Nodi ESTs Ymatebol i Hydrogen Perocsid sy'n Ymwneud â Biosynthesis Glycoside Phenylethanoid mewn Diwylliant Cell Salsa Cistanche

Cyswllt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-bost:audrey.hu@wecistanche.com

J. CHEN et al

Haniaethol
Mae hydrogen perocsid yn elicitor anfiotig effeithiol a all gymell biosynthesis metabolyn eilaidd mewn planhigion. Rydyn ni'n dangos hynny yn niwylliant ataliad celloedd planhigyn meddyginiaethol sy'n goddef halenCistanchesalsa, cynhyrchu cydrannau bioactifffenylethanoidglycosidauCynyddwyd (PeGs) ar ôl triniaeth H2O2. Adnabod genynnau sy'n gysylltiedig â PeGs(ffenylethanoidglycosidau)biosynthesis yr effeithiwyd arno gan H2O2, fe wnaethom adeiladu llyfrgell hybrideiddio ataliad tynnu o enynnau ymatebol H2O2 gan ddefnyddioCistanchesalsallinell gell a nododd 105 o dagiau dilyniant a fynegwyd (ESTs) ac 85 o enynnau. Dangosodd dadansoddiadau anodi swyddogaethol llyfrgell EST a ontoleg genynnau genynnau yn ymwneud ag ymatebion straen amrywiol, biosynthesis metabolion eilaidd, a rheoleiddio trawsgrifiadol. Yn eu plith, fe wnaethom nodi dau enyn yn ymwneud â'r PeGs(ffenylethanoidglycosidau)llwybr biosynthesis (4-coumate coenzyme A ligase a sinamate 4-hydroxylase), a dau ffactor trawsgrifio math WRKY. Dadansoddwyd mynegiadau genynnau dethol ar ôl y driniaeth H2O2 gan RT-qPCR. Trawsgrifiad cynnar cynyddol o PeG(ffenylethanoidglycosidau)datgelodd genynnau llwybr biosynthesis ar ôl y driniaeth fod PeG wedi'i achosi gan H2O2(ffenylethanoidglycosidau)biosynthesis trwy uwch-reoleiddio ei enynnau allweddol.
Allweddeiriau ychwanegol: cinnamate-4-hydroxylase, 4-coumate coenzyme A ligase, hybridization subtractive subtractive.Cistanchesalsa. ffenylethanoidglycosidau.

Rhagymadrodd

Cistanchesalsayn barasit planhigyn lluosflwydd ar wraidd Haloxylos ammodendrun, ac mae'n tyfu yn ardal anialwch gorllewin Tsieina. Am ganrifoedd,Cistancherhywogaethau wedi cael ei ddefnyddio fel meddygaeth lysieuol traddodiadol (Wang et al. 2012). Mae cydrannau bioactif ynffenylethanoidglycosidau(PeGs) sy'n cael effaith hynod ar glirio rhywogaethau ocsigen adweithiol (ROS), amddiffyn rhag ymbelydredd, gwella imiwnedd, a gwrth-heneiddio (Nan et al. 2013). PeGs(ffenylethanoidglycosidau)biosynthesis ynCistancheyn cael ei gychwyn o ffenylalanin (Ffig. 1 Suppl.) a chaiff asid caffeig wedi'i syntheseiddio ei glycosyleiddio ymhellach i ffurfio PeGs amrywiol(ffenylethanoidglycosidau)(Wang et al. 2012). Tri phrif PeG(ffenylethanoidglycosidau), echinacoside, acteoside, a 2'-acetylacteoside, yn cael eu hystyried fel y cydrannau mwyaf gweithredol ynCistanche(Kobayashi et al. 1984). Er mwyn cyfoethogi eu cynnwys ynCistanchediwylliant celloedd, profwyd amrywiol elicitors gan gynnwys chitosan, putrescine, Ag plus , a straen osmotig (Ouyang et al. 2005a, b, Cheng et al. 2005, 2006, Liu et al. 2007, Liu a Cheng 2008). Fodd bynnag, genynnau sy'n ymwneud â PeGs(ffenylethanoidglycosidau)biosynthesis ynCistanche, yn bennaf genynnau llwybr metaboledd ffenylalanîn, wedi'u nodi'n anaml. Dim ond genyn sy'n amgodio ffenylalanine amonia-lyase (PAL) a nodwyd yn ddiweddar yn Cistanche deserticola (Hu et al. 2011). Amgodio genynnau eraill, er enghraifft, sinamate-4-hydroxylase (C4H), a allai gataleiddio trosi sinamate i asid cumarig, a 4-coumate coenzyme A ligase (4CL), genyn hanfodol ar gyfer lignin a flavanoids biosyntheses, heb eu darganfod ynCistanche.
Fe wnaethon ni ddefnyddio diwylliant celloeddCistanchesalsai astudio PeGs(ffenylethanoidglycosidau)biosynthesis a mynegiant genynnau cysylltiedig. Fe wnaethom hefyd ymchwilio i effaith elititor effeithiol H2O2 ar PeGs(ffenylethanoidglycosidau)biosynthesis. Ymhellach, i ddod o hyd i genynnau ymatebol cynnar sy'n ymwneud â PeGs(ffenylethanoidglycosidau)biosynthesis, cynhaliom hybrideiddio ataliad tynnu (SSH) i adeiladu llyfrgell cDNA o enynnau ymatebol H2O.

