Manteision acteoside - trin glioblastoma

Cyswllt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-bost:audrey.hu@wecistanche.com

TAE WOONG HWANG; Dong HUN KIM; DA BI KIM1; TAE WEDI JANG; GUN-HWA KIM; MINHO MOON; KYUNG AH YOON; DAE EUN CHO; JAE HO PARK; JWA-JIN KIM

1. Rhagymadrodd

Glioblastomayw'r math mwyaf cyffredin o diwmor ymennydd cynradd malaen malaen a'r tiwmor ymennydd cynradd mwyaf ymledol a dinistriol (1,2), gyda chyfradd goroesi ganolrifol o ~18 mis gyda therapi amlfodd ymosodol. Mae penderfyniadau triniaeth cyfredol yn gyfyngedig ac yn cynnwys ymbelydredd, cemotherapi, a llawdriniaeth ar y cyd â'r asiant alkylating temozolomide (TMZ) (3,4). Er gwaethaf argaeledd therapïau ymosodol, mae cleifion âglioblastomayn gyffredinol â phrognosis gwael (5). TMZ yw'r prif gyffur cemotherapiwtig a ddefnyddir wrth drin malaen yn glinigolglioblastoma(6‑8); fel asiant alkylating yn y gyfres, mae'n gallu treiddio i'r rhwystr gwaed-ymennydd (9-11). Yn ystod dilyniant glioblastoma malaen a goresgyniad helaeth ledled yr ymennydd, mae ymwrthedd cynyddol cyffuriau i TMZ yn lleihau ei effeithiolrwydd therapiwtig (12,13). Yn unol â hynny, cyffuriau therapiwtig newydd i'w gwrthweithioglioblastomayn cael eu ceisio ar frys.

Mae astudiaethau blaenorol wedi nodi bod celloedd glioma yn cael marwolaeth celloedd trwy awtophagi, neu farwolaeth celloedd rhaglen math II, mewn ymateb i TMZ (14,15). Gall awtophagy gael ei atal gan 3-methyladenine (3-MA) ​​trwy drosi protein sy'n gysylltiedig â micro-tiwbyn 1 cadwyn ysgafn 3 (LC3)-I i LC3-II, gan leihauglioblastomamarwolaeth celloedd (16,17); fodd bynnag, mae rôl awtophagi yn dibynnu ar y cyd-destun cellog. Ac eithrio rôl sytotocsig yn ystod gweithredu TMZ, mae sefydlu awtoffagi gan straen cellog yn broses sytoprotective sy'n dileu agregau sytoplasmig a achosir gan straen, organynnau, a macromoleciwlau mewn celloedd mamaliaid trwy'r system lysosomaidd. Yn eu tro, mae celloedd sy'n ymwneud â chynnal homeostasis yn derbyn egni trwy'r prosesau catabolaidd hyn (18,19). Mae rolau cymhleth awtoffagi yn awgrymu y gallai actifadu awtophagi gael effeithiau gwrthganser ar y cyd â thriniaeth TMZ trwy gymellglioblastomaawtoffagi celloedd heb gael effeithiau niweidiol na darparu buddion i feinweoedd arferol. Mae'n werth nodi, mae TMZ wedi arddangos effeithiau therapiwtig synergaidd ar y cyd â fitamin D, gan gynnwys hyfywedd celloedd wedi'i atal a mwy o awtophagi mewnglioblastomacelloedd. At hynny, dangoswyd bod y cyfuniad o TMZ a fitamin D yn cael effeithiau gwrthganser in vivo, gan gynnwys llai o faint tiwmor a chyfradd goroesi hir. Mae'r astudiaethau hyn yn awgrymu y gallai triniaeth gyfunol gael effeithiau gwrthganser synergaidd trwy fecanweithiau awtoffagic yn seiliedig ar TMZglioblastomatherapi (15).

Acteosideyn glycoside ffenylethanoid sy'n cael ei ddosbarthu'n eang mewn nifer o feddyginiaethau llysieuol Tsieineaidd traddodiadol tonifying (20,21). Mae nifer o gamau ffarmacolegol, gan gynnwys gweithredoedd gwrthocsidiol, gwrthganser, gwrthlidiol, antinffritig ac antimetastatig, wedi'u cysylltu âacteosid(22‑24). Mae astudiaethau blaenorol wedi dangos hynnyacteosidyn cael effeithiau amddiffynnol yn erbyn carbon tetraclorid- ac anaf i'r afu a achosir gan D-galactosamine. Mae'r mecanweithiau sy'n sail i effeithiau amddiffynnol acteosid yn debygol o fod yn gysylltiedig â'i allu i atal bioactivation cyfrwng P450 ac effeithiau sborionu radical rhydd a achosir gan amlygiad carbon tetraclorid (25,26).

