RHAN Ⅱ: Rôl Ffibroblast Arennol Sylfaenol Dynol mewn TGF- 1-Dyfeisiau Dynwared Ffibrosis Cyfryngol
Mar 26, 2022
Cyswllt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-bost:audrey.hu@wecistanche.com
RHAN Ⅱ: Rôl Ffibroblast Arennol Sylfaenol Dynol mewn TGF- 1-Dyfeisiau Dynwared Ffibrosis Cyfryngol
Seong-Hye Hwang, Yun-Mi Lee & et al.
Haniaethol
Ffibrosis arennolyn glefyd cronig cynyddol yn yr arennau sydd yn y pen draw yn arwain at fethiant arennol cyfnod olaf. Er gwaethaf sawl dull o frwydroffibrosis arennol, nid yw model arbrofol i werthuso cyffuriau sydd ar gael ar hyn o bryd yn ddelfrydol. Fe wnaethom ddatblygu modelau b-dynwared gan ddefnyddio dyfeisiau cyd-ddiwylliant tri dimensiwn (3D) a ddyluniwyd gyda thair haen ar wahân o interstitium tiwbyn, sef haenau epithelial, ffibroblastig ac endothelaidd. Cyflwynwyd celloedd epithelial tiwbaidd procsimol arennol dynol (HK-2), celloedd endothelaidd gwythiennau umbilical dynol, a ffibroblastau arennol sy'n deillio o gleifion, a gwerthuswyd effeithiauttrawsnewid ffactor twf - (TGF-)aTGF-triniaeth atalydd ar hynarennolffibrosismodel. Mae mynegiant yffibrosismarciwr actin cyhyrau alffa-llyfn arnoTGF- 1ychwanegwyd y driniaeth mewn celloedd HK-2 wedi'u meithrin â monolayer mewn model clefyd 3D. Yn y compartment fasgwlaidd oarennolffibrosismodelau, cynyddwyd dwysedd y llongau a gostyngwyd yn yTGF--grwp wedi'i drin aTGF-- grŵp triniaeth atalydd, yn y drefn honno. Multiplex ELISA gan ddefnyddio supernatants yn yTGF--dangosodd modelau 3D ysgogol fod lefelau cytocin pro-llidiol a ffactorau twf gan gynnwys interleukin-1 beta, ffactor-alffa necrosis tiwmor, ffactor twf ffibroblast sylfaenol, aTGF- 1, TGF- 2, aTGF- 3eu cynyddu, a oedd yn dynwared micro-amgylcheddau ffibrotig yr arennau dynol. Gall yr astudiaeth hon alluogi adeiladu dynolarennolffibrosis-dynwared model dyfais y tu hwnt i arbrofion diwylliant traddodiadol.
Geiriau allweddol: ffibroblast arennol; ffibrosis; TGF- 1
manteision iechyd cistanche tubolosa: trin clefydau cronig yn yr arennau
CLICIWCH YMA I RAN Ⅰ
3. Trafodaeth
TGF- 1yn chwarae rhan bwysig mewn cronni matrics mewn ffibrogenesis arennol ac yn atal amlhau yn y rhan fwyaf o gelloedd, gan gynnwys celloedd epithelial glomerwlaidd ac endothelaidd, yn ogystal â chelloedd epithelial tiwbaidd 【1 】. Fodd bynnag, mae TGF-ß1 yn achosi cynnydd mewn ffibroblastau arennol dynol trwy sefydlu ffactor twf ffibroblast sylfaenol (FGF-2) [8].