Ffig. 1. Mynegiant genynnau cymharol a bennir gan RT-qPCR ar ôl triniaeth H2O2. CsWRKY1 - Ffactor trawsgrifio WRKY (Contig07), CsC4H1 - sinamate 4-hydroxylase (Contig09), Cs4CL1 - 4-courate: ligase (Contig03), CsHSP1 - protein sioc gwres 70 kDa (Contig 01), a CsSOD1 - superoxide dismutase (Contig16). Cafodd celloedd eu trin â 80 ug dm-3 H2O2 mewn cyfrwng hylif am 2 awr a chymharwyd mynegiadau â rheolydd wedi'i drin â dŵr. Modd plws - DC o dri ailadrodd biolegol; * - P < 0.05,="" **="" -="" p=""><>

Defnyddiau a dulliau

Sefydlwyd llinell gell CS2001 o betalau oCistanchesalsa(CA Mey.) Beck yn casglu yn nhalaith Neimenggu ac yn isddiwylliedig. Roedd y dull diwylliant yn debyg i brotocol a gyhoeddwyd yn flaenorol (Liu et al. 2007). Yn gyffredinol, defnyddiwyd cyfrwng solet Murashige a Skoog (1962; MS) ar gyfer isddiwylliant a chyfrwng hylifol ar gyfer PeGs(ffenylethanoidglycosidau)biosynthesis (dyma'r cyfrwng MS addasedig wedi'i ategu â 30 g dm-3 glwcos a 2.{9}} mg dm-3 indole-3-asid asetig). Ar gyfer triniaeth H2O2, cafodd 5.0 ± 0.2 g o gelloedd mewn cyfnod twf cyflym, fel arfer 20 i 30 d ar ôl iddynt gael eu his-feithrin yn y cyfrwng solet, eu brechu i gyfrwng hylif 50 cm3 mewn fflasg Erlenmeyer 250 cm3 ac wedi'u meithrin yn y tywyllwch gyda neu heb grynodiadau H2O2 gwahanol. Y PeGs(ffenylethanoidglycosidau)dadansoddwyd cynnwys ar ôl 10 d anwythiad gan H2O2 yn unol â dull a gyhoeddwyd yn flaenorol (Liu et al. 2007) yn seiliedig ar gromatograffaeth hylif perfformiad uchel cyfnod gwrthdro gyda elution graddiant methanol.

Casglwyd y celloedd 2 h ar ôl y driniaeth H2O2 o'r cyfrwng trwy bapur hidlo gan ddefnyddio twndis Büchner, ac yna cawsant eu rhewi mewn nitrogen hylifol a'u malu'n bowdr. Cafodd pob 2 g o bowdr cell ei lysu gan ddefnyddio cymysgedd o 1 cm3 o 2-mercaptoethanol, 1 cm3 o 200 g dm{{10}} sarcosyl, a 8 cm3 o glustog GTC (5 M guanidinium isothiocyanate, 62.5 mM Tris-HCl, pH 8.0, 6.25 mM EDTA, pH 8.0, thiourea 5 mM, a 10 mM dithiothreitol). Yna deorwyd y celloedd ar rew am 15 munud, yna ychwanegwyd 1/3 cyfaint o 8.5 M CH3COOK, pH 6.0, a deorwyd y celloedd ar rew am 15 munud ac yna eu centrifugio ar 15 000 g am 15 munud . Ychwanegwyd y supernatant at gyfaint cyfartal o isopropanol i waddodi cyfanswm RNA. Cafodd cyfanswm yr RNA ei buro ymhellach gan becyn bach RNeasy (Qiagen, Hilden, UDA) yn unol â chyfarwyddiadau'r gwneuthurwr. Cafodd RNA negesydd ei ynysu o gyfanswm RNA gan ddefnyddio pecyn midi mRNA Oligotex (Qiagen).

