Atal Melanogenesis Gan 2-mercaptoethanesulfonate Sodiwm

Cyswllt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-bost:audrey.hu@wecistanche.com

Jeong-Hwan Kim1,2,3,#, Chang-Taek Oh2,#, Tae-Rin Kwon2, Jong Hwan Kim2,3, Dong-Ho Bak2,3, Hyuk Kim1, Won-Seok Park1, a Beom Joon Kim2,3 ,*

ABSENOLDEBMae sodiwm 2-mercaptoethanol-sulfonate (mesna) yn gyfrwng amddiffynnol a ddefnyddir yn helaeth mewn meddygaeth oherwydd ei effeithiau gwrthocsidiol. Yn ddiweddar, dangoswyd bod rhywogaethau ocsigen adweithiol (ROS) yn cynyddu pigmentiad. Felly, gall sborionwyr ROS ac atalyddion cynhyrchu ROS atal melanogenesis. Mae fforch flaen bocs-O3a (FoxO3a) yn ffactor angiogenig anifeiliaid sy'n cyfryngu pigmentiad croen a achosir gan ROS. Yn yr astudiaeth hon, ein nod oedd ymchwilio i effaith gwynnu mesna a'r mecanwaith signalau sy'n cyfryngu'r effaith hon. Defnyddiwyd celloedd melanoma dynol (MNT-1) yn yr astudiaeth hon. Mesurwyd mRNA a mynegiant protein gan PCR meintiol amser real a dadansoddiad blotio Gorllewinol i olrhain newidiadau mewn signalau cysylltiedig â FoxO3a a achosir gan mesna. Perfformiwyd assay immunofluorescence i bennu trawsleoli niwclear FoxO3a. Pan gafodd celloedd melanoma MNT eu trin â mesna, gostyngodd cynhyrchiant melanin a secretiad. Ynghyd â'r effeithiau hyn cafwyd cynnydd mewn actifadu FoxO3a a thrawsleoli niwclear, gan arwain at is-reoleiddio pedwar prif enyn melanogenesis: MITF, TYR, TRP1, a TRP2. Canfuom fod mesna, gwrthocsidydd a sborionwr radical, yn atal cynhyrchu melanin ac y gallai felly fod yn asiant defnyddiol ar gyfer triniaeth glinigol anhwylderau hyperbigmentation.

Geiriau AllweddolGwrthocsidyddionHyperpigmentation MesnaSkin paratoadau ysgafnhau

Cistanche: gwrthocsidydd ac asiant gwynnu croen defnyddiol

RHAGARWEINIAD

Mae gan y diwydiant colur ddiddordeb mewn darganfod deunyddiau sydd â phriodweddau gwynnu croen. Yn ddiweddar, dangoswyd bod rhywogaethau ocsigen adweithiol (ROS) yn cael effeithiau paradocsaidd ar melanocytes [1]. Yn benodol, maent yn cynyddu pigmentiad ac yn achosi niwed ocsideiddiol a achosir gan straen i'r melanocytes. Felly, gall sborionwyr ROS ac atalyddion cynhyrchu ROS atal melanogenesis [2,3].

Mae sodiwm 2-mercaptoethanol-sulfonate (mesna) yn gyfrwng amddiffynnol sy'n cael ei ddefnyddio fel gwrthwenwyn cemegol a chymhorthydd mewn amrywiol feysydd therapiwtig. Defnyddir Mesna yn eang mewn meddygaeth oherwydd ei effeithiau amddiffynnol a gwrthocsidiol [4,5]. Fel gwrthocsidydd, mae mesna yn gweithredu trwy gynnal y statws thiol mewngellol yn effeithiol. Er bod mesna yn bodoli mewn ffurfiau llai ac ocsidiedig, mae'n bodoli'n bennaf yn y ffurf lai. Mae Mesna yn gweithredu fel gwrthocsidydd trwy chwilota radicalau rhydd, sy'n atal melanogenesis trwy atal gweithgaredd tyrosinase [6]. Felly, rhagwelir y bydd mesna yn lleihau melanogenesis de novo.

