Effaith Therapiwtig Cistanche Deserticola Ar Ymgarthu mewn Model Llygoden Fawr Rhwymedd Senile
Mar 27, 2022
Cyswllt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
Xia Zhang, Fa-Juan Zheng, Zhen Zhang
Haniaethol
CEFNDIR
Rhwymedd yw un o'r clefydau swyddogaethol gastroberfeddol cronig. Mae'n effeithio'n ddifrifol ar ansawdd bywyd. Gall Cistanche deserticola (C. deserticola) drin rhwymedd yn amlwg, ond nid yw ei fecanwaith wedi'i egluro. Roeddem yn tybio bod mecanwaith ohono wedi gwella symudedd berfeddol trwy ysgogi Cajalcells interstitial (ICC). Mae cysylltiad agos rhwng actifadu'r derbynnydd C-kit ar wyneb ICC a swyddogaeth yr ICC, ac mae'r llwybrau signalau ffactor bôn-gelloedd (SCF)/C-kit yn chwarae rhan bwysig ynddo. Er mwyn ymchwilio i fecanwaith sut mae C. deserticola yn trin rhwymedd, nod yr astudiaeth hon oedd sefydlu model rhwymedd mewn llygod mawr ac archwilio rôl llwybr signalau SCF/C-kit yn y driniaeth.
NOD
Archwilio llwybrau signalau SCF/C-kit yn rôl C. deserticola i drin rhwymedd trwy fodel llygod mawr rhwymedd.
DULLIAU
Rhannwyd pedwar deg wyth 8-mo-old Sprague–Dawley llygod mawr yn 4 grŵp yn ôl dull pwysau ar hap: Grŵp normal (n=12), grŵp model (n=12), grŵp deserticola C. (n=12) a grŵp atalyddion (n=12). Derbyniodd y grŵp arferol bygavage halwynog arferol; derbyniodd y grŵp model loperamid trwy medrydd; derbyniodd y grŵp atalyddion loperamide a C. deserticola trwy gavage, a chwistrellwyd STI571 yn fewnberitoneol. Yn ystod y driniaeth, cofnodwyd y pwysau, gronynnau fecal, ac ansawdd fecal bob 10 d. Ar ddiwrnod 20 ar ôl sefydlu'r model, tynnwyd meinweoedd y colon o bob grŵp. Defnyddiwyd staen hematocsilin ac eosin i arsylwi newidiadau patholegol. Canfuwyd lefelau mynegiant genynnau SCF, C-kit, ac Aquaporin gan immunohistochemistry, blotio gorllewinol, ac adwaith cadwyn polymeras meintiol amser real. Arsylwyd y celloedd mitocondria epithelial colonig a goblet gan microsgopeg electron trawsyrru.
CANLYNIADAU
O'i gymharu â'r grŵp arferol, wrth i'r driniaeth fynd rhagddo, gostyngodd pwysau llygod mawr yn y grwpiau model a rhwystrwyr yn sylweddol, gostyngodd pwysau'r stôl, ac roedd ansawdd y stôl yn sych (P < {{0}}.{6}="" }5).="" c.="" deserticola="" gwrthdroi'r="" gostyngiad="" pwysau="" inbody="" a="" phwysau="" stôl="" a="" gwella="" ansawdd="" stôl.="" dangosodd="" dadansoddiad="" histopatholegol="" fod="" yr="" epitheliwm="" mwcosaidd="" colonig="" yn="" y="" grŵp="" model="" yn="" anghyflawn,="" a="" bod="" trefniant="" y="" chwarennau'n="" afreolaidd="" neu="" wedi'u="" difrodi.="" fe="" wnaeth="" triniaeth="" â="" c.="" deserticola="" wella="" cyfanrwydd="" a="" pharhad="" celloedd="" epithelial="" a="" threfniant="" rheolaidd="" y="" chwarennau.="" roedd="" yr="" asiantau="" blocio="" yn="" atal="" effeithiau="" c.="" deserticola="" immunohistochemistry="" a="" dangosodd="" adwaith="" cadwyn="" polymeras="" meintiol="" amser="" real="" fod="" mynegiant="" scf="" a="" c-kitprotein="" neu="" enynnau="" ym="" meinwe="" colonig="" y="" grŵp="" model="" wedi="" gostwng="" (p=""><0.05), tra="" bod="" triniaeth="" gyda="" c.="" deserticola="" cynyddu="" protein="" neu="" fynegiant="" genynnau="" (p="">< 0.05).dangosodd="" blotio="" gorllewinol="" bod="" mynegiant="" aquaporin="" apq3="" yn="" cynyddu,="" tra="" bod="" mynegiant="" cx43="" wedi="" gostwng="" yn="" y="" grŵp="" model.="" roedd="" triniaeth="" gyda="" c.="" deserticolain="" yn="" atal="" mynegiant="" apq3="" ac="" yn="" hyrwyddo="" mynegiant="" cx43.="" dangosodd="" microsgopeg="" trawsyrru="" electron="" fod="" mitocondria'r="" epitheliwm="" colonig="" yn="" y="" grŵp="" model="" wedi="" chwyddo="" ac="" wedi'u="" trefnu'n="" afreolus,="" a="" microfili="" yn="" brin.="" roedd="" y="" cyflwr="" yn="" well="" yn="" y="" grŵp="" c.="" deserticola.="" cadarnhaodd="" llygod="" a="" gafodd="" eu="" trin="" ag="" atalydd="" sti571="" fod="" rhwystro="" llwybr="" scf/c-kit="" yn="" atal="" gwella="" rhwymedd="" gan="" c.="">
CASGLIAD
Gwellodd C. deserticola ymgarthu mewn llygod mawr â rhwymedd, ac roedd y llwybr SCF/C-kitsignaling, sy'n gyswllt allweddol i swyddogaeth ICC, yn chwarae rhan bwysig yn y driniaeth.
