Rhan 3:Rolau Gwahanol Ar gyfer Parth Deacetylase HDAC3 yn The Hippocampus And Medial Prefrontal Cortex yn Ffurfio a Difodiant Cof

am fwy o information:ali.ma@wecistanche.com

Pls cliciwch yma yn ôl i Rhan 2

ClicioCistanches a Cistanche i wella cof

Cydnabyddiaethau

Diolch yn arbennig i Dr Norbert J. Fortin am ei gymorth gyda dadansoddiad ystadegol.

Ffynonellau Ariannu: Cefnogwyd y gwaith hwn gan y Sefydliad Cenedlaethol ar Gamddefnyddio Cyffuriau a grantiau'r Sefydliad Cenedlaethol dros Iechyd Meddwl (DA025922, DA036984, MH101491) i MAW ac NIDA a grantiau'r Sefydliad Cenedlaethol ar Ymddygiad (NIA) (F32 DA043998 a T32 AG000096-33) i YA.

Cyfeirnodau

Alenghat T, Meyers K, Mullican SE, Leitner K, Adeniji-Adele A, Avila J, Bucan M, Ahima RS, Kaestner KH, Lazar MA. Mae corepressor derbynyddion niwclear a histone deacetylase 3 yn llywodraethu ffisioleg metabolig tua'i gilydd. Natur. 2008; 456:997–1000. [PubMed: 19037247]

Balderas I, Rodriguez-Ortiz CJ, Salgado-Tonda P, Chavez-Hurtado J, McGaugh JL, Bermudez-Rattoni F. Atgyfnerthu adnabod gwrthrychau a chyd-destuncofcynnwys gwahanol ranbarthau o'r cimychiaid o ran natur. Dysgu Mem. 2008; 15:618–624. [PubMed: 18723431]

Baltan S, Bachleda A, Morrison RS, Murphy SP. Mynegiant o ddatgysylltu histone mewn compartmentau cellog o ymennydd y llygoden ac effeithiau isgemia. Res Strôc Trawsl 2011; 2:411–423. [PubMed: 21966324]

Barrett RM, Malvaez M, Kramar E, Matheos DP, Arrizon A, Cabrera SM, Lynch G, Greene RW, Wood MA. Mae'r canolbwynt Hippocampal o CBP yn effeithio ar addasiadau penodol i'r histone, potensial hirdymor, a'r tymor hircof. Niwroseicoleg. 2011; 36:1545–1556. [PubMed: 21508930]

Bowers ME, Xia B, Carreiro S, Ressler KJ. Mae'r ataliwr Dosbarth I HDAC RGFP963 yn gwella'r gwaith o atgyfnerthu'r ofn sydd wedi'i giwio. Dysgu Mem. 2015; 22:225–231. [PubMed: 25776040]

Broide RS, Redwine JM, Aftahi N, Young W, Bloom FE, Winrow CJ. Dosbarthu deacetylasau histone 1–11 yn yr ymennydd hyrddod. J Mol Neurosci. 2007; 31:47–58. [PubMed: 17416969]

Burger C, Gorbatyuk OS, Velardo MJ, Peden CS, Williams P, Zolotukhin S, Reier PJ, Mandel RJ, Muzyczka N. Fectorau feirysol AAV recombinant wedi'u fformadu â chapsidau feirysol o seroteipiau 1, 2 a 5 yn arddangos effeithlonrwydd gwahaniaethol a tropiaeth celloedd ar ôl eu cyflwyno i wahanol ranbarthau o'r system nerfol ganolog. Mol Ther. 2004; 10:302–317. [PubMed: 15294177]

Dere E, Huston JP, De Souza Silva MA. Ffarmacoleg, niwroanatomi, a niwrogeneteg adnabod gwrthrychau un prawf mewn cnofilod. Neurosci Biobehav Rev. 2007; 31:673–704. [PubMed: 17368764]

Ennaceur A. Cydnabod gwrthrych un prawf yn y llygod mawr a llygod: materion methodolegol a damcaniaethol. Behav Brain Res. 2010; 215:244–254. [PubMed: 20060020]

