Delweddu'r Microgylchrediad Arennol mewn Therapi Celloedd

Cyswllt:ali.ma@wecistanche.com

Katerina Apelt et

Coesyn cistanche ar gyfer clefyd yr arennau, cliciwch yma i gael y sampl

Crynodeb:

ArennolMae rarefaction microfasgwlaidd yn chwarae rhan ganolog mewn blaengararenclefyd. Felly, bydd dulliau i ddelweddu microgylchrediad yr aren yn cynyddu ein dealltwriaeth o fecanweithiau clefyd ac o ganlyniad efallai y bydd yn darparu dulliau newydd o werthuso therapi seiliedig ar gelloedd. Ar hyn o bryd, fodd bynnag, mae ymarfer clinigol yn brin o ddulliau delweddu anfewnwthiol, diogel ac effeithlon i fonitro newidiadau microfasgwlaidd arennol dros amser mewn cleifion sy'n dioddef o glefyd arennol. I bwysleisio'r pwysigrwydd, rydym yn crynhoi'r wybodaeth gyfredol am ficro-gylchrediad arennol ac yn trafod yr ymwneud â chlefyd cynyddol yr arennau. At hynny, cyflwynir trosolwg o'r technegau delweddu sydd ar gael i ddatgelu morffoleg, swyddogaeth ac ymddygiad microfasgwlaidd arennol gyda'r buddion a'r cyfyngiadau cysylltiedig. Yn y pen draw, gall yr angen i asesu ac ymchwilio i glefyd arennol yn seiliedig ar ddarlleniadau in vivo gyda datrysiad hyd at lefel capilari ddarparu newid paradeim ar gyfer diagnosis a therapi ym maesneffroleg.

Geiriau allweddol: aren; microcirculation; microfasgwlaiddprinfaction; therapi celloedd; delweddu

1. Rhagymadrodd

Mae gan y fasgwleiddiad arennol bensaernïaeth anatomegol gymhleth, sy'n adlewyrchu ei swyddogaeth ffisiolegol unigryw [1]. Er gwaethaf addasiad deinamig iawn y rhwydwaith micro-fasgwlaidd i newidiadau hemodynamig, gall camweithrediad fasgwlaidd fod yn ganlyniad neu hyd yn oed achosarendatblygu a dilyniant clefydau [2,3]. Yn unol â hynny, gall camweithrediad micro-fasgwlaidd fod yn nodwedd gynnar o anaf ffibrotig i'r arennau, gan awgrymu y byddai asesiad anfewnwthiol a dilysu pensaernïaeth a swyddogaeth microfasgwlaidd arennol yn welliant mawr i asesu effeithiolrwydd therapïau sydd â'r nod o leihau ffibrosis arennol.

Mewn ymarfer clinigol, difrifoldeb cronigarendosberthir clefyd (CKD) yn seiliedig ar y gyfradd hidlo glomerwlaidd (GFR) sy'n adlewyrchu'n ysgafn (60-89 mL / min / 1.73 m2 ), yn gymedrol (30-59 mL / min / 1.73 m2 ) neu'n ddifrifol (15-29 mL / min/1.73 m2 ) wedi gostwngarenswyddogaethyn seiliedig ar gategorïau wedi'u diffinio ymlaen llaw [4]. Diffinnir dilyniant clefyd i CKD datblygedig a chlefyd arennol cyfnod olaf (ESRD) gan glomerulosclerosis a ffibrosis tubulointerstitial gyda GFR o lai na 15 mL/mun/1.73 m2. Mae nifer o astudiaethau wedi dangos bod y ffenomen o golli capilarïau arennol, hy, prinhad microfasgwlaidd arennol, yn cydberthyn yn agos â difrifoldeb clefyd yr arennau ac yn ymwneud â bioleg dilyniant dilynol tuag at CKD [3,5-7]. Amlygwyd ffurfio ffibrosis arennol fel nodwedd ganolog ar gyfer colled capilarïau peritubwl o'r fath a cholled epithelial arennol dilynol. Os gellir amddiffyn microfasgwleiddiad yr aren neu hyd yn oed ei adfer, byddai cywirdeb meinwe strwythurol arennol yn gwella a gellir atal dilyniant afiechyd [2,8]. Yn ogystal, mae'n bosibl y gellir diffinio ffenestr therapiwtig i asesu difrifoldeb yr anaf cyn bod graddau'r difrod i'r arennau'n anghildroadwy. Yn benodol, gellir asesu a mireinio'r defnydd o therapïau celloedd fel cymwysiadau addawol o gelloedd stromatig mesenchymal (MSCs) ar gyfer trin clefydau fasgwlaidd arennol. Fodd bynnag, mae dealltwriaeth fanwl o brinder microfasgwlaidd arennol yn dal i gael ei llesteirio gan absenoldeb dulliau delweddu sy'n galluogi monitro cydraniad uchel ac anfewnwthiol o bensaernïaeth ac ymarferoldeb cychod.

Yn yr adolygiad hwn, rydym yn crynhoi'r wybodaeth gyfredol am y microfasgwleiddiad arennol a'r mecanweithiau patholegol a all effeithio ar ficro-gylchrediad. Rydym yn trafod pwysigrwydd pericytes ac yn rhoi mewnwelediad i'w rôl ganolog wrth achosi dilyniant clefyd arennol trwy gamweithrediad microfasgwlaidd a ffacsiwn prin, yn ogystal â datblygiadarenffibrosis. Wedi hynny, rydym yn disgrifio datblygiadau newydd mewn technegau delweddu a allai fonitro newidiadau o'r fath mewn microgylchrediad arennol.

2. Y Fasgwleiddiad Arennol

2.1. Cylchrediad Gwaed Arennol

Mae microfasgwleiddiad y corff dynol yn cynnwys rhydwelïau, capilarïau, a gwythiennau ac yn effeithio ar gyfnewid ocsigen, maetholion a metabolion rhwng y gwaed a'r meinwe o'i amgylch [8,9]. Yn amlwg, mae swyddogaeth hanfodol microcirculation yn cael ei reoleiddio'n dynn yn seiliedig ar anghenion metabolaidd yr organ. Prif gyfrifoldeb arterioles yw rheoleiddio'r llif gwaed trwy addasu'r gwrthiant i sicrhau y gellir gweithredu'r cyfnewid hanfodol ar lefel capilarïau [10]. Yn hyn o beth, mae addasu parhaus i alw homeostatig y meinwe sylfaenol yn bennaf yn dibynnu ar blastigrwydd deinamig celloedd endothelaidd. Ar yr un pryd, mae iechyd endothelaidd y microgylchrediad yn dibynnu ar y cyfathrebu rhynggellog agos â pericytes sy'n sefydlogi'r pibellau gwaed yn gorfforol, yn rheoleiddio angiogenesis, ac yn rheoli llif y gwaed [11,12].

Mae'r aren yn organ fasgwlaidd iawn sy'n arddangos nodweddion morffolegol a swyddogaethol unigryw sy'n adlewyrchu heterogenedd rhyfeddol ei rwydwaith fasgwlaidd [1,10]. Mae gwaed yn mynd i mewn i'r aren trwy'r rhydweli arennol trwy'r hilum (Ffigur 1), sy'n rhannu ymhellach yn ddeuol yn y pelfis arennol yn rydwelïau segmentol a changhennau'n gynyddol ar lefel y calycs bach yn rydwelïau rhynglobar sy'n ymledu rhwng y pyramidau arennol [1,13 ]. Ar y ffin rhwng y cortecs a'r medwla, mae rhydwelïau rhynglobar yn llifo i'r rhydwelïau arcuate, gan ffurfio gwahaniad anatomegol rhwng y ddwy adran arennol [1]. Yn y cortecs, mae rhydwelïau rhynglobaidd, a elwir hefyd yn rydwelïau pelydrol cortigol neu rydwelïau treiddiol cortigol, yn codi'n berpendicwlar o rydwelïau arcuate ac yn ymwahanu i rydwelïau afferol i gyflenwi gwahanol ganghennau'r goeden glomerwlaidd. Yn dibynnu ar leoliad y glomeruli, mae gwaed wedi'i hidlo yn dod at ei gilydd yn y plexws capilari cortigol o amgylch y tiwbiau procsimol a distal neu'r plexws capilari medwlari ar lefel dolen Henle. Yn olaf, mae gwaed yn draenio i mewn i'r system gwythiennol sy'n rhedeg ochr yn ochr â'r rhwydwaith rhydwelïol sy'n gadael yr aren trwy'r rhynglobaidd, arcuate, rhynglobar, segmentol, ac yn y pen draw y wythïen arennol uwchben yr wreter. Yn gyffredinol, mae'r patrwm fasgwlaidd sylfaenol hwn yn cael ei gadw ar draws mamaliaid [14,15].

2.2. Rhwydweithiau Capilari yr Arennau

Adlewyrchir cymhlethdod y bensaernïaeth microfasgwlaidd arennol gan morffoleg amrywiol y gwahanol bibellau gwaed arennol (Ffigur 2). Mae heterogenedd strwythurol a swyddogaethol yr endotheliwm arennol a'r celloedd perifasgwlaidd o'u cwmpas yn mynd law yn llaw â'r math o rwydwaith capilari [15-17]. Mewn gwirionedd, mae presenoldeb gwelyau capilari amrywiol yn nodwedd ryfeddol sy'n sicrhau hidlo trwy'r rhwydwaith capilari glomerwlaidd, yn ogystal â secretion ac adamsugniad trwy'r rhwydwaith capilari peritubwl a'r rhwydwaith capilari medwlaidd [1,13,14]. Mae'r microcirculation cortigol yn bennaf yn sicrhau bod yr hidlif glomerwlaidd yn cael ei ail-amsugno, tra bod ysgarthiad halen a dŵr yn cael ei reoleiddio'n bennaf gan y rhan microfasgwlaidd medullary [14]. Yn ddiddorol, er bod y medwla yn gwneud tua 30 y cant o gyfanswm màs meinwe arennol, dim ond 10 y cant o gyfanswm y llif gwaed arennol (RBF) sy'n cynnwys y rhan hon [10]. Yn seiliedig ar y sefyllfa anatomegol, gellir rhannu'r microcirculation arennol yn (i) microcirculation cortical; a (ii) microcirculation medullary [13,14].

