Gall Polysacaridau O Cistanche Oedi'n Sylweddol Heneiddio Gweithrediad yr Ysgyfaint

Cyswllt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-bost:audrey.hu@wecistanche.com

Dydd Sul Yun Wang Dejun Liu Xiaomei Shi Le Zhang Hongquan

(Sefydliad Meddygaeth, Prifysgol Yangzhou, Yangzhou 225001)

Heneiddioyn broses lle mae meinweoedd ac organau'r corff yn dioddef dirywiad swyddogaethol a morffolegol a hyd yn oed heneiddio yn ystod bywyd. Mae'r ysgyfaint wedi'i gysylltu'n uniongyrchol â'r amgylchedd allanol ac yn derbyn cylchrediad gwaed o'r corff cyfan. Mae'n fwyaf agored i ffactorau niweidiol amrywiol yn yr amgylchedd ac yn y corff. Mae'n un o'r organau cynharaf yn y corff lle mae heneiddio'n digwydd. Mae rôl radicalau rhydd yn y broses heneiddio wedi'i gadarnhau gan ymchwil llawer o ysgolheigion. Mae'r arbrawf hwn yn defnyddio osôn i greu model heneiddio arbrofol i'w arsylwieffeithiau polysacaridau o Cistanche ar oddefgarwch hypocsia, swyddogaeth gwrthocsidiol, ac uwch-strwythur ysgyfaint llygod sy'n heneiddio. Dylanwad. Disgwylir gosod y sylfaen ymchwil ar gyferpolysacaridau o Cistanchewrth ohirio newidiadau dirywiol ysgyfeiniol a gofal iechyd system resbiradol yr henoed.

Pwrpas yr astudiaeth hon yw arsylwi ar y newidiadau dirywiol yn uwch-strwythur celloedd meinwe'r ysgyfaint mewn llygod heneiddio arbrofol a dylanwadpolysacaridau o Cistanchearno. Defnyddio anadliad parhaus osôn (Osôn, Ob) am 4 wythnos i gymell dull model heneiddio'r ysgyfaint, gan ddefnyddio Polysaccharide o Cistanche 50 a 100 gram i weinyddu llygod model am 6 wythnos i ganfod goddefgarwch hypocsia, yr ysgyfaint, a serwm superoxide mewn llygod sy'n heneiddio Dismutase (SOD). ) gweithgaredd a chynnwys malondialdehyde (MDA). Gwelwyd newidiadau organynnau meinwe'r ysgyfaint ac uwch-strwythur o dan ficrosgop electron. Canlyniadau Gostyngodd y llygod heneiddio arbrofol a achosir gan osôn y goddefgarwch hypocsia yn sylweddol; gostyngodd SOD yr ysgyfaint a serwm a chynyddodd MDA. O'i gymharu â'r grŵp model, gall Polysacarid o Cistanche ymestyn yn sylweddol amser goddefgarwch hypocsia llygod sy'n heneiddio (P<0.01), improve="" the="" activity="" of="" sod="" in="" the="" serum,="" reduce="" the="" content="" of="" mda=""><0.01), and="" delay="" the="" degeneration="" of="" mitochondria="" and="" lamellar="" bodies="" in="" the="" lung="" cells="" of="" aging="" mice=""><0.01). conclusion="">Gall polysacaridau o Cistanche yn sylweddolgohirio'r arbrawf Dirywiad ffisiolegol a morffoleg celloedd yr ysgyfainto lygod sy'n heneiddio'n rhywiol.

1 deunydd

1.1 Anifeiliaid

Llygod glân 3 mis oed o straen ICR, 18 ~ 22g, ¥ ^ bob hanner, a ddarperir gan Ganolfan Anifeiliaid Arbrofol Prifysgol Yangzhou, rhif tystysgrif: Su Dongzhi 98002 ^

1.2 Cyffuriau ac adweithyddion

Polysacaridau o Cistanche: Wedi'i ddarparu gan Sefydliad Ymchwil Planhigion Gwyllt Nanjing, wedi'i baratoi â dŵr distyll i 2.5 g·LT, 5.0 gL-1; Darperir pecynnau prawf SOD, MDA gan Sefydliad Ymchwil Peirianneg Biofeddygol Nanjing Juli.