Felly, mae tystiolaeth yn awgrymu bod y ddauacteosida TMZ yn achosi effeithiau gwrthganser trwy farwolaeth celloedd. Fodd bynnag, mae eu cysylltiad ac effeithiau gwrthganser yng nghyd-destunglioblastomaaros i'w hegluro. Felly, amcan yr astudiaeth bresennol oedd gwirio effeithiau gwrthganser synergaiddacteosidwedi'i gyfuno â TMZ i mewnglioblastomatherapi. Perfformiwyd assay hyfywedd celloedd i ddadansoddi effeithiau gwrthganser y driniaeth gyfunol yn C6glioblastomacelloedd (llygoden fawrglioblastomallinell gell), a chymharwyd y canlyniadau â'r rhai yn dilyn triniaeth gyda TMZ yn unig. I archwilio ymhellach y mecanwaith o farwolaeth celloedd a achosir gan cotreatment gydaacteosidac archwiliwyd TMZ, apoptosis a genynnau cysylltiedig ag awtophagi mewn celloedd C6.

acteosid gwrth-tiwmor

2. Deunyddiau a dulliau

Diwylliant Cell:

Y llygoden fawr C6glioblastomaprynwyd llinell gell o American Type Culture Collection (Rockville, MD, UDA). Cafodd y celloedd eu meithrin o dan amodau di-haint ar 37˚C mewn amgylchedd llaith gyda 5 y cant o CO2 yng nghyfrwng addasedig Eagle's (DMEM) Dulbecco wedi'i ategu â serwm buchol ffetws 10 y cant (FBS), ac 1 y cant o wrthfiotigau a gwrthfycotigau (Welgene, Daegu i gyd). , Corea).

Deunydd Planhigyn:

Abeliophyllum distichum Nakai [voucher no. Casglwyd Park1001(ANH)] ym mharc Thema Misun-hyang, Coedwig Hamdden Seongbul-Mountain, Korea.

Sefydlu Callus:

Er mwyn ysgogi ffurfio calws (27), ynysu 1-cm2 echdynion dail o'r planhigion ffres. Cafodd yr allblaniad ei feithrin ar gyfrwng Murachige a Skoog (swcros 4 y cant, 0.9 y cant agar wedi'i ategu ag 1 mg/l asid asetig naphthalene ac 1 mg/l 2,4-dichloro asid asetig ffenoxy, pH 5.7) yn 25˚C. Cafodd y callus ei ysgogi 20 diwrnod yn ddiweddarach. Nifer digonol oacteosida gafwyd trwy isddiwylliad i wahanu a phuroacteosido'r callus (Ffig. 1). Gwahanol sypiau o puroacteosideu defnyddio ym mhob arbrawf. Perfformiwyd pob arbrawf deirgwaith gan ddefnyddio swp gwahanol.

Ynysu a phuro:

Crynhowyd y ffracsiynau asetad ethyl mewn gwactod a'u defnyddio fel sampl ar gyfer puro acteosid.Acteosideynysu a phuro gan y system Arwahanu Cromatograffig Cyflym (Isolera™ Spektra, Biotage, Uppsala, Sweden) gan ddefnyddio SNAP KPHOSPHO-SIL a SNAP Ultra Cetris (Biotage). Mae'racteosidpuro o'r callus ei ddadansoddi'n feintiol gan ddefnyddio'r acteosid safonol gan HPLC-PDA dadansoddiad. Yn olaf, cafwyd acteoside purdeb Mwy na neu'n hafal i 95 y cant o'r callus a'i ddefnyddio fel sampl ar gyfer cemotherapi ar sail temozolomideglioblastoma.