Fanselow MS, Dong HW. A yw'r hippocampws segur a'r ventral yn strwythurau gwahanol yn ymarferol? Niwron. 2010; 65:7–19. [PubMed: 20152109]

Fischle W, Dequiedt F, Hendzel MJ, Guenther MG, Lazar MA, Voelter W, Verdin E. Mae gweithgarwch enszymatig sy'n gysylltiedig â HDACs dosbarth II yn dibynnu ar gymhleth amlbroffesiwn sy'n cynnwys HDAC3 a SMRT/N-CoR. Mol Cell. 2002; 9:45–57. [PubMed: 11804585]

Fuchs RA, Evans KA, Ledford CC, Parker AS, Achos JM, Mehta RH, Gweler RE. Rôl y cortex cyn-geni segur, amygdala basolateral, a hippocampus segur mewn adfer cyd-destunol o cocên sy'n ceisio yn y llygod mawr. Niwroseicoleg. 2005; 30:296–309. [PubMed: 15483559]

Fuchs RA, Eaddy JL, Su ZI, Bell GH. Mae rhyngweithiadau'r amygdala basolateral gyda'r hippocampws segur a'r cortex cyn-geni segur yn rheoleiddio'r gwaith o adfer cocên sy'n ceisio cocên yn y llygod mawr. Eur J Neurosci. 2007; 26:487–498. [PubMed: 17650119]

Gräff J, Tsai LH. Acetylation Histone: mnemonics moleciwlaidd ar y cromataidd. Nat Rev Neurosci. 2013; 14:97–111. [PubMed: 23324667]

Guenther MG, Barak O, Lazar MA. Mae'r creiddiau SMRT a N-CoR yn ysgogi ffactorau ar gyfer deacetylase histone 3. Mol Cell Biol. 2001; 21:6091–6101. [PubMed: 11509652]

Guenther MG, Yu J, Kao GD, Yen TJ, Lazar MA. Cynulliad o'r cymhleth ailbrosesu SMRT-histone 3 yn gofyn am y ganolfan TCP-1. Genes Dev. 2002; 16:3130–3135. [PubMed: 12502735]

Haberland M, Maldwyn RL, Olson EN. Mae rolau niferus histone yn gwaethygu mewn datblygiad a ffisioleg: goblygiadau ar gyfer clefydau a therapi. Nat Rev Genet. 2009; 10:32–42. [PubMed: 19065135]

Hartig J, Stefanko DP, Multani ML, Figueroa DX, McQuown SC, Wood MA. Mae atal HDAC yn modiwleiddio tymor hir sy'n ddibynnol ar hippocampuscofar gyfer lleoliad gwrthrych mewn modd sy'n ddibynnol ar CBP. Dysgu Mem. 2011; 18:71–79. [PubMed: 21224411]

Haettig J, Sun Y, Wood MA, Xu X. Mae diffyg gweithredu sy'n benodol i'r math celloedd o hippocampal CA1 yn amharu ar gydnabyddiaeth gwrthrych sy'n dibynnu ar leoliad yn y llygoden. Dysgu Mem. 2013; 20:139–146. [PubMed: 23418393]

Isaac WL, Nonneman AJ, Neisewander J, Landers T, Bardo MT. Mae briwiau cortex prefrontal yn amharu'n wahaniaethol ar ddewis lle wedi'i atgyfnerthu gan cocên ond nid yn osgoi blas wedi'i gyflyru. Behav Neurosci. 1989; 103:345–355. [PubMed: 2706078]

Jenuwein T, Allis CD. Cyfieithu'r cod histone. Gwyddoniaeth. 2001; 293:1074–1080. [PubMed: 11498575]

Kalivas P, McFarland K. Cylchedau Brain ac adfer ymddygiad sy'n ceisio cocên. Seicofferyllfa (Berl). 2003; 168:44–56. [PubMed: 12652346]