Yn yr astudiaeth bresennol, rydym yn sefydlu affibrosis- dyfais dynwared sy'n defnyddio tair cydran cellog hanfodol, gan gynnwys ffibroblastau arennol sylfaenol dynol, celloedd epithelial tiwbaidd arennol, a chelloedd endothelaidd dynol a'i werthuso felarennolffibrosismodel yn seiliedig arTGF- 1ysgogiad. I gynhyrchuarennolffibrosis-on-a-chip, fe wnaethom sefydlu system diwylliant 3D newydd a ddyluniwyd gyda thair rhan ar wahân o feinwe, gyda'r nod o oresgyn rhwystrau sy'n gysylltiedig â modelu clefyd arennol. Dangosodd ein hastudiaeth hynnyTGF- 1ymatebion cellog ysgogedig, gan gynnwys trawsnewid epithelial-mesenchymal tiwbaidd (EMT) o gelloedd epithelial, newid microfasgwlaidd mewn celloedd endothelaidd, a newidiadau cytocin mewn ffibroblastau arennol. Dyma'r astudiaeth gyntaf i gyflwyno affibrosis- dyfais dynwared sy'n cynnwys ffibroblastau cynradd sy'n deillio o arennau dynol a ffibroblastau ysgogol wedi'u hynysu oddi wrth gleifion âTGF- 1, inducer hysbys o ymatebion ffibrotig a ddefnyddir yn gyffredinol fel y safon i ddynwaredffibrosismewn diwylliannau celloedd [9]. Mae’r canlyniadau hyn yn awgrymu hynnyTGF- 1-mae celloedd epithelial wedi'u trin yn cael eu trosi i ffenoteip tebyg i gelloedd mesenchymal. PrydTGF- 1yn cael ei roi i ffibroblastau, mae cytocinau amrywiol yn cael eu newid i adlewyrchu anwythiad prosesau ffibrotig. Mae yn amlwg fod yn yarennolffibrosismodel, ffibroblasts yw'r prif rym y tu ôl i ddatblygiad y system ddiwylliant sefydledig trwy ysgogiad TGF.
Dywedodd Davis et al, fod 3Dculture celloedd endothelaidd yn ddigonol i'r celloedd oresgyn a ffurfio rhwydwaith lwmen a thiwb, yn dilyn organeb gyfan in vivo [10,11]. Mae sawl grŵp wedi adrodd bod modelau diwylliant 3D yn dangos lefelau uwch o nephrotoxicity na modelau cell-culture 2D [12]. At hynny, roedd mynegiant genynnau sy'n gysylltiedig â neffrowenwyndra a llid yn sylweddol uwch yn y model diwylliant celloedd 3D arennol nag mewn diwylliant 2D nodweddiadol[13].
Yn yr astudiaeth hon, mae'r cyfryngau diwylliant dynolarennolffibrosisroedd gan -on-a-chip lefel sylweddol uwch o cytocinau o'i gymharu â lefel 2Dculture. Mae ein grŵp wedi dangos y gall ffibroblastau sy'n deillio o gleifion ail-greu meinweoedd arennol brodorol, gan gynnwys haenau celloedd endothelaidd ac epithelial, trwy ein hawgrymiadauffibrosis-ar-a-sglodyn model. O ganlyniad, mae'r canfyddiadau hyn yn dangos bod yarennolffibrosisMae model -on-a-chip yn efelychu amgylchedd microffisegol yr aren ddynol yn gywir. Yn ogystal, oherwydd bod y ffibroblastau sy'n cael eu meithrin yn y sglodion yn deillio o gleifion, gellir cael modelau cleifion eraill sy'n glinigol berthnasol yn hawdd ac yn glir mewn modd diogel. Felly, y dynolarennolffibrosisgall system fodel -on-a-sglodyn ganiatáu ar gyfer datblygu meddygaeth bersonol gyda mesuriadau sensitif o swyddogaethau epithelial ac endothelaidd. Yn ein harbrofion,ffibrosisa lleihawyd angiogenesis yn yTGF-grwpiau sy'n cael eu trin ag atalyddion. Mae atalyddion TGF yn wrthwynebwyr naturiol TGF-, sydd wedi'u dangos gan ddefnyddio modelau clefyd arennol amrywiol. Mae'n ymddangos ei bod yn bosibl cynnal arbrofion i gadarnhau effeithiolrwydd triniaeth mewn modelau afiechyd gan ddefnyddio cyfryngau therapiwtig fel yr atalydd TGF hwn. Felly, mae'r sglodyn hwn wedi bod yn fodd i ddatblygu model gwell o ffibrosis arennol i fesur morffoleg a gweithrediad celloedd a gallai fod yn ddefnyddiol wrth gynnal asesiadau neffrowenwyndra ar gyfer fferyllol.
