Rhan 2: Mae Echinacoside yn Atal Rhyddhau Glwtamad Trwy Atal Ca2 Sy'n Ddibynnol ar Foltedd ynghyd â Mynediad A Protein Kinase C mewn Terfynellau Nerfau Cerebrocortical Rat

Cyswllt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-bost:audrey.hu@wecistanche.com

Cheng Wei Lu 1,2, Tzu Yu Lin 1,2, Shu Kuei Huang 1 a Su Jane Wang 3,*

Pls cliciwch yma yn ôl i Ran 1

3.2 Goblygiadau Therapiwtig

Excitotoxicity, proses patholegol a achosir gan ryddhau gormod o glwtamad ac actifadu derbynyddion glwtamad, yw prif achos marwolaeth niwronaidd mewn anhwylderau ymennydd acíwt a chronig fel strôc, anaf trawmatig i'r ymennydd, clefyd Parkinson, a chlefydau Alzheimer [13,41], a strategaethau therapiwtig gall cynnwys ataliad rhyddhau glwtamad fod yn strategaethau niwro-amddiffynnol addawol ar gyfer trin clefydau o'r fath. Mae Echinacoside wedi'i gadarnhau i dreiddio i'r rhwystr gwaed-ymennydd (BBB) ​​ac mae'n arddangos effeithiau niwro-amddiffynnol mewn amrywiol fodelau in vivo o niwrowenwyndra [8,10-12,42]. Er nad yw mecanwaith yr effeithiau niwro-amddiffynnol hyn wedi'i ddeall yn llwyr, mae nifer o fecanweithiau posibl wedi'u hadrodd gan gynnwys ataliad ymateb llidiol, sefydlogi swyddogaeth mitocondriaidd, gwrthocsidiad, sborion radical rhydd, a dynwared swyddogaeth niwrotroffig [5,9,12,42]. Yn yr astudiaeth gyfredol, mae galluechinacosidei leihau rhyddhau glwtamad o derfynellau nerf gall hefyd esbonio'n rhannol ei fecanwaith niwro-amddiffynnol. Fodd bynnag, a yw'r effaith hon yn cyfrannu at botensial therapiwtig ymddangosiadolechinacosidemewn anhwylderau'r ymennydd sy'n gysylltiedig â chynhyrfu glwtamad yn haeddu ymchwil pellach.

Effeithiau niwro-amddiffynnol ocistancef echinacoside

4.Defnyddiau a Dulliau

4.1. Cemegau

Prynwyd Fura-2-acetoxymethyl ester (Fura-2-AM) a 3',3',3'-dipropylthiadicarbocyanine ïodid [DiSC3(5)] gan Invitrogen (Carlsbad, CA, UDA). o-conotocsin MVIIC, rottlerin, 2-[1-(3-dimethylaminopropyl)indol-3-yl]-3-(indol-3-yl) maleimide ( GF109203X), 5,6,7,13-tetrahydro- 13-methyl-5-oxo-12H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,{ {27}}c]carbazole-12-propanenitrile (Go6976) ac N-[2-(p- bromocinnamylamino)ethyl]-5-isoquinolinesulfonamide (H89) eu prynu oddi wrth Tocris Bioscience (Bryste, UK). ).Echinacoside, dantrolene, DL-threo-beta-benzyl-oxyaspartate (DL-TBOA), 7-cloro-5-({7}}cloropheny)-1,{9}}dihydro{ {10}},1-benzothiazepin-2(3H)-one (CGP37157), 2-(2-amino-3- methoxyphenyl)-4H -1-benzopyran-4-un) (PD98059), ethylene glycol bis (-aminoethyl ether)- N, N, N/, N/- asid tetraacetig (EGTA) a phob adweithydd arall eu prynu gan Sigma- Aldrich Co. (St. Louis, MO, UDA).