Assay bromid 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-l)-,5-diphenyltetrazolium bromid (MTT):

Er mwyn nodi'r crynodiad ataliol hanner-uchafswm TMZ (gwerth IC50) yn erbyn celloedd C6, cafodd celloedd 1x104 mewn ataliadau un-gell eu hadu i ffynhonnau unigol o blatiau ffynnon 96 a'u deor am 24 h ar 37˚C cyn triniaeth TMZ yn yr un a nodir. crynodiadau (1, 5, 10, ac 20 mM) ar 37˚C am 24 h. Ar ôl pennu gwerth TMZ IC50 fel 5 mm, cafodd y celloedd eu trin am 24 h gyda 5 mM TMZ, 50 µMacteosid, neu gyfuniad o'r ddau (5 mM TMZ a 50 µMacteosid). Ychwanegwyd hydoddiant MTT (5 mg/ml) at bob ffynnon (10 µl) a'i feithrin ar 37˚C am 2 h. Yn dilyn hynny, tynnwyd y cyfrwng ac ychwanegwyd DMSO ar gyfaint o 200 µl yr un a'i adweithio ar dymheredd ystafell am 30 munud. Mesurwyd yr amsugnedd ar 595 nm i bennu hyfywedd celloedd.

Assay gwella clwyf:

Cafodd crogiad cell C6 mewn 1 ml ei feithrin mewn plât 12 ffynnon a'i dyfu i gydlifiad. Cafodd y celloedd eu trin â TMZ,acteosid, neu TMZ a mwyacteosidac yna ei grafu â blaen pibed di-haint 10‑µl i greu clwyf artiffisial. Ar 0 a 24 h ar ôl y clwyf, cafodd delweddau digidol o'r broses gwella clwyfau eu dal gan ddefnyddio microsgop gwrthdro. Cafodd mudo celloedd ei feintioli trwy fesur maint y graith ar 0 a 24 h gan ddefnyddio'r meddalwedd dadansoddi delweddau, meddalwedd ImageJ 1.43u/Java1.6.0_22 (NIH, Bethesda, Maryland, UDA). Perfformiwyd pob arbrawf dair gwaith a pherfformiwyd y mesuriadau yn driphlyg.

Blotio imiwn:

Cafodd celloedd C6 eu trin â TMZ,acteosid, neu TMZ a mwyacteosidam 24 h. Cafodd celloedd eu gorchuddio ar rew gan y byffer lysis RIPA (25 mM Tris-HCl, pH 7.5, 150 mM NaCl, 1 y cant Nonidet P-40, 1 y cant sodiwm deoxycholate, 0.1 y cant SDS), wedi'i ategu â choctel atalyddion proteas a phosphatase (Roche, Basel, y Swistir) am 30 munud. Ar ôl centrifugio ar 18,341 xg am 15 munud ar 4˚C, cafwyd y supernatant. Pennwyd crynodiad protein gan ddefnyddio Bradford Protein Assays (Bio-rad, Hercules, CA, UDA). Llwythwyd symiau cyfartal o gyfanswm proteinau (30 µg) i ffynhonnau sengl a'u ffracsiynu trwy electrofforesis trwy SDS-TUDALEN 10-15 y cant. Trosglwyddwyd y proteinau i bilenni polyvinylidene difluoride (EMD Millipore, Bedford, MA, UDA). Yn dilyn deori mewn hydoddiant blocio sy'n cynnwys 5 y cant o laeth di-fraster mewn halwynog Tween/Tris-byffer am 30 munud ar dymheredd ystafell. Archwiliwyd y blots gyda gwrthgyrff cynradd gwanedig 1:1,000-(cat. rhif. 9662, caspase 3; Cell Signaling Technology, Inc., Danvers, MA, UDA), lymffoma B0-cell 2 (sc- 7382, Bcl-2), Bcl-2-protein X cysylltiedig (cath. rhif 2772, Bax), ffosfforyleiddiad (p‑)p53 (sc-101762), cyfanswm-p53 (sc-6243), -actin (cath. rhif 4970; i gyd; Santa Cruz Biotechnology, Inc., Dallas, TX, UDA), LC-3 (L8918, Sigma; Merck KGaA, Darmstadt, yr Almaen), Rab7 (cat. rhif 9367, Cell Signaling Technology, Inc. ), t62 (cath. rhif 114), p‑p38 (cath. rhif 9211), cyfanswm‑p38 (cath. rhif 9212), p‑c‑Mehefin N‑terminal kinase (cath. rhif 9251, t. -JNK), cyfanswm-JNK (cath. rhif 9252), kinase p-allgellog a reoleiddir gan signalau (cath. rhif 9101, p-ERK), cyfanswm-ERK (cat. rhif 9102; pob Cell Signaling Technology, Inc. .) dros nos am 4˚C. Dilynwyd hyn gan ddeor gyda gwrthgyrff eilaidd cyfuniad perocsidas marchruddygl (1:2,000; LF-SA8001A, Goat Anti-Mouse IgG-HRP) neu LF-SA8002A (Goat Anti-Cwningen IgG-HRP), AB Frontier, Seoul, Korea.) am 2 awr ar dymheredd ystafell. Yna delweddwyd y proteinau trwy ddod i gysylltiad â Chemi-Doc (Bio-Rad Laboratories, Inc., Hercules, cA, UDA).