Kojima N, Wang J, Mansuy IM, Grant SG, Mayford M, Kandel ER. Achub nam ar y potensial hirdymor yn fyn-ddiffygiol drwy gyflwyno trawsgene Fyn. Proc Natl Acad Sci U S A. 1997; 94:4761–4765. [PubMed: 9114065]

Kouzarides T. Addasiadau cronmataidd a'u swyddogaeth. Cell. 2007; 128:693–705. [PubMed: 17320507]

Krasnova IN, Li SM, Wood WH, McCoy MT, Prabhu VV, Becker KG, Katz JL, Cadet JL. Ymatebion trawsgrifiadol i atgyfnerthu effeithiau cocên yn y rat hippocampus a'r cortex. Genes Brain Behav. 2008; 7:193–202. [PubMed: 17640290]

Kwapis JL, Alaghband Y, López AJ, Gwyn AO, Campbell RR, Dang RT, Rhee D, Tran AV, Carl AE, Matheos DP, Wood MA. Cyd-destun ac Ofn Clywedol yn cael eu Rheoleiddio'n Wahaniaethol gan Weithgaredd HDAC3 yn Is-giwclei Ochrol a Basal yr Amygdala. Niwroseicoleg. 2017; 42:1284–1294. [PubMed: 27924874]

Lahm A, Paolini C, Pallaoro M, Nardi MC, Jones P, Neddermann P, Sambucini S, Bottomley MJ, Lo Surdo P, Carfi A, Koch U, De Francesco R, Steinkuhler C, Gallinari P. Datguddio'r gweithgaredd catalytig cudd o'r dosbarth fertigol IIa histone deacetylases. Proc Natl Acad Sci U S A. 2007; 104:17335–17340. [PubMed: 17956988]

LaLumiere RT, Niehoff KE, Kalivas P. Mae'r cortex tor-calch yn rheoleiddio'r gwaith o atgyfnerthu difodiant ar ôl hunan-weinyddu cocên. Dysgu Mem. 2010; 17:168–175. [PubMed: 20332188]

Laurent V, Westbrook RF. Diffyg gweithredu'r tor-dyletswydd ond nid y cortex prelimbig sy'n amharu ar atgyfnerthu ac adalw ofn. Dysgu Mem. 2009; 16:520–529. [PubMed: 19706835]

Lebrón K, Milad MR, Quirk GJ. Oedi cyn galw i gof am ofn yn y llygod mawr gyda briwiau'r cortex rhagflas cyfryngol. Dysgu Mem. 2004; 11:544–548. [PubMed: 15466306]

Levenson JM, Sweatt JD. Mecanweithiau epigenetig: thema gyffredin mewn asgwrn-asgwrn ac infertebrataucofffurfiad. Cell Mol Life Sci. 2006; 63:1009–1016. [PubMed: 16596331]

López AJ, Kramar E, Matheos DP, Gwyn AO, Kwapis J, Vogel-Ciernia A, Sakata K, Espinoza M, Wood MA. Effeithiau Penodol i Hyrwyddwyr Modiwleiddio AR Plasticity Synaptig Hippocampal aFfurfio Cof. J Neurosci. 2016; 36:3588–3599. [PubMed: 27013687]

Malvaez M, Sanchis-Segura C, Vo D, KM Lattal, Wood MA. Mae modiwleiddio addasu cromataidd yn hwyluso'r broses o ddiflad o ddewis lle wedi'i ysgogi gan cocên. Seiciatreg Biol. 2010; 67:36–43. [PubMed: 19765687]

Malvaez M, Mhillaj E, Matheos DP, Palmery M, Wood MA. Mae CBP yn y niwclews yn rheoleiddio aceniad histone a ysgogir gan cocên ac mae'n hanfodol ar gyfer ymddygiad sy'n gysylltiedig â cocên. J Neurosci. 2011; 31:16941–16948. [PubMed: 22114264]

