Rhan 2: Trawsblannu Echdyniad Gwyn Wy Cyw Iâr PBMCs Cwningen Anwythol Fel Triniaeth Ar gyfer Anaf Isgemia Arennol-atlifiad mewn Cwningod

Am fwy o wybodaeth cysylltwch â:tina.xiang@wecistanche.com

Cliciwch ar y ddolen isod i gael rhan 1

https://www.xjcistanche.com/news/part-1-transplantation-of-chicken-egg-white-ex-54616513.html

Cliciwch i ddysgu mwy o wybodaeth. am wella arennol

Canlyniadau

1. Labelu PBMCs yn llwyddiannus gyda CFSE

Roedd PBMCs wedi'u labelu gan garboxyfluorescein diacetate a succinimidyl ester (CFSE) yn arddangos fflworoleuedd melyn-wyrdd o dan ficrosgop fflworoleuedd, fel y dangosir yn Eig 1B. Ar ôl gwrth-staenio gyda DAPI, dangosodd yr holl gelloedd fflworoleuedd glas, fel y dangosir yn Ffig 1A, a dangosodd dadansoddiad o'r gorgyffwrdd yn y staenio fflworoleuedd fod y celloedd wedi'u labelu'n llwyddiannus, fel y dangosir yn Eig 1C.

2. Adnabod PBMCs ar ôl sefydlu

2.1.Lefelau mynegiant cymharol o genynnau celloedd somatig sy'n gysylltiedig ag aml-alluogrwydd mewn PBMCs anwythol ac anwythol.Cynyddwyd mynegiant NANOG, OCT4, a SOX2 yn sylweddol mewn PBMCs a ysgogwyd â dyfyniad gwyn wy cyw iâr, a gostyngwyd mynegiant y genyn cell somatig LMNA (Ffig 1D), a nododd fod y celloedd yn gwahaniaethu i gelloedd aml-alluog. Dangosodd dadansoddiad ystadegol fod y ddau grŵp yn sylweddol wahanol (n=3,p=0.003). Anwythwyd y celloedd deirgwaith, a chynhwyswyd tri atgynhyrchiad biolegol yn yr astudiaeth. Nid oedd y gwahaniaeth yn y genyn cell somatig LMNA rhwng y ddau grŵp yn ystadegol arwyddocaol.

2.2.Roedd ffactor lluosogrwydd PBMCs anwythol yn sylweddol uwch na PBMCs heb eu hysgogi.. Ymhlith y celloedd anwythol, roedd{{{0}}.081 y cant yn bositif ar gyfer OCT4-PE, tra bod 99.3 y cant o'r celloedd anwythol yn bositif ar gyfer OCT4-PE . Canrannau'r SSEA-4-PE-positif celloedd anysgogedig ac anwythol oedd 1.08 y cant a 16.5 y cant, yn y drefn honno. Ar ben hynny, roedd 0.495 y cant o'r celloedd anwythol yn bositif ar gyfer NANOG-PE, tra canfuwyd bod 95.8 y cant o'r celloedd anwythol yn NAOG-PE-positif (Ffig 1E-1M). Canrannau'r celloedd rheoli isotype positif ar gyfer OCT4-PE, SSEA{-4-PE, a NANOG-PE oedd 0.546 y cant ,0.401 y cant , a 0.249 y cant , yn y drefn honno.

2.3.Rhoddodd dadansoddiadau imiwnohistocemegol ganlyniadau cadarnhaol ar gyfer y PBMCs anwythol.Dangosodd dadansoddiadau imiwnohistocemegol o OCT4 a NANOG fod PBMCs anwythol, ond nid PBMCs anghymhellol, wedi mynegi'r marcwyr hyn (Ffig 2A-2D). Mae Ffig2A a 2C yn dangos PBMCs heb eu cymell, ac mae Ffig 2B a 2D yn dangos PBMCs anwythol. Yn ogystal, mae OCT4expression yn cael ei ddangos yn Ffig 2A a 2B, ac mae Ffig 2Cand 2D yn dangos mynegiant NANOG.

2.4.Cynhyrchodd dadansoddiadau blotiau gorllewinol ganlyniadau cadarnhaol ar gyfer PBMCs ysgogedig.Yn ôl canlyniadau blot y Gorllewin, mynegwyd OCT4 mewn PBMCs anwythol ond nid mewn PBMCs heb eu cymell (EFig 2E).