Staenio imiwnofflworoleuedd:

Mae protein pilen sy'n gysylltiedig â lysosomaidd 1 (LAMP1) ac LC3 yn farcwyr ar gyfer lysosomaidd ac awtophagi. Paratowyd y celloedd (1x105 cell/ffynnon) ar orchuddion gwydr wedi'u sterileiddio (BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ, UDA) yn driphlyg. Yn dilyn triniaeth gyda TMZ,acteosid, neu TMZ a mwyacteosidam 24 h, gosodwyd y celloedd mewn paraformaldehyde 4 y cant am 30 mun, wedi'u rhwystro â serwm cyw iâr arferol 5 y cant (S-3000; Vector Laboratories, Inc., Burlingame, CA, UDA), 0.1 y cant Triton X -100 ac yna deor 1 h ar gyfer athreiddedd ac i rwystro rhyngweithiadau protein-protein amhenodol. Yna deorwyd y celloedd gyda'r gwrth-LAMP1 (1:200; sc-19992, Santa Cruz Biotechnology, Inc.) a gwrth-LC3 (1:400; PM036, MBL International, Woburn, MA, UDA) dros nos am 4˚ C. Yna golchwyd y celloedd ddwywaith gyda PBS a'u deor am 2 awr ychwanegol yn y tywyllwch gyda chymysgedd o wrthgyrff eilaidd Alexa Fluor 488 a 594 (1:200; Alexa Fluor 488 (A-11008) a 594 (A-11007), Thermo Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA, UDA) a'i olchi eto gyda PBS. Cafodd y cnewyllyn eu staenio gan ddefnyddio 4,6-diamidino-2-phenylindole (Sigma; Merck KGaA), ac yna eu golchi ddwywaith gyda PBS. Yna cafodd y sleidiau eu gosod a chafodd delweddau eu dal o dan ficrosgop confocal laser LSM-700.

Ffigur 1. Strwythur cemegol acteoside.

Cytometreg llif.

Dadansoddwyd y celloedd ar gyfer Mitotracker Green a MitoSOX yn ôl cytometreg llif gan ddefnyddio cytomedr llif FACSCanto II, fel y nodwyd gan y gwneuthurwr (BD Biosciences). Yn dilyn dau olchi gyda PBS, gosodwyd y celloedd mewn paraformaldehyde 4 y cant am 30 munud ar dymheredd yr ystafell ac yn athraidd gyda 0.25 y cant Triton X-100 yn PBS am 20 munud. Cafodd y celloedd eu staenio â gwrthgyrff cynradd dros nos ar 4˚C (1:200) ac yna gyda gwrthgyrff eilaidd am 1 awr ar rew. Yn dilyn dau olchi gyda PBS, gosodwyd y celloedd mewn paraformaldehyd 4 y cant a'u profi ar unwaith. Casglwyd y data cytometreg llif gan ddefnyddio 10,000 o gelloedd a chawsant eu dadansoddi gan ddefnyddio meddalwedd FlowJo 7.6.1 (Tree Star, Inc., Ashland, OR, USA).

Dadansoddiad ystadegol:

Dadansoddwyd yr holl ddata gan ddefnyddio GraphPad Prism 5.0 ac fe'u cyflwynir fel cymedr ± gwall safonol y cymedr. Dadansoddwyd data gyda dadansoddiad un ffordd o amrywiant gyda phrawf ôl hoc cymariaethau lluosog Tukey ar gyfer cymharu gwerthoedd cymedrig ymhlith grwpiau lluosog. P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">

