).

Dangosodd y set o 38 o samplau fecal dros 2 filiwn o ddarlleniadau, ac yna eu dosbarthu gan ddefnyddio cronfa ddata Greengenes. Canfuwyd nifer uchel o ASVs (33,734) ymhlith y samplau a brofwyd ac fe'u dosbarthwyd fel rhai sy'n perthyn i'r deyrnas Bacteria. Mesurwyd amrywiaeth Shannon ym mhob sampl a dangosodd y grŵp o 38 sampl werthoedd ar gyfer amrywiaeth Shannon yn amrywio o 6.2 i 7.7.

Yn ddiddorol, canfuom fod pob claf yn wahanol iawn ymhlith ei gilydd (p=0.001) wrth gymharu un claf â chlaf arall ar y gwaelodlin (Ffig. 1A). Cadwyd y gwahaniaethau hyn ymhlith y cleifion ar hyd yr 20 wythnos o driniaeth; nid oedd unrhyw wahaniaethau arwyddocaol (p> 0.05) pan gafodd y samplau eu grwpio fesul wythnos o driniaeth (llinell sylfaen, 4, 12, neu 20 wythnos). Mae'n bwysig nodi bod microbiome'r perfedd wedi'i ganfod yn sefydlog trwy gydol yr 20 wythnos o astudio mewn cleifion a oedd ar CA cyn yr astudiaeth ac yn honni bod y therapiwtig hwnnw o fewn protocol yr astudiaeth, a hefyd mewn cleifion a newidiodd therapiwteg sy'n rhwymo ffosffad (o ddim triniaeth , CA neu galsiwm carbonad i CA neu SFO).

Pan wnaethom gymharu proffiliau microbaidd y cleifion a gafodd eu trin â CA yn erbyn SFO o ystyried yr holl bwyntiau amser, canfuom wahaniaethau ystadegol (Ffig. 1 B); a chadarnhawyd y gwahaniaethau hyn gan ANOSIM (p=0.002) a PERMANOVA (p=0.001). Gwnaed y dadansoddiad ystadegol hwn yn annibynnol ar y gwahaniaethau a welwyd ar y llinell sylfaen.

Astudiwyd y cymunedau bacteriol a Bacteroi- detes a Firmicutes oedd y ffyla mwyaf cyffredin a ddarganfuwyd yn y samplau fecal, ac yna Proteobacteria, Actinobacte- ria, a Verrucomicrobia. Gan edrych am wahaniaethau cyfansawdd mwy penodol, gwnaethom gymharu lefelau tacsonomaidd lluosog ymhlith y samplau hyn. Wrth ddadansoddi'r bacteriol

Ffig. 1 Prif Ddadansoddiad Cydlynol (PCO) o'r proffiliau microbiom ar gyfer cleifion lluosog. B Prif Ddadansoddiad Cydlynol (PCO) o'r proffiliau microbiom ar gyfer triniaethau cyffuriau (calsiwm asetad yn erbyn sucroferric oxyhydroxide)

cyfansoddiad ar lefel y genws, Bacteroides oedd y mwyaf cyffredin yn y ddau grŵp o gleifion, yn annibynnol os cawsant eu trin â naill ai CA neu SFO (Ffig. 2). Roedd y proffiliau microbaidd yn wahanol iawn ymhlith cleifion ac, unwaith eto, roedd y dadansoddiad clystyru yn grwpio samplau o'r un claf yn annibynnol ar y driniaeth a ddilynwyd a chyfnod y driniaeth (gwaelodlin, 4, 12, neu 20 wythnos).