Mae'r microgylchrediad cortigol wedi'i wahanu'n gorfforol gan y rhydwelïau arcuate sy'n arwain at rydwelïau rhynglobaidd sy'n cangenu ymhellach o'r ddwy ochr i sawl rhydweli afferol i gyflenwi'r rhwydwaith capilari glomerwlaidd [14]. Mae'r canghennog yn digwydd ar ongl wahanol yn dibynnu ar leoliad y glomeruli o fewn y cortecs. Trwy'r rhydweli afferol, mae'r rhwydwaith capilari glomerwlaidd sy'n cynnwys 6-8 dolen capilari yn cael ei gyflenwi â gwaed sy'n gadael trwy'r rhydwelïol echrydus ar ôl cael ei hidlo [10]. Mae capilarïau glomerwlaidd (Ffigur 2a) wedi'u ffurfio o endotheliwm ffenestredig tenau, parhaus, gwastad yn bennaf, sydd wedi'i orchuddio â podocytau. Gall yr ardaloedd â ffenestri gymryd hyd at 20-50 y cant o'u harwynebedd cell cyfan [16]. Mae'r glomeruli cortical yn cyfansoddi 90 y cant o'r holl glomeruli sy'n bresennol yn yr aren, ac felly nid yw'n syndod bod y rhan fwyaf o'r RBF yn llifo drwodd yn bennaf [13]. Mae'r 10 y cant sy'n weddill o'r holl glomeruli wedi'u lleoli ar y ffin cortico-medwlari ac maent yn fwy o ran maint. Heblaw am wahaniaethau maint y glomerwli, gellir esbonio gwahaniaethau strwythurol rhydwelïon afferol ac echrydus sy'n cyflenwi'r glomerwli cortigol a chyfosodol gan yr arwyddocâd i gadw pwysedd capilari.

Er mwyn sicrhau bod y gwaed yn cael ei hidlo'n iawn, mae'r gwahaniaeth mewn diamedr rhwng rhydwelïau cortigol afferent (Ffigur 2b) a rhydwelïon efferent cortigol (Ffigur 2c) yn 15 µm yn erbyn 10 µm [13]. Mae pwysedd gwaed yn cael ei reoleiddio ar ochr rhydwelïau afferol trwy gyfrwng newidiadau gwrthiant sy'n esbonio'r endotheliwm parhaus sy'n cael ei lapio gan gelloedd cyhyrau llyfn (SMCs) [18]. Mae archwiliad agosach o'r rhydwelïol afferol yn datgelu presenoldeb dwy segment fasgwlaidd yn hytrach nag endotheliwm unffurf ar hyd y llong gyfan fel y deuir ar ei draws yn gyffredin. Mae rhan ymylol y rhydwelïol afferol yn cynnwys endotheliwm anathraidd gyda SMCs wedi'u trefnu'n dynn, sy'n ofynnol ar gyfer crebachiad llestr. Mewn cyferbyniad â'r rhan distal, sydd wedi'i leoli'n agos at y glomerwlws ac mae'n cynnwys endotheliwm athraidd oherwydd presenoldeb ffenestri. Yn ddiddorol, mae'r ffenestri hwn braidd yn nodwedd anghyffredin mewn cychod â phwysedd mewnfasgwlaidd uchel. Ar ben hynny, mae pericytes sy'n cynhyrchu renin siâp ciwb yn lapio rhan distal y rhydweli afferol i gyfryngu rheoleiddio pwysedd gwaed lleol yn y glomerwlws [17,19].

Mae gwaed wedi'i hidlo yn gadael pob un o'r glomerwli cortigol trwy'r rhydweli effro i ddod at ei gilydd yn y plexws capilari cortigol trwchus o amgylch y tiwbiau arennol [10]. Ar wahân i'r system capilari glomerwlaidd, gelwir yr ail adran capilari hwn yn system capilarïau peritubwl [16]. Mae'r capilarïau peritubwl (Ffigur 2d) wedi'u ffenestri a'u waliau tenau gyda diamedr cyfartalog o tua 7 µm [13,15]. Mae'r capilarïau hynny'n darparu ocsigen a maetholion i'r tiwbiau sydd wedi'u lleoli yn y cortecs arennol, ond nid o reidrwydd i'r un y maent yn tarddu ohono [10,15]. Mae capilarïau peritubwlaidd yn arddangos endotheliwm mwy parhaus, yn ogystal â diamedr llai o gymharu â chapilarïau medwlaidd y vasa recta [13,16]. Mewn clefyd arennol, bydd yr anaf glomerwlaidd yn dylanwadu o'r diwedd ar y capilarïau peritubwlaidd a drefnir yn ddilyniannol i lawr yr afon, a thrwy hynny gyflymu dilyniant clefyd arennol [10,20].

Mae gan y rhydwelïol afferent cyfosodol (Ffigur 2e) ddiamedr bras o 20 µm, tra bod gan y rhydweli effro cyfosodol (Ffigur 2f) ddiamedr mewnol mwy trwchus o 20–25 µm [13]. Mae'r rhydweli echrydus sy'n gadael y glomerwlws cyfochrog wedi'i amgylchynu'n fawr gan sawl SMC. Mae'r gwahaniaeth amlwg hwn mewn diamedr llestr, yn ogystal â chynnydd mewn cyhyredd, yn codi'r ddadl ynghylch cyfranogiad y math hwn o glomerwlws mewn isgemia. Mae'n ymddangos bod y bensaernïaeth fasgwlaidd arennol wedi'i threfnu mewn ffordd arbennig i gadw'r medwla rhag difrod isgemig. Mae'r ddamcaniaeth efallai na fydd rhydwelïau afferol ac echrydus o'r glomerwli cyfochrog yn gyfrifol am reoleiddio'r cymrawd gwaed medwlaidd (MBF), ond gallai hyn hefyd fod yn groes i'w rôl i reoli'r gyfradd hidlo glomerwlaidd [21]. Yn lle hynny, mae'n ymddangos bod y vasa recta disgynnol (DVR) o'r bwndeli fasgwlaidd sydd wedi'u lleoli yn streipen fewnol y medwla allanol yn gyfrifol am reoli'r MBF a allai esbonio'r nifer uchel o bericytes sy'n lapio'r rhan hon o longau. Felly mae'r DVR yn chwarae rhan allweddol yn y broses o reoleiddio pwysau arterial yn y tymor hir [13]. Mae rhydwelïonau echrydus sy'n gysylltiedig â'r glomerwli cyfochrog yn llifo trwy'r bwndeli fasgwlaidd, sydd wedi'u lleoli yn streipen fewnol y medwla allanol yn troi i mewn i'r DVR. Mae'r DVR yn arwain at y rhwydwaith capilari medwlari sy'n gysylltiedig â'r vasa recta esgynnol (AVR) [1].

Mae'r microcirculation medullary yn dechrau pan fydd y rhydwelïolau echrydus sy'n tarddu o'r glomeruli juxtamedullary yn mynd i mewn yn ddyfnach i'r meinwe i gyflenwi'r 30 y cant sy'n weddill o'r meinwe arennol a elwir yn medwla [13,14]. Mae medwla un pyramid arennol wedi'i rannu'n ddwy ran yn anatomegol: y medwla allanol sydd wedi'i leoli reit o dan y cortecs, ac yna'r medwla mewnol sy'n ymledu hyd at frig y parenchyma, a elwir y papila. Yn gyffredinol, mae nifer y capilarïau medwlari yn cynyddu o flaen y pyramid arennol. Mae arsylwi agosach yn dangos y gellir isrannu'r medwla allanol ymhellach i'r stribed allanol a'r stribed mewnol hynod fasgwlaraidd sy'n cynnwys y plexws capilari trwchus a'r plexws rhyng-bwndel [15]. Nodweddir y capilarïau rhyng-bwndel gan endotheliwm wedi'i ffenestreiddio ac maent yn gysylltiedig â'r wythïen arcuate [14,22].

Mae pob rhydweli efferent cyfosodol yn hollti'n sawl bwnd, a elwir yn fwndeli fasgwlaidd, i ffurfio canghennau'r DVR (Ffigur 2g) sydd â diamedr mwy o'i gymharu â chapilarïau periwbwlaidd y cortecs [15,23]. Mae sawl pericytes ynghlwm wrth endotheliwm y DVR o'r bwndeli fasgwlaidd [17]. Yn ddiddorol, mae nifer y pericytes sy'n lapio'r llongau yn gostwng yn DVR (Ffigur 2h) o'r medulla mewnol [15,17]. Mae'r trefniant morffolegol hwn o'r DVR yn y compartment medulla allanol a mewnol yn adlewyrchu ei swyddogaeth ddeuol [10]. I ymhelaethu, mae vasoconstriction y DVR yn ymddangos yn bennaf yn y rhan procsimol, sydd wedi'i leoli yn y medulla allanol [15]. Yn y rhan distal, hy, y medulla mewnol, fodd bynnag, mae cyfnewid electrolyte yn bennaf yn digwydd. Mae'r gwahaniaeth anatomegol hwn yn awgrymu'n uniongyrchol isboblogi amlwg o bericytes o ran ymddangosiad morffolegol ac eiddo swyddogaethol [15,17].

Yn ddwfn o fewn y medulla mewnol, holltodd canghennau amrywiol o'r DVR yn rhwydwaith capilari cymhleth cyn cysylltu â'r AVR sylweddol llai [10]. Mae endotheliwm y DVR yn barhaus, mewn cyferbyniad â chelloedd endothelaidd yr AVR (Ffigur 2i), sydd â ffenestri uchel. Yn y pen draw, mae'r holl waed yn cael ei gasglu o'r AVR, yn ogystal â chapilarïau peritubwlaidd y plexws capilari cortigol i'r system venous. Yn gyffredinol, mae gwythiennau arennol yn arddangos wal fasgwlaidd hynod denau ac mae gwythiennau rhynglobaidd, arcuate a rhynglobar wedi'u ffenestri ac yn cynnwys diafframau. Yn syndod, mae gwythiennau rhynglobaidd yn gyffredinol yn fwy tebyg i gapilarïau peritubwl nag â gwythiennau oherwydd yr epitheliwm tenau gyda ffenestri mawr.

Mae'r gwahanol segmentau microfasgwlaidd arennol a'u hymddangosiad morffolegol cain ar lefel celloedd yn codi'r amheuaeth bod y cymhlethdod presennol yn cael ei drosi'n fecanwaith clefyd hyd yn oed yn fwy cymhleth. Felly, mae'r adran ganlynol yn canolbwyntio ar y prosesau sylfaenol sy'n gysylltiedig â chamweithrediad microfasgwlaidd arennol.