Narvaez M, McQuown SC, Rogge GA, Astarabadi M, Jacques V, Carreiro S, Rusche JR, Wood MA. Mae ataliwr detholus HDAC3 yn gwella'r ymddygiad sy'n ceisio cocên mewn modd parhaus. Proc Natl Acad Sci U S A. 2013; 110:2647–2652. [PubMed: 23297220]

Maren S. Niwrobioleg ofn palmant i gyflwr. Annu Rev Neurosci. 2001; 24:897–931. [PubMed: 11520922]

Marie-Claire C, Laurendeau I, Canestrelli C, Courtin C, Vidaud M, Roques B, Noble F. Mae fos ond nid Cart (trawsgrifiad cocên ac amhetamine a reoleiddir) yn cael ei orbwysleisio gan sawl cyffur cam-drin: astudiaeth gymharol gan ddefnyddio adwaith cadwyn polymerase meintiol amser real mewn ymennydd hyrddod. Neurosci Lett. 2003; 345:77–80. [PubMed: 12821175]

McQuown SC, Wood MA. HDAC3 a'r rhagdybiaeth pad brêc moleciwlaidd. Niwrobiol Dysgu Mem. 2011; 96:27–34. [PubMed: 21521655]

McQuown SC, Barrett RM, Matheos DP, Post RJ, Rogge GA, Alenghat T, Mullican SE, Jones S, Rusche JR, Lazar MA, Wood MA. Mae HDAC3 yn rheoleiddiwr negyddol beirniadol offurfio cof yn y tymor hir. J Neurosci. 2011; 31:764–774. [PubMed: 21228185]

Meyers RA, Zavala AR, Neisewander JL. Dorsal, ond nid ventral, mae briwiau hippocampal yn amharu ar gyflyru lle cocên. Niwroadroddiad. 2003; 14:2127–2131. [PubMed: 14600510]

Mullican SE, Gaddis CA, Alenghat T, Nair MG, Giacomin PR, Everett LJ, Feng D, Steger DJ, Schug J, Artis D, Lazar MA. Mae Histone deacetylase 3 yn frêc epigenomig mewn actifadu amgen macroffage. Genes Dev. 2011; 25:2480–2488. [PubMed: 22156208]

Mumby DG. Persbectifau ar gof adnabod gwrthrychau yn dilyn difrod hippocampal: gwersi o astudiaethau yn y llygod mawr. Behav Brain Res. 2001; 127:159–181. [PubMed: 11718890]

Parkinson JA, Olmstead MC, Burns LH, Robbins TW, Everitt BJ. Anghymell mewn effeithiau anafiadau i'r cnewyllyn sy'n cronni craidd a silffoedd ar ymddygiad dull palmant arswydus a'r potensial i atgyfnerthu cyflyru a gweithgarwch locomotor gan D-amhetamine. J Neurosci. 1999; 19:2401–2411. [PubMed: 10066290]

Peixoto L, Abel T. Rôl acen histone wrth ffurfio cof a namau gwybyddol. Niwroseicoleg. 2013; 38:62–76. [PubMed: 22669172]

Penney J, Tsai LH. Histone deacetylases yn y cof a gwybyddiaeth. Signal Sci. 2014; 7:re12. [PubMed: 25492968]

Peters J, LaLumiere RT, Kalivas P. Mae'r cortecs rhagflas tor-galch yn gyfrifol am atal cocên sy'n ceisio mewn llygod mawr. J Neurosci. 2008; 28:6046–6053. [PubMed: 18524910]

Peters J, Kalivas P, Quirk GJ. Mae cylchedau difodiant ar gyfer ofn a dibyniaeth yn gorgyffwrdd yn y cortex rhagflas. Dysgu Mem. 2009; 16:279–288. [PubMed: 19380710]

Pfaffl MW. Model mathemategol newydd ar gyfer meintioli cymharol mewn RT-PCR amser real. Acidau Niwcleig Res. 2001; 29:e45. [PubMed: 11328886]

