Perthynas Rhwng Serwm Bcl-3, Gal-3, TGF- 1 A Ffibrosis Interstitaidd Arennol mewn Llygod Mawr â Chlefyd Arennau Cronig

Crynodeb:

Amcan: Ymchwilio i'r berthynas rhwng serwm a achosir gan adenin Bcl-3, Gal-3, TGF- 1 ac arennolffibrosis interstitial mewn llygod mawr â chlefyd cronig yn yr arennau. Dulliau Rhannwyd ugain o lygod mawr gwrywaidd gradd SPF ar hap yn grŵp rheoli (n=10) a grŵp model (grŵp CKD, n=10), a rhoddwyd adenine i'r grŵp model trwy gavage a'r grŵp rheoli oedd o gael cyfaint cyfartal o halwynog trwy gavage, a dienyddiwyd y llygod mawr yn ystod y 3ydd a'r 6ed wythnos, yn y drefn honno, a gadawyd gwaed i ganfod wrea nitrogen, creatinin a Bcl-3, Gal-3, a'r arennol arsylwyd newidiadau patholegol gan staenio AU, difrifoldeb ffibrosis interstitial gan staenio Masson, a mynegiant protein -SMA yn y meinweoedd arennol trwy staenio imiwn-histocemegol. O'i gymharu â'r grŵp rheoli, mae lefelau wrea gwaednitrogen,creatinin, Bcl{{0}}, Gal-3 a TGF- 1 yn sylweddol uwch yn y grŵp CKD ar bob pwynt amser (P＜0.0 5). Roedd arwynebedd cymharol ffibrau colagen rhyngranol yn y grŵp CKD yn sylweddol uwch nag yn y grŵp rheoli (P < 0.05). Dangosodd dadansoddiad cydberthynas gydberthynas bositif rhwng lefelau gwaed Bcl-3, Gal-3, TGF- 1 ac arwynebedd cymharol ffibrosis rhyng-raniadol arennol (rs=0.776, P < 0.001 ;rs=0.58, P < 0.001; rs=0.52, P=0.001).

Casgliad Cynyddwyd lefelau Serum Bcl-3, Gal-3 a TGF- 1 yn sylweddol mewn llygod mawr gyda model CKD a achosir gan adenin ac roedd cydberthynas agos rhyngddynt a difrifoldebffibrosis arennol, y disgwylir iddo fod yn fiofarciwr newydd i'w asesuffibrosis arennol.

Geiriau allweddol:clefyd cronig yn yr arennau; ffibrosis interstitial; Bcl-3; Gal-3; TGF- 1

Cliciwch Yma I Gael Mwy o Wybodaeth Am Sut Trin CistancheClefyd cronig yn yr arennau

Clefyd cronig yn yr arennau(CKD) yn broblem gyhoeddus fyd-eang ac mae ei mynychder yn cynyddu bob blwyddyn [1].Clefyd cronig yn yr arennau(CKD) yn broblem gyhoeddus fyd-eang, ac mae ei mynychder yn cynyddu o flwyddyn i flwyddyn [1]. Mewn cyferbyniad, ffibriliad arennol yw prif batholeg dilyniant CKD i'r cam olaf. Mae CKD yn newid patholegol mawr ac yn llwybr cyffredin i bob math o CKD symud ymlaen i'r cam olaf. Mae difrifoldeb ffibrosis arennol yn gysylltiedig yn agos â dewis triniaeth a phrognosis cleifion. Felly, mae'n bwysig iawn asesu graddau ffibrosis arennol yn gywir [2]. Felly, mae asesiad cywir o raddau ffibrosis arennol yn bwysig iawn [2]. Biopsi arennau yw'r safon aur ar gyfer gwneud diagnosis o ffibrosis arennol a gall ddeall yn gywir ac yn weledol y newidiadau patholegol yn yr aren a phennu graddau ffibrosis arennol. Fodd bynnag, mae'n ymledol ac mae ganddo rai cyfyngiadau o ran gweithredu. Gellir defnyddio uwchsain B, CT, MRI a dulliau anfewnwthiol eraill i ryw raddau i bennu ffibrosis arennol. Fodd bynnag, dim ond trwy newidiadau anatomegol yn yr aren y gall y profion hyn adlewyrchu ffibrosis arennol yn anuniongyrchol. Fodd bynnag, dim ond trwy newidiadau anatomegol yn yr aren y gall y profion hyn adlewyrchu ffibrosis arennol yn anuniongyrchol, ac mae'n anodd canfod a barnu ei ddifrifoldeb yn gynnar [3]. Fodd bynnag, dim ond trwy newidiadau anatomegol yn yr aren y gall y profion hyn adlewyrchu ffibrosis arennol yn anuniongyrchol, gan ei gwneud yn anodd ei ganfod yn gynnar a phennu ei ddifrifoldeb [3]. Mewn cyferbyniad, gall biofarcwyr asesu neu fesur yn feintiol brosesau biolegol a phatholegol clefyd. gall biomarcwyr asesu neu feintioli prosesau biolegol a phatholegol clefyd, a hefyd gwasanaethu fel targedau therapiwtig ar gyfer y clefyd [4]. Gall y biomarcwyr asesu neu feintioli prosesau biolegol a phatholegol clefyd, a hefyd gwasanaethu fel targedau therapiwtig ar gyfer y clefyd [4]. Mae nifer o fiofarcwyr wedi'u nodi ar gyfer gwneud diagnosis o ffibrosis arennol. Fodd bynnag, nid oes marciwr a dderbynnir yn gyffredinol i bennu ffibrosis arennol. Felly, mae'n bwysig archwilio a sgrinio ar gyfer biomarcwyr gwerthfawr.

