Nano Milk Protein-Mucilage Cyfadeiladau: Nodweddion ac Effaith Anticancer Rhan 2

I gael rhagor o wybodaeth, cysylltwch âtina.xiang@wecistanche.com

Cliciwch y ddolen i ddysgu rhan 1:https://www.xjcistanche.com/news/nano-milk-protein-mucilage-complexes-characte-55049142.html

3. Deunyddiau a Dulliau

3.1. Deunyddiau

Prynwyd husk Plantago ovata (isgoal) a ffrwythau aeddfedu Ziziphus Spina-Christi(Nabeq) o Giza, yr Aifft; prynwyd crynodiad protein llaeth (AS,81.3% protein) gan gwmni Fonterra (Auckland, Seland Newydd). Mae'r proteinau casein a gwenith yn yr MPC yn bennaf yn eu ffurf frodorol a tebyg, llygod, i'r rhai a geir mewn llaeth. Roedd yr holl gemegau a ddefnyddiwyd o burdeb dadansoddol.

3.2.Paratoi Isabgol Husk Mucilage (IHM) a Nabeg Mucilage (NabM)

Paratowyd mwcilage hwk Isabgol (IHM) a mwcilage Nabeq (NabM) yn unol â'r dull a ddisgrifiwyd gan El-Maksoud et al. [5]. Yn fyr, paratowyd ataliad o hwsg isabgol drwy ddiddymu 1.2 g mewn 100 mL o ddŵr distyllu a'i buro â hydoddiant asetôn. Roedd y gel a ddeilliodd o hynny yn cael ei storio yn yr oergell (4-5°C) nes ei ddefnyddio.

Ar gyfer NabM, golchwyd y ffrwythau Nabeq wedi'u rhwygo'n drylwyr gyda dŵr tap i gael gwared ar fudr. Roedd y ffrwythau ffres wedi'u gwahanu oddi wrth yr hadau a'u cymysgu â dŵr distyllu ar gymhareb o 1:10(w/v) ar ôl cael eu torri'n ddarnau bach. Cafodd y gymysgedd ei chymysgu gan ddefnyddio cymysgydd labordy (Toshiba Mixie, Japan) a chaniatawyd iddo sefyll am 12 h yn yr oergell.

Yna, cafodd y darn mwcilaginous ei ganoli yn 2000 rpm am 30 munud a'i hidlo drwy frethyn cerdd. Roedd y mwcilage hydawdd viscous a ddeilliodd o hynny yn cael ei achosi gan acetone. Roedd y mwcilage crai a gafwyd yn cael ei storio yn yr oergell nes ei ddefnyddio.

At ddibenion dadansoddol, cafodd y mwcilage ei sychu mewn ffwrn aer ar dir 40°Cand gan ddefnyddio melin bêl MM400(Retsch, yr Almaen). Mae cyfansoddiad cemegol powdr mwcilage psyllium husk (PHMP) a phowdr mwcilage Nabeq (NabMP) wedi'i fesur. Y lleithder, protein, braster, lludw, ffibr crai, a chyfanswm y cynnwys carbohydrad oedd 8.49, 0.34,0.21,2.13,1.53,and87.44% ar gyfer PHMP a 9.18,4.72,2.05,2.69,1.70,and78.26% ar gyfer NabMP, yn y drefn honno. Roedd y powdr canlyniadol yn cael ei storio ar dymheredd oer (4-5°C) hyd nes y caiff ei ddadansoddi ymhellach.