ffenylethanoidglycosidaumewnCistancheSalsa

Cynhyrchwyd llyfrgell SSH o reolaeth a chafwyd samplau o gelloedd 30 y cant H2O 2 awr ar ôl y codiad gan ddefnyddio pecyn tynnu cDNA a ddewiswyd gan PCR (Clontech, Mountain View, UDA). Ar gyfer adeiladu llyfrgelloedd, cafodd y cynhyrchion eu puro ar wahân gan ddefnyddio pecyn puro gel (Qiagen) a'u clonio i fector pGEM gan ddefnyddio pecyn clonio TA (Tiangen, Beijing, Tsieina). Cafodd plasmidau o glonau annibynnol eu hynysu a'u dilyniannu gan ddefnyddio paent preimio T7. Defnyddiwyd yr holl ddilyniannau tag dilyniant a fynegwyd (EST) o'r llyfrgell (gyda'r dilyniannau fector wedi'u tynnu) ar gyfer cydosod contig gyda CAP3 (http://doua.prabi.fr/software/cap3). Cafodd yr ESTs eu grwpio yn contigs a singletons; cawsant eu defnyddio ar gyfer chwiliad homoleg gan ddefnyddio rhaglen BLASTx yn NCBI (http://blast.ncbi. nlm.nih.gov). Yna cafodd y dilyniannau eu hanodi, eu dadansoddi, a'u dosbarthu yn ôl termau ontoleg genynnau (GO) gan ddefnyddio Blast2GO (http://www.blast2go.com).
Perfformiwyd adwaith cadwyn polymeras meintiol amser real (RT-qPCR) yn ôl Bustin et al. (2009). Cafodd y samplau cDNA eu syntheseiddio gan ddefnyddio pecyn adweithydd PrimeScript RT (Takara, Dalian, Tsieina) o 0.5 ug o gyfanswm RNA. Cynhaliwyd RT-qPCR gan ddefnyddio citiau SYBR Premix Ex Taq II a ROX plus (Takara) ar system PCR amser real ABI 7300 (Applied Biosystems, Foster City, UDA) gyda thri atgynhyrchiad technegol. Cynlluniwyd preimio gan ddefnyddio meddalwedd Primer3 ar-lein yn unol â'r cyfarwyddyd a ddarparwyd gan Takara; rhestrir y paent preimio a ddefnyddiwyd yn yr astudiaeth hon yn Nhabl 1 Suppl. Cafodd y mynegiadau genynnau eu normaleiddio i RNA 18S, yr oedd ei fynegiant yn sefydlog yn yr holl samplau.

Dadansoddwyd y canlyniadau gan ddefnyddio fersiwn R 3.1.1, a dilyswyd arwyddocâd gwahaniaethau gan brawf-t y Myfyriwr.