4.2. Anifeiliaid

Defnyddiwyd llygod mawr Sprague-Dawley gwryw deufis oed. Roedd anifeiliaid yn cael eu cartrefu o dan amodau amgylcheddol safonol (22 ± 1 oC; 50 y cant o leithder cymharol; 12 h cylch golau / tywyll) ac yn caniatáu mynediad diderfyn i fwyd a dŵr. Lladdwyd yr anifeiliaid trwy ddad-beniad a thynnwyd y cortecs cerebral yn gyflym ar 4 oC. Cymeradwywyd y gweithdrefnau arbrofol gan Bwyllgor Gofal a Defnydd Anifeiliaid Sefydliadol Fu Jen (A10259), yn unol â Chanllaw'r Sefydliadau Iechyd Cenedlaethol ar gyfer Gofalu a Defnyddio Anifeiliaid Labordy. Gwnaethpwyd pob ymdrech i leihau dioddefaint anifeiliaid ac i ddefnyddio isafswm o anifeiliaid angenrheidiol i gynhyrchu canlyniadau dibynadwy.

4.3. Paratoadau Synaptosomaidd

Cafodd synaptosomau eu puro o cortecs cerebral llygod mawr ar raddiannau amharhaol Percoll fel y disgrifiwyd yn flaenorol [43,44]. Yn gryno, homogeneiddiwyd y meinwe mewn cyfrwng sy'n cynnwys 0.32 M swcros (pH 7.4), cafodd y homogenad ei allgyrchu am 10 munud ar 3000 × g (5{{25} }00 rpm mewn rotor JA 25.5; Beckman Coulter, Inc., Miami, FL, UDA) a 4 oC, a chafodd y supernatant ei allgyrchu eto am 12 munud ar 14,500 × g (11, 000 rpm mewn rotor JA 25.5). Ailddaliwyd y belen yn ysgafn mewn swcros 0.32 M (pH 7.4), a gosodwyd cyfanswm o'r ataliad synaptosomaidd hwn (2 mL) ar raddiant amharhaol 3 mL Percoll yn cynnwys swcros 0.32 M, 1 mM EDTA, 0.25 mM DL-dithiothreitol, 3 y cant , 10 y cant , a 23 y cant Percoll (pH 7.4). Ar ôl centrifugio ar 32,500 × g (16,500 rpm mewn rotor JA 20.5) am 7 munud ar 4 oC, adferwyd y synaptosomau rhwng y bandiau 10 y cant a'r 23 y cant Percoll, a chawsant eu gwanhau mewn cyfaint olaf o 30 ml o Cyfrwng byffer HEPES (140 mM NaCl, 5 mM KCl, 5 mM NaHCO3, 1 mM MgCl2 ﹒ 6H2O, 1.2 mM Na2HPO4, 10 mM glwcos, a 10 mM HEPES (pH 7.4)). Yn dilyn allgyrchu pellach ar 27,000 × g (15,000 rpm mewn JA 25.5) am 10 munud, cafodd y belen synaptosome ei haildynnu mewn 3 ml o gyfrwng byffer HEPES, a phennwyd y cynnwys protein gan ddefnyddio assay Bradford. Yn olaf, cafodd 0.5 mg o'r ataliad synaptosomau ei wanhau mewn 10 ml o gyfrwng byffer HEPES a'i allgyrchu ar 3000 × g (5000 rpm mewn rotor JA 20.1) am 10 munud. Taflwyd y supernatant, a chafodd y pelenni sy'n cynnwys y synaptosomau eu storio ar rew a'u defnyddio o fewn 4-6 h.

