Myfyrdod Am Yr Ansawdd Microbiolegol Dŵr Haemodialysis ym Mrasil Ⅲ

Deddfwriaeth gyfredol ar ddŵr dialysis ym Mrasil

Mae'r meini prawf a ddefnyddir ar gyfer ygwerthuso dialysiscododd dŵr drwy ymwybyddiaeth awdurdodau cymwys o’r risg bosibl y byddai cleifion sy’n cael triniaeth yn agored iddynt (Faria, 2011).

FAINT O HYD MAE'N EI GYMRYD I CISTANCHE WEITHIO?

Mae Penderfyniad y Bwrdd Cyfarwyddwyr Colegol (RDC) rhif 33/2008 yn darparu ar gyfer rheoleiddio technegol ar gyfer cynllunio, rhaglennu, ymhelaethu, gwerthuso a chymeradwyo Systemau Trin a Dosbarthu Dŵr ar gyfer Hemodialysis yn asiantaeth rheoleiddio iechyd Brasil (Anvisa, 2008) .

Mae RDC rhif 11/2014 yn darparu ar gyfer y gofynion Arfer Da ar gyferGwasanaethau Dialysis, mae'n berthnasol i bob gwasanaeth dialysis, boed yn gyhoeddus, preifat, dyngarol, sifil neu filwrol, gan gynnwys y rhai sy'n cyflawni gweithgareddau addysgu ac ymchwilio. Mae hefyd yn pennu bod y samplau ar gyfer dadansoddiadau microbiolegol yn cael eu casglu o leiaf bob mis ar adeg dychwelyd y ddolen ddosbarthu ac yn un o'r pwyntiau yn yr ystafell brosesu. Yn ogystal, mae'n pennu bod yn rhaid gwirio ansawdd microbiolegol dŵr pryd bynnag y bydd amlygiadau pyrogenig, bacteremia, neu amheuaeth o sepsis mewncleifion ar ddialysis. Mae’r RDC hwn rhif 11/2014 yn sefydlu’r safon ansawdd dŵr ar gyfer dialysis, gyda’r priodoleddau biolegol a microbiolegol yn cael eu hamlygu yn Nhabl 1 (Anvisa, 2014).

TABL I - Safon ansawdd biolegol a microbiolegol ar gyfer dŵr dialysis

Mae'r Sefydliad Rhyngwladol ar gyfer Safoni (ISO) yn ei safon rhif 13959:2014 yn darparu ar gyferhaemodialysisdŵr a therapïau cysylltiedig, gan nodi fel safon ansawdd gyfanswm o gyfrif microbiolegol llai nag 100 CFU / mL neu lai os felly, a ddarperir mewn deddfwriaeth leol. Nododd hefyd lefelau endotocsinau islaw 0.25UE/mL neu yr un mor fach os felly, a ddarperir gan ddeddfwriaeth leol (Y Sefydliad Safoni Rhyngwladol, 2014).

DULLIAU MICROBIOLEGOL AC AMGEN

Cyfrifo bacteria heterotroffig

Gellir ei ystyried fel marc cychwynnol y profion microbiolegol pan oedd yng nghanol 1610 ac, ym 1665 dyfeisiwyd y microsgopau gan Galileo Galilei a Van Leeuwenhoek yn y drefn honno. Er mae'n debyg nad Leeuwenhoek oedd y cyntaf i arsylwi bacteria a phrotosoa, ef oedd y cyntaf i wneud adroddiadau gyda darluniau a disgrifiadau o'i arsylwadau. Ymhlith y rhain, ym 1675, disgrifiodd bethau byw a oedd yn bresennol mewn dŵr (Dias, 2018; Pelczar, Reid, Chan, 1980).

Fodd bynnag, roedd gwyddonwyr Almaeneg wedi arsylwi twf cytrefi mewn tatws wedi'u berwi, a oedd yn nodweddu'r arfer o dyfu microbau a datblygiad cyfryngau diwylliant. Koch, a ddechreuodd dyfu micro-organebau mewn cyfrwng solet. Enwodd agar y sylwedd a dynnwyd o algâu a allai solidoli ar dymheredd ystafell. Datblygodd Richard Petri blât gwydr ar gyfer adneuo'r cyfrwng diwylliant (Jay, 2001; Pelczar, Reid, Chan, 1996).

Ar ôl 200 mlynedd o ddarganfod bodau byw mewn dŵr gan Leeuwenhoek, roedd Louis Pasteur, Robert Koch, Theobald Smith ac ychydig o wyddonwyr eraill yn cysylltu bodau microsgopig â chlefydau. Ym 1878, cafodd Joseph Lister y diwylliannau pur cyntaf o facteria gan ddefnyddio gwanediadau cyfresol mewn cyfrwng hylif (Pelczar, Reid, Chan, 1980).

