Effeithiau Gwahaniaethol Cyfoethogi Amgylcheddol Cryno yn dilyn Arwahanrwydd Cymdeithasol mewn Llygod Mawr Rhan 2

Prawf maes agored

Defnyddiwyd cae agored (72 × 72 × 45 cm) i fesur lefelau gweithgaredd locomotor cyffredinol. Cymerwyd pob anifail i ystafell brawf 5 cyn y prawf a'i roi yn yr ystafell OFT am 5 munud arall.

Yn ystod y blynyddoedd diwethaf, mae mwy a mwy o astudiaethau gwyddonol wedi dangos bod cysylltiad anorfod rhwng gweithgaredd modur a chof. Mae gwahanol fathau o weithgareddau chwaraeon yn cael effaith sylweddol ar hyrwyddo cof i bobl o wahanol oedrannau, sydd o arwyddocâd mawr i'n hastudiaeth, ein gwaith a'n bywyd bob dydd.

Gall gweithgareddau ymarfer corff ysgogi cylchrediad gwaed a system resbiradol y corff a hyrwyddo metaboledd. Yn y modd hwn, bydd y pibellau gwaed yn yr ymennydd yn derbyn gwell cyflenwad gwaed, a bydd mwy o ocsigen a maetholion yn cael eu darparu i sicrhau gweithrediad arferol celloedd yr ymennydd. Gall y cyflwr corfforol da hwn ein helpu i ganolbwyntio'n well a gwella galluoedd dysgu a chof. O ganlyniad, mae pobl sy'n cymryd rhan yn rheolaidd mewn gweithgaredd corfforol yn gyffredinol yn gallu cynnal eu cof a'u bywiogrwydd meddwl yn well.

Yn ogystal, gall gwahanol fathau o weithgareddau ymarfer corff effeithio ar wahanol fathau o gof. Er enghraifft, gall ymarfer aerobig fel rhedeg pellter hir hyrwyddo twf yr hippocampus, a thrwy hynny wella gallu cof gofodol pobl. Gall gweithgareddau cydsymud cyflym fel chwarae tenis bwrdd ysgogi cof dawns a chof tymor byr. Ar gyfer yr henoed, gall cymryd rhan mewn chwaraeon meddwl fel gwyddbwyll wella cof yn fawr o ran deallusrwydd a gwybyddiaeth ofodol.

Yn ogystal, gall gweithgareddau ymarfer corff wella cof ymhellach trwy leihau straen a gwella ansawdd cwsg. Mae straen ac anhunedd nid yn unig yn effeithio ar gyflenwad gwaed a metaboledd yr ymennydd ond hefyd yn gwneud pobl yn isel eu hysbryd ac wedi blino'n lân, gan eu gwneud yn methu â chanolbwyntio a chanolbwyntio. Gall gweithgareddau ymarfer corff priodol dynnu sylw, lleddfu straen ar y corff a'r ymennydd, helpu i wella ansawdd ein cwsg, ei gwneud hi'n haws i ni ganolbwyntio ar ddysgu a gweithio, a gwella cof.

I grynhoi, gall gweithgareddau ymarfer corff hyrwyddo cylchrediad gwaed a metaboledd, gwella cyflwr corfforol ac iechyd meddwl, a thrwy hynny hyrwyddo gwella cof. Felly, dylem gymryd rhan mewn gwahanol fathau o weithgareddau chwaraeon yn ein bywydau bob dydd i gynnal iechyd y corff a'r ymennydd a hyrwyddo gwella cof. Gellir gweld bod angen i ni wella ein cof. Gall Cistanche deserticola wella cof yn sylweddol, oherwydd gall Cistanche deserticola hefyd reoleiddio cydbwysedd niwrodrosglwyddyddion, megis cynyddu lefelau acetylcholine a ffactorau twf. Mae'r sylweddau hyn yn bwysig iawn ar gyfer cof a dysgu. Yn ogystal, gall cig hefyd wella llif y gwaed a hyrwyddo darpariaeth ocsigen, a all sicrhau bod yr ymennydd yn derbyn digon o faetholion ac egni, gan wella bywiogrwydd a dygnwch yr ymennydd.