TGF-yw'r prif ffactor probrotig mewn amrywiol glefydau arennau [14] ac mae'n chwarae rhan mewn angiogenesis [15]. Mae effeithiau angiogenig TGF- yn gymhleth iawn a gallant gael gweithgaredd proangiogenig neu antiangiogenig yn dibynnu ar y lleoliad a ffactorau rheoleiddio amrywiol [16]. Mae'n ymddangos bod ffactorau twf angiogenig fel VEGF a FGF-2sy'n achosi angiogenesis in vivo yn chwarae rhan ganolog wrth fodiwleiddio angiogenesis in vivo [17-20]. Mae peth tystiolaeth yn nodi y gall y ddau ffactor hyn weithredu'n synergyddol i hyrwyddo digwyddiadau morffogenetig celloedd endothelaidd [21,22]. Rydym wedi darparu tystiolaeth bod mynegiant mRNA VEGF a secretiad protein FGF-2 yn cael eu codi'n sylweddol gan TGF- 1 mewn sglodion 3D o gymharu â diwylliant 2D.
Mae cyfyngiad einffibrosisefallai mai modelau yw eu bod wedi'u creu mewn cyfnod cymharol fyr, 24 h. Mae gan TGF-beta briodweddau pro-ffibrotic a gwrthlidiol yn gynnarffibrosisbroses, nid yn y broses gronig. Yn gonfensiynol,TGF-wedi'i ddefnyddio'n bennaf mewn cytocinau a achosirffibrosismodelau. Fodd bynnag, gan mai dim ond un cytocin na ellir ei gynrychioli mewn vivo,ffibrosismodelau sefydlu gan ddefnyddio nifer o sylweddau ymgeisiol ychwanegol megisTGF-a BMP7 wedi'u cynnig. Fodd bynnag, nid yw dau neu dri cytocin yn ddigon i atgynhyrchu in vivo o hyd. DefnyddiasomTGF-fel man cychwyn; fodd bynnag, ceisiwyd gweithredu micro-amgylchedd in vivo ar y sglodion trwy achosi storm cytocin mwy amrywiol. Fibroblast, un o brif gydrannau cellogffibrosis, ei gyflwyno, ac ysgogiad eilaidd o cytocinau mwy amrywiol (IL-1 , TNF- , b-FGF,TGF- 1, TGF-2, aTGF-3) wedi'i ysgogi mewn ffibroblastau a ysgogwyd gydaTGF-. Felly, amgylchedd tebyg iffibrosisyn y corff dynol ei atgynhyrchu.
dyfyniad cistanche deserticola: trin clefydau'r arennau
4. Defnyddiau a Dulliau
4.1.Diwylliannau Cell
Kidney fibroblasts(KFs)were isolated from biopsies of the normal tissue portion of renal cell carcinoma patients with an estimated glomerular filtration rate (eGFR)>60 mL/munud/1.73 m2 ar ôl i gleifion roi eu caniatâd i ail fiopsi at ddibenion ymchwil. Cafodd KFs eu meithrin mewn cyfrwng twf ffibroblast (FGM-2, Lonza, y Swistir), a defnyddiwyd darnau 3 i 4 ar gyfer yr arbrofion. Cafodd ffibroblastau arennol eu crafu o'r meithriniad am 1-2 wythnos nes i'r celloedd ffurfio haenen mono. Er mwyn dileu celloedd epithelial sy'n halogi'r diwylliant, dewiswyd ffibroblastau gan ddefnyddio gleiniau gwrth-fibroblast magnetig (Miltenyi Biotec Inc., Auburn, CA, UDA) ar ôl y darn cyntaf. Datgysylltwyd celloedd gan ddefnyddio 0.05 y cant o asid trypsin-ethylenediaminetetraacetig (EDTA)(Welgene, Gyeongsan, Korea), wedi'i ddeor â gleiniau gwrth-ffibr, a'u gwahanu gan ddefnyddio colofn