Mae'r RNA M6 A Darllenydd YTHDF2 yn Rheoli Antitumor Cell NK Ac Imiwnedd Gwrthfeirysol Rhan 5

Mae celloedd NK yn defnyddio dau brif ddull o ddinistrio celloedd tiwmor a chelloedd sydd wedi'u heintio â firws: (1) rhyddhau moleciwlau sytotocsig, fel asperforin a gransymau, sy'n achosi'n uniongyrchol apoptosis celloedd targed neu pyroptosis (Zhou et al., 2020) a (2) secretion of several cytocinau (fel IFN- , TNF- , a GM-CSF) a chemocinau (MIP-1 , MIP-1 , IL-8, a RANTES) sy'n gwella swyddogaeth imiwnedd cynhenid ​​ac addasol arall celloedd (Fauriatet al., 2010; Reiter, 1993).

Mae celloedd tiwmor yn gelloedd annormal yn y corff dynol sy'n amlhau ac yn lledaenu'n afreolus, gan achosi niwed mawr i'n cyrff. I drin tiwmorau, mae llawer o bobl yn dewis derbyn cemotherapi, radiotherapi, a thriniaethau eraill. Gall y triniaethau hyn ddinistrio celloedd tiwmor i raddau, ond maent hefyd yn achosi niwed penodol i'n hiechyd, megis effeithio ar ein cof.

Ar hyn o bryd cemotherapi yw un o'r dulliau pwysicaf o drin celloedd canser. Mae'n defnyddio cyffuriau arbennig i ladd celloedd canser ac atal twf a lledaeniad celloedd canser. Fodd bynnag, gall y cyffuriau hyn hefyd niweidio rhai celloedd normal, yn enwedig yn yr ymennydd, felly gall rhai pobl brofi dirywiad sylweddol yn eu cof wrth dderbyn cemotherapi.

Fodd bynnag, ni ddylem roi'r gorau i driniaeth am y rheswm hwn. Mae datblygiad gwyddoniaeth a thechnoleg wedi rhoi llawer o driniaethau newydd i ni, megis therapi wedi'i dargedu, imiwnotherapi, ac ati. Gall y triniaethau hyn nid yn unig leihau'r difrod a achosir gan gemotherapi i'n corff ond hefyd lladd celloedd tiwmor yn effeithiol.

Yn ogystal, gallwn hefyd gymryd rhai mesurau i amddiffyn ein cof. Er enghraifft, gallwn wella cof trwy ymarfer yr ymennydd, megis darllen yn ofalus, dysgu ieithoedd tramor, chwarae gemau ymennydd, ac ati Yn ogystal, gall bwyta'n dda a chysgu'n dda hefyd helpu i gynnal cof da.

Yn fyr, mae perthynas benodol rhwng celloedd tiwmor a chof, ond ni ddylem roi'r gorau i driniaeth yn hawdd oherwydd hyn. Dylem gymryd camau rhagweithiol i ddiogelu ein hiechyd corfforol a’n cof a chredu y gall datblygiadau mewn technoleg ddod â thriniaethau gwell inni. Gadewch inni frwydro yn erbyn celloedd tiwmor ac amddiffyn ein hiechyd a'n dyfodol disglair! Gellir gweld bod angen i ni wella'r cof, a gall Cistanche deserticola wella'r cof yn sylweddol, oherwydd mae gan Cistanche deserticola effeithiau gwrthocsidiol, gwrthlidiol a gwrth-heneiddio, a all helpu i leihau ocsidiad ac adweithiau llidiol yn yr ymennydd, a thrwy hynny amddiffyn y iechyd y system nerfol. Yn ogystal, gall Cistanche deserticola hefyd hyrwyddo twf ac atgyweirio celloedd nerfol, gan wella cysylltedd a swyddogaeth rhwydweithiau niwral. Gall yr effeithiau hyn helpu i wella cof, dysgu a chyflymder meddwl, a gallant hefyd atal datblygiad camweithrediad gwybyddol a chlefydau niwroddirywiol.