3. Camweithrediad Microfasgwlaidd Arennol

3.1. Camweithrediad Endothelaidd

Mae'r endotheliwm arennol yn dawel yn bennaf o dan amodau ffisiolegol; fodd bynnag, mewn ymateb i newidiadau micro-amgylcheddol, hy, straen cneifio, hypocsia, straen ocsideiddiol, neu llid, mae actifadu celloedd endothelaidd yn digwydd a chynhyrchir ffactorau twf angiogenig [24]. Yn dibynnu ar y sbardun, gall actifadu celloedd endothelaidd ysgogi ffenoteip pro-llidiol a pro-thrombotig i hyrwyddo adlyniad celloedd imiwnedd ac ymdreiddiad ar gyfer ffurfio microthrombi. Fodd bynnag, er mwyn cynnal y rhwystr fasgwlaidd ar gyfer swyddogaeth reoleiddiol helaeth addas a athreiddedd ar gyfer cludiant hydoddyn, mae'n hanfodol rheoleiddio cyflwr metabolig quiescent yn dynn, yn ogystal â chelloedd endothelaidd actifedig.

Mae cyfanrwydd meinwe a swyddogaeth organau yn dibynnu'n bennaf ar ddarlifiad addas o'r rhwydwaith microfasgwlaidd [8]. Felly, nid yw'n syndod bod celloedd endothelaidd yn arddangos plastigrwydd uchel i sicrhau addasiad deinamig i newidiadau amgylcheddol trwy addasu'r rhif capilari, siâp morffolegol, a swyddogaeth [1,2,8]. Fodd bynnag, mae cyfnod hir o bwysedd gwaed uchel yn achosi newidiadau di-droi'n-ôl yn y microcirculation, gan arwain at gelloedd endothelaidd anafedig a nodweddir gan briodweddau addasu diffygiol. Mae'r cartrefostasis tarfu hwn yn cael ei adlewyrchu gan ostyngiad mewn ocsid nitrig (NO), ffactor hypocsia-anwythol-1 (HIF-1 ), a ffactor twf endothelaidd fasgwlaidd (VEGF), ynghyd â chynnydd mewn ffactorau eraill megis fel angiostatin, endostatin, a thrombospondin [1]. Yn nodedig, mae'r tueddiad i gamweithrediad endothelaidd yn yr aren yn amrywiol ac mae'n dibynnu ar y math o gell endothelaidd sydd wedi'i leoli o fewn gwahanol adrannau'r microcirculation arennol [16,24]. Er mwyn egluro ffenoteipiau heterogenaidd celloedd endothelaidd arennol a'u hymateb gwahanol i newidiadau microfasgwlaidd, mae Dumas et al. [25] yn ddiweddar darparodd atlas cydraniad uchel o'r endotheliwm arennol trwy ddefnyddio dilyniant RNA un-gell.

Mae camweithrediad endothelaidd yn aml yn cyd-ddigwydd â dirywiad acíwt a chynyddol yng ngweithrediad yr arennau [24]. Mae'r camweithio hwn yn achosi mwy o wrthwynebiad fasgwlaidd, sy'n cyd-fynd â gostyngiad mewn RBF [26]. Mae cyfnod hir o vasoconstriction yn achosi darlifiad meinwe annigonol ac actifadu ffactorau straen a thwf gan arwain at newidiadau morffolegol [1]. Yn dibynnu ar ddifrifoldeb ac yn enwedig hyd unrhyw sarhad penodol, gellir newid y RBF yn anadferadwy trwy gyflwyno newidiadau strwythurol yn y microcirculation. Achosir y newidiadau morffolegol hynny gan broses a elwir yn ailfodelu microfasgwlaidd. Diffinnir ailfodelu microfasgwlaidd fel yr ymateb i newidiadau swyddogaethol y microfasgwlaidd, a all o ganlyniad achosi newid pensaernïaeth microfasgwlaidd ar lefel strwythurol mewn ymgais olaf i gyrraedd homeostasis hemodynamig [1,2,8]. Yn olaf, gall camweithrediad endothelaidd arwain at ffenomen o'r enw 'no-reflow, lle na ellir adfer y darlifiad, gan arwain yn y pen draw at ddifrod celloedd epithelial tiwbaidd sy'n arwain at anaf acíwt i'r arennau (AKI) [24].

Mae'n bwysig iawn tynnu sylw at y ffaith bod camweithrediad endothelaidd nid yn unig yn gysylltiedig â chlefyd yr arennau ond hefyd yn gyrru datblygiad clefyd yn weithredol [24]. Mae camweithio microfasgwlaidd arennol yn cael ei adlewyrchu gan gamweithrediad endothelaidd a achosir gan anafiad celloedd, sy'n tarfu ar ryngweithio agos pericytes â'r haen endothelaidd ac yn rhwystro cyfathrebu cellog.

3.2. Ymwneud Pericyte â Chamweithrediad Arennol

Nodwedd ganolog o CKD yw colli cynyddol y rhwydwaith capilari peritubwlaidd, proses y cyfeirir ati fel rarefaction [27]. Mae ffibrosis tubulointerstitial, yn ogystal ag epitheliwm tiwbaidd wedi'i ddifrodi, yn cael ei ragflaenu gan y prinhad capilari hwn yn yr aren [27], tra bod cydberthynas uniongyrchol rhwng y rarefaction microfasgwlaidd hwn â difrifoldeb ffibrosis [28,29]. Ar ben hynny, canfuwyd bod maint y ffacsiwn prin yn rhagfynegi graddau'r difrod rhyng-ranogol yn ogystal â newidiadau yn y gyfradd hidlo glomerwlaidd mewn cleifion CKD [28]. Mae'r canfyddiadau hyn yn awgrymu rôl gynnar sy'n cyfyngu ar gyfradd ar gyfer ansefydlogi/colli microfasgwlaidd yn natblygiad CKD a phathogenesis ffibrosis [30]. Gall actifadu celloedd endothelaidd cronig gan ffactorau risg cardiofasgwlaidd achosi colli pericytes sy'n chwarae rhan hanfodol yn y broses o sefydlogi ac amlhau capilarïau trwy ryngweithio â chelloedd endothelaidd [31]. Yn wir, mae tystiolaeth gronnus yn nodi pwysigrwydd pericytes a'u rhan mewn iechyd microfasgwlaidd arennol [17].

Mae pericytes yn gelloedd murlun perifasgwlaidd gyda phrosesau hirgul yn gorchuddio'r endotheliwm sydd wedi'u mewnosod o fewn pilen islawr capilarïau [32]. Maent yn gelloedd o darddiad mesenchymal ac yn codi o'r Forkhead blwch D1 (FoxD1) ynghyd â phoblogaeth epil stromal, sydd hefyd yn arwain at gelloedd murlun eraill fasgwleiddiad yr arennau gan gynnwys SMCs, ffibroblastau preswyl, celloedd renin, a chelloedd mesangial [33], tra bod holl gelloedd endothelaidd y fasgwleiddiad arennau yn tarddu o lewcemia bôn-gelloedd (SCL) ynghyd ag epilyddion [34]. Mae pericytes yn wahanol i ffibroblastau preswyl (perifasgwlaidd) gan eu bod wedi'u hymgorffori yn y bilen islawr fasgwlaidd, ond nid yw'r rhan fwyaf o astudiaethau yn yr aren yn gwahaniaethu rhwng pericytes a ffibroblastau perifasgwlaidd [31,35], yn debygol oherwydd diffyg marcwyr penodol. Mae marcwyr a ddefnyddir yn gyffredin i adnabod pericytes yn cynnwys derbynnydd ffactor twf sy'n deillio o blatennau- (PDGFR ), proteoglycan chondroitin sylffad NG2, actin cyhyrau llyfn (SMA), clwstwr o wahaniaethu 73 (CD73), a PDGFR , ond mae'r marcwyr hyn yn nodi gwahanol ( gorgyffwrdd) is-setiau o bericytes wedi'u lleoli i wahanol ranbarthau anatomegol, gan adlewyrchu heterogenedd y boblogaeth gell hon [17] ac yn fwyaf tebygol hefyd heterogeneity swyddogaethol. Mae Pericytau yn rheoleiddio datblygiad fasgwlaidd, sefydlogi, aeddfedu ac ailfodelu yn dynn [11] ac yn rheoli llif y gwaed trwy vasoconstriction. Mae pericytes yn cael eu rheoleiddio'n swyddogaethol gan ffactorau vasoconstrictive megis angiotensin II ac adenosine triphosphate (ATP), yn ogystal â chan ffactorau vasodilatory megis NO a prostaglandinau [17]. Mae aeddfedu pibellau gwaed yn dibynnu ar recriwtio celloedd perifasgwlaidd i sefydlogi'r fasgwlaidd a rheoli pwysedd gwaed [12].

Yn yr aren, mae pericytes yn lapio rhannau distal rhydweliynnau afferol y glomeruli cortigol ac maent yn bresennol yn bennaf yn y capilarïau peritubwl ac yn y vasa recta [13,19]. Yn ogystal, mae celloedd mesangial yn is-set (arbenigol) o bericytes arennol sy'n bwysig wrth gynnal cefnogaeth strwythurol ar gyfer capilarïau glomerwlaidd a rheoleiddio hemodynameg glomerwlaidd. Ar ben hynny, mae pericytes juxtaglomerwlaidd contractile sydd wedi'u lleoli yn yr arterioles yn cyfryngu pwysedd gwaed glomerwlaidd lleol ac yn effeithio ar bwysedd gwaed systemig trwy secretiad renin [19]. Yn ddiddorol, mae celloedd rhagflaenydd renin sy'n deillio o'r adran stromal wedi'u cysylltu'n ofodol â datblygiad pibellau gwaed tra dangoswyd bod ffurfio cangen rhydwelïol yn cael ei ragflaenu gan ymddangosiad celloedd sy'n mynegi renin ar bwynt canghennog [33,36]. Ar ben hynny, gan ddefnyddio gohebydd renin trawsgenig zebrafish, dangoswyd bod celloedd sy'n mynegi renin yn rhagflaenu ysgewyll angiogenig [37]. Yn aren y llygoden oedolion, mae celloedd o darddiad renin hefyd yn cael eu harsylwi mewn lleoliadau perifasgwlaidd ac yn cyd-staenio â marcwyr pericyte (PDGFR / NG2) [38], gan awgrymu rôl bwysig o bosibl i'r is-set hon mewn cynnal a chadw fasgwlaidd.