magnetig, a'r llif- trwy ei gasglu. Roedd y ffibroblastau cynradd wedi'u puro wedi'u nodweddu gan ddadansoddiad didoli celloedd wedi'i actifadu gan fflworoleuedd (FACS) gan ddefnyddio gwrthgyrff gwrth-ffeibrofblast wedi'u cyfuno ag AG. Defnyddiwyd y Datgysylltydd didoli celloedd wedi'i actifadu'n magnetig (MACS) ar gyfer briwio meinwe'r arennau'n ysgafn. Prynwyd Gwahanydd Magnetig Octo MACSTM gyda cholofnau MACS LS (gyda phlymwyr) i buro celloedd â label microbead oddi wrth Miltenyi Biotec Inc. (Auburn, CA, UDA). Defnyddiwyd tiwbiau MACS C ysgafn (Miltenyi Biotec Inc., Auburn, CA, UDA) ar gyfer briwio arennau ar gyfer gwahanu celloedd. Cafwyd Strainers Smart MACS (70 um) gan Miltenyi Biotec Inc. (Auburn, CA, UDA). Defnyddiwyd byffer colofn i olchi colofnau ac ail-ddarparu pelenni celloedd. Paratowyd y byffer fel datrysiad sy'n cynnwys albwmin serwm buchol 0.5 y cant (BSA) gyda EDTA 2 mM mewn halwynog wedi'i glustogi â ffosffad (PBS) (pH7.4) a'i brynu gan Miltenyi Biotec Inc. (Auburn, CA, UDA). Cafodd celloedd endothelaidd gwythiennau umbilical-dynol sy'n mynegi protein fflwroleuol gwyrdd (GFP-HUVECs, Lonza, y Swistir) eu meithrin yn Endothelaidd Twf Canolig (EGM-2, Lonza, y Swistir), a defnyddiwyd celloedd yn rhannau 3 i 4. Cafwyd celloedd llinell gell tiwbaidd procsimol dynol (arennau dynol-2(HK-2) o'r Casgliad Diwylliant Math Americanaidd (ATCC) Tyfu'r llinell gell mewn cyfrwng Eagle's Eagle (DMEM) wedi'i addasu â glwcos uchel gan Dulbecco. wedi'i ategu gan 10 y cant o serwm buchol ffetws (FBS), penisilin (100 U/mL), a streptomycin (100 ug/ml) Prynwyd adweithyddion gan Gibco (Rockville, MD, UDA).Datgysylltwyd pob cell gan ddefnyddio 0.05 y cant Trypsin- EDTA a'i gynnal mewn deorydd llaithedig ar 37 gradd a 5 y cant CO2.Cafodd KFs eu hail-atal mewn FGM-2 ar grynodiad cell o gelloedd 4×10 gradd/ml.Celloedd epithelial tiwbaidd dynol arennau (HK-2 }}) eu hail-atal ar grynodiad o gelloedd gradd 2 × 10/mL mewn DMEM.GFP-HUVECs glwcos uchel eu hailddarparu ar grynodiad o gelloedd 2×10 gradd/mL mewn EGM-2.
4.2.Adweithyddion
Roedd y matrics yn cynnwys geliau ffibrin, gan gynnwys ffibrinogen sydd ar gael yn fasnachol o blasma buchol, aprotinin o ysgyfaint buchol, a thrombin o blasma buchol. Prynwyd y tri deunydd uchod gan Sigma (St. Louis, MO, UDA). Cafodd ffibrinogen ei hydoddi mewn l × PBS mewn baddon dŵr (37 gradd ) am 30 munud ar grynodiad o 10 mg/mL. Diddymwyd thrombin ac aprotinin mewn dŵr wedi'i ddad-ïoneiddio ar grynodiad o 50 uned/mL a 4 TIU/mL. Cafodd y tri datrysiad eu sterileiddio trwy hidlo trwy hidlydd 0.22 μm. Dynol ailgyfunolTGF- 1gan PeproTech EC Ltd. (Llundain, DU). Prynwyd atalydd penodol o kinase derbynnydd TGF-beta, SB431542, gan Tocris Cookson, Inc. (Ellisville, MO, UDA).