Cliciwch Gwybod i gynyddu pŵer cof

Yn yr astudiaeth hon, gwelsom fecanweithiau nad ydynt yn union yr un fath y mae YTHDF2 yn eu defnyddio i reoleiddio gwrth-tiwmor celloedd NK ac imiwnedd gwrthfeirysol. Yn y lleoliad tiwmor, mae YTHDF2 yn hyrwyddo'r crebachu hyn o perforin, gransym B, ac IFN- gan gelloedd NK ar gyfer rheoli metastasis melanoma, tra, yn ystod haint MCMV, mae YTHDF2 yn hyrwyddo gweithgaredd gwrthfeirysol cyfryngol celloedd NK yn erbyn MCMV yn bennaf trwy reoleiddio perforin.

Un esboniad posibl am yr anghysondeb hwn yw bod actifadu celloedd NK gan diwmorau neu firysau yn cael ei reoleiddio mewn gwahanol foesau.

Mae MCMV yn actifadu celloedd NK trwy amgodio protein m157, ligand o gellreceptor NK Ly49H (Smith et al., 2002), ac yn gysylltiedig ag addaswyr dwy fewngell, DAP10 a DAP12 (Ffrangeg et al., 2006; Orr et al., 2009). Fodd bynnag, yng nghyd-destun tiwmor, mae actifadu celloedd NK yn cael ei reoleiddio'n dynn gan ei ryngweithio â gwahanol ligandau derbynnydd NKcell a fynegir gan gelloedd tiwmor yn ogystal â gan cytocinau, megis IL-15 a TGF-, yn y micro-amgylchedd tiwmor (Wu et al., 2020b).

Yn ogystal, canfuom fod YTHDF2 yn hyrwyddo aeddfedu celloedd NK trwy reoleiddio Eomes. Fodd bynnag, canfuwyd safleoedd nobinding yn Eome mRNA, sy'n awgrymu bod YTHDF2 yn rheoleiddio mynegiant Eomes yn anuniongyrchol. Mae angen astudiaethau pellach i ymchwilio i'r mecanwaith y mae YTHDF2 yn ei ddefnyddio i reoleiddio mynegiant Eomes.

Yn ogystal, mae sut mae'r YTHDF2 yn derbyn ac yn cyfryngu signalau a all siapio'r ymateb cellimiwn NK yn gyflym yn erbyn firws neu gelloedd tiwmor yn wahanol hefyd yn gofyn am archwiliad pellach.

Dangoswyd bod celloedd NK wedi’u peiriannu â gofal yn darparu buddion sylweddol mewn lymffoma a lewcemia CD atglafychol neu anhydrin (Liu et al., 2020). Fodd bynnag, mae ehangiad cyfyngedig a dyfalbarhad celloedd NK in vivo, yn ogystal â masnachu cyfyngedig mewn celloedd NK a ymdreiddiad i safleoedd tiwmor, yn parhau i fod yn her fawr i therapi seiliedig ar NKcell (Yilmaz et al., 2020).

Gan fod cleifion canser sydd wedi'u heintio â'r orfeirysol, fel y rhai â COVID-19, fel arfer yn cael lymffopenia dros dro (Grossman et al., 2015; Zhaoet al., 2020), mae ehangu celloedd NK yn effeithlon yn ystod lymffopenia yn hanfodol ar gyfer rheoli twf tiwmor a haint firaol.

Mae ein canfyddiadau'n dangos bod YTHDF2 yn gyrru allanfa celloedd NK o BMand yn hyrwyddo amlhau homeostatig celloedd NK yn ystod lymffopenia in vivo mewn llygod heb gelloedd T, B, ac NK. Mae ein hastudiaeth hefyd yn dangos bod YTHDF2 yn rheoleiddio swyddogaeth effeithydd celloedd NK yn gadarnhaol.

Felly, gall ymgorffori mynegiant YTHDF2 i gelloedd NK neu CAR-NK fod â buddion amlochrog ar gyfer ehangu cell NK yn ystod gweithgynhyrchu in vitro, dyfalbarhad, a gwella swyddogaeth effeithydd in vivo. At hynny, gallai'r uwch-reoleiddio YTHDF2 a welsom yn y lleoliad tiwmor ac yn ystod haint firaol gynyddu gallu NK neu CAR-NKcells i ymdreiddio i ficro-amgylchedd y clefyd.