Mae synthesis melanin yn cael ei reoleiddio gan sawl llwybr trawsgludo signal gyda swyddogaethau pwysig mewn melanogenesis. Yn ddiweddar, dangoswyd bod blwch pen fforch O3a (FoxO3a) yn ffactor angiogenig anifeiliaid sy'n cyfryngu pigmentiad croen a achosir gan ROS, gan awgrymu cysylltiad agos rhwng melanogenesis a gwrthocsidyddion, yn enwedig asid ascorbig (AA) a N-acetylcysteine ​​(NAC) [7]. Er bod mesna yn sborionwr radical pwerus, nid yw ei effaith gwynnu a'i mecanwaith signalau wedi'u hymchwilio eto.

Yn yr astudiaeth hon, ein nod oedd ymchwilio i effaith ataliol mesna ar synthesis melanin a mynegiant ffactorau melanogenesis, er mwyn egluro'r mecanwaith sy'n sail i'w weithred ddadbigmentu effeithiol.

tubolosa cistanche

DULLIAU

Assay meithriniad celloedd a hyfywedd celloedd

Cadwyd y celloedd melanoma dynol (MNT-1) a ddefnyddiwyd yn yr astudiaeth hon mewn cyfrwng hanfodol lleiaf (MEM; Gibco, Grand Island, NY, UDA) yn cynnwys 10 y cant o MEM Dulbecco, 20 mM HEPES (Sigma-Aldrich Co. , St Louis, MO, UDA), 20 y cant FBS, 100 U/ml penisilin G, a 100 mg/ml sylffad streptomycin. Cafodd celloedd eu lluosogi ar 37 gradd gyda 5 y cant o CO2. Mesurwyd hyfywedd celloedd gan 3-(4,5-dimethyl-thiazol-2-yl)2,5-assay deiphenyl tetrazolium bromid (MTT). Yn fyr, ar ôl deori â sylweddau prawf, tynnwyd y cyfrwng diwylliant ac ychwanegwyd hydoddiant MTT (5 mg / ml). Yna, cedwir celloedd am 1 h 37 gradd a'u tynnu gyda DMSO. Penderfynwyd ar amsugno ar 590 nm gan ddefnyddio darllenydd microplate.

2, 2-diffenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) assay gweithgaredd sborionu radical

Perfformiwyd assay gweithgaredd sborionu radical DPPH fel y disgrifiwyd yn flaenorol [8], gydag ychydig o addasiadau. Yn gryno, ychwanegwyd 10 ul o mesna (3–400 ug/ml, wedi'i hydoddi mewn ethanol) at 190 ul o hydoddiant ethanol sy'n cynnwys radicalau DPPH (100 μM) ym mhob ffynnon o { {6}}plât ffynnon. Cafodd y cymysgedd ei ysgwyd a'i ddeor am 30 munud ar 37 gradd yn y tywyllwch, ac ar ôl hynny mesurwyd yr amsugniad ar 517 nm gydag AA fel y rheolaeth gadarnhaol. Mae amsugnedd is yn cynrychioli gweithgaredd sborion DPPH uwch. Cyfrifwyd effaith ysbwriel y cant fel a ganlyn: cyfradd sborionio ( y cant )=[1 – (A1 – A2)/A0] × 100 y cant , lle mae A0, A1, ac A2 yn amsugnedd y rheolydd (heb sampl ), sampl prawf, a sampl heb DPPH, yn y drefn honno. Ailadroddwyd arbrofion deirgwaith yn annibynnol.

Budd Cistancheextract: radicalau rhydd clir.

Assay tyrosinase madarch

Perfformiwyd y assay madarch tyrosinase in vitro gyda L-tyrosine a L-3,4-dihydroxyphenylalanine (L-DOPA) fel y swbstrad tyrosinase. Penderfynwyd ar weithgaredd ataliol pob sampl (mesna ac AA) yn erbyn ocsidiad tyrosinase-catalyzed o L-tyrosine yn unol â dulliau Chang et al. [9]. Yn gryno, cymysgwyd 40 ul o 1.5 mM L-tyrosine (swbstrad) wedi'i hydoddi mewn byffer ffosffad 0.1 M (pH 6.8) a 120 ul o'r un byffer gydag 20 ul o bob sampl mewn crynodiadau gwahanol. Yna, ychwanegwyd 20 ul o tyrosinase madarch (2,000 U/ml mewn byffer ffosffad) i gychwyn yr adwaith, a deorwyd y cymysgedd assay ar 37 gradd am 15 munud. Yn olaf, cafodd y cynnydd mewn amsugnedd ar 475 nm a achoswyd gan ffurfio dopachrome ei fonitro gan ddefnyddio darllenydd microplate (Opsys MR; Dynex Technologies, Ltd., Frankfurt, yr Almaen).