Cliciwch i ddysgu mwy o wybodaeth

3.3. Paratoi Cyfadeiladau Protein Llaeth-Mucilage (MPMC)

Paratowyd cyfadeiladau protein llaeth (AS) gydag IHM a NabM yn ôl Morr et al.gyda rhai addasiadau [44]. Ailgyfansoddwyd crynodiad protein llaeth mewn dŵr distyllu(10%). Roedd y coleoid protein llaeth a ddeilliodd o hynny yn gymysg ag IHM a NabM ar gymhareb 1:3 (o/o). Addaswyd pH y gymysgedd i 10 a'i adael i sefyll am 10 munud. Ar ôl hynny, cafodd y pH ei ostwng i 3.5 gan ddefnyddio 0.1 N HCl a'i adael am 10 munud arall. Yna addaswyd y pH i pH 4.6 gan ddefnyddio 0.5 M NaOH i gasglu hidlo MPMCby ar bapur hidlo: Roedd AS, yn ogystal â'r MPMC a ddeilliodd o hynny, yn cael ei sychu gan lyoffileiddio ar -45°CC am 24h gan ddefnyddio'r lyoffilizer Novalyphe-NL500, Offerynnau Savant, Holbrook, NY, UDA.

3.4. Nodweddion Ffisicocemegol a Swyddogaethol

Mesur 3.4.1.pH

Mesurwyd pH y cynhyrchion a ddeilliodd o hynny ar ateb o 10% gan ddefnyddio mesurydd pH wedi'i raddnodi (HANNA, HI 902 m, yr Almaen).

3.4.2.Penderfynu ar Dwysedd Bulk (BD), Dwysedd Tapped (TD), a Mynegai Carr

Cafodd powdr MPMC ei arllwys i silindr mesur 50 mL hyd at 25 mL, sy'n cyfateb i'r cyfaint heb ei gyffwrdd, ac yna tap 5-10 gwaith nes na nodwyd unrhyw newid pellach o gyfaint y powdr yn cyfateb i'r cyfaint a oedd wedi'i dapio.

Penderfynwyd ar y dwysedd swmp, y dwysedd wedi'i dapio, a mynegai Carr gan ddefnyddio'r hafaliadau canlynol [45]:

(1) BD = màs/ cyfaint heb ei gyffwrdd

(2) TD = màs/cyfaint wedi'i dapio

(3) Mynegai Carr (%)= (TD-BD)/TD×100

3.4.3. Mynegai Amsugno Dŵr (WAI) a Mynegai Hydoddedd Dŵr (WSD)

Archwiliwyd hydoddedd dŵr a mynegeion amsugno dŵr o AS ac MPMC yn unol â'r dull a ddisgrifiwyd gan Yagc a Gogus gyda rhai addasiadau [46]. Roedd y samplau(0.5 g)wedi'u gwasgaru mewn 10 mL o ddŵr distyllu ar 25°Cin tiwb canrifoedd. Ar ôl sefyll am 30 munud, gyda gwrthdroad tiwb bob 5 munud, roedd y samplau wedi'u canoli ar 3500 rpm am 15 munud. Trosglwyddwyd y ffeilio ar blât alwminiwm a'i sychu am 3 awr ar 105°C. Cofnodwyd pwysau'r gel sy'n weddill a phenderfynwyd ar WSI a WAI fel a ganlyn:

(4) WAI(g/g)= Ennill pwysau gel/Pwysau sych y sampl

(5) WSI%= Pwysau solidau sych mewn uwchnatant ×100/Pwysau sych y sampl

3.4.4. Treuliad Protein Llaeth

Pennwyd treuliad protein yn ôl Abd El-Ghany et al. [47]. Yn fyr, gwasgarwyd samplau AS ac MPMC mewn dŵr distyllu ar grynodiad o 6.38 mg/mL, ac addaswyd y pH i 8.0. Un melin o hydoddiant stoc ensran wedi'i baratoi'n ffres (1.6 mg/mL trypsin, 3.1 mg/mL, ac 1.3 mg/mL ER amino peptidase1

(ERAP1)yn gymysg ag ataliad protein ar 37°C. Cofnodwyd y pH ar ôl 10 munud, a phenderfynwyd ar weithgarwch ensym gan ddefnyddio casein fel geirda. Defnyddiwyd yr hafaliad canlynol i gyfrifo treuliad protein [47]:

(6)% Treuliad = 210.46-18.10 (pH)

