Straen Ocsidiol, Metabolaeth Egni Camweithredol, A Niwrodrosglwyddyddion Ansefydlog Wedi Newid Proffil Metabolaidd yr Ymennydd Mewn Model Llygoden Fawr O Efelychu Heliox Dirlawnder Deifio I 4.0 MPa Ⅱ

Gweithdrefn echdynnu meinwe

Mân addasiad oedd y weithdrefn echdynnu metabolion pegynol o samplau meinwe fel yr adroddwyd [18]. Cafodd samplau meinwe wedi'u rhewi ymlaen llaw eu dadmer ar rew ac yna cawsant eu homogeneiddio'n fecanyddol mewn system hydoddydd dŵr methanol-clorofform-dŵr rhewllyd-oer gradd HPLC (400 μL, 400 μL, a 285 μL, yn y drefn honno, fesul 100 mg o feinwe'r ymennydd) gan ddefnyddio homogenizer meinwe (Precellys 24, Bertin Technologies, Villeurbanne, Ffrainc). Cadwyd y homogenadau canlyniadol ar iâ am gyfnod o 30 munud ac yna eu centrifugio ar 12,000 xg am gyfnod o 10 munud ar 4˚C. Yna tynnwyd y supernatant o bob sampl a'i lyoffileiddio i gael powdr yn cynnwys metabolion pegynol mewn sychwr rhewi (FD-1A-80, BIOCOOL, China). Wedi hynny, ailgyfansoddwyd pob sampl powdr gyda byffer 550 μL PBS â 0.1 y cant o TSP, ac yna cafodd yr holl samplau eu cymysgu'n drylwyr â rota a'u centrifugio ar 12,000 xg am gyfnod o 20 munud ar 4˚C. Yna trosglwyddwyd cyfanswm o 500 μL o uwchnatant i diwb NMR 5.0 mm-diamedr (Norrel, DU). Roedd egwyddor echdynnu protein yn y sampl cortecs fel y disgrifiwyd yn flaenorol heb unrhyw addasiadau. Arllwyswyd union nifer y samplau cortecs i glustog homogenization (HEPES 25 mmol/L, pH 7.4, MgC12 5 mmo1/L, DTT 2 mmol/L, EDTA 1.3 mmol/L, EGTA 1 mmol/L, 0.1 y cant Triton X-100, aprotinin, pepstatin A a leupeptin 10 ug/ml yr un) a homogeneiddio â llaw mewn baddon iâ. Cafodd y cymysgedd ei fewngyrchu ar 1,000 xg am gyfnod o 10 munud ar 4˚C, a defnyddiwyd y uwchnatant ar gyfer y crynodiadau protein meintiol gan ddefnyddio prawf Bradford.

Cliciwch Yma I Wybod Swyddogaeth Gwrth-ocsidiad Cistanche

Assay biocemegol

Cymhwyswyd assay imiwnosorbent sensitif, cystadleuol wedi'i gysylltu ag ensymau (ELISA) gyda chitiau assay ar gyfer meintioli'r ensymau metabolaidd Na-KATPase ac AChE a'r niwrodrosglwyddyddion DA, E, NE, 5HT, a GABA. Penderfynodd ELISA hefyd lefelau SOD, MDA, a GPx mewn meinwe cortigol gyda chitiau assay yn unol â chyfarwyddiadau'r gwneuthurwr.