3.3. Rhyngweithiadau Signalau Cell-Pericyte Endothelaidd

Mae pericytes yn rhyngweithio â'r celloedd endothelaidd trwy lu o ryngweithiadau cilyddol sy'n rheoleiddio'r llwybrau signalau sydd eu hangen ar gyfer sefydlogi ac egino angiogenig. Mae pericyte yn arwyddo i'r endotheliwm trwy ffactorau wedi'u secretu fel VEGF, PDGF, trawsnewid ffactor twf- (TGF- ), ac angiopoietin-1 (Ang-1), yn ogystal â thrwy groestalk endothelaidd-pericyt uniongyrchol [39 ]. Yn yr un modd, mae'r endotheliwm yn arwyddo i gelloedd stromal o amgylch gan ddefnyddio ffactorau fel angiopoietin-2 (Ang-2) ​​a PDGF. Mae Ang yn ymyrryd yn negyddol â signalau Ang-1-mediated Tie-2, sy'n arwain at amharu ar ryngweithiad celloedd pericyte-endothelial ac ansefydlogi llestr wedi hynny ac ailfodelu microfasgwlaidd annormal [40,41]. Mae astudiaethau llygoden hefyd yn tystio i bwysigrwydd hanfodol y rhyngweithio rhwng celloedd stromal perifasgwlaidd a chelloedd endothelaidd wrth gynnal a chadw'r rhwydwaith capilarïau, sy'n dangos, pan fydd buddsoddiad pericytes yn cael ei rwystro, bod y rhwydwaith capilari yn ansefydlogi a bod prin yn digwydd [42]. Er enghraifft, mae hyperglycemia yn cynyddu mynegiant Ang-2 endothelaidd gan achosi i gelloedd stromal perifasgwlaidd ymfudo i ffwrdd o gapilarïau [43]. Dangosodd astudiaethau diweddar o'n labordy fod anafiadau isgemia-atgyfnerthu mewn llygod mawr [44] ac arennau rhoddwyr dynol [45] yn arwain at godiad cyflym yng nghydbwysedd Ang-2/Ang-1, sy'n gysylltiedig gyda cholli cywirdeb microfasgwlaidd. Ar ben hynny, mewn cleifion â diabetes, gwelwyd gwrthdroi iechyd capilari a gostyngiad yn y gymhareb Ang-2/Ang-1 a thrombomodulin hydawdd (marciwr anaf celloedd endothelaidd) o fewn 12 mis ar ôl trawsblannu arennau-pancreas ar yr un pryd [46 ]. Wrth ymyl y llwybrau angiopoietin / Tie2 [47], mae crosstalk endothelaidd-pericyte yn cael ei reoleiddio gan signalau superfamily TGF [48], VEGF [49], a llwybrau signalau sphingosine-1-ffosffad (S1P) [50].

3.4. Pericytau fel Rhagflaenydd Myofifibroblasts

Mae modelau olrhain llinach genetig Murine wedi dangos mai pericytes (a chelloedd perifasgwlaidd eraill) yw prif ffynhonnell myofifibroblastau positif -SMA mewn modelau llygoden o ffibrosis arennol [51,52]. Mewn gwirionedd, nododd astudiaeth gain ddiweddar a oedd yn cynnwys dilyniannu RNA un gell dri phrif ffynhonnell myofibroblastau mewn arennau dynol: (i) NOTCH3 plws RGS5 ynghyd â PDGFR - pericytes; (ii) MEG3 ynghyd â PDGFR ynghyd â ffibroblastau; a (iii) COLEC11 plws CXCL12 ynghyd â ffibroblastau [53]. Yn ystod gwahaniaethu pericyte-i-myofibroblast, sylwyd ar newidiadau cylchred celloedd sy'n gyson â gwahaniaethu ac ehangu, ac roedd llwybrau cyfoethog yn cynnwys signalau WNT canonaidd a phrotein actifadu-1 (AP-1), yn ogystal ag actifadu trawsgrifio ffactor 2 (ATF2), PDGFR, integrin, rhyngweithio derbynyddion matrics allgellog (ECM), a llwybrau signalau TGF [53]. Dangoswyd yn flaenorol bod ffracsiwn bach o boblogaeth celloedd PDGFR plws yn cynnwys gli1 perifasgwlaidd ynghyd ag epilyddion sy'n nodi poblogaeth celloedd perifasgwlaidd tebyg i MSC y dangoswyd ei fod hefyd yn gyfranwyr allweddol at ffibrosis organ a achosir gan anaf trwy gynhyrchu myofifibroblasts [54] . Ar ben hynny, dangoswyd bod homolog oncogene sy'n gysylltiedig â glioma 1 (Gli1) ynghyd â cholled pericyte yn achosi anafiad capilari prin ac anaf tiwbaidd agos [55]. Mae'n werth nodi, gan fod pericytes wedi'u cysylltu'n flaenorol a'u bod yn perthyn yn agos i MSCs [56], mae hyn hefyd yn codi'r cwestiwn a allai is-set o bericytes fod yn MSCs, ac felly'n cyfrannu at adfywiad yr arennau. Mewn gwirionedd, mae llawer o astudiaethau wedi canfod rôl debyg i epilwr amlalluog ar gyfer pericytes mewn meinweoedd amrywiol [35,57,58].

Gyda'i gilydd, mae ffacsiwn microfasgwlaidd yn cyfrannu'n uniongyrchol at y gronfa o myofibroblastau sy'n gyfrifol am gynhyrchu gormod o broteinau ECM sef prif gyfansoddyn meinwe craith mewn ffibrosis. Yn ogystal, mae trawsnewid pericyte-i-myofibroblast yn achosi datgysylltu pericytes o'r wal fasgwlaidd, gan arwain at gapilarïau ansefydlog a fyddai ynddo'i hun yn achosi ffacsiwn prin [52]. Serch hynny, mae prif effaith ffacsiwn prin ar bathogenesis methiant arennol cronig yn cael ei achosi gan golled mewn darlifiad arennol sy'n gwaethygu isgemia medwlaidd ymhellach ac yn gyrru datblygiad ffibrosis rhyng-raniadol, sy'n cael ei gyfryngu gan fynegiant estynedig TGF- a ffactor twf meinwe gyswllt. (CTGF) [59]. Felly, mae'n bosibl iawn y bydd ffacsiwn microfasgwlaidd yn gweithredu fel switsh pro-ffibrotic sy'n cyfyngu ar gyfradd yn pathogenesis methiant arennol cronig. Yn wir, gallai therapïau sy'n targedu rhyngweithio cell-pericyt endothelaidd, ee, wedi'u hanelu at signalau derbynnydd PDGFR- neu VEGF, atal trawsnewid myofibroblast a chyfyngu ar ddatblygiad ffibrosis [60-62], gan ddangos rôl allweddol y rhwydwaith capilari mewn anafiadau i'r arennau ac fel targed therapiwtig posibl.

Yn seiliedig ar yr uchod, mae'n amlwg bod pensaernïaeth fasgwlaidd gymhleth yr aren yn cynhyrchu adrannau perifasgwlaidd lluosog, pob un â'i swyddogaethau a'i ofynion penodol ei hun. Felly, mae angen ymchwil yn y dyfodol sy'n canolbwyntio ar ddosbarthiad manwl o bericytes arennol trwy nodweddu is-boblogaethau yn seiliedig ar eu lleoliad, morffoleg celloedd, a swyddogaeth. O'r herwydd, gallai dulliau delweddu newydd sy'n anelu at gael mynediad at bibellau gwaed bach yn anfewnwthiol ddarparu'r wybodaeth hanfodol hon. Fel yr enghreifftir ym maes niwrobioleg [12], gallai categoreiddio gwahanol isdeipiau o bericytes ddarparu llwybrau newydd ar gyfer datblygu therapi wedi'i dargedu ar gyfer camweithio fasgwlaidd.

4. Modaleddau Delweddu Fasgwlaidd

Mae gwahanol glefydau arennau yn adlewyrchu patrwm nodweddiadol o newidiadau uwch-strwythurol. O ganlyniad i ddatblygiadau technolegol ym maes delweddu biofeddygol, datgelwyd mecanweithiau ffisiolegol a phathoffisiolegol arennol dros yr ychydig ddegawdau diwethaf [63]. Drwy ganolbwyntio ar newidiadau anatomegol a morffolegol mewn pensaernïaeth meinwe, ehangodd ein gwybodaeth am glefyd arennol yn gynyddol, gan wella diagnosteg a darparu cyfleoedd triniaeth arloesol. Fodd bynnag, anwybyddwyd newid deinamig pibellau gwaed yn bennaf oherwydd yr her i ymchwilio i ymddygiad fasgwlaidd mewn arbrofion cyfres amser. O ganlyniad, mae angen meddygol heb ei ddiwallu i ddatblygu technegau delweddu anfewnwthiol i fonitro hemodynameg microcirculation arennol [16].

Byddai hefyd yn ddiddorol cysylltu canlyniadau delweddu â biofarcwyr (newydd) yn y maes neffroleg fasgwlaidd. Er enghraifft, rydym yn dangos noncoding RNAS i gael eu cysylltu'n dynn ag anaf fasgwlaidd [64,65]. Gall cyfuno'r mesuriadau hyn esgor ar gysylltiadau newydd (achosol) a phosibiliadau newydd ar gyfer diagnosis. Ar ben hynny, pan fydd dulliau delweddu newydd yn cael eu cyplysu â datblygiad diweddar technegau seiliedig ar gell sengl megis dilyniannu RNA un-gell a thrawsgrifomeg ofodol [53,66,67], gallai hyn ganiatáu dadansoddiad manwl digynsail o'r cyfansoddiad a'r ddeinameg. o'r fasgwleiddiad arennol. Mae'r adrannau canlynol yn crynhoi'r dulliau delweddu ex vivo ac in vivo sydd eisoes ar gael ar gyfer ymchwilio i agweddau morffolegol a swyddogaethol y microfasgwlaidd arennol.

4.1. Cyn Vivo

Mae llawer o'n gwybodaeth am ficro-fasgwleiddiad arennol yn deillio o ddadansoddiad ex vivo cynhwysfawr o fiopsïau meinwe. Yn unol â hynny, mae therapi seiliedig ar gelloedd yn aml yn cael ei werthuso trwy dorri meinwe a staenio. Er bod llawer o astudiaethau'n ymchwilio i effaith therapiwtig MSCs ar y fasgwleiddiad arennol [68], ychydig o grwpiau ymchwil sydd wedi manteisio ar ddulliau delweddu soffistigedig, megis tomograffeg microgyfrifiadurol (micro-CT), i asesu therapi MSC trwy archwilio'r bensaernïaeth 3D. o'r fasgwleiddiad arennol [69–74].