Cistanche Echinacoside: Gwrth-apoptosis

3. Canlyniadau

3.1 Codriniaeth â TMZ ac ataliadau acteosidglioblastomaamlhau celloedd a mudo.

Triniaeth gyfunol â TMZ aacteosidatal hyfywedd celloedd C6. TMZ lleihau hyfywedd celloedd mewn modd dos-ddibynnol (Ffig. 2 A), tra acteoside ei ben ei hun yn cael unrhyw effaith sylweddol ar unrhyw lefel driniaeth (Ffig. 2 B). Yn dilyn deori mewn cyfrwng diwylliant sy'n cynnwys TMZ gyda neu heb acteoside am 24 h, cynhaliwyd assay MTT i gymharu sytotocsigeddau gwahanol lefelau triniaeth. Roedd TMZ yn atal hyfywedd celloedd yn sylweddol, tra nad oedd acteoside yn atal twf celloedd yn sylweddol. Roedd triniaeth gyfunol â TMZ ac acteoside yn lleihau hyfywedd celloedd yn sylweddol (Ffig. 2C). Roedd triniaeth gyda TMZ neu acteoside ar ei ben ei hun yn lleihau'r gallu i wella clwyfau (Ffig. 3A). Mesurwyd y pellter clwyf ( y cant ) gan ddefnyddio'r canlyniadau a ddangosir yn Ffig. 3A gyda meddalwedd ImageJ. Cynyddodd pellter y clwyf yn sylweddol yn dilyn triniaeth gyfunol (Ffig. 3B), o'i gymharu â'r naill driniaeth unigol neu'r llall. Mae'r canlyniadau hyn yn dangos bod cotreatment gyda TMZ ac acteoside yn atalydd effeithiol oglioblastomaamlhau celloedd a mudo.

3.2 Mae Acteoside a TMZ yn effeithio ar apoptosis yn synergyddol mewn celloedd C6.

Datgelodd canlyniadau'r dadansoddiad o blotiau gorllewinol fod lefelau caspase-3, Bax, a phosphorylated p53 wedi'u hollti yn uwch ac roedd lefelau Bcl-2 yn is yn dilyn triniaeth gyfunol â TMZ aacteosidnag yn dilyn triniaeth gyda TMZ yn unig (Ffig. 4A).ActeosideYna gwelwyd swyddogaeth mitocondriaidd wedi'i chyfryngu a chynhyrchu rhywogaethau ocsigen adweithiol (ROS), sy'n gyfryngwyr allweddol signalau apoptotig, yn y celloedd C6 a driniwyd gan TMZ. I wirio màs mitocondriaidd, cynhaliwyd dadansoddiad didoli celloedd wedi'i ysgogi gan fflworoleuedd gan ddefnyddio MitoTracker Green. Cotreatment gyda TMZ aacteosidarwain at fàs mitocondriaidd uwch na thriniaeth gyda TMZ yn unig (Ffig. 4B). Roedd cynhyrchu ROS yn sylweddol uwch yn dilyn cotreatment gyda TMZ ac acteoside na thriniaeth gyda TMZ yn unig (Ffig. 4 C). Mae'r canlyniadau hyn yn awgrymu bod cynhyrchu ROS a swyddogaeth mitocondriaidd yn bwysig mewn apoptosis a achosir gan driniaeth â TMZ ac acteoside. Mae triniaeth â TMZ ac acteoside yn achosi awtophagi mewn celloedd C6. Adroddwyd bod TMZ yn achosi awtophagi (28,29); felly, archwiliodd yr astudiaeth bresennol i ba raddau yr oedd awtoffagy yn cael ei achosi gan TMZ ynghyd â thriniaeth acteosid. Cafodd y celloedd C6 eu trin â TMZ gyda neu heb acteosid; ar ôl 24 h, a chafodd y celloedd eu staenio ar gyfer immunofluorescence i ganfod LAMP1 a LC3 fel marcwyr awtoffagy. Arsylwyd lefelau mynegiant uwch o LAMP1 a LC3 yn dilyn y driniaeth gyfuniad (Ffig. 5A). Archwiliwyd mynegiant protein sy'n gysylltiedig ag awtophagi hefyd, a chanfuwyd bod TMZ wedi ysgogi trosi LC3-I i LC3-II, sy'n arwydd o gynhyrchu autophagosome. Arsylwyd cyfradd uwch o drosi LC3-I i LC3-II ar ôl cael ei drin â TMZ ac acteosid na thriniaeth â TMZ yn unig. Roedd lefelau mynegiant Rab7 a t62 yn dynodi anwythiad awtophagy yn y celloedd a driniwyd gan TMZ (Ffig. 5 B). Mae'r canfyddiadau hyn yn awgrymu bod cotreatment â TMZ ac acteosid wedi gwella'r broses awtoffagicglioblastomacelloedd.