llysieuyn cistanche

4.4. Rhyddhau Glwtamad

Profwyd rhyddhau glwtamad gan fflworimetreg ar-lein fel y disgrifiwyd yn flaenorol [45,46]. Cafodd pelenni synaptosomaidd eu hailddarparu mewn cyfrwng byffer HEPES (0.5 mg/mL) a'u deori ymlaen llaw ar 37 oC am 10 munud ym mhresenoldeb albwmin serwm buchol 16 uM i rwymo unrhyw asidau brasterog rhydd a ryddhawyd o synaptosomau yn ystod cyfnod deori. Trosglwyddwyd cyfanswm o 2-mL o'r synaptosomau i cuvette wedi'i droi yn cynnwys 2 mM NADP plws , 50 uned o glutamad dehydrogenas, a 1.2 mM CaCl2, a mesurwyd fflworoleuedd NADPH mewn LS Perkin-Elmer{{14 }} sbectrofflworimedr (PerkinElmer Bywyd a Gwyddorau Dadansoddol, Waltham, MA, UDA) ar donfeddi cyffro ac allyriadau o 340 a 460 nm, yn y drefn honno. Gan nad yw synaptosomau yn agored i ysgogiad trydanol, defnyddiwyd yr atalydd sianel potasiwm 4-aminopyridine i ysgogi rhyddhau glwtamad. 4-mae aminopyridine yn ansefydlogi potensial y bilen a chredir ei fod yn achosi dadbolariad digymell ailadroddus Na plws sy'n dibynnu ar sianel sy'n fras yn agos at ddadbolariad in vivo y derfynell synaptig sy'n arwain at actifadu sianeli Ca2 plws sy'n ddibynnol ar foltedd a rhyddhau niwrodrosglwyddydd [47 ]. Cafwyd data bob 2 s. Ychwanegwyd safon o glutamad alldarddol (5 nmol) ar ddiwedd pob arbrawf. Defnyddiwyd gwerth y newid fflworoleuedd a gynhyrchwyd gan yr adio safonol i gyfrifo'r glwtamad a ryddhawyd fel nanomolau o glwtamad fesul miligram o brotein synaptosomal (nmol/mg). Mae'r gwerthoedd rhyddhau a ddyfynnir yn y testun yn lefelau a gyrhaeddwyd ar gyflwr cyson ar ôl 5 munud o ddadbolaru (nmol/mg/5 mun). Dadansoddwyd data cronnus gan ddefnyddio taenlenni Lotus 1-2-3 (IBM, White Plains, NY, UDA) a MicroCal Origin (OriginLab Corporation, Northampton, MA, UDA).

4.5. Potensial Pilenni Plasma

Penderfynwyd ar botensial y bilen plasma gyda lliw pilen-positif-sensitif, DiSC3(5) [48]. Cafodd synaptosomau eu hailddarparu mewn cyfrwng byffer HEPES, a throsglwyddwyd cyfanswm o 2 ml i cuvette wedi'i droi yn cynnwys 5 uM DiSC3(5) ar 37 oC mewn sbectrolifwr Perkin-Elmer LS{-55 (PerkinElmer Life and Analytical Sciences, Waltham, MA , UDA). Ar ôl caniatáu i'r cymysgedd gydbwyso am 3 munud, penderfynwyd ar y fflworoleuedd ar donfeddi cyffro ac allyrru 646 nm a 674 nm, yn y drefn honno. Casglwyd data bob 2 s. Dadansoddwyd data cronnus gan ddefnyddio MicroCal Origin (OriginLab Corporation, Northampton, MA, UDA) a'u mynegi mewn unedau fflworoleuedd.

4.6. Cytosolic Ca2 plws Crynodiad ([Ca2 plws ]C)

Mesurwyd y [Ca2 plws ]C gyda'r dangosydd Ca2 plus fura-2. Cafodd synaptosomau (0.5 mg/mL) eu rhag deori mewn cyfrwng byffer HEPES sy'n cynnwys 5 uM fura-2 a 0.1 mM CaCl2, am 30 munud ar 37 oC mewn tiwb profi wedi'i droi . Ar ôl llwytho fura-2, cafodd synaptosomau eu centrifugio mewn microcentrifuge am 30 s ar 3000 × g (5000 rpm). Cafodd y pelenni synaptosomaidd eu hail-ddarparu mewn cyfrwng byffer HEPES, a chafodd yr ataliad synaptosomaidd ei droi mewn cuvett thermostatedig mewn sbectrofluoromedr Perkin-Elmer LS{-55 (PerkinElmer Life and Analytical Sciences, Waltham, MA, UDA). Ychwanegwyd CaCl2 (1 mM) ar ôl 3 munud a gwnaed ychwanegiadau pellach ar ôl 10 munud ychwanegol. Cronnwyd data fflworoleuedd ar donfeddi cyffro o 340 a 380 nm (tonfedd allyriadau 505 nm) ar gyfnodau o 2 s. [Ca2 plws ]C (nM) ei gyfrifo gan ddefnyddio gweithdrefnau graddnodi [49] a hafaliadau a ddisgrifiwyd yn flaenorol [50]. Dadansoddwyd data cronnol gan ddefnyddio MicroCal Origin (OriginLab Corporation, Northampton, MA, UDA).

