Astudiaeth Ragarweiniol Ar Samplau Pasta a Nodweddir Mewn Cyfansoddion Gwrthocsidiol A'u Gweithgaredd Biolegol Ar Gelloedd Arennau

Cyswllt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-bost:audrey.hu@wecistanche.com

Mae Federico Di Marco et al

Crynodeb:Mae pasta yn un o fwydydd sylfaenol yMôr y Canoldirdiet ac am y rheswm hwn, fe'i dewiswyd ar gyfer yr astudiaeth hon i werthuso ei briodweddau gwrthocsidiol. Dewiswyd tri math o basta: gwenith yr hydd, rhyg, a phasta wy. Cynhaliwyd dadansoddiadau nodweddu ansoddol-meintiol ganHPLC-DADi adnabod cyfansoddion gwrthocsidiol. Dangosodd y data bresenoldeb carotenoidau fel lutein a pholyffenolau fel asid indoleasetig, (carotenoidau o {{{{}}}.08 i 0.16 mg/100 g,polyffenolauo 3.7 i 7.4 mg/100 g). Er mwyn asesu effaith y metabolion a ganfuwyd, cynhaliwyd arbrofion in vitro ararenmodelau celloedd: HEK-293 a MDCK. Profwyd safonau -caroten, asid indoleacetig, asid caffeic, detholiadau hydroalcoholig a charotenoid o samplau o basta ym mhresenoldeb asiant gwrthocsidiol i bennu amrywiadau hyfywedd. -caroten ac asid indoleacetig safonau yn cael effaith amddiffynnol ar HEK-293 celloedd tra na chanfuwyd unrhyw effaith ar MDCK. Mae'r crynodiadau a brofir yn debygol yn yr ystod o'r rhai a gyrhaeddir yn y corff ar ôl bwyta prydau pasta safonol. Dangosodd detholiadau cyfoethogi carotenoid a detholiadau hydroalcoholig effeithiau gwahanol, arsylwi achub ar gyfer pasta rhyg dyfyniad hydroalcoholic a pasta gwenith yr hydd dyfyniad cyfoethogi carotenoid, tra dangosodd pasta wy dos mwynach yn dibynnu effeithiau gan dybio ymddygiad pro-oxidant ar grynodiadau uchel. Mae'r canlyniadau rhagarweiniol yn awgrymu olrhain ymddygiadau yn ôl i'r ffytocomplexes cyfan mewn perthynas â moleciwlau sengl a bod angen ymchwilio ymhellach.

Geiriau allweddol:pasta;Môr y Canoldirymborth; polyffenolau; carotenoidau; cyfansoddion gwrthocsidiol;areniechyd;HPLC/DADdadansoddiadau

Mae Cistanche tubulosa yn atal clefyd yr arennau, cliciwch yma i gael y sampl

1. Rhagymadrodd

Er hynny nid oes diffiniad unigryw o'rMôr y Canoldirdiet - oherwydd yr amrywiadau a'r addasiadau mewn traddodiadau coginio nid yn unig o amgylch ardal Môr y Canoldir ond hefyd ledled y byd [1] - gellir meddwl bod gan ddeiet Môr y Canoldir sawl cydran sy'n bodloni meini prawf pwysig ar gyfer diet iach: cynnwys isel o dirlawn asidau brasterog, cynnwys uchel o garbohydradau cyfansawdd, ffibr dietegol a moleciwlau gwrthocsidiol, a digonedd mewn llysiau.

Mae'n anodd sefydlu pa fwydydd, neu gynhwysion gweithredol ynddynt, o'rMôr y Canoldirdiet sydd fwyaf cyfrifol am y manteision iechyd; mae data cronnus yn awgrymu mai ei brif fanteision yw'r cyfuniad o'r amrywiaeth gymhleth ac eang o wahanol faetholion sy'n rhyngweithio'n synergyddol ac yn ychwanegyn [2].

Yn ystod y blynyddoedd diwethaf, mae'r llenyddiaeth gynyddol (astudiaethau arsylwi a threialon rheoli ar hap) wedi dangos y buddion iechyd sy'n gysylltiedig â diet Môr y Canoldir, gan leihau'r risg o ddatblygu clefydau cronig lluosog fel clefydau cardiofasgwlaidd [3-5], diabetes [6-10], canser [11,12], gordewdra [13-15] neu iechyd gwybyddol [16-19] a disgwyliad oes cynyddol [20].

Ymddengys mai gwelliannau mewn pwysedd gwaed [21], proffil lipid [22,23], ymwrthedd i inswlin [24], ac amddiffyniad rhag straen ocsideiddiol, llid, cydgasglu platennau, a chamweithrediad endothelaidd [25-28] yw'r mecanweithiau gweithredu sy'n gyfrifol am effeithiau buddiol ar iechyd cyffredinol. Gallai'r holl effeithiau biolegol hyn a hyrwyddir gan ymlyniad at ffordd o fyw Môr y Canoldir fod yn berthnasol nid yn unig i'r clefydau cronig a grybwyllir uchod ond hefyd ar gyfer atal pydredd arennol yn y boblogaeth gyffredinol. Mae clefyd cronig yr arennau (CKD) yn broblem iechyd cyhoeddus byd-eang, sy'n effeithio ar dros 750 miliwn o bobl ledled y byd ac yn aml yn gweithredu'n dawel a dirwystr diolch i'w gyflwyniad clinigol asymptomatig. Mae gwahanol linellau tystiolaeth wedi tanlinellu'r berthynas gref rhwng diet Môr y Canoldir a chadwraeth arennol [29].

O ystyried yr holl effeithiau uchod fel ffactorau risg ar gyfer dirywiad gweithrediad arennol, gellir ystyried yr aren yn un o'r prif dargedau. Mae meta-ddadansoddiad diweddar o astudiaethau carfan wedi dangos bod dietau seiliedig ar blanhigion fel diet Môr y Canoldir neu ddull dietegol o atal gorbwysedd (DASH) yn gysylltiedig â risg is o ddigwyddiad.CKDac albwminwria yn y boblogaeth gyffredinol [30]. Un esboniad posibl yw bod ffrwythau a llysiau yn cynnwys cyfansoddion bioactif sy'n amddiffyn rhag llid a chamweithrediad endothelaidd sy'n hyrwyddo newidiadau deinamig o'r ffracsiwn hidlo, gan arwain at ostyngiad cynyddol yn y gyfradd hidlo glomerwlaidd, ehangu cyfaint hylif allgellog, cydbwysedd ïon annormal, a hypocsia arennol, yn y pen draw. gan arwain at golli swyddogaeth yr arennau [31-33]. Ar ben hynny, efallai bod y cynnydd yn y defnydd o lysiau, ffrwythau, grawnfwydydd a chodlysiau wedi arwain at ostyngiad yn y defnydd o brotein anifeiliaid gan ddylanwadu'n gadarnhaol ar gydbwysedd asid-sylfaen a hemodynameg glomerwlaidd yaren, gan ei amddiffyn rhag sglerosis glomerwlaidd a cholli swyddogaeth [34-37].

