Rhan 3: Mae Echinacoside Wedi'i Ynysu o Cistanche Tubulosa yn Ysgogi Cyfrinachedd Hormon Twf Trwy Ysgogi'r Derbynnydd Ghrelin
Mar 06, 2022
Mae Echinacoside Wedi'i Ynysu o Cistanche tubulosa yn Ysgogi Cyfrinachedd Hormon Twf trwy Weithredu'r Derbynnydd Ghrelin
Chieh-Ju Wu 1, Mei-Yin Chien 2, Nan-Hei Lin 1, Yi-Chiao Lin 1, Wen-Ying Chen 3, Chao-Hsiang Chen 2,4,* a Jason TC Tzen 1,*
1 Sefydliad Graddedig Biotechnoleg, Prifysgol Genedlaethol Chung-Hsing, Taichung 402, Taiwan; baby159357520@gmail.com (C.-JW); CMNHEI@mohw.gov.tw (N.-HL); s9755702@gmail.com (Y.-CL)
2 Ko Da Fferyllol Co Ltd, Taoyuan 324, Taiwan; rd1@koda.com.tw
3 Adran Meddygaeth Filfeddygol, Prifysgol Genedlaethol Chung-Hsing, Taichung 402, Taiwan; wychen@dragon.nchu.edu.tw
4 Sefydliad Graddedig Pharmacognosy, Prifysgol Feddygol Taipei, Taipei 110, Taiwan
*Gohebiaeth: gm@koda.com.tw (C.-HC); TCTZEN@dragon.nchu.edu.tw (JTCT); Ffôn.: ynghyd â 886-4-22840328 (est. 776) (JTCT); Ffacs: ynghyd â 886-4-22853527 (JTCT)
Golygydd Academaidd: Pinarosa Avato
Derbyniwyd: 22 Ionawr 2019; Derbyniwyd: 14 Chwefror 2019; Cyhoeddwyd: 17 Chwefror 2019
Cyswllt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
Crynodeb:CistancheMae rhywogaethau, ginseng yr anialwch, wedi'i gofnodi i feddu ar lawer o weithgareddau biolegol mewn ffarmacopeia Tsieineaidd traddodiadol ac fe'i defnyddiwyd fel meddygaeth gwrth-heneiddio. Tri glycosid ffenylethanoid -echinacoside, tubuloside A, ac acteoside - wedi'u canfod yn echdyniad dŵrCistanche tubulosa(Schenk) R. Wight a'r prif gyfansoddwr,echinacoside, wedi ei buro ymhellach.Echinacosideo grynodiad uwch na 10_6 M yn dangos gweithgaredd sylweddol i ysgogi secretiad hormon twf o gelloedd pituitary llygod mawr. Yn debyg i hormon sy'n rhyddhau hormon twf-6, analog synthetig o ghrelin, cafodd ysgogiad secretiad hormon twf gan echinacoside ei atal gan [D-Arg1, D-Phe5, D-Trp7,9, Leu11]-substance P , agonist gwrthdro y derbynnydd ghrelin. Dangosodd modelu moleciwlaidd fod y tri glycosid ffenylethanoid yn rhyngweithio'n ddigonol â phoced rhwymo'r derbynnydd ghrelin, ac roedd echinacoside yn dangos rhyngweithio ychydig yn well â'r derbynnydd na thubuloside A ac acteoside. Mae'r canlyniadau'n awgrymu bod glycosidau ffenylethanoid, yn enwedig echinacoside, yn gyfansoddion gweithredol sy'n debygol o fod yn gyfrifol am effeithiau gwrth-heneiddio C. tubulosa ac y gellir eu hystyried i ddatblygu fel analogau an-peptidyl o ghrelin.