4.1.1. Tomograffeg ficro-gyfrifiadurol (Micro-CT)

Mae cyflwyno tomograffeg microgyfrifiadurol (micro-CT) gan Flannery et al. [75] yn 1987 wedi agor llwybrau newydd ar gyfer astudio fasgwleiddiad cyflawn cnofilod er mwyn ennill gwybodaeth am fecanweithiau afiechyd gyda datrysiad gofodol uchel. Galluogodd y dull ex vivo hwn ddelweddu pensaernïaeth microfasgwlaidd arennol a meintioli rhif glomerwlaidd, dosbarthiad gofodol, a chyfaint, y gellir ei ddefnyddio fel dangosydd ar gyfer cyflwr pathoffisiolegol yr organ gyfan [76]. Roedd y cydraniad mewn un maes golygfa 3D gyda 10, 243 voxels yn caniatáu delweddu rhydwelïau afferol ac effro, yn ogystal â chapilarïau glomerwlaidd arennau cnofilod. Mewn llygod mawr, defnyddiwyd maint voxel ailgyfansoddedig o 21 µm [77] ac mewn moch, astudiwyd y fasgwleiddiad arennol gyda maint voxel o 40 µm a maes golygfa sgan o 1.2 mm [78]. Roedd datblygiadau ym maes micro-CT yn gyfle i ddelweddu pibellau gwaed neffron y llygoden fawr gyda chydraniad voxel o 1 µm o fewn maes golwg sgan o 2 mm [79].

Yn seiliedig ar y dechneg meintioli a ddatblygwyd gan Hillman et al. [80] gan ddefnyddio CT confensiynol, pensaernïaeth llestr a chyfaint fasgwlaidd o fewn adrannau meinwe arennol gwahanol eu pennu yn unol ag astudiaethau tebyg, a werthusodd llestri arennol yn seiliedig ar adrannau meinwe histolegol [77]. Yn ddiddorol, trwy gymhwyso dulliau delweddu fel micro-CT, codwyd pwysigrwydd ymchwilio i gapilarïau peritubwl a'u hymwneud â chyflyrau patholegol yn ogystal â'r ffordd gonfensiynol o feddwl am rôl y rhwydwaith capilarïau glomerwlaidd.

Gellir delweddu a chanfod newidiadau strwythurol cynnar y microfasgwlaidd gan ficro-CT, ac felly nid yw'n syndod bod nifer o fecanweithiau moleciwlaidd ar y lefel fasgwlaidd sy'n gysylltiedig â chlefyd yr arennau wedi'u nodi gan ficro-CT. Mewn amrywiol fodelau clefyd arennol, megis mewn clefyd yr arennau polycystig (PKD), disgrifiwyd cydberthynas rhwng patholeg a microfasgwlaidd gostyngol fel y'i pennwyd gan ficro-CT gyda datrysiad o faint voxel 17 µm [81]. Ar ben hynny, gwelwyd cynnydd mewn dwysedd microfasgwlaidd cortigol mewn hypercholesterolemia fel arwydd cynnar o ddifrod morffolegol arennol cynyddol [78]. Mewn llygod mawr â ligation dwythell bustl cronig, canfuwyd hypoperfusion cortical gan ficro-CT, a allai esbonio'r aflonyddwch ar gadw halen a dŵr gyda dilyniant clefyd pellach [82]. Yn ogystal, mewn arennau stenotic, roedd y straen ocsideiddiol cynyddol yn gysylltiedig ag ailfodelu microfasgwlaidd arennol, a chynigiwyd posibiliadau triniaeth trwy ymyrraeth gwrthocsidiol cronig [83].

Mantais fawr o ficro-CT yw y gellir diffinio'r echelinol, yn ogystal â geometreg radial systemau fasgwlaidd [84]. Yn ogystal â delweddu'r bensaernïaeth fasgwlaidd arennol mewn 3D, gellir gwerthfawrogi dwysedd gofodol micro-lestri [78,83], gellir pennu dwysedd a maint y llong gyda diamedr hyd at 80 µm mewn gwahanol adrannau arennol anatomegol [77,78,83,85 ], a gellir arsylwi arteithiolrwydd y llongau [83]. Ar ben hynny, gellid gwahaniaethu a mesur cyfaint capilari fasgwlaidd glomeruli, yn ogystal â'r capilarïau peritubwl o fewn y cortecs [82].

Mae protocol meintioli safonol wedi'i ddefnyddio'n helaeth i ymchwilio i newid microfasgwlaidd o fewn y adrannau cortigol a medwlari wedi'u diffinio'n dda ar lefel strwythurol er mwyn pennu'r dwysedd a'r diamedr fasgwlaidd [77,82]. Mae Ngo et al. [84] perfformio astudiaeth gymharu o ficro-CT a microsgopeg golau a daeth i'r casgliad bod meintioli'r geometreg fasgwlaidd arennol a gaffaelwyd gan ficro-CT yn dechneg ymarferol a chywir. Yr unig werth ychwanegol o ddelweddu microsgopig ysgafn o'i gymharu â micro-CT yw ei fod yn caniatáu gwahaniaethu rhwng rhydwelïau a gwythiennau trwy'r posibilrwydd o ddelweddu'r wal fasgwlaidd. Fodd bynnag, trwy gymhwyso micro-CT, gellid delweddu rhydwelïau o 100 a 60 µm mewn diamedr o lygod mawr a chwningod, yn y drefn honno, mewn 3D. Fodd bynnag, ni all micro-CT adnabod pibellau gwaed bach llai na 10 µm yn iawn, gan annog yr angen i ddychwelyd yn ôl i imiwn-histocemeg er mwyn dal hyd yn oed y capilarïau arennol lleiaf [85].

4.1.2. Microsgopeg Fflworoleuedd Taflen Ysgafn (LSFM)

Gyda chyflwyniad microsgopeg fflworoleuedd dalen ysgafn (LSFM), gellir cyflawni delweddu cydraniad uchel o gyfeintiau mawr y dyddiau hyn mewn cyfnod rhesymol o amser [86,87]. Trwy argaeledd LSFM, symudwyd y diddordeb o dechnegau histolegol confensiynol a gymhwysir fel mater o drefn sy'n cynnwys torri'r meinwe, ac yna staenio'r microfasgwlaidd, tuag at ddelweddu'r meinwe yn ei chyfanrwydd. Mae dadansoddiad cyfeintiol yn ffafriol oherwydd nid yn unig y caiff rhan ddethol o'r meinwe ei harchwilio, ond hefyd mae cymeriad deinamig pensaernïaeth llestr ac ymddygiad yn cael ei gadw mewn golwg 3D.

Er mwyn cadw'r wybodaeth 3D, gwneir sbesimen biolegol yn dryloyw trwy wahanol brotocolau clirio meinwe optegol (OTC) i leihau gwasgariad golau ac amsugno golau ar gyfer staenio fflwroleuol FL pellach [87]. Yn ystod y blynyddoedd diwethaf, mae dulliau OTC wedi ennill poblogrwydd gan fod delweddu 3D yn rhoi'r cyfle i astudio organau cyfan yn bosibl oherwydd datblygiadau modern LSFM. Gellir caffael organ gyfan neu hyd yn oed anifail cyfan gyda datrysiad ar y lefel gellog mewn 3D o fewn munudau [88]. Gyda phenderfyniad tebyg i ficrosgopeg fflworoleuedd FL confocal, fodd bynnag, mae gan LSFM gymhareb signal-i-sŵn maint dau orchymyn yn well, gan leihau cannu fflworoffor FL a ffototocsig yn ddramatig, gan alluogi prosesu delweddu ar raddfa fawr sy'n ofynnol ar gyfer OTC [89]. Manteision ychwanegol yw bod y nifer a gofnodwyd o fframiau a chyflymder recordio yn fwy, tra bod hyd cyffredinol y ddelwedd yn llawer byrrach.

Byth ers cyflwyno LSFM, cafodd nifer o brotocolau OTC eu gwella a'u mireinio ar gyfer gwahanol sbesimenau meinwe ac organau sy'n deillio o sawl rhywogaeth. Yn y blynyddoedd diwethaf, mae'r clirio diwenwyn sy'n seiliedig ar doddydd gan ethyl cinnamate (ECi) yn cael ei gymhwyso'n eang i glirio arennau murine [88,90,91]. Mae’r protocol hwn yn cymryd llai o amser, er enghraifft protocolau arloesol CLARITY (delweddu anhyblyg acrylamid-hybrid wedi’i gyfnewid â lipid clir), CUBIC (coctels delweddu ymennydd/corff clir, dirwystr a dadansoddiad cyfrifiannol), a/neu DISCO (delweddu tri dimensiwn o organau wedi'u clirio â thoddydd), ond eto mae'n cynnig cliriad cymharol resymol o'r aren gyda swm isel o awtofflworoleuedd ar ôl. Cyflawnwyd gwaith rhyfeddol gan Ertürk a chydweithwyr [92], a lwyddodd i glirio aren ddynol gyfan trwy ddull athreiddo meinwe newydd o'r enw SHANEL (clirio a labelu organau dynol bach-micelle-cyfryngol). Penderfynwyd bod gan y parth cortecs ddimensiynau o tua 2742 ± 665 mm (cymedr ± SD) a oedd yn cynnwys capilarïau glomerwlaidd â diamedr o 221 ± 37 mm, ac roedd gan rydwelïau afferent ddiamedr o 71 ± 28 mm. Ar ben hynny, mae fframwaith dysgu dwfn hynod soffistigedig ar gyfer meintioli'r fasgwleiddiad niwronaidd ar ôl OTC, o'r enw VesSAP (piblinell segmentu a dadansoddi llestri), wedi'i ddatblygu ym maes niwrowyddoniaeth [93].

Er gwaethaf y ffaith bod llawer o gynnydd mawr wedi'i gyflawni ym maes OTC yn ystod y blynyddoedd diwethaf, mae rhai anfanteision yn parhau i fodoli gan nad yw mynegiant fflworoffores FL mewndarddol yn cael ei gadw'n foddhaol yn bennaf gan gyfyngu ar y defnydd o anifeiliaid trawsenynnol. Fodd bynnag, pryder mawr yw bod maint morffolegol y meinwe ac o ganlyniad y fasgwlaidd yn cael ei newid gan y toddyddion llym sydd eu hangen ar gyfer OTC. Yn ogystal, mae'r swm aruthrol o ddata a gynhyrchir gan LSFM yn parhau i fod yn her, nid yn unig ar gyfer storio a thrin data yn gywir ond hefyd ar gyfer dadansoddiad meintiol [87].