Er gwaethaf hyn, mae yna nifer o astudiaethau gyda data cyferbyniol ar gyfer effaith diet protein uchel ar ddirywiad swyddogaeth arennol yn y boblogaeth gyffredinol [38-41] mae tystiolaeth gynyddol yn awgrymu bod y ffynhonnell protein yn chwarae rhan bwysig wrth gadw swyddogaeth arennol a bod gallai newid o ffynhonnell protein anifail i blanhigyn fod yn fuddiol [42,43].

Pasta yw un o'r bwydydd sy'n cael ei fwyta fwyaf yn y byd ac mae'n un o brif fwydydd diet Môr y Canoldir. Yn draddodiadol, yr Eidal yw prif gynhyrchydd ac arweinydd bwyta pasta, hyd yn oed os yw pasta'n cael ei fwyta ledled y byd am gost isel, blasusrwydd, ac oes silff hirach na chynhyrchion becws eraill [44]. Mae pasta yn ffynhonnell dda o garbohydradau ac egni (mae 100 g o basta wedi'i goginio yn cynnwys tua 31 g o garbohydradau a thua 158 kcal) ond fel arfer mae'n isel mewn lipidau, proteinau, ffosfforws, a photasiwm sy'n gydrannau maethol sydd wedi'u cyfyngu yn y rhan fwyaf o ddietau arennol ar gyfer clefyd yr arennau (ar gael ar-lein yn https://fdc.nal.usda.gov, cyrchwyd ar 1 Rhagfyr 2020). Mae pasta gwenith wedi'i gyfoethogi'n naturiol, sy'n cynrychioli mwyafrif y pasta sydd ar gael yn fasnachol, hefyd yn cynnig lefelau da o thiamin, ribofflafin, niacin, ffolad, haearn, a seleniwm, yn ogystal â pholyffenolau. Ar ben hynny, mae pasta bob amser yn cael ei fwyta mewn cyfuniad ag eitemau bwyd eraill y gellid eu hystyried yn ffynhonnell gryfach o polyffenolau, fel olew olewydd a llysiau. Mae pasta fel arfer yn cael ei gynhyrchu gyda semolina gwenith caled, oherwydd ei briodweddau rheolegol rhagorol, lliw uwch y pasta, ansawdd y coginio, a derbyniad gan y defnyddiwr, ond yn ddiweddar gellir cynhyrchu pasta hefyd gan ddechrau o rawnfwydydd eraill megis reis, gwenith yr hydd, rhyg, sillafu.

Yn ystod y blynyddoedd diwethaf, mae defnyddwyr wedi dod yn fwy ymwybodol y gall diet cytbwys, fel un Môr y Canoldir, effeithio'n gadarnhaol ar iechyd, a dyna pam mae'r diwydiant bwyd yn ceisio bodloni'r gofynion hyn trwy gynhyrchu bwydydd a chynhwysion bwyd o ansawdd a swyddogaethol.

Er bod bwydydd cyfnerthedig wedi'u cynhyrchu at ddibenion iach, gellid annog pobl i'w cymryd yn lle diet cytbwys. Mae hwn yn bwnc mor bwysig i annog yr FDA i gyhoeddi dogfen ad hoc o'r enw "Polisi atgyfnerthu FDA" i roi ateb ar un ochr i'r diwydiant bwyd ac ar y llall i'r byd academaidd [44].

Mae diet cytbwys, digonol ac amrywiol yn gam pwysig tuag at ffordd o fyw hapus ac iach heb y risg o orlwytho gyda rhai cydrannau ychwanegol sydd wedi'u cynnwys mewn bwyd cyfnerthedig. Yn union am y rheswm hwn mae grawnfwydydd anhraddodiadol a ffug-grawnfwydydd wedi'u hailddarganfod sydd wedi paratoi'r ffordd ar gyfer eu defnyddio fel cynhwysion bwyd swyddogaethol gan fod ganddynt rai rhinweddau maethol a swyddogaethol sy'n absennol neu'n ddiffygiol mewn grawnfwydydd traddodiadol. Mae gwenith yr hydd a rhyg yn ffynonellau cyfoethog o ffytochemicals fel polyphenolau, cyfansoddion sydd wedi'u cydberthyn yn gryf â gweithgareddau gwrthocsidiol [45,46].

Wedi'i lansio ym mis Mawrth 2005, roedd Prosiect MOLI-SANI yn cynnwys tua 25,{3}} o ddinasyddion sy'n byw yn Molise (yr Eidal), i werthuso ffactorau amgylcheddol a genetig sy'n sail i glefydau cardiofasgwlaidd, tiwmorau, a chlefydau niwroddirywiol. Yn ôl astudiaeth gan brosiect MOLI-SANI, mae cymeriant pasta yn gysylltiedig â BMI is a lefelau is o ordewdra canolog. Mae llawer o astudiaethau wedi cadarnhau bod dietau calorïau uchel yn arwain at ennill pwysau ac nid diet sy'n cynnwys carbohydradau. Mewn gwirionedd, os yw'r gyfran o basta yn gywir ac nad yw'r saws yn rhy galorig, gall plât o basta fod â chynnwys calorig sy'n parchu'r gofyniad ynni dyddiol [47]. Mae parch mawr i pasta gan fod ei nodweddion wedi'u cysylltu nid yn unig â rheoli pwysau'r corff ond hefyd â nifer o briodweddau iechyd cadarnhaol [48]. Dangosodd astudiaeth reoledig ar hap a gynhaliwyd ar bynciau iach fod cynhyrchion sy'n seiliedig ar ryg yn gwella rheoleiddio glycemig, yn cynyddu hormonau berfeddol sy'n ymwneud â rheoleiddio archwaeth a metaboledd. Mae rhyg yn lleihau lefelau archwaeth ôl-frandio trwy leihau'r awydd i fwyta mewn prydau dilynol, cynyddu syrffed bwyd, a lleihau newyn trwy gynyddu'r hormonau syrffed bwyd GLP-1 (peptid tebyg i glwcagon-1) a peptid YY (PYY). Gwelwyd ymateb glwcos ôl-frandio is mewn grŵp o bobl sy'n bwyta bwydydd sy'n seiliedig ar ryg o'i gymharu â grŵp o bynciau sy'n bwyta gwenith wedi'i buro. Mae hyn yn digwydd oherwydd bod rhyg yn rawnfwyd mynegai glycemig isel y gellir ei ddefnyddio hefyd mewn cleifion diabetig [49]. Gall rhyg wella'r proffil lipid plasma, mewn gwirionedd, mae cymeriant rhyg cyfan yn gysylltiedig yn wrthdro â chrynodiad colesterol LDL, y gymhareb LDL / HDL, a chrynodiad triglyseridau. Mae'r effaith hon oherwydd presenoldeb ffibrau a -glwcanau [50].