1.3 Offeryn

Sbectrophotometer uwchfioled UV755B, cynnyrch o Shanghai Ffatri Offeryn Dadansoddol; generadur osôn, cynnyrch o Ffatri Offeryn Meddygol Wuxi; H-300 microsgop electron trawsyrru, cynnyrch Hitachi, Japan.

2 Dull

2 1 Paratowyd model heneiddio ysgyfaint arbrofol gydag anaf troad aroglau Cymerwyd llygod ICR o'r diwrnod a'r dyluniad arbrofol, a chafodd y llygod yn y grŵp model a'r grŵp triniaeth eu grwpio ar hap.

Crëwyd y model heneiddio arbrofol am 4 wythnos yn barhaus. Ar yr un pryd, rhoddwyd 20 ml-kg ^d'1 i'r grŵp rheoli (cymerwch y llygod arferol a brynwyd yn yr un swp) a'r grŵp model gyda saline arferol, Polysacarid o grŵp triniaeth Cistanche I a II Polysacarid o Cistanche 50, Rhoddwyd 100 mg-kg-1-d-' gan weinyddiaeth fewngastrig, a'r cyfnod gweinyddu oedd 6 wythnos. Ar ôl y weinyddiaeth ddiwethaf, cynhaliwyd profion mynegai amrywiol.

2.2 Dull prawf goddefgarwch hypocsia (2)

Rhoddwyd pob grŵp o lygod mewn potel malu 250 ml yn cynnwys 20 g o galch soda. Roedd Vaseline wedi'i selio, a chofnodwyd yr amser o roi'r llygod yn y botel i fygu a marwolaeth o dan dymheredd a phwysau arferol.

2.3 Ysgyfaint a gwaed

Penderfynu cynnwys SOD^MDA o bob grŵp o lygod 1 awr ar ôl y weinyddiaeth ddiwethaf, tynnu'r peli llygaid a chasglu gwaed i wahanu'r serwm; yna aberthwyd y llygod, tynnwyd y meinweoedd ysgyfaint allan, ac ychwanegwyd saline at y homogenizer gwydr i baratoi homogenate meinwe ysgyfaint 100 g -f1, pennwyd gweithgaredd SOD yr ysgyfaint a'r serwm gan ddull Huangsuyin oxidase, a phenderfynwyd cynnwys MDA trwy ddull anwedd asid thiobarbitwrig.

2.4 Dull paratoi sbesimen microsgopeg electron (3)

Rhennir yr arbrawf yn grŵp rheoli, grŵp model, a grŵp dos uchel. Mae'r dulliau modelu a gweinyddu yr un fath â'r rhai uchod. Ar ôl y weinyddiaeth ddiwethaf, mae 3 llygod o bob grŵp yn cael eu dewis ar hap, ac fe'u rhoddir i farwolaeth trwy wddf, a chymerir yr ochrau dde yn y drefn honno. Meinwe apex yr ysgyfaint, 0.4 mmol, L-1 glutaraldehyde, a 0.04 mmol, gosodiad dwbl gyda L'1 OfeO4, dadhydradiad graddiant aseton, mewnosod Epon 812, plwm-wraniwm staenio electronau, Hitachi H-300 trawsyrru electron microsgop gyda 10,000 i 20,000 chwyddhad Arsylwi newidiadau a newidiadau adeileddol y prif organynnau o dan luosrifau.

2.5 Mynegir canlyniadau prosesu ystadegol yn nhermau degau o bridd s, ac mae cymharu'r ddau fodd sampl yn defnyddio'r prawf-t.

3 Canlyniadau

3.1 Effaith Polysacarid o Cistanche ar oddefgarwch hypocsia mewn llygod sy'n heneiddio

Un awr ar ôl y weinyddiaeth olaf o lygod ym mhob grŵp, profwyd yr amser goddefgarwch hypocsia. Dangosodd y canlyniadau fod yr amser y gallai llygod sy'n heneiddio oddef hypocsia yn sylweddol fyrrach na llygod arferol. Mae'r amser yn sylweddol hir o'i gymharu â'r grŵp model, ond nid oes gwahaniaeth arwyddocaol o'i gymharu â'r grŵp rheoli, sy'n dangos y gall Polysacarid o Cistanche wella goddefgarwch hypocsia llygod sy'n heneiddio yn sylweddol, gweler Tabl 1

