Marcwyr Ansawdd Cistanches Herba Yn Seiliedig ar Berthynas Sbectrwm-Effaith Gwrthocsidiol Ⅱ

3 canlyniad

3.1 Sefydlu map olion bysedd

Paratowch 10 swp o atebion prawf yn ôl y dull o dan 2.1, defnyddiwch yr amodau cromatograffig o dan 2.2 i'w canfod, cael olion bysedd pob swp o samplau (Ffigur 1), a dewis brig Rhif 11 (C11) fel uchafbwynt cyfeirio'r olion bysedd. Mewnforio'r ffeil data.AIA cyfnod hylif o olion bysedd y cynnyrch prawf Cistanche deserticola i mewn i'r meddalwedd "System Gwerthuso Tebygrwydd Olion Bysedd Cromatograffig Meddygaeth Traddodiadol Tsieineaidd" (fersiwn 2012). Cafodd dau ar bymtheg o gopaon cromatograffig cyffredin eu graddnodi yn y modd cyffredin, a'u cymharu â'r sbectrwm safonol cyfeirio cymysg (Ffigur 2), nodwyd cyfanswm o 10 copa cyffredin.

3.2 Ymchwil ar effaith gwrthocsidiol Cistanche deserticola

3.2.1 Effaith Cistanche deserticola ar hyfywedd celloedd HEK 293.

O'i gymharu â chelloedd yn y grŵp arferol, ni chynhyrchodd Cistanche deserticola sytowenwyndra ar grynodiad màs o 50 ~ 100 ug·mL–1, ac roedd cyfraddau goroesi celloedd yn fwy na 90%. Wrth i grynodiad Cistanche deserticola gynyddu, gostyngodd hyfywedd celloedd. Felly, dewiswyd Cistanche deserticola gyda chrynodiad màs o 100 µg·mL–1 i'w roi wedyn.

3.2.2 Effaith Cistanche deserticola ar ROS a achosir gan H2O2 yng nghelloedd HEK 293

Cyfrifwyd y ROS IC50 o Cistanche deserticola mewn crynodiadau gwahanol gan ddefnyddio meddalwedd GraphPad Prism 8. Dangosir y canlyniadau yn Ffigur 3 a Thabl 2.

I gael mwy o wybodaeth am cistanche, gadewch i ni edrych ar sut i wahaniaethu rhwng ansawdd cistanche. Mae ansawdd Cistanche yn dibynnu ar gynnwys y cynhwysion gweithredol Echinacoside ac Acteoside, mae'r cynnwys uwch yn golygu swyddogaeth gryfach, heddiw rydym yn cymryd 30% Echinacoside a 12% Atodiadau Cistanche Acteoside fel enghraifft i roi esboniad i ni, yn gyffredinol ffoniwch cistanche yn yr erthygl hon.

FAINT O HYD MAE'N EI GYMRYD I CISTANCHE WEITHIO?

3.2.3 Effaith Cistanche deserticola ar SOD a achosir gan H2O o gelloedd HEK 293

Fel y dangosir yn Ffigur 4, o'i gymharu â'r grŵp arferol, gostyngwyd gweithgaredd SOD yng nghelloedd y grŵp model yn sylweddol, a chynyddodd gweithgaredd SOD grŵp gweinyddu Cistanche deserticola i raddau amrywiol (P).<0.001), indicating that Cistanche deserticola can increase the intracellular SOD enzyme activity.

3.2.4 Effaith Cistanche deserticola ar CAT a achosir gan H2O yng nghelloedd HEK 293

Fel y dangosir yn Ffigur 5, gall H2O2 achosi gostyngiad sylweddol mewn gweithgaredd ensymau CAT mewngellol (P<0.001), with the activity only reaching 30% of the normal group, indicating that H2O2 has seriously damaged the antioxidant system of cells. After Cistanche deserticola administration, intracellular CAT enzyme activity decreased significantly (P<0.001). The enzyme activity was significantly increased (P<0.001).

3.3 Sgriniad marc-Q Cistanche deserticola yn seiliedig ar ddadansoddiad cydberthynas effeithlonrwydd sbectrol

3.3.1 Mae PCA yn defnyddio'r gwerth eigen > 1 a'r gyfradd cyfraniadau amrywiad cronnus > 85% fel y safon i echdynnu 4 prif gydran. Mae gan y llain sgri (Ffigur 6) o'r tair prif gydran gyntaf gromlin fwy serth, sy'n golygu bod ei chyfradd cyfraniad yn uwch. mawr. Cyfradd cyfraniadau amrywiant cronnus y pedair prif gydran yw 87.640%, sy'n dangos y gall y pedair prif gydran hyn gynrychioli 87.640% o wybodaeth y newidynnau gwreiddiol. Dangosir y gwerthoedd eigen cychwynnol a'r cyfraddau cyfraniadau amrywiant yn Nhabl 3. Mae'r matrics cydran cylchdroi yn cael ei sicrhau trwy ddull amrywiad uchaf normaleiddio Kaiser, gweler Tabl 4. Yn ôl gwerth llwytho pob brig cromatograffig ar y pedair prif gydran, mae'r wybodaeth a adlewyrchir gan bob un. gellir echdynnu prif gydran. Hynny yw, po fwyaf yw'r gwerth llwyth, y mwyaf yw dylanwad y brig cromatograffig ar y brif gydran. Ym mhrif gydran 1, copaon 1 i 3, 5, 7, 11, a 13 i 15 sydd â'r llwythiadau absoliwt mwyaf; ym mhrif gydran 2, brigau 6 ac 16 sydd â'r llwythiadau absoliwt mwyaf; mae brig 17 yn esbonio gwybodaeth prif gydran 3, Peak 8 sy'n cael yr effaith fwyaf ar brif gydran 4, felly dewiswyd y 13 cydran gemegol o gopaon 1 ~ 3, 5 ~ 8, 11, 13 ~ 17 fel prif sail ddeunydd Cistanche deserticola ar gyfer dadansoddiad effeithlonrwydd sbectrol dilynol.