Yn gryno, un fantais bwysig o gymhwyso technegau fel micro-CT neu SFM yw y gellir dal dosbarthiad llestr gofodol a nodi nodweddiad prin strwythurol y rhwydwaith fasgwlaidd gyda datrysiad addas i ddelwedd bron pob un o'r strwythurau capilari arennol. Fodd bynnag, mae angen sefydlogi'r ddwy dechneg ac felly dim ond ex vivo y gellir eu perfformio. Er mwyn monitro newidiadau morffolegol a swyddogaethol i'r microfasgwlaidd arennol, mae strategaethau delweddu amser in vivo yn ddymunol.

4.2. Yn Vivo

Byddai cymhwyso dulliau delweddu in vivo yn cynnig cyfle i werthuso therapi seiliedig ar gelloedd mewn amser real a dilysu effeithiau therapiwtig posibl ar y lefel fasgwlaidd. O ganlyniad, mae datblygiadau ym maes delweddu biofeddygol in vivo yn pwyso am astudio effeithiau MSC ar fasgwleiddiad yr arennau. Dim ond llond llaw o astudiaethau sydd wedi cymhwyso delweddu in vivo i archwilio gweithredu MSC, gan ddefnyddio microsgopeg amlffoton (MPM) [94], CT [95,96], a delweddu cyseiniant magnetig (MRI) [95-97].

4.2.1. Microsgopeg Amlffoton (MPM)

Mae microsgopeg amlffoton (MPM) yn dibynnu ar amsugno dau neu fwy o ffotonau ar yr un pryd yn yr awyren ffocal yn unig, a ddaeth ar gael ym 1995 [98]. Gellir delweddu prosesau deinamig in vivo ar y lefel gellog, ac, ar wahân i astudio llif gwaed fasgwlaidd arennol [63], mae MPM yn cynnig y cyfle i fonitro gwahanol segmentau microfasgwlaidd arennol mewn amser real. Mae'r cydraniad uchel yn caniatáu delweddu'r rhydwelïau afferol ac effro a chapilarïau glomerwlaidd. Er ei bod yn dechnegol bosibl cael mynediad at y microcirculation medullary, serch hynny mae'n parhau i fod yn her oherwydd dyfnder y treiddiad [98]. Fodd bynnag, mae'n ymarferol delweddu glomerwlws cyfan gyda diamedr bras o 100 µm a chael mynediad i brosesau deinamig ar y lefel gellog.

Yn bwysig, gellir delweddu a mesur gollyngiadau microfasgwlaidd in vivo trwy afradu glas Evans mewn arennau ffibrotig gan MPM [99]. Mesurwyd nifer y capilarïau tyllog a phennwyd y diamedr yn llawer is na 10 µm. Yn ddiweddar, cymhwysodd ein grŵp ymchwil MPM i ddarparu tystiolaeth in vivo bod organoidau arennau sy'n deillio o fôn-gelloedd lluosog dynol (hPSC) yn ffurfio cysylltiad swyddogaethol â'r fasgwleiddiad arennol a oedd yn bodoli eisoes mewn llygod ar ôl trawsblaniad isgapsiwlaidd arennol [100,101].

Manteision MPM yw absenoldeb fflworoleuedd FL y tu allan i ffocws a ffotobleaching cyfyngedig yn y rhanbarth ffocws [98]. Fodd bynnag, un o'r anfanteision yw'r dyfnder delweddu cyfyngedig sy'n gofyn am ddefnyddio ffenestr delweddu abdomenol i gael mynediad i fasgwleiddiad arennol in vivo [102,103]. Mae'r ffenestr abdomenol hon yn caniatáu delweddu in vivo am sawl wythnos hyd at fis; fodd bynnag, mae gosod ffenestr ddelweddu o'r fath yn gofyn am lawdriniaeth ymledol ac mae'n gysylltiedig â siawns o lid. Ar ben hynny, weithiau mae ffenestri delweddu yn cael eu colli a gall necrosis meinwe ddigwydd [102]. Yn amlwg, nid yw'r dull delweddu hwn yn drosglwyddadwy i ymarfer clinigol.

Mae dewis arall diddorol i fonitro llif gwaed capilari yn anfewnwthiol wrth erchwyn y gwely yn gyraeddadwy ers cyflwyno microsgopeg hanfodol a ddelir â llaw (HVM) i ymarfer clinigol [104]. Er bod y dull delweddu hwn wedi'i seilio ar dechnoleg hollol wahanol, hy, microsgopau fideo maes tywyll a llif ochr, mae'n cynnig asesiad amser real o gapilarïau arwynebol sydd wedi'u lleoli. Mae algorithmau newydd a weithredir yn glinigol, a elwir yn becynnau meddalwedd MicroTools, yn galluogi dadansoddiad delweddu micro-fasgwlaidd awtomataidd o ddwysedd cychod cyfan a thryloyw ar gyfer cyrchu angiogenesis, ymledu / cyfyngu llongau, a chydbwysedd hylif, yn ogystal â chynhwysedd cyflenwi ocsigen yn seiliedig ar hematocrit capilari a chyflymder erythrocytes [105 ]. Fodd bynnag, i astudio'r microfasgwleiddiad arennol, nid yw'r dulliau hynny'n addas oherwydd eu dyfnder treiddiad cyfyngedig.

4.2.2. Tomograffeg Gyfrifiadurol (CT)

Mae galw mawr am ddulliau delweddu anfewnwthiol sy'n gallu monitro a meintioli newidiadau morffolegol a swyddogaethol i'r micro-fasgwlaidd arennol er mwyn pennu rôl y microfasgwlaidd wrth i'r clefyd symud ymlaen i CKD. Er bod perthynas achosol rhwng ffaniad prin capilari a dilyniant ffibrosis arennol wedi'i gydnabod ers blynyddoedd lawer, mae Ehling et al. [3] oedd y cyntaf i berfformio dadansoddiadau ansoddol a meintiol anfewnwthiol o newidiadau fasgwlaidd anatomegol a swyddogaethol yn ystod dilyniant CKD. Gwelwyd gostyngiad cynyddol yng nghyfaint gwaed arennol gan ficro-CT wedi'i wella mewn cyferbyniad in vivo mewn tri model murine gyda ffibrosis yr arennau cynyddol, hy, anaf isgemia-atlifiad (IRI), rhwystr wreteral unochrog, a llygod Alport. Yn ogystal â newidiadau swyddogaethol i'r pibellau micro, roedd colled fasgwlaidd peritubwl yn cydberthyn â ffurfio meinwe ffibrotig ym mhob un o'r tri model llygoden CKD. Fodd bynnag, er mwyn cael gwybodaeth am bwyntiau cangen, diamedr llestr, a artaith, roedd angen micro-CT ex vivo, sy'n nodi'r angen am dechnolegau delweddu biofeddygol sy'n dod i'r amlwg sy'n darparu mynediad i ficro-lestri in vivo gyda chydraniad cellog agos.

Mantais fawr CT yw bod delweddu'r fasgwleiddiad arennol yn cael ei gaffael o fewn munudau gyda datrysiad rhesymol, gan ddarparu gwybodaeth 3D am y sefydliad fasgwlaidd. Gan ddefnyddio cyfryngau cyferbyniad sy'n seiliedig ar ïodin, caiff y cyferbyniad ei wella a cheir darlun manylach fyth o'r microfasgwlaidd. Yn ddiweddar, mireiniwyd asesiad ansoddol a meintiol gan ficro-CT o arennau murine mewn amodau ffisiolegol a phatholegol trwy ddarlifo ag asid ffosffotungstic (PTA) i wella'r cyferbyniad o fewn y pibellau gwaed [106]. Er na ellid gwahaniaethu'n glir rhwng y rhydwelïau a'r gwythiennau'n cyfyngu'n glir, roedd y cydraniad gyda maint voxel o 40 µm in vivo a maint voxel o 12.5 µm ex vivo yn dal y sefydliad hyd at lefel y pibellau gwaed arcuate.

Anfantais fawr arall o ddefnyddio CT i fonitro clefyd arennol, fodd bynnag, yw'r angen i ddefnyddio cyfryngau cyferbyniad radiograffeg ïodin. Mae'n hysbys bod yr asiantau cyferbyniad hyn yn achosi nephrotoxicity, sy'n wrtharwydd ar gyfer defnydd clinigol mewn cleifion â nam arennol sy'n bodoli eisoes [107-109]. Mae nam acíwt ar yr aren oherwydd y cyfrwng cyferbyniad a weinyddir yn newid hemodynameg arennol ac yn achosi hypocsia medwlaidd sy'n arbennig o annymunol wrth ymchwilio i gerwindeb microfasgwlaidd arennol. Yn yr un modd, mae asiantau cyferbyniad sy'n seiliedig ar gadolinium a ddefnyddir yn helaeth mewn MRI yn cael eu dileu gan yr aren ac mae'n ymddangos eu bod yn achosi nam arennol [110].

4.2.3. Delweddu Cyseiniant Magnetig (MRI)

Cyflwynwyd MRI mewn ymarfer clinigol yn yr 1980au a daeth yn syth yn un o'r technegau delweddu a ddefnyddir fwyaf [111]. Mae MRI yn ddull delweddu anfewnwthiol a di-ïoneiddio sy'n cymhwyso maes magnetig cryf a thrwy ddefnyddio addasiad asiant cyferbyniad T1 a T2, gellir canfod priodweddau ymlacio gwaed. At hynny, mae angiograffeg cyseiniant magnetig (MRA) yn delweddu pensaernïaeth fasgwlaidd anifeiliaid bach trwy ddefnyddio cyfrwng cyferbyniad sy'n seiliedig ar gadoliniwm. Fodd bynnag, un o anfanteision mawr MRA yw'r defnydd anodd o'r cyfrwng cyferbyniad gofynnol. Yn ffodus, gellir pennu darlifiad arennol gyda a heb yr angen am asiantau cyferbyniad sy'n cynnig buddion a chyfyngiadau [112].