Penderfynwyd effaith ataliol pob dyfyniad ar ocsidiad L-DOPA gan tyrosinase madarch yn ôl dull Masamoto et al. [10], gyda mân addasiadau. Yn gryno, cymysgwyd 100 ul o glustogfa ffosffad 0.1 M gydag 20 ul o grynodiadau amrywiol o bob sampl. Sbardunwyd adweithiau trwy ychwanegu 20 ul o madarch tyrosinase (2,000 U/ml mewn byffer ffosffad). Yna cafodd y cymysgedd ei ddeor ar 37 gradd am 5 munud ac yna ei ychwanegu at 40 ul o L-DOPA (4 mM mewn byffer ffosffad 0.1 M). Deorwyd y cymysgedd adwaith hwn am 10 munud ar 37 gradd, ac wedi hynny mesurwyd ei amsugnedd ar 475 nm. Cyfrifwyd canran yr ataliad o ocsidiad tyrosine neu L-DOPA fel a ganlyn: ataliad ( y cant )=100 - (B/A × 100), lle roedd A a B yn werthoedd ΔOD475 a gofnodwyd ar 10 munud heb a gyda'r prawf sampl, yn y drefn honno. Ailadroddwyd arbrofion deirgwaith yn annibynnol.

Mesur cynnwys melanin

Pennwyd cynnwys melanin cellog gan fersiwn wedi'i addasu o'r dull a adroddwyd gan Hosoi et al. [11]. Yn gryno, cafodd celloedd MNT 1 eu hadu ar 24-blat ffynnon ar ddwysedd o 1 × 105 cell/ffynnon a’u deor dros nos. Disodlwyd y cyfrwng gan gyfrwng sy'n cynnwys crynodiadau gwahanol o mesna, NAC, ac AA, ac ar ôl hynny cafodd y cymysgeddau eu deor am 72 h arall, a chafodd y cyfrwng ei ddileu. Yna cafodd y celloedd eu golchi ddwywaith gyda PBS, eu cynaeafu trwy trypsinization gan ddefnyddio 0.25 y cant trypsin / 0.02 y cant EDTA yn PBS, eu pelennu, a'u solubilized mewn 1 N NaOH am 1 h ar 80 gradd . Ar ôl centrifugio ar 3,000 × g am 10 munud, mesurwyd OD y supernatant canlyniadol ar 490 nm gan ddarllenydd microplate. Perfformiwyd arbrofion yn driphlyg.

RT-PCR amser real meintiol (qRT-PCR)

Echdynnwyd cyfanswm RNA cellog o gelloedd MNT-1 gan ddefnyddio Pecyn Bach RNeasy (Qiagen, Valencia, CA, UDA). Ar gyfer synthesis cDNA, cafodd 1 µg o RNA ei drawsgrifio o chwith gan ddefnyddio pecyn synthesis cDNA llinyn cyntaf Primerscript (Takara Bio Inc., Shiga, Japan). Perfformiwyd PCR amser real meintiol (qPCR) gan ddefnyddio IQ SYBR Green Supermix (Bio-Rad, Hercules, CA, UDA). Roedd paramedrau thermogylchu qRT-PCR yn cynnwys deoriad ar 95 gradd am 10 munud, ac yna 45 cylch ar 95 gradd am 10 eiliad, 72 gradd am 1 eiliad, a 40 gradd am 30 eiliad. Perfformiwyd yr adweithiau mewn System Canfod PCR Amser Real BioRad CFX96. Ar ddiwedd pob rhediad qRT-PCR, dadansoddwyd y canlyniadau'n awtomatig a chynhyrchwyd plot ymhelaethu ar gyfer pob cDNA. Perfformiwyd yr holl arbrofion yn driphlyg. mesurwyd lefelau mynegiant mRNA gan ddefnyddio'r dull CT cymharol a'u normaleiddio i GAPDH, y trawsgrifiad genyn cadw tŷ.