3.3.2 CSP

Mae ROS IC50 yn ddangosydd negyddol o effeithiolrwydd cyffuriau, felly mae cyfernod cydberthynas negyddol yn golygu bod cydberthynas gadarnhaol rhwng y newidyn dibynnol ac effeithiolrwydd cyffuriau. Mae cyfernodau cydberthynas y 13 copa cromatograffig o Cistanche deserticola i gyd yn negyddol, sy'n dangos eu bod i gyd yn gysylltiedig yn gadarnhaol â chael gwared ar ROS IC50, ymhlith yr oedd copaon 14 a 3, 7, 11, 1, a 13 yn cydberthyn yn hynod o gryf â ROSIC50 (P<0.01), and peaks 2, 5, and 15 were strongly correlated (P<0.05); the 13 chromatographic peaks were all positively correlated with SOD, among which peaks 13 and 3 , 15, 11, 2 were extremely strongly correlated with SOD (P<0.01), and peaks 1, 14, 7, 5, and 6 were strongly correlated (P<0.05); 11 peaks were positively correlated with CAT, and peak 5 was positively correlated with CAT. There was a strong correlation (P<0.05). The results are shown in Table 5.

Gan gyfuno canlyniadau CSP ROS IC50, SOD, a CAT, dewiswyd copaon 1 ~ 3, 5, 7, 11, a 13 ~ 15 fel y grŵp cynhwysyn gweithredol ar gyfer Cistanche deserticola i gael effeithiau gwrthocsidiol.

3.3.3 PLS

In PLS, the ROS IC50 regression coefficients of 13 chromatographic peaks are all negative and positively correlated with the pharmacodynamic activity. Among them, the chromatographic peaks with VIP>1 are: 14, 3, 11, 1, 7, 13, 2, 5, 15 (Figure 7A); in the study of SOD enzyme activity, the coefficients of all peaks are positive, that is, all peaks are positively correlated with drug efficacy. Among them, the chromatographic peaks with VIP>1 are: 13, 3, 15, 11, 2, 1 , 14, 7 (Figure 7B); in the study of CAT enzyme activity, except for peaks 6 and 16, the other chromatographic peaks are positively correlated with drug efficacy, among which the chromatographic peaks with VIP>1 yw: 5, 13, 14, 11 , 7 (Ffig. 7C). Cafodd y cyfansoddion a gynrychiolir gan gopaon 1 ~ 3, 5, 7, 11, a 13 ~ 15 eu sgrinio allan fel cydrannau gweithredol gwrthocsidiol posibl yn y model PLS.

3.4 Gwirio gweithgaredd marc-Q Cistanche deserticola

3.4.1 Effaith cynhwysion actif ar sytowenwyndra HEK 293

Yn seiliedig ar ganlyniadau dadansoddiad cydberthynas sbectrwm-effaith, dewiswyd 6 chynhwysyn gan gynnwys asid genipinig, 8-asid epistrychnoig, echinaceoside, verbascoside, anthocynoside A, ac isorbascoside ar gyfer gwirio gweithgaredd. Ni ddangosodd chwe chynhwysyn gweithredol Cistanche deserticola unrhyw sytowenwyndra mewn crynodiadau yn amrywio o 0.781 i 3.125 µmol·mL–1, ac roedd cyfraddau goroesi celloedd i gyd yn uwch na 90%. Wrth i'r crynodiad gynyddu, mae hyfywedd celloedd yn cael ei atal. Felly, dewiswyd y crynodiadau dosio dilynol fel 0.781, 1.563, a 3.125 µmol·mL–1.

3.4.2 Parau cynhwysion actif

Dilyswyd effaith gwrthocsidiol celloedd HEK 293 a ysgogwyd gan H2O trwy ganfod effaith chwilota pob cynhwysyn gweithredol ar ROS mewngellol a'r gallu i reoleiddio gweithgaredd ensymau SOD a CAT i wirio a oes ganddo effaith gwrthocsidiol. Yn yr arbrawf chwilota ROS, roedd y gwahaniaethau rhwng y grwpiau asid genipinig canol a dos uchel a'r grŵp model yn ystadegol arwyddocaol (P<0.01, P<0.001, Figure 8A). Compared with the model group, there were statistically significant differences between the low, medium and high dose groups of inulin, anthoside A, verbascoside and isorbascoside (P<0.001, Figure 8B, Figure 8C), indicating that the six monomers All have a certain degree of ROS scavenging effect; in the SOD and CAT enzyme activity measurement test, the enzyme activities of the low, medium and high dose groups of active ingredients were all higher than the model group, indicating that all 6 monomers can increase SOD and CAT Enzyme activity.