Y Sail Wyddonol ar gyfer Cymhwyso Cistanche yn Newydd
Mar 09, 2022
Cyswllt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-bost:audrey.hu@wecistanche.com
Sun Weidong1, Chen fei2, Sun yun2
(1. Ysbyty Meddygaeth Tseiniaidd Traddodiadol Yangzhou, Yangzhou 225009, Jiangsu; 2. Ysgol Meddygaeth, Prifysgol Yangzhou, Yangzhou 225001, Jiangsu)
CRYNODEB: Sefydlwyd model hyrddod hyperplasia prostatig beg nin (BPH), a chafodd tri grŵp dos o acteoside eu gweinyddu ar lafar am 4 wythnos, i astudio effaith distyllu acteoside oCistanche tubulosaar apoptosis a chwarennau prostad uwchfioled uwchstrwythur mewn llygod mawr gyda BPH. Gwelwyd newid uwchadeileddol y chwarren prostad gan ficrosgopi electron trawsyrru. Dangosodd y canlyniadau nad oedd Apoptosis o brostad hyrddod arferol yn amlwg, roedd isel
cyfradd apoptosis y prostad yn y grŵp enghreifftiol, yn y acteoside dos uchel oCistanche tubulosatriniaeth, roedd apoptosis prostad hyrddod yn sylweddol uwch na'r model.
ALLWEDDEIRIAU:Cistanche,Cistanche tubulosa, acteoside; rat; dechrau hyperplasia prostatig; apoptosis; uwchadeileddol
Yn y broses o hyperplasia prostad (BPH), mae apoptosis celloedd yn un o'r mecanweithiau sy'n denu sylw ar hyn o bryd. Mae codio genynnau yn ei bennu ac yn galluogi celloedd i reoli marwolaeth celloedd wedi'i raglennu drwy ymateb i signalau penodol.
Ar ôl i'r prostad ddatblygu i faint oedolion, cynhelir cyfradd ymledol celloedd y prostad ar 1% i 2% drwy gydbwysedd cyfradd gyfartalog y apoptosis. Unwaith y bydd y cydbwysedd wedi torri, ystyrir mai dyma achos BPH. O dan amodau arferol, mae lefelau estron ac androgen a chylchrediad arferol yn y prostad yn fath o gyflwr hunan-gydbwysedd sy'n bodoli yn y broses o amledd ac apoptosis. Pan fydd y cydbwysedd rhwng amledd a apoptosis allan o gydbwysedd, bydd yn arwain at dwf pellach ac ehangu'r chwarren, sy'n achosi ehangu'r compartment celloedd epiotheliol yn bennaf [1].
Yn yr arbrawf hwn, sefydlwyd model hyperplasia prostad hyrddod i arsylwi a dadansoddi effaith acteoside (glycoside tebyg i'r coaction), un o gydrannau cemegolCistanchear apoptosis a newidiadau uwchadeileddol celloedd y prostad hyrddod, er mwyn gwerthuso effaith acteoside Mae effaith atal hyperplasia prostad yn darparu sail wyddonol ar gyfer datblygu a defnyddio defnyddiau newydd o feddygaeth Tsieineaidd Cistanche.
Cistancheechdynnu
1 Deunydd a Dulliau
1. 1 Anifail Arbrofol
Darperir hanner cant o ddynion 6-7 wythnos oed, gradd lân, sy'n pwyso 80-100 g, gan y Ganolfan ar gyfer Meddygaeth Gymarol Prifysgol Yangzhou.
1. 2 Adweithyddion a Meddyginiaethau
Mae pigiad propionate Testosterone yn dod o Shanghai General Pharmaceutical Co, Ltd., y fanyleb yw 25 mg·mL-1, ac mae'r rhif batsh yn 060708. Mae datrysiad marw PI yn dod o Ganolfan Brofi Prifysgol Yangzhou. Cynnwys Aktiside yw 945 g·kg-1, a baratowyd gan yr Adran Dadansoddi Meddygaeth Tsieineaidd, Prifysgol Fferyllol Tsieina.
