Proffilio Metabolomeg Seiliedig ar NMR ar gyfer Sialens Radical A Priodweddau Gwrth-heneiddio Rhan 1
Jun 06, 2022
Cysylltwchoscar.xiao@wecistanche.comam fwy o wybodaeth
Crynodeb:Mae perlysiau sydd fel arfer yn cael eu cydnabod fel planhigion meddyginiaethol yn adnabyddus am eu heffeithiau therapiwtig ac fe'u defnyddir yn draddodiadol i drin nifer o afiechydon, gan gynnwys heneiddio. Nod yr astudiaeth hon oedd gwerthuso'r amrywiadau metabolyn ymhlith chwe pherlysiau dethol sef Curcuma longa, Oenanthe japonica, Vitex Mundo, Pluchea indica, Cosmos caudatus, a Persicaria minws gan ddefnyddio cyseiniant magnetig niwclear proton ('H-NMR) ynghyd â dadansoddiad data aml-amrywedd (MVDA). . Mesurwyd actifedd sborionu radical rhydd y darn gan 2,2-diffenyl-1-picrylhydrazyl(DPPH), a 2,2-asinobis(3-ethyl-benzothiazoline{{8) }}asid sulfonic)(ABTS) ac assay cynhwysedd amsugno radical ocsigen (ORAC). Nodweddwyd yr eiddo gwrth-heneiddio gan weithgareddau ataliol gwrth-elastase a gwrth-colagenase. Datgelodd y canlyniadau fod P. minws yn dangos y gweithgareddau scavenging radical uchaf ac eiddo gwrth-heneiddio. Roedd y biplot rhannol sgwariau lleiaf (PLS) yn nodi presenoldeb metabolion cryf yn P. minuses megis quercetin, quercetin-3-O-rhamnoside (quercitrin), deilliadau myricetin, catechin, isorhamnetin, astragalin, ac apigenin.dull echdynnu flavonoid pdfGellir dod i'r casgliad y gellir ystyried P. minws yn ffynhonnell bosibl o gynhwysyn gwrth-heneiddio a hefyd yn ddileu radical rhydd da. Felly, gellid defnyddio P. minws mewn datblygiad yn y dyfodol mewn ymchwil gwrth-heneiddio a pharatoadau cynhwysion meddyginiaethol.
Geiriau allweddol:sborion radical; atalydd elastase; atalydd collagenase; metabolomeg; dadansoddi data aml-amrywedd; proton NMR; proffilio cyfansawdd
1. Rhagymadrodd
Nodweddir heneiddio gan ddirywiad cynyddol yn swyddogaethau ffisiolegol amrywiol organau, ac yna camweithrediadau, ac yn y pen draw marwolaeth [1]. Gellir ei gategoreiddio gan aflonyddwch ffisiolegol, metabolig ac imiwnedd sy'n gysylltiedig â straen ocsideiddiol eithafol. Mae cynhyrchu rhywogaethau ocsigen adweithiol (ROS) yn barhaus, er ei fod yn hanfodol ar gyfer swyddogaethau biolegol, yn farwol pan fo'n bresennol mewn symiau gormodol. Mae'r radicalau hyn fel arfer yn cael eu dileu trwy'r system amddiffyn gwrthocsidiol. Fodd bynnag, yn y cyfnod heneiddio, mae'r system amddiffyn gwrthocsidiol yn dod yn gamweithredol, gan arwain at ddifrod cellog ac o ganlyniad, gan wneud y celloedd yn agored i glefydau dirywiol amrywiol.