Ar ddiwedd y 19eg ganrif, mabwysiadwyd technegau tyfu i ddadansoddi ansawdd dŵr yfed. Ar gyfer dadansoddiad E. coli a cholifformau eraill, daeth cawl diwylliant, trwy'r nifer mwyaf tebygol (MPN), yn brif ddull, yn ogystal â chyfrwng agar neu gyfrwng solet Koch ar gyfer y cyfrif cyfan, ac mae'r ddau ohonynt wedi mynd trwy ychydig o addasiadau. Ym 1950 cyflwynwyd y defnydd o ffilterau pilen ar gyfer cyfrifo bacteriol (Pelczar, Reid, Chan, 1996; Sartory, Watkins, 1999).

Mae MNP yn syml ond mae angen amser dadansoddi hirach (hyd at 5 diwrnod), tra bod canlyniadau tybiedig hidlo pilen ar gael ar ôl 3-5 diwrnod o ddeori (Anvisa, 2019). O ran y cyfrwng solet, mae un o'r opsiynau yn cynnwys plac cyfrif agar (PCA), cyfryngau gwael mewn maetholion ac yn anaddas ar gyfer adferiad bacteria sydd eisoes dan straen mewn dŵr. Gellir defnyddio cyfryngau diwylliant gwannach o ran maeth hefyd, er enghraifft, oherwydd gallant adennill nifer fwy o facteria, ond nid y boblogaeth hyfyw gyfan (Sartory, Watkins, 1999). Mae Agar 2A Reasoner (R2A), yn enghraifft o gyfryngau diwylliant gwannach o ran maeth a dyma’r un a argymhellir fwyaf ar gyfer dadansoddiad microbiolegol dŵr (USP, 2017).

Ar hyn o bryd, mae yna lawer o ddulliau microbiolegol confensiynol, megis dull plât, hidlo pilen, a thiwbiau lluosog gan y broses MNP (Anvisa, 2019). Er eu bod yn syml, yn effeithlon ac yn ddarbodus, mae ganddynt rai cyfyngiadau: detholusrwydd isel y cyfrwng diwylliant, amrywioldeb yr ymateb biolegol, a chanlyniadau hwyr wrth ganfod micro-organebau sy'n peryglu'r amser i bennu mesurau ataliol i leihau anafiadau cleifion (Anvisa , 2019).

Mewn ymgais i leihau’r cyfyngiadau hyn, mae dulliau microbiolegol amgen wedi’u datblygu i ddarparu lefel uwch o ansawdd i’r profion, mwy o sensitifrwydd, a chanlyniadau cyflymach, gan ganiatáu i gamau unioni gael eu cymryd yn gynnar (Anvisa, 2019)

Endotocsinau bacteriol

Defnyddiodd Theodor Billroth, ym 1865, y term pyrogen i gyfeirio at sylweddau a achosodd dwymyn (Kikkert, Groot, Aarden, 2008; Cynhadledd Staff Meddygol, 1978). Mae astudiaethau Richard Pfeiffer ar golera ym 1892, a anogwyd gan Robert Koch, yn ei gysegru fel tad endotocsin ar gyfer ei ddarganfyddiad (Rietschel, Cavaillon, 2003).

Ym 1942, ychwanegwyd y prawf pyrogen trwy ddull in vivo yn y Pharmacopoeia Americanaidd yn ei ddeuddegfed argraffiad (Mc Closky et al., 1943). Ers ei gynnwys, mae'r prawf hwn wedi'i ddefnyddio'n helaeth i werthuso'r halogiad gan pyrogenau mewn cyffuriau parenteral (Kikkert, Groot, Aarden, 2008). Fodd bynnag, dim ond yn 1976, cafodd y prawf hwn ei gynnwys yn y Pharmacopoeia Brasil (Navega et al., 2015).

Mae'r prawf yn seiliedig ar fesur ymateb twymyn y gwningen ar ôl chwistrelliad mewnwythiennol o'r hydoddiant prawf, a defnyddir y dehongliad o'r canlyniadau i nodweddu'r rheolaeth fiolegol (Anvisa, 2019). Fodd bynnag, mae rhai cyfyngiadau, megis rheoli anifeiliaid, amrywioldeb biolegol, a materion moesegol. Roedd yr agweddau hyn yn annog ymchwilwyr i ddatblygu dulliau amgen ar gyfer y prawf in vivo o pyrogenau (Kikkert, Groot, Aarden, 2008). Yn eu hymchwil, nododd Levin a Bang (1964), a ddyfynnwyd gan Kikkert, Groot, ac Aarden (2008), fod endotocsin Escherichia coli wedi achosi ceulo yn hemolymff y cranc Limulus polyphemus.