2.5. Roedd hydoedd y telomere cymharol yn sylweddol hirach mewn PBMCs anwythol.Yn seiliedig ar y canlyniadau PCR meintiol, roedd telomeres y PBMCs anwythol (1.83807±0.84756) yn sylweddol hirach na rhai PBMCs heb eu hysgogi(1±0.08307)(Eig 2E, yn golygu gwyriadau safonol , n=5,p=0.013), a ddangosodd fod y celloedd yn gwahaniaethu i fôn-gelloedd ifanc. Cynyddodd hydoedd telomere cymharol mewn gwirionedd ar ôl dadwahaniaethu.

3. Gostyngwyd lefelau nitrogen wrea serwm a creatinin yn y grŵp trin celloedd anwythol

Roedd gan y grŵp rheoli model gynnwys nitrogen wrea o 22.1 mmol/l a chynnwys creatinin o 452 umol/l. Ar ôl tair rownd o drawsblannu â chelloedd anwythol, y cynnwys nitrogen wrea oedd 7 mmol/l, a'r cynnwys creatinin oedd 74 μmol/l; roedd y gwerthoedd hyn yn debyg i'r lefelau arferol. Arhosodd y lefelau yn y grŵp trin celloedd heb ei ysgogi yn uchel (Ffig 2G). Dangosodd dadansoddiad ystadegol wahaniaethau ystadegol arwyddocaol rhwng canlyniadau'r pedwar grŵp (p= 0.031).

4. Gostyngwyd y crynodiadau protein wrinol yn y grŵp anwythol

Y crynodiad protein wrinol yn y grŵp rheoli model oedd 8.17 mg/ml. Ar ôl y tair triniaeth, y crynodiad protein wrinol yn y grŵp anwythol oedd 4.35 mg/ml, a oedd yn debyg i'r lefel arferol. Fodd bynnag, arhosodd cynnwys protein wrinol y grŵp heb ei ysgogi yn uchel ar 7.96mg/ml (Ffig 2H). Dangosodd dadansoddiad ystadegol wahaniaethau ystadegol arwyddocaol rhwng y canlyniadau a gafwyd o'r pedwar grŵp (p=0.001).

5. Canfuwyd celloedd wedi'u labelu yn y grŵp anwythol

Fel y dangosir yn Ffig3A-3D, dosbarthwyd llawer o gelloedd fflwroleuol yn arennau'r grŵp trin celloedd anwythol, tra bod ymeinweoedd yr arennauo'r tri grŵp arall ni ddangosodd unrhyw gelloedd fflwroleuol. Esboniad posibl yw bod celloedd anwythol yn cael eu cludo i'r aren anafedig i atgyweirio'r difrod. Roedd dosbarthiad PBMCs wedi'u labelu'n fflworoleuol mewn adrannau arennau wedi'u rhewi yn awgrymu bod y celloedd hyn yn ymwneud â thrwsio'r aren a anafwyd.

6. Roedd strwythur aren y grŵp anwythol yn arddangos ffenoteip arferol

Yn seiliedig ar ganlyniadau staenio hematoxylin-eosin(HE), difrodwyd strwythur arennau'r cwningod yn y grŵp rheoli model. Ar ôl triniaeth gyda'r celloedd anwythol, mae'rarennoldangosodd strwythur meinwe ffenoteip arferol. Mewn cyferbyniad, parhaodd y difrod i feinwe'r arennau yn y grŵp trin celloedd heb ei ysgogi (Ffig 3E-3H). Dangosir y sgôr necrosis tiwbaidd acíwt (ATN) yn Ffig 3I.