3.2 Effaith polysacarid Cistanche ar swyddogaeth gwrthocsidiol llygod sy'n heneiddio

Casglwyd gwaed (serwm) a meinwe'r ysgyfaint (homogenate ysgyfaint) y llygod ym mhob grŵp ar ôl y weinyddiaeth ddiwethaf, a phenderfynwyd SOD a MDA. Canlyniadau Gostyngodd gweithgaredd SOD serwm ac ysgyfaint llygod sy'n heneiddio, a chynyddodd y cynnwys MDA. O'i gymharu â'r grŵp rheoli, roedd y gwahaniaeth yn arwyddocaol. Gall polysacaridau o Cistanche gynyddu gweithgaredd serwm a SOD yr ysgyfaint mewn llygod sy'n heneiddio, a lleihau'r cynnwys MDA. O'i gymharu â'r grŵp rheoli, nid oes gwahaniaeth arwyddocaol, ac mae'r gwahaniaeth gyda'r grŵp model heneiddio yn arwyddocaol, gweler Tablau 2 a 3.

3.3 Effaith Polysacarid o Cistanche ar dywyllwch mewngellol celloedd epithelial alfeolaidd⑷

Mae dull gweithgynhyrchu'r microsgop electron yr un fath ag o'r blaen. Dadansoddiad morffometrig: O dan y microsgop electron, arsylwyd pob sbesimen mewn 10 maes gweld i fesur yr organynnau. Dangosodd y canlyniadau fod mitocondria a chyrff lamellar y grŵp model yn cael eu lleihau, roedd y bilen islawr wedi'i dewychu, a chynyddwyd y polysomau. O gymharu â'r grŵp rheoli, roedd gwahaniaethau sylweddol. Fe wnaeth polysacaridau o grŵp dos uchel Cistanche ei wella. O'i gymharu â'r grŵp model, roedd y gwahaniaeth yn sylweddol, ac yn y bôn roedd yn agos at y grŵp rheoli. Gweler Tab 4.

3.4 Newidiadau yn uwch-strwythur celloedd epithelial yr ysgyfaint mewn llygod sy'n heneiddio'n arbrofol a dylanwad polysacaridau Cistanche

Gellir gweld llygod model sy'n heneiddio o dan ficrosgop electron: mae celloedd epithelial math I alfeolaidd yn haen sengl o fath gwastad gyda thrwch o tua {{0}}.2 pm. Mae'r cnewyllyn yn fach ac yn drwchus. Mae rhai mitocondria, cymhlyg Golgi, a reticwlwm endoplasmig gwasgaredig yn y cytoplasm periniwclear. Cymharol denau, gyda llai o ficroffilamentau a microdiwbylau. Gwelwyd newidiadau histolegol yn ysgyfaint llygod sy'n heneiddio o dan y microsgop electron. Y prif newidiadau oedd celloedd epithelial alfeolaidd wedi'u teipio II. Gostyngodd neu ddiflannodd y microvilli ar wyneb rhydd y celloedd, gwanhawyd y cyrff lamellar, roedd y strwythur lamellar yn aneglur, ac roedd gan ychydig o gelloedd gelloedd lamellar bach. Mae'r corff yn diflannu, ac mae'n sylwedd amorffaidd gwag neu homogenaidd tebyg i stribed gyda dwysedd electronau isel. Mae mitocondria a reticwlwm endoplasmig garw yn cael eu lleihau yn y corff celloedd. Mae pilen islawr celloedd epithelial alfeolaidd yn amlwg wedi'i dewychu, a gellir gweld toreth o gelloedd diaffram a ffibroblastau yn y interstitiwm alfeolaidd (Ffig 1,2). Er bod y bilen niwclear fewnol a'r chwyddo mitocondriaidd i'w gweld yn y grŵp polysacarid Cistanche, gostyngwyd y radd yn sylweddol o gymharu â'r grŵp model (Ffig 3.4). Dangosodd arsylwi o dan ficrosgop electron y grŵp meddyginiaeth fod y celloedd epithelial math yn wastad, gydag arwyneb llyfn, dim cnewyllyn, ac roedd rhai tua 0.1 o drwch. Roedd ychydig o organynnau yn y periniwclews, ac roedd gronynnau radiwm yn weladwy. Mae gan gelloedd Math II fili byr ar yr wyneb, nifer fawr o mitocondria, reticwlwm endoplasmig garw, a chymhleth Golgi yn y cytoplasm (Ffig 5,6).