Ar draws y byd y dyddiau hyn, mae yna amrywiaeth o berlysiau sydd wedi cael eu defnyddio'n draddodiadol gan werin ar gyfer heneiddio naill ai i'w cynnwys mewn prydau wedi'u coginio neu eu bwyta'n amrwd fel salad. Ymhlith y perlysiau cyffredin a ddefnyddir ym Malaysia at y dibenion hyn mae dail Curcuma longa, Oenanthe japonica, Vitex negundo, Pluchea indica, Cosmos caudatus, a Persicaria minus. Yn ogystal â'r dibenion hyn, credir bod gan y perlysiau hyn werthoedd meddygol sy'n cyfrannu'n anuniongyrchol at fuddion iechyd eu defnyddwyr. Er enghraifft, mae dail C. longa yn cael eu defnyddio'n helaeth oherwydd eu harogl dymunol, yn enwedig mewn paratoadau coginiol Asiaidd, er nad yw eu defnydd wrth baratoi meddyginiaethol wedi'i ddogfennu'n dda eto.O. defnyddir javanica fel arfer mewn meddygaeth draddodiadol i drin clefyd melyn, gorbwysedd, polydipsia, gostwng pwysedd gwaed, lleddfu arhythmia a gwrth-anaffylacsis [2-4]. Adroddwyd hefyd bod gan y perlysiau hwn briodweddau amddiffynnol yn erbyn niwed ocsideiddiol i'r afu a achosir gan straen, perocsidiad lipid hepatig mewn llygod mawr sy'n cael eu trin â bromobensen, meddwdod alcohol, a gweithgaredd firws hepatitis B [5-8]. Mae V. negundo yn cael ei ddefnyddio'n draddodiadol fel meddygaeth werin i wella cur pen, twymyn, annwyd, a pheswch, trin clefyd y llygad, ddannoedd, llid, leukoderma, wlserau croen, twymyn catarrhal, arthritis gwynegol, gonorrhea, broncitis, vermifuge, gwrthfacterol, antipyretig a phriodweddau gwrthhistaminaidd [9,10]. Adroddwyd bod gan y perlysieuyn hwn botensial gwrth-hyperglycemig, ac effeithiau hepatoprotective ac fe'i defnyddiwyd fel therapi amnewid hormonau mewn ymarfer clinigol[11-13]. Gwyddys yn draddodiadol bod P. indica yn meddu ar effeithiau gwrthocsidiol, gwrthficrobaidd, gwrthlidiol, hypoglycaemig a diuretig; ac i wella arthritis gwynegol [14-19]. Mae perlysiau lleol poblogaidd, C. caudatus wedi'i ddefnyddio i wella cylchrediad y gwaed, hyrwyddo ffurfio esgyrn iach, lleihau gwres y corff, hyrwyddo anadl ffres, trin heintiau sy'n gysylltiedig â micro-organebau pathogenig, gostwng pwysedd gwaed uchel ac mae hefyd yn ddefnyddiol wrth lanhau'r gwaed [20-24]. Mae'n hysbys hefyd bod gan y perlysiau hwn briodweddau gwrthocsidiol, gwrth-diabetig, gwrth-hypertensive, gwrth-bacteria, l, a gwrth-ffwngaidd [22,25-27]. Adroddwyd bod perlysiau adnabyddus, P. minws yn meddu ar weithgaredd gwrthficrobaidd, gweithgaredd sytotocsig yn erbyn HeLa (carsinoma ceg y groth dynol), gwrthocsidydd cryf, a gweithgaredd gwrthganser [{28-33]. Defnyddir y perlysiau hwn hefyd mewn meddygaeth lysieuol i wella anhwylderau treulio, gan fod ei olew hanfodol wedi'i ddefnyddio i gael gwared â dandruff ac fe'i defnyddir hefyd mewn therapi aroma ac yn y diwydiant persawr [34,35]. Fodd bynnag, mae cymhwyso'r perlysiau hyn fel asiant gwrth-heneiddio yn gyfyngedig o hyd ac mae diffyg gwybodaeth yn y maes hwn.