1. 3 Offer Arbrofol
Philips Tecnai 12 mae microsgop electron trosglwyddo yn dod o Philips yn yr Iseldiroedd; Mae cytomedr llif FACSAria yn dod o BD yn yr Unol Daleithiau.
1. 4 Grwpio a Modelu
Ar ôl sbaddu yn ôl y dull o lenyddiaeth [3], chwistrellwyd llygod mawr gyda 5 mg· (kg·d)-1o dystosteron propionate ar gefn y llygod mawr am 4 wythnos i sefydlu model hyperplasia prostad. Rhannwyd y llygod enghreifftiol ar hap yn grwpiau enghreifftiol: model ynghyd â grŵp dos uchel acteoside, model ynghyd â grŵp dos canolig acteoside, model ynghyd â grŵp dos isel acteoside, deg llygod mawr ym mhob grŵp; roedd deg llygod arferol arall fel grŵp rheoli.
1. 5 Dull Gweinyddu
Un wythnos ar ôl modelu, rhoddwyd 60, 30, 15 mg i grwpiau dos uchel, canolig ac isel; (kg·d)-1 drwy gacen, yn y drefn honno. Rhoddwyd yr un faint o salîn arferol i'r grŵp enghreifftiol a'r grŵp rheoli unwaith y dydd am bedair wythnos, wedi'u pwyso unwaith yr wythnos, ac yn addasu'r dos yn ôl pwysau'r corff.
1. 6 Casglu a Phrosesu Samplau
1) Paratoi deunydd a sampl: 24 awr ar ôl y weinyddiaeth ddiwethaf, pwyso'r llygod mawr ac aberthu'r llygod mawr drwy ddadleoli serfigol. Agorwch yr abdomen isaf ar unwaith, plicio oddi ar y meinweoedd o amgylch y prostad, rhyddhau'r prostad, a chymryd rhan o'r prostad i'w ddefnyddio mewn baddon iâ. Homogenizer meinweoedd homogenizer, ataliad un gell y prostad wedi'i baratoi, a'i staenio gyda dull un cam propidiwm ïodin [4]; roedd rhan arall o feinwe'r prostad wedi'i gosod mewn 25 g· L-1 glwtaraldiffyg i baratoi adrannau hynod denau.
2) Paratowch ataliad cell sengl: O dan amodau aseptig, tynnwch y prostad hyrddod yn llwyr a'i symud i ddysgl petri, golchwch y gwaed a'r clotiau gwaed ar wyneb y feinwe prostad gyda PBS, a thynnwch y braster o'i gwmpas, y ffibr gormodol, a'r celloedd celloedd. O'r un prostad hyrddod, meinwe prostad ffres gyda maint o tua 0.5 cm3ei gymryd a'i dorri'n ddarnau i baratoi ataliad celloedd prostad [5]. Rhowch y bloc meinwe prostad mewn dysgl petri, ac ychwanegwch ychydig o PBS; defnyddio siswrn offthalmolegol i dorri'r feinwe mewn baddon iâ, malu'r homogenizer i ataliad, ychwanegu 10 mL PBS, pibellau'r homogenate meinwe, a defnyddio 0. 074 mm o rhwyll neilon maint pore wedi'i hidlo i mewn i'r tiwb prawf, wedi'i ganoli ar 1 500 r min-1am 3 munud, a golchwyd y pitw dair gwaith gyda PBS, bob tro ar 500 r munud-1canoli cyflymder isel tymor byr i gael gwared ar sbwriel celloedd, i hidlydd rhwyll neilon maint pore 0.037 mm i gael gwared ar gliwiau celloedd. Cyfrifwch y celloedd ac addasu'r crynodiad celloedd i 2×109 celloedd· L-1. Stain gyda hydoddiant staenio 1 mL PI, diogelu rhag golau ar 4 °C am 10 munud.
3) Paratoi adran ultrathin: Ar gyfer paratoi adran meinwe uwchfioled, gweler llenyddiaeth [6].