Mae pasta yn adnabyddus fel ffynhonnell carbohydradau, ond gall hefyd gynnwys mân gyfansoddion, megis carotenoidau [51], yn enwedig lutein, a rhywogaethau gwrthocsidiol eraill megis polyffenolau. Gellir cyfoethogi'r moleciwlau bioactif hyn mewn gwahanol fathau o basta, yn dibynnu ar y deunyddiau crai. Er enghraifft, mae cynnwys carotenoid gwenith caled yn uwch na chynnwys bara gwenith [52] a gellir cynyddu lefel y gwrthocsidyddion trwy ymgorffori ffracsiwn bran a chnewyllyn cyfan gwenith caled mewn cynhyrchion pasta [53]. Mae gwenith yr hydd yn ffynhonnell sylweddol o gyfansoddion ffenolig, fitaminau, ac asidau amino hanfodol [54], tra bod ychwanegu wy wrth baratoi'r pasta yn cyfleu carotenoidau a lutein. Mae carotenoidau yn cymryd rhan mewn gweithgaredd atal, yn enwedig mewn syndrom llid ac mae eu rôl oherwydd eu priodweddau gwrthocsidiol [55] yn erbyn radicalau rhydd ac ocsigen singlet [56]. Mae pasta yn cynnwys gwahanol fathau o foleciwlau gwrthocsidiol ac ar gyfer defnyddwyr aml, gellir ystyried defnydd mawr yn ffynhonnell bwysig o gyfansoddion iach o'r fath.

Yma rydym yn dangos bod gwahanol fathau o basta, sef gwenith yr hydd, rhyg, a phasta wy, yn cynnwys symiau amrywiol o gyfansoddion gwrthocsidiol, sydd â rôl i wella hyfywedd celloedd arennol ar gyflwr cyson neu ar anwythiad straen ocsideiddiol.

2. Defnyddiau a Dulliau

2.1. Samplau

Dadansoddwyd a phrofwyd tri sampl o basta wedi'i goginio: un sampl o basta gwenith yr hydd gwenith cyflawn (1), un sampl o basta rhyg gwenith cyflawn (2), ac un sampl o basta wy o flawd durum gwenith dl dl wedi'i falu â charreg (3).

2.2. Paratoi Samplau Pasta

Coginiwyd cyfansymiau o 50 g o basta gwenith yr hydd gwenith cyflawn neu basta rhyg gwenith cyflawn mewn 500 ml o ddŵr am 7 munud; Coginiwyd 50 g o basta wy o flawd gwenith caled mewn 500 ml o ddŵr am 1 munud, fel y nodwyd gan y gwneuthurwr.

I gael darnau cyfoethogi mewn carotenoidau, 10 go pasta wedi'i goginio eu toddi mewn 100 ml aseton, oer sonicated am 30 munud. Cafodd y sampl ei centrifugio am 5 munud ar 5000 rpm, mae'r supernatant wedi'i anweddu'n sych gydag anweddydd cylchdro a diddymwyd y gweddillion mewn aseton neu DMSO yn dibynnu ar y dadansoddiad i lawr yr afon. Er mwyn cael darnau wedi'u cyfoethogi mewn polyffenolau, toddwyd 10 g o bob sampl o basta wedi'i goginio mewn 50 ml o 70:30 EtOH/H2O ar pH 3.2. Ysgwyd y samplau am 24 awr, wedi'u centrifugio am 5 munud ar 1400 rpm. Cafodd y sampl ei allgyrchu am 5 munud ar 5000 rpm a chasglwyd a dadansoddwyd y supernatant yn HPLC-DAD, tra bod aliquot yn sych anweddu, a diddymwyd y gweddillion yn DMSO ar gyfer triniaeth celloedd.

2.3. Dadansoddiad HPLC-DA-MS

Cynhaliwyd dadansoddiadau meintiol o garotenoidau a pholyffenolau gan ddefnyddio cromatograffaeth hylif HP 1100 wedi'i gyfarparu â synhwyrydd DAD ac a reolir gan weithfan HP 9000 (Agilent Technologies, Palo Alto, CA, UDA) ac yn gysylltiedig â sbectromedr cronni. gyda rhyngwyneb API/electrochwistrellu (Agilent Technologies). Roedd amodau gweithredu'r sbectromedr màs fel a ganlyn: tymheredd nwy, 350 ◦C; cyfradd llif nitrogen, 11.0 L/mun; pwysedd nebulizer, 40 psi; tymheredd pedwarpol, 100 ◦C; a foltedd capilari, 4000 V. Gweithredwyd y sbectromedr màs mewn moddau positif a negatif ar80–180 eV.

Gwahanwyd cyfansoddion gan ddefnyddio colofn 250 × 4.6 mm id, 5 µm LUNA C18 (Phenomenex, Torrance, CA, UDA). Cofnodwyd sbectra UV/Vis yn yr ystod 190-600 nm a chaffaelwyd y cromatogramau ar 250, 280, 330, 350, a 450 nm. Dadansoddwyd y samplau yn ôl elution graddiant ar gyfradd gymrawd o 0.8 mL/munud. Y cam symudol ar gyfer carotenoidau oedd system graddiant toddyddion llinellol aml-gam (toddydd A: aseton, toddydd B: H2O, pH 3.2 gan asid fformig), gan ddechrau o 80 y cant aseton hyd at 100 y cant mewn 30 munud. cafodd polyffenolau eu hanwybyddu gan ddefnyddio'r graddiant canlynol: o 90 y cant H2O (wedi'i addasu i pH 3.2 gan asid fformig) i 100 y cant CH3CN mewn 40 munud. Roedd yr holl doddyddion a ddefnyddiwyd o burdeb gradd HPLC (BDHLaboratory Supplies, Poole, UK).

2.4. Dadansoddiad Meintiol

Perfformiwyd meintioli cyfansoddion polyphenolig unigol yn uniongyrchol gan HPLC-DAD gan ddefnyddio cromlin atchweliad pum pwynt (R2 Yn fwy na neu'n hafal i 0.998) yn yr ystod o 0–30 µg ar sail safonau dilys. Yn benodol, pennwyd flavonols ar 350 quercetin doniol 3-O-glucoside fel cyfansawdd cyfeirio tra bod deilliadau asid caffeic yn cael eu pennu ar 330 nm gan ddefnyddio asid clorogenig fel cyfansawdd cyfeirio a deilliad asid asetig indole ar 280 nm gan ddefnyddio 3 asid indoleacetig (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, UDA). Penderfynwyd ar garotenoidau ar 450 nm gan ddefnyddio beta-caroten fel cyfansawdd cyfeirio (Extrasynthese, Lione, Francia). Ym mhob achos, cyfrifwyd crynodiadau gwirioneddol y deilliadau ar ôl cymhwyso cywiriadau ar gyfer gwahaniaethau mewn pwysau moleciwlaidd.