Mae llên gwerin wedi defnyddio perlysiau neu blanhigion meddyginiaethol ar gyfer trin cyflyrau amrywiol megis gowt, pwysedd gwaed uchel, diabetes, dolur rhydd, a hefyd i ohirio heneiddio [36]. Dywedodd Sefydliad Iechyd y Byd fod y rhan fwyaf o afiechydon wedi cael eu trin â pherlysiau traddodiadol neu blanhigion meddyginiaethol ac mae hyn wedi cael ei ymarfer gan 65-80 y cant o boblogaeth y byd[37]. Dangoswyd bod gan rai o'r planhigion hyn weithgaredd sborion radical cryf iawn [38]. Mae'r cyfansoddion naturiol y credir eu bod yn cyfrannu at yr effeithiau therapiwtig hyn yn deillio o grŵp o fetabolion eilaidd, yn enwedig polyffenolau. Mae planhigion yn syntheseiddio polyffenolau yn naturiol ac yn darparu categori enfawr o gyfansoddion cemegol sy'n meddu ar briodweddau gwrthocsidiol, gwrth-garsinogenig, gwrth-gordewdra, gwrth-diabetig, gwrthlidiol a swyddogaethol eraill. Gallai polyffenolau hefyd amddiffyn rhag straen ocsideiddiol [39,40]. Mae gan y metabolion eilaidd hyn amrywiadau sylweddol yn eu strwythurau, sy'n cyfrannu at flas, lliw a phriodoleddau synhwyraidd y planhigion. Mae polyffenolau yn rhyngweithio â'r celloedd ar lefel gellog, yn bennaf trwy gysylltiad uniongyrchol â derbynyddion neu ensymau sy'n gysylltiedig â thrawsgludiad signal. Gall addasu statws rhydocs y celloedd arwain at y rhyngweithio hwn a hefyd sbarduno cadwyn o ymatebion rhydocs-ddibynnol. Mae effeithiau gwrthocsidyddion a phroocsidyddion polyphenolau wedi'u diffinio'n eang, gan arwain at effeithiau gwahanol ar lwybrau ffisiolegol celloedd. Gall goroesiad celloedd wella os yw polyffenolau yn gweithredu fel gwrthocsidyddion. Mewn cyferbyniad, gallant achosi apoptosis ac atal esblygiad tiwmor pan fyddant yn gweithredu fel proocsidyddion. Fodd bynnag, gall effeithiau amddiffynnol polyphenols ehangu ymhell y tu hwnt i oresgyn straen ocsideiddiol yn unig [41]. Mae astudiaethau cronnus wedi nodi y gallai polyphenolau fel quercetin, epicatechin gallate, epigallocatechin gallate, ac asid galig atal gweithgaredd ensymau proteolytig a tyrosinase in vitro, trwy berfformio fel asiantau cymhleth neu waddodi [{65-80]. Felly, gellir defnyddio perlysiau neu blanhigion meddyginiaethol a ddangosodd nodweddion gwrthocsidiol ac effeithiau ataliol yn erbyn ensymau heneiddio fel gwrthocsidyddion a hefyd fel asiantau gwrth-heneiddio. O ystyried hyn, dylid perfformio proffilio metabolion a chydberthynas â gweithgaredd chwilota radical a phriodweddau gwrth-heneiddio'r planhigion hyn. Gellir gwerthuso amrywiad metabolaidd rhwng organebau trwy fetabolomeg, a ystyrir yn offeryn amlbwrpas y dyddiau hyn [46,47].flavonoidaugellir astudio'r amrywiad gan ddefnyddio dulliau dadansoddol penodol ynghyd â dadansoddi data aml-amrywedd. Er enghraifft, yr offeryn dadansoddol a ddefnyddir amlaf ar gyfer astudiaeth metabolomeg planhigion yw sbectrosgopeg cyseiniant magnetig niwclear (NMR) [48]Gallai sbectrosgopeg NMR gynnig dadansoddiad strwythurol syml a gyflawnir o signalau a chysonion cyplu metabolion (cynradd ac uwchradd) sef bresennol yn yr organebau, gan gynnwys echdynion crai [49]. Ar ben hynny, gall dwyster y signal metabolit o'i gymharu â chrynodiad molar ddarparu tystiolaeth ddefnyddiol am ansawdd a maint y metabolion a nodwyd [49]. NMR yw'r opsiwn gorau ar gyfer olion bysedd a gwahaniaethu ar gyfer perlysiau oherwydd bod y gwerthusiad hwn yn adlewyrchu nifer y metabolion a nodwyd ac nid y signalau a neilltuwyd [49]. Rheolwyd llawer iawn o ddata a gafwyd o ddadansoddiadau NMR gan ddadansoddiad prif gydrannau (PCA) a sgwariau lleiaf rhannol (PLS), sy'n gydrannau o ddadansoddi data aml-amrywedd. Defnyddir yr offer defnyddiol hyn hefyd i ganfod marcwyr posibl yn y samplau[48].