Mae Bcellymffoma3 (Bcl-3), Bcl-3 mewn llygod mawr, a Bcl-3 mewn llygod mawr wedi’u nodi fel y biomarcwyr pwysicaf ar gyfer diagnosis ffibrosis arennol. Mae Bcl-3 (Bcl-3) a Galectin-3 (Gal-3) yn farcwyr arennol posibl addawol yn y blynyddoedd diwethaf. blynyddoedd, ond eu gwerth Fodd bynnag, mae angen ymchwilio ymhellach i'w werth. Yn yr astudiaeth hon, ein nod oedd sefydlu model llygod mawr CKD a achosir gan adenin ac ymchwilio i werth Galectin 3. Yn yr astudiaeth hon, sefydlwyd model llygod mawr o CKD wedi'i ysgogi gan adenin a mesurwyd y serwm Bcl-3, Gal -3, ffactor trawsgenig 1, a biomarcwyr eraill mewn llygod mawr. Nod yr astudiaeth hon oedd sefydlu model llygod mawr o CKD a achosir gan adenine a mesur lefelau serwm Bcl-3, Gal-3, gan drawsnewid ffactor twf- 1 (TGF- 1 }}) a TGF- 1.

(TGF- 1) a dadansoddi eu perthynas â ffibrosis rhyng-ranol arennol, i archwilio a allant fod yn sail i bennu ffibrosis arennol. Dadansoddwyd lefelau TGF- 1, Gal-3 a TGF- 1 i benderfynu a allent fod yn fiofarcwyr newydd o ffibrosis arennol.

1 Defnyddiau a dulliau

1.1 Anifeiliaid arbrofol

Prynwyd ugain o lygod mawr SD gwrywaidd o radd SPF, pwysau corff (200 ± 10) g, 8 wythnos oed, o Ganolfan Anifeiliaid Arbrofol Prifysgol Feddygol De-orllewin [SCXK (Chuan) 2018-17]. Cafodd y llygod mawr eu cartrefu a'u casglu yn ystafell anifeiliaid Canolfan Ymchwil Meddygaeth Integreiddiol Ysbyty Cysylltiedig Meddygaeth Tsieineaidd Traddodiadol Prifysgol Feddygol De-orllewin [SYXK (Chuan) 2018-065]. Dilynodd yr arbrawf yr egwyddor "3R" o ofal trugarog. Cymeradwyodd pwyllgor moeseg anifeiliaid arbrofol Prifysgol Feddygol De-orllewin yr astudiaeth (swmu20220018).

1.2 Prif offerynnau ac adweithyddion

Adenine (Sigma, UDA); Gal-3 pecyn ELISA (Jiangsu Enzyme Free Industry Co., Ltd., China), Rat TGF- 1 pecyn ELISA (Jiangsu Enzyme Free Industry Co.

Cyf., Tsieina), llygoden fawr Bcl-3 ELISA kit (Jiangsu Enzyme Free Industry Co., Ltd., China); Ateb staenio Masson (Hefei Bomei Biotechnology Co, Ltd, Tsieina); -SMA gwrthgorff (Wuhan PhD Bioengineering Co., Ltd., Tsieina); allgyrchydd rhewi cyflym (Eppendorf Co. Ltd.

Cyf., yr Almaen); dadansoddwr biocemegol awtomatig (Siemens, yr Almaen); microsgop paraffin (Thermo, UDA); microsgop ysgafn (Nikon, Japan); offeryn safoni ensymau (Rayto, RT-6100).

1.3 Dulliau arbrofol

1.3.1 Grwpio arbrofol a pharatoi modelau Rhannwyd ugain o lygod mawr SD gwrywaidd gradd SPF ar hap yn grwpiau rheoli (n=10) a grwpiau model (CKD, n=10) ar ôl 1 wythnos o fwydo addasol. Cafodd Adenine ei hydoddi mewn dŵr distyll i wneud ataliad o 2.5 y cant. Rhoddwyd 250 mg / (kg-d) o ataliad adenine i'r grŵp CKD trwy gavage yn rheolaidd o'r 1af i'r 4edd wythnos, a rhoddwyd 125 mg / (kg-d) o ataliad adenin i'r grŵp rheoli o'r 5ed i'r 5ed wythnos. y 6ed wythnos; rhoddwyd yr un cyfaint o saline i'r grŵp rheoli trwy adwy, a bwydwyd y ddau grŵp â chow arferol. Roedd yr holl lygod mawr yn cael eu bwydo a'u dyfrio'n rhydd, gyda hanner y golau a hanner yr amser tywyll, ac roedd tymheredd yr ystafell yn 18 gradd -25 gradd .