Heb ddefnyddio asiant cyferbyniad, mae labelu sbin yn manteisio ar ddŵr mewndarddol fel olrheiniwr tryledadwy sydd ond yn ei gwneud hi'n bosibl mesur y darlifiad o fewn y cortecs arennol gan fod yr amser cludo medullary yn rhy hir i'w ddal. Ar ben hynny, i bennu'r llif gwaed arennol, mesurir sifftiau cam o sbinau ar hyd un cyfeiriad, sy'n awgrymu'r angen am awyren delweddu perpendicwlar tuag at y rhydwelïau o ddiddordeb ar gyfer cyflawni mesuriad cywir [112]. Felly, nid yw'n syndod bod y dechneg hon yn her fawr o ran delweddu rhydwelïau arennol, heb sôn am y capilarïau cortigol bach.

Gellir pennu ymarferoldeb llestr trwy feintioli'r RBF trwy MR-darlifiad a monitro'r cyflwr ocsigeniad trwy ddelweddu cyferbyniad gwaed-ocsigen-ddibynnol (BOLD) [112,113]. Fodd bynnag, prif gyfyngiad MRI swyddogaethol yw cyflawni canlyniadau dibynadwy ac atgenhedlu mewn organau y mae symudiadau anadlol yn effeithio arnynt, sy'n cynnwys yr aren, er ei fod yn llai agored i arteffactau symud o'i gymharu â'r afu neu'r coluddyn [112]. Er gwaethaf y ffaith bod astudiaethau dichonoldeb MRI swyddogaethol 1.5 Tesla wedi darparu addewid mawr wrth fesur voxel-wise [114], dim ond mewn ardaloedd patholegol y gellid canfod annormaleddau darlifiad gan godi'r cwestiwn a fydd mân newid fasgwlaidd yn cael ei ganfod yn ddigonol. Gyda chyflwyniad sganiwr MRI gyda chryfder maes magnetig o 3.0 Tesla, roedd y gymhareb signal-i-sŵn wedi gwella'n aruthrol [115,116], fodd bynnag, mae'r datrysiad a gaffaelwyd yn parhau i fod yn broblem.

Mae'r datrysiad a ddarperir gan MRI yn dibynnu'n bennaf ar gryfder y maes magnetig a gellir ei optimeiddio ar gyfer unrhyw faes magnetig penodol trwy addasu'r dilyniannau pwls [111]. Mae'r datrysiad gofodol wedi'i gyfyngu'n bennaf gan y gymhareb signal-i-sŵn sy'n gofyn am amser caffael cyflym ac yn gyffredinol mae'n cyflawni datrysiad o 3 × 4 mm mewn maint picsel [117]. Hyd yn oed pan fydd maes magnetig uchel o 7 Tesla yn cael ei gymhwyso, y datrysiad gorau y gall rhywun ei gyflawni gyda BOLD yw tua 500 µm. Heblaw am y penderfyniad anfoddhaol a'r cyfyngiad i ddelweddu'r rhan fwyaf o brosesau deinamig, anfantais fawr arall yw bod MRI yn gysylltiedig â chostau uchel a bod angen cyfleusterau a chynnal a chadw arbennig arno.

4.2.4. Uwchsain

Cyflwynodd datblygiadau mewn uwchsain newid patrwm ar gyfer monitro anfewnwthiol o newid microfasgwlaidd arennol adeileddol a swyddogaethol ac agorwyd llwybrau newydd i archwilio cychod bach gyda system gludadwy am gost gymharol isel. Mewn model llygod mawr o isgemia acíwt a achosir gan hypoperfusion difrifol am 1 h, gwerthuswyd llif gwaed arennol mewn amser real trwy ddefnyddio uwchsain lliw a thon pwls (PW) Doppler [118]. Datgelodd delweddu lliw Doppler hefyd yr anhawster i ddelweddu rhydwelïau arcuate oherwydd eu maint cymharol fach a lleoliad y stiliwr perpendicwlar i ddal y llif rhydweli sydd ei angen ar gyfer cyfrifo cyflymder gwaed a chymhwyso cywiro ongl Doppler. Fodd bynnag, dim ond yn y rhydwelïau mewn-arennol y gellid cyfrifo'r cyflymder gwaed, hy, rhydwelïau segmentol, rhynglobar, ac arcau. Yn unol â hynny, ni ellid cael gwybodaeth am ficrogylchrediad oherwydd y cyfyngiad ar y datrysiad a ddarperir gan uwchsain confensiynol.

Gyda chyflwyniad technoleg uwchsain Doppler tra-gyflym, gellid cyflawni mwy o ddatrysiad trwy drosglwyddiad tonnau heb ffocws sy'n anfon sawl ton cydamserol ar gyfradd ffrâm uchel ar yr un pryd mewn un maes golygfa cyfan, yn hytrach na sganio llinell fesul llinell trwy gymhwyso trawsyrru trawst ffocws [119]. Y trosglwyddiad tonnau awyren hwn yw'r cysyniad sylfaenol y tu ôl i ddelweddu uwchsain Doppler cyflym iawn ac mae'n ei gwneud hi'n bosibl canfod pibellau cortigol o aren ddynol wedi'i thrawsblannu â diamedr o dan 1 mm [120]. Ar ben hynny, mae uwchsain Doppler tra-chyflym yn darparu techneg in vivo hynod ffafriol i fonitro prinhad microfasgwlaidd arennol mewn astudiaethau rhag-glinigol (Ffigur 3A). Er gwaethaf datblygiadau uwchsain Doppler tra-gyflym, mae mynediad i lefel capilari yn dal i ddibynnu ar ddefnyddio asiantau wedi'u gwella â chyferbyniad [121]. Serch hynny, nid oes unrhyw bryderon diogelwch gwerth eu crybwyll wrth ddefnyddio asiant gwrthgyferbyniol ar gyfer uwchsain Doppler, yn enwedig o'i gymharu ag asiantau cyferbyniad CT ac MRI sy'n aml yn dangos neffrowenwyndra [122]. Fodd bynnag, gellir cyflawni datrysiad anhygoel o fasgwleiddiad arennol murine in vivo (Ffigur 3B).

Fe wnaeth microsgopeg lleoleiddio uwchsain (ULM) ddatrys y cyfaddawd rhwng cydraniad gofodol a dyfnder treiddiad trwy, ar y naill law, gymhwyso delweddu uwchsain Doppler tra chyflym, ac, ar y llaw arall, defnyddio cyfryngau cyferbyniad uwchsain ar ffurf microbubbles llawn nwy. [121,123,124]. Ymhlith eraill, mae Errico et al. [123] arfaethedig ULM i ddelweddau microvessels cranial gyda diamedr o 10 µm dros holl ddyfnder yr ymennydd murine sydd tua 10 mm o drwch. Mewn cyhoeddiad diweddar, mae Demené et al. [125] gallai ddal deinameg llif gwaed serebro-fasgwlaidd ar y lefel ficrosgopig yn ddwfn yn yr ymennydd dynol trwy olrhain microbubbles wedi'u chwistrellu'n fewnwythiennol yn unigol i wella delweddu cydraniad uwch a galluogi datrysiad fasgwlaidd hyd at 25 µm. Er mwyn cael gafael ar y cyflawniad anhygoel hwn, mae'n hollbwysig nodi na allai unrhyw ddull delweddu anfewnwthiol arall ddelweddu'r microfasgwlaidd in vivo islaw graddfa milimetrig. Er mwyn cyrraedd y datrysiad gofodol rhyfeddol hwn mewn vivo, roedd dwy her fawr i'w goresgyn: yr aberration penglog ac arteffactau mudiant. Er nad yw'r defnydd o ULM ar gyfer organau'r abdomen fel yr aren yn cael ei rwystro gan aberiad strwythurau esgyrn, mae'r arteffactau mudiant yn anhawster mawr. Fodd bynnag, llwyddodd astudiaethau in vivo diweddar i ddarparu'r ymdrechion cyntaf i ddelweddu'r fasgwleiddiad arennol gan ULM [5,126,127].

Gellid gwahaniaethu rhwng adrannau fasgwlaidd gwahanol o fewn yr aren llygod mawr, a, thrwy gymhwyso microbubbles, cynyddwyd y cydraniad i ddelweddu bwndeli llestr tenau y fasa recta sydd wedi'u gwahanu gan bellter o 400 µm oddi wrth ei gilydd [5]. Yn ogystal, amcangyfrifwyd cyflymder echelinol gwaed, hy, llai na 2 mm/s, sy'n gysylltiedig â llif y micro-lestri arennol trwy olrhain swigod micro wedi'u chwistrellu â diamedr o 1 µm sy'n gallu cyrraedd diamedr llestr sy'n llai nag 20 µm. Cân et al. [127] delwedd y microlestri cortigol arennol o gwningod a gallent wahanu'n glir llestri in vivo â diamedr o 76 µm. Er y gellid cywiro symudiad anadlol, mae arteffactau symud y tu allan i'r awyren yn parhau i fod yn heriol ac yn amhosibl eu cywiro gan na ellid cael gwybodaeth ddelweddu yn llwyr [5].

Yn ddiweddar, mae dilyniant AKI-i-CKD wedi'i astudio gan uwchsain Doppler gwibgyswllt wedi'i wella mewn cyferbyniad mewn model llygoden o IRI unochrog [6]. Trwy chwistrellu microbubbles, canfuwyd 32 µm o bibellau gwaed arennol bach a mesurwyd newidiadau fasgwlaidd yn yr aren, hy, cyfaint gwaed arennol, dwysedd fasgwlaidd, a artaith. Roedd dwysedd fasgwlaidd y gyffordd cortecs a corticomedullari a gafwyd gan uwchsain yn ystod delweddu in vivo yn cytuno â meintioliad a gafwyd ar ôl gwrthimiwnedd CD31 a gydnabyddir fel safon euraidd mewn bioleg fasgwlaidd. Mae hyn yn unol ag astudiaeth arall, a berfformiwyd gan Cao et al. [128], a ddangosodd y gellir pennu difrifoldeb AKI trwy uwchsain wedi'i wella â chyferbyniad trwy chwistrelliad microbubble. Mae cydberthynas agos rhwng mesuriadau darlifiad arennol in vivo ac anaf arennol a bennir ar y lefel histolegol.

Yn unol â'r astudiaethau uwchsain hynny, mae Hueper et al. Awgrymodd [7] yn flaenorol y gallai darlifiad arennol ragweld dilyniant AKI-i-CKD a bennir gan MRI.