Gall Cistanche gwrth-heneiddio
Yn wyneb y cais cyfyngedig a diffyg gwybodaeth am y perlysiau dethol hyn fel asiantau gwrth-heneiddio, yn yr astudiaeth hon, mae dail chwe pherlysiau dethol, sef C.longa, O. javanica, V. negundo, P. indica, C Dadansoddwyd .caudatus, a P.minus, gan ddefnyddio sbectrosgopeg H-NMR ar gyfer proffilio metabolion a chydberthynas â gweithgaredd sborionu radical ac eiddo gwrth-heneiddio. Rhagdybiwyd y byddai'r perlysiau hyn yn datgelu gweithgareddau biolegol sylweddol (gweithgarwch chwilota radical ac eiddo gwrth-heneiddio) a byddai cydberthynas sylweddol rhwng metabolion ac eiddo gwrth-heneiddio yn cael ei sicrhau.defnyddiau hesperidinDewiswyd y perlysiau hyn ar sail eu defnydd ers cenedlaethau mewn bwyd traddodiadol lleol ac maent yn cael eu bwyta'n amrwd fel salad yn ystod oesoedd y werin.
2. Canlyniadau a Thrafodaeth
2.1.Gweithgarwch Sborion Radical Perlysiau
Mae radicalau rhydd wedi'u cysylltu fel achos nifer o afiechydon dynol sy'n cynnwys diabetes mellitus, atherosglerosis, briwiau llidiol, clefyd isgemig y galon, anhwylderau metabolaidd, gwahanol glefydau gwrthimiwnedd, cyflyrau dirywiol niwrogyhyrol, a'r broses heneiddio [50-52] Y mecanwaith posibl credir bod cyfansoddion ffenolig fel system amddiffyn gwrthocsidiol oherwydd eu bod yn chwilota'n uniongyrchol o'r radicalau rhydd sy'n ymwneud â heneiddio a chlefydau cronig eraill [53-55]. Yn y bôn, mae gweithgaredd sborionu radical cyfansoddion naturiol mewn planhigion yn cael ei fesur er mwyn graddio ac argymell y deunyddiau planhigion gorau i'w bwyta [56].
Yn yr astudiaeth hon, mae potensial gweithgarwch chwilota radical chwe pherlysiau yn erbyn 2,2-diffenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH),2,2-asinobis(3-ethyl-benzothiazoline-1- {7}}Archwiliwyd radicalau asid sylffonig)(ABTS) a chynhwysedd amsugno radical ocsigen (ORAC)(perocsyl) ac fe'i dangosir yn Ffigur 1. Datgelodd canlyniadau'r astudiaeth fod gweithgaredd sborionu radical y perlysiau a astudiwyd yn amrywio o 36.12 i 411.61 ug/mL ar gyfer IC5o y assay DPPH,70.27 i 854.98mg sampl capasiti gwrthocsidiol cyfatebol Trolox (TEAC)/g ar gyfer assay ABTS a sampl Trolox/g 1972.31 i 6639.01 mM ar gyfer assay ORAC. Roedd canfyddiadau gweithgaredd sborionu radical DPPH yn dangos bod dail P. minws yn dangos cryn dipyn (t<0.05) higher="" radical="" scavenging="" effect="" followed="" by="" c.caudatus,="" pindica,="" v.="" negundo,="" o.e="" javanica,="" and="" c.longa="" leaves="" (figure="" 1a).="" the="" leaves="" of="" p.="" minus="" extracted="" with="" 60%="" ethanol="" showed="" exceptionally="" high="" radical="" scavenging="" activity="" that="" was="" close="" to="" that="" of="" trolox.="" this="" finding="" is="" in="" agreement="" with="" huda-faujan="" et="" al.[57]who="" stated="" that="" p.="" minus="" extract="" showed="" greater="" antioxidant="" activity="" when="" compared="" to="" other="" common="" herbs="" such="" as="" c.="" caudatus,o.javanica,="" centella="" asiatica,="" and="" murraya="" koenigiii="" leaves,="" and="" the="" antioxidant="" activity="" were="" comparable="" to="" that="" of="" synthetic="" antioxidant="" butylhydroxytoluene="" (bht),="" other="" studies="" have="" also="" proved="" that="" p.minus="" leaves="" demonstrated="" high="" antioxidant="" activity="">