7. Gostyngwyd IOD y grwpiau celloedd anwythol yn sylweddol

Defnyddiwyd meddalwedd Image-Pro Plus 6.0(Media Cybernetics, Inc., Rockville, MD, UDA) i wneud dadansoddiad imiwn-histocemegol o'r dwysedd optegol cronnol (IOD). Ar gyfer pob grŵp, dewiswyd o leiaf chwe maes chwyddo 200× ar hap o bob adran, a chafodd delweddau eu dal. Ceisiwyd edrych ar yr holl faes gweledigaeth i sicrhau bod gan bob ffotograff yr un cefndir. Defnyddiwyd Image-Pro Plus 6.0software i ddewis yr un lliw brown â safon unffurf ar gyfer barnu'r staenio cadarnhaol yn yr holl ddelweddau. Dadansoddwyd pob delwedd i bennu IOD staenio positif. Cynyddwyd yr IOD yn sylweddol yn y grŵp rheoli model, tra bod IODs y grwpiau rheolaeth arferol a'r grwpiau celloedd ysgogedig wedi'u lleihau a'u lleihau'n sylweddol, yn y drefn honno. Ni ostyngwyd IOD y grŵp trin celloedd heb ei ysgogi yn sylweddol o'i gymharu â grŵp rheoli'r model (Ffig 3). Dangosodd dadansoddiad ystadegol wahaniaethau sylweddol rhwng canlyniadau'r pedwar grŵp(p =0.001).

8. Gwellwyd ffibrosis yn y grŵp anwythol

Gwelwyd dyddodiad ffibr colagen sylweddol yn y grŵp rheoli model, a digwyddodd ffibrosis difrifol. Cafodd y ffibrosis hwn ei wella neu ei ddileu yn y grŵp trin celloedd anwythol, tra bod ffibrosis difrifol i'w weld o hyd yn y grŵp trin celloedd heb ei ysgogi (Eig 4A-4D).

9. Ni welwyd tewhau pilen yr islawr yn y grŵp anwythol

Cynyddwyd trwch y bilen islawr glomerwlaidd, pilen basilar y capsiwl arennol, a'r bilen tubulointerstitial yn sylweddol yn y grŵp rheoli model. Yn y grŵp trin celloedd anwythol, ni ddangosodd y bilen islawr unrhyw dewychu sylweddol, tra bod pilenni islawr mwy trwchus i'w gweld o hyd yn y grŵp trin celloedd anwythol (Ffig 4E-4H). Dangosir sgoriau trwch pilen yr islawr yn Ffig 4I.

10. Celloedd wedi'u trawsblannu wedi'u gwahaniaethu i gelloedd epithelial tiwbaidd

Dangosodd y canlyniadau imiwnfflworoleuedd fod y celloedd a drawsblannwyd yn arddangos fflworoleuedd gwyrdd a choch ar yr un pryd, a oedd yn dangos bod y celloedd a drawsblannwyd yn cael eu gwahaniaethu i gelloedd epithelial tiwbaidd (TECs) (Ffig 4J).

11. Cynyddwyd y sylweddau a nodwyd yn y grŵp model a lleihawyd ar ôl triniaeth

Yn y modd ïon negyddol, y ddau sylwedd a ddangosodd lefelau sylweddol uwch yn y grŵp rheoli model oedd 2'-deoxy-D-ribose a N-acetylglucosamine 1-ffosffad (Ffig 5A). Gostyngwyd lefelau'r ddau gyfansoddyn hyn yn sylweddol ar ôl therapi celloedd anwythol o'i gymharu â'r lefelau a geir yn y grŵp rheoli model (Fig5A). Yn y modd ïon positif, mae lefelau tri sylwedd (D-pinitol, lysyl-glycine, a glutamyl). -asparagine) wedi cynyddu'n sylweddol yn y grŵp rheoli model (Ffig 5B), a gostyngwyd lefelau'r tri sylwedd hyn yn sylweddol ar ôl therapi celloedd anwythol o'i gymharu â'r rhai a geir yn y grŵp rheoli model (Fig5B).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0244160.g005

Yn y modd ïon negyddol, cynyddwyd lefelau'r ddau sylwedd a nodwyd yn y grŵp model a gostyngwyd ar ôl triniaeth, a nododd gydberthynas ystyrlon rhwng lefelau'r ddau sylwedd.

Yn y modd ïon positif, cynyddwyd lefelau'r tri sylwedd a nodwyd yn y grŵp rheoli model a gostyngwyd ar ôl triniaeth, a nododd gydberthynas ystyrlon rhwng lefelau'r tri sylwedd hyn.