2 Canlyniadau a dadansoddiadau
Ffig. 1 Apoptosis o'r model hyrddod BPH a chamau gweithredu a ysgogwyd gan acteoside
a. Grŵp arferol; b. Grŵp enghreifftiol; c. Grŵp dos uchel Acteoside; d. Grŵp dos isel Acteoside
2. 1 Effaith acteoside ar apoptosis prostad hyrddod
Mae Ffigur 1 yn dangos uchafbwynt yr apoptosis a ganfuwyd gan cytometreg llif, sy'n dangos bod acteoside yn cael effaith pro-apoptotig. Dangosodd y dadansoddiad ystadegol o ganlyniadau'r apoptosis celloedd fod y gyfradd apoptosis celloedd hyrddod wedi cynyddu'n sylweddol (24.7±1. 85)% a (16.1±1.04)% ar ôl triniaeth gyda dosau uchel, canolig ac isel o'r acteoside. , (14.5±0.68)%, a'r grŵp arferol (1.1±0.06)%, grŵp enghreifftiol (9.5±0.5)%, grŵp cadarnhaol (9.83±0.76) Mae'r gwahaniaeth mewn% o gymharu yn sylweddol (P<0.01), indicating="" that="" aktidine="" can="" induce="" cell="" apoptosis,="" the="" effect="" is="" stronger="" than="" that="" of="" the="" positive="" control="" drug="" qianliekang="" (figure="">
Ffig. 2 Radio apoptosis yn y model hyrddod BPH ac effaith acteoside
2.2 Effaith acteoside ar uwchlori celloedd hyperplasia prostatig.
Dengys arsylwadau microsgopi Electron fod gan y prostad hyrddod arferol niwclei cyflawn, yn amlwg yn niwclis, a dosbarthiad cromataidd niwclear unffurf; mae gan y reticwm endoplasmig garw yr un maint, mae wedi'i drefnu'n daclus, ac nid oes ganddo unrhyw wagio. Nid oes microvilli tebyg i fysedd ar wyneb yr epiotheum, dim chwyddo gwiddondria, ac ychydig o gyfrinachau yn y ceudod. Cafodd cnewyllyn celloedd y prostad yn y grŵp enghreifftiol eu dadffurfio a'u crebachu, ac roedd y cytoplasm yn gyffredin. Ehangwyd y reticwm endoplasmig garw mewn siâp tebyg i syst, a chafodd y syst ei lenwi â gronynnau protein dwysedd uchel. Roedd y gwiddondria ychydig yn chwyddedig (roedd brechlynnau hefyd), Mae cyfrinachau dwysedd canolig yn y ceudod, a chanfuwyd gronynnau cyfrinachau crwn trwchus mewn rhai celloedd. Yn y llygod mawr a gafodd eu trin ag acteoside, roedd y niwclews yn gyfan o'i gymharu â'r grŵp enghreifftiol. Roedd y niwclews wedi'i ganoli, cynyddwyd y dwysedd niwclear, cronnwyd heterochromataidd, roedd gan y cytoplasm frechiadau, a gostyngwyd y brechlynnau reticwm endoplasmig garw. Roedd gan y grŵp acteoside dos isel ychydig o niwclei Shrinkage, cytoplasm afreolaidd, cyfoethocach, a llai o reticwm endoplasmig garw (Ffigur 3).
Mantais cistanche: gwrth-Apoptosis
3 Trafodaeth
Mae Apoptosis yn broses o farwolaeth celloedd wedi'i rhaglennu mewn organebau amlgellog sy'n rheoleiddio datblygiad y corff ac yn cynnal sefydlogrwydd yr amgylchedd mewnol, ac mae codau genetig yn ei bennu.
Mae gan gelloedd apoptotig eu nodweddion morffolegol a biolegol unigryw: crebachu cromataidd niwclear, diraddio a darnio helaeth DNA, crebachu celloedd ar raddfa lawn, crebachu celloedd celloedd a phrotestiadau allanol sy'n cwmpasu organelles (fel gwiddondria a ribosomes), a ffurfio darnau niwclear nodweddiadol Cyrff Apoptotig, mae celloedd apoptotig nid yn unig yn cadw strwythur a swyddogaeth cofiadwy celloedd cyflawn ond hefyd mae ganddynt strwythur cyflawn o organelles, sy'n wahanol i'r gwddf celloedd.