Geiriau Allweddol:Cistanche deserticola; rhwymedd senile; Ffactorau bôn-gelloedd; C-cit
deunydd crai cistanche ffres
RHAGARWEINIAD
Mae rhwymedd senile (SC) yn un o'r afiechydon swyddogaethol gastroberfeddol cronig cyffredin mewn cleifion geriatrig, sy'n achosi neu'n gwaethygu digwyddiadau serebro-fasgwlaidd a chlefydau eraill ac yn effeithio'n ddifrifol ar ansawdd bywyd y boblogaeth oedrannus[1,2]. Yn ôl meddygaeth Tsieineaidd draddodiadol, y prif etioleg a phathogenesis gwres gastroberfeddol SCare, diffyg Yin a Jin, a dad-wlychu coluddol[3,4], tra gall Cistanche deserticola (C. deserticola) gynhesu'r arennau ac ymlacio'r coluddion. Mae ymchwilwyr wedi adrodd bod effaith berfeddol mae gwella symudedd a thriniaeth SC yn glir, ond nid yw ei fecanwaith wedi'i egluro[5,6]. Mae Cajalcells Interstitial (ICCs) yn fath arbennig o gelloedd mesenchymal yn y llwybr gastroberfeddol. Mae ICCs yn cymryd rhan yn pathogenesis llawer o gamweithrediadau modur gastroberfeddol[7,8]. Mae actifadu C-kit yn dibynnu ar y rhwymiad o'i ffactor bôn-gelloedd ligand (SCF)[9]. Ymchwilio i effaith a mecanwaith gweithredu C. deserticola on SC, nod yr astudiaeth hon oedd sefydlu model SC mewn llygod mawr a achosir gan loperidol i archwilio rôl llwybr signalau SCF/C-kit wrth drin rhwymedd gan C. deserticola.
DEUNYDDIAU A DULLIAU
Deunyddiau arbrofol
Anifeiliaid arbrofol:Yr anifeiliaid arbrofol oedd 48 o lygod mawr Sprague Dawley gwrywaidd yn pwyso 500-550g; pob un wedi'i brynu gan Changsha Tianqin BiotechnologyCo. Cyf Codwyd llygod mawr yn labordy anifeiliaid Chongqing Weisiteng BiomedicalTechnology Co. Ltd., o ystyried golau dydd a nos arferol, bwyd a diod. Roedd pob gweithdrefn yn cydymffurfio â'r canllawiau rheoli a gyhoeddwyd gan Bwyllgor Moeseg Ysbyty Meddygaeth Tsieineaidd Traddodiadol Chongqing.
Adweithyddion cynradd:Roedd y prif adweithyddion yn cynnwys loperamide (Sigma, St. Louis, MO, Unol Daleithiau America), C. deserticola o Hubei Jurui Traditional Chinese Medicine DecoctionCo. Ltd., STI571 o Chinese Selleck Co. Ltd., a SCF, C-kit, connexin 43 (Cx43), aquaporin 3 (AQP3) a gwrthgyrff -actin (Abcam, Caergrawnt, MA, Unol Daleithiau), PrimeScript II Llinyn 1af cDNA Kit Synthesis a Premix Taq™ (Ex Taq™ Fersiwn 2.0)(Takara Co. Ltd., Japan).