12. Gwelwyd newidiadau sylweddol ym metabolaeth pyrimidin a llwybrau biosynthesis ffenylalanin, tyrosin a tryptoffan

Yn y modd ïon negyddol, canfuwyd newid sylweddol yn y llwybr metaboledd pyrimidine rhwng y grŵp rheoli model a'r grŵp rheoli arferol (Eig6A). Yn ychwanegol,

arsylwyd newidiadau sylweddol yn y llwybr hwn yn y grŵp trin celloedd anwythol o'i gymharu â'r grŵp rheoli model (Ffig 6B), a nododd fod y llwybr metaboledd pyrimidin yn llwybr sydd wedi'i newid yn sylweddol. Yn y dadansoddiad modd ïon cadarnhaol, newidiwyd y llwybrau biosynthesis ffenylalanîn, tyrosin, a tryptoffan yn sylweddol yn y grŵp rheoli model o'i gymharu â'r grŵp rheoli arferol (Ffig 6C), a newidiwyd y llwybrau hyn yn sylweddol yn y grŵp trin celloedd anwythol o'i gymharu â'r grŵp rheoli model (Eig 6D), a nododd fod y llwybrau biosynthesis ffenylalanin, tyrosin a tryptoffan yn llwybrau ystyrlon. Yn Ffig 6, mae lliw swigen tywyllach a chyfaint mwy yn dynodi gwahaniaeth mwy arwyddocaol. Fel y dangosir gan y saethau yn Ffig 6A a 6B, mae'r gwahaniaeth yn y llwybr metaboledd pyrimidin yn arwyddocaol, ac fel y nodir gan y saethau yn Ffig 6C a 6D, mae'r gwahaniaethau mewn llwybrau biosynthesis ffenylalanin, tyrosin a tryptoffan yn sylweddol.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0244160.g006

Trafodaeth

AciwtarenMae anaf a achosir gan isgemia-atlifiad yn glefyd clinigol cyffredin, ac mae cyfradd marwolaethau cleifion ag anaf acíwt i'r arennau tua 30 y cant i 50 y cant oherwydd mesurau triniaeth cyfyngedig[14]. Yn ystod isgemia, mae actifadu ensymau yn achosi dinistr cytosgerbydol, difrod cellbilen, a diraddio DNA, sydd yn y pen draw yn arwain at necrosis celloedd ac apoptosis [15]. Mae isgemia-atlifiad hefyd yn actifadu proteinau ategu, cytocinau, a chemocinau, ymhlith moleciwlau eraill, ac mae'r mecanweithiau sy'n sail i anafiadau isgemia-atlifiad o bwysigrwydd sylweddol [16]. Yn ogystal, mae bôn-gelloedd wedi'u trawsblannu yn hyrwyddo mudo a recriwtio bôn-gelloedd arennol gweddilliol i'r safle anaf ac yn cymell eu gwahaniaethu i TECs, ond nid yw'r union fecanwaith yn glir [17].

Mae marwolaethau cleifion ag anaf isgemia-atlifiad yn uchel oherwydd diffyg triniaeth glinigol effeithiol [18]. Mae'r cyflwr yn gofyn am therapi amnewid arennol hirdymor neu gydol oes neutrawsblannu arennau[19]. Mae mecanwaith pathoffisiolegol anaf atlif isgemia yn gymhleth iawn ac yn deillio o ryngweithiadau niferus ymhlith celloedd llidiol, celloedd endothelaidd fasgwlaidd, a cytocinau[20]. Yn y blynyddoedd diwethaf, mae bôn-gelloedd mesenchymal wedi dod yn ffocws ymchwil ar anafiadau isgemia-atlifiad [21] a dangoswyd eu bod yn gwella a achosir gan isgemia-atlifiad.anaf arennol. Fel y dangosir mewn astudiaethau sy'n defnyddio modelau isgemia-atlifiad, mae bôn-gelloedd mesenchymal yn chwarae rhan bwysig wrth reoleiddio imiwnedd, cymryd rhan mewn adluniad fasgwlaidd [22], ac atgyweirio'r micro-amgylchedd arennol trwy gyfrinachu ffactorau antiapoptotig paracrine, ffactorau mitogenig, a ffactorau angiogenig. Datgelodd astudiaeth ddiweddar gan ddefnyddio bôn-gelloedd o darddiad gwahanol fod bôn-gelloedd lluosog anwythol yn fathau eraill o fôn-gelloedd [22]. Credwn fod y celloedd anwythol yn fwy tebygol o fod yn fôn-gelloedd mesenchymal oherwydd eu bod yn fwy aeddfed na bôn-gelloedd plwripotent anwythol.