Mae IL{0}} yn rheolydd allweddol datblygiad celloedd NK, homeostasis, goroesiad, a swyddogaeth effeithydd (Becknell a Caligiuri, 2005; Mishra et al., 2014; Yu et al., 2013). Yn flaenorol, adroddodd ein grŵp lwybr signalau newydd IL-15–AKT–XBP1s sy’n cyfrannu at swyddogaethau effeithydd a goroesiad celloedd NK dynol (Wang et al., 2019b). Fodd bynnag, nid yw'r union fecanweithiau a ddefnyddir gan IL-15 i reoleiddio goroesiad celloedd NK wedi'i ddeall yn llawn eto.

Yma, daethom o hyd i fecanwaith newydd arall yn yr ystyr bod STAT5-YTHDF2 yn ffurfio dolen adborth gadarnhaol i lawr yr afon o gelloedd NK trwytho IL-15 sydd yn ei dro yn rheoli amlder celloedd NK, goroesiad, a swyddogaethau effeithydd. Dangosodd ein hadroddiad blaenorol nad yw IL-15 yn ysgogi trawsgrifio XBP1s, ac nad yw XBP1s yn rhyngweithio â STAT5 mewn celloedd NK (Wang et al., 2019b), gan awgrymu bod rheoleiddio XBP1s gan IL-15 yn STAT5 annibynnol .

Felly wedi nodi dau gyfryngwr newydd IL-15 yn NKcells, XBP1s ac YTHDF2, nad yw XBP1s yn cael eu rheoleiddio ganSTAT5 ar eu cyfer, tra bod YTHDF2 yn ddibynnol ar STAT5. Gall y cymhlethdod hwn o signalau IL-15 nodweddiadol gyfateb i rôl gymhleth a phliotropig IL-15, sy'n elfen allweddol o'r amgylchedd llidiol yn y micro-amgylchedd tiwmor a'r ymateb i haint firaol (Nguyen et al., 2002; Santana Carreroet al., 2019).

Adlewyrchir y cymhlethdod hefyd yn y ffaith nad yw diffyg Ythdf2 yn effeithio ar oroesiad ac ymlediad celloedd gorffwysNK in vivo, tra bod YTHDF2 yn chwarae rhan hanfodol wrth reoleiddio amlder a/neu oroesiad celloedd NK a weithredir gan IL-15 neu gan haint MCMV .

Mae ein hastudiaeth hefyd yn cefnogi’r cysyniad bod addasiadau YTHDF2 neu m6A yn gyffredinol yn chwarae rhan fwy canolog mewn dynameg celloedd NK yn y cyflwr actifedig a/neu osodiadau clefydau.

Yn yr astudiaeth hon, fe wnaethom gymhwyso strategaeth aml-omics (RNA-seq, m6A-seq, a RIP-seq) i nodi targedau YTHDF2 yn NKcells.

Yn unol â'n canfyddiad bod celloedd NK diffygiol Ythdf wedi dangos oedi sylweddol o ran twf celloedd, canfuom nifer fawr o enynnau yn ymwneud â chylchred celloedd a rhaniad celloedd a oedd wedi gostwng yn sylweddol yng nghelloedd Ythdf2ΔNK NK, gan awgrymu bod YTHDF2 yn rheoli twf celloedd trwy reoleiddio cylchred celloedd . O bwys, mae'r addasiadau m6A wedi bod yn ymwneud yn helaeth â rheoleiddio'r cylchred celloedd.

Mae METTL3 yn hyrwyddo twf celloedd mewn lewcemia myeloid acíwt trwy wella'r broses o gyfieithu genynnau yn y llwybr beicio cell (Barbieri et al., 2017; Vu et al., 2017). Mae dileu METTL14 yn ymestyn niwrogenesis cortigol i gamau ôl-enedigol trwy ymestyn y cyfnod pontio S-i-M o gelloedd glial rheiddiol (Yoonet al., 2017).

Yn gyson â'n hastudiaeth, adroddwyd bod celloedd inHeLa, YTHDF2 yn targedu llwybrau sy'n ymwneud nid yn unig â swyddogaeth foleciwlaidd ond hefyd mewn amlhau a goroesi celloedd (Wanget al., 2014).