Canlyniadau

Biosynthesis pob un o'r tri phrif PeG a achosir gan hydrogen perocsid(ffenylethanoidglycosidau)mewnCistanchesalsacelloedd atal (Tabl 1) ond heb unrhyw effaith amlwg ar dwf celloedd (Ffig. S2). Cynyddodd cynnwys echinacoside eisoes ar ôl y driniaeth 10 ug dm-3 H2O2 (P < 0.05),="" cofnodwyd="" cynnydd="" uwch="" ar="" ôl="" y="" 20="" ug="" dm="" -3="" triniaeth="" h2o2="" (p="">< 0.01),="" a'r="" cynnydd="" uchaf="" oedd="" ar="" ôl="" y="" triniaethau="" 40,="" 80,="" a="" 160="" ug="" dm-3="" h2o2.="" dangosir="" canlyniadau="" tebyg="" ar="" gyfer="" acteosid,="" ond="" cyrhaeddodd="" ei="" gynnwys="" uchafbwynt="" ar="" ôl="" y="" driniaeth="" h2o2="" 80="" ug="" dm.="" roedd="" biosynthesis="" 2'-acetylacteoside="" yn="" llai="" sensitif="" i="" driniaeth="" h2o2;="" roedd="" cynnydd="" sylweddol="" yn="" ei="" gynnwys="" (p="">< 0.05)="" mewn="" crynodiadau="" h2o2="" dros="" 40="" ug="" dm-3.="" ar="" ôl="" y="" driniaeth="" 80="" ug="" dm-3="" h2o2,="" swm="" pob="" un="" o'r="" tri="" phrif="">(ffenylethanoidglycosidau)cynyddu'n sylweddol (P < 0.01)="" dros="" y="" rheolydd.="" felly,="" defnyddiwyd="" y="" crynodiad="" hwn="" mewn="" arbrofion="">
I gynhyrchu llyfrgell wedi'i chyfoethogi ar gyfer genynnau ymatebol cynnar sy'n cael eu huwchreoleiddio gan H2O2, defnyddiwyd cDNA oCistanchesalsacelloedd crog wedi'u trin â 80 ug dm-3 H2O2 am 2 awr. Fe wnaeth dilyniannu pas sengl 129 o glonau ailgyfunol yn y llyfrgell SSH esgor ar 105 o ESTs glân ar ôl eithrio dilyniant fector. Defnyddiwyd yr ESTs clir hyn ar gyfer cydosod gan CAP3, a chynhyrchwyd 18 contig a 67 tunnell sengl (Tabl 2). Felly, ynysu 85 o enynnau yn y llyfrgell hon. Hyd cymedrig y 105 EST glân oedd 527 bp, sy'n ddigonol ar gyfer dosbarthiad swyddogaethol dilyniant seiliedig ar debygrwydd.

ffenylethanoidglycosidaumewnCistancheSalsa

Cafodd pob un o'r 85 genyn a gafwyd yn y llyfrgell eu hadalw gan BLASTx yn erbyn cronfa ddata protein nad oedd yn cael ei ddefnyddio gan GenBank ar gyfer tebygrwydd dilyniant (E-werth Llai na neu'n hafal i 0.001). Ni ddangosodd un ar hugain o enynnau unrhyw drawiadau yn y gronfa ddata, efallai eu bod yn benodol iddyntCistanchesalsa. Mewnforiwyd y canlyniadau gyda BLASThits i feddalwedd Blast2GO ar gyfer dadansoddiadau cyfoethogi llwybrau GO a KEGG pellach. O'r 64 o enynnau â thrawiadau BLAST, cafodd 50 eu hanodi yn ôl y disgrifiad o enynnau homologaidd o rywogaethau eraill. Cafodd y genynnau anodedig eu henwi yn ôl y disgrifiad o drawiadau BLAST. Mae dadansoddiad GO (Ffig. 3 Suppl.) yn dangos, ymhlith y 50 genyn hyn, fod 14 o enynnau yn ymwneud ag ymatebion i ysgogiadau, a thros 30 o enynnau yn ymwneud â phrosesau metabolaidd (Tablau 1 a 2). Ymhlith y genynnau hyn, cafodd dau homolog genyn llwybr biosynthesis PeG eu hynysu yn ôl y disgwyl: 4-coumate coenzyme A ligase (a enwir Cs4CL1: Contig03) a cinnamate 4-hydroxylase (a enwir CsC4H1: Contig14). Ymhellach, perfformiwyd RT-qPCR i gadarnhau mynegiadau ysgogedig o enynnau o'r llyfrgell ar ôl y driniaeth H2O2.