4.3. Patrymau Celloedd yn y Dyfais
Cyn hadu celloedd i hwyluso bondio tynn, cafodd y ddyfais ei thrin am 1 munud mewn peiriant plasma (Femto Science Inc., Suwon, Korea) gyda phŵer o 70 W, 50 Hz. hydrophilicity wyneb a achosir gan driniaeth plasma a helpodd i hwyluso patrwm gel a llwytho cyfryngau. Er mwyn osgoi newidiadau mewn hydrophilicity, perfformiwyd arbrofion o fewn 30 munud ar ôl triniaeth plasma. Gellir gwneud patrymau cellog gwahanol o fewn y dyfeisiau mewn modd hynod addasadwy. Roedd yn bwysig pennu cyfansoddiad a chrynodiad y gwahanol fathau o gelloedd i'w patrwm ymlaen llaw. Ar gyfer ataliadau hydrogel cellog, paratowyd 37.5 μL o ataliad celloedd a chyfrinlif ar wahân o 12.5 μL o hydoddiant ffibrinogen 10 mg/mL (250 μL o hydoddiant ffibrinogen 10 mg/mL gyda 40 μL o 4 TIU/mL aprotinin) i'w gymysgu ar unwaith) cyn llwytho. Yn union cyn ei lwytho, cymysgwyd y 37.5 μL o ataliad celloedd â 12.5 μL o ffibrinogen 10 mg / mL nes ei fod wedi'i homogeneiddio. Cymysgwyd y 50ulL o hydrogel â defnyn 1 ul o thrombin (0.5 uned/ml). Yn syth ar ôl cymysgu, chwistrellwyd thrombin gydag ataliad ffibrin o GFP-HUVECs (crynodiad cell o gelloedd 2 × 10 '/ ml) i ymyl allanol y sianel allanol (Ffigur 3, Gel A). Fe wnaethom aros 3 munud i groesgysylltu ffibrinogen fod yn gyflawn. Yn syth ar ôl cymysgu, gosodwyd thrombin gydag ataliad ffibrin o KFs (crynodiad celloedd o gelloedd gradd 4 × 10 / mL) ar bob ochr i lawr y gronfa ddŵr fesul ffynnon (Ffigur 3, Gel C). Caniatawyd yr ataliad ffibrin hwn o KFs i groesgysylltu ar dymheredd ystafell am 3 munud. Chwistrellwyd ataliad cell o 10 μL o gelloedd epithelial tiwbaidd procsimol arennol dynol (HK-2) i borthladd chwistrellu'r sianel fewnol (Ffigur 3, Gel B). I atodi HK-2 i wal y gel ffibrin yn y sianel GFP-HUVECs, cafodd y ddyfais ei droi 90 gradd a'i roi yn y 5 y cant CO, sef deorydd am 30 munud ar 37 gradd. Mae'r HK-2 setlo i lawr a ffurfio celllen ar ochr y gel ffibrin.
Ar ôl atodi'r HK-2, cafodd y ddyfais ei llenwi ag EGM-2. Deorwyd y ddyfais am 3 diwrnod ar 37 gradd mewn deorydd 5 y cant CO. Newidiwyd y cyfrwng gyda neu heb 5ng/mLTGF- 1a gyda 5ng/mLTGF- 1a 10 umTGF- 1atalydd ar ôl tri diwrnod o ddeori (Ffigur 3).