Mesur NMR

Cyflawnwyd meintioli metabolion meinwe yn effeithlon gan ddefnyddio llwyfan dadansoddol yn seiliedig ar sbectromedr NMR cydraniad uchel hylif Bruker Avance-III wedi'i gyfarparu â chwiliedydd cryogenig sensitifrwydd uchel yn gweithredu ar amledd o 600. 17 MHz ar gyfer arsylwi 1 H ar 298 K. Cymhwyswyd dilyniant curiad pwls 1 H ZGPR (TOPSPIN fersiwn 3.0, Bruker Biospin) un dimensiwn wedi'i atal gan ddŵr (RD{-90˚-ACQ) i caffael data NMR ar gyfer pob sampl. Cofnodwyd pedwar sgan ffug a 128 o sganiau dros dro i barth amser o bwyntiau data 32 K gan ddefnyddio lled sbectrol o 20 ppm gydag oedi ymlacio o 10.0 s ac amser caffael o 2.73 s. Cymhwyswyd swyddogaeth ehangu llinell esbonyddol o 0.3 Hz a llenwi sero i bwyntiau data 64 K i'r holl bydredd anwytho rhydd (FIDs) cyn trawsnewid Fourier. Defnyddiwyd technegau NMR dau ddimensiwn ychwanegol gyda sbectrosgopeg cydberthynas graddiant maes pwls (gCOSY) a sbectrosgopeg cydberthynas gyfan homoniwclear 2D (TOCSY) gan ddefnyddio rhaglenni pwls safonol ar samplau dethol i gadarnhau'r aseiniadau sifft cemegol. Defnyddiwyd cyfnewidydd sampl awtomataidd ar gyfer cyflwyno sampl yn barhaus wrth gaffael pob sbectra.

Adnabod a chadarnhau metabolion

Nodwyd signalau NMR yn seiliedig ar leoliad cyseiniannau unigol ar y sbectra ym mhecyn meddalwedd Chenomx NMR Suite v. 8.4 (Fersiwn Gwerthuso). Cadarnhawyd rhai aseiniadau metabolion gan ystyried sifftiau cemegol, cysonion cyplu a phatrymau lluosogrwydd metabolion fel gwybodaeth am gyplyddion sgalar a dynnwyd o 1 H–1 H COSY, 1 H–1 H TOCSY, cronfeydd data NMR cyhoeddus megis COLMAR a Metabolome Dynol Cronfa Ddata (HMDB), a'r llenyddiaeth [18, 19].

Dadansoddiad ystadegol aml-amrywedd

Roedd y protocol cynbrosesu a ddefnyddiwyd ar gyfer rhagbrosesu pob sbectrwm NMR 1D 1 H yr un fath â'r hyn a ddisgrifiwyd yn ein gwaith blaenorol [20]. Cafodd sbectra 1 H NMR eu cyflwyno'n raddol a'u cywiro gan ddefnyddio MestReNova (Mestrelab Research, SL, Sbaen), a chafodd rhanbarth sbectrol pob metabolyn ei integreiddio i un bwced. Tynnwyd cyseiniant y signal toddydd organig a'r rhanbarth signal H2O/HOD gweddilliol ym mhob sbectra 1D 1 H NMR. A 0.{{30}}Cymhwyswyd gweithdrefn bwced 03 Hz a normaleiddio i swm y dwyster sbectrol wedi'i luosi â 10000 ym mhob sbectra. Dim ond y gwerthoedd bwced mwyaf mewn un brig a ddewiswyd ar gyfer y dadansoddiad cam nesaf er mwyn osgoi camddehongli'r metabolion gwahaniaethol oherwydd signalau sy'n gorgyffwrdd. Yn dilyn hynny, echdynnwyd bwcedi annatod o 47 o fetabolion a bu'n destun dadansoddiad data unnewidyn ac aml-amrywedd. Perfformiwyd dadansoddiad diwahaniaeth yn ôl dadansoddiad prif gydran (PCA) a dadansoddiad gwahaniaethu yn ôl dadansoddiad gwahaniaethol rhannol sgwariau lleiaf (PLS-DA) a rhagamcanion orthogonol i ddadansoddiad gwahaniaethol strwythurau cudd (OPLS-DA) gan ddefnyddio pecyn meddalwedd SIMCA-P plus 14.0 (Umetrics , Umeå, Sweden) wedi'i raddio i ddata amrywiant uned. Darluniwyd y plotiau sgôr PCA a PLS-DA gyda'r prif gydrannau cyntaf a'r ail (t[1], t[2]), tra bod plot sgôr OPLS-DA yn defnyddio t[1] a'r gydran orthogonol (i[1] ]). Cyfrifwyd y paramedrau Q2 (cum), R2Y(cum), ac R2X (cum) i brofi cadernid y modelau gwahaniaethu yn erbyn gorffitio [21]. Fel y disgrifiwyd yn flaenorol, mae gwerth asesu ansawdd o C2 � 0.4 yn cael ei ystyried yn fodel dibynadwy. Defnyddiwyd y strategaeth draws-ddilysu saith gwaith a'r prawf trynewid 200 o weithiau gyda'r gydran gyntaf i warchod rhag gorffitio modelau a dilysu ymhellach ddibynadwyedd a dibynadwyedd y modelau. Pe bai gan linell atchweliad Ch2 ryng-gipiad negyddol a bod gwerthoedd Q2 wedi'u gosod yn y pwynt mwyaf chwith yn fwy na holl werthoedd Ch2 y pwyntiau cywir yn y prawf trynewid, roedd y model OPLS-DA sefydledig yn gadarn [22]. Cymhwyswyd y strategaeth traws-ddilysu plyg 10- rhagosodedig i warchod rhag gorffitio modelau. Yn gyffredinol, ystyrir ystadegyn asesu ansawdd (C2) � 0.4 yn fodel dibynadwy, fel y disgrifiwyd yn flaenorol. Defnyddiwyd y cyfernodau cydberthynas (r) a gwerthoedd VIP a dynnwyd o'r modelau OPLS-DA i nodi metabolion a gyfrannodd yn sylweddol at y gwahaniad rhwng y ddau grŵp. Yn ogystal, cyfrifwyd y newidiadau plyg mewn metabolion rhwng grwpiau gan ddefnyddio swyddogaeth. IA/IB, lle mae IA ac IB yn cynrychioli'r gwerthoedd cymedrig ar gyfer y metabolyn annatod yn y grwpiau A a B, yn y drefn honno. Cafodd y map gwres a'r siartiau bocs eu plotio i hwyluso dealltwriaeth o'r amrywiadau metabolion ymhlith grwpiau.