I gadarnhau bod genynnau hanfodol a nodwyd o'r llyfrgell SSH yn ymatebol i'r driniaeth H2O2, mynegwyd dau PeG(ffenylethanoidglycosidau)genynnau sy'n gysylltiedig â llwybr biosynthesis (Cs4CL1, CsC4H1), dau enyn a achosir gan ROS (CsSOD1: Contig 16, CsHSP1: CISTH099), ac un genyn tebyg i ffactor trawsgrifio teulu WRKY (CsWRKY1: Contig 07) gan RT-qPCR ar ôl y driniaeth gyda H2O2 (Ffig. 1). Cafodd mynegiadau CsC4H1, Cs4CL1, CsSOD1, a CsWRKY1 eu huwchreoleiddio fwy na 15-plyg, 3-plyg, 45-plyg, a 4-plyg, yn y drefn honno 2 h ar ôl y H2O2 triniaeth. Newidiwyd mynegiant CsHSP1 1.8 gwaith yn unig ar ôl y driniaeth H2O2.
Dadansoddwyd cwrs amser mynegiadau CsWRKY1, CsC4H1, a Cs4CL1 ar ôl y driniaeth H2O2 ymhellach gan RT-qPCR (Ffig. 2). Roedd yr ymadroddion CsC4H1 a Cs4CL1 wedi'u cynyddu'n fawr (mwy na 80-plyg a 50-plyg, yn y drefn honno) ar ôl y driniaeth 16-h ac yna'n cael eu gostwng ar ôl 32 h. Cafodd mynegiant CsWRKY1 ei uwch-reoleiddio fwy na 20-plyg ar 4 awr ac yna'n gostwng o 8 h wedi hynny (Ffig. 2).

Ffig. 2. Mynegiad cymharol CsWRKY1 (A), CsC4H1 (B), a Cs4CL1 (C) ar wahanol adegau ar ôl triniaeth gyda 80 ug dm-3 H2O2. Yr oedd yr ymadroddion wedi eu normaleiddio i reol ; (wedi'i drin â dŵr). Modd plws - DC o dri ailadrodd biolegol; *- P <0.05,**- p=""><>

Trafodaeth

Mae hydrogen perocsid yn elicitor planhigion adnabyddus sy'n dangos effeithiau amrywiol ar blanhigion. Fel ROS, gall gymell y system chwilota ROS sy'n cynnwys superoxide dismutase, catalase, peroxidases, ac ati, ac mae'n gweithredu fel y signal i lawr yr afon o halen, osmotig, a dadhydradu

yn pwysleisio (Wi et al. 2006, Kar 2011, Furlan et al. 2013, Sathiyaraj et al. 2014). Awgrymwyd bod cynhyrchu H2O2 mewn planhigion yn cyd-fynd â biosynthesis metabolyn eilaidd ysgogedig yn yCistanchesalsadiwylliant celloedd. Yn ôl y disgwyl, mae ein canlyniadau yn datgelu bod PeGs(ffenylethanoidglycosidau)biosynthesis yn yCistanche salsaysgogwyd meithriniad celloedd ar ôl y driniaeth H2O2 (Tabl 1). Cynnwys tri phrif PeG(ffenylethanoidglycosidau)cynyddu ar ôl y driniaeth H2O2 sy'n nodi ei rôl ganolog mewn biosynthesis PeGs. Awgrymodd genynnau a gyfoethogwyd yn y llyfrgell SSH ymhellach ei effaith ar PeGs(ffenylethanoidglycosidau)sefydlu biosynthesis ynCistanche salsa.

Gwyddys llawer o enynnau ymatebol H2O, megis ascorbate peroxidase (CISTH069, Karyotou a Donaldson 2005), h-quinone oxidoreductase (CISTH125, Bello, et al. 2001), CsSOD1, CsHSP1 (Baruah et al.), 2001 (Baruah et al.), a genynnau ymateb ymwrthedd i glefydau (Contig10, Nanda, et al. 2010), eu cyfoethogi yn y llyfrgell SSH (Tabl 3, Tabl 2 Suppl.). Cadarnhawyd rhai o'r genynnau ymatebol ROS nodweddiadol hyn gyda mynegiant anwythol ar ôl y driniaeth H2O2 ymhellach gan RT-qPCR (Ffig. 1 a 2) yn nodi bod llyfrgell SSH cymwys wedi'i hadeiladu yma. Darganfuwyd dau enyn llwybr biosynthesis PeG, CsC4H1 a Cs4CL1, hefyd yn y llyfrgell hon a chafodd y ddau fynegiad genynnau hyn eu hysgogi gan y driniaeth H2O2 mewn modd sy'n dibynnu ar amser (Ffig. 2). Mae'n awgrymu bod y driniaeth H2O2 wedi achosi PeGs(ffenylethanoidglycosidau)biosynthesis ar y lefel enetig trwy reoleiddio genynnau llwybr PAL. Fodd bynnag, ni chafodd PAL a genynnau biosynthesis PeGs eraill i lawr yr afon (Wang et al. 2012) eu nodi yn y llyfrgell SSH; efallai mai'r rheswm am hyn yw nad yw'r llyfrgell wedi'i dilyniannu'n ddigonol. Dylid egluro perthynas rhwng mynegiadau a achosir gan CsC4H1 a Cs4CL1 a biosynthesis cynyddol PeGs ar ôl y driniaeth H2O2 trwy ddadansoddiad pellach.