Nid yw mecanwaith moleciwlaidd apoptosis celloedd wedi'i egluro'n llawn hyd yn hyn. Dangosodd astudiaethau [7] fod llawer o genynnau'n gysylltiedig â rheoleiddio genynnau apoptosis celloedd.
Apoptosis yw'r broses o BPH ar hyn o bryd yn denu mwy o sylw. Fe'i pennir gan godio genynnau ac mae'n galluogi celloedd i reoli marwolaeth celloedd drwy ymateb i signalau penodol [1]. Ar ôl i'r prostad ddatblygu i faint oedolion, mae cyfradd y celloedd prostad yn cael ei chynnal ar 1% i 2% drwy gydbwysedd y gyfradd apoptosis. Mae dinistrio'r cydbwysedd hwn bob amser wedi'i ystyried yn achos BPH [8]. O dan amodau arferol, mae lefel yr estron a'r androgen a'r cylchrediad rheolaidd yn y prostad yn fath o gyflwr hunan-gydbwysedd sy'n bodoli yn y broses o amledd ac apoptosis. Pan fydd y llu a'r apoptosis allan o gydbwysedd, bydd yn achosi i'r chwarennau dyfu ac ehangu ymhellach, yn bennaf oherwydd ehangu'r compartment celloedd epiotheliol [9]. Gall torri ar draws y cydbwysedd hwn fod o ganlyniad i newidiadau mewn lefelau neu swyddogaethau androgen; gall hefyd fod o ganlyniad i unrhyw ymateb a gynhyrchir gan symbyliad AR o DHT neu newidiadau yn lefelau ffactorau twf sy'n cael eu cyfryngu gan DHT [2]. Yn yr astudiaeth hon, canfu FCM apoptosis celloedd a chanfu fod cyfradd apoptosis celloedd y prostad yn y llygod mawr o ystyried dosau uchel o acteoside wedi cynyddu'n sylweddol. Dangosodd canlyniadau microsgopi Electron fod cnewyllyn celloedd y prostad yn y grŵp enghreifftiol wedi'u dadffurfio, ehangwyd y reticwm endoplasmig garw yn fawr mewn siâp syst, a chafodd y syst ei lenwi â gronynnau protein dwysedd uchel, a chanfuwyd gwacáu. Roedd y gwiddondria wedi'i chwyddo'n ysgafn, ac astudiaethau cysylltiedig[ 10-11 ] Mae'r adroddiad yn gyson.
Ar ôl ymyrraeth acteoside, roedd graddau hyperplasia'r prostad yn y llygod mawr yn is. Roedd y grŵp dos uchel hefyd yn dangos arwyddion cynnar o apoptosis: roedd cnewyllyn celloedd y prostad yn parhau i fod yn gyfan, ac roedd brechlynnau reticwm endoplasmig yn sylweddol is. Cyddwyso niwclei, mwy o ddwysedd niwclear, cronni heterochromataidd, yn debyg i nodweddu celloedd meinwe'r prostad yn y llygod mawr ar ôl sbaddu [12-13]. Mae'n dangos bod acteoside o'rcistancheyn gallu ysgogi apoptosis celloedd yn y llygod mawr gyda hyperplasia'r prostad, rheoleiddio ac adfer cydbwysedd apoptosis celloedd y prostad a'r llu o bobl, a chwarae rhan yn y gwaith o atal celloedd y prostad rhag ymledu. Mae canlyniadau'r astudiaeth hon ac astudiaethau blaenorol [14] yn dangos bod effaith lesol acteoside, elfen gemegol oCistanche tubulosa, ar hyperplasia'r prostad fod yn gysylltiedig â hyrwyddo apoptosis celloedd, lleihau gorbwysleisio AR a TGF-UR1. Mae angen astudio'r dull gweithredu manwl ymhellach o hyd.