Pan fyddwn yn ystyried yr holl bwyntiau amser (pob claf a phob wythnos), roedd yn bosibl canfod gwahaniaethau ystadegol (p < 0.05)="" ar="" gyfer="" y="" cymunedau="" microbaidd="" wrth="" gymharu'r="" samplau="" ar="" gyfer="" newidynnau="" lluosog,="" gan="" gynnwys="" rhyw,="" cardiomyopathi="" isgemig,="" y="" defnydd="" o="" gathetr="" fel="" mynediad="" fasgwlaidd,="" neu="" oedran="" (trefnwyd="" y="" cleifion="" yn="" dri="" grŵp:="" o="" dan="" 45,="" ystod="" 61-69,="" uwch="" na="" 71).="" o'r="" fath="" ystadegol="" difer-="" ences="" ni="" ellid="" ei="" arsylwi="" pan="" fydd="" pob="" cam="" triniaeth="" (gwaelodlin,="" 4,="" 12,="" neu="" 20="" wythnos)="" yn="" cael="" ei="" ystyried="" ar="" wahân;="" felly,="" ni="" welwyd="" unrhyw="" wahaniaethau="" ar="" gyfer="" y="" newidynnau="" rhyw,="" oedran,="" cardiomyopathi="" isgemig,="" defnydd="" cathetr,="" a="" thriniaethau="" cyffuriau="" (ca="" yn="" erbyn="">

Trafodaeth

Dyma'r astudiaeth gyntaf sy'n cymharu'r newidiadau ym microbiome perfedd cleifion haemodialysis sy'n cymryd CA yn erbyn SFO. Yn ein hastudiaeth, nid oedd unrhyw wahaniaethau cyson yng nghyfansoddiad bacteriol microbiome'r perfedd rhwng yr asiantau rhwymo ffosffad gwahanol hyn. Er i ni ddod o hyd i wahanol broffiliau microbiome wrth gymharu'r ddau grŵp o driniaeth, roedd y proffil gwahanol hwn eisoes yn bresennol ar y llinell sylfaen, ac nid oedd triniaeth hirdymor yn addasu'r amrywiaeth hon yn unrhyw un o'r ddau grŵp. Felly, dim newidiadau sylweddol

Ffig. 2 Dadansoddiad clystyru a phroffiliau microbiom (ar lefel genws) ar gyfer y samplau a ystyriwyd yn yr astudiaeth hon

arsylwyd dros wahanol bwyntiau amser (gwaelodlin, wythnos 4, wythnos 12, wythnos 20) mewn pynciau haemodialysis microbiome perfedd a gafodd eu trin â CA yn erbyn y rhai sy'n cael eu trin â SFO.

Mae microbiome perfedd ein cleifion yn unol ag adroddiadau blaenorol, a ddominyddir gan Bacteroidetes a Firmicutes phyla, sef Actinobacteria, Proteobacteria, a Verrucomi- crobia yn ail linell y cytrefiad [29]. Fel y trafodwyd yn helaeth yn flaenorol, mae gan gleifion CKD nifer o ffactorau cynhenid ​​​​sy'n hyrwyddo dysbiosis perfedd ar wahân i'r therapïau ffarmacolegol, sef llai o gludiant colonig, newid gallu treulio, asidosis metabolig, oedema wal berfeddol, ac un o'r pwysicaf, y coluddyn uchel. argaeledd tocsinau uremig. O gymharu â rheolaethau iach, mae cleifion sy'n cael haemodialysis yn cyflwyno mwy o Bacteroidetes [30], sydd hefyd yn ategu canlyniadau ein hastudiaeth.

Ychydig o dystiolaeth sydd am effaith rhwymwyr ffosffad ar ficrobiome y perfedd [25]. Mae astudiaethau sy'n asesu effeithiau rhwymwyr ffosffad sy'n seiliedig ar galsiwm, gan gynnwys CA, ar ficrobiome perfedd cleifion CKD, gan ddadansoddi samplau fecal, yn ddiffygiol [31]. Mae Trautvetter et al. [32], gwelwyd cynnydd o gyfanswm asidau brasterog cadwyn fer fecal a digonedd cymharol uwch o'r genws Clostridium XVIII mewn unigolion iach sy'n cymryd calsiwm carbonad. Mae Navarro-Gonzalez et al. [22], dadansoddodd samplau serwm cleifion hemodialysis a gymerwyd naill ai'r sevelamer rhwymwr ffosffad nad yw'n seiliedig ar galsiwm neu'r rhwymwr ffosffad sy'n seiliedig ar galsiwm CA a daeth i'r casgliad bod triniaeth â sevelamer yn gysylltiedig â gostyngiad sylweddol mewn protein C-adweithiol uchel-sensitif, IL -6, endotoxin serwm, a chrynodiadau CD14 hydawdd rhagfynegwyr annibynnol o farwolaethau mewn cleifion haemodialysis.