Geiriau allweddol: cistanchetubulosa;echinacoside; ghrelin; secretiad hormon twf;ffenylethanoidglycosidau
echinacosidemewncistancheyn cael llawer o effeithiau
Pls cliciwch yma i Rhan 2
4. Defnyddiau a Dulliau
4.1. Cemegau a Deunyddiau Planhigion
CistancheCafwyd deserticola YC Ma o farchnad leol a'i ddilysu gan Dr Nan-Hei Lin.Cistanchetubulosa (Schenk) Prynwyd R. Wight oddi wrth Sinopharm Tian-Li Pharmaceutical Co., Ltd., (Hangzhou, China). Prynwyd acetonitrile gradd HPLC, asid fformig, a methanol gan ECHO Chemical Co, Ltd, (Miaoli, Taiwan). Prynwyd cyfrwng addasedig Dulbecco Eagle's (DMEM), serwm buchol ffetws dialyzed (DFBS), a Trypsin-EDTA gan Invitrogen (Carlsbad, CA, UDA). DNase Cefais fy prynu gan Worthington Biochemical (Lakewood, NJ, UDA). Cafwyd hormon twf sy'n rhyddhau hormonau-6 (GHRP-6) gan Gen Way Biotech, Inc. (San Diego, CA, UDA). Prynwyd colagenase math I a [D-Arg1, D-Phe5, D-Trp7,9, Leu11]-sylwedd P gan Sigma-Aldrich Co. (St. Louis, MO, UDA). Prynwyd pecyn ELISA hormon twf llygod mawr gan Sunred Biological Technology Corporation (Shanghai, Tsieina).
4.2. HPLC/UV ac LC_MSn Dadansoddiadau o Echdynnu Dŵr o Cistanche spp.
Coesyn sych (25 g) oCistanchedeserticola YC Ma orCistancheTynnwyd tubulosa (Schenk) R deirgwaith gyda 50 0 ml o ddŵr distyll am 60 munud ar 50 gradd mewn baddon dŵr. Cafodd yr ateb ei hidlo trwy Hidlydd Syriaidd 13 mm gyda hidlydd pilen 0.45 um PP (Pall Corporation, Glen Cove, NY, UDA), a bu'n destun y dadansoddiadau canlynol. Dadansoddwyd y cyfansoddion cemegol yn y darnau
gan ddefnyddio colofn Syncronis C18 (diamedr mewnol 4.6 × 250 mm, 5 um, Thermo Scientific, Waltham, MA, UDA) yn y system HPLC ynghyd â synhwyrydd model arae ffotodiode 600E (Waters Corporation,
Aberdaugleddau, MA, UDA). Roedd y cyfnod symudol yn cynnwys (A) dŵr yn cynnwys {{{{}}}}.1 y cant o asid fformig a (B) acetonitrile. Roedd y graddiant eluting fel a ganlyn: 0–60 mun, graddiant llinol o 14 y cant B; 0–3 mun, 14 y cant i 17 y cant B; 3–4 mun, 17 y cant B; 4-15 mun, 17 y cant i 20 y cant B; 15–20 mun, 20 y cant B; 20–50 mun, 20 y cant i 14 y cant B; 50–60
min, 14 y cant B. Gosodwyd tonfedd canfod amsugnedd uwchfioled (UV) ar 330 nm. Roedd sbectromedr màs tandem trap llinol pedwarpôl (LTQ) (Thermo Electron, San Jose, CA, UDA) gyda rhyngwyneb ïoneiddiad electrochwistrellu (ESI) wedi'i gysylltu â system Surveyor LC (Thermo Electron)
gyda dolen sampl 5 uL. Roedd y graddiant eluting fel a ganlyn: 0–90 mun, graddiant llinol o 14 y cant B; 0–24 mun, 14 y cant i 17 y cant B; 24–25 mun, 17 y cant B; 25–36 mun, 17 y cant i 20 y cant B; 36–37 mun, 20 y cant B; 37-80 munud,
20% to 14% B; 80–90 min, 14% B. The heated capillary temperature was set at 300℃ with a spray voltage of 4.5 kV. Negative ESI mode was firstly scanned ranging from m/z 400–1000. Data-dependent MSN was obtained using the high purity helium (>99.99 y cant ) fel y nwy gwrthdrawiad.