In this study, ABTS radical cation decolorization assay showed quite similar results obtained in the DPPH radical scavenging activity (Figure 1B).P.minus leaves showed the highest Trolox equivalent antioxidant capacity (TEAC), followed by C.caudatus, P.indica, V. negundo, C.longa, and O. javanica. However, the antioxidant value for C. longa leaves was not significantly different (p>0.05) o V. negundo ac O.javanica. Mae'r canfyddiad hwn wedi'i ragweld gan fod gweithgareddau sborionu radical ABTS a DPPH yn rhannu mecanwaith adwaith tebyg yn y dadansoddiad gwrthocsidiol lle mae un neu fwy o electronau'n cael eu trosglwyddo i leihau'r cyfansoddion targed. Yn asesiad ABTS, cymharwyd y canlyniadau trwy ddefnyddio cywerth Trolox. Yn ôl y TEAC, roedd detholiad dail P.minus yn gyfrwng chwilota radical cryf a gellid ei astudio ymhellach ar gyfer priodweddau swyddogaethol eraill.
Mae Ffigur 1 hefyd yn dangos gweithgaredd sborionio echdynion llysieuol ar radicalau perocsyl yn nhermau ORACvalue (sampl mM Trolox/g). Ymhlith y darnau o berlysiau a brofwyd, roedd gweithgaredd sborionio V. negundo a C.caudatus yn erbyn radicalau perocsyl a gynhyrchwyd gan AAPH yn sylweddol (t.<0.05) higher,="" followed="" by="" p.="" minus="" and="" p.="" indica,="" and="" the="" lowest="" radical="" scavenging="" potential="" was="" exhibited="" by="" o.="" javanica="" and="" c.="" longa="" (figure="" 1c).="" this="" finding="" was="" slightly="" different="" when="" compared="" with="" the="" other="" two="" radical="" scavenging="" assays(dpph="" and="" abts),="" which="" revealed="" that="" p.minus="" had="" the="" highest="" free="" radical="" scavenging="" effect.="" in="" vitro,="" antioxidant="" potential="" can="" be="" determined="" according="" to="" two="" categories="" of="" classes,="" which="" are="" hydrogen="" atom="" transfer(hat)based="" assays="" and="" electron="" atom="" transfer="" (et)based="" assays.="" assays="" based="" on="" et="" include="" dpph="" and="" abts="" radical="" scavenging="" capacity="" assays,="" the="" total="" phenolic="" assay="" by="" folin-ciocalteu="" reagent,="" superoxide="" dismutase(sod)="" assay,="" and="" the="" ferric="" ion="" reducing="" antioxidant="" power(frap)="" assay="" an="" example="" of="" hat-based="" assays="" is="" the="" orac="" assay="" which="" scavenges="" peroxyl="" radicals="" [60].="">cistanche ymerodraeth gollFelly, gellir dyfalu bod y mecanwaith gweithredu yn effaith chwilota radical P.minus yn dibynnu'n gryf ar brofion seiliedig ar ET, sy'n bennaf yn chwilio am rywogaethau ocsigen adweithiol heblaw radicalau perocsyl. Serch hynny, roedd yr holl brofion yn awgrymu bod gan P.minus a C.caudatus weithgaredd gwrthocsidiol uchel, sy'n debyg i'r rheolaeth gadarnhaol, quercetin. Felly, dylid ymchwilio i gymhwyso'r perlysiau hyn fel asiantau gwrth-heneiddio.
2.2. Gweithgaredd Atal Elastase
Mae elastase yn ensym o ddosbarth y dosbarth proteas (peptidase) sy'n torri i lawr elastin. Mae elastin wedi'i leoli mewn meinwe gyswllt ac mae'n brotein sy'n atebol am elastigedd y croen a'r ysgyfaint ac yn cael ei gataleiddio gan yr ensym elastase [61-63]. Mae astudiaethau blaenorol wedi profi bod dirywiad elastin gan elastase mewngellol yn cynyddu wrth i ni heneiddio neu oherwydd amlygiad mynych i ymbelydredd UV, sydd wedyn yn arwain at heneiddio croen [62-64].