Mae SFO yn rhwymwr ffosffad sy'n seiliedig ar haearn, ac roedd data'n awgrymu y gallai'r haearn sydd yn y cyfansoddyn newid microbiota'r perfedd oherwydd bod rhai bacteria perfedd yn defnyddio haearn i gynyddu digonedd cymharol [26, 33, 34]. Ar ben hynny, dangoswyd y gallai cynnydd yn faint o haearn sy'n cyrraedd y colon hyrwyddo ffyrnigrwydd rhai bacteria pathogenig ac amgylchedd sydd o blaid eiddil [20, 35]. Ond er gwaethaf y dystiolaeth hon, mae ein hastudiaeth yn dangos nad yw'n ymddangos bod triniaeth SFO mewn cleifion haemodialysis yn addasu microbiome'r perfedd, na thriniaeth CA.

Roedd Ling Lau et al. [27], cymharodd microbiome fecal a thocsinau uremig mewn samplau serwm rhwng llygod mawr CKD (a gafodd neffrectomi 5/6) a llygod mawr arferol, a neilltuwyd ar hap i ddeiet rheolaidd neu ddeiet sy'n cynnwys cyfradd cit ferric 4 y cant am 6 wythnos. Sylwasant fod gan lygod mawr CKD niferoedd cymharol is o rai Firmicutes a Lactobacillus ac amrywiaeth microbau perfedd is o gymharu â llygod mawr arferol, ond disgrifiwyd hefyd bod triniaeth sitrad fferrig mewn llygod mawr CKD yn cynyddu amrywiaeth bacteriol bron i lefelau a welwyd mewn llygod mawr rheoli a bod y driniaeth hon. nid oedd yn cynyddu tocsinau uremig. Mewn astudiaeth ddiweddar, Wu et al. [36], o'i gymharu â chleifion hemodialysis perfedd microbiome trin â naill ai calsiwm carbonad neu citrad ferric. Sylwasant ar amrywiaeth ficrobaidd sylweddol uwch yn y grŵp a gafodd ei drin â sitrad fferrig, gyda mwy o Bacteroidetes a llai o Firmicutes.

Hyd y gwyddom, dim ond un astudiaeth a berfformiwyd mewn bodau dynol ynghylch effaith SFO ar ficrobiome y perfedd. Mae Iguchi et al. [37], o gymharu newidiadau 3 mis ym microbiome perfedd a thocsinau uremig cleifion haemodialysis a gafodd eu trin â naill ai SFO yn erbyn dim triniaeth ar gyfer hyperffosffatemia. Ni chanfuwyd ychwaith unrhyw newidiadau ym microbiome'r perfedd mewn cleifion a gafodd eu trin â SFO dros amser. Felly, mae ein hastudiaeth yn cadarnhau sefydlogrwydd hirdymor microbiome'r perfedd mewn cleifion haemodialysis sy'n cael eu trin â SFO am 5 mis.

Pwynt pwysig arall i'w drafod yw ein bod yn ein hastudiaeth wedi sylwi ar wahaniaethau mewn microbiome perfedd cleifion haemodialysis o'i gymharu yn ôl oedran neu ryw, ond nid ydym wedi dod o hyd i wahaniaethau pan fyddwn yn eu cymharu yn ôl grŵp o driniaeth (CA yn erbyn SFO). Yn unol, mae rhai newidiadau wedi'u dangos yn y microbiome perfedd trwy heneiddio [38]. Mae cleifion oedrannus, yn enwedig y rhai â sgorau eiddilwch uchel, yn cyflwyno cyfrannau cymharol o Bacteroidetau yn bennaf, llai o amrywiaeth microbaidd, a gostyngiadau mewn Bifdobacte-ria, Bacteroides/Prevotella, Lactobacillus, a chlwstwr Clostridium IV, o'u cymharu ag unigolion ifanc, sy'n cyflwyno mwy o amrywiaeth microbaidd. a chyfrannau uwch o Firmicutes, ymhlith eraill [39, 40]. Mae tystiolaeth gynyddol hefyd yn cefnogi bod newidiadau ym microbiome y perfedd wrth gymharu menywod a dynion [41, 42]. Yn ein hastudiaeth, gwelwyd rhai gwahaniaethau ym microbiome y perfedd yn ôl rhyw ac oedran, ond roedd y gwahaniaethau a ganfuwyd ymhlith pob claf yn llawer mwy amlwg.