2.5. Cyfanswm Cynnwys Ffenolig

Penderfynwyd ar gyfanswm y cynnwys ffenolig gan ddefnyddio dull Folin-Ciocalteu, a ddisgrifiwyd gan Singleton et al. [57] ac wedi'i addasu ychydig yn ôl Dewanto et al. [58]. At 125 µL o'r detholiad sampl wedi'i wanhau'n addas, ychwanegwyd 0.5 ml o ddŵr wedi'i ddadïoneiddio a 125 µL o'r adweithydd Folin-Ciocalteu. Cadwyd y gymysgedd am 6 munud ac yna ychwanegwyd 1.25 ml o hydoddiant Na2CO3 dyfrllyd 7 y cant. Addaswyd y gyfrol derfynol i 3 ml gyda dŵr. Ar ôl 90 munud, mesurwyd yr amsugniad ar 760 nm yn erbyn dŵr fel gwag. Mynegir cyfanswm y ffenoligau fel cyfwerth asid galig (GAE, mg asid galig/sampl 100 g) trwy gromlin graddnodi asid galig. Roedd y gromlin raddnodi yn amrywio o 20 i 500 µg/mL (R2=0.9969) [57,58].

2.6. Diwylliant Cell

Cafodd celloedd Arennau Embryonig Dynol 293 (HEK-293) a chelloedd aren cwn Madin-Darby (MDCK) eu meithrin mewn DMEM ynghyd â GlutaMAX, 10 y cant (v/v), serwm buchol ffetws, penisilin 100 U/mL a 100 µg /mL streptomycin ar 37 ◦C gyda 5 y cant o CO2.

2.7. Assay MTT

Cafodd 5{{10}}00 o gelloedd/ffynnon MDCK a HEK-293 eu hadu mewn 96 o blatiau ffynnon a chaniatáu iddynt lynu am 24 awr. Ar gyfer astudiaethau hyfywedd, deorwyd celloedd am 24 h i 72 h gyda beta caroten, indole-3-asid asetig, asid caffeic (yn DMSO), a darnau pasta yn unig neu ym mhresenoldeb ffthalad monoperocs magnesiwm (MMPP, Sigma-Aldrich). , St. Louis, MO, UDA). Defnyddiwyd DMSO yn y cyfrwng ar grynodiadau cyfartal i'r rhai a ddefnyddiwyd ar gyfer y cyfansoddion a brofwyd ar gyfer samplau heb eu trin. Roedd y crynodiad a brofwyd ar gyfer y safonau yn amrywio o 2 pM i 10 µM, tra ar gyfer MMPP o 0.001 i 0.05 mg/mL. Mesurwyd hyfywedd celloedd 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-deuffenyl tetrazolium bromid (MTT, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, UDA). Deorwyd y platiau ar 37 ◦C am 1 h ac yna cafodd y Formazan a gynhyrchwyd gan y gostyngiad MTT ei hydoddi mewn DMSO. Canfuwyd amsugnedd ar ddarllenydd microplate (Mithras LB 940-Berthold) ar 570 nm. Cyfrifwyd canran hyfywedd celloedd gan ddefnyddio'r gymhareb AbsTEST/AbsCTRL.

2.8. Dadansoddiad Ystadegol

Perfformiwyd pob arbrawf mewn pedair gwaith a'i ailadrodd o leiaf dair gwaith. Aseswyd gwahaniaethau mewn canrannau hyfywedd gan ddefnyddio prawf-t Myfyriwr pâr ac ANOVA dwy ffordd ac yna prawf posthoc gyda chywiriad Holm ar gyfer cymariaethau lluosog dros metabolion crynodiadau (p < 0.05).="" mynegwyd="" canlyniadau="" fel="" gwall="" cymedrig="" ±="" safonol="" a="" pherfformiwyd="" y="" dadansoddiad="" gan="" amgylchedd="" r-studio="" [59]="" ar="" gyfer="" fersiwn="" r="" 3.6.3="" [60]="" gan="" ddefnyddio'r="" pecyn="" "tidyverse"="">

3. Canlyniadau a Thrafodaeth

3.1. Penderfynu Ansawdd Cemegol Samplau Pasta

Mae gwybodaeth faethol bwyd yn caniatáu gwneud dewisiadau gwybodus am fwyd a diet. Yn draddodiadol, caiff pasta ei baratoi o semolina ond hyd yn oed gyda grawnfwydydd eraill, mae pob un ohonynt yn cynnwys startsh fel prif gyfansoddyn ac yna protein, braster, fitaminau, mwynau a chyfansoddion bioactif [62]. Mae Tabl S1 yn adrodd y data maeth.

Er mwyn cymharu gwerthoedd maethol sawl math o basta sydd wedi'i gyfoethogi mewn cyfansoddion bioactif oherwydd y gwahanol ffynonellau o rawnfwydydd neu ychwanegu at gynhwysion penodol, dadansoddwyd pasta gwenith yr hydd, pasta rhyg a phasta wy gennym. Er mwyn cael darnau wedi'u cyfoethogi yn yr is-ddosbarthiadau amrywiol o gyfansoddion sy'n bresennol yn y samplau pasta, cynhaliwyd a dadansoddwyd echdyniadau hydroalcoholig ac aseton. Nodwyd polyffenolau unigol yn betrus gan ddefnyddio data o ddadansoddiad HPLC-DAD-MS trwy gymharu a chyfuniad o'u hamseroedd cadw a sbectrometreg màs a sbectra UV (gweler Ffigurau S1-S5 am yr un enghraifft o sbectra MS) a chymharu canlyniadau â safonau (kaempferol, quercetin, rutin, ac asid ferulic) a gweithiau llyfryddol blaenorol. Yn benodol, mewn darnau hydroalcoholic, nodwyd deilliadau flavonoids, caffeic, ac asid indoleacetig (Tabl 1): y deilliad asid indoleacetig yw'r prif gyfansoddyn fel y disgrifiwyd o'r blaen hyd yn oed ar gyfer semolina. [63]. O ystyried cyfansoddiadau cymharol, dangosodd pasta gwenith yr hydd lefelau uwch o flavonoids, yn arbennig, deilliadau quercetin yw'r prif flavonols fel yr adroddwyd yn flaenorol mewn gwenith yr hydd [64,65], a phresenoldeb dibwys o ddeilliadau asid caffeic; dangosodd pasta rhyg lefelau uwch o ddeilliadau asid caffeic, yn arbennig, asid ferulic [66] a chynnwys isel o flavonoidau; pasta wy a gyflwynwyd dim ond crynodiad isel o flavonoids (deilliad apigenin [67]) a dim presenoldeb deilliadau asid caffeic.

Er enghraifft, cyflwynir proffiliau cromatograffig samplau pasta wedi'u coginio, a gofnodwyd ar 350 nm, yn Ffigur 1. Mae'r ffigur yn dangos cyfansoddiad ansoddol y samplau a ddadansoddwyd.

Lutein oedd y prif garotenoid a nodwyd yn y darnau aseton, gyda chynnwys cymharol tebyg mewn perthynas â'r rhywogaethau carotenoid cyffredinol, fel y dangosir yn Nhabl 2, yn unol ag astudiaethau blaenorol [68]. Ni chanfuwyd carotenoidau mewn pasta rhyg.