Mae'r model heneiddio difrod osôn yn seiliedig ar theori radical rhad ac am ddim heneiddio. Mae difrod radical di-ocsigen yn chwarae rhan bwysig yn y broses o heneiddio'r ysgyfaint. Yr ysgyfaint yw'r unig organ sy'n cyfathrebu â'r amgylchedd allanol. Mewn cyfnod penodol o amser, mae anifeiliaid yn cael eu hanadlu'n barhaus ag osôn. Yr ysgyfaint yw'r rhai cyntaf i ddod i gysylltiad ag osôn ac maent fwyaf agored i niwed. Ar ôl i osôn fynd i mewn i'r corff, mae'n cynhyrchu radicalau rhydd anion superoxide hynod weithgar yn gyflym. Mae radicalau rhydd gormodol yn fwy na gallu chwilota'r corff, yn dinistrio ac yn bwyta'r ensymau sborionu radical rhydd (fel SOD) yn y corff, ac yna'n achosi i'r organau a hyd yn oed y corff heneiddio. Yn yr arbrawf hwn, gostyngodd gallu gwrth-hypocsia llygod sy'n heneiddio a achosir gan osôn yn sylweddol, gostyngodd gweithgaredd sylwedd gwrthocsidiol SOD mewn serwm a meinwe'r ysgyfaint, a chynyddodd y metabolyn perocsidiad lipid MDA yn sylweddol. Gyda'r defnydd o Rongrong Duojing 50,100 mg-kg1 trwyth parhaus o lygod heneiddio arbrofol, mae gan y llygod sy'n heneiddio goddefgarwch hypocsia amlwg Cynyddwyd, mae gweithgaredd superoxide dismutase ar gyfer chwilota radicalau rhydd yn cael ei wella. Mae cynnwys metabolion perocsidiad lipid yn cael ei leihau, sy'n dangos y gall polysacaridau o Cistanche wella swyddogaeth gwrthocsidiol llygod sy'n heneiddio.

Mae cyrff lamellar yn y cytoplasm o gelloedd epithelial math n alfeol yn cael eu defnyddio'n aml i fesur swyddogaeth celloedd epithelial. Gelwir secretions cyrff lamellar newyn yn syrffactyddion alfeolaidd, sy'n bodoli ar ryngwyneb hylif aer alfeoli a gallant leihau tensiwn arwyneb yr alfeoli. Gall newidiadau heneiddio'r cyrff lamellar arwain at leihau sylweddau gweithredol arwyneb alfeolaidd. Mae tensiwn wyneb yr alfeoli yn gymharol uchel, ac mae grym tynnu'r alfeoli yn cynyddu, sy'n arwain at grebachu'r alfeoli. Datgelodd arsylwadau microsgopeg electron fod celloedd epithelial alfeolaidd n-math llygod sy'n heneiddio wedi newid yn sylweddol. Gellir gweld bod y corpwscles lamellar yn cael eu gwanhau, mae'r strwythur yn aneglur, mae'r mitocondria yn chwyddo ac yn lleihau, mae'r reticwlwm endoplasmig garw hefyd yn cael ei leihau, ac mae pilen yr islawr yn cael ei drwchu'n sylweddol. Er y gellir gweld newidiadau strwythurol tebyg ar ôl cymhwyso Polysacarid o Cistanche, mae'r radd yn cael ei leihau'n sylweddol, sy'n dangos y gall Polysacarid o Cistanche wella neu ohirio'n sylweddol y newidiadau dirywiol morffolegol yng nghyrff lamellar celloedd epithelial yr ysgyfaint a dirywiad mitocondriaidd mewn llygod sy'n heneiddio. Mae'r rhan fwyaf o strwythur y gell yn gyfan yn y bôn, gan ohirio newidiadau uwch-strwythur yr ysgyfaint. Mae canlyniadau'r astudiaeth hon yn awgrymu y gall polysacaridau o Cistanche leihau'r newidiadau strwythurol a swyddogaethol a achosir gan niwed ocsideiddiol i'r ysgyfaint a achosir gan osôn, gohirio heneiddio'r ysgyfaint, a darparu tystiolaeth arbrofol ar gyfer ymchwil gymhwysol.