Technoleg Paratoi Ar gyfer Wenyang Tongbian Granules

Crynodeb:

AmcanPenderfynu a gwneud y gorau o dechnoleg paratoi Wenyang Tongbiangranules.

DulliauEchdynnwyd decoction dŵr. Defnyddiwyd cynnwys glycoside echinacea mewn monarchdrug a'r cyfansawdd cnwd fel mynegeion. Defnyddiwyd prawf orthogonal L9 (34) i wneud y gorau o echdynnu gronynnau Wenyang Tongbian. Optimeiddiwyd y broses ffurfio orau yn seiliedig ar anhawster gronynniad, ffurfadwyedd a chynhyrchiant gronynnau. Canlyniadau Roedd yr echdynnu optimaidd yn cynnwys ychwanegu 10 plygiadau o ddŵr ac echdynnu 3 gwaith, 1 awr bob tro. Y broses ffurfio orau: y math o ddeunydd ategol wasdextrin, cymhareb y excipients oedd 1∶0.9, a'r asiant gwlychu gorau oedd 85% ethanol. Casgliad Mae'r broses echdynnu a mowldio yn sefydlog ac yn rhesymol, yn syml ac yn ymarferol, gydag atgenhedlu da, a all ddarparu sail ar gyfer cynhyrchu diwydiannol gronynnau Wenyang Tongbian.

Geiriau allweddol: Wenyang Tongbian granlue; prawf orthogonal; echdynnu; mowldio

FFURFIO LYSIEUOL NEWYDD AR GYFER YR ARENYANG DIFFYG

Gwasanaeth Cefnogol o Wecistanche

E-bost:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Ffôn:+86 15292862950

Yang rhwymedd diffygyn gyffredin ymhlith yr henoed a menywod. Ni ddylai'r dull trin fod yn buriad syml. Gall y dull Warming Yang gyflawni canlyniadau da [1]. Mae Wenyang Tongbian Granules yn baratoad mewn ysbyty a ddatblygwyd yn seiliedig ar brofiad clinigol yr Athro Lin Aizhen o Ysbyty Taleithiol Hubei o Feddygaeth Tsieineaidd Traddodiadol wrth drin rhwymedd swyddogaethol yn yr henoed. Mae'n cynnwys Cistanche deserticola, rhisgl sinamon, astragalus, ac Atractylodes macrocephala. Yn y fformiwla, mae gan Cistanche deserticola swyddogaethau tonifying aren yang a bod o fudd i hanfod a gwaed, a dyma'r prif feddyginiaeth sy'n cynhesu yang; mae gan rhisgl sinamon swyddogaethau cynhesu meridiaid a dadflocio pibellau gwaed, ailgyflenwi tân a chefnogi yang; mae gan astragalus y swyddogaethau o godi yang ac ailgyflenwi qi, alinio briwiau a hyrwyddo adfywio meinwe; ac mae gan Atractylodes macrocephala y swyddogaethau o gryfhau'r ddueg ac ailgyflenwi qi, sychu lleithder a hyrwyddo diuresis.

Mae astudiaethau wedi dangos mai glycosidau ffenylethanol yw'r prif gynhwysion gweithredol yn Cistanche deserticola [2]. Yn eu plith, echinacoside a verbascoside yw'r cynhwysion nodweddiadol ar gyfer rheoli ansawdd Cistanche deserticola fel y nodir yn y Pharmacopoeia Tsieineaidd. Dywedodd Liu Xianhong et al. Daeth [3] i'r casgliad trwy dreialon dynol in vivo bod Cistanche deserticola yn addas ar gyfer triniaeth glinigol rhwymedd ac y gall drin y symptomau a'r achos sylfaenol. Mae prif gydrannau cemegol rhisgl sinamon yn cynnwys olewau anweddol, polysacaridau, flavonoidau, ac ati. Mae astudiaethau ffarmacolegol modern wedi dangos bod rhisgl sinamon yn cael effeithiau ffarmacolegol megis vasodilation, wlser gwrth-gastrig, ac effeithiau gwrthfacterol [4]. Astragalus polysacaridau, flavonoids, ac astragaloside IV yw'r prif gydrannau cemegol sy'n cael effeithiau immunomodulatory [5]. Mae gan Atractylodes macrocephala effeithiau cryfhau'r ddueg a rheoleiddio anhwylderau fflora berfeddol a gellir ei ddefnyddio'n glinigol i drin camweithrediad gastroberfeddol [6]. Defnyddir y presgripsiwn gwreiddiol yn bennaf mewn decoctions meddygaeth Tsieineaidd, ond mae ganddo anfanteision megis anghyfleustra mewn decoction, dos mawr, ac anghyfleustra wrth gario. Er mwyn gwneud y presgripsiwn profiad clinigol hwn yn cael ei ddefnyddio'n helaeth mewn ymarfer clinigol, fe'i datblygwyd yn ronynnau. Defnyddiodd yr arbrawf hwn y cynnyrch past a chynnwys echinacoside, y prif gynhwysyn gweithredol yn y brif feddyginiaeth, fel dangosyddion, yn parhau i ddefnyddio'r broses decoction dŵr traddodiadol, a defnyddiodd y dull prawf orthogonal L9 (34) i wneud y gorau o faint o ddŵr a ychwanegwyd. , amser decoction, ac amseroedd decoction yn y broses echdynnu i gael y broses echdynnu gorau. Ar yr un pryd, ymchwiliwyd i'r broses fowldio granule i bennu proses fowldio sefydlog a rhesymol, gan ddarparu cyfeiriad ar gyfer cynhyrchu peilot, rheoli ansawdd, a chymhwysiad clinigol y paratoad [7-8].