3.3 Mae Acteoside yn ysgogi mynegiant genynnau llwybr MAPK mewn triniaeth sy'n seiliedig ar TMZ.

Mae astudiaethau blaenorol wedi dangos bod TMZ yn rheoleiddio'r llwybr MAPK, gan gynnwys p38, JNK, ac ERK (30). Felly, ymchwiliodd yr astudiaeth bresennol i weld aacteosidyn effeithio ar fynegiant genynnau MAPK sy'n gysylltiedig â TMZ. Cafodd y celloedd C6 eu trin â TMZ gyda neu hebacteosid. Ar ôl 24 h, arweiniodd triniaeth TMZ at lefelau mynegiant uwch o p-p38, p-JNK, a p-ERK. Roedd mynegiant genynnau a reoleiddir gan TMZ yn sylweddol uwch yn dilyn TMZ ynghyd â thriniaeth acteosid na thriniaeth gyda TMZ yn unig (Ffig. 6). Mae'r sylwadau hyn yn awgrymu hynnyacteosidyn effeithio ar fecanweithiau therapiwtig sy'n seiliedig ar TMZ trwy'r llwybr MAPK.

Acteoside gwrth-glioblastoma

Trafodaeth

Mae canlyniadau'r astudiaeth bresennol yn sefydlu bod y driniaeth gyfunol â TMZ gydaacteosidyn cynnig potensial therapiwtig ar gyferglioblastomatriniaeth, a darparu tystiolaeth bod cemosensiteiddio i gyfuniad o TMZ aacteosidgall ddigwydd trwy wella awtophagy. Fel y treiglad oglioblastomagall celloedd arwain at anactifadu llwybr apoptotig, sefydlu awtophagi gan TMZ plusacteosidgall cotreatment gynrychioli dull amgen ar gyferglioblastomatherapi. Fodd bynnag, ai awtophagy yw'r unig fecanwaith ar gyferglioblastomatherapi gyda TMZ a mwyacteosidcotreatment yn parhau i fod yn eglur.

Mae awtophagi yn fecanwaith cellog hanfodol ar gyfer diraddio proteinau ac organynnau cytoplasmig. Gall mantais catabolaidd awtoffagi ysgogedig fod yn bwysig mewn amodau dirdynnol; felly, gall sefydlu awtophagy fod yn fecanwaith addasol ar gyfer atal marwolaethau celloedd (31-33). Mae astudiaethau blaenorol wedi nodi bod llai o awtophagi yn cydberthyn â chanser (34-36). Yn ogystal, mae nifer o broteinau a llwybrau signalau sy'n gysylltiedig ag awtophagy yn cael eu dadreoleiddio yn ystod trawsnewid malaen, gan arwain at ostyngiad mewn gweithgaredd awtoffagic. Mae lefelau mynegiant uchel o LC3 hefyd wedi'u cysylltu â chyfraddau goroesi uwch mewn cleifion âglioblastomagyda sgorau perfformiad gwael (37,38). Yn yr un modd, mae canlyniadau'r astudiaeth bresennol yn dangos y gall adfer awtophagi arferol fod yn strategaeth gudd ar gyferglioblastomatherapi, a gall fod yn fecanwaith ar gyfer cyfyngu ar dwf celloedd tiwmor annormal.