Mae presenoldeb metabolion eilaidd gwrthocsidiol wedi'i werthuso yn y samplau pasta hefyd (Tabl 3). Aseswyd cyfanswm cynhwysedd gwrthocsidiol bio-gydrannau, sy'n debygol o ganlyniad i weithgaredd ffenol/polyffenol a didynnwyd nifer y moleciwlau o'r fath.

3.2. Effaith Indole-3-Asid Asetig,8-Caroten, ac Asid Caffeic ar Hyfywedd Celloedd

Mae diet Môr y Canoldir wedi'i gydnabod fel ffynhonnell moleciwlau gwrth-ocsidydd, sy'n amddiffyn yr organeb rhag straen ocsideiddiol ac yn cefnogi'r statws iach [2]. Felly, roeddem yn meddwl tybed a all y biomoleciwlau a ganfyddir yn ein samplau pasta effeithio ar hyfywedd celloedd ac i ba raddau. Fe wnaethom ddefnyddio celloedd arennau iach HEK-293 a MDCK i bennu gweithgaredd asid indoleacetig, -caroten, a chyfansoddion safonol asid caffeic. Mae'r aren yn arbennig o agored i straen ocsideiddiol ac mae cronni radicalau rhydd yn arwain at swyddogaeth nam arennol [69]. Deorwyd celloedd â chrynodiad sgalar o'r cyfansoddion safonol a mesurwyd hyfywedd celloedd ar wahanol adegau (Ffigur 3 a Ffigur S6).

Canfuwyd nad oeddent yn cael unrhyw effaith wenwynig ar gelloedd HEK{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{013}}}}}}}}}}}}}}}) gelloedd ar adegau deori . Roedd -caroten yn unig yn lleihau hyfywedd celloedd mewn modd siâp u ar gelloedd HEK-293 ac mewn modd dibynnol ar ddos ​​mewn celloedd MDCK (Ffigur 3). Yn rhyfeddol, mae'r crynodiadau sy'n debygol o gyrraedd yn y corff ar ôl bwyta pryd pasta safonol (80 gr fel arfer) yn yr ystod o'r rhai a brofwyd isaf (2 × 10_5 -2 × 10_4 uM, [70) ,71]), a ddarparodd welliant gwan i hyfywedd y ddwy linell gell. Ar y llaw arall, mewn crynodiadau uwch uwchlaw 0.2 uM, y gellir eu cael yn ffarmacolegol yn unig, dangosodd asid caffeig welliant sylweddol yn hyfywedd y gell, tra dangosodd asid indoleasetig a -caroten effeithiau tebyg ynghyd â chynnydd crynodiad (2-20 uM ) mewn celloedd HEK{-293 ar hyd yr amser.

3.3. Effaith Indole-3-Asid Asetig, -Caroten, ac Asid Caffeic ar Gelloedd sy'n cael eu Trin â MMPP

Fe wnaethom feddwl nesaf a all asid indoleacetig, -caroten, ac asid caffeic wrthweithio straen a achosir gan yr asiant ocsideiddio MMPP. Yn gyntaf, gwnaethom brofi'r effaith MMPP trwy amlygu celloedd HEK-293 a MDCK i wanediadau cyfresol (0.{4}} 05-0.05 mg/mL) i'r cyffur a phennwyd hyfywedd y gell. Sylwyd ar ostyngiad dibynnol dos yn dilyn triniaeth MMPP ac roedd yr IC50 yn gymaradwy yn y ddwy linell gell a brofwyd. Ar ôl deori gyda 20–25 µg/mL MMPP gostyngwyd hyfywedd y gell yn sylweddol i tua 50–60 y cant (Ffigur 4) a chyfrifwyd mai'r crynodiad atal hanner uchaf (IC50) oedd 26 µg/mL ar gyfer HEK{{16} } a 22 µg/mL ar gyfer MDCK.

Yna, fe wnaethon ni brofi gweithgaredd amddiffynnol ein moleciwlau gwrth-ocsidydd ar gelloedd wedi'u trin â MMPP, trwy ychwanegu at y cyfryngau cell gyda 2 × 10_5 nM indoleacetig, -caroten, neu asid caffeic. Cadarnhawyd effaith ychydig yn gadarnhaol ar hyfywedd celloedd HEK-293 a MDCK trwy ddefnyddio'r safonau fel y cyfryw ar y dos sy'n debygol o ddeillio o ddogn o basta (Ffigur 5).

Yn ôl y disgwyl, gostyngodd MMPP hyfywedd celloedd i 60-65 y cant ; mae'r driniaeth ag asid mewndoleacetig neu -caroten yn gwrthweithio'r effaith MMPP ac yn achub hyfywedd y gell 30 y cant (p < 0.001)="" a="" 27="" y="" cant="" (p=""> 0.01) yn y drefn honno ar gelloedd HEK-293, tra nad oedd asid caffeic yn cael unrhyw effaith arwyddocaol. Ym mhresenoldeb asiant ocsideiddiol, dangosodd beta-caroten ac asid indoleacetig effaith amddiffynnol ar y celloedd ar grynodiad isel, tra nad oedd asid caffeic yn gwrthweithio straen ocsideiddiol ar y crynodiad sydd ei angen i wella hyfywedd celloedd. Mae'r effeithiau cadarnhaol hynny'n debygol o ganlyniad i briodweddau gwrthocsidiol asid indoleasetig a charotenoidau a all wrthbwyso'n sylweddol sytowenwyndra cyfryngol MMPP ar y dos a ddefnyddir yn y cyflwr arbrofol hwn. Serch hynny, ni welwyd unrhyw achubiaeth sylweddol ar gelloedd MDCK a driniwyd gan MMPP, sy'n awgrymu, hyd yn oed os oedd safonau yn unig yn dangos effaith gadarnhaol iawn ar hyfywedd celloedd, nad ydynt yn ddigon i fynd i'r afael â'r straen ocsideiddiol a achosir gan MMPP. Mae'n ymddangos bod celloedd embryonal HEK 293 yn fwy prydlon i drefnu llinell amddiffyn rhag straen na MDCK oedolion, yn ôl pob tebyg oherwydd systemau homeostasis rhydocs cellog ychwanegol.

3.4. Effaith y Ffracsiwn Wedi'i Gyfoethogi â Charotenoid sy'n Deillio o Basta ar Sytowenwyndra a Achosir gan MMPP

Er mwyn gwerthuso effeithiau'r ffracsiynau wedi'u cyfoethogi â charotenoid sy'n deillio o echdynnu aseton o basta gwenith yr hydd a phasta wy ar gelloedd arennol ym mhresenoldeb straen ocsideiddiol, deorwyd celloedd HEK-293 â chrynodiadau gwahanol o echdynion o 2 × { {3}} uM i 2 × 10_3 uM ym mhresenoldeb MMPP am 72 h (Ffigur 6, a Thabl S2). Mae'r crynodiad a ddefnyddir yn cyfeirio at y crynodiad -caroten a ganfyddir yn y dyfyniad (Tabl2). Roedd y cynnwys lutein yn amrywio o 1.5 × 10_6 uM i 1.5 × 10_3 uM mewn pasta gwenith yr hydd ac o 1.34 × 10_6 uM i 1.34 × 10_3 uM mewn pasta wy.