O ran canfyddiadau labordy, yn ôl y disgwyl, cyflwynodd cleifion a gafodd eu trin â'r rhwymwr ffosffad sy'n seiliedig ar galsiwm CA lefelau calsiwm uwch na'r rhai a gafodd eu trin â SFO. Gwelsom, er nad oedd yn arwyddocaol yn ystadegol, lefelau uwch o baramedrau llidiol, megis cyflymder gwaddodi, protein C-adweithiol, a ferritin yn y grŵp CA o gymharu â'r grŵp SFO; disgrifiwyd effaith pleiotropig o'r fath ar leihau llid ar gyfer rhai rhwymwyr ffosffad heblaw rhwymwyr calsiwm [43].

Mae'n hanfodol ystyried bod ein hastudiaeth yn cyflwyno rhai cyfyngiadau. Ar y naill law, mae maint sampl y claf yn fach, felly mae'n anodd dod i gasgliadau cadarn, yn enwedig ar effeithiau'r newidynnau clinigol a biocemegol a ddadansoddwyd. I ddilysu ein canlyniadau, mae angen astudiaeth fwy, gyda nifer cynyddol o gleifion. Ar y llaw arall, mae gan ein cleifion gefndiroedd gwahanol, gyda chyd-forbidrwydd nodedig a all ddylanwadu ar ficrobiome y perfedd. Felly, mae ein hastudiaeth yn rhybuddio am yr amrywioldeb uchel o broffiliau a geir ar ficrobiome perfedd cleifion sy'n derbyn rhwymwyr ffosffad. Mae gwahaniaethau o'r fath yn cyfyngu ar unrhyw gasgliadau a gwahaniaethau ychwanegol a geir ymhlith y cleifion sy'n derbyn rhwymwyr ffosffad gwahanol.

Fel y gwnaethom adrodd, i chwilio a allai newidyn clinigol penodol ddylanwadu ar y proffil microbiome gwahaniaethol hwn, dadansoddwyd y prif baramedrau clinigol ar waelodlin ein cleifion a chanfuom unrhyw wahaniaethau ystadegol arwyddocaol rhwng y ddau grŵp triniaeth. Roedd cleifion 5 a 6 ychydig allan o drefn a gellir nodi bod claf 5 wedi derbyn vancomycin a tobramycin am 3 wythnos, tra bod claf 6 wedi cyflwyno dolur rhydd cronig gyda diwylliannau negyddol dro ar ôl tro a syndrom gwastraffu posibl yn gysylltiedig.

Yn ein hastudiaeth, ni welsom unrhyw newidiadau ym micro-biome perfedd ein cleifion haemodialysis ar ôl 20 wythnos o driniaeth, yn annibynnol ar y rhwymwr ffosffad. Am y foment, wrth ddewis rhwymwr ffosffad, dylem ddibynnu ar eu pŵer ar leihau ffosffad serwm, y baich bilsen, y cysylltiad â'r cynnydd calcheiddio fasgwlaidd, y digwyddiadau niweidiol, neu'r goddefgarwch gastroberfeddol [44-47]; er bod disgwyl dylanwad y rhwymwyr ffosffad hyn ar ficrobiome perfedd, ac mae'n dal yn bosibl, am y tro, nid oes tystiolaeth y dylai'r agwedd hon ddylanwadu ar ein hymagwedd wrth drin hyperffosffademia.