3.5.Ffracsiynau Ffenolig o PHM a NabM

Cynhaliwyd cyfansoddion ffenolig o samplau mwcilage gan ddefnyddio dadansoddiad HPLC gan y protocol a ddisgrifiwyd gan Elsayed et al. [48]. Yn fyr, dadansoddwyd y dyfyniad mwcilage gan ddefnyddio system HPLC cyfres Agilent 1260 (Agilent Technolegau Inc., Santa Clara, CA, UDA). Pasiwyd y gwahaniad gan ddefnyddio'r golofn C18 (100 mm×4.6 mm h.y.,5 um). Roedd y cyfnod symudol yn cynnwys (A) dŵr 0.2% H3PO4, (B)methanol, a(C) acetonitrile ar gyfradd lif o 0.6 mL/min. Roedd yr elfen graddiant yn unol â'r cynllun nesaf: 0-11 munud (96%A., 2% B);11-13 munud (50% A,25%B);13-17min (40% A,30%B);17-20.5 munud (50%B,50%C);a 20.5-30 munud (96% A,2% B). Pennwyd y donfedd synhwyro (synhwyrydd UV,284 nm) ar 284 nm. Maint y pigiad oedd 20 μL a chynhaliwyd tymheredd y golofn ar 30°C. Roedd cyfansoddion yn hysbys drwy gymharu eu hamser cadw â'r rhai o safonau dilys. Defnyddiwyd cyrion calibradu i werthuso'r symiau cyfansawdd.

3.6.Cyfanswm Ffenolig a Flavonoid Cynnwys AS ac MPMC

Pennwyd cynnwys Polyffenolic gan ddull Folin-Ciocalteu gyda rhai addasiadau [5]. Yn gryno, roedd 2.8 mL milli-Qwater yn cynnwys 10 mg o AS neu MPMC yn gymysg â 2 mL o 2% sodiwm carbonad, a 0.1 mL o 50% o adweithydd Folin-Ciocalteau. Ar ôl 30 munud o deori ar dymheredd ystafell, mesurwyd amsugno'r gymysgedd adwaith ar 750 nm yn erbyn dŵr wedi'i selio fel gwag gan ddefnyddio sbectroffotomedr (Hitachi, Model 100-20). Defnyddiwyd asid Gallig (GA) fel cyfansoddyn ffenolig safonol, ac adeiladwyd cromlin safonol saith pwynt (0-200 mg/L). Mynegwyd y canlyniadau fel cyfwerth ag asid galig miligram fesul gram protein (GAE/g).

Flavonoidaupenderfynwyd ar gynnwys gan ddefnyddio'r dull alwminiwm clorid fel y disgrifiwyd yn flaenorol gan Abedelmaksoud et al. gyda rhai addasiadau [5]. Yn gryno, roedd dŵr 2.8 mL mililitr-Q yn cynnwys 10 mg AS neu MPMC yn gymysg â 0.1 mL o 10% alwminiwm clorid hexahydrad a 0.1 mL o 1 M o acen potasiwm. Ar ôl deori ar dymheredd ystafell am 40 munud, mesurwyd amsugno'r gymysgedd adwaith ar 415 nm yn erbyn dŵr wedi'i selio fel gwag. Defnyddiwyd Quercetin fel safon gan ddefnyddio cromlin safonol saith pwynt (0-50 mg/L). Mynegwyd cyfanswm y cynnwys flavonoid fel miligram quercetin cyfatebol (QE/g).

3.7. Gweithgaredd Gwrthocsidiol AS ac MPMC

Gwerthuswyd cyfanswm capasiti creithiau radical am ddim AS ac MPMC gan ddefnyddio tair ymosodiad gwrthocsidiol gwahanol: Stabl 2,2-diffenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH), Azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sylffad asid (ABTS), a radicalau radical Hydroxyl (HS) fel y disgrifiwyd yn flaenorol gan El-Maksoud et al. [5].

3.8. Proffil Amino Acidau o AS ac MPMC

Roedd samplau protein yn asid hydrolyzed gan ddefnyddio 6 N HCl yn ôl Peksa et al. [49. Dadansoddwr asid amino awtomataidd (AAA 400, INGOs Ltd.) ei ddefnyddio i bennu asidau amino.