Ystadegau unnewidyn o integrynnau metabolyn

Mynegir cyfartaledd bwced metabolion ym mhob grŵp fel y gwyriad ± safonol (SD). Cynhaliwyd dadansoddiad unnewidyn hefyd gan ddefnyddio ANOVA (dadansoddiad o amrywiant). Gwerthuswyd gwahaniaethau ystadegol arwyddocaol rhwng grwpiau gan brawf-t heb ei ail o ddwy gynffon ar ôl trosi log ym meddalwedd GraphPad Prism V 8.4.3 (Graph Pad Software Inc., San Diego, CA, UDA). Diffiniwyd gwahaniaethau ystadegol arwyddocaol gan werthoedd p (< 0.05). According to the three criteria, including an absolute value of r greater than 0.50, a value of VIP greater than 1.0, and a p-value less than 0.05, the bucket variables with one of three features will be selected as discriminatory variables. Because more than one bucket value was listed from the same metabolite, two or more discriminative variables arising from the same metabolite will be present in the discriminatory panel. Selection will be carried out based on VIP rankings, and only the variables from the same metabolites with the highest VIP values were therefore selected as discriminatory metabolite level features, which will be included in the next-step analysis.

Dadansoddiad cydberthynas metabolig ystadegol system a dadansoddiad clwstwr hierarchaidd

Cynhaliwyd cyfrifiad cyfernod cydberthynas Pearson a dadansoddiad clwstwr hierarchaidd yn seiliedig ar integrynnau cymharol metabolion yn R Studio (Fersiwn 1.4.1717) gyda sgriptiau bach. Ar gyfer pob pâr grŵp, dangoswyd y matrics cydberthynas mewn map picsel fel y disgrifir yn y llenyddiaeth [21]. Yn gryno, ar gyfer pob newidyn mewn un grŵp, ystyriwyd bod cydberthnasau â gwerthoedd p llai na 0.05 yn gydberthynas ystadegol arwyddocaol ac fe’u cadwyd i adeiladu’r rhwydwaith cydberthynas terfynol i ddangos perthnasoedd cudd metabolion o fewn y grŵp. grŵp a'r perthnasoedd metabolaidd cynhyrfus rhwng grwpiau. Mae'r sgwariau coch yn dangos cydberthynas gadarnhaol fwy arwyddocaol. Mae'r sgwariau glasach yn dangos cydberthynas gadarnhaol fwy arwyddocaol. Mae'r sgwariau gwyn yn dynodi'r gydberthynas heb unrhyw arwyddocâd. Defnyddiwyd yr offeryn MetaboAnalyst 3.0 i ddadansoddi'r llwybrau a'r rhwydweithiau metabolaidd cerebral mwyaf perthnasol a ddefnyddiwyd wrth i ymatebwyr i HSD. Ar gyfer y dadansoddiad topoleg llwybr a gyflawnwyd, dewiswyd llyfrgell llwybr mamaliaid Rattus norvegicus (llygoden fawr). Defnyddiwyd y dull hwn hefyd i ddarparu amcangyfrifon o effaith llwybr, cyfradd darganfod ffug (FDR), a gwerthoedd p.