4.7. Blotio Gorllewinol

Cafodd synaptosomau eu homogeneiddio mewn byffer lysis (byffer HEPES 10 mM, pH 7.4), 1 y cant Triton X-100, a chymysgedd atalydd proteas. Eglurwyd lysates gan allgyrchiad, a phennwyd crynodiad protein gan ddefnyddio pecyn profi protein (Labordai Bio-Rad, Hercules, CA, UDA). Gwahanwyd symiau cyfartal o broteinau gan electrofforesis gel sodiwm dodecyl sylffad-polyacrylamid (SDS-PAGE) a'u trosglwyddo i'r bilen nitrocellulose. Cafodd y pilenni eu rhwystro â halwynog Tris-byffer a oedd yn cynnwys 5 y cant o laeth braster isel ac wedi'i ddeor â gwrthgorff sylfaenol priodol (ffosffo-protein kinase C (padell), 1:3000, NOVUS Biologicals Inc., Beverly, MA, UDA) dros nos yn 4 oC. Ar ôl tri golchiad mewn halwynog wedi'i glustogi gan Tris, cafodd y bilen ei thrin â'r gwrthgorff cyfunedig marchruddygl eilaidd (1:3000) am 1 awr ar dymheredd ystafell. Yna golchwyd y pilenni o leiaf deirgwaith gyda halwynog wedi'i glustogi gan Tris a'u delweddu gan ddefnyddio'r system cemiluminescence uwch (Amersham, Swydd Buckingham, DU). Cafodd aliquot o samplau ei lwytho a'i archwilio â gwrthgorff gwrth-PKC i ganfod PKC fel rheolydd llwytho. Aseswyd lefel mynegiant neu ffosfforyleiddiad yn ôl dwysedd band, a gafodd ei feintioli gan densitometreg. Dadansoddwyd meintioli densitometrig bandiau gan ddefnyddio meddalwedd Syngene (Synoptics, Cambridge, UK).

4.8. Dadansoddiad Ystadegol

Cafwyd data o un paratoad synaptosomaidd ac nid oeddent yn annibynnol ar ei gilydd. I brofi pa mor arwyddocaol yw effaith cyffur yn erbyn rheolaeth, defnyddiwyd prawf-t Myfyriwr dwy gynffon. Pan oedd angen cymhariaeth ychwanegol (megis a oedd ail driniaeth wedi dylanwadu ar weithred echinacoside), defnyddiwyd ANOVA un ffordd wedi'i ddilyn gan brawf Tukey. Cwblhawyd y dadansoddiad trwy feddalwedd SPSS (17.0; SPSS Inc., Chicago, IL, UDA). Mynegir data fel cymedr ± SEM; gwerthuswyd arwyddocâd yn p < 0.05="" ar="" gyfer="" pob="" mesur="">

cistanche

5. Casgliadau

Dyma'r astudiaeth gyntaf sy'n dangos bod echinacoside yn atal rhyddhau glwtamad o synaptosomau cerebrocortical llygod mawr trwy leihau mewnlifiad Ca2 ynghyd â sianeli Cav2.2 a Cav2.1, ac mae'r ataliad rhyddhau hwn yn debygol o ddibynnu ar atal y llwybr protein kinase C, o leiaf yn rhan. Mae'r canfyddiad presennol yn werthfawr oherwydd ei fod yn rhoi cipolwg newydd ar fecanweithiau gweithredu echinacoside yn yr ymennydd.

Diolchiadau: Cefnogwyd y gwaith hwn gan grant gan y Weinyddiaeth Gwyddoniaeth a Thechnoleg (MOST 103-2320-B-030-001 MY3).

Cyfraniadau Awdur: Tzu Yu Lin a Su Jane Wang a luniodd a dyluniodd yr arbrofion; Cheng Wei Lu perfformio yr arbrofion; Cheng Wei Lu a Shu Kuei Huang dadansoddi'r data; Ysgrifennodd Su Jane Wang y papur.