beth yw cistanche
4.4. Imunocytofluorescence
Cafodd meinweoedd cyd-ddiwylliedig yn y ddyfais eu gosod gyda hydoddiant paraformaldehyd 4 y cant (w/v) (Biosesang, Seongnam, Korea) yn PBS (Welgene, Gyeongsan, Korea) am 20 munud, ac yna athreiddedd gyda 20 munud trochi yn 0.15 y cant Triton X-100(Sigma, St.Louis, MO, UDA). Yna cafodd y samplau eu trin â 3 y cant BSA (Sigma, UDA) am 1 h. Deorwyd y celloedd â gwrthgyrff a brynwyd gan Abcam. Y gwrthgyrff cynradd oedd gwrth-cytokeratin 8 a gwrth-o-SMA, wedi'u gadael am 2 ddiwrnod ar dymheredd ystafell (RT). Defnyddiwyd Alexa Fluor 647 asyn cyfun gwrth-gwningen IgG(H plws L) fel gwrthgorff eilaidd. Perfformiwyd labelu DNA gyda gwanhad 1:250 o Hoechst33342 (Thermo Scientific, Rockford, IL, UDA) am 3 h yn RT. Casglwyd delweddau gan ddefnyddio microsgop laser confocal Zeiss LSM 710. Mesurwyd y dwyster fflworoleuedd cymedrig (MFI) gan ddefnyddio ImageJ a dadansoddwr dwysedd fflworoleuedd.
4.5. Dadansoddiad Amlblecs o Sytocinau
Defnyddiwyd pecyn dynol MSD V-Plex Cytokine ac Angiogenesis Panel 1 (Rockville, MD, UDA) i fesur crynodiadau interleukin-1 beta （IL-1ß） a ffactor twf ffibroblast sylfaenol (b-FGF). mewn samplau sengl, yn unol â chyfarwyddiadau'r gwneuthurwr. Aseswyd yr holl samplau ar gyfer cyfanswm lefelau protein IL-1 a b-FGF. Cafodd y swm (mewn tud/mL) ei feintioli o gromlin safonol pob mesuriad.
4.6. Immunoassay Glain Amlblecs
Dadansoddwyd crynodiadau cytocin gan ddefnyddio system imiwno-asesu gleiniau amlblecs (Procarta Cytokine Assay Kit; Affymetrix, Inc., Santa Clara, CA, UDA), yn seiliedig ar dechnoleg aml-blecsio (xMAP; Luminex, Austin, TX, UDA), yn ôl y cyfarwyddiadau'r gwneuthurwr. Cafwyd y data gan ddefnyddio gweithfan sy'n gydnaws â Luminex a'i feddalwedd rheolwr (gweithfan Bio-Plex a meddalwedd fersiwn 6.0; Bio-Rad, Tokyo, Japan), yn unol â chyfarwyddiadau'r gwneuthurwr. Mae TGF dynol- 1, TGF- 2, a TGF- 3 yn ymwneud â'rffibrosisdadansoddwyd y broses ar yr un pryd yn y samplau gwanedig. Mae isffurfiau oTGF-eu canfod gan ddefnyddio Bio-Plex 200 Systems a Bio-Plex ProTM Human sydd ar gael yn fasnacholTGF-profion (Labordai Bio-Rad, Inc); yn seiliedig ar y wybodaeth a ddarparwyd gan y gwneuthurwr. Gall y pecyn profi amlblecs fesur yn feintiol cytocinau lluosog o'r uwchnatant gyda therfyn canfod is o 1 pg/mL fesul cytocin. Cafodd pob sampl ei redeg fel un mesuriad ar gyfer swm cyfyngedig o'r uwchnatydd a gasglwyd.
4.7.Real-Time PCR
Perfformiwyd echdynnu RNA gan ddefnyddio TRIzol Reagent (Invitrogen Life Technologies, Carlsbad, CA, UDA). Defnyddiwyd Master Mix a Phecyn Synthesis cDNA Llinyn Cyntaf Cymorth Dychwelyd ar gyfer trawsgrifio cefn o gyfanswm yr RNA.qPCR gan ddefnyddio'r Biosystems Cymhwysol TM PowerUpTM SYBRTM Green Master Mix (Thermo Fisher Scientific, Inc.). Paratowyd y paent preimio penodol gan Bioneer (Daejeon, Korea) a'u defnyddio yn yr arbrawf hwn fel a ganlyn. Mae’r dilyniannau preimio wedi’u crynhoi yn Nhabl 1.