Cliciwch gwybod atchwanegiadau i hybu cof

Recordiwyd sesiynau ar fideo trwy ddefnyddio meddalwedd olrhain anifeiliaid EthoVision (Noldus, Wageningen, NL) i asesu cyfanswm hyd y symudedd a phatrymau ymddygiad penodol, gan gynnwys magu athigmotaxis.

Uchel a drysfa

Defnyddiwyd EPM (Handley & Mithani, 1984; Pellow et al., 1985; Pellow & File, 1986) a sefydlwyd ar 51 cm uwchlaw lefel y ddaear i asesu ymddygiad tebyg i bryder. Mae'n cynnwys sylfaen bren gyda phedair braich gul (50 × 10 cm).

Gorchuddir dwy fraich gyferbyn ag ochrau gwydr acrylig tryloyw a elwir yn freichiau agored, tra bod y ddwy arall wedi'u cau ag ochrau pren, gan arwain at goridorau llawer tywyllach.

Rhoddwyd pob anifail yn y rhan ganolog a'i adael yn y ddrysfa am 5 munud. Cafodd cyfanswm yr amser a dreuliwyd yng nghanol thema, mewn breichiau agored a breichiau caeedig, ei gofnodi a'i gyfrifo gydag EthoVision. Mae amser a dreulir mewn breichiau agored yn arwydd o effaith gorbryderus tra bod breichiau caeedig yn gysylltiedig ag ymddygiad tebyg i bryder (Walf & Frye, 2007).

Y-ddrysfa ddŵr

Fe wnaethom ddefnyddio fersiwn wedi'i addasu o'r ddrysfa ddŵr T a ddatblygwyd gan Del Arco et al. (2007) a dilyswyd gan Locchi et al.(2007). Llenwyd drysfa Y gwydr acrylig yn cynnwys tair braich 120 gradd ar wahân (45 × 15.5 × 45 cm yr un) â 30 cm o ddŵr ar 24 ± 0.5 gradd i asesu perfformiad cof gweithio gofodol trwy newid yn ddigymell.

Profwyd pob llygoden fawr am 5 diwrnod gyda chwe threial yn olynol y dydd, wedi'u gwahanu gan egwyl anrhyngeiriol o 30 s. Daethpwyd ag anifeiliaid i'r ystafell brawf 5 munud cyn y treial cyntaf i ymgyfarwyddo â'r amgylchedd. Ym mhob treial, gosodwyd anifeiliaid ar ochr bellaf y fraich gychwyn gyda'u pen yn pwyntio at ganol y ddrysfa, a nofiodd tuag ato i ddewis un o'r ddwy fraich darged (Braich A neu Fraich B).

Gosodwyd platfform tryloyw bach 1 cm o dan lefel y dŵr yn un o'r breichiau targed (Braich A neu Fraich B) mewn dull gwrthbwys ar ddechrau'r treial cyntaf a'i newid bob yn ail rhwng y ddwy fraich darged ar gyfer pob treial.

Roedd anifeiliaid nad oedd yn gallu dod o hyd i'r platfform yn y 60au yn cael eu tywys yn ysgafn tuag at eu cynffon. Yn dilyn y treial diwethaf, cawsant eu rhoi mewn cawell bach i sychu am 40 munud cyn cael eu dychwelyd i'w cewyll cartref. Recordiwyd pob sesiwn ar fideo gan ddefnyddio EthoVision. Cafodd hwyrni i leoli'r llwyfan cudd mewn awdrial a nifer y cofnodion braich anghywir (gwallau) eu codio.

Trywyddiad darlifiad, prosesu meinwe, ac imiwn-histocemeg

Perfformiwyd sefydlogiad darlifiad yr anifeiliaid ar Ddiwrnod 41,24 awr ar ôl y prawf ymddygiadol diwethaf (WYM Day 5). Tynnwyd anifeiliaid o'u cewyll (SI neu EE), eu hanestheteiddio'n ddwfn â hydoddiant cetamin-xylazine (100-15 mg/kg, IP), a'u darlifo â 4% o baraformaldehyd depolymerized (pH7.4).