Canlyniadau Mynegeion biocemegol cortical o'r grwpiau HSD a CON

I ddilysu effeithiau newid metabolaidd HSD ar feinweoedd yr ymennydd, paramedrau biocemegol, gan gynnwys gweithgareddau ensymatig metabolaidd metabolaidd ynni Na-KATP, AChE, a LDH, niwrodrosglwyddyddion DA, E, NE, 5HT, a GABA, a yrproteinau ocsideiddiol sy'n gysylltiedig â straenoSOD, MDA, a Gpx ym meinweoedd cortecs ipsilateral o lygod mawr HSD a CON hefyd (Tabl 1). O'u cymharu â'r grŵp rheoli, cynyddwyd lefelau DA, E, NE, ac MDA yn sylweddol, tra gostyngwyd cynnwys Na-KATP, AChE, LDH, 5HT, GABA, SOD, a Gpx yn y model HSD. Rhestrwyd terfyn canfod pecynnau profi a ddefnyddiwyd yn y gwaith presennol yn Nhabl S3 yn y ffeil o ddeunyddiau atodol.

Tabl 1. Mesurwyd meintioli paramedrau biocemegol mewn meinwe cortecs CON a HSD anifeiliaid gan ELISA gyda'r pecynnau assay. (cymedr ± SD). yn dynodi arwyddocâd ystadegol.

Metabolitau a nodwyd mewn sbectra 1 H NMR o samplau meinwe ymennydd

Mae Ffig 3 yn dangos tri sbectra cynrychioliadol 1 H NMR o'r cortecs (Ffig 3A), hippocampus (Ffig 3B), a striatum (Ffig 3C) llygoden fawr HSD. Nodwyd ystod eang o fetabolion amlwg yn ôl data 1 H NMR o samplau meinwe'r ymennydd, ac maent yn anionau asid organig (lactad (Lac), malonate (Maln), succinate (Suc), malate (Mal), fumarate (FMA). ), 2-hydroxybutyrate (2-HB), asetad (Ace), fformat (Ar gyfer), taurine (Tau), ascorbate(Asc), 2-hydroxybutyrate (2HIB)), asidau amino (leucine (Leu), isoleucine (Ile), valine (Val), alanine (Ala), glycin (Gly), tyrosine (Tyr), phenylalanine (Phe), aspartate (Asp), glutamine (Gln), glwtamad (Glu) , threonine (Thr), serine (Ser), lysin (Lys), asparagine (Asn), niwrodrosglwyddyddion (-aminobutyrate (GABA)), metabolion sy'n gysylltiedig ag ynni (creatine (Cre), adenosine triphosphate (ATP), adenosine monophosphate ( AMP), metabolion cysylltiedig â ffosffolipid (Ophosphoethanolamine (PEA), O-phosphocholine (Pcho), sn-glycero-3-phosphocholine (GPC)), ac eraill (myo-inositol (MI), nicotinamide adenine dinucleotide (NAD plus). ), asid nicotinu ric (Nic), N-acetylaspartate (NAA), ffosffad nicotinamide-adenine-dinucleotide (NADP plus), UDP-N- galactose (UDPGa), wridin (Uri), uracil (Ura), cystidine (Cyt) , uridine 5'- monophosphate (UMP), inosine 5'-monophosphate (IMP), inosine (Ino), choline (Cho), car nitin (Car), glutathione (GSH). S1 Mae Tabl yn dangos gwybodaeth fanwl am yr aseiniadau metabolion.