Mewn awtophagi arferol, mae cydrannau cytoplasmig penodol yn cael eu hynysu o fewn awtoffagosomau sydd wedyn yn asio â lysosom i gael eu diraddio a'u hailgylchu (39,40). Pan fydd awtophagy yn cael ei uwchreoleiddio, mae cyfraddau ffurfio awtoffagosom yn rhagori ar gyfraddau diraddio lysosomaidd; gelwir y cyflwr hwn yn straen awtoffagic. Os bydd straen neu awtophagi annormal yn parhau, gall marwolaeth celloedd ddigwydd trwy ddisbyddu egni neu newidiadau yn y cydbwysedd beclin-1 / Bcl-2. Gall apoptosis hefyd gael ei sbarduno gan orfywiogrwydd awtoffagosome, amlyncu organynnau cytoplasmig gan gynnwys y mitocondria neu reticwlwm endoplasmig (41). Awgrymwyd y gall awtophagi cyffredinol achosi marwolaeth celloedd yn ystod trosiant cytoplasmig ac organelle arferol mewn celloedd iach. Yn y broses hon, mae'r gell yn 'canibaleiddio' ei hun o'r tu mewn, sy'n nodwedd allweddol o farwolaeth celloedd rhaglenedig math II. Er bod y mecanweithiau y maeacteosidyn gwella effaith therapiwtig seiliedig ar TMZglioblastomatherapi heb ei egluro'n llawn o hyd, mae'n bosibl bod yr effeithiau gwrthganser a ddangosir gan y driniaeth gyfunol a archwiliwyd yn yr astudiaeth bresennol yn gysylltiedig â'r mecanweithiau awtoffagic hyn.

Acteosideyn glycoside ffenylethanoid sy'n deillio o blanhigion (22,26). Mae astudiaethau blaenorol wedi adrodd ar weithgareddau biolegol amrywiol acteosid. Mae'r newidiadau yn lefelau mynegiant caspase-3 hollt ac LC3 yn yr astudiaeth bresennol yn dangos bod triniaeth gyda chyfuniad o TMZ aacteosidapoptosis ysgogedig ac awtophagi mewn celloedd C6 (Ffig. 4 a 5). Dangoswyd bod y driniaeth gyfunol yn cael effaith synergaidd arglioblastomacelloedd. Er bod mecanweithiau posibl eraill o'r effeithiau synergaidd hyn yn dal heb eu hegluro, nododd yr astudiaeth bresennol sefydlu awtoffagi fel mecanwaith tiwmorladdol hanfodol.acteosidcemosensiteiddio yn ystod seiliedig ar TMZglioblastomatherapi.

Mae acteoside yn trin glioblastoma

Cyfeiriadau

1. Friedman HS, Kerby T, a Calvert H: Temozolomid a thrin glioma malaen. Canser Clin Res 6: 2585-2597, 2000.

2. Mrugala MM a Chamberlain MC: Mecanweithiau clefyd: Temozolomide aglioblastoma- edrych i'r dyfodol. Nat Clin Ymarfer Oncol 5: 476-486, 2008.

3. Agarwala SS a Kirkwood JM: Gall Temozolomide, asiant alkylating newydd gyda gweithgaredd yn y system nerfol ganolog, wella triniaeth melanoma metastatig uwch. Oncolegydd 5: 144-151, 2000.

4.Stevens MF, Hickman JA, Stone R, Gibson NW, Baig GU, Lunt E a Newton cG: Antitumor imidazotetrazines. 1. Synthesis a chemeg 8-carbamoyl-3-(2-cloroethyl)imidazo[5,1-d]-1,2,3, 5-tetrazine-4(3 H)-un, antitumor sbectrwm eang newydd asiant. J Med Chem 27: 196-201, 1984.

5. Fulda S: Triniaeth celloedd yn seiliedig ar farwolaethglioblastoma. Marwolaeth Cell dis 9: 121, 2018.

6. Chen PH, Shen WL, Shih CM, Ho KH, Cheng CH, Lin CW, Lee CC, Liu AJ, a Chen KC: Mae llwybr Notch3 a ataliwyd gan CHAC1 yn ymwneud â sytowenwyndra glioma a achosir gan temozolomide. Niwroffarmacoleg 116: 300-314, 2017.

7. Oshiro S, Tsugu H, Komatsu F, Ohmura T, Ohta M, Sakamoto S, Fukushima T ac Inoue T: Effeithiolrwydd triniaeth temozolomide mewn cleifion â glioma gradd uchel. Gwrthganser Res 29: 911-917, 2009.

8. Van den Bent MJ: Triniaeth gynorthwyol o gliomas gradd uchel. Ann Oncol 17 (Suppl 10): x186-x190, 2006.

9. Shen W, Hu JA, a Zheng JS: Mecanwaith effeithiau gwrth-tiwmor a achosir gan temozolomide ar gelloedd glioma. J Int Med Res 42: 164-172, 2014.

10.Barciszewska AC, Gurda D, Głodowicz P, Nowak S a Naskręt-Barciszewska MZ: Mecanwaith epigenetig newydd o weithredu temozolomide mewn celloedd glioma. PLoS Un 10: e0136669, 2015.