3.9. Priodweddau Gwynegol

Paratowyd samplau fel y disgrifiwyd gan Barnes [50]gyda rhai addasiadau. Pennwyd y viscosedd o 2.5%(w/w)ateb ar pH7 ar 25±1°C gan ddefnyddio viscomedr Brookfield (DV-II+ Pro, Meddalwedd Rheocalc, yr Almaen). Roedd straen (σ)a viscosedd (n)wedi'u plotio fel swyddogaeth o gyfradd cneifio. Cyfrifwyd y mynegai cysondeb(K) a mynegai ymddygiad llif (n) y model cyfraith pŵer:

Mae gwerth n yn hafal i 1 ar gyfer hylifau Newtonaidd ac mae'n amrywio o 0 i 1 ar gyfer hylifau sy'n teneuo cneifio ac yn fwy nag 1 ar gyfer hylifau tewhau cneifio [51].

3.10.Sganio Gwahaniaethol Calorimetreg (DSC)

Mesurwyd priodweddau thermol AS ac MPMC gan ddefnyddio calorïau sganio gwahaniaethol (PerkinElmer, UDA). Gosodwyd samplau(4-6 mg) mewn plât alwminiwm a'u selio. Yna cafodd pob sosban ei gwresogi i 350°C gyda llif o nwy nitrogen sych ar 20 mL min-I ar gyfradd wresogi o 10°C min-1. O uchafbwynt endothermig thermogram Y DSC, amcangyfrifwyd y tymheredd ar y dechrau, y tymheredd pontio uchaf, a'r pwynt diraddio [52]. Penderfynwyd ar y gwerth enthalpy pontio (AH) o'r ardal o dan yr uchafbwynt endothermig yn y gromlin DSC, a defnyddiwyd y badell alwminiwm gwag fel cyfeiriad.

3.11. Sbectrosgopïen Isgoch Fourier-Transform (FTIR)

Mesurwyd sbectol isgoch rhwng 600 a 3500 cm-I ar 25°Cusing sbectroffotomedr FTIR (QFA Flex, UDA) gan y dull myfyrio cyfan a wanhawyd gan ddefnyddio penderfyniad o 4 cm-I a chaffael 10 sgan yr eiliad.

3.12. Microsgopi Electron Trawsyrru

Cafodd microstrwythur AS ac MPMC ei ddychmygu gan ddefnyddio microsgop electron trawsyrru (JEOL, JEM 1400 Flash, Japan) ar 80 kV. Cymhwyswyd y cam cryo yn y dull staenio negyddol [53].