Yn dilyn ôl-osod dros nos yn yr un hydoddiant, torrwyd adrannau coronaidd (40-50 μm) â vibratome (VT1000 S, Leica Biosystems, Nussloch, yr Almaen) a'i drin mewn halwynog wedi'i glustogi â ffosffad (PBS; pH 7.4).

Datgelwyd mynegiant y protein c-Fos gan immunohistochemistry i asesu effaith amodau tai ar nifer y niwronau sy'n actif yn ddigymell mewn gwahanol ranbarthau ymennydd.

Cyflawnwyd treiddiad meinwe trwy ychwanegu {{0}}.05%Triton X-100 (pH 7.4) at PBS (PBS-Tx). Cafodd adrannau eu trin â hydrogen perocsid (0.6%) am 30 munud ar dymheredd yr ystafell (RT) cyn eu trosglwyddo i'r toddiant blocio.

Cawsant eu rhwystro â serwm gafr arferol 20% (NGS; Vector Laboratories) yn PBS-Tx am 30 munud yn RT a'u deor â gwrthgorff gwrth-c-Fos (llygoden monoclonaidd, Santa Cruz 8047, crynodiad 1:500) mewn PBS-Tx gyda 1% NGS am 3 noson ar 4 gradd. Yna cafodd adrannau eu rinsio mewn PBS (3 × 10 mun), eu trosglwyddo i doddiant gwrthgorff eilaidd (IgG gwrth-lygoden biotinylated, 1:250 yn PBS-Tx gyda 1% NGS), a'u deor am 2 h yn RT.

Yn dilyn cyfres arall o rinsio, cawsant eu deor â peroxidase afidin-biotinylated (cit ABC, Vector Laboratories) yn PBS am 20 munud atRT. Daeth y cynnyrch peroxidase i'r amlwg gyda hydrad tetrahydrochloride diaminobenzidine (DAB, Sigma-Aldrich D5637) wedi'i wella â nicel3,30-.

Microsgopeg a chyfrif celloedd

Fe wnaethom brosesu cyfanswm o 48 adran o 12 anifail (6 SI Parhaus a 6 SI i EE; 4 adran fesul anifail) ag ansawdd darlifiad da. Cafodd nifer y cnewyllyn c-Fos-imiwnopositif (c-Fos +) ei feintioli ar gyfer y cortecs ôl-splenaidd (RSC), cortecs perirhinol agranwlaidd (Ardal 35; PRC), cnewyllyn ochrol yr amygdala (LA), a chnewyllyn basoochrog yr amygdala (BL). .

Daethpwyd o hyd i ranbarthau o ddiddordeb yn ôl-sytolegol ag atlas ymennydd llygod mawr (Paxinos & Watson, 2006). Cafwyd delweddau gyda microsgop epifluorescent (Olympus BX53) gyda chamera unlliw CCD (Olympus XM10). Cyfyngwyd dadansoddiadau i'r meinwe a ddewiswyd cyn i imiwn-histocemeg ac adrannau nodol gael eu prosesu ar ôl caffael data.

Roedd celloedd wedi'u labelu yn cael eu cyfrif mewn ffasiwn lled-awtomatig. Yn gyntaf, canfuwyd a mesurwyd nifer y celloedd c-Fos + yn y rhanbarthau a grybwyllwyd uchod gydag ategyn cyfrif acell (ITCN) yn ImageJ (Schneider et al., 2012).

Cynhyrchodd yr ITCN ddelweddau allbwn yn dangos y celloedd a ganfuwyd ym mhob rhanbarth. Fe wnaeth dau sgoriwr annibynnol sy'n ddall i'r amodau arbrofol werthuso'r delweddau hyn i nodi a chyfrif achosion ffug-negyddol (hy, celloedd wedi'u labelu'n wael a gollwyd gan y feddalwedd). Ychwanegwyd cyfartaledd rhifyddol y ddau gyfrif celloedd ffug-negyddol hyn at gyfanswm nifer y celloedd a ganfuwyd gan yr ITCN ar gyfer pob adran.