cistanche perlysiau dyfyniad atchwanegiadau
Dulliau
Paratoi a grwpio model SC:Er mwyn osgoi dylanwad ffactorau dryslyd megis pwysau'r corff ar y canlyniadau arbrofol, cafodd y llygod mawr eu grwpio ar hap gan y dull grwpio bloc ar hap. Cafodd pedwar deg wyth o lygod mawr eu bwydo'n addasol am 1 wythnos, a chafodd y llygod mawr eu rhifo yn nhrefn pwysau o ysgafn i drwm. Yn ôl trefn pwysau corff, rhannwyd y llygod mawr yn 12 parth (roedd pwysau llygod mawr ym mhob parth yn debyg), gyda 4 llygod mawr ym mhob parth. Rhannwyd y 12 parth yn 4 grŵp o 12 (arferol, model, C. deserticola, a rhwystrwr). Rhoddwydloperamid (0.0625/100 g, 10 mL/kg) i lygod mawr yn y grŵp model yn ôl gavage. Dyblwyd y dos gavage cyntaf, a rhoddwyd y cyffur am 10:00 bob dydd, unwaith y dydd am 20 diwrnod yn olynol. Rhoddwyd yr un faint o halwynog arferol i'r grŵp arferol trwy medrydd. Yn ogystal, cafodd y grŵp model ei drin â C. deserticola (0.156 g/100 g, 10 ml/kg) trwy gludydd. Rhoddwyd C. deserticola (0.156 g/100 g, 10 mL/kg) i'r grŵp atalyddion drwy gavage a STI571(25 mg/mL, 1 mL/kg) drwy chwistrelliad mewnperitoneol. Yn ystod yr arbrawf, cofnodwyd pwysau'r corff, pwysau'r stôl, a chyflwr y stôl bob 10 d. Ni fu unrhyw farwolaeth ddamweiniol yn unrhyw un o'r llygod mawr. Ugain diwrnod yn ddiweddarach, lladdwyd y llygod mawr, a thynnwyd meinwe'r colonig i'w harchwilio a chadwraeth nitrogen hylifol. Roedd y prif rannau wedi'u gosod a'u mewnosod.
Dadansoddiad histopatholegol:Cafodd y llygod mawr a ymprydiodd dros nos eu hanestheteiddio gan chwistrelliad mewnperitoneol gyda 7 y cant o hydrad cloral (5 mL/kg) drannoeth. Agorwyd yr abdomen i wahanu'r meinwe colonig, a thynnwyd 8-10 mm o'r colon. Tynnwyd y cynnwys berfeddol trwy ysgwyd yn ysgafn mewn polybutylenesuccinate wedi'i oeri ymlaen llaw a'i osod am 24 awr mewn hydoddiant sefydlog paraformaldehyd 4 y cant. Perfformiwyd mewnosod paraffin confensiynol. Cafodd adrannau meinwe (5 μm) eu tynnu forhematoxylin a staen eosin, a gwelwyd morffoleg histopatholegol o dan ficrosgop.
Canfod mynegiant SCF a C-kit trwy staenio imiwn-histocemegol:Cafodd meinweoedd theparaffin a archwiliwyd gan histopatholeg uchod eu torri i mewn, eu hailhydradu ag ethanol graddiant dewaxed xylene wedi'i dorri, adferwyd antigen trwy wres, a'i selio am 1h gyda serwm gafr ar dymheredd ystafell. Ychwanegwyd gwrthgyrff cynradd SCF a C-kit dro ar ôl tro, a chadwyd meinweoedd dros nos ar 4 gradd . Ar ôl rinsio â polybutylenesuccinate, gollyngwyd marchruddygl peroxidase i labelu gwrthgorff eilaidd, rinsio â succinate polybutylene am 5 munud, gollwng 2, 4-hydoddiant cromogen asid diaminobutyric, ail-liwio â hematoxylin, dadhydradu alcohol graddiant gwrthdro, wedi'i dryloywi gan xylene a niwtral sêl resin. Yn ficrosgopig, roedd y cnewyllyn yn las porffor, a'r cynhyrchion canlyniad cadarnhaol oedd gronynnau melyn brown neu felyn.
Canfod mynegiant mRNA C-kit mewn meinwe colonig trwy adwaith cadwyn polymeras meintiol amser real (RT-qPCR):Cafodd meinwe colonig llygod mawr wedi'i rewi ei falu gan homogenizer, ac ychwanegwyd 1 ml RNAiso Plus. Tynnwyd cyfanswm RNA meinwe colonig gan y dull clorofform / isopropanol, a chanfuwyd ansawdd RNA trwy electrofforesis trwy gel. Ar ôl cael ei adnabod gan ddelweddwr gel Bio-Rad, cafodd 1 ug RNA ei ail-drawsgrifio i cDNA gan Takara PrimeScript II Llinyn 1af cDNA Synthesis Kit.Yn ôl cronfa ddata NCBI Gene ID: 64030, canfuwyd rhanbarth CDS y genyn C-kit a'i gyfuno â Dilyniant Primer dylunio Primer-Blast NCBI, a gafodd ei syntheseiddio gan Sangon Biotech Co. Ltd, llinyn synnwyr dilyniant primer C-kit 5'-AGGT GTACCGTTCCTGTCCC-3', llinyn antisense 5'-GGCTGGATTTGCTCTTTGCTGT-3', - llinyn synnwyr actin 5'-CTTCCTTCCTGGGTGGATGGAATC-3', llinyn antisense 5'-CTGTGTTGGCATAGAGGTCTT-3'. Perfformiwyd ymhelaethiad PCR ar offeryn PCR Amser Real Bio-RadCFX90. Yr amodau ar gyfer assay PCR oedd dadnatureiddio cychwynnol ar 95 gradd am 5 munud, 30 cylch o 95 gradd am 30 s, 60 gradd am 30 s a 72 gradd am 1 munud ac yna estyniad terfynol ar 72 gradd am 10 munud. Cymerwyd 2-ΔΔCt (ΔCt=gwerth Ct - -actin Ctvalue) i ddadansoddi mynegiant genynnau cymharol.