Yn y ddau echdyniad aseton, roedd presenoldeb ffytocomplexes naturiol, yn dangos effeithiau gwahanol mewn perthynas â'r safon sengl, gan arwain at fwy o weithgaredd mewn crynodiadau is. Wrth i grynodiad darnau o basta wyau gynyddu, gwelwyd gostyngiad yn hyfywedd celloedd. Achosodd y crynodiad isaf o echdynion carotenoid (2 × 10−6 µM) effaith gadarnhaol gymedrol yn unig neu ym mhresenoldeb MMPP ar gelloedd HEK-293. Cynhyrchodd echdyniad pasta gwenith yr hydd welliant yn hyfywedd celloedd fel y darn yn unig, ond hefyd ym mhresenoldeb MPP yn amrywio o 32 ± 5 y cant ar y crynodiad isaf i 21 ± 9 y cant ar gyfer 2 × 10 −4 µM.

Aseswyd gweithgaredd echdynion aseton hefyd ar gelloedd MDCK ym mhresenoldeb neu absenoldeb MMPP a'i gymharu â'r hyn a gafwyd mewn celloedd HEK-293 (Ffigur 7 a Thabl S2).

Rhoddodd detholiadau wedi'u cyfoethogi â charotenoidau effaith hyfywedd cyffredinol ar bob crynodiad a brofwyd ar gyfer y ddau fath o basta. O ran gwenith yr hydd HEK-293, rhoddodd detholiad pasta achubiaeth well ar driniaeth MMPP ar gyfer yr holl ddosau yn amrywio o 50 ± 7 y cant i 82 ± 5 y cant o'i gymharu â chelloedd HEK-239; roedd detholiadau o basta wy yn achubiaeth fach yn unig ar y crynodiad isaf o garotenoidau 2 × 10_6 uM ym mhresenoldeb MMPP, sy'n awgrymu bod cyfansoddiad penodol echdynion yn chwarae rhan allweddol yn yr ymateb. Felly, dangosodd pasta gwenith yr hydd fwy o gapasiti achub ar hyfywedd y gell mewn perthynas â phasta wy ac ers i'r arbrofion gael eu perfformio gan ddefnyddio'r un faint o -caroten, gallai'r gwahaniaeth fod oherwydd presenoldeb mân gyfansoddion, megis cyfansoddion flavonoids, yn uwch. yn y cyn.

Mae rhywogaethau carotenoidau yn ymwneud â gwahanol adweithiau cemegol sy'n creu natur ddeuol o ocsidydd a gwrth-ocsidydd yn dibynnu ar y cyd-destun biolegol a'u crynodiadau: mae'r adweithedd uchel hwn oherwydd presenoldeb y bondiau dwbl cyfun [72]. Roedd eu rôl gwrthocsidiol yn gysylltiedig â'r gallu i ddadleoli'r electronau a roddwyd gan rywogaethau ocsideiddiol a radicalau [73,74]. Ym mhresenoldeb amodau ocsideiddiol uchel, gellir trosi eu gweithgaredd yn pro-oxidant [75]. Yn ein hachosion ni, gwelwyd y canfyddiad hwn mewn pasta wy ar gyfer HEK-293 (ar ei ben ei hun ac ym mhresenoldeb MMPP) a chelloedd MDCK ym mhresenoldeb MMPP, lle roedd dosau gwahanol o echdyniad aseton yn cynhyrchu effeithiau croes.

3.5. Effaith Detholiad Hydroalcoholig ar Sytowenwyndra a Achosir gan MMPP

Wedi hynny, gwnaethom werthuso effeithiau'r darnau hydroalcoholig o basta gwenith yr hydd, pasta rhyg, a phasta wy ar gelloedd arennol trwy brofi crynodiadau gwahanol yn amrywio o 5 × 10_5 uM i 5 × 10_1 uM gyda neu heb MMPP (Ffigur 8a Thabl S3). Mae'r crynodiad a ddefnyddir yn cyfeirio at grynodiad cyfanswm y cynnwys ffenolig a ganfyddir yn y dyfyniad (Tabl 3). Yn ôl cynnwys y samplau pasta a adroddwyd yn Nhabl 1, ar gyfer pasta gwenith yr hydd, graddiwyd crynodiad asid Indoleacetig o 1.85 × 10_5 uM i 1.85 × 10_1 uM, ar gyfer deilliadau asid caffeic oedd safle o 3.5 × 10_6 uM i 3.5 × 10_2 uM ac ar gyfer flavonoids roedd cynnwys yn graddio o 2.8 × 10_5 uM i 2.8 × 10_1 uM; ar gyfer pasta rhyg, roedd crynodiad asid Indoleacetig yn graddio o 2.2 × 10_5 uM i 2.2 × 10_1 uM, ar gyfer asid caffeic yn deillio o 1.95 × 10_5 uM i 1.95 × {{37} } uM ac ar gyfer rhywogaethau flavonoids o 8.5 × 10_6 uM i 8.5 × 10_2 uM; ar gyfer pasta wy, roedd y crynodiad o asid Indoleacetig yn graddio o 4.25 × 10_5 uM i 4.25 × 10_1 uM, ar gyfer rhywogaethau flavonoids o 7.5 × 10_6 uM i 1.85 × 10_2 uM tra nad oedd unrhyw ddeilliadau asid caffeic yn bresennol.

Ni chafodd echdyniad hydroalcoholig o basta wy unrhyw effaith arwyddocaol ar hyfywedd HEK- 293 yn annibynnol ar bresenoldeb straen ocsideiddiol. Dangosodd detholiad o basta gwenith yr hydd welliant yn hyfywedd celloedd ar driniaeth MMPP yn unig ar y crynodiad uchaf (28 ± 6 y cant). Dangosodd detholiad pasta rhyg yn unig welliant cyffredinol yn hyfywedd celloedd ar gyfer yr holl ddosau yn amrywio o 14 ± 7 y cant i 18 ± 1 y cant yn ogystal ag ym mhresenoldeb MMPP o 27 ± 3 y cant i 13 ± 3 y cant . Arweiniodd y cymhleth Phyto a gyflwynwyd yn y darnau i fod yn fwy gweithredol na safonau sengl, gan gael effaith ar hyfywedd celloedd ar grynodiadau is o gymharu â'r olaf. Mae'r canlyniadau hyn yn awgrymu, yn yr echdynion hydroalcoholig, y gellid priodoli'r prif rôl yn yr achub i bresenoldeb deilliadau asid caffeic, arsylwi achubiad uwch ar gyfer pasta rhyg ac effaith is / dibwys ar orffennol wyau, lle nad oes modd eu canfod.

Yna profwyd y dyfyniad hydroalcoholig ar gelloedd MDCK yn yr un amodau ag o'r blaen ac aseswyd hyfywedd y gell (Ffigur 9 a Thabl S4).