Defnyddiwyd deg microlitr o PowerUp SYBR Green Master Mix, 4 μL o cDNA, a 2 pmol o bob paent preimio ar gyfer PCR amser real mewn cyfrol derfynol o 20 μL. Cynhaliwyd yr adwaith ar 95 gradd am 1s a 60 gradd am 20 s am 45 cylch ar ôl dadnatureiddio ar 95 gradd am 20 s. Perfformiwyd PCR yn ddyblyg neu'n driphlyg ar gyfer pob sampl. Pennwyd lefelau cDNA gan ddefnyddio cromlin safonol o drothwyon cylchred. Roedd yr holl ddata ar gyfer pob cDNA o fewn y gromlin safonol gyfatebol. Cafodd y data a gafwyd eu normaleiddio i -actin cDNA.
4.8. Dadansoddiad Ystadegol
Cyflwynir data meintiol fel cymedr ±SD neu SE o dri arbrawf annibynnol o leiaf. Perfformiwyd dadansoddiadau ystadegol gan ddefnyddio prawf-t Myfyriwr dau gynffon. Dim ond ar lefel hyder 95 y cant neu uwch y gwnaethom ystyried gwahaniaeth sylweddol (t<>
5. Casgliadau
I grynhoi, roedd y protocolau yn yr astudiaeth hon yn galluogi adeiladu dynolarennolffibrosis-yn dynwared dyfeisiau fel model ac yn dangos effeithiau amrywiol nad ydynt yn bosibl mewn arbrofion diwylliant 2D. Credwn y bydd y strategaeth werthuso a gynigir yn yr astudiaeth hon yn arwain at well dealltwriaeth o'r manylionffibrosismecanweithiau sy'n ymwneud â newidiadau patholegol yn ystodclefyd arennol. Gellid defnyddio'r ffibrosis arennol 3D datblygedig-ar-sglodyn fel model in vitro posibl, a fydd yn dod â ni'n agosach at greu model aren-ar-sglodyn gwell.
cistanche phelypaes: triniaeth ar gyfer clefydau'r arennau
Cyfeiriadau
1. Border, W. ; Noble, N. Ffactor twf trawsnewidiol mewn meinweffibrosis.N. Eng. J. Med.1994, 331,1286-1292.
2. Wang, W.;Huang, XR;Li,AG;Liu,F;Li,J.; Truong, LD; Wang, XJ; Lan, mecanwaith HYSsignaling TGF-betal i atal llid arennol: Rôl Smad. Dwi yn. Soc. Nephrol.2005, 16, 1371-1383. [CrossRef]
3. Liu,Y.Arennolffibrosis: Mewnwelediadau newydd i'r pathogenesis a therapiwteg.Kidney Int.2006,69,213-217. [CrossRef][PubMed]
4. Andes, D.; Craig, WA Model ffarmacocineteg a ffarmacodynameg Anifeiliaid: Adolygiad beirniadol. Int. J.Antimicrob.Agents 2002, 19,261-268. [CrossRef]
5. Kim, S.; Takayama, S.Organ-ar-a-sglodyn a'r aren. Arennau Res. Clin. Pract.2015, 34, 165-169.[CrossRef][PubMed]
6. Jang, KJ; Mehr, AP; Hamilton, GA; McPartlin, ALl; Chung, S. ; Suh, KY; Ingber, DEHuman tiwbyn procsimol arennau ar-a-sglodyn ar gyfer cludo cyffuriau ac asesu neffrowenwyndra. Cyfanrif. Biol. 2013,5,1119-1129. [CrossRef[PubMedl
7. Reardon, S. 'Organau-ar-sglodion' yn mynd yn brif ffrwd. Natur 2015, 523, 266. [CrossRef]
8. Strutz, F; Zeisberg, M; Renziehausen, A.; Raschke, B. ; Becker, V; Kooten, CV; MuLler, GATGF- 1yn achosi cynnydd mewn ffibroblastau arennol dynol trwy sefydlu ffactor twf ffibroblast sylfaenol (FGF-2).Kidney Int. 2001, 59, 579-592.[CrossRef][PubMed]