Pfaffl MW, Georgieva TM, Georgiev IP, Ontsouka E, Hageleit M, Blum JW. Meintioli RT-PCR amser real o ffactor twf inswlin (IGF)-1, derbynnydd IGF-1, IGF-2, derbynnydd IGF-2, derbynnydd inswlin, derbynnydd hormon twf, proteinau IGF-rwymol 1, 2 a 3 yn y rhywogaethau buchol. Domest Anim Endocrinol. 2002; 22:91–102. [PubMed: 11900967]

Quirk GJ, Russo GK, Barron JL, Lebron K. Rôl cortecs rhagflas gwythiennol wrth adfer ofn wedi'i ddiffodd. J Neurosci. 2000; 20:6225–6231. [PubMed: 10934272]

Quirk GJ, Garcia R, Gonzalez-Lima F. Mecanweithiau rhagflas o ofn wedi'u cyflyru. Seiciatreg Biol. 2006; 60:337–343. [PubMed: 16712801]

Rescorla RA. Cymharu cyfraddau newid cysylltiol wrth gaffael a difodiant. J Exp Seicol Anim Behav Process. 2002; 28:406–415. [PubMed: 12395498]

Rogge GA, Singh H, Dang R, Wood MA. Mae HDAC3 yn rheoleiddiwr negyddol o ffurfio cof sy'n gysylltiedig â chyd-destun cocên. J Neurosci. 2013; 33:6623–6632. [PubMed: 23575859]

Roozendaal B, Hernandez A, Cabrera SM, Hagewoud R, Malvaez M, Stefanko DP, Haettig J, Wood MA. Mae angen gweithgaredd glwcocorticoid sy'n gysylltiedig â'r membran ar gyfer modiwleiddio cof hirdymor drwy addasu cromataidd. J Neurosci. 2010; 30:5037–5046. [PubMed: 20371824]

Rumbaugh G, Sillivan SE, Ozkan ED, Rojas CS, Hubbs CR, Aceti M, Kilgore M, Kudugunti S, Puthanveettil SV, Sweatt JD, Rusche J, Miller CA. Dethol ffarmacolegol O fewn Dosbarth I Histone Deacetylases Rhagfynegyddion Effeithiau ar Swyddogaeth Synaptig ac Achub Cof. Niwroseicoleg. 2015; 40:2307–2316. [PubMed: 25837283]

Sando R 3ydd, Gounko N, Pieraut S, Liao L, Yates J 3ydd, Maximov A. HDAC4 sy'n llywodraethu rhaglen drawsgrifiadol sy'n hanfodol ar gyfer plasty a chof synaptig. Cell. 2012; 151:821–834. [PubMed: 23141539]

Sierra-Mercado D Jr, Corcoran KA, Lebron-Milad K, Quirk GJ. Mae diffyg gweithredu'r cortecs rhagflas gwythiennol yn lleihau mynegiant o ofn wedi'i gyflyru ac yn amharu ar y galw i gof dilynol am ddiflad. Eur J Neurosci. 2006; 24:1751–1758. [PubMed: 17004939]

Stafford JM, Raybuck JD, Ryabinin AE, Lattal KM. Mae cynyddu acen histone yn y rhwydwaith hippocampus-tor-calch yn gwella ofn. Seiciatreg Biol. 2012; 72:25–33. [PubMed: 22290116]

Stefanko DP, Barrett RM, Ly AR, Reolon GK, Wood MA. Modiwleiddio cof hirdymor ar gyfer adnabod gwrthrychau drwy atal HDAC. Proc Natl Acad Sci U S A. 2009; 106:9447–9452. [PubMed: 19470462]

Sun Z, Feng D, Fang B, Mullican SE, You SH, Lim HW, Everett LJ, Nabel CS, Li Y, Selvakumaran V, Won KJ, Lazar MA. I weithredu'n annibynnol ar YHDAC3 mewn trawsgrifiad a metabolaeth, mae angen corepressor derbynyddion niwclear. Mol Cell. 2013; 52:769–782. [PubMed: 24268577]