1 Offerynnau ac adweithyddion

1.1 Offerynau

Cynghrair e2695cromatograff hylif perfformiad uchel, Synhwyrydd amrywiaeth deuodau 2998 (Waters, USA), ES225SMDR 1/100,000 cydbwysedd dadansoddol (Precisa, y Swistir), UPT -11-10T peiriant dŵr ultrapure (Shenzhen UPT Technology Co, Ltd), KQ-500Glanhawr ultrasonic CNC amledd ddeuol VDE (Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.).

1.2 Cyffuriau prawf

Sleisys Cistanche Gwin(rhif swp: 2322050113, a gynhyrchwyd yn Mongolia Fewnol), sleisys sinamon (rhif swp: 2323020103, a gynhyrchwyd yn Guangxi), sleisys astragalus (rhif swp: 2323020105, a gynhyrchwyd yn Gansu), sleisys macrocephala Atractylodes (rhif swp, 021320 a gynhyrchir yn: 021320, sleisys a gynhyrchwyd yn Gansu): ) (Hubei Chenmei Chinese Medicine Co, Ltd., mae'r holl dafelli yn cael eu nodi fel rhai dilys gan Chen Shuhe, prif fferyllydd y SefydliadMeddygaeth Tsieineaidd Traddodiadolo Ysbyty Meddygaeth Tsieineaidd Traddodiadol Taleithiol Hubei, ac maent yn gymwys yn ôl rhifyn 2020 o'rTsieineaidd FfarmacopoeiaRhan I). Sylwedd cyfeirio Echinacoside(rhif swp: 111670-201907, purdeb: 91.8%, Ymchwil Arolygu Bwyd a Chyffuriau Tsieina).

Dextrin (rhif swp: 230102), startsh corn (rhif swp: 221008) (Henan Zhenghong Pharmaceutical Excipients Co, Ltd.), swcros (rhif swp: TF28221205), cellwlos microgrisialog (rhif swp: TF471211001: rhif lactos), TF463Y230101) (Hunan Jiudian Hongyang Fferyllol Co, Ltd).

2 Dulliau a Chanlyniadau

2.1 Penderfynu cynnwys echinacoside

2.1.1 Cyflyrau cromatograffig: Defnyddiwyd Agilent 5 TC-C18 (250 nm × 4.6 mm, 5 μm) fel y golofn gromatograffig; defnyddiwyd methanol fel y cyfnod symudol A, defnyddiwyd hydoddiant asid fformig 0.1% fel y cyfnod symudol B, elution graddiant (0-17 min, 26.5%A; 17-20 min, 26.5% → 29.5%A; 20-54 mun,

29.5%A, 54-55 mun, 29.5% → 26.5%A; 55-60munud, 26.5%A); cyfradd llif 1.0 mL·mun-1; tymheredd colofn 30 gradd; synhwyrydd arae deuod, tonfedd canfod 330 nm; cyfaint pigiad 10μL; ni ddylai rhif plât damcaniaethol a gyfrifir yn seiliedig ar yr uchafbwynt echinacoside fod yn llai na 3000[9].