Ar ôl trawsblannu bôn-gelloedd lluosog ysgogedig, mae moleciwlau a fynegir ar wyneb y bôn-gelloedd plwripotent anwythol yn rhyngweithio â chelloedd T i reoleiddio eu gweithgaredd biolegol. Gall celloedd T osgoi'r system imiwnedd yn dilyn difrod a lleihau dwyster yr ymateb imiwn yn y meinwe amgylchynol, ac felly mae'r celloedd hyn yn chwarae rhan wrth amddiffyn swyddogaeth meinwe sydd wedi'i difrodi i ryw raddau [23]. Llwyddwyd i sefydlu model cwningen o ffibrosis rhyng-ranol arennol a dangoswyd y gall trawsblannu bôn-gelloedd awtologaidd anwythol atgyweirio niwed i'r arennau o fewn 8 wythnos [24]. Mae bôn-gelloedd yn darparu microamgylchedd manteisiol ar gyfer atgyweirio difrod epithelial tiwbaidd arennol [24]. Yn yr arbrawf hwn, ar ôl gweinyddu tair triniaeth wythnosol yn olynol, adferwyd lefelau creatinin serwm a nitrogen wrea yn y grŵp trin celloedd anwythol i'r un lefel a arsylwyd yn y grŵp rheoli arferol, tra bod y lefelau yn y driniaeth celloedd anwythol a rheolaeth model. grwpiau yn sylweddol uwch.

Fel y dangosir gan Haynesworth et al. [25], mae bôn-gelloedd mesenchymal yn secretu amrywiaeth o ffactorau twf, ffactorau sy'n ysgogi cytref, moleciwlau adlyniad, a rhyngleucynnau (IL-6, IL-7, IL-8, I{{5) }}, IL-14, ac IL-15), sy'n hyrwyddo mitosis TECs arennol a thrwsio meinweoedd a thrwy hynny atal dyrchafiad crynodiadau creatinin ac wrea nitrogen.

Yn yr astudiaeth bresennol, canfuwyd lefelau mynegiant y ffactorau lluosogrwydd SSEA-4, NANOG, ac OCT4 mewn PBMCs anwythol gan sytometreg llif, a datgelodd y canlyniadau fod PBMCs yn dadwahaniaethu i gelloedd amlalluog. Dangosodd y dadansoddiad PCR meintiol fod y telomeres mewn PBMCs anwythol yn sylweddol hirach na'r rhai mewn PBMCs anghymhellol. Yn seiliedig ar ein tystiolaeth, mae PBMCs a gafwyd o waed ymylol cwningen yn gwahaniaethu i fôn-gelloedd amlalluog yn dilyn triniaeth gyda darnau gwyn wy cyw iâr ac yn arddangos nodweddion coesyn mesenchymal. celloedd [9], sy'n caniatáu iddynt gymryd rhan yn y pen draw wrth atgyweirio anaf arennol. Mae astudiaethau wedi dangos y gall celloedd wyau mamaliaid a darnau celloedd wyau Xenopus ailraglennu celloedd somatig [6,7]. Dangosodd ein hymchwil flaenorol y gall echdyniad wyau cyw iâr hefyd ailraglennu celloedd somatig [5,9]. Yr wy cyw iâr yw'r gell wy fwyaf, a bydd ei allu i ailraglennu celloedd somatig felly'n hyrwyddo ymchwil biolegol celloedd. Mae'r camau ailraglennu a achosir gan echdynnu cell wy mamalaidd a cell wy Xenopus yn feichus, ac mae'r darnau'n anodd eu cael; fodd bynnag, wyau cyw iâr yw'r celloedd wyau mwyaf, ac felly gellir cael llawer iawn o echdyniad gwyn wy cyw iâr. Os cyflawnir y driniaeth mewn modd di-haint, nid oes angen hidlo a sterileiddio'r dyfyniad a gafwyd. Gellir cynnal gweithgaredd y dyfyniad yn dda. Fe wnaethom ailadrodd yr arbrawf sefydlu gan ddefnyddio crynodiadau terfynol o echdyniad gwyn wy cyw iâr o 10 y cant , 20 y cant , 30 y cant , 40 y cant , a 50 y cant i gymell y PBMCs (gweler Ffigau Sl i S3). Wrth i grynodiad y dyfyniad gwyn wy cyw iâr gynyddu, cynyddodd cyfradd bositif y ffactor lluosogrwydd yn raddol, a chafwyd y gyfradd bositif uchaf gyda chrynodiad terfynol o 50 y cant. Fodd bynnag, bydd crynodiad dyfyniad gwyn wy cyw iâr yn uwch na 50 y cant yn effeithio ar dwf celloedd. Fe wnaethom ddefnyddio proteas, DNase, ac RNase i lyse'r protein, DNA, ac RNA mewn echdyniad gwyn wy, yn y drefn honno, ac yna cynhaliwyd ein harbrawf sefydlu. Canfuom nad oes gan y detholiad gwyn wy a gafwyd ar ôl lysis protein y gallu i ailraglennu celloedd bellach, ac mae gan y dyfyniad protein cyw iâr a geir ar ôl lysis DNA a RNA y gallu i ailraglennu celloedd o hyd. Felly, cadarnhaodd y canfyddiadau hyn fod prif rôl y dyfyniad yn cael ei chwarae gan y gydran protein (ni ddangosir y canlyniadau).