Tzschentke TM, Schmid WJ. Mae anafiadau asid cwinolinig ar wahân o'r cortecs rhagflas cyfryngol rat prelimbig yn effeithio ar cocên- ac MK-801-, ond nid gwobr a ysgogwyd gan forffîn ac amhetamine ac actifadu seicomotor fel y'i mesurir gyda'r paradeim cyflyru dewis lle. Behav Brain Res. 1998; 97:115–127. [PubMed: 9867237]

Tzschentke TM, Schmid WJ. Heterogenedd swyddogaethol y cortex rhagflas cyfryngol hyrddod: effeithiau briwiau isarea-benodol ar wahân ar ddewis lle a ysgogir gan gyffuriau a synhwyro ymddygiadol. Eur J Neurosci. 1999; 11:4099–4109. [PubMed: 10583498]

Vogel-Ciernia A, Matheos DP, Barrett RM, Kramar EA, Azzawi S, Chen Y, Magnan CN, Zeller M, Sylvain A, Haettig J, Jia Y, Tran A, Dang R, Post RJ, Chabrier M, Babayan AH, Wu JI, Crabtree GR, Baldi P, Baram TZ, Lynch G, Wood MA. Mae'r isuned rheoleiddio cromataidd sy'n benodol i niwronau BAF53b yn angenrheidiol ar gyfer plasty a chof synaptig. Nat Neurosci. 2013; 16:552–561. [PubMed: 23525042]

Vogel-Ciernia A, Wood MA. Ailfodelu cromataidd sy'n benodol i niwronau: cyswllt coll mewn mecanweithiau epigenetig sy'n sail i blastig synaptig, cof ac anhwylderau anabledd deallusol. Niwroharmacoleg. 2014; 80:18–27. [PubMed: 24140580]

Gwyn AO, Kramar Asiantaeth yr Amgylchedd, López AJ, Kwapis JL, Doan J, Saldana D, Davatolhagh MF, Alaghband Y, Blurton-Jones M, Matheos DP, Wood MA. BDNF yn achub plasty synaptig sy'n ddibynnol ar BAF53b a chof sy'n gysylltiedig â cocên yn y niwclews. Nat Commun. 2016; 7:11725. [PubMed: 27226355]

Winters BD, Saksida LM, Bussey TJ. Cof adnabod gwrthrychau: mecanweithiau niwrobiolegol o amgodio, cydgrynhoi ac adalw. Neurosci Biobehav Rev. 2008; 32:1055–1070. [PubMed: 18499253]

Zhang J, Kalkum M, Chait BT, Roeder RG. Mae'r derbynnydd niwclear N-CoR-HDAC3 yn llesteirio'r llwybr JNK drwy'r GPS2 isuned annatod. Mol Cell. 2002; 9:611–623. [PubMed: 11931768]

Tynnu sylw at

► Rhwystro gweithgaredd deacetylase HDAC3 yn y hippocampus dorsal gwell cof lleoliad gwrthrych hirdymor ond ni chafodd unrhyw effaith ar ffurfio cof sy'n gysylltiedig â cocên. ► Impairing y parth HDAC3 yn y cortex prelimbig heb unrhyw effaith ar ffurfio cof sy'n gysylltiedig â cocên. ► Rhwystro gweithgaredd deacetylase HDAC3 yn y cortex tor-galch yn cael unrhyw effaith ar ddiflad. Arweiniodd gweithgaredd dadfeiliad HDAC3 yn y hippocampws segur at ddiflad wedi'i hwyluso.

Ffigur 1.