Canlyniadau

Newid pwysau

Cofnodwyd pwysau corff yr anifeiliaid ar bedwar pwynt amser, cyn (Dyddiau 1, 15, a 31) ac ar ôl y manipiwleiddio EE (Diwrnod 41). Canfuwyd effaith amser ar bwysau'r corff (F (3, 42)=7.69, p < 0.001) a rhyngweithiad grŵp amser pwyso (F (3, 42) )=3.30, p=0.029, 2 × 4 ANOVA cymysg dwy ffordd, sy'n pwyntio at golled pwysau sylweddol mewn anifeiliaid EE yn dilyn cyfoethogi: pwysau ar Ddiwrnod 1 (M= 324 .6, SD=15.7), Diwrnod 15(M= 334.6,SD= 13.3), andDay 31(M= 325.5,SD{{) 33}}.6) yn uwch na Day41 (M=311.9, SD=14; pob ps < 0.05).

Nid oedd unrhyw newid o'r fath yn y grŵp SI parhaus (Diwrnod 1, M=321, SD =12.5; Diwrnod 15, M=325, SD=15.5; Diwrnod 31 , M=322.3, SD= 15.5;Diwrnod 41, M=320.1, SD= 12.9).

Anobaith ymddygiadol

Fe wnaethom asesu effeithiau trin EE byr ar anobaith ymddygiadol yn dilyn straen a achosir gan SI trwy gofnodi a chymharu sgorau ansymudedd cyffredinol FST (Slattery &Cryan, 2012; Yankelevitch-Yahav et al., 2015).

Roedd lefel ansymudedd y grŵp SI i EE (M=49.04, SD=21.77) yn sylweddol uwch na'r hyn a welwyd yn y grŵp SI parhaus (M=29.47, SD { {6}}.04;t (14)=2.18, p=0.047,d=1.09, prawf-t samplau annibynnol; Ffig. 2), pwyntio i ymddygiad anobaith mewn anifeiliaid sy'n agored i EE byr, ac effaith gwrth-iselder cymharol SI parhaus.

Dylid nodi bod y waelodlin, h.y., FST-1, sgorau ansymudedd yr SI parhaus (M=41.32, SD=17.02) ac SI i anifeiliaid EE (M {{5) Roedd }}.18, SD=11.42) yn debyg iawn. Felly, nid oedd y gwahaniaeth a welwyd yng nghyfnod prawf yr FST yn ganlyniad i wahaniaeth gwaelodlin mewn gweithgaredd locomotor. Yn yr un modd, arsylwyd am yn ail mewn lefelau gweithgaredd locomotor cyffredinol yn dilyn FST-2, fel yr aseswyd yn yr OFT (isod).

Gweithgaredd locomotor ac ymddygiad archwiliadol

Defnyddiwyd yr OFT i asesu gwahaniaethau posibl mewn gweithgaredd locomotor rhwng yr OS parhaus ac SI i anifeiliaid EE. Doedd dim gwahaniaeth rhwng y rheolydd (M =160.05, SD=53.95) ac anifeiliaid arbrofol (M=206.93,SD=76.36; t( 14)=1.42, p=0.178, prawf-t samplau annibynnol; Ffig. 3), sy'n dangos nad oedd effaith metabolig (hy, newid pwysau) EE byr yn newid y locomotorfedd cyffredinol ac yn ymyrryd gyda'r FST.

Nid oedd ymddygiad magu, sy'n arwydd o ymddygiad archwiliadol, yn dangos gwahaniaeth arwyddocaol rhwng y grwpiau ychwaith, er bod anifeiliaid SI toEE yn aml yn dangos mwy o fagu (M=38.75, SD =31.91) o gymharu ag SI parhaus anifeiliaid (M=18.75, SD=11.83; t (14)=1.66, p=0.119, sampl-prawf annibynnol). Ni newidiodd y canlyniad pan oedd yr arsylwadau wedi'u cyfyngu i'r canol (SI i EE M=2.25, SD=1.75 vs.

parhaus SI M {{0}}.38, SD=2.77) neu'r cyrion (SI toEE M=34.25, SD=34.44 vs. parhaus SI M=16.38,SD=9.93) o'r OFT (pob un > 0.05). Waeth beth fo'r grwpiau, roedd mwyafrif yr ymddygiad magu yn cael ei arddangos ar y cyrion, yn aml yn erbyn y waliau (M=25.31, SD =25.34) yn hytrach na'r canol (hy, magu annibynnol ;M=2.31, SD=2.17;t (15)=3.54, p=0.003, d=1.28,pâr samplau t-prawf).