4.3. Ynysu Echinacoside
Crynhowyd yr echdyniad dŵr o'r coesyn sych (25 g) o C. tubulosa o dan bwysau llai i roi surop brown dwfn. Ataliwyd yr echdyniad crai â dŵr distyll a'i lyoffileiddio gan sychwr rhewi. Datryswyd y powdr o 100 mg mewn dŵr distyll o 5 mL a chafodd ei buro gan ddefnyddio colofn Sephadex LH -20 (100 mL; GE Healthcare Bio-Sciences AB, Sweden) wedi'i dawelu â hydoddiant methanol dyfrllyd 10 y cant a'i fonitro gan HPLC . Canfuwyd y ffracsiynau sy'n cynnwys echinacoside trwy ddarllen yr amsugnedd ar 245 nm a'u cynaeafu trwy ddefnyddio awtosampler.
4.4. Anifeiliaid
Cymeradwywyd yr arbrofion gan Bwyllgor Sefydliadol Gofal a Defnydd Anifeiliaid Prifysgol Chung_National Chung_Hsing gyda'r rhif cymeradwyo IACUC 106-079. Sprague gwrywaidd_Prynwyd llygod mawr Dawley yn pwyso 250_300 g oddi wrth BioLASCO, Taiwan Co., Ltd. (Taipei, Taiwan). Roedd dau anifail y cawell yn cael eu cynnal mewn amgylchedd rheoledig o 23 o2, 60 o lleithder 10 y cant, a chylchred golau / tywyll 12 awr. Roedd y llygod mawr yn cael eu bwydo â diet chow safonol (darparwyd calorïau
gan 28.7 y cant o brotein, 13.4 y cant o fraster, a 57.9 y cant carbohydrad, 5001 Cnofilod LabDiet, St Louis, MO, UDA) a dŵr distyll ad libitum.
4.5. Diwylliant Celloedd Pituitary Cynradd
Cafodd celloedd pituitary eu hynysu yn ôl dull gwasgariad ensymatig wedi'i addasu a ddatblygwyd gan Yamazaki et al. [29]. Yn fyr, anestheteiddiwyd llygod mawr Sprague Dawley gwrywaidd â Zoletil 50 (40 mg / kg, IP; Virbac Laboratories, Carros, Ffrainc), a chafodd y chwarennau pituitary blaenorol eu tynnu a'u gwasgaru i gelloedd meithrin pituitary mewn ataliad, fel y disgrifiwyd yn flaenorol [30].
4.6. Assay Secretion Hormon Twf
Cafodd y prif gelloedd pituitary blaenorol o 4 × 104 o gelloedd / ffynnon eu meithrin ar 37 gradd o dan 5 y cant CO2 am 2 ddiwrnod cyn y assay secretion hormon twf yn ôl y protocol a ddisgrifiwyd yn flaenorol [30].
Ar ôl cael gwared ar y cyfrwng meithrin, cafodd celloedd eu newynu mewn cyfrwng Eryr Addasedig Dulbecco (DMEM) di-serwm am 90 munud i sefydlogi secretiad hormon gwaelodol. Disodlwyd y cyfrwng newyn gan DMEM ffres yn cynnwys echinacoside (o 10_8 i 10_5 M) neu GHRP-6 (gweithydd derbynnydd ghrelin dynol, GHSR, 10_7 M) fel rheolaeth gadarnhaol, a chafodd celloedd eu deor am 15 a 30 munud ar 37 gradd o dan 5 y cant CO2. Er mwyn canfod effaith antagonist, deorwyd y celloedd â GHSR
agonist gwrthdro, [D-Arg1, D-Phe5, D-Trp7,9, Leu11]-substance P (0.5 uM), ac yna'n cael ei drin â DMEM sy'n cynnwys echinacoside (10_5 M) neu GHRP-6 (10_7 M) am 30 munud. Casglwyd at y cyfrwng
pennu secretion hormon twf gan becyn ELISA hormon twf llygod mawr (Shanghai Sunred Biological Technology Corporation).