Gwrthdaro Buddiannau: Nid yw'r awduron yn datgan unrhyw wrthdaro buddiannau.

dyfyniad perlysiau cistanche

Cyfeiriadau

1. Tu, PF; Wang, B. ; Deyama, T.; Zhang, ZG; Lou, ZC Dadansoddiad o glycosidau ffenylethanoid o Herba cistanchis gan RP-HPLC. Acta Pharm. Pechod. 1997, 32, 294–300.

2. Dalby-Brown, L.; Barnett, H.; Landbo, AK; Meyer, AS; Molgaard, P. Effeithiau gwrthocsidiol synergaidd alcalidau, deilliadau asid caffeig, a ffracsiynau polysacarid o Echinacea purpurea ar ocsidiad in vitro o lipoproteinau dwysedd isel dynol. J. Amaeth. Cemegydd Bwyd. 2005, 53, 9413–9423. [CrossRef] [PubMed]

3. Dapas, B. ; Dall'Acqua, S.; Bulla, R. ; Agostinis, C. ; Perissutti, B. ; Invernizzi, S.; Grassi, G. ; Voinovich, D. Imiwnofodiwleiddio wedi'i gyfryngu gan surop llysieuol sy'n cynnwys dyfyniad gwraidd Echinacea safonol: Astudiaeth beilot mewn pynciau dynol iach ar fynegiant genynnau cytocin. Ffytomeddygaeth 2014, 21, 1406–1410. [CrossRef] [PubMed]

4. Ef, WJ; Ffang, TH; Tu, PF Cynnydd ymchwil ar weithgareddau ffarmacolegol echinacoside. Tsieina J. Chin. Mater. Med. 2009, 34, 476–479.

5. Deng, M. ; Zhao, JY; Tu, PF; Jiang, Y.; Li, ZB; Mae Wang, YH Echinacoside yn achub y celloedd niwronaidd SHSY5Y o apoptosis a achosir gan TNFalpha. Eur. J. Ffarmacol. 2004, 505, 11–18. [CrossRef] [PubMed]

6. Koo, KA; Canwyd, SH; Parc, JH; Kim, SH; Lee, KY; Kim, YC Gweithgareddau niwro-amddiffynnol in vitro o glycosidau ffenylethanoid o Callicarpa dichotoma. Med Planta. 2005, 71, 778–780. [CrossRef] [PubMed]

7. Wang, YH; Xuan, ZH; Tian, ​​S.; Du, GH Echinacoside Yn amddiffyn rhag 6-Anhwylder Mitocondriaidd a Achosir gan Hydroxydopamine ac Ymatebion Llidiol mewn Celloedd PC12 trwy Leihau Cynhyrchu ROS. Evid. Ategiad Seiliedig. Altern. Med. 2015, 2015, 189239. [CrossRef] [PubMed]

8. Zhu, M.; Lu, C. ; Li, W. Mae amlygiad dros dro i echinacoside yn ddigon i actifadu signalau Trk ac amddiffyn celloedd niwronaidd rhag rotenone. J. Neurochem. 2013, 124, 571–580. [CrossRef] [PubMed]

9. Geng, X. ; Tian, ​​X. ; Tu, P. ; Pu, X. Effeithiau niwro-amddiffynnol echinacoside yn y model MPTP llygoden o glefyd Parkinson. Eur. J. Ffarmacol. 2007, 564, 66–74. [CrossRef] [PubMed]

10. Wei, LL; Chen, H.; Jiang, Y.; Tu, PF; Zhong, M.; Du, J. ; Liu, F.; Wang, L.; Liu, CY Effeithiau echinacoside ar lefelau histio-ganolog o fàs gweithredol mewn llygod mawr occlusion rhydweli cerebral canol. Biomed. Amgylch. Sci. 2012, 25, 238–244. [PubMed]

11. Wu, CR; Lin, HC; Su, MH Gwrthdroad gan ddarnau dyfrllyd o Cistanche tubulosa o ddiffygion ymddygiadol mewn model llygod mawr tebyg i glefyd Alzheimer: Perthnasedd ar gyfer dyddodiad amyloid a swyddogaeth niwrodrosglwyddydd canolog. Ategiad BMC. Altern. Med. 2014, 14, 202. [CrossRef] [PubMed]

12. Zhao, Q. ; Gao, J. ; Li, W. ; Cai, D. Effeithiau niwrotroffig a niwroadferol Echinacoside yn y model llygoden MPTP subacute o glefyd Parkinson. Ymennydd Res. 2010, 1346, 224–236. [CrossRef] [PubMed]