Ychwanegwyd prawf Limulus Amebocyte Lysate (LAL), yn y Pharmacopoeia Americanaidd yn 1980, tra cafodd ei gynnwys yn y Pharmacopoeia Brasil yn unig yn 1996 (Farmacopéia, 1996; USP, 1980). Mae dau fath o brofion LAL, y cyntaf yw'r prawf ceulo lled-feintiol, sy'n seiliedig ar ffurfio gel; yr ail un yw'r ffotometrig, prawf meintiol, y gellir ei rannu'n ddull cromogenig sy'n seiliedig ar ddatblygiad lliw, a'r dull turbidimetric sy'n seiliedig ar ddatblygiad cymylogrwydd (Anvisa, 2019).

Fodd bynnag, mae rhai cyfyngiadau i brofion LAL megis amrywioldeb techneg y dadansoddwr, a’r gwall sy’n gynhenid ​​i’r offerynnau a ddefnyddiwyd, sy’n peryglu ansawdd y dadansoddi, yn y cyd-destun hwn mae dulliau amgen sy’n dileu’r cyfyngiadau hyn yn ddymunol (Anvisa, 2019; Charles River, 2017 Lemgruber et al., 2011)

Dulliau Microbiolegol Amgen

Mae dulliau microbiolegol amgen yn ddymunol pan geisir goresgyn cyfyngiadau dulliau confensiynol. Mewn gwahanol grynodebau, mae dulliau amgen yn cael eu dosbarthu i ansoddol, meintiol, neu ddull adnabod (Anvisa, 2019; PDA, 2013; USP, 2017).

Mae Pharmacopoeia Brasil yn tynnu sylw at y prif ddulliau: seiliedig ar hyfywedd, seiliedig ar dwf, a seiliedig ar gydrannau cellog (Anvisa, 2019). Disgrifir y prif fathau o ddulliau microbiolegol amgen a'u technolegau priodol yn Nhabl II.

TABL II - Prif fathau o ddulliau microbiolegol amgen a'u technolegau priodol

Er gwaethaf pwysigrwydd defnyddio dulliau amgen cyflym i ddarparu nid yn unig y posibilrwydd o gamau unioni mewn amser real ond hefyd mwy o ddiogelwch cleifion, ychydig o astudiaethau sy’n cael eu cynnal i ddangos eu bod yn berthnasol ym maes dadansoddi dŵr wedi’i drin â dialysis (Anvisa, 2019) . Mae Riepl et al. (2011) gwerthuso cymhwysedd cytometreg cyfnod solet, a ddatgelwyd gan ficrosgopeg epifluorescence, a gwelwyd cydberthynas uchel rhwng y dull confensiynol a'r dull amgen.

Mae'r cymhwysiad cytometreg cyfnod solet mewn dadansoddiad microbiolegol dŵr dialysis yn addawol oherwydd, ar wahân i fod yn ddibynadwy, mae'n ddull cyflym, gan fod yr amser dadansoddi tua thair awr, ac awgrymir ei ddefnyddio ar gyfer monitro nid yn unig ansawdd y dŵr ond hefyd y dialysis. hylif (Canaud, 2011; Riepl et al., 2011).

Mae cytometreg, yn ogystal â bod yn ddull cyflym, hefyd yn caniatáu canfod micro-organebau an-driniadwy hyfyw. Mae'r micro-organebau hyn yn gyfrifol am wahaniaethau canlyniadau rhwng yr arbrofion labordy a microbiota dŵr go iawn. Ni allant rannu a ffurfio cytrefi, er bod ganddynt fecanwaith metabolaidd gweithredol ac yn parhau'n fyw. Mae gan lawer o facteria, yn enwedig gram-negyddol, y gallu hwn. Gellir tynnu sylw at rywogaethau Mycobacterium fel VNC posibl (Anvisa, 2019; Joux, Lebaron, 2000; Díaz et al., 2010; Sandle, 2015).

Mae technegau sy'n seiliedig ar gydrannau cellog fel dadansoddiad PCR 16S rDNA hefyd yn dechneg addawol oherwydd ei fod yn annibynnol ar ddiwylliant ac felly'n gallu canfod micro-organebau hyfyw na ellir eu meithrin (Anvisa, 2019; Gomila et al., 2010; Gomila, Ramirez, Lalucat, 2007 ).