4.7. Dadansoddiad Ystadegol
Cyflwynwyd y data fel gwerthoedd cymedrig o DC. Dadansoddwyd y gwahaniaethau yn ôl T-Test. Perfformiwyd cyfrifiadau ystadegol gan GraphPad Prism 6 (GraphPad Software Inc., La Jolla, CA, UDA). Ystyriwyd lefel p < 0.05="" yn="" ystadegol="">
4.8. Modelu Homoleg a Tocio
Sefydlwyd modelu homoleg a docio i dderbynnydd ghrelin dynol, derbynnydd secretagogue hormon twf (GHSR, rhif derbyn AAI13548), trwy ddilyn ein hadeiladwaith blaenorol [21,24]. Yn gryno, defnyddiwyd strwythurau crisial o dderbynyddion adrenergig 1 a 2 (PDB 2YCY a 3PDS) gyda ligandau rhwymedig, cyanopindolol, a FAUC50 fel templedi i adeiladu strwythur GHSR [31,32]. Dewiswyd strwythur GHSR gyda'r cyfanswm egni PDF isaf i'w docio ymhellach gyda GHRP-6, echinacoside, tubuloside A, ac acteoside. Perfformiwyd yr holl brosesau modelu gan ddefnyddio platfform Discovery Studio 2.1 (http://accelrys.com/).
Lawrlwythwyd strwythur 3D GHRP-6 o gronfa ddata cyfansawdd Pub-Chem ar wefan NCBI (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/). Adeiladwyd strwythurau 3D echinacoside, tubuloside A, ac acteoside gan ddefnyddio rhaglen Chem3D (http://www.cambridgesoft.com/). Diffiniwyd safle rhwymo ligand GHSR fel y gofod sfferig gyda radiws 14 Å o ganol y boced rhwymo yn yr efelychiad docio. Perfformiwyd tocio GHRP-6, echinacoside, tubuloside A, neu acteoside i safle rhwymo GHSR yn silico trwy ddefnyddio'r modiwl LibDock yn y pecyn Discover Studio 2.1 a'i leihau ymhellach gan algorithm lleihau craff gyda grym CHARMm yn y maes Pecyn Discover Studio 2.1 [33]. I gymharu cysylltiadau rhwymo cymharol echinacoside, tubuloside A, ac acteoside yn GHSR, defnyddiwyd ardal y ganolfan weithredol a adeiladwyd gyda GHRP-6 yn GHSR ar gyfer y tocio, a chyfrifwyd yr egni rhwymol gan GEMDOCK (Sefydliad Biowybodeg , Prifysgol Genedlaethol Chiao Tung, Taiwan).
Cyfraniadau Awdur: Arbrofion anifeiliaid, C.-JW, Y.-CL, a W.-YC; Adnabod a phuro: MY.C., N.-HL, a C.-HC; Modelu moleciwlaidd: C.-JW, Y.-CL, a JTCT; Dylunio ac ysgrifennu'r prosiect: C.-HC a JTCT
Ariannu: Cefnogwyd y gwaith yn rhannol gan grant i Jason TC Tzen o Brifysgol Genedlaethol Chung-Hsing (NCHU-102D604).
Diolchiadau: Mae'r awduron yn diolch i Tian-Shun Weng am rannu ei brofiad proffesiynol yn y defnydd o rywogaethau Cistanche.
Gwrthdaro Buddiannau: Nid yw pob awdur yn datgan unrhyw wrthdaro buddiannau.