Newidiadau proffil metabolaidd a ddatgelir gan ddadansoddiad metabolomig

Gwnaed PCA, sef dull dadansoddi archwiliadol a diduedd o sbectra 1 H NMR o bob echdyniad o’r ymennydd ar draws gwahanol ranbarthau’r ymennydd, yn gyntaf i ddatgelu’r prif dueddiadau metabolaidd a yrrir gan amlygiad hyperbarig i 400 msw amgylchedd dirlawnder helox. Datgelodd plot gwasgariad PC1 vs PC2 a gafwyd o PCA (S1A–S1C Ffig) o ddata bwced annatod wahaniaeth penodol gyda rhywfaint o orgyffwrdd rhwng y ddau ddosbarthiad. Dangosodd ymchwiliadau dan oruchwyliaeth i fodelau PLS-DA (S1A'-S1C' Ffig) ac OPLS-DA (Ffig 4A-4C) wahaniaethau dosbarth clir o'r proffiliau metabolaidd rhwng grwpiau. Mae Ffig 4 yn dangos lleiniau sgôr y model OPLS-DA ar gyfer y rhanbarth cortecs (A), y rhanbarth hippocampus (B), a'r rhanbarth striatum (C), gan ddangos gwahaniaethu clir rhwng y grwpiau HSD a'r rheolyddion. Roedd yr amrywiad eglur iawn a daioni'r rhagfynegiad a adlewyrchwyd gan werthoedd R2X a Q2 (S1A'–S1C' Ffig, Ffig 4A–4C) a lleiniau prawf trynewid (Ffig 4'{{-4C'A) yn dangos y cadernid y modelau dan oruchwyliaeth a gynhyrchir. Casglwyd y cyfernod cydberthynas (r) a dynnwyd o'r lleiniau llinell S, pwysigrwydd amrywiol mewn rhagamcaniad (VIP), a'r gwerth-p o'r profion univariate nonparametric i asesu'r metabolion sylweddol sy'n gyfrifol am y patrymau dosbarth-wahaniaethol. Felly, gan fodloni unrhyw un o'r tri maen prawf (gwerth absoliwt r yn fwy na 0.50, gwerth VIP yn fwy na 1.0, ynghyd â gwerth p llai na 0.05), dewiswyd panel o fetabolion ystadegol arwyddocaol (Tabl 1) sy'n gyfrifol am y gwahaniad rhwng y grwpiau CON a HSD. Yn Nhabl 1, mae gwerthoedd newid plyg sy'n fwy nag 1 yn dangos lefel uwch yn y grŵp HSD, tra bod gwerthoedd newid plyg sy'n llai nag 1 yn nodi lefel ostyngol yn y grŵp HSD. Rhestrir gwerthoedd DC cymedrig metabolion gwahaniaethol yn Nhabl S2. Gan ddefnyddio'r dadansoddiad clwstwr hierarchaidd o fetabolion a'r dull cysylltu cyfartalog, mae'r map gwres a gynhyrchir (Ffig 5A-5C) gyda dendrogramau yn caniatáu delweddu gwell o newidiadau metabolaidd tri rhanbarth yr ymennydd a achosir gan amlygiad hyperbarig mewn amgylchedd dirlawn heliwm ocsigen.

Anhwylderau metabolaidd a welwyd mewn gwahanol ranbarthau ymennydd llygod mawr HSD