Ffig. 1. Effaith 2-mercaptoethanol-sylffonad (mesna) ar 2, 2-diffenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) gweithgaredd sborionio a thyrosinas madarch

Dadansoddiad blotiau gorllewinol

Cynhyrchwyd echdynion protein o gelloedd MNT{{0}} gan ddefnyddio byffer assay radioimmunoprecipitation (RIPA) oer (50 mM Tris HCl, pH 7.2, 150 mM NaCl, 1 y cant NP40 , 0.1 y cant SDS, 0.5 y cant DOC, 1 mM PMSF, 25 mM MgCl2, a phosphatase atalydd coctel). Mesurwyd cynnwys protein y lysates celloedd canlyniadol gan ddefnyddio pecyn profi protein asid bicinchoninig Pierce (BCA) (Thermo Scientific, Waltham, MA, UDA). Cafodd symiau cyfartal o brotein eu datrys gan SDS-PAGE (geliau 8 y cant -12 y cant) a'u trosglwyddo i bilenni PVDF (Millipore, Billerica, MA, UDA). Ar ôl blocio â llaeth sgim o 5 y cant mewn halwynog wedi'i glustogi gan Tris yn cynnwys 0.5 y cant Tween 20 (Sigma-Aldrich Co.) am 2 awr, chwiliwyd y pilenni â gwrthgyrff cynradd a'u deor â gwrthgyrff eilaidd wedi'u cyfuno â marchruddygl peroxidase-cyfun. Canfuwyd gwrthgyrff hybrid gan ddefnyddio datrysiad cemiluminescence gwell (ATTO Co., Tokyo, Japan), a chaffaelwyd delweddau gan ddefnyddio LAS-1000 LuminoImage Analyzer (Fujifilm, Tokyo, Japan). Perfformiwyd yr holl arbrofion yn driphlyg.

Assay ffracsiynu cellog

Cynhyrchwyd ffracsiynau protein cytoplasmig a niwclear gan ddefnyddio pecyn adweithydd echdynnu niwclear a cytoplasmig NE-PER yn dilyn protocol y gwneuthurwr (Pierce Biotechnology, Rockford, IL, UDA). Ategwyd yr adweithyddion echdynnu ag atalyddion ffosffatas, pyroffosffad sodiwm 10 mM, tabledi atalydd proteas (Roche Diagnostics, Basel, y Swistir), a orthovanadad sodiwm 100 mM. Perfformiwyd arbrofion yn driphlyg.

Assay immunofluorescence FoxO3a

Cafodd celloedd MNT{{0}} eu hadu ar sleidiau meithrin celloedd pedair siambr (SPL Life Sciences Co, Ltd., Pocheon, Korea) a'u trin â phob sylwedd prawf (mesna, NAC, neu AA) am 1 Dydd. Nesaf, golchwyd y sleidiau gyda 1 × PBS a'u gosod gyda 4 y cant o baraformaldehyd am 20 munud. Ar ôl golchi eto gyda 1 × PBS, cafodd y sleidiau eu deor gyda 0.01 y cant Triton X-100 (Sigma-Aldrich Co.) mewn 1 × PBS am 20 munud, wedi'i rwystro â 2 y cant BSA mewn 1 × PBS am 2 awr, ac yna'n cael ei ddeor â gwrthgyrff gwrth-FoxO3a dros nos ar 4 gradd . Ar ôl golchi â 1 × PBS, cafodd y sleidiau eu deori ag IgG gwrth-gwningen gafr cyfun FITC (1:1,000, DS730-F; Novus Biologicals, Littleton, CO, USA) a'u gosod defnyddio 4',6-diamidino-2-phenylindole (DAPI; Golden Bridge International, Inc., Mukilteo, WA, UDA). Archwiliwyd morffoleg celloedd gan ddefnyddio microsgop fflworoleuedd DP70 gan ddefnyddio meddalwedd rheolydd DP (Olympus Optical Co., Ltd., Tokyo, Japan). Perfformiwyd arbrofion yn driphlyg.