Fe wnaethom hefyd ddadansoddi samplau gwaed anifeiliaid ar ôl wythnos o driniaeth. Fodd bynnag, nid oedd y gwahaniaeth rhwng y pedwar grŵp yn arwyddocaol; felly, dim ond ar ôl tair triniaeth y byddwn yn dangos y canlyniadau a gafwyd ar gyfer y pedwar grŵp. Roedd dosbarthiad PBMCs wedi'u labelu'n fflworoleuol mewn adrannau arennau wedi'u rhewi yn awgrymu bod y celloedd hyn yn ymwneud â thrwsio'r aren a anafwyd. Roedd staen AU yn dangos difrod i strwythur yr arennau yn y grŵp rheoli model. Ar ôl triniaeth â chelloedd anwythol, dangosodd yr aren strwythur arferol, tra gwelwyd difrod i strwythur yr arennau yn y grŵp trin celloedd anwythol. Ar ôl tair triniaeth, datgelodd staen trichrome Masson o adrannau arennau o'r pedwar grŵp ddyddodiad sylweddol o ffibr colagen a ffibrosis difrifol yn y grŵp rheoli model. Cafodd y ffibrosis hwn ei wella neu ei ddileu trwy driniaeth gyda'r celloedd anwythol, tra bod ffibrosis difrifol i'w weld o hyd yn y grŵp trin celloedd anwythol. deoxy-D-ribose a N-acetylglucosamine 1-ffosffad yn y grŵp rheoli model o'i gymharu â'r grŵp rheoli arferol, a gostyngwyd lefelau'r sylweddau hyn yn sylweddol yn y grŵp trin celloedd anwythol o'i gymharu â'r grŵp rheoli model. Yn y modd ïon positif, cynyddwyd lefelau pum sylwedd yn sylweddol yn y grŵp rheoli model o'i gymharu â'r grŵp rheoli arferol, a gostyngwyd lefelau tri o'r pum sylwedd hyn yn sylweddol yn y grŵp trin celloedd anwythol o'i gymharu â'r grŵp rheoli model .

Mae'r prif fecanweithiau rhagdybiedig sy'n sail i atgyweirio'r aren a arsylwyd a'r gostyngiad cysylltiedig yn yr ymateb llidiol wedi'u rhestru isod. ① Mae PBMCs ysgogedig yn gwahaniaethu i mewn i TECs neu'n asio â chelloedd sydd wedi goroesi i hyrwyddo atgyweirio meinwe arennol yn uniongyrchol. ② Mae effeithiau synergaidd amrywiol cytocinau yn darparu micro-amgylchedd da ar gyfer atgyweirio meinweoedd arennol [26]. Ar ôl tri thrawsblaniad o PBMCs anwythol, dychwelodd y swyddogaeth arennol a mynegeion patholegol i'r lefelau arferol, a pharhaodd y lefelau arferol hyn tan ddiwedd yr arbrawf, a awgrymodd fod y bôn-gelloedd aml-alluog a drawsblannwyd yn hyrwyddo atgyweirio strwythur a swyddogaeth meinwe arennol yn effeithiol.