13. Meldrum, BS Glwtamad fel niwrodrosglwyddydd yn yr ymennydd: adolygiad o ffisioleg a phatholeg. J. Nutr.2000, 130, 1007S–1015S. [PubMed]

14. Lee, D.; Shim, MS; Kim, KY; Na, YH; Kim, H.; Kim, SY; Weinreb, RN; Mae Ju, WK Coenzyme C10 yn atal excitotoxicity glwtamad a newid mitocondriaidd ocsideiddiol wedi'i gyfryngu gan straen mewn model llygoden o glawcoma. Ymchwilio. Offthalmol. Vis. Sci. 2014, 55, 993–1005. [CrossRef] [PubMed]

15. Choi, DW Calsiwm ac anaf niwronau excitotoxic. Ann. NY Acad. Sci. 1994, 747, 162–171. [CrossRef][PubMed]

16. Lau, A. ; Tymianski, M. Derbynyddion glwtamad, niwrowenwyndra a niwroddirywiad. Pfluger. Arch. 2010, 460, 525–542. [CrossRef] [PubMed]

17. Sattler, R. ; Tymianski, M. Mecanweithiau moleciwlaidd marwolaeth celloedd niwronaidd excitotocsig derbynnydd glwtamad. Mol. Neurobiol. 2001, 24, 107–129. [CrossRef]

18. Schauwecker, PE Niwroamddiffyniad gan wrthwynebwyr derbynyddion glwtamad yn erbyn marwolaeth celloedd excitotocsig a achosir gan atafaelu yn yr ymennydd sy'n heneiddio. Exp. Neurol. 2010, 224, 207–218. [CrossRef] [PubMed]

19. Yeganeh, F. ; Nikbakht, F.; Bahmanpour, A.S.; Rastegar, K. ; Namavar, R. Effeithiau niwro-amddiffynnol NMDA ac antagonists derbynyddion glwtamad metabotropig grŵp I yn erbyn niwroddirywiad a achosir gan homocysteine ​​​​mewn hippocampus llygod mawr: Astudiaeth in vivo. J. Mol. Neurosci. 2013, 50, 551–557. [CrossRef] [PubMed]

20. Doble, A. Rôl cynhyrfedd mewn clefyd niwroddirywiol: goblygiadau ar gyfer therapi. Ffarmacol. Ther.1999, 81, 163–221. [CrossRef]

21. Muir, KW Dulliau therapiwtig seiliedig ar glutamad: Treialon clinigol gydag antagonists NMDA.Curr. Barn. Ffarmacol. 2006, 6, 53–60. [CrossRef] [PubMed]

22. González, JC; Egea, J. ; del Carmen Godino, M.A.; Fernandez-Gomez, FJ; Sánchez-Prieto, J.; Gandía, L.; García, AG; Iorddonen, J. ; Mae Hernández-Guijo, JM Neuroprotectant minocycline yn iselhau niwrodrosglwyddiad glutamatergig a Ca2 ynghyd â signalau mewn niwronau hippocampal. Eur. J. Neurosci. 2007, 26, 2481–2495. [CrossRef] [PubMed]

23. Lu, CW; Lin, TY; Mae Wang, SJ Memantine yn lleihau rhyddhau glwtamad trwy atal Ca2 sy'n ddibynnol ar foltedd ynghyd â mynediad a phrotein kinase C mewn terfynellau nerf cortecs cerebral llygod mawr: Mecanwaith derbynnydd-annibynnol NMDA. Neurochem. Int. 2010, 57, 168–176. [CrossRef] [PubMed]

24. Wang, SJ; Sihra, TS Mae antagonydd derbynnydd metabotropig anghystadleuol 5 glwtamad (E)-2-methyl-6- styryl-pyridine (SIB1893) yn lleihau rhyddhau glwtamad trwy atal Ca2 sy'n ddibynnol ar foltedd ynghyd â mynediad mewn terfynellau nerf serebrocortigol llygod mawr (synaptosomau). J. Ffarmacol. Exp. Ther. 2004, 309, 951–958. [CrossRef] [PubMed]