Darparodd y dadansoddiad aml-amrywedd a'r dadansoddiad univariate uchod gan ddefnyddio uchder bwced metabolion yn y gwahanol grwpiau tiwb gwaith gwych i nodi metabolion gwahaniaethol gan ddatgelu'r newidiadau metabolaidd niwrolegol posibl sy'n gysylltiedig â digwyddiadau HSD. Darganfuwyd AMP uchel, FMA, Nic, a Phe a gostyngiad yn Ala, Asn, Car, Cho, Cyt, GABA, GSH, Ino, Lac, Pcho, Phe, Tyr, Ura, ac Uri ym meinwe cortecs yr HSD grŵp o'i gymharu â'r grŵp CON (Ffig 5A, Tabl 1). Yn y cyfamser, yn yr hippocampus, gostyngodd Ala, GSH, Lac, Uri, Cyt, GABA, Tyr, ac Ura hefyd a chynyddodd AMP yn y grŵp HSD, fel y gwnaethant yn y cortecs. Ar ben hynny, mynegwyd y Thr upregulated a Gly is-reoledig, ATP, Tau, Imp, Suc, Asc, a DMA mewn darnau hippocampus o'r grŵp HSD mewn perthynas â'r rheolaethau (Ffig 5B, 5D, Tabl 1). O'i gymharu â'r grŵp CONS, gostyngodd cynnwys Cyt, GABA, Ura, Cho, a Thr hefyd fel y gwnaethant yn y cortecs a'r hippocampus. Yn ogystal, lefelau uwch o asidau amino cadwyn ganghennog (BCAAs, gan gynnwys Leu, Ile, Val), a Lys a lefelau gostyngol o Gln, NAA, NAD plus , NADP plus , Asp, cyfres o fetabolion o ATP, Tau, IMP, a Suc, a ostyngodd hefyd yn yr hippocampus, a gwelwyd dau fetabol arall, Ino a Pcho, a oedd hefyd yn gostwng yn y cortecs, ym meinweoedd striatum llygod mawr grŵp HSD (Ffig 5C, 5D, Tabl 1). Mae llawer o fetabolion o'r fath bob amser yn dynodi llwybrau moleciwlaidd ymhlyg gyda chymhlethdod ac amrywiaeth. Mesurwyd gwerthoedd bwced annatod metabolion gwahaniaethol, a cheir crynodeb o newidiadau plyg ystadegol arwyddocaol yn eu crynodiadau rhwng y grwpiau heliox-dirlawnder-hyperbarig-agored a rheoli yn Nhabl S2 a Thabl 2 ar gyfer y tri rhanbarth ymennydd.

Ffig 4. Plotiau sgôr sgwariau gwahaniaethol dadansoddiad gwahaniaethol orthogonol rhannol (OPLS-DA) a phlotiau prawf trynewidiad sy'n gwahaniaethu effaith datguddiad dirlawniad heliox 4{00 msw ar sbectra 1H NMR o grwpiau rheoli yn y cortecs (CONC, n=8, HSDC, n=8, A ac A') (R2X=0.38; Q2=0.46), hippocampus (CONH, n {{12} }, HSDH, n=8, B a B') (R2X=0.37; Q2=0.43), a striatum (CONS, n=8, HSDS, n=8, C ac C') (R2X=0.39; Q2=0.40). Roedd gwerthoedd y paramedr Q2 yn y plotiau sgôr OPLS-DA, a oedd yn hafal i neu'n fwy na 0.40, ynghyd â gwerthoedd Q2 y pwynt mwyaf chwith yn y modelau trynewid yn fwy na'r holl werthoedd Q2 gosodedig o'r pwyntiau cywir (newidiad prawf 80 gwaith), gan nodi bod y modelau OPLS-DA sefydledig yn ddilys.

Gwelwyd Pcho, a oedd hefyd yn gostwng yn y cortecs, ym meinweoedd striatum llygod mawr grŵp HSD (Ffig 5C, 5D, Tabl 1). Mae llawer o fetabolion o'r fath bob amser yn dynodi llwybrau moleciwlaidd ymhlyg gyda chymhlethdod ac amrywiaeth. Mesurwyd gwerthoedd bwced annatod metabolion gwahaniaethol, a cheir crynodeb o newidiadau plyg ystadegol arwyddocaol yn eu crynodiadau rhwng y grwpiau heliox-dirlawnder-hyperbarig-agored a rheoli yn Nhabl S2 a Thabl 2 ar gyfer y tri rhanbarth ymennydd.

Ffig 5. Map gwres a phlotiau cydberthynas ystadegol sy'n deillio o werthoedd bwced y metabolion gwahaniaethol o'r cortecs (mae samplau A, A', HSDC yn gorwedd yn y panel uchaf ac mae CONC yn y panel isaf), hippocampus (B, B', HSDH). mae'r grŵp yn gorwedd yn y panel uchaf ac mae CONH yn gorwedd yn y panel isaf), ac mae samplau striatum (C, C', HSDS yn gorwedd yn y panel uchaf ac mae CONS yn gorwedd yn y panel isaf) meinweoedd llygod mawr HSD a CON. Mae metabolion ar y map gwres yn cael eu trefnu gan glystyru hierarchaidd yn seiliedig ar y tebygrwydd cyffredinol mewn patrymau lefel. Diagram Venn (D) yn dangos gorgyffwrdd metabolit ymhlith y cymariaethau HSDC-CONC, HSDH-CONH, a HSDS-CONS.