Er nad yw'r mecanwaith penodol y mae PBMCs anwythol yn ei ddefnyddio i hyrwyddo atgyweirio strwythurol a swyddogaethol yr aren wedi'i ddeall yn llawn eto, mae canlyniadau'r astudiaeth hon yn awgrymu bod trawsblannu PBMCs ysgogedig mewnwythiennol yn hyrwyddo atgyweirio ar ôl anaf acíwt i'r arennau. Mae'r canlyniadau hyn yn darparu cyfeiriad gwerthfawr i ymchwilwyr sy'n ymchwilio i swyddogaeth bôn-gelloedd amlalluog wrth adfywio arennau sydd wedi'u difrodi ac ar gyfer triniaeth glinigol ar gyfer clefydau acíwt a chronig yr arennau.

I grynhoi, mae trawsblaniad bôn-gelloedd amlalluog ysgogedig yn arwyddocaol iawn ar gyfer atgyweirio celloedd parenchymal mewn modelau anifeiliaid o fethiant arennol a chlefydau eraill yr arennau.

Casgliadau

Roedd trin PBMCs â detholiad gwyn wy cyw iâr yn cynyddu mynegiant genynnau a phroteinau sy'n gysylltiedig â lluosogrwydd yn sylweddol, a ddangosodd fod y celloedd wedi dadwahaniaethu i fôn-gelloedd amlalluog. Felly, mae PBMCs anwythol yn gwahaniaethu i fôn-gelloedd amlalluog a gellir eu defnyddio o bosibl i drinanaf i'r arennau. Mae angen ymchwil yn y dyfodol i nodi'r moleciwlau allweddol mewn echdyniad gwyn wy cyw iâr ac felly gwella effeithlonrwydd sefydlu ymhellach.

Cyfeiriadau

1. Yuan X, Li D, Chen X, Han C, Xu L, Huang T, et al. Mae fesiglau allgellog o gelloedd stromal mesenchymal bôn-gelloedd lluosog a achosir gan bobl (hiPSC-MSCs) yn amddiffyn rhag isgemia arennol / anaf atdlifiad trwy gyflenwi protein penodolrwydd (SP1) ac actifadu sphingosine kinase 1 yn drawsgrifiadol ac atal necroptosis. Cell Marwolaeth Dis. 2017; 8(12):3200. Epub 2017/12/14. https://doi.org/10. 1038/s41419-017-0041-4 [pii]. PMID: 29233979; PubMed Central PMCID: PMC5870585.

2. Fahmy SR, Soliman AC, El Ansary M, Elhamid SA, Mohsen H. Effeithiolrwydd therapiwtig trawsblaniad bôn-gelloedd mesenchymal llinyn bogail dynol yn erbyn isgemia arennol/anaf atdlifiad mewn llygod mawr. Cell Meinwe. 2017; 49(3):369–75. Epub 2017/05/10. S0040-8166(16)30171-9 [pii] https://doi.org/10.1016/j.tice. 2017.04.006 PMID: 28476205.

3. Hu H, Zou C. Bôn-gelloedd Mesenchymal mewn Isgemia Arennol-Anafiadau Atgyfnerthu: Safbwyntiau Biolegol a Therapiwtig. Bôn-gell Cyrr Res Ther. 2017; 12(3): 183–7. Epub 2016/10/27. https://doi.org/10. 2174/1574888X11666161024143640 [pii]. PMID: 27781940.

4. Zhou L, Cân Q, Shen J, Xu L, Xu Z, Wu R, et al. Cymhariaeth o ffracsiwn fasgwlaidd stromal adipose dynol a bôn-gelloedd mesenchymal sy'n deillio o adipose ar gyfer gwanhau isgemia arennol acíwt/anaf atdlifiad. Cynrychiolydd Gwyddonol 2017; 7:44058. Epub 2017/03/10. https://doi.org/10.1038/srep44058 [pii]. PMID: 28276451; PubMed Central PMCID: PMC5343423.

5. Ruan GP, ​​Wang JX, Pang RQ, Yao X, Cai XM, Wang Q, et al. Mae triniaeth â darnau gwyn-wy-cyw neu wy cyfan yn cynnal ac yn gwella goroesiad a gwahaniaethu celloedd dueg. Sytotechnoleg. 2012; 64(5):541–51. Epub 2012/02/22. https://doi.org/10.1007/s10616-012-9431-8 PMID: 22350684; PubMed Central PMCID: PMC3432533.

6. Miyamoto K, Tsukiyama T, Yang Y, Li N, Minami N, Yamada M, et al. Mae echdynion di-gell o oocytau mamalaidd yn rhannol ysgogi ailraglennu niwclear mewn celloedd somatig. Atgynhyrchiad Biol. 2009; 80(5):935–43. Epub 2009/01/24. https://doi.org/10.1095/biolreprod.108.073676 [pii]. PMID: 19164171.