Dangosodd y detholiad hydroalcoholig o wenith yr hydd a phasta wy effeithiau cyferbyniol ar hyfywedd celloedd: mae'r cyntaf yn ei gynyddu, tra bod yr olaf yn ei leihau; ni chanfuwyd unrhyw effaith ar driniaeth MMPP ar gyfer y ddau. Nid oedd detholiad o basta rhyg yn unig yn dangos unrhyw effaith nodedig ar hyfywedd celloedd, ond mae'n datgelu effaith amddiffynnol gref yn erbyn straen ocsideiddiol wedi'i gyfryngu gan MMPP ar bob crynodiad yn amrywio o 50 ± 7 y cant i 61 ± 21 y cant. Mewn amodau safonol.

Yn absenoldeb MMPP, mae'n ymddangos bod cynnwys uchel asid indoleacetig yn y darn o basta wy yn cael effaith wenwynig ar hyfywedd celloedd. Wrth gymharu'r modelau dwy gell, gwelsom ymddygiadau gwahanol mewn perthynas â'r pasta gwenith yr hydd a rhyg yn absenoldeb MMPP. Yn benodol, dangosodd HEK-293 gynnydd mewn hyfywedd gyda'r olaf, tra bod MDCK gyda'r cyntaf. Mae'r gwahaniaethau'n gysylltiedig â gweithrediad y cyfadeiladau ffotograffau a nodweddir gan gynnwys uwch o flavonoids ar gyfer y pasta gwenith yr hydd. Mae'r achub ar hyfywedd celloedd ymhlith samplau, fel y gwelwyd ar gyfer y ddwy linell gell, yn cyfateb i gynnwys cynyddol deilliadau asid caffeig mewn pasta rhyg.

Gallai astudiaeth o'r rhyngweithio rhwng polyffenolau sy'n cynnwys ffytocomplexes a chelloedd arennol helpu i ymchwilio i'r effeithiau pwysig hysbys ar ffisioleg arennol a achosir gan y cyfansoddion hynny [76], gan ganolbwyntio ar un o'r cerbydau posibl, pasta, sydd fel arfer yn gysylltiedig â diet iach arennol. Fel rheol gyffredinol, mae gan fetabolion polyphenolau hanner oes plasma o ychydig oriau ac maent yn cael eu dileu'n gyflym gan yr aren a'r afu: y llwybr ysgarthiad wrinol a bustlog. Mae cyfanswm y metabolion polyphenol sy'n cael eu hysgarthu mewn wrin yn cydberthyn nid yn unig â'u crynodiad plasma uchaf ond hefyd â'u gallu i gael eu hysgarthu gan y bustlog yn hytrach na'r llwybr wrinol. Er enghraifft, mae ysgarthiad wrinol o quercetin a'i glycosidau yn cyfrif am 0.3-1.4 y cant o'r dos a amlyncwyd [77]; Mae asid caffeic ac asidau ferulic yn cyfrif am 5.9 y cant a 27 y cant yn y drefn honno. Felly, gall polyffenolau sy'n deillio o basta gael effaith gadarnhaol ar gelloedd arennol yn dibynnu ar eu

swm a metaboledd. Mae angen astudiaethau pellach i ddiffinio eu cyfraniad i iechyd yr arennau yn well.

Deunyddiau Atodol:Mae'r canlynol ar gael ar-lein yn https://www.mdpi.com/article/ 10.3390/nu13041131/s1, Tabl S1: Tabl Maeth. Tabl S2—Canfod amrywiad hyfywedd celloedd HEK-293 a MDCK wedi'i ddeor gyda swm cynyddol o ffracsiwn wedi'i gyfoethogi â charotenoid o basta gwenith yr hydd a phasta wyau ar ganolig a MMPP ar gyfer 72 (HEK-293) a 24 ( MDCK) oriau. *p < {{20}}.5,="" **="" p="">< 0.01,="" ***="" p="">< {{30}}.001="" .="" tabl="" s3="" -="" canfod="" amrywiad="" hyfywedd="" celloedd="" hek-293="" wedi'i="" ddeor="" gan="" y="" swm="" cynyddol="" o="" echdyniad="" hydroalcoholig="" o="" basta="" gwenith="" yr="" hydd,="" pasta="" rye,="" a="" phasta="" wy="" ar="" ganolig="" a="" mmpp="" am="" 72="" h.="" *="" p="">< 0.5,="" **="" p="">< 0.01,="" ***="" p="">< 0.001.="" tabl="" s4="" -="" canfod="" amrywiad="" hyfywedd="" celloedd="" mdck="" wedi'i="" ddeor="" gyda="" swm="" cynyddol="" o="" echdyniad="" hydroalcoholig="" o="" basta="" gwenith="" yr="" hydd,="" pasta="" rye,="" a="" phasta="" wy="" ar="" ganolig="" a="" mmpp="" am="" 24="" h.="" *="" p="">< 0.5,="" **="" p="">< 0.01,="" ***="" p="">< 0.001.="" ffigur="" s1:="" sbectra="" ms="" o="" kaempferol="" mewn="" echdyniad="" hydroalcoholig="" pasta="" wedi'i="" goginio="" gwenith="" yr="" hydd.="" ffigur="" s2:="" sbectra="" ms="" o="" quercetin="" mewn="" echdyniad="" hydroalcoholig="" pasta="" wedi'i="" goginio="" gwenith="" yr="" hydd.="" ffigur="" s3:="" sbectra="" ms="" o="" rutin="" mewn="" echdyniad="" hydroalcoholig="" pasta="" wedi'i="" goginio.="" ffigur="" s4:="" ms="" sbectra="" o="" asid="" ferulic="" un="" mewn="" pasta="" wedi'i="" goginio="" rhyg="" dyfyniad="" hydroalcoholic.="" ffigur="" s5:="" sbectra="" ms="" o="" glycosidau="" apigenin="" mewn="" detholiad="" hydroalcoholig="" pasta="" wedi'i="" goginio'n="" wyau.="" ffigur="" s6:="" darganfod="" hyfywedd="" celloedd="" hek-293="" wedi'i="" ddeor="" â="" swm="" cynyddol="" o="" asid="" indoleacetig,="" -caroten="" ac="" asid="" caffeic="" am="" 24="" (a)="" a="" 48="" (b)="" awr="" gwerthoedd="" a="" adroddwyd="" i="" gyfateb="" i="" gymedrig="" hyfywedd="" celloedd="" â="" gwall="" safonol="" dros="" dri="" atgynhyrchiad="" biolegol.="" cyfrifwyd="" canran="" hyfywedd="" celloedd="" gan="" ddefnyddio'r="" gymhareb="">

References

1. Lacatus,u, CM; Grigorescu, ED; Floria, M.; Onofriescu, A.; Mihai, BM Deiet Môr y Canoldir: O ddiwylliant bwyd sy'n cael ei yrru gan yr amgylchedd i bresgripsiwn meddygol sy'n dod i'r amlwg. Int. J. Amgylch. Res. Iechyd y Cyhoedd 2019, 16, 942.

2. Jacobs, DR; Gros, MD; Tapsell, LC Synergedd bwyd: Cysyniad gweithredol ar gyfer deall maeth. Yn. J. Clin. Nutr.2009, 89, 1543S.