Yn ogystal â'r genynnau llwybr PAL a ysgogwyd gan y driniaeth H2O2, canfuwyd dau ffactor trawsgrifio teulu WRKY (CsWRKY1, CsWRKY2) yn y llyfrgell SSH (Tabl 3 a Thabl 2 Suppl.), a chadarnhawyd mynegiant wedi'i ysgogi gan CsWRKY1 gan RT-qPCR . Roedd ei fynegiant yn ymatebol i driniaeth H2O2 yn gynharach na mynegiant dau enyn llwybr PAL, Cs4CL1 a CsC4H1 (Ffig. 2). O astudiaethau blaenorol, gwelwyd cyd-fynegiant o rai ffactorau trawsgrifio WRKY a genynnau llwybr PAL mewn reis (Gupta et al. 2012). At hynny, mae mynegiant genynnau PAL yn cael ei uwch-reoleiddio mewn mutant gor-fynegiant OsWRKY03 (Liu et al. 2005). Mae'n bosibl y bydd y ddau ffactor trawsgrifio teulu WRKY uchod hefyd yn gysylltiedig â PeGs(ffenylethanoidglycosidau)biosynthesis ynCistanchesalsa. Yn ddiddorol, canfuwyd ESTs cysylltiedig â dadhydradu (CISTH067, CISTH064) yn y llyfrgell SSH, a allai awgrymu bod y driniaeth H2O2 yn gysylltiedig â mynegiant genynnau ymatebol i ddadhydradu mewnCistanchesalsafel yr arsylwyd mewn planhigion eraill (Schmidt et al. 2013, Zhou et al. 2013). Nodwyd un genyn cysylltiedig â signalau gibberellin (GA), tebyg i dderbynnydd gibberellin gid1b (CISTH092), yn y llyfrgell SSH sy'n awgrymu cysylltiad signalau GA a thriniaeth H2O2 ynCistanchesalsa, a adroddwyd hefyd mewn haidd (Bahin et al. 2011). Fodd bynnag, mae angen mwy o astudiaethau i gadarnhau a yw'r genynnau hyn yn gysylltiedig â PeGs(ffenylethanoidglycosidau)biosynthesis. Heblaw am y genynnau a grybwyllir uchod, mae'r llyfrgell SSH a adeiladwyd yma hefyd yn cyflwyno genynnau gyda neu heb drawiadau BLAST. Mae'n gwella ein dealltwriaeth o effaith H2O2 ar C. salsa ac yn gyntaf mae'n darparu gwybodaeth am ei enynnau sy'n ymwneud â biosynthesis PeGs.

I gloi, fe wnaethom asesu effaith H2O2 ar PeGs(ffenylethanoidglycosidau)sefydlu yn yCistanchesalsadiwylliant celloedd. Adeiladwyd y llyfrgell SSH ar ôl y driniaeth H2O2, a chadarnhawyd mynegiant genynnau dethol gan RT-qPCR. Nodwyd dau enyn biosynthesis cysylltiedig â llwybr biosynthesis a genynnau eraill sy'n ymateb i H2O. Bydd y canfyddiadau hyn yn ehangu ein dealltwriaeth o PeGs a achosir gan H2O(ffenylethanoidglycosidau)biosynthesis ynCistanchesalsai'r lefel foleciwlaidd, gan ddarparu'r wybodaeth ar gyfer trin genynnauCistanchesalsadiwylliannau celloedd i wella PeGs(ffenylethanoidglycosidau)cynhyrchu.