7. Alberio R, Johnson AD, Stick R, Campbell KH. Ailfodelu niwclear gwahaniaethol o gelloedd somatig mamalaidd gan oocyt Xenopus laevis a cytoplasm wy. Cell Gwariant Res. 2005; 307(1):131–41. Epub 2005/06/ 01. S0014-4827(05)00088-1 [pii] https://doi.org/10.1016/j.yexcr.2005.02.028 PMID: 15922733.

8. Hansis C, Barreto G, Malory N, Niehrs C. Mae ailraglennu niwclear celloedd somatig dynol gan echdynnu wyau Xenopus yn gofyn am BRG1. Curr Biol. 2004; 14(16):1475–80. Epub 2004/08/25. https://doi.org/10. 1016/j.cub.2004.08.031 [pii]. PMID: 15324664.

9. Ruan GP, ​​Yao X, Shu J, Liu JF, Pang RQ, Pan XH. Mae darnau gwyn wy cyw iâr yn hyrwyddo mynegiant OCT4 a NANOG a thwf telomeres mewn celloedd 293T. Cell Mol Biol (Noisy-le-grand). 2017; 63(7):59– 65. Epub 2017/08/26. https://doi.org/10.14715/cmb/2017.63.7.10 PMID: 28838341.

10. Alzahrani FA. Mae melatonin yn gwella potensial therapiwtig ecsosomau sy'n deillio o fôn-gelloedd mesenchymal yn erbyn anaf ar gyfer isgemia arennol mewn llygod mawr. Am J Cyfieithu Res. 2019; 11(5): 2887-907. Epub 2019/ 06/21. PMID: 31217862; PubMed Central PMCID: PMC6556638.

11. Lee KW, Kim TM, Kim KS, Lee S, Cho J, Park JB, et al. Isgemia Arennol - Anaf Atlifiad mewn Model Mwnci Diabetig a Phrofi Therapiwtig o Fôn-gelloedd Mesenchymal sy'n Deillio o Fêr Esgyrn Dynol. J Diabetes Res. 2018; 2018: 5182606. Epub 2018/08/30. https://doi.org/10.1155/2018/5182606 PMID: 30155487; PubMed Central PMCID: PMC6092988.

12. Xie LB, Chen X, Chen B, Wang XD, Jiang R, Lu YP. Effaith amddiffynnol bôn-gelloedd mesenchymal mêr esgyrn wedi'u haddasu gyda klotho ar anaf arennol isgemia-atlifiad. Ren Methu. 2019; 41(1):175–82. Epub 2019/04/04. https://doi.org/10.1080/0886022X.2019.1588131 PMID: 30942135; PubMed Central PMCID: PMC6450585.

13. Zhu G, Pei L, Lin F, Yin H, Li X, He W, et al. Mae ecsosomau o fôn-gelloedd mesenchymal sy'n deillio o fêr-esgyrn dynol yn amddiffyn rhag isgemia arennol/anaf atdlifiad trwy drosglwyddo miR-199a-3t. J Cell Physiol. 2019; 234(12): 23736-49. Epub 2019/06/11. https://doi.org/10.1002/jcp.28941 PMID: 31180587.

14. Shen B, Liu J, Zhang F, Wang Y, Qin Y, Zhou Z, et al. CCR2 Ecsosom Cadarnhaol a Ryddhawyd gan Bôn-gelloedd Mesenchymal Yn Atal Swyddogaethau Macrophage ac yn Lliniaru Isgemia/Anafiadau Arennol a Achosir gan Atlifiad. Bôn-gelloedd Int. 2016; 2016: 1240301. Epub 2016/11/16. https://doi.org/10.1155/2016/ 1240301 PMID: 27843457; PubMed Central PMCID: PMC5098097.

15. Ying MK, Chen ZM, Wang YC, Feng S, Lin C, Chen FF, et al. [Effaith bôn-gelloedd mesenchymal metaneffrig ar ôl anaf arennol isgemia-atlifiad mewn llygod]. Zhonghua Yi Xue Za Zhi. 2016; 96(20):1573– 7. Epub 2016/06/09. https://doi.org/10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2016.20.006 PMID: 27266685