2.1.2 Paratoi datrysiad cyfeirio

Cymerwch swm priodol o echinacoside, pwyso 9.65 mg yn gywir, ei roi mewn fflasg gyfeintiol 25 mL, ychwanegu 50%

methanol i'w hydoddi a'i wanhau i'r marc fel yr hydoddiant stoc cyfeirio. Yn gywir pibed 1 mL o doddiant stoc echinacoside i mewn i fflasg gyfeintiol 25 ml, ychwanegu 50% methanol i'w wanhau i'r marc, ysgwyd yn dda, a pharatoi datrysiad cyfeirio sy'n cynnwys 14.17 ug fesul 1 mL [9].

2.1.3 Paratoi datrysiad prawf

Cymerwch tua 0.5 g o bowdr past sych, ei falu'n bowdr, ei bwyso'n gywir, ei roi mewn potel gonigol â stopiwr brown, ychwanegu 50 mL o 50% methanol yn gywir, ei atal yn dynn, ei ysgwyd yn dda, ei bwyso, ei drin yn ultrasonic am 40 munud (pŵer 250 W, amledd 45 kHz), gadewch iddo oeri, pwyso eto, ychwanegu 50% methanol i wneud iawn am y pwysau a gollwyd, ei ysgwyd yn dda, gadewch iddo sefyll, cymerwch y supernatant, ei hidlo, a chymerwch yr hidlif.

2.1.4 Paratoi datrysiad sampl negyddol

Cymerwch tua 0.5 g o bowdr past sych y fformiwla heb win deunyddiau meddyginiaethol Cistanche, a pharatoi'r ateb sampl negyddol yn ôl y dull o dan "2.1.3".

2.1.5 Prawf penodoldeb

Yn union biped yr ateb prawf, yr ateb cyfeirio a'r ateb sampl negyddol yn y drefn honno, a mesurwch yn unol â'r amodau cromatograffig o dan "2.1.1". Cofnodwch y cromatogram. Dangosir y canlyniadau yn Ffigur 1. Nid oes unrhyw ymyrraeth â'r sampl negyddol. Mae'r canlyniadau'n dangos bod gan y dull benodoldeb da.

Ffig 1 Cromatogram penodol o ronynnau Wenyang Tongbian

2.1.6 Ymchwiliad llinol i berthynas

Cymerwch swm priodol o echinacoside, ei bwyso'n gywir i 10.11 mg, ei roi mewn fflasg gyfeintiol 25 mL, ychwanegu 50% methanol i'w wanhau i mewn i gyfres o grynodiadau o ddatrysiad cyfeirio, a'i chwistrellu yn unol â'r amodau cromatograffig o dan "2.1" .1" i bennu gwerth ardal brig echinacoside. Tynnwch gromlin safonol, gyda'r swm pigiad o gyfeirnod echinacoside fel yr echel lorweddol (ug, X) a gwerth annatod yr ardal brig fel yr echelin fertigol (Y), a pherfformiwch atchweliad llinol.

Yr hafaliad atchweliad yw Y=1.294×104X - 4.931×104, r=0.9997. Mae'r canlyniadau'n dangos bod gwerth annatod ardal brig swm pigiad echinacoside mewn perthynas llinol dda rhwng 1.4850 a 371.2392 ug.

2.1.7 Prawf manwl

Allsugnwch 10 μL o'r hydoddiant cyfeirio yn gywir (crynodiad màs o 37.12 ug·mL－ 1) o dan "2.1.6", chwistrellwch 6 gwaith, cofnodwch werth arwynebedd brig echinacoside yn y drefn honno, a chyfrifwch y gwerth RSD i fod yn 1.1%, gan nodi bod gan yr offeryn drachywiredd da.

2.1.8 Prawf ailadrodd

Cymerwch yr un past sych, ei falu'n bowdr, pwyso 6 dogn yn gywir, pob un ohonynt tua 0.5 g, a'u rhoi mewn potel gonigol â stopper brown. Dyfyniad yn ôl y dull o dan "2.1.3", pennwch y cynnwys, a chyfrifwch. Dengys y canlyniadau mai cynnwys cyfartalog echinacoside yn y sampl yw 1.46 mg·g－ 1, a'r gwerth RSD yw 2.7%, sy'n dangos bod ailadroddadwyedd y dull hwn yn dda.

2.1.9 Prawf sefydlogrwydd

Cymerwch yr un datrysiad sampl, tynnwch lun 10 μL yn gywir, a'i chwistrellu o fewn 0, 2, 4, 8, 12, 18 a 24 awr yn y drefn honno. Gwerth RSD ardal brig yw 0.71%, sy'n dangos bod gan yr ateb sampl sefydlogrwydd da o fewn 24 awr.