Mae delweddu uwchsain wedi'i wella gan ficrobubble o'r fasgwleiddiad arennol eisoes wedi'i berfformio'n llwyddiannus mewn bodau dynol i bennu darlifiad microfasgwlaidd arennol a dangosodd safbwyntiau gwych ar gyfer diagnosis [129-133]. Yn ddiddorol, mae'r dull delweddu hwn wedi'i gymhwyso wrth drawsblannu arennau i bennu statws darlifiad alografftau arennau a allai ddarparu darlleniad anfewnwthiol addas i ragweld gwrthodiad acíwt [134]. Ar wahân i ddibyniaeth gweithredwr a allai gynrychioli cyfyngiad wrth ddefnyddio uwchsain, roedd cryfder cytundeb rhyng-arsylwyr yn uchel iawn rhwng dau ddarllenydd, gan adlewyrchu dichonoldeb mawr wrth wneud cais yn y lleoliad clinigol [132]. Oherwydd y hygludedd a'r cymhwysiad sy'n arbed amser ac wedi'i addasu'n syml, mae uwchsain gyda microbubbles wedi'u gwella â chyferbyniad yn darparu persbectif gwych ar gyfer gwerthuso'r microfasgwleiddiad arennol mewn ymarfer clinigol, yn enwedig mewn cleifion ICU [135]. Mae'r dechnoleg hon felly'n cynnig addewid mawr i'w chyfieithu i ymarfer clinigol ar ôl meistroli cywiriad arteffactau mudiant abdomenol yn llwyddiannus ar gyfer olrhain microbubble cadarn gyda manwl gywirdeb uchel.

5. Casgliadau a Safbwyntiau

Mae heterogeneity trawiadol y bensaernïaeth fasgwlaidd arennol yn adlewyrchu ei hamrywiaeth swyddogaethol gymhleth a'i hadrannau, gyda chanlyniad rhesymegol bod astudio newid microfasgwlaidd a gweddiad prin yn gofyn am ddulliau delweddu soffistigedig. Bydd datblygu, cymhwyso a gwella dulliau delweddu in vivo i astudio clefydau fasgwlaidd arennol yn rhoi gwell dealltwriaeth o weithrediad therapïau celloedd fel MSC ar y lefel fasgwlaidd a gallant egluro biomarcwyr penodol y gellir eu monitro yn ystod dilyniant afiechyd.

Cyfeiriadau

1. Chade, AR Arennol strwythur fasgwlaidd a rarefaction. Compr. Physiol. 2013, 3, 817–831. [CrossRef] [PubMed]

2. Chade, AR Llestri Bach, Rôl Fawr: Microcirculation Arennol a Dilyniant Anafiadau Arennol. Gorbwysedd 2017, 69, 551–563. [CrossRef] [PubMed]

3. Ehling, J. ; Bábícková, J.; Gremse, F. ; Klinkhammer, BM; Baetke, S.; Knochel, R.; Kiessling, F.; Floege, J. ; Lammers, T. ; Boor, P. Delweddu meintiol tomograffeg micro-gyfrifiadurol o gamweithrediad fasgwlaidd mewn clefydau arennau cynyddol. J. Am. Soc. Nephrol. 2016, 27, 520–532. [CrossRef] [PubMed]

4. Chen, TK; Knicely, DH; Grams, ME Diagnosis a Rheolaeth Clefyd yr Arennau Cronig: Adolygiad. Physiol. Bihav. 2019, 322, 1294–1304. [CrossRef] [PubMed]

5. Fored, J. ; Zhang, H.; Ilovitsh, T.; Mahakian, L.; Tam, S.; Ferrara, KW Microsgopeg lleoleiddio uwchsain i ddelweddu ac asesu microfasgwlaidd mewn aren llygod mawr. Sci. Rep. 2017, 7, 13662. [CrossRef] [PubMed]

6. Chen, Q. ; Yu, J. ; Rush, BM; Stociwr, SD; Tan, RJ; Kim, K. Arennau Int. 2020, 98, 355–365. [CrossRef] [PubMed]

7. Hueper, K.; Gutberlet, M.A.; Rong, S.; Hartung, D.; Mengel, M.; Lu, X. ; Haller, H.; Wacker, F.; Meier, M.; Gueler, F. Anafiadau Acíwt i'r Arennau: Labelu Sbin Prifwythiennol i Fonitro Nam Arennol Darlifiad mewn Llygod - Cymharu â Chanlyniadau Histopathologig a Gweithrediad Arennol. Radioleg 2014, 270, 117–24. [CrossRef]

8. Ardoll, BI; Schiffrin, EL; Mourad, JJ; Agostini, D.; Vicaut, E. ; Safar, ME; Struijker-Boudier, HA Darlifiad meinwe nam, patholeg sy'n gyffredin i orbwysedd, gordewdra a diabetes mellitus. Cylchrediad 2008, 118, 968–976. [CrossRef]

9. Carmeliet, P.; Jain, RK Mecanweithiau moleciwlaidd a chymwysiadau clinigol angiogenesis. Natur 2011, 473, 298–307. [CrossRef]

10. Molema, G. ; Aird, WC Heterogeneity Fasgwlaidd yn yr Arennau. Semin. Nephrol. 2012, 32, 145–155. [CrossRef]

11. Armulik, A. ; Abramson, A.; Betsholtz, C. Rhyngweithiadau endothelaidd/pericyt. Cylch. Res. 2005, 97, 512–523. 03.16652.d7. [CrossRef]

12. Attwell, D.; Mishra, A. ; Neuadd, CN; O'Farrell, FM; Dalkara, T. Beth yw pericyte? J. Cereb. Metab Llif Gwaed. 2016, 36, 451–5. [CrossRef]

13. Evans, RG; Eppel, GA; Anderson, WP; Denton, KM Mecanweithiau sy'n sail i reolaeth wahaniaethol ar lif y gwaed yn y medwla arennol a'r cortecs. J. Hypertens. 2004, 22, 1439–1451. [CrossRef]

14. Pallone, TL; Silldorff, EP; Turner, MR Llif gwaed mewnreenol: Anatomeg microfasgwlaidd a rheoleiddio darlifiad medwlari. Clin. Exp. Ffarmacol. Physiol. 1998, 25, 383–392. doi:10.1111/j.1440-1681.1998.tb02220.x. [CrossRef]

15. Pallone, TL; Edwards, A.; Mattson, DL Cylchrediad medullary Arennol. Compr. Physiol. 2012, 2, 97–140. [CrossRef] [PubMed]

16. Guerci, P. ; Ergin, B. ; Ince, C. Mae macro-a microcirculation yr aren. Arfer Gorau. Res. Clin. Anaesthesiol. 2017, 31, 315–329. [CrossRef]

17. Shaw, I. ; Marchog, S.; Mullins, J.; Hughes, J.; Péault, B. Pericytau yn y fasgiad arennol: Rolau mewn iechyd ac afiechyd. Nat. Nephrol y Parch. 2018, 14, 521–534. [CrossRef]

18. Rosiwall, L. ; Peti-Peterdi, JJ Heterogenedd y rhydweli afferol - Cydberthynas rhwng morffoleg a swyddogaeth. Nephrol. Deialwch. Trawsblannu. 2006, 21, 2703–2707. [CrossRef]

19. Stefanska, A.; Kenyon, C.; Cristion, HC; Bwcle, C.; Shaw, I. ; Mullins, JJ; Péault, B. Mae pericytes arennau dynol yn cynhyrchu renin. Arennau Int. 2016, 90, 1251–1261. [CrossRef]

20. Schlondorff, DO Trosolwg o'r ffactorau sy'n cyfrannu at bathoffisioleg clefyd arennol cynyddol. Arennau Int. 2008, 74, 860–866. [CrossRef]

21. Pallone, TL; Zhang, Z.; Rhinehart, K. Ffisioleg y microcirculation medullary arennol. Yn. J. Physiol. Ren. Physiol. 2003, 284, F253–66. [CrossRef] [PubMed]

22. Pallone, TL Bwndeli fasgwlaidd cymhleth, coesau esgynnol trwchus, ac acwaporinau: Gwasgu'r medwla allanol. Yn. J. Physiol. Ren. Physiol. 2014, 306, 505–506. [CrossRef] [PubMed]

23. Zimmerhackl, BL; Robertson, CR; Jamison, RL Y microgylchrediad medullary. Arennau Int. 1987, 31, 641–647. [CrossRef] [PubMed]

24. Dumas, SJ; Meta, E. ; Borri, M.; Luo, Y.; Li, X. ; Rabelink, TJ; Carmeliet, P. Amrywiaeth ffenotypig a metabolig. Nat. Nephrol y Parch. 2021, 1–24. [CrossRef]

25. Dumas, SJ; García-Caballero, M.; Carmeliet, P. Llofnodion Metabolaidd Ffenoteipiau Endothelaidd Unigryw. Tueddiadau Endocrinol. Metab. 2020, 31, 580–595. [CrossRef]

26. Jourde-Chiche, N.; Fakhouri, F.; Dou, L. ; Bellini, J.; Burley, A.S.; Fformat, M.; Jarrot, PA; Kaplanski, G.; Le Quintrec, M.; Pernin, V. ; et al. Strwythur a swyddogaeth endotheliwm ym maes iechyd ac afiechyd yr arennau. Nat. Nephrol y Parch. 2019, 15, 87–108. [CrossRef]

27. Hir, DA; Norman, JT; Iawn, LG Adfer y microfasgwleiddiad arennol i drin clefyd cronig yn yr arennau. Nat. Nephrol y Parch. 2012, 8, 244–250. [CrossRef]

28. Choi, YJ; Chakraborty, S.; Nguyen, V. ; Nguyen, C. ; Kim, BK; Shim, OS; Suki, WN; Truong, LD Mae colled capilari peritubwlaidd yn gysylltiedig ag anaf tubulointerstitial cronig yn yr aren ddynol: Mynegiant wedi'i newid o ffactor twf endothelaidd fasgwlaidd. Hum. Pathol. 2000, 31, 1491–1497. [CrossRef]

29. Ishii, Y. ; Sawada, T. ; Kubota, K.; Fuchinoue, S.; Teraoka, S.; Shimizu, A. Anafu a cholli cynyddol capilarïau peritubwl wrth ddatblygu neffropathi alografft cronig. Arennau Int. 2005, 67, 321–332. [CrossRef]

30. Serón, D.; Alexopoulos, E.; Raftery, MJ; Hartley, B.; Cameron, JS Nifer y trawstoriadau capilari interstitial a aseswyd gan wrthgyrff monoclonaidd: Perthynas â difrod interstitial. Nephrol. Deialwch. Trawsblannu. 1990, 5, 889–893. [CrossRef]