Cyfeiriadau
1. Wang, T. ; Zhang, X. ; Xie, W. Cistanche deserticola YC Ma, "Anialwch ginseng": Adolygiad. Yn. J. Chin. Med. 2012,40, 1123–1141. [CrossRef] [PubMed]
2. Wang, T.; Chen, C. ; Yang, M.; Deng, B. ; Kirby, MG; Zhang, X. Mae dyfyniad ethanol Cistanche tubulosa yn cyfryngu lefelau hormon rhyw llygod mawr trwy sefydlu ensymau steroidogenig y ceilliau. Pharm. Biol. 2016, 54, 481–487. [CrossRef] [PubMed]
3. Lin, WY; Chun, Y. ; Jack, C. ; Kao, ST; Tsai, FJ; Liu, HP Llwybrau moleciwlaidd yn ymwneud â hyrwyddo hirhoedledd a gwelliant gwybyddol Cistanche tubulosa yn Drosophila. Ffytomeddygaeth 2017, 26, 37–44. [CrossRef]
4. Wu, CR; Lin, HC; Su, MH Gwrthdroad gan ddarnau dyfrllyd o Cistanche tubulosa o ddiffygion ymddygiadol mewn model llygod mawr tebyg i glefyd Alzheimer: Perthnasedd ar gyfer dyddodiad amyloid a swyddogaeth niwrodrosglwyddydd canolog. Ategiad BMC. Altern. Med. 2014, 14, 202. [CrossRef]
5. Xuan, GD; Liu, CQ Ymchwil ar effaith glycosidau ffenylethanoid (PEG) y Cistanche deserticola ar wrth-heneiddio mewn llygod oedrannus a achosir gan D-galactose. Zhong Yao Cai 2008, 31, 1385–1388. [PubMed]
6. Jiang, Y.; Tu, PF Dadansoddiad o gyfansoddion cemegol mewn rhywogaethau Cistanche. J. Chromatogr. 2009, 1216, 1970–1979. [CrossRef] [PubMed]
7. Gao, C. ; Wang, C. ; Wu, G. Cistanche cyfanswm glycosidau ar ddylanwad y llygod mawr dementia fasgwlaidd dysgu a chof a'r ymchwil mecanwaith. Gên. Perlysieuyn. Med. 2005, 36, 1852–1855.
8. Li, F. ; Yang, Y.; Zhu, P.; Chen, W.; Qi, D.; Shi, X. ; Zhang, C.; Yang, Z.; Mae Li, P. Echinacoside yn hyrwyddo adfywiad esgyrn trwy gynyddu cymhareb OPG/RANKL mewn celloedd MC3T3-E1. Fitoterapia 2012, 83, 1443–1450. [CrossRef]
9. Shimoda, H. ; Tanaka, J.; Takahara, Y.; Takemoto, K. ; Shan, SJ; Su, MH Effeithiau hypocholesterolemig dyfyniad Cistanche tubulosa, meddyginiaeth amrwd draddodiadol Tsieineaidd, mewn llygod. Yn. J. Chin. Med. 2009, 37, 1125–1138. [CrossRef]
10. Tang, F. ; Hao, Y. ; Zhang, X. ; Qin, J. Effaith echinacoside ar ffibrosis yr arennau trwy atal llwybr signalau TGF- 1/Smads yn y model llygod DB/DB o neffropathi diabetig. Cyffur Des. Datblygwch. Ther. 2017, 11,2813–2826. [CrossRef]
11. Xiong, WT; Gu, L. ; Wang, C. ; Haul, HX; Liu, X. Effeithiau gwrth-hyperglycemig a hypolipidemig Cistanche tubulosa mewn llygod DB/DB diabetig math 2. J. Ethnopharmacol. 2013, 150, 935–945. [CrossRef] [PubMed]
12. Bao, XX; Ma, HH; Ding, H. ; Li, WW; Zhu, M. Optimeiddio rhagarweiniol o fformiwla meddygaeth lysieuol Tsieineaidd yn seiliedig ar yr effeithiau niwro-amddiffynnol mewn model llygod mawr o glefyd Parkinson a achosir gan rotenone. J. Integr. Med. 2018, 16, 290–296. [CrossRef] [PubMed]
13. Kojima, M.; Hosoda, H.; Dyddiad, Y.; Nakazato, M.; Matsuo, H.; Mae Kanagawa, K. Ghrelin yn peptid acylated hormon twf sy'n rhyddhau o'r stumog. Natur 1999, 402, 656–660. [CrossRef] [PubMed]
14. Zigman, JM; Jones, JE; Lee, CE; Saper, CB; Elmquist, JK Mynegiant o mRNA derbynnydd ghrelin yn y llygoden fawr ac ymennydd y llygoden. J. Comp. Neurol. 2006, 494, 528–548. [CrossRef] [PubMed]