Fei et al. (2020) yn ddiweddar fod YTHDF2 yn hyrwyddo amlhau celloedd o bosibl trwy hwyluso diraddio mRNA yn ystod y cylchred celloedd mewn celloedd HeLa, sy'n awgrymu mecanwaith (au) cyffredinol YTHDF2 neu ei addasiadau m6A cysylltiedig wrth gynnal goroesiad a swyddogaeth celloedd. Gan fod angen miliynau o gelloedd ar gyfer y dadansoddiad strategaeth aml-omeg, roedd yn rhaid i ni ddibynnu ar NKcells ex vivo estynedig a lluosog iawn.

Gall hyn esbonio'r sylw mai genynnau cylch-gell yw'r targedau a sgriniwyd o YTHDF2 yn bennaf, tra na ddangoswyd targedau posibl sy'n rheoli goroesiad celloedd, swyddogaeth yr effeithydd, ac aeddfedu celloedd NK. Serch hynny, credwn fod ein data yn darparu'r dystiolaeth gyntaf bod targedau YTHDF2 yn cyfrannu at brosesau cylchred celloedd a rhannu celloedd mewn celloedd imiwnedd, yn enwedig mewn celloedd NK.

I gloi, fe wnaethom ddarganfod rôl anhysbys yn flaenorol o YTHDF2 neu methylation m6A fel rheolydd cadarnhaol cellantitumor NK a gweithgaredd gwrthfeirysol yn ogystal â homeostasis cell NK ac aeddfedu. Mae'r canfyddiadau hyn yn rhoi mewnwelediad i sut mae NKcells yn arolygu'n effeithiol yn erbyn metastasis tiwmor a haint firaol trwy methylation mRNA m6A.Deunyddiau a dulliauMiceYthdf2fl/fl cynhyrchwyd llygod gan labordy J. Chen.

Yn gryno, cynlluniwyd lluniad y rhoddwr i gynhyrchu newid amodol o enyn targed penodol ar electroporation (ailgyfuniad homologaidd) mewn bôn-gelloedd embryonig llygoden. Mae'r casét targedig (En2SA-IRES-LacZ-pA-hBactP-Neo-pA) wedi'i bob ochr gan ensym ailgyfuno fflippas (Flp) - safleoedd ailgyfuno targed adnabod, sy'n caniatáu tynnu'r casét targedu gydag ailgyfuno Flp.

Mae pâr o loxP hefyd yn cael ei gyflwyno o amgylch pedwerydd exon Ythdf2, a ddefnyddir ar gyfer dileu amodol pedwerydd exon Ythdf2 gan y Cre recombinase. Cynhyrchwyd llygod gyda'r alel fflocs (Ythdf2fl/fl) trwy groesi'r llygod F1offspring gyda llygod ROSA26-FlpE (stoc rhif. 003946; TheJackson Laboratory). Croeswyd llygod Ythdf2fl/fl i C57BL/6 am o leiaf 10 cenhedlaeth cyn eu defnyddio ar gyfer unrhyw arbrawf.

Roedd llygod Ncr{0}}iCre yn anrheg gan Eric Vivier (Centre d'Immunologie de Marseille-Luminy, Marseille, Ffrainc; NarniMancinelli et al., 2011). Rag2 -/ -Il2rg - / - darparwyd llygod gan y cyfleuster anifeiliaid yn City of Hope. Prynwyd llygod NCI B6-Ly5.1/Cr (CD45.1mice) gan Charles River Laboratories. IL-15Cafodd Tgmice eu cynhyrchu gan ein grŵp a'u hôl-groesi i'r cefndir C57BL/6 (Fehniger et al., 2001). Daeth llygod Stat5fl/fl yn wreiddiol gan John J. O'Shea (Sefydliad Cenedlaethol Arthritis a Chlefydau Cyhyrysgerbydol a Chroen, Bethesda, MD; Cui et al., 2004).

Stat5fl/fl Ncr1-iCre mice were generated in the laboratory of J.C. Sun (Wiedemann et al., 2020). All mice were on a C57BL/6 background for >10 cenhedlaeth. Defnyddiwyd llygod gwrywaidd a benywaidd 6-{2} wythnos oed ar gyfer yr arbrofion. Defnyddiwyd cydwyr sbwriel cre-negyddol fel rheolyddion WT. Cymeradwywyd pob arbrawf anifeiliaid gan bwyllgor gofal a defnydd anifeiliaid sefydliadol City ofHope.

For more information:1950477648nn@gmail.com