Mae feirws mwtant pwynt negyddol amlwg (HDAC3(Y298H)-v5 yn mynegi'n effeithiol yn y hippocampws segur. (A) Ychwanegwyd epitope V5 at y feirws mwtant pwynt. (B) Delwedd imiwnedd gynrychioliadol sy'n dangos mynegiant o'r tag epitope V5 (gwyrdd) yn y hippocampws segur (DH) ar ôl trwytho AAV-HDAC3(Y298H)-v5. Ni welwyd unrhyw staeniau V5 gyda'r feirws rheoli AAV-EV. Roedd celloedd yn cael eu gwrthgynnig gyda DAPI (glas). (C) Cynyddodd V5 mRNA yn sylweddol yn y DH ofmice a oedd wedi'i heintio ag AAV- HDAC3(Y298H)-v5, AAV-EV n = 5, HDAC3(Y298H)-v5 n = 4. (D) Cynyddodd HDAC3 yn sylweddol hefyd yn y DH ofmice a gafodd ei heintio ag AAV-HDAC(Y298H)-v5 o'i gymharu â rheolaethau AAV-EV, AV-EV n = 6, HDAC3(Y298H)-v5 n = 6. *p<>

Ffigur 2.

Rhwystro gweithgaredd HDAC3 yn y dh gwell cof ar gyfer lleoliad gwrthrych (OLM), ond nid ar gyfer adnabod gwrthrychau (ORM). (A) Derbyniodd Mice hyfforddiant is-ddaliad (3 munud) mewn amgylchedd gyda dau wrthrych union yr un fath a chafodd brawf cadw 24 awr yn ddiweddarach lle mae un gwrthrych yn cael ei symud i leoliad newydd. Disgrifia'r drefn ddulliau ar gyfer B ac C. (B) Dangosodd Mice a roddwyd AAV-HDAC3(Y298H)-v5 ffafriaeth sylweddol i'r lleoliad gwrthrych newydd 24h ar ôl hyfforddiant o'i gymharu â rheolaethau EV, AAV-EV n = 8, HDAC3(Y298H)-v5 n = 6. (C) Nid oedd y grwpiau'n wahanol o ran amser archwilio llwyr y ddau wrthrych. (D) Derbyniodd Mice hyfforddiant is-ddaliad (3 munud) mewn amgylchedd gyda dau wrthrych union yr un fath a chafodd brawf cadw 24 awr yn ddiweddarach lle cafodd un gwrthrych ei ddisodli gan un newydd (ORM), AAV-EV n = 9, HDAC3(Y298H)-v5 n = 7. Disgrifia'r drefn ddulliau ar gyfer E ac F. (E) Nid oedd rheolaeth AAV-EV nac AAV-HDAC3(Y298H)-v5 llygod yn dangos ffafriaeth sylweddol i'r gwrthrych newydd. (F) Nid oedd grwpiau'n wahanol o ran amser archwilio llwyr y ddau wrthrych. *p<>

Ffigur 3.

Nid yw rhwystro gweithgarwch HDAC3 yn y hippocampws segur yn cael unrhyw effaith ar ffurfio cof CPP a ysgogir gan cocên. (A) Sgematig o'r weithdrefn cocên-CPP. (B) Cocên - mynegiant CPP a nodir gan sgôr cymedrig CPP (amser a dreulir mewn cocên (CS+) minws wedi'i baru â salîn (CS 3) ± a.y.m). Ar ddos cyflyru cocên 5 mg/kg, dangosodd AAV-HDAC3(Y298H)- v5 llygod sgôr CPP tebyg i reolaethau EV yn ystod y prawf, AAV-EV n = 15, HDAC3(Y298H)-v5 n = 15.

Ffigur 4.

Nid yw dileu genynnau homozygous oHdac3 yn y hippocampws segur yn cael unrhyw effaith ar ffurfio cof CPP a ysgogwyd gan cocên. (A) Sgematig o'r weithdrefn cocên-CPP. (B) Mynegiant Cocên-CPP a nodir gan sgôr cymedrig CPP (amser a dreulir mewn cocên (CS +) minws wedi'i baru â salîn (CS 3) ± a.y.m). Ar ddos cyflyru cocên 5 mg/kg, dangosodd Hdac3flox/flox llygod sgôr CPP tebyg i reolaethau Hdac3+/+ yn ystod y prawf. (C) Delwedd imiwnedd gynrychioliadol sy'n dangos mynegiant oHDAC3 (gwyrdd) yn y hippocampws segur ar ôl trwythiad oAAV2.1 Cre wedi'i heintio yn Hdac3+/+ a Hdac3flox/fflox llygod. Roedd celloedd yn cael eu gwrthgynnig gyda DAPI (glas). (D) Cadarnhaodd meintioli imiwnedd fod HDAC3 wedi'i leihau'n sylweddol yn Hdac3flox/fflox llygod o'i gymharu â rheolaethau Hdac3+/+, Hdac3+/+ n = 12, Hdac3flox/fflox n = 11. *p<>

Ffigur 5.