3.13.Astudiaethau Biolegol ar AS ac MPMC

Gweithgaredd Gwrth-ganser 3.13.1.In Vitro

Cafwyd yr holl linellau celloedd a ddefnyddiwyd yn yr arbrawf hwn o'r Casgliad Diwylliant Math Americanaidd (ATCC, Manassas, VA, UDA). Defnyddiwyd dwy linell gell ganseraidd ddynol yn yr ymosodiad hwn: mammary adenocarcinoma (MCF-7, ATCCHTB-22TM)a charsinoma hepatogellog (HepG2, ATCC4 HB-8065TM). Ffibr croen nad yw'n ganseraidd BJ-1(ATCC(8) CRL-2522TM) a'r fron epiotheliol MCF-12F (ATCC CRL-10782TM) Profwyd llinellau celloedd hefyd i'w cymharu. Tyfwyd llinellau celloedd yng nghyffrwng Eagle wedi'i addasu gan Dulbecco (DMEM/glwcos uchel, HyCloneTM, UDA) wedi'i ategu â serum buchol 10% y ffetws (FBS, Gibco, Brasil), 100 U/mL penicillin, 100 ug/mL streptomycin, a 25 ng/mL amffotericin B(Sigma, Oakville, AR, Canada) a'i ddiwyllio ar 37°C gyda 5%CO, mewn deorydd digrifwch. Disodlwyd y cyfrwng diwylliannol bob yn ail ddiwrnod gyda chyfrwng ffres. Pan gyrhaeddodd y celloedd 70% o ddryswch, cawsant eu datgysylltu gan ddefnyddio 0.25% Trypsin-EDTA(1X) Gibco, Canada, a'u trosglwyddo i fflasg diwylliant newydd. Ar ôl yr ail ddarn, cafodd y celloedd eu rhoi ar brawf a'u platio mewn plât 96-da ar grynodiad o 2×10* celloedd/da. Ar ôl 24 h o deori, cafodd y cyfrwng ei dwyllo, a golchwyd y celloedd ddwywaith gyda PBS ac yna'n cael eu trin â 200 μL o gyfrwng diwylliant yn cynnwys crynodiadau gwahanol o samplau protein(1, 5,10, a 20ug/mL). Defnyddiwyd Doxorubicin HCl(4 ug/mL) fel rheolydd cadarnhaol, tra bod celloedd a gafodd eu trin â chyfrwng heb eu datrys yn cael eu cymryd fel rheolaeth negyddol. Roedd y platiau wedi'u deori ar 37°CC am 24 h a'rgwrth-ganserpenderfynwyd ar weithgarwch y samplau gan ddefnyddio ymosodiad niwtral o ran y defnydd coch yn ôl Repetto et al. [54]. Yn fyr, ar ôl y cyfnod deori, disodlwyd y cyfrwng gyda 150 uL o dyw coch niwtral (100 mg/mL) wedi'i ddiddymu mewn cyfrwng di-sero, a chafodd y celloedd eu deori ar 37°CC am 3 h. Nesaf, cafodd y celloedd eu rinsio gyda PBS, ac ychwanegwyd 150 μL o gyfrwng elution (EtOH/AcCOOH,50 1)ac yna ysgwyd tyner am 10 munud i sicrhau diddymiad llwyr. Mesurwyd amsugno ar 540nm gan ddefnyddio darllenydd plât microdon (BioTek,96 Well Plates, ELX808, UDA).

lle mae Ac yn amsugno'r rheolydd ac Fel y mae amsugno'r sampl. Cyfrifwyd marwolaeth celloedd canran a gyflwynwyd fel cytotocsid(%)a'r crynodiad sy'n lladd 50% o gelloedd (IC50) ar gyfer pob sampl.

3.13.2.Penderfynu ar p53, Bax, Caspase-3, a Lefel Proteinau Bcl-2

Pennwyd lefelau cellog marcwyr protein apoptosis allweddol ar ôl 24 h ar ôl triniaeth gydag ICso AS ac MPMC. Yn fyr, cafodd Hep G-2, MCF-7, Bj-1, a chelloedd MCF-12F eu hadu ar 5× 10* o gelloedd/da mewn platiau 6-da. Ar ôl 24 h o deori gyda'r samplau ar 37 o'r C, casglwyd celloedd a'u lysio ac yna'u canoli am 10,000rpm am 20 munud ar 4°C. Cafodd crynodiad protein ei fesur yn yr uwchnatant gan ymosodiad Bradford [55]. Dadansoddwyd gweithgaredd Caspase-3 gan ddefnyddio pecyn ymosod colorimetrig (Abcam, ab39401)yn ôl cyfarwyddiadau'r gwneuthurwr [56]. Yn gryno, ychwanegwyd 10 mg o brotein at 50 uL o is-set Caspase ac addaswyd y gyfrol derfynol i 200 μL gan ddefnyddio'r glustog adwaith ar 37 o C, a chafodd y gymysgedd ei deori am 1 h yn y tywyllwch ac yna mesur crynodiad Caspase-3 ar 405 nm.

Lefel y marciwr pro-apoptotig p53, sy'n gysylltiedig â X(Bax), a'r marciwr gwrth-apoptotig B-cell lymffoma-2(Bcl-2)wedi'i bennu mewn llysiau celloedd gan ddefnyddio Aseso Ensmewn-Gysylltiedig â'r Imiwnedd Cam Syml ELISA yn ôl cyfarwyddiadau'r gwneuthurwr (ab207225, ab119506, ac ab199080; Abcam, UDA), yn y drefn honno [57,58].