cistanche phelypaes

CANLYNIADAU

Effaith mesna ar weithred sborion DPPHity

Defnyddir DPPH yn helaeth i asesu effeithiolrwydd gwrthocsidiol cymysgeddau cymhleth a chyfansoddion unigol. Gwerthuswyd gweithgaredd in vitroantioxidant mesna gan brofion gweithgaredd sborionu radical DPPH a'i gymharu ag AA. Gwerthoedd IC50 oedd 23.49 a 21.89 ug/ml ar gyfer mesna ac AA, yn y drefn honno, gan ddangos bod y ddau gyfansoddyn yn sborionwyr radical cryf a bod eu galluoedd sborionu radical yn gymaradwy (Ffig. 1A a Thabl 1).

Mae Mesna yn atal gweithgaredd tyrosinase madarch

Er mwyn ymchwilio i weld a yw mesna yn atal yr ensym allweddol mewn melanogenesis yn uniongyrchol, cynhaliwyd assay tyrosinase madarch in vitro. Roedd mesna ac AA yn atal ocsidiad madarch tyrosinase-gyfryngol o L-DOPA a tyrosine mewn modd dos-ddibynnol (Ffig. 1 B, C). Yn ôl y disgwyl, roedd y rheolaeth gadarnhaol (AA) yn atal tyrosinase madarch yn gryf, tra bod mesna yn dangos gweithgaredd ataliol cryf tebyg (Tabl 1). Gwerthoedd IC50 mesna yn erbyn L-DOPA a L-tyrosine oedd 22.5 a 16.3 ug/ml, yn y drefn honno, tra bod gwerthoedd AA yn 120.8 a 166.9 ug/ml, yn y drefn honno. Gyda'i gilydd, mae ein canlyniadau'n dangos bod mesna yn ataliad cryfach o weithgaredd tyrosinase madarch nag AA.

Mae Mesna yn lleihau synthesis melanin mewn celloedd MNT-1

I gymharu effeithiau ataliol mesna, NAC, ac AA ar gynnwys melanin, cafodd celloedd MNT-1 eu trin â chrynodiadau gwahanol o'r gwrthocsidyddion hyn. Gostyngodd y tri asiant gynhyrchu melanin yn sylweddol mewn modd a oedd yn dibynnu ar ddos ​​o'i gymharu â chynhyrchu melanin mewn celloedd heb eu trin (Ffig. 2A, B). Gwerthoedd IC50 ar gyfer synthesis melanin oedd 230 nM, 173 nM, a 812 nM ar gyfer mesna, NAC, ac AA, yn y drefn honno. Nid oedd crynodiad effeithiol mesna yn sytotocsig i gelloedd MNT-1 (Ffig. 2C). Mae'r canlyniadau hyn yn awgrymu bod effaith ataliol mesna ar synthesis melanin yn cydberthyn yn dda ag effeithiau mesna ar weithgaredd tyrosinase madarch. Yn ogystal, gwnaethom werthuso newidiadau yn y mynegiant o MITF, TYR, TRP-1, a TRP-2 mewn celloedd MNT-1 (Ffig. 2D). Fe wnaeth Mesna a NAC is-reoleiddio mynegiant MITF, TYR, a TRP-2 yn sylweddol ar 12-24 h, ond adenillwyd y lefelau ar ôl 48 h. Ymhellach, gwnaeth AA is-reoleiddio lefelau mynegiant MITF, TYR, TRP-1, a TRP-2, ond cynyddodd eu lefelau wedi hynny ar ôl 48 h. Fe wnaethom hefyd ddadansoddi lefelau protein MITF, TYR, TRP-1, a TRP-2 ar 24-48 h a chanfod bod y lefelau wedi gostwng yn sylweddol ar ôl triniaeth gyda phob asiant am 24-48 h (Ffig. .2E). Mae'r data hyn yn dangos bod mesna, NAC, ac AA i gyd yn lleihau synthesis melanin, yn debygol trwy is-reoleiddio MITF, TYR, a TRP-2.