1.3.2 Casglu sbesimenau

Dienyddiwyd y llygod mawr ar ddiwedd y 3ydd a'r 6ed wythnos, yn y drefn honno, a chasglwyd gwaed o'r aorta abdomenol; cafodd meinweoedd yr arennau eu gosod mewn hydoddiant fformalin niwtral 10 y cant a'u gwneud yn adrannau paraffin, a chafodd y rhan arall o feinweoedd yr arennau ei rewi a'i storio ar 80 gradd Roedd rhan arall y meinwe arennau wedi'i rewi a'i storio ar 80 gradd yn yr oergell.

1.3.3 Dangosyddion nitrogen wrea gwaed, creatinin, Bcl-3, Gal-3 a TGF- 1

Mesurwyd swyddogaeth arennol llygod mawr gan ddadansoddwr biocemegol cwbl awtomatig. Defnyddiwyd ELISA imiwno-assay sy'n gysylltiedig ag ensymau i bennu serwm Bcl-3, Gal-3 a TGF- 1. Pennwyd symiau Bcl-3, Gal-3 a TGF- 1 gan ELISA. Prynwyd yr holl becynnau oddi wrth Jiangsu Enzyme Free Industrial Co. Prynwyd yr holl becynnau oddi wrth Jiangsu Enzyme Free Industrial Co.

1.3.4 Meinwe arennol Staenio AU Roedd meinweoedd sefydlog yr arennau wedi'u dadhydradu, eu mewnosod, eu torri i mewn ac wedi'u gwyro.

Roedd meinweoedd sefydlog yr arennau wedi'u dadhydradu, eu mewnblannu, eu torri i mewn a'u gwyro i ddŵr

Tabl 1 Cymhariaeth o swyddogaeth arennol rhwng dau grŵp o lygod mawr (&x±s)

2.2 Cymhariaeth lefelau serwm Bcl-3, Gal-3 a TGF- 1 rhwng y ddau grŵp O gymharu â'r grŵp rheoli, y gwaed Bcl-3, Gal-3 ac roedd lefelau TGF- 1 yn y grŵp CKD yn uwch na'r rhai yn y grŵp rheoli. O gymharu â'r grŵp rheoli, roedd lefelau gwaed Bcl-3, Gal-3 a TGF{{10}} yn sylweddol uwch yn y grŵp CKD ar bob pwynt amser (P < {{14} }}.05). Roedd lefelau TGF- 1 yn sylweddol uwch yn y grŵp CKD (P < 0.05); o fewn y grŵp CKD, roedd lefelau Bcl-3 3yn sylweddol uwch ar 6 wythnos o gymharu â 3 wythnos yn y grŵp CKD (P < 0.05). Gweler Ffigur 1

2.3 Staeniad AU o feinweoedd yr arennau yn y ddau grŵp Nid oedd unrhyw newidiadau patholegol amlwg ym meinweoedd arennau'r grŵp rheoli ar bob pwynt amser, tra gwelwyd meinweoedd arennau'r grŵp CKD ar bob pwynt amser. Nid oedd unrhyw newidiadau patholegol amlwg ym meinweoedd arennau'r grŵp rheoli ar bob pwynt amser, tra yn y grŵp CKD, arennol Dangosodd y celloedd epithelial arennol yn y grŵp CKD necrosis dirywiol, ymlediad, ymlediad meinwe ffibrog interstitial ac ymdreiddiad celloedd llidiol. Roedd y newidiadau yn fwy amlwg yn wythnos 6 nag yn wythnos 3, gweler Ffigur 2

2.4 Staenio meinweoedd arennol masson a sgoriau ffibriliad interstitial y ddau grŵp o lygod mawr Interstitium y grŵp rheoli llygod mawr ar ddiwedd y 3ydd a'r 6ed wythnos Ni welwyd unrhyw ddyddodiad ffibr colagen amlwg yn interstitiwm y llygod mawr rheoli ar ddiwedd y 3ydd a'r 6ed wythnos. Y cynnydd mewn dyddodiad ffibr colagen yn interstitium llygod mawr CKD ar ddiwedd y 6ed wythnos o'i gymharu â diwedd y 3edd wythnos （ Roedd ardal gymharol ffibrau colagen interstitial yn y grŵp CKD hefyd yn sylweddol uwch nag yn y grŵp rheoli . Roedd ardal gymharol ffibrau colagen rhyng-raniadol yn y grŵp CKD hefyd yn sylweddol uwch na'r un yn y grŵp rheoli, ac roedd yn uwch ar ddiwedd wythnos 6 nag ar ddiwedd wythnos 3 (P < {{1{4} }.05). (P < 0.05). Gweler Ffigur 3.

Ffigur 3 Canlyniadau staenio Masson a sgôr ardal gymharol ffibrau colagen yn y interstitium arennol