Pryder

Mae magu gwahaniaethol a chyfanswm yr hyd a dreuliwyd yn y ganolfan yn erbyn ymylon yr OFT yn dangos newid mewn lefelau pryder cyffredinol. Yn dilyn yr arsylwad hwn, fe wnaethom ddefnyddio mesur pryder safonol - yr EPM - a chymharu ymddygiad tebyg i bryder yr SI ac SI parhaus ag anifeiliaid EE.

Gwelsom fod y grŵp SI i EE yn treulio llawer mwy o amser yn y breichiau agored (M=169.25, SD=106.59) o gymharu ag anifeiliaid rheoli (M=60.87, SD { {6}}.51;t (14)=−2.33, p=0.036, d=1.16, sampl-prawf annibynnol; Ffig. 4), yn dynodi ancsiolytig effaith cyfoethogi byr yn dilyn straen a achosir gan SI.

Cof gweithio gofodol

Aseswyd perfformiad cof gweithio gofodol dros bum diwrnod yn olynol yn WYM. Canfuom effaith sylweddol ar ddiwrnod y prawf, fel y'i mesurwyd gan hwyrni cymedrig i leoli'r llwyfan dianc cudd (F (1.47, 20.64)=12.95,p=0.001, 2 × 5 dwy ffordd cymysg ANOVA), gan ddatgelu bod dysgu wedi'i gyflawni.

Dangosodd profion posthoc wedi'u cywiro Bonferroni fod hwyrni i leoli'r platfform yn sylweddol uwch ar y diwrnod cyntaf (M {{{0}}.26, SD=10.13) o gymharu â'r trydydd (M=6). 79, SD= 2.25), pedwerydd (M=4.73, SD =1.44), a phumed (M=6.29, SD {{14} }.03) o ddyddiau y WYM (allps < 0.05; Ffig. 5).

Nid yw ychwaith yn rhyngweithiad cyflwr diwrnod prawf(F (1.47, 20.64)=2.54, p=0.115) na phrif effaith y cyflwr arbrofol (F (1, 14)=3 .87, p=0.069, 2 × 5 dwyffordd cymysg ANOVA).

Dadansoddwyd cyfanswm y cofnodion braich anghywir (hy, gwallau) ar draws treialon fel mesur ychwanegol o berfformiad cofio gwaith a chanfuwyd effaith sylweddol o ddiwrnod prawf (F (4, 56)=4.71, p {{4 }}.002, 2 × 5 dwyffordd cymysgANOVA). Datgelodd profion post-hoc a gywirwyd gan Bonferroni fod cyfanswm nifer y gwallau wedi gostwng yn sylweddol ar y pedwerydd diwrnod (M=8.69, SD=1.82) o gymharu â diwrnod cyntaf WYM (M=12 .69, SD=4.27; p < 0.05), yn dynodi bod dysgu wedi'i gyflawni.

Nid oedd prif effaith y cyflwr arbrofol (F (1, 14)=2.46, p=0.139, 2 × 5 ANOVA cymysg dwy ffordd) na rhyngweithiad cyflwr diwrnod prawf (F (4, 56)=1.34, p=0.269). Mae'r dadansoddiadau cyfradd gwallau yn dangos bod y ddau grŵp wedi dysgu ar y pedwerydd diwrnod. Fodd bynnag, roedd perfformiad anifeiliaid SI i EE yn ymddangos yn well yn ystod 2 ddiwrnod cyntaf WYM (Ffig. 5).

Daeth y gwahaniaeth hwn mewn hwyrni i leoli'r platfform yn arwyddocaol ar ail ddiwrnod WYM (SI i EE M=7.13, SD= 2.63 vs. parhaus SI M=11.09, SD=4.47;t (14) =2.17, p=0.048, d=1.08, prawf-t samplau annibynnol), yn pwyntio at ddysgu cyflymach yng nghyfnod cynnar y dasg cof.

For more information:1950477648nn@gmail.com