Ffig. 2. Effeithiau 2-mercaptoethanol-sylffonad (mesna) ar felanogenesis mewn-1 celloedd MNT.

Mae Mesna yn ysgogi trawsleoli niwclear FoxO3a

Adroddwyd bod NAC ac AA yn ysgogi trawsleoli niwclear FoxO3a, sy'n rheoleiddio melanogenesis ac yn lleihau synthesis melanin. Adroddwyd hefyd eu bod yn ysgogi mynegiant MITF, TYR, TRP-1, a TRP-2 yng nghelloedd MNT 1 [7]. Roeddem yn rhagdybio bod ffosfforyleiddiad FoxO3a mewn trawsleoli niwclear yn rhan o'r prosesau melanogenesis a achosir gan mesna. I brofi ein rhagdybiaeth, fe wnaethom gynnal assay immunofluorescence. Dangosodd y canlyniadau fod mesna, NAC, ac AA oll wedi achosi trawsleoli niwclear FoxO3a (Ffig. 3A, B). Yn ogystal, cynyddwyd lefel y FoxO3a mewndarddol yn y ffracsiwn niwclear o gelloedd wedi'u trin â gwrthocsidyddion (Ffig. 3 C). Mae'r canlyniadau hyn yn awgrymu bod mesna yn rheoleiddio trawsleoli niwclear FoxO3a, yn benodol trwy wella trawsleoli niwclear FoxO3a, a thrwy hynny leihau synthesis melanin.

Mae Mesna yn cymell ffosfforyleiddiad MST1 a JNK

Gan fod FoxO3a yn rhyngweithio â phroteinau amrywiol, gall rwymo i ffactorau sy'n gysylltiedig â melanogenesis yn y cnewyllyn i ffurfio cyfadeiladau pwysau moleciwlaidd uchel sy'n cyflawni ei swyddogaethau cysylltiedig. Adroddwyd bod croniad niwclear FoxO3a yn actifadu MST1, a ddilynir gan actifadu JNK [12,13]. Er mwyn ymchwilio i'r mecanweithiau sy'n sail i drawsleoli niwclear FoxO3a, defnyddiwyd dadansoddiad blotiau Gorllewinol o arbrawf cwrs amser i olrhain newidiadau mewn signalau cysylltiedig â FoxO3a a achosir gan mesna. Gwnaethom gadarnhau bod triniaeth â mesna, NAC, ac AA yn cynyddu'n sylweddol ffosfforyleiddiad MST1 a JNK (Ffig. 4). Mae'r canlyniadau hyn yn awgrymu bod mesna, NAC, ac AA yn rheoleiddio trawsleoli niwclear FoxO3a trwy ffosfforyleiddiad MST1 a JNK.

llysieuyn cistanche

TRAFODAETH

Mae Melanogenesis, un o brif swyddogaethau melanocytes gwahaniaethol, yn chwarae rhan bwysig wrth amddiffyn y croen rhag difrod gan ymbelydredd UV-B ac mae'n bennaf gyfrifol am liw croen. Mae pigment melanin yn cronni'n annormal yn gyfrifol am anhwylderau pigmentiad fel melasma a lentigo henaint. Mae Melanogenesis yn cynnwys cyfres o brosesau ocsideiddio ensymatig a reoleiddir yn dynn sy'n arwain at synthesis a chydosod polymerau melanin. Felly, mae llawer o gyfryngau gwrthocsidiol wedi'u defnyddio i drin hyperpigmentation croen. Yn ddiweddar, adroddwyd bod FoxO3a yn ymwneud â rheoleiddio melanogenesis ac yn cael effeithiau angiogenig anifeiliaid. Yn benodol, mae gweithgaredd angiogenig anifeiliaid gwrthocsidyddion yn cael ei gyfryngu gan actifadu FoxO3a trwy ei drawsleoli niwclear [7].