Dyluniwyd yr astudiaeth bresennol i bennu effaith detholiadau o berlysiau dethol fel asiantau gwrth-heneiddio. Mae Ffigur 2A yn dangos ataliad yr ensym elastase gan y darnau perlysiau. Fe wnaeth ensymau elastase a ddeorwyd gyda'r echdynion perlysiau yn sylweddol (p < {="" {="" }}="" .05)="" atal="" yr="" ensym="" o="" fwy="" na="" 40="" y="" cant="" .="" datgelodd="" canlyniadau'r="" astudiaeth="" fod="" gweithgaredd="" ataliol="" elastase="" y="" perlysiau="" a="" brofwyd="" yn="" amrywio="" o="" ataliad="" 43.47="" i="" 57.91="" y="" cant.="" mewn="" crynodiad="" o="" 100="" ug/ml="" ar="" gyfer="" pob="" echdyniad="" o="" berlysiau,="" dangosodd="" p.minus="" yn="" sylweddol=""><0.05) higher="" elastase="" inhibition="" at="" 57.61="" ±="" 0.95%,="" even="" higher="" than="" that="" of="" quercetin="" at="" the="" same="" concentration="" with="" inhibition="" at="" 52.94±1.18%.="" c.caudatus="" also="" showed="" comparable="" anti-elastase="" activity="" (51.34±0.21%)to="" quercetin,="" followed="" by="" p.="" indica,="" v.negundo,="" c.="" longa="" and="" o.javanica.="" similar="" findings="" were="" also="" observed="" by="" other="" studies="" on="" persicaria="" species="" (synonyms="" polygonum="" spp)[43,65,66].="" kim="" et="" al.="" [44]="" also="" reported="" that="" the="" persicaria="" spp="" demonstrated="" the="" highest="" elastase="" inhibition="" among="" 60="" plants="" studied="" with="" inhibition="" against="" elastase="" activity="" being="" more="" than="" 50%.="" the="" inhibition="" of="" the="" elastase="" enzyme="" activity="" of="" p.="" minus="" obtained="" in="" this="" study="" is="" in="" agreement="" with="" previous="">
Mae echdynion planhigion wedi cael eu hymchwilio'n eang ar gyfer gweithgareddau atal ensymau heneiddio ac yn aml canfyddir bod ganddynt weithgaredd gwrth-elastase, er enghraifft, pennwyd gweithgaredd gwrth-elastase o polyffenolau wedi'u hynysu o ddail persimmon (Diospyros kaki) [67] a rhosmari (Rosmarinus officinalis) detholiadau [68]. Mae cyfansoddion ffenolig fel catechin, epicatechin, resveratrol, a procyanidin B2 mewn pomace grawnwin yn ogystal â ffenoligau planhigion [69,70], a flavonoidau fel quercetin, kaempferol, a myricetin fel cyfansoddion unigol[71], hefyd wedi'u canfod i gael gweithgaredd gwrth-elastase cryf.ffracsiwn flavonoid puro micronedig 1000 mg yn defnyddioDatgelodd astudiaeth debyg ar 23 o ddarnau planhigion fod gan de gwyn y gweithgareddau gwrth-elastase uchaf, a oedd yn cynnwys cynnwys ffenolig uchel iawn [72]. Felly, gallai cyfansoddion ffenolig yn enwedig flavonoidau a allai fod yn bresennol yn P. minws fod wedi cyfrannu at ei weithgaredd gwrth-elastase uchel.
2.3. Gweithgarwch Atal Collgenase
Mae ensym colagenase yn metalloproteinas sy'n torri'r bondiau peptid mewn colagen. Mae'r ensym hwn hefyd yn gallu hollti moleciwlau eraill a geir mewn celloedd, megis elastin, ffibronectin, gelatin, aggrecan, a laminin, ar wahân i golagen [73]. Dangosodd canlyniadau'r astudiaeth fod gweithgaredd ataliol colagenas y perlysiau a brofwyd yn amrywio o 56.49 ± 1.29 i 71. {{ 6}} ± 1.08 y cant . Sylwyd ar duedd debyg ar gyfer gweithgareddau gwrth-colagenas y perlysiau a astudiwyd, lle dangosodd P.minus yn sylweddol eto (t.<0.05) higher="" collagenase="" inhibitory="" activity="" with="" 71.00±="" 1.08%(figure="" 2b).="" interestingly,="" the="" inhibitory="" effect="" of="" p.minus="" was="" higher="" than="" that="" of="" quercetin="" at="" the="" same="" concentration="" (65.95±0.56%).="" c.caudatus="" and="" p.="" indica="" on="" the="" other="" hand,="" showed="" comparable="" anti-collagenase="" activity="" to="" quercetin="" at="" 66.05±0.74%="" and="" 66.29±1.68,="" respectively.="" the="" inhibition="" of="" the="" collagenase="" enzyme="" decreased="" in="" the="" order="" of="" p.="" minus="">P.indica >C.caudatus >C.longa> O.javanica>V. Segundo. However, the anti-collagenase activity was found to be not significantly different (p>0.05)rhwng P. indica a C.caudatus, C.longa, ac O.javanica. Mae astudiaeth ar weithgarwch gwrth-colagenas wedi nodi y gallai catechins te gwyrdd fel epigallocatechin gallate (EGCG) fod yn rymus atalydd collagenase. Yn yr un modd, yn yr astudiaeth bresennol, dangosodd EGCG weithgaredd gwrth-colagenas arbennig o dda ar 12.5 ug/mL. Yn ôl Kim et al. [74], gall dyfyniad te, sy'n cynnwys catechins sy'n cael eu cydnabod fel chelators metel, glymu i'r Zn2ion o fewn yr ensym colagenas ac felly ei gadw rhag cyfuno â'r swbstrad. Mae'r mecanwaith hwn oherwydd bod collagenase yn ensym metalloproteinase sy'n cynnwys sinc.
Mae colagen, sef y protein mwyaf helaeth yn y matrics allgellog ac un o brif gydrannau'r croen, yn gyfrifol am gryfder ac elastigedd y croen, ac am gynnal ei hyblygrwydd [75]. Felly, gall y cyfansoddion sy'n arddangos gweithgaredd gwrth-colagenas gael effeithiau gwerthfawr, yn gyffredinol, i gadw croen iach trwy atal diraddio matrics dermol trwy ohirio'r broses o ddadelfennu colagen ac yna'r broses wrinkling. Yn yr astudiaeth hon, gallai effaith atal P. minws echdyniad ar weithgaredd colagnase fod wedi digwydd trwy sawl mecanwaith. Gan fod P. minws yn berlysieuyn ac mae'n hysbys bod y rhan fwyaf o'r perlysiau'n gyfoethog â pholyffenolau, efallai bod y grwpiau hydrocsyl (OH) o bolyffenolau wedi cysylltu â'r asgwrn cefn neu gadwyn grŵp ochr swyddogaethol arall o golagenas. Ar wahân i hynny, mae'n bosibl bod y rhyngweithio hydroffobig rhwng cylch bensen polyphenol a cholagenase wedi newid cydffurfiad yr ensym, gan arwain at anweithrediad yr ensym [76]. Gallai'r trydydd mecanwaith gynnwys y safle actif ïon sinc mewn collagenase fel y nodir uchod. Roedd Bigg et al. [77]adroddodd fod safle actif yr ensym colagnase yn cynnwys ïon sinc adeileddol sy'n gweithredu'n hanfodol i gynorthwyo rhyngweithio ag atalydd. Yn ogystal â'r polyffenolau, gallai flavonoidau, sy'n is-grŵp o polyffenolau, hefyd gelu metel sinc gan ei 3-strwythur hydroxy flavon [78].
Datgelodd astudiaeth gan Sin a Kim [79] fod flavonols yn effeithiol iawn fel atalyddion collagenase. Yn ôl yr awduron, roedd quercetin a kaempferol yn cael effaith ataliol uwch ar weithgaredd collagenase o'i gymharu â flavones, isoflavones a flavanones, lle'r oedd yr olaf y mwyaf aneffeithlon. Felly, credir bod y grŵp flavonols o gyfansoddion fel quercetin, kaempferol, myricetin, a galanin a allai fod yn bresennol yn P.minus yn darparu gweithgaredd gwrth-colagenas uchel y perlysiau hwn. Ar y llaw arall, mae angen atalyddion elastase a cholagenase naturiol o'r planhigyn fel ffynhonnell newydd o gyfryngau gwrth-heneiddio, er mwyn atal y croen rhag mynd yn hen neu'n rhychau. Felly, mae'r canfyddiad presennol yn awgrymu bod posibilrwydd ar gyfer yr un cydrannau yn P. minws dyfyniad a allai gael effaith ataliol yn erbyn elastase a ensymau collagenase.
2.4.1H-NMR Adnabod Perlysiau a Metabolitau
Cyflwynir sbectra cynrychioliadol H-NMR o'r perlysiau a astudiwyd yn Ffigur 3A. Roedd cymhariaeth weledol o sbectra LH-NMR o'r chwe pherlysiau yn dangos rhai gwahaniaethau, yn enwedig ar gyfer dosbarthiadau amrywiol o fetabolion. Roedd gwahaniaeth amlwg rhwng sbectra H-NMR y perlysiau yn yr aliffatig (6 0.{5}}.00), carbohydrad(63.00-5.50), a yn arbennig, y rhanbarth aromatig (65.50-9.00). Yn y rhanbarth aromatig, roedd sbectra-NMR P. minws yn dangos gwahaniaethau amlwg ac yn dangos arwyddion cryfach fyth o gymharu â'r perlysiau eraill (Ffigur 3B). Roedd hyn yn awgrymu y gallai dail P.minus gynnwys crynodiad uwch o fetabolion aromatig o gymharu â pherlysiau eraill.
Datgelodd dadansoddiad pellach o'r 'sbectra H-NMR fod cyfanswm o 29 o fetabolion mawr wedi'u cydnabod o'r darnau dail, fel y dangosir yn Nhabl 1. Darparwyd y broses o adnabod metabolion sylfaenol gan y feddalwedd (cronfa ddata Chenomx) a nodwyd metabolion eilaidd o gronfa ddata ar-lein (Cronfa Ddata Metabolome Dynol [HMDB]; http://www.hmdb.ca/) a hefyd drwy gymharu â data o y llenyddiaeth. Roedd y metabolion yn naw metabolyn cynradd (n=9), asidau ffenolig (n=5). flavonoidau (n{5}}) ac asid asgorbig (n =1). Roedd y metabolion cynradd a nodwyd yn cynnwys asidau amino (alanin a falin), asidau brasterog,s, a D-limonen lle darganfuwyd eu symudiadau cemegol yn y rhanbarth aliffatig (6 0.50-3.00). Canfuwyd metabolion cynradd sy'n cynnwys carbohydradau (-glwcos, -glwcos, ffrwctos, swcros), colin, ac asid asgorbig yn y rhanbarth shifft cemegol o δ3.00-5.50. Nodwyd metabolion eilaidd y rhanbarth aromatig (65.50-9.00) fel quercetin, quercetin-3-O-rhamnoside [47,80], quercetin-3-O-glucoside [80], quercetin-3-O-glucuronide [81], quercetin-3-O-arabinofuranoside [47 80], rutin, deilliadau myricetin, catechin, epicatechin, isorhamnetin, astragalin, apigenin, clorogenig asid, asid galig, asid coumarig, asid fumarig, asid fformig, 3-methylxanthine a serotonin, Mae astudiaethau amrywiol wedi dangos presenoldeb cyfansoddion ffenolig a metabolion eilaidd, yn arbennig, flavonoids yn P. minws dail [{{33} }], fel y canfuwyd hefyd yn yr astudiaeth hon.
Daw'r erthygl hon o Molecules 2019, 24, 3208; doi:10.3390/molecules24173208 www.mdpi.com/journal/molecules