3.13.3.DIFROD DNA wedi'i Ysgogi gan Ddiogelu Straen Ocsideiddiol

Cynhaliwyd ymosodiad difrod DNA fel y disgrifiwyd yn flaenorol gan Leba et al. [59] gydag ychydig o addasiad. Yn gryno, roedd 3 μL o blasmid ataliwr Riboniwclease RNH1(NM_203387)Tagio Dynol ORF Clone 10 μg/μL yn gymysg ag adweithydd Fenton (5 mM o H2O2 a 0. 3 mM o FeSO4 a 0. 6 mM o EDTA), ac addaswyd y gyfrol derfynol i 25 μL gan ddefnyddio clustogi ffosffad (H2POA, 8.3 mM, tH 7.4). Yna, cafodd yr ateb ei deori am 20 munud ar 37°C. Er mwyn asesu gallu'r AS a'r MPMC i ddiogelu rhag ocsid yn erbyn difrod DNA a ysgogwyd gan adweithydd Fenton, ychwanegwyd 5 μg/mL AS/NabM, AS/IHM, ac AS cyn deori. Defnyddiwyd DNA plasmid RNH1 (3 μL, 10 μg/μL) fel rheolaeth diogelu DNA.

3.13.4.Ymosodiad difrod DNA genomeg sy'n seiliedig ar PCR

Roedd genyn homo sapiens methylenetetrahydrofolate (MTHFR) wedi'i chwyddo gan ddefnyddio PCR o genomeg gwaed a dynnwyd yn flaenorol o samplau gwaed iach gan ddefnyddio pecyn echdynnu DNA safonol [60]. Roedd DNA wedi'i deori am 10 munud gyda neu heb adweithydd Fenton wedi'i ategu ag AS neu MPMC. Ymhelaethwyd ar freuder 198-bp gan ddefnyddio forward5'-TGAAGGAGAAGGTGTCTGCGGGA-3' a gwrthdroi 5'-AGGACGGTGCGTGAGAGTGAGAGTG-3'primers. Gan ddefnyddio 50ng o DNA a driniwyd, cynhaliwyd ymhelaethu ar PCR yn dilyn thermocycler nesaf (94°C am 5 munud, ac yna 25 cylch o wadu, y 30au ar 94°C; atodi, 30au ar 60°C; ac estyniad,30 ar 72°C)am 25 cylch ac 1 cylch ymestyn terfynol ar 72°C am 5min. Cymhwyswyd samplau adwaith PCR ar gyfer electrofforesis gel agarose (2%).

3.13.5. Proffilio Mynegiant Genynnau gan RT-qPCR

Cynhaliwyd dadansoddiadau o fynegiant genynnau o genynnau marcio allweddol o blaid a gwrth-apoptotig gyda HepG-2, MCF-7, Bj-1 a chelloedd MCF-12F a amlygir i IC50 a gafwyd data (Tabl 3)am 72 h. Yn fyr, cafodd cyfanswm yr RNA ei echdynnu gan ddefnyddio Cyfanswm y Kit Puro RNA (QIAGEN., Thorold, AR, Canada) yn ôl cyfarwyddiadau'r gwneuthurwr. cDNA

cynhaliwyd synthesis fel y disgrifiwyd yn flaenorol gan Aboul-Sound et al. [61]. Perfformiwyd ac aseswyd rhaglenni ymhelaethu a phenodoldeb amplicon PCR drwy ddefnyddio beiciwr thermol Rotor-Gene O 5-Plex HRM (Qiagen, Yr Almaen) gyda Quanti-Tect SYBR-Green PCR Kit (Qiagen, yr Almaen) fel y'i cofnodwyd yn flaenorol yn dilyn protocolau safonol [61]. Defnyddiwyd y primerau canlynol: Hs_P53_1 SG QuantiTect Primer Attack (QT00060235); Hs_CASP3_1_SG Quan-tiTect Primer Attack (QT00023947); Lymffoma B-cell 2 Hs_BCL2_1_SG QuantiTect Primer Attack (QT00025011); Hs_BAX_1_SG protein tebyg i Bcl-2 QuantiTect Primer Attack (QT00031192); a 18S rDNA genyn cadw tŷ (HK) Hs_RRN18S_1_SGQuantiTect Primer Attack(QT00199367). Roedd rhaglen feicio thermol PCR a dadansoddiad mynegiant genynnau i bennu'r newid plyg o'i gymharu â'r genyn 18S yn cael eu cyflawni yn y bôn fel yr adroddwyd yn flaenorol [61].