9. Zanotti, S.; Bragato, C.; Zucchella, A.; Maggi, L.; Mantegazza, R.; Morandi, L.; Mora, M. Effaith gwrth-ffibrotic o pirfenidone mewn ffibroblastau sy'n deillio o gyhyr gan gleifion nychdod cyhyrol Duchenne. Gwyddor Bywyd. 2016, 145,127-136. [CrossRef]
10. Davis, GE.:Camarillo. C, W. Mae mecanwaith pinocytig alffa 2 beta 1 integrin-ddibynnol sy'n cynnwys ffurfio gwactod mewngellol a chyfuniad yn rheoleiddio lwmen capilari a ffurfiant tiwb mewn matrics colagen tri dimensiwn. Exp. Cell Res. 1996, 224, 39-51.[CrossRef]
11. Bayless, KJ; Davis, G. Mae angen y Cdc42 a Race GTPases ar gyfer ffurfio lwmen capilari mewn matricsau allgellog tri dimensiwn. J. Cell Sci. 2002,115,1123-1136. [CrossRef [PubMed]
12. DesRochers, TM; Suter, L.; Roth, A. ; Kaplan, DL Meinwe arennau dynol 3D Bioengineered, llwyfan ar gyfer pennu nephrotoxicity. PLoS ONE 2013, 8, e59219. [CrossRef]
13. Astashkina, AI; Mann, BK; Prestwich, GD; Grainger, DW Cymharu biomarcwyr neffrowenwyndra cyffuriau rhagfynegol yn niwylliant organoid cynradd 3-D yr arennau a llinellau celloedd anfarwoledig. Bioddeunyddiau 2012, 33, 4712-4721. [CrossRef] [PubMed]
14. Meng, XM; Nikolic-Paterson, DJ; Lan, HY TGF-beta: Prif reoleiddiwrffibrosis. Nat.Rev.Nephrol.2016,12, 325-338. [CrossRef]
15. Pardali,E.;Goumans, MJ;ten Dijke,P. Arwyddion gan aelodau o'r teulu TGF-beta mewn morffogenesis fasgwlaidd ac afiechyd. Tueddiadau Cell Biol.2010, 20, 556-567. [CrossRef] [PubMed]
16. Cunha, SL; Pietras, K. ALK1 fel targed sy'n dod i'r amlwg ar gyfer therapi antiangiogenig o ganser. Gwaed 2011,117,6999-7006.[CrossRef]
17.Klagsbrun, M.;D'Amore, PA Rheoleiddwyr angiogenesis. Annu. Parch. Physiol.1991,53, 217-239. [CrossRef]
18. Gwerinwr, J.;Shing, Y.Angiogenesis. J.Biol. Cemeg.1992, 267,10931-10934. [CrossRef]
19. Shweiki, D. Itin, A.Soffer, D.Keshet, E. Gall ffactor twf endothelaidd fasgwlaidd a achosir gan hypocsia gyfryngu angiogenesis a gychwynnir gan hypocsia. Natur 1992, 359, 843-848. [CrossRef]
20. Kim, KJ; Li, B. ; Winer, J. ; Armanini, M; Gillett, N.; Phillips, HS; Ferrera, N. Mae atal twf endothelaidd fasgwlaidd angiogenesis a achosir gan ffactor yn atal twf tiwmor mewn vivo. Natur 1993, 362, 841-844. [CrossRefl]
21. Pepper, MS; Ferrara, N.; Orci, L. ; Montesano, R. Synergedd cryf rhwng ffactor twf endothelaidd fasgwlaidd a ffactor twf ffibroblast sylfaenol wrth sefydlu angiogenesis in vitro.Biochem. Bioffys. Res. Cymmun.1992,189,824-831.[CrossRefl
22. Goto, F. ; Goto, K. ; Weindel, K.; Folkman, J. Effeithiau synergaidd o ffactor twf endothelaidd fasgwlaidd a ffactor twf ffibroblast sylfaenol ar amlhau a ffurfio llinyn o gelloedd endothelaidd capilari buchol o fewn geliau colagen. Lab. Ymchwilio.1993,69, 508-551.[PubMed]