I gloi, nododd ein hastudiaeth nad oedd 5-triniaeth mis gyda naill ai CA neu SFO yn addasu amrywiaeth gwaelodlin na chyfansoddiad bacteriol gwaelodlin mewn cleifion haemodialysis, ond rhybuddion am yr amrywioldeb uchel o broffiliau a geir ar ficrobiome perfedd cleifion CKD.

Diolchiadau Amherthnasol.

Cyfraniadau awdur IB, FG, a JB genhedlu a chyfrannu at ddyluniad yr astudiaeth; Cyfrannodd AMB, IB, a FG at gynhwysiant cleifion a rheolaeth glinigol; AMB, IB, a FG. cyfrannu at samplu a chasglu data, cyfrannodd AV, MNJ., RP at echdynnu DNA fecal a dilyniannu rRNA 16S; Cyfrannodd RA, AV, MNJ, RP, a BSM at adeiladu'r tabl OTU, yr aseiniad tacsonomig a'r data a'r dadansoddiad ystadegol; Cyfrannodd AMR, RA, IB, FG, BSM at ddrafftio'r llawysgrif a darparodd adolygiadau beirniadol o'r llawysgrif. Roedd gan yr awduron fynediad llawn i'r data, a'r awdur cyfatebol oedd â'r cyfrifoldeb terfynol am gyflwyno'r llawysgrif i'w chyhoeddi.

Ariannu Ariannwyd yr ymchwil hwn gan FEDER—Cronfa Ewropeaidd Cronfa Rhanbarthol Desenvolvimento trwy Raglen Weithredol COMPETE 2020 ar gyfer Cystadleurwydd a Rhyngwladoli (POCI), Portiwgal 2020, a chan gronfeydd Portiwgaleg trwy FCT / MCTES yn fframwaith y prosiect MicroMOB "POCI{" {2}} FEDER-029777 / PTDC/MEC-MCI/29777/2017".

Argaeledd data Mae'r setiau data a ddefnyddiwyd a/neu a ddadansoddwyd yn ystod yr astudiaeth gyfredol ar gael gan yr awdur cyfatebol ar gais rhesymol.

Argaeledd cod Amherthnasol.

Datganiadau

Gwrthdaro buddiannau Nid oes gan AMR, RA, IB, FG, AV, MNJ, RP, JB, BSM unrhyw wrthdaro buddiannau i'w ddatgan.

Cymeradwyaeth moeseg Cymeradwywyd yr astudiaeth hon gan Bwyllgor Moeseg Ymchwil Clinigol yr Ysbyty Universitari Germans Trias i Pujol (PI-16–169, NCT5551048) ac roedd yn cydymffurfio â'r egwyddorion a amlinellwyd yn Natganiad Helsinki.

Caniatâd i gymryd rhan Cafodd yr holl gyfranogwyr eu recriwtio'n wirfoddol ar ôl derbyn gwybodaeth fanwl am brotocol yr astudiaeth. Cafwyd caniatâd gwybodus ysgrifenedig gan yr holl gleifion.

Caniatâd cyhoeddi Amherthnasol.

Mynediad Agored Mae'r erthygl hon wedi'i thrwyddedu o dan Drwydded Ryngwladol Creative Commons Attribution 4.0, sy'n caniatáu defnyddio, rhannu, addasu, dosbarthu ac atgynhyrchu mewn unrhyw gyfrwng neu fformat, cyn belled â'ch bod yn rhoi credyd priodol i'r awdur gwreiddiol( s) a’r ffynhonnell, darparu dolen i’r drwydded Creative Commons, a nodi a wnaed newidiadau. Mae'r delweddau neu ddeunydd trydydd parti arall yn yr erthygl hon wedi'u cynnwys yn nhrwydded Creative Commons yr erthygl, oni nodir yn wahanol mewn llinell gredyd i'r deunydd. Os nad yw deunydd wedi'i gynnwys yn nhrwydded Creative Commons yr erthygl ac na chaniateir i'ch defnydd arfaethedig dan reoliadau statudol neu ei fod yn fwy na'r defnydd a ganiateir, bydd angen i chi gael caniatâd yn uniongyrchol gan ddeiliad yr hawlfraint. I weld copi o'r drwydded hon, ewch i http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/.