25. Dunkley, Cysylltiadau Cyhoeddus; Jarvie, Addysg Gorfforol; Heath, JW; Kidd, GJ; Rostas, JA Dull cyflym o ynysu synaptosomau ar raddiannau Percoll. Ymennydd Res. 1986, 372, 115–129. [CrossRef]

26. Arac, A. ; Li, N. ; Doyle, RT; Haydon, PG SNARE rhyddhau glwtamad protein-ddibynnol o astrocytes.J. Neurosci. 2000, 20, 666–673. [PubMed]

27. Dunlop, J. Dulliau therapiwtig sy'n seiliedig ar glutamad: Targedu'r system gludo glwtamad.

Curr. Barn. Ffarmacol. 2006, 6, 103–107. [CrossRef] [PubMed]

28. Zucchi, R.; Ronca-Testoni, S. Y reticwlwm sarcoplasmig Ca2 ynghyd â sianel/derbynnydd ryanodin: Modyliad gan effeithwyr mewndarddol, cyffuriau a chyflyrau clefydau. Ffarmacol. Parch 1997, 49, 1–51. [PubMed]

29. Fan, Y. ; Li, J. ; Zhang, YQ; Jiang, LH; Zhang, YN; Roedd Yan, CQ Protein kinase C delta yn cyfryngu sytowenwyndra o 6-Hydroxydopamine trwy actifadu kinase 1/2 allgellog parhaus a reoleiddir gan signal mewn celloedd PC12. Neurol. Res. 2014, 36, 53–64.[CrossRef] [PubMed]

30. Gschwendt, M.; Müller, HJ; Kielbassa, K.; Zang, R.; Kittstein, W.; Rincke, G. ; Marks, F. Rottlerin, atalydd kinase protein newydd. Biocemeg. Bioffys. Res. Cymmun. 1994, 199, 93–98. [CrossRef] [PubMed]

31. Nicholls, DG; Sihra, TS; Sanchez-Prieto, J. Rhyddhau glwtamad sy'n ddibynnol ar galsiwm ac yn annibynnol o synaptosomau wedi'i fonitro gan fflworometreg barhaus. J. Neurochem. 1987, 49, 50–57. [CrossRef] [PubMed]

32. Nicoll, RA Cyplu derbynyddion niwrodrosglwyddydd â sianeli ïon yn yr ymennydd. Gwyddoniaeth 1988, 241,545–551. [CrossRef] [PubMed]

33. Wu, LG; Saggau, P. Ataliad presynaptig rhag rhyddhau niwrodrosglwyddydd. Tueddiadau Neurosci. 1997, 20, 204–212. [CrossRef]

34. Turner, TJ; Dunlap, K. Nodweddu ffarmacolegol o sianeli calsiwm presynaptig gan ddefnyddio mesuriadau biocemegol is-eiliad o niwrorosecretion synaptosomal. Niwroffarmacoleg 1995, 34, 1469–1478. [CrossRef]

35. Millan, C. ; Sanchez-Prieto, J. Cyplu gwahaniaethol sianeli calsiwm math N- a P/Q ag ecsocytosis glwtamad yn cortecs yr ymennydd llygod mawr. Neurosci. Lett. 2002, 330, 29–32. [CrossRef]

36. Vazquez, E. ; Sanchez-Prieto, J. Mae modiwleiddio presynaptig o ryddhau glwtamad yn targedu gwahanol sianeli calsiwm mewn terfynellau nerf cerebrocortical llygod mawr. Eur. J. Neurosci. 1997, 9, 2009–2018. [CrossRef] [PubMed]

37. Hir, P. ; Mercer, A.; Begum, R. ; Stephens, GJ; Sihra, TS; Jovanovic, JN Nerve Terminal Derbynyddion GABAA Yn Ysgogi Signalau Ca2 plus / Calmodulin-ddibynnol i Atal Ca2 â gatiau foltedd ynghyd â Rhyddhau Mewnlifiad a Glwtamad. J. Biol. Cemeg. 2009, 284, 8726–8737. [CrossRef] [PubMed]