Canfod lefel mynegiant protein Cx43 ac AQP3 mewn meinwe colonig trwy blotio Gorllewinol:Casglwyd tua 1 cm o feinwe colonig wedi'i rewi a'i lysu â hylif pyrolysis cryf RIPA (100 μL). Cafodd y meinwe ei homogeneiddio â glasshomogenizer 20 gwaith a'i drosglwyddo i diwb centrifuge 1.5 ml. Echdynnwyd yr uwchnatant ar ôl centrifugio ar 12000 rpm ar 4 gradd am 5 munud, a phenderfynwyd crynodiad cyfanswm y protein yn yr uwchnatant gan y dull BCA. Fe wnaethom dynnu 25ug o brotein dadnatureiddio i berfformio electrofforesis gel sodiwm dodecyl sylffad-polyacrylamid ac yna trosglwyddo'r proteinau yn y gel i fflworid bilen polyvinylidene ar gerrynt cyson o 200 mA ac yna ei selio gan 5 y cant o laeth sgim confiningliquid am 2 h ar dymheredd ystafell. Cafodd gwrthgyrff cynradd cyfatebol eu gwanhau â hylif selio, eu deor ar 4 gradd dros nos, yna golchi ymwrthedd y bilen ac ychwanegu ail wrthgyrff. Ar ôl ychwanegu hylif ECL, cawsant eu rhoi o dan y mesurydd datguddiad ar gyfer y prawf gan ddadansoddiad dwysedd optegol.
Microsgopeg trosglwyddo electron:Fe wnaethom gymryd tua 1 cm o feinwe colonig procsimol, ei osod mewn 2.5 y cant o glutaraldehyde am 24 h, ei ddadhydradu ag aseton graddedig, ei fewnosod yn Epon812, a thorri adrannau ultrathin 50 nm ar ultramicrotome. Cafodd yr adrannau eu staenio ag asetad wraniwm deuocsid a hylif lliwio sitrad plwm ar dymheredd yr ystafell am 10 munud. Gwelsom fili colonig, mitocondria celloedd epithelial, a chelloedd goblet o dan ficrosgop electron trosglwyddo Philips Tecnai-10.
Dadansoddiad ystadegol
SPSS 19. Defnyddiwyd meddalwedd 0 ar gyfer dadansoddi data, a defnyddiwyd meddalwedd GraphPad Prism8.4 i blotio'r canlyniadau. Defnyddiwyd prawf Shapiro-Wilk ar gyfer profi normalrwydd. Cynrychiolwyd data â dosbarthiad arferol gan gymedr ± SD. Defnyddiwyd eitemau gwall i gynrychioli'r cymedrig ±SD o haemoglobin ar ôl triniaeth. Defnyddiwyd prawf-t y myfyriwr i gymharu dau grŵp. Defnyddiwyd dadansoddiad o amrywiant i gymharu rhwng grwpiau lluosog. Defnyddiwyd y dull Student-Newman-Keuls i gymharu grwpiau lluosog mewn parau, a defnyddiwyd prawf Dunnett i fesur y gwahaniaethau rhwng pob grŵp arbrofol a grŵp rheoli mewn dilyniant. Mesurwyd data cysylltiedig yn ôl pwyntiau amser lluosog, a defnyddiwyd dadansoddiad data mesur dro ar ôl tro o amrywiad cynnal. Os dangosodd y prawf sfferigedd P > 0.{{10}}5, defnyddiwyd dadansoddiad data mesur ailadroddus o amrywiant. Os P < 0.05,="" cymerwyd="" yr="" hafaliad="" amcangyfrif="" cyffredinol.="" cynrychiolwyd="" data="" nad="" oedd="" yn="" cydymffurfio="" â="" dosbarthiad="" arferol="" gan="" m="" (p25,="" p75),="" a="" defnyddiwyd