2.1.10 Prawf Adfer Sampl

Pwyswch yn gywir 6 dogn o'r un swp o samplau prawf, 0.24 g yr un, a'u rhoi mewn potel gonigol â stopiwr brown. Yn ôl cymhareb màs 1:1 o'r cydrannau yn y sampl prawf, ychwanegwch yn gywir 0.9 mL o'r sylwedd cyfeirio echinacoside (crynodiad màs yw 371.24 ug·mL－ 1) o dan "2.1.6", paratowch y datrysiad prawf yn ôl y dull o dan "2.1.3", pennwch ardal brig cromatograffig echinacoside a chyfrifwch y cynnwys. Dengys y canlyniadau mai cyfradd adennill gyfartalog echinacoside yw 101.09%, a'r gwerth RSD yw 1.6%.

2.2 Cynllun arbrofol a dangosyddion gwerthuso

Dewiswyd faint o ddŵr a ychwanegwyd (A), amser echdynnu (B), a nifer yr echdyniadau (D) fel y ffactorau i'w harchwilio. Gosodwyd lefelau tri ffactor yn ôl canlyniadau'r ymchwiliad ffactor sengl blaenorol, gweler Tabl 1. Defnyddiwyd y tabl prawf orthogonal L9 (34) yn yr arbrawf, gweler Tabl 2. Defnyddiodd y prawf y cynnyrch o past a chynnwys echinacoside fel dangosyddion gwerthuso i ymchwilio i'r broses echdynnu dŵr optimaidd.

Tab 1 Ffactor a lefel y prawf orthogonol

2.2.1 Prawf orthogonol

Yn ôl y gymhareb presgripsiwn, pwyswch 18 dogn o bob blas meddyginiaethol, 55 g yr un, a pherfformiwch echdynnu decoction dŵr yn ôl y cynllun dylunio orthogonal yn Nhabl 2. Mae gan bob grŵp 2 ddogn cyfochrog. Mae'r decoction yn cael ei hidlo trwy sgrin rwyll 80-, mae'r hidlydd yn cael ei gyfuno, ei oeri, mae'r cyfaint decoction yn cael ei fesur, mae 50 mL yn cael ei bibed yn gywir i ddysgl anweddu sydd wedi'i bwyso'n gyson, wedi'i anweddu i sychder , a'i sychu dan bwysau llai ar 60 gradd i gael y sampl orthogonal past sych sych. Cyfrifwch y cynnyrch past (cynnyrch past=(pwysau past sych × cyfaint hylif meddyginiaethol) / (50 × pwysau darn decoction) × 100%). Yn ôl yr amodau cromatograffig o dan "2.1.1" a'r dull o dan "2.1.3", penderfynwyd swm echdynnu echinacoside yn y 9 grŵp o ddarnau prawf orthogonal yn y drefn honno. Swm echdynnu Echinacoside=pwysau past sych × cynnwys echinacoside / gwin pwysau darn decoction Cistanche. Sgôr cynhwysfawr=cynnwys echinacoside ÷ cynnwys uchaf × 0.5 × 100% + cynnyrch past ÷ uchafswm cynnyrch past × 0.5 × 100% [10]. Dangosir y canlyniadau yn Nhabl 2.

Fel y dangosir yn Nhabl 3, gan gymryd y cynnyrch past a sgôr cynhwysfawr cynnwys echinacoside fel y dangosyddion gwerthuso, mae'r amrediad gwerth R yn y tabl yn dangos mai effeithiau cynradd ac eilaidd pob ffactor yw D > B > A; mae canlyniadau'r dadansoddiad amrywiant yn dangos bod y ffactor D (amseroedd decoction) yn ystadegol arwyddocaol (P < 0.05), a dewisir lefel D3; nid yw'r ffactor A (adiad dŵr) a'r ffactor B (amser decoction) yn ystadegol arwyddocaol (P > 0.05). O ystyried bod cyfradd amsugno dŵr y deunyddiau meddyginiaethol yn y paratoad hwn yn gymharol uchel (155%), ac wedi'i gyfuno â ffactorau megis anghenion cynhyrchu gwirioneddol, dewisir yr amodau echdynnu gorau posibl fel A2B1D3, hynny yw, ychwanegu 10 gwaith o ddŵr, decocting 3 gwaith, bob tro am 1 awr.