O: ' Nodi ESTs ymatebol hydrogen perocsid sy'n ymwneud â biosynthesis glycosid ffenylethanoid yn niwylliant celloedd salsa Cistanche' ganJ. CHEN et al.

--- BIOLOGIA PLANTARUM 59 (4): 695-700, 2015 J. CHEN et al. DOI: 10.1007/s10535-015-0541-y

Cyfeiriadau

Bahin, E., Bailly, C., Sotta, B., Kranner, I., Corbineau, F., Leymarie, J.: Mae Crosstalk rhwng rhywogaethau ocsigen adweithiol a llwybrau signalau hormonaidd yn rheoleiddio cysgadrwydd grawn mewn haidd. - Amgylchedd Cell Planhigion. 34: 980-993, 2011.
Baruah, K., Norouzitallab, P., Linayati, L., Sorgeloos, P., Bossie, r P.: Mae rhywogaethau ocsigen adweithiol a gynhyrchir gan gynnyrch ysgogi sioc gwres (Hsp) yn cyfrannu at gynhyrchu Hsp70 a Hsp{{1} }imiwnedd amddiffynnol cyfryngol yn Artemia franciscana yn erbyn vibrios pathogenig. — Dev. Cyf. Imiwnol. 46: 470-479, 2014.
Bello, RI, Gomez-Diaz, C., Navarro, F., Alcain, FJ, Villalba, JM: Mynegi NAD(P)H: quinone oxidoreductase 1 mewn celloedd HeLa  rôl hydrogen perocsid a chyfnod twf. — J. biol. Cemeg. 276: 44379-44384, 2001.
Bustin, SA, Vandesompele, J., Pfaffl, MW: Safoni qPCR a RT-qPCR. - Genet. Eng. Biotechnol. Newyddion 29: 40-43, 2009.
Cheng, XY, Wei, T., Guo, B., N, I W., Liu, CZ:Cistanchediwylliannau crog celloedd deserticola:ffenylethanoidglycosidaubiosynthesis a gweithgaredd gwrthocsidiol. - Biocemeg Proses. 40: 3119-3124, 2005.
Cheng, XY, Zhou, HY, Cui, X., Ni, W., Liu, CZ Gwelliant offenylethanoidglycosidaubiosynthesis ynCistanchediwylliannau ataliad celloedd deserticola gan chitosan elicitor. — J. Biotechnol. 121: 253-260, 2006.
Furlan, A., Llanes, A., Luna, V., Castro, S.: Mae asid abscisic yn cyfryngu cynhyrchu hydrogen perocsid mewn cnau daear a achosir gan straen dŵr. — Biol. Planhigyn. 57: 555-558, 2013.
Gupta, SK, Ra,i AK, Kanwar, SS, Chand, D., Singh, NK, Sharma, TR: Mae'r genyn ymwrthedd chwyth swyddogaethol sengl Pi54 yn actifadu mecanwaith amddiffyn cymhleth mewn reis. — J. exp. Bot. 63: 757-772, 2012.
Hu, GS, Jia, JM, Hur, YJ, Chung, YS, Lee, JH, Yun, DJ, Chung, WS, Yi, GH, Kim, TH, Kim, DH: Nodweddu moleciwlaidd genyn amonia-lyase ffenylalanin oCistancheanialwch. — Mol. Biol. Cynrychiolydd 38: 3741-3750, 2011.
Kar, RK: Ymatebion planhigion i straen dŵr: rôl rhywogaethau ocsigen adweithiol. - Ymddygiad Signal Planhigion 6: 1741-1745, 2011.
Karyotou, K., Donaldson, RP: Ascorbate peroxidase, sborionwr hydrogen perocsid mewn pilenni glyoxysomal. — Arc h. Biocemeg. Bioffys. 434: 248-257, 2005.
Kobayashi, H., Karasawa, H., Miyase, T., Fukushima, S.: Astudiaethau ar gyfansoddioncistancheyn herba. 4. Ynysu a strwythurau 2 glycosidau ffenylpropanoid newydd, cistanoside-C, a cistanoside-D. - Cemeg. Pharm. Tarw. 32: 3880-3885, 1984.