15. Castaneda, TR; Tong, J. ; Datta, R. ; Culler, M.; Tschop, MH Ghrelin wrth reoleiddio pwysau'r corff a metaboledd. Blaen. Neuroendocrinol. 2010, 31, 44–60. [CrossRef] [PubMed]
16. Rudman, D.; Feller, AG; Nagraj, HS; Almaenwyr, GA; Lalitha, PY; Goldberg, AF; Schlenker, RA; Cohn, L.; Rudman, IW; Mattson, DE Effeithiau hormon twf dynol mewn dynion dros 60 oed. N. Saesneg. J. Med. 1990, 323, 1–6. [CrossRef] [PubMed]
17. Liu, H. ; Bravata, DM; Olkin, I. ; Nayak, S.; Roberts, B.; Garber, AC; Hoffman, AR Adolygiad systematig: Diogelwch ac effeithiolrwydd hormon twf yn yr henoed iach. Ann. Intern. Med. 2007, 146, 104–115. [CrossRef] [PubMed]
18. Giordano, R. ; Bonelli, L.; Marinazzo, E.; Ghigo, E.; Arviat, E. Triniaeth hormon twf mewn heneiddio dynol: buddion a risgiau. Hormonau 2008, 7, 133–139. [CrossRef] [PubMed]
19. Sattler, FR Hormon twf yn y gwryw sy'n heneiddio. Arfer Gorau. Res. Clin. Endocrinol. 2013, 27, 541–555. [CrossRef]
20. Lo, YH; Chen, YJ; Chang, CI; Lin, YW; Chen, CY; Lee, MR; Lee, VS; Mae Tzen, JTC Teaghrelins, tetraglycosidau flavonoid acylated unigryw mewn te oolong Chin-shin, yn weithredwyr llafar tybiedig y derbynnydd ghrelin.
J. Amaeth. Cemegydd Bwyd. 2014, 62, 5085–5091. [CrossRef]
21. Hsieh, SK; Lo, YH; Wu, CC; Chung, TY; Tzen, JTC Nodi canolradd biosynthetig o teaghrelins a chyfansoddion tebyg i teaghrelin mewn te oolong, a'u tocio moleciwlaidd i'r derbynnydd ghrelin.
J. Cyffuriau Bwyd Rhefrol. 2015, 23, 660–670. [CrossRef]
22. Hsieh, SK; Chung, TY; Li, YC; Lo, YH; Lin, NH; Kuo, PC; Chen, WY; Mae Tzen, JTC Ginkgoghrelins, glycosidau flavonoid acylated unigryw yn Folium Ginkgo, yn ysgogi secretiad hormon twf trwy actifadu'r derbynnydd ghrelin. J. Ethnopharmacol. 2016, 193, 237–247. [CrossRef]
23. Han, L. ; Mavis, GAN; Liu, E.; Zhang, Y.; Li, W. ; Cân, X. ; Fu, F.; Gao, X. Nodweddu adeileddol ac adnabod glycosidau ffenylethanoid o Cistanches deserticola YC Ma gan UHPLC/ESI-QTOF-MS/MS. Ffytochem. Rhefrol. 2012, 23, 668–676. [CrossRef]
24. Lu, D.; Zhang, J.; Yang, Z.; Liu, H.; Li, S.; Wu, B. ; Ma, Z. Dadansoddiad meintiol o Cistanches Herba gan ddefnyddio cromatograffaeth hylif perfformiad uchel ynghyd â chanfod araeau deuod a sbectrometreg màs cydraniad uchel ynghyd â dulliau ceometrig. J. Medi Sci. 2013, 36, 1945–1952. [CrossRef]
25. Lleuad, M. ; Kim, HG; Hwang, L. ; Yma, JH; Kim, S.; Hwang, S.; Kim, S.; Lee, D.; Chung, H. ; O, MS; et al. Effaith niwro-amddiffynnol ghrelin yn y 1-methyl-4-ffenyl-1, 2, 3, model llygoden tetrahydropyridine 6- o glefyd Parkinson trwy rwystro actifadu microglial. Neurotocs. Res. 2009, 15, 332–347. [CrossRef]
26. Lupien, SJ; Isabelle, OM; Hupbach, A.; Tu, MT; Bws, C. ; Walker, D.; Pruessner, J.; Mcewen, BS Y tu hwnt i'r cysyniad straen: Llwyth alostatig - Persbectif biolegol a gwybyddol datblygiadol. Mewn Seicopatholeg Datblygiadol: Cyfrol Dau: Niwrowyddoniaeth Ddatblygiadol; John Wiley & Sons, Inc.: Efrog Newydd, NY, UDA, 2015; 578–628.