Nid yw rhwystro gweithgarwch HDAC3 yn y cortex prelimbig (PrL) yn cael unrhyw effaith ar ffurfio cof CPP a ysgogir gan cocên. (A) Sgematig o'r weithdrefn cocên-CPP. (B) Cocên - mynegiant CPP a nodir gan sgôr cymedrig CPP (amser a dreulir mewn cocên (CS+) minws wedi'i baru â salîn (CS 3) ± a.y.m). Ar ddos cyflyru 5 mg/kg cocên, dangosodd AAV-HDAC3(Y298H)- v5 llygod sgôr CPP tebyg i reolaethau EV yn ystod y prawf, AAV-EV n = 12, HDAC3(Y298H)-v5 n = 12. (C) Delwedd imiwnedd gynrychioliadol sy'n dangos mynegiant o'r tag epitope V5 (gwyrdd) ar ôl trwytho AAV-HDAC3(Y298H)-v5 sy'n targedu'r PrL. Ni welwyd unrhyw staeniau V5 gyda'r feirws rheoli AAV-EV. Roedd celloedd yn cael eu gwrthgynnig gyda DAPI (glas) ac roedd niwronau wedi'u gwrthgynnig gyda NiwroTrace (coch). Roedd mynegiant V5 wedi'i gyfyngu i raddau helaeth i ranbarth rhaglith y cortex rhagflas cyfryngol. (D) Trwythiad feirysol wedi'i dargedu yn y PrL. Mae rhanbarthau cysgodol delweddau atlas y llygoden yn dangos yr estyniad cynrychioliadol o'r trwythiad feirysol.

Ffigur 6.

Nid yw rhwystro gweithgarwch HDAC3 yn y cortex tor-calch (IL) yn cael unrhyw effaith ar ddiflad cof CPP a ysgogir gan cocên. (A) Sgematig o'r weithdrefn cocên-CPP. (B) Cocên - mynegiant CPP a nodir gan sgôr cymedrig CPP (amser a dreulir mewn cocên (CS+) minws wedi'i baru â salîn (CS 3) ± a.y.m). Hyfforddwyd anifeiliaid i ddechrau ar 20 mg/kg o cocên. Yn dilyn hynny, cafodd anifeiliaid eu derbyn o fewn IL AAV-EV neu AAV-HDAC3(Y298H)-v5 gwybed feirysol, ac archwiliwyd cof difodiant. Dangosodd AAV-HDAC3(Y298H)-v5 llygod sgôr CPP tebyg i reolaethau EV yn ystod profion ôl-brofion 2–5, AAV-EV n = 17, HDAC3(Y298H)- v5 n = 16. (C) Delwedd imiwnedd gynrychioliadol sy'n dangos mynegiant o'r tag epitope V5 (gwyrdd) ar ôl trwytho AAV-HDAC3(Y298H)-v5 sy'n targedu'r IL. Ni welwyd unrhyw staeniau V5 gyda'r feirws rheoli AAV-EV. Roedd celloedd yn cael eu gwrthgynnig gyda DAPI (glas) ac roedd niwronau wedi'u gwrthgynnig gyda NiwroTrace (coch). Roedd mynegiant V5 wedi'i gyfyngu i raddau helaeth i ranbarth tor-calch y cortex rhagflas cyfryngol. (D) Trwythiad feirysol wedi'i dargedu yn yr IL. Mae rhanbarthau cysgodol delweddau atlas y llygoden yn dangos graddau cynrychioliadol y trwythiad feirysol.