Liu, CZ, Cheng, XY: Gwellaffenylethanoidglycosidaubiosynthesis mewn diwylliannau celloedd oCistanchedeserticola gan straen osmotig. - Cell Planhigion Sylw 27: 357-362, 2008.
Liu, JY, Guo, ZG, Zeng, ZL: Gwell cronni offenylethanoidglycosidautrwy fwydo rhagflaenydd i ddiwylliant ataliad oCistanchesalsa. — Biochem. Eng. J. 33: 88-93, 2007.
Liu, XQ, Bai, XQ, Qian, Q., Wang, XJ, Chen, MS, Chu, CC: OsWRKY03, ysgogydd trawsgrifio reis sy'n gweithredu mewn llwybr signalau amddiffyn i fyny'r afon o OsNPR1. — Cell Res. 15: 593-603, 2005.
Murashige, T., Skoog, F.: Cyfrwng diwygiedig ar gyfer twf cyflym a biobrofion gyda diwylliannau meinwe tybaco. — Physiol. Planhigyn. 15: 473-497, 1962.
Nan, ZD, Zeng, KW, Shi, SP, Zhao, MB, Jiang, Y., Tu, PF:Phenylethanoidglycosidaugyda gweithgareddau gwrthlidiol o'r coesauCistanchedeserticola diwylliedig yn anialwch Tarim. -- Fitoterapia 89: 167-174, 2013 .
Nanda, AK, Andrio, E., Marino, D., Pauly, N., Dunand, C.: Rhywogaethau ocsigen adweithiol yn ystod rhyngweithiadau cynnar planhigion-micro-organeb. — J. Integr. Biol Planhigion. 52: 195-204, 2010.
Ouyang, J., Wang, XD, Zhao, B., Wang, YC: Cynhyrchu gwell offenylethanoid glycosidautrwy fwydo rhagflaenydd i ddiwylliant celloedd oCistancheanialwch. - Biocemeg Proses. 40: 3480-3484, 2005a.
Ouyang, J., Wang, XD, Zhao, B., Wang, YC: Gwell cynhyrchuffenylethanoidglycosidauganCistanchecelloedd deserticola wedi'u meithrin mewn bioadweithydd aergludiad dolen fewnol gyda chodwr sifter. - Ensym Microbiol. Tech. 36: 982-988, 2005b.
Salcedo-Morales, G., Jimenez-Aparicio, AR, Cruz-Sosa, F., Trejo-Tapia, G.: Nodweddu anatomegol a histocemegol o haustorium in vitro o wreiddiau Castilleja tenuiflora. — Biol. Planhigyn. 58: 164-168, 2014.
Sathiyaraj, G., Srinivasan, S., Kim, YJ, Lee, OR, Parvin, S., Balusamy, SR, Khorolragchaa, A., Yang, DC: Mae ymgodiad hydrogen perocsid yn gwella goddefgarwch halen trwy actifadu proteinau sy'n gysylltiedig ag amddiffyn yn Panax ginseng CA Meyer. — Mol. Biol. Cynrychiolydd 41: 3761-3771, 2014.
Schmidt, R., Mieulet, D., Hubberten, HM, Odata, T., Hoefgen, R., Fernie, AR, Fisahn, J., Segundo, BS, Guiderdoni, E., Schippers, JHM, Mueller-Roeber, B.: Mae SALTRESPONSIVE ERF1 yn rheoleiddio signalau ocsigen adweithiol sy'n ddibynnol ar rywogaethau yn ystod yr ymateb cychwynnol i straen halen
mewn reis. -- Cell Planhigion 25: 2115-2131, 2013.
Wang, T., Zhang, XY, Xie, WY:Cistanchedeserticola YC Ma, "Desert Ginseng": adolygiad. — Amer. J. ên. Med. 40: 1123-1141, 2012.
Wi, SG, Chung, BY, Kim, JH, Lee, KS, Kim, JS Patrwm dyddodiad o hydrogen perocsid yn y dail dail o reis dan straen halen. — Biol. Planhigyn. 50: 469-472, 2006.
Zhou, XF, Jin, YH, Yoo, CY, Lin, XL, Kim, WY, Yun, DJ, Bressan, RA, Hasegawa, PM, Jin, JB: CYCLIN H1 yn rheoleiddio ymatebion straen sychder ac agoriad stomatal golau glas a achosir gan atal croniad rhywogaethau ocsigen adweithiol mewn Arabidopsis. — Planhigion Physiol. 162: 1030-1041, 2013.