38. Turner, JR; Angle, JM; Du, ED; Llawenydd, JL; Sachau, DB; Madara, JL PKC-ddibynnol rheoleiddio ymwrthedd transepithelial: Rolau MLC a MLC kinase. Yn. J. Physiol. 1999, 277, C554–C562. [PubMed]

39. Vaughan, PF; Walker, JH; Cyfoedion, C. Rheoleiddio secretiad niwrodrosglwyddydd gan brotein kinase C.Mol. Neurobiol. 1998, 18, 125–155. [CrossRef] [PubMed]

40. Coffey, ET; Sihra, TS; Nicholls, DG; Pocock, JM Mae ffosfforyleiddiad synapsin I a MARCKS mewn terfynellau nerfau yn cael ei gyfryngu gan Ca2 plus mynediad trwy sianel Aga-GI sensitif Ca2 plus sydd wedi'i gysylltu ag ecsocytosis glwtamad. FEBS Lett. 1994, 353, 264–268. [CrossRef]

41. Obrenovitch, TP; Urenjak, J. Trosglwyddiad glwtamatergig wedi'i newid mewn anhwylderau niwrolegol: O glwtamad allgellog uchel i effeithiolrwydd synaptig gormodol. Prog. Neurobiol. 1997, 51, 39–87. [CrossRef]

42. Zhang, D.; Li, H. ; Mae Wang, JB Echinacoside yn atal ffibriliad amyloid o HEWL ac yn amddiffyn rhag niwrowenwyndra a achosir gan A. Int. J. Biol. Macromol. 2015, 72, 243–253. [CrossRef] [PubMed]

43. Lin, TY; Lu, CW; Wang, CC; Lu, JF; Mae Wang, SJ Hispidulin yn atal rhyddhau glwtamad mewn terfynellau nerf cerebrocortical llygod mawr. Gwenwynig. Appl. Ffarmacol. 2012, 263, 233–243. [CrossRef] [PubMed]

44. Chang, CY; Lin, TY; Lu, CW; Huang, SK; Wang, YC; Chou, SS; Mae Wang, SJ Hesperidin yn atal rhyddhau glwtamad ac yn gweithredu niwro-amddiffyniad yn erbyn excitotoxicity a achosir gan asid kainic yn hippocampws llygod mawr. Niwrotocsicoleg 2015, 2015, 157–169. [CrossRef] [PubMed]

45. Nicholls, DG; Sihra, TS Mae gan synaptosomau gronfa ecsocytotig o glwtamad. Natur 1986, 321, 772–773.[CrossRef] [PubMed]

46. ​​Wang, CC; Kuo, JR; Mae Wang, SJ Dimebon, cyffur gwrth-histamin, yn atal rhyddhau glwtamad mewn terfynellau nerfau cerebrocortical llygod mawr. Eur. J. Ffarmacol. 2014, 734, 67–76. [CrossRef] [PubMed]

47. Tibbs, GR; Barrie, AP; van Mieghem, FJ; Mc-Mahon, HT; Nicholls, DG Potensial gweithredu ailadroddus mewn terfynellau nerfau ynysig ym mhresenoldeb 4-aminopyridine: Effeithiau ar Ca2 plus rhydd sytosolig a rhyddhau glwtamad. J. Neurochem. 1989, 53,1693–1699. [CrossRef] [PubMed]

48. Akerman, KE; Scott, LG; Heikkila, JE; Heinonen, E. Dibyniaeth ïonig o botensial pilen ac ymatebion sy'n gysylltiedig â derbynyddion glwtamad mewn synaptoneurosomau fel y'i mesurir â llifyn cyanin, DiSC2(5).J. Neurochem. 1987, 48, 552–559. [CrossRef] [PubMed]

49. Sihra, TS; Bogonez, E.; Mae Nicholls, DG Localized Ca2 ynghyd â mynediad yn cael effaith ffafriol ar ddadffosfforyleiddiad protein, ffosfforyleiddiad, a rhyddhau glwtamad. J. Biol. Cemeg. 1992, 267, 1983–1989. [PubMed]

50. Grynkiewicz, G. ; Poenie, M.; Tsien, RY Cenhedlaeth newydd o ddangosyddion Ca2+ gyda phriodweddau fflworoleuedd llawer gwell. J. Biol. Cemeg. 1985, 260, 3440–3450. [PubMed]