27. Rizzo, M.; Rizvi, AA; Sudar, E. ; Soskic, S.; Obradovic, M.A.; Montalto, G. ; Boutjdir, M.; Mihaidis, DP; Isenovic, ER Adolygiad o effeithiau cardiofasgwlaidd a gwrth-atherogenig ghrelin. Curr. Pharm. Des. 2013, 19, 4953–4963. [CrossRef]
28. Holst, B. ; Lang, M.; Brandt, E. ; Bach, A. ; Howard, A.; Frimurer, TM; Beck-Sickinger, A.; Schwartz, Gweithyddion gwrthdro derbynnydd TW Ghrelin: Adnabod craidd peptid gweithredol a'i epitopau rhyngweithio ar y derbynnydd. Mol. Ffarmacol. 2006, 70, 936–946. [CrossRef]
29. Yamazaki, M.; Nakamura, K.; Kobayashi, H.; Matsubara, M.A.; Hayashi, Y.; Kanagawa, K.; Sakai, T. Effaith rheoleiddio ghrelin ar secretiad hormon twf o gelloedd pituitary blaenorol llygod mawr tyllog. J. Neuroendocrinol. 2002, 14, 156–162. [CrossRef]
30. Lo, YH; Chen, YJ; Chung, TY; Lin, NH; Chen, WY; Chen, CY; Lee, MR; Chou, CC; Mae Tzen, JTC Emoghrelin, deilliad emodin unigryw yn Heshouwu, yn ysgogi secretiad hormon twf trwy actifadu'r derbynnydd ghrelin. J. Ethnopharmacol. 2015, 159, 1–8. [CrossRef]
31. Moukhametzianov, R.; Warne, T. ; Edwards, PC; Serrano-Vega, MJ; Leslie, AG; Tate, CG; Schertler, GF Dau gydffurfiad amlwg o helix 6 a welwyd mewn strwythurau derbynnydd adrenergig beta wedi'u rhwymo gan wrthwynebydd. Proc. Natl. Acad. Sci. UDA 2011, 108, 8228–8232. [CrossRef]
32. Rosenbaum, DM; Zhang, C.; Lyons, JA; Holl, R. ; Aragao, D.; Arlow, DH; Rasmussen, SG; Choi, HJ; Devree, BT; Sunahara, RK; et al. Adeiledd a swyddogaeth cymhlyg adrenoceptor agonist-beta(2) anghildroadwy. Natur 2011, 469, 236–240. [CrossRef]
33. Brooks, BR; Bruccoleri, AG; Olafson, BD; Gwladwriaethau, DJ; Swaminathan, S.; Karplus, M. CHARMM - Rhaglen ar gyfer ynni macromoleciwlaidd, lleihau, a chyfrifiadau dynameg. J. Cyfrifiadur. Cemeg. 1983, 4, 187–217. [CrossRef]