3.14.Dadansoddiad Ystadegol

Mynegwyd y canlyniadau a gafwyd fel cymedr ± wyriad safonol. Cyflawnwyd ystadegau gan ddefnyddio SPSSsoftware 11.5 (SPSS, Inc.Chicago, IL, UDA). Defnyddiwyd prawf ystod lluosog Duncan i bennu'r gwahaniaethau sylweddol ymhlith yr holl samplau, ac ystyriwyd bod gwahaniaethau'n sylweddol ar p<>

4. Casgliadau

I gloi, datgelodd yr astudiaeth hon fod cymysgu protein llaeth âpolysaccharidaudrwy wahaniaethu datrysiad pH yn dechneg addas ar gyfer cymhathu. Mae gan y cyfadeiladau mwcilage protein llaeth sy'n deillio o hynny (MPMC) ffenolig sylweddol uwch aflavonoidaucynnwys na'r protein llaeth (AS). Dangosodd canlyniadau DSC fod cymhathu AS â polysacgaridau wedi cynyddu'n sylweddol y sefydlogrwydd thermol gyda newid mewn tymheredd gwadu. Cynhaliwyd dadansoddiadau FTIR i nodi'r grwpiau swyddogaethol, ac ymchwiliwyd i ymddygiad llif y cyfadeiladau a baratowyd. Cynyddodd WSI a WAI o brotein llaeth drwy gymhlethu gyda NabM neu IHM. Defnyddiwyd TEM i ddelweddu microstrwythur y cyfadeiladau a baratowyd. Ar y llaw arall, disgwylir i'r cyfadeiladau protein llaeth sy'n deillio o hynny gyda mwcilage hwsgol isabgol (HM) neu mwcilage Nabeq (NabM) berfformio'n well na'r proteinau llaeth brodorol yn yr effaith gwrthocsidiol a gwrth-ganser. I grynhoi, mae'r MPMCexpressed eiddo gwrth-ganser unigryw yn erbyn canser y fron enghreifftiol a llinellau celloedd carsinoma hepatig (MCF7 a HEPG2, yn y drefn honno) fel y profwyd gan ymosodiad niwtral ar y defnydd coch.

Mae MPMC wedi gwella'r ddaugwrthocsidydda gweithgarwch gwrth-amledd. Mae caspases yn brotestiadau rheolydd allweddol sy'n gysylltiedig â sefydlu apoptosis. Mae uwchraddio trawsgrifiadau protein caspase 3 a mRNA (Ffigur 9A, B) yn rheoli proteinau eraill ar lwybr apoptosis, a nodweddir gan gwymp y membran gwiddon gyda rhyddhau cytocrom c a ysgogwyd gan Bax ac ysgogi caspase 9leading i'r gwaith dilynol o ymgysylltu â caspase 3. Datgelodd uwchraddio Casp3, t53, a Bax, ynghyd â lleihau mynegiant Bcl-2, fod ymsefydlu apoptosis MPMCinduced, lle bydd uwchraddio p53 yn ysgogi mynegiant o Bax, a fydd, yn ei dro, yn ysgogi datganiad cytochrome c, ac yna actifadu caspase-9 a-3. At hynny, mae'n hysbys bod Bcl-2 yn atal rhyddhau cytochrome c. Yn ein hastudiaeth, dangoswyd bod israddio Bcl-2 a ysgogwyd gan MPMC yn hwyluso rhyddhau cytocrom c a ysgogwyd gan Bax a'r apoptosis dilynol.

Mae effaith gwrth-ganser y cyfadeiladau protein-polysacgaride yn rhoi mwy o oleuadau ar ba mor berthnasol yw'r cyfadeiladau hyn i'w defnyddio wrth ddatblygu therapïau canser fforddiadwy ac effeithlon heb fawr o sgil-effeithiau.