3. De Lorgeril, M.; Salen, P.; Martin, J.-L.; Monjaud, I. ; Oedi, J. ; Mamelle, Deiet N. Môr y Canoldir, Ffactorau Risg Traddodiadol, a Chyfradd Cymhlethdodau Cardiofasgwlaidd Ar ôl Cnawdnychiant Myocardaidd. Cylchrediad 1999, 99, 779–785.

4. Psaltopoulou, T. ; Naska, A.; Orfanos, P.; Trichopoulos, D.; Mountokalakis, T.; Trichopoulou, A. Olew olewydd, diet Môr y Canoldir, a phwysedd gwaed rhydwelïol: astudiaeth Ymchwiliad Darpar Ewropeaidd Gwlad Groeg i Ganser a Maeth (EPIC). Yn. J. Clin. Nutr. 2004, 80, 1012–1018.

5. Estruch, R. ; Rhosyn.; Salas- Salvad6, J.; Covas, M.-I.; Corella, D.; Ar6s, F. ; G6mez-Gracia, E.; Ruiz-Gutierrez, V.; Fiol, M.; Lapetra, J. ; et al. Atal sylfaenol o glefyd cardiofasgwlaidd gyda diet Môr y Canoldir. Z. Gefassmedizin 2013, 10, 28 .

6. Uusitupa, M. ; Khan, TA; Viguiliouk, E.; Kahleova, H.; Rivellese, AA; Hermansen, K.; Pfeiffer, A. ; Thanopoulou, A.; Salas- Salvad6, J.; Schwab, U.; et al. Atal diabetes math 2 trwy newid ffordd o fyw: Adolygiad systematig a meta-ddadansoddiad. Maetholion 2019, 11, 2611.

7. Jannasch, F.; Kröger, J.; Schulze, MB Patrymau dietegol a diabetes Math 2: Adolygiad systematig o lenyddiaeth a meta-ddadansoddiad o ddarpar astudiaethau. J. Nutr. 2017, 147, 1174–1182.

8. Esposito, K. ; Chiodini, P.; Maiorino, MI; Bellastella, G.; Panagiotakos, D.; Giugliano, D. Pa ddeiet ar gyfer atal diabetes math 2? Meta-ddadansoddiad o ddarpar astudiaethau. Endocrinaidd 2014, 47, 107–116.

9. Huo, R. ; Du, T. ; Xu, Y. ; Xu, W. ; Chen, X. ; Haul, K. ; Yu, X. Effeithiau diet ar ffurf Môr y Canoldir ar reolaeth glycemig, colli pwysau a ffactorau risg cardiofasgwlaidd ymhlith unigolion diabetes math 2: Meta-ddadansoddiad. Eur. J. Clin. Nutr. 2015, 69, 1200–1208.

10. Martin-Peldez, A.S.; Fito, M.; Castaner, O. Effeithiau diet Môr y Canoldir ar atal diabetes math 2, dilyniant afiechyd, a mecanweithiau cysylltiedig. Adolygiad. Maetholion 2020, 12, 2236.

11. Milajerdi, A. ; Namazi, N.; Larijani, B. ; Azadbakht, L. Cymdeithas Mynegeion Ansawdd Deietegol a Marwolaethau Canser: Adolygiad Systematig a Meta-ddadansoddiad o Astudiaethau Carfan. Nutr. Canser 2018, 70, 1091–1105.

12. Schwingshackl, L. ; Schwedhelm, C.; Gilbert, C.; Hoffmann, G. Cadw at ddiet Môr y Canoldir a'r risg o ganser: Adolygiad systematig wedi'i ddiweddaru a meta-ddadansoddiad. Maetholion 2017, 9, 1063.

13. Say6n-Orea, C. ; Razquin, C. ; Tarw6, M. ; Corella, D.; Ffit6, M. ; Romaguera, D.; Vioque, J. ; Alonso-G6mez, AC; Wärnberg, J.; Martinez, JA; et al. Effaith Ymyrraeth Maeth ac Ymddygiad ar Ymlyniad Deiet Môr y Canoldir â Llai o Ynni ymhlith Cleifion â Syndrom Metabolaidd: Dadansoddiad Interim o Hap-dreial Clinigol PREDIMED-Plus. JAMA J. Am. Med. Cymdeithasfa. 2019, 322, 1486–1499.

14. Bajerska, J. ; Chmurzynska, A.; Muzsik, A.; Krzyz˙ anowska, P.; Ma˛dry, E. ; Malinowska, AC; Walkowiak, J. Colli pwysau ac effeithiau iechyd metabolig o ddeietau Môr y Canoldir a Chanol-Ewropeaidd â chyfyngiad ynni mewn menywod ôlmenopawsol: Hap-brawf rheoledig. Sci. Cyf. 2018, 8, 11170.

15. Estruch, R. ; Martinez-Gonzalez, MA; Corella, D.; Salas- Salvad6, J.; Ffit6, M. ; Chiva-Blanch, G.; Fiol, M.; G6mez-Gracia, E.; Ar6s, F. ; Lapetra, J. ; et al. Effaith diet Môr y Canoldir braster uchel ar bwysau'r corff a chylchedd y waist: Dadansoddiad canlyniadau eilaidd rhagnodedig o hap-dreial rheoledig PREDIMED. Lancet Diabetes Endocrinol. 2019, 7, e6–e17.

16. Molendijk, M. ; Molero, P.; Ortuño Sdnchez-Pedreño, F.; Van der Does, W.; Angel Martinez-Gonzalez, M. Ansawdd diet, a risg iselder: Adolygiad systematig a meta-ddadansoddiad dos-ymateb o astudiaethau arfaethedig. J. Effeithio. Anhwylder. 2018, 226, 346–354.

17. Wu, L. ; Sun, D. Glynu wrth ddeiet Môr y Canoldir a'r risg o ddatblygu anhwylderau gwybyddol: Adolygiad systematig wedi'i ddiweddaru a meta-ddadansoddiad o ddarpar astudiaethau carfan. Sci. Cynrychiolydd 2017, 7, 1–9.

18. Loughrey, DG; Lavecchia, S.; Brennan, A.S.; Lawlor, BA; Kelly, ME Effaith diet Môr y Canoldir ar weithrediad gwybyddol oedolion hŷn iach: Adolygiad systematig a meta-ddadansoddiad. Adv. Nutr. 2017, 8, 571–586.

19. Arnold, SE; Arvanitakis, Z.; Macauley-Rambach, SL; Koenig, AC; Wang, HY; Ahima, RS; Crefft, S.; Gandy, S.; Buettner, C. ; Stockel, LE; et a Ymwrthedd i inswlin yr ymennydd mewn diabetes math 2 a chlefyd Alzheimer: Cysyniadau a phroblemau. Nat. Neurol y Parch. 2018, 14, 168–181.

20. Trichopoulou, A. ; Vasilopoulou, E. Deiet Môr y Canoldir, a hirhoedledd. Br. J. Nutr. 2020, 84, S205–S209.