Budd-dal cistanche: gwella imiwnedd
Cyfeirnodau:
[1] Giacomo N, Antonio G, Ra fa el B B, et al. Chwydd, apoptosis, a BPH, beth yw'r Dystiolaeth [J]. Cyflenwadau Wroleg Ewropeaidd, 2006(5): 401-408.
[2] Car mab I C, Rittmaster R. Rôl dihydrotestosterone mewn hyperplasia prostatig benigaidd [J]. Wroleg, 2003, 61: 2-7.
[3] Xu Shuyun, Bian Julian, Chen Yuxiu. Methodoleg arbrawf ffarmacolegol[M]. 3ydd rhifyn. Beijing: Tŷ Cyhoeddi Meddygol Pobl, 2002: 1552-1553.
[4] Zhai Qiwei, Ji Hongbin, Yan Mingda, et al. Defnyddio system mynegiant y gellir ei defnyddio i astudio swyddogaeth Akt[ J]. Bwletin Gwyddoniaeth Tsieineaidd, 2000, 45( 16): 1738-1741.
[5] Xia Anzhou, Xing Shuhua, Zhu Xuewen, et al. Astudiaeth gymharol ar y dulliau paratoi ar gyfer atal meinweoedd arennol un gell [J]. Cyfnodolyn Coleg Meddygol Xuzhou, 2004, 24( 1):50-53.
[6] Sun Yun, Wang Dejun, Liu Xiaomei, et al. Mae'r newidiadau i uwchlori'r ysgyfaint mewn llygod sy'n heneiddio arbrofol ac effaith polysaccharide haeddiannol Cistanche[ J]. Bwletin Ffarmacolegol Tsieineaidd,2002, 18( 1): 84-87.
[7] Liu Qingming, Lu Mingzhi. Cynnydd ymchwil yn y pathogenesis o amledd celloedd hyperplasia prostatig a apoptosis[ J]. Jiangxi Gwyddoniaeth Labordai Meddygol, 2005, 23( 2): 141-143.
[8 ] Sharia t S F, Ashfaq R, Roehrborn C G, et al. Mynegi biofarcwyr sydd wedi goroesi ac apoptotig mewn plasma hyperstatig sy'n plygu [J]. J Urol, 2005, 174: 2046-2050.
[9 ] Unter G, Madersbacher S, Berg er P. Hyperplasia prostatig Benign: ailfodelu meinwe sy'n gysylltiedig ag oedran [J ]. Exp Gerontol, 2005, 40: 121-128.
[10] Zheng Heng, Shao Chunli, Qian Jiaqing. Effaith lesol hydroclorid ar hyperplasia'r prostad yn y llygod mawr[ J]. Cyfnodolyn o Brifysgol Feddygol Tongji, 1999, 28( 3):227-229.
[11] Zhong Wei, Qiu Shudong, Jiang Sailing. Newidiadau morffolegol hyperplasia prostatig benigaidd a'r gwahaniaeth o ARmRN mynegiant [J]. Cyfnodolyn o Brifysgol Feddygol Xi'an, 1999,20( 2): 145-149.
[12] Niu Yuanjie, Dong Kequan, Bai Jingwen, et al. Newidiadau patholegol deinamig o brostad canine ar ôl sbaddu[ J]. Tsieinëeg Journal of Wroleg, 1998, 19( 7): 429-433.
[13] Ye Zhangqun, Lan Ruzhu, Zhou Yusheng, et al. Newidiadau deinamig yn microstrwythur prostad y rat ar ôl sbaddu[ J]. Tsieinëeg Journal of Wroleg, 2001,22( 8): 468-472.
[14] Sun Weidong, Chen fei, Sun yun. Effaith lesol Aktiside ar fodel hyperplasia prostatig arbrofol[ J]. Cyfnodolyn Prifysgol Yangzhou: Amaethyddiaeth a Gwyddorau Bywyd
Argraffiad, 2008, 29(3): 55-58.