Dadansoddiad cydberthynas metabolit

Roedd y berthynas rhwng neu ymhlith metabolion mor gymhleth yn Ffig 5A'-5C'. Ar gyfer y metabolion ynni, y cydberthnasau cadarnhaol ar gyfer Lac vs Ala yn HSDC, AMP vs IMP yn HSDH, ATP vs Pcho yn HSDS, Suc vs GABA/Gln/Tyr/NAA yn HSDS, a'r cydberthynas negyddol ar gyfer Lac vs Thr a GSH vs Roedd Suc yn HSDH, Suc vs Val yn HSDS yn bresennol yn y plotiau cydberthynas metabolion. Ar gyfer y niwrodrosglwyddyddion, roedd y cydberthnasau cadarnhaol ar gyfer GABA vs Car yn HSDC, GABA vs Cho yn CONH, a GABA vs Suc/Ino/Gln yn HSDS yn bresennol yn y plotiau cydberthynas metabolion. Roedd y cydberthnasau negyddol ar gyfer GABA yn erbyn FMA yn y CONC a GABA yn erbyn NAA/ Ura/NADP plus yn y CONS yn bresennol yn y plotiau cydberthynas metabolit. Ar gyfer y metabolion sy'n gysylltiedig âstraen ocsideiddiol, ycydberthnasau cadarnhaolar gyfer GSH vs Asn yn yr HSDC a'r CONC, Tau vs Lac yn yr HSDH, Tau vs Suc/Ala yn y CONH, roedd y cydberthynas negyddol ar gyfer GSH vs Suc yn yr HSDH, Tau vs Thr yn yr HSDH yn bresennol yn y gydberthynas metabolit lleiniau.

Dadansoddiad llwybr Metabolomeg

Datgelodd dadansoddiad meintiol o'r llwybr a oedd yn cynnwys dadansoddiad cyfoethogi llwybr ac effaith llwybr o dopoleg y llwybr fodyliadau ystadegol arwyddocaol iawn wedi'u hysgogi gan HSD i gyfres o lwybrau metabolaidd. Disgrifir sgorau effaith llwybr, ynghyd â chyfraddau darganfod ffug (FDR) a gwerthoedd p, yn Ffig 6. Ystyriwyd bod llwybrau wedi'u cyfoethogi'n sylweddol os oedd gwerthoedd p yn is na 0.{5}}5; roedd y metabolion proffil (trawiadau) o gymharu â chyfanswm metabolion y llwybr (statws cyfatebol) yn uwch nag 1; ac roedd y sgorau effaith (sy'n nodi effaith metabolion yr effeithiwyd arnynt yn sylweddol yn y llwybr yn seiliedig ar fesur topoleg rhwydwaith o ganoli cymharolrwydd) yn uwch na 0. Y llwybrau yn y cortecs (Ffig 6A) gyda'r gwerth effaith metabolaidd mwyaf oeddffenylalanin, tyrosin, abiosynthesis tryptoffan>metaboledd ffenylalanîn> metaboledd pyrimidine > metabolaeth alanin, aspartate, a glwtamad. Y llwybrau yn yr hippocampus (Ffig 6B) a gafodd yr effaith metabolig fwyaf oedd ffenylalanîn, tyrosin, a biosynthesis tryptoffan> metaboledd glutathione> metaboledd glycin, serine a threonin> metaboledd purin> metaboledd pyrimidine> alanin, aspartate, a metaboledd glwtamad> metaboledd butanoad . Y llwybrau yn y striatum (Ffig 6C) a gafodd yr effaith metabolig fwyaf oedd alanin, aspartate, a metaboledd glwtamad> metaboledd nicotinad a nicotinamid> metabolaeth purin.

Gofynnwch am fwy:

E-bost:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Ffôn: ynghyd â 86 15292862950