Defnyddir Mesna yn therapiwtig i atal cystitis hemorrhagic a hematuria oherwydd cyclo-ffosffadau fel ifosfamide. Mae Mesna yn foleciwl bach sy'n gallu sborion ROS yn rhinwedd ei grŵp sulfhydryl [14]. Yn yr astudiaeth hon, fe wnaethom ddangos bod gan mesna allu sborion radical cryf, yn debyg i allu AA (Ffig. 1A). Pwrpas y gwaith presennol oedd ymchwilio i effeithiau ataliol mesna ar ffurfiant melanin, sy'n ymwneud yn agos â phigmentiad croen. Canfuom fod mesna yn lleihau cynhyrchiant melanin mewn celloedd melanoma MNT a secretiad ganddynt. Roedd yr effaith hon oherwydd cynnydd sydyn mewn actifadu FoxO3a a thrawsleoli niwclear, gan arwain at is-reoleiddio prif enynnau melanogenesis (ee, MITF, tyrosinase, TRP1, a TRP2 [DCT]) ar ôl 12 h o driniaeth.

Mae actifadu MST1 yn hyrwyddo cronni niwclear FoxO3a, sy'n cyd-fynd ag actifadu JNK. Dangosodd astudiaeth flaenorol mewn celloedd melanoma fod MST1 yn hyrwyddo marwolaeth celloedd mewn ymateb i straen ocsideiddiol trwy actifadu FoxO3a yn uniongyrchol [12]. Yn y cyfamser, nododd astudiaeth arall fod MST1 yn hanfodol ar gyfer goroesiad celloedd T naïf mewn ymateb i ROS mewngellol trwy reoleiddio lefelau protein FoxO [15]. Yn ein hastudiaeth, fe wnaeth mesna ysgogi trawsleoli niwclear FoxO3a trwy actifadu MST1 a JNK, yn y drefn honno. Fodd bynnag, ni newidiodd mesna nifer y celloedd MNT-1 (Ffig. 2D), sy'n awgrymu nad yw mesna yn achosi apoptosis celloedd. Felly, mae'n ymddangos bod MST1 yn gweithredu yn unol ag amodau celloedd i fodiwleiddio swyddogaeth FoxO i reoleiddio marwolaeth a goroesiad celloedd yn wahanol.

Anhwylder pigmentaidd caffaeledig yw melasma sy'n digwydd yn bennaf ar yr wyneb ac sy'n effeithio'n bennaf ar fenywod o flynyddoedd geni plant. Yn dibynnu ar faint o ddyddodiad melanin yn y croen, fe'i dosberthir fel yr epidermis, y croen, a melanin cymysg. Melanoma epidermaidd yw ffurf fwyaf cyffredin y clefyd, a nodweddir gan fwy o melanin yn yr epidermis. Nodweddir melasma dermol gan gynnydd mewn melanin yn y dermis, tra bod melanin cymysg yn cyfeirio at gyfuniad o melasma epidermaidd a dermol [16]. Mae'r opsiynau triniaeth melasma sydd ar gael ar hyn o bryd yn cynnwys asiantau amserol, pilio cemegol, laserau, a therapi golau [17]. O'r triniaethau hyn, dangoswyd mai therapi cyfuniad amserol sy'n cynnwys hydroquinone, tretinoin, a fluocinolone asetonide yw'r mwyaf effeithiol, ond dangosodd tua 40 y cant o gleifion erythema a phlicio. At hynny, cynhyrchodd pilio cemegol, therapi laser, a therapi golau ganlyniadau therapiwtig cymysg, gyda risg uwch o lid a gorbigmentu dilynol. Felly, mae'r dulliau trin presennol ar gyfer melasma yn anfoddhaol. Mae AA, a elwir fel arall yn fitamin C, yn gwrthocsidydd cryf a sborionwr radical sy'n ymyrryd â melanogenesis trwy atal adweithiau ocsideiddiol yn y broses gynhyrchu melanin [18]. Mewn 12-astudiaeth dwy ochr-ddall ar hap ar hap wythnos, adroddodd menywod Corea sy'n dioddef o felasma welliant amlwg ar yr ochr a gafodd ei thrin gan ddefnyddio iontophoresis â fitamin C [19]. Felly, rydym yn rhagdybio bod mesna, gwrthocsidydd a sborionwr radical, hefyd yn atal cynhyrchu melanin ac y gallai felly fod yn therapiwtig defnyddiol ar gyfer triniaeth glinigol anhwylderau hyperbigmentation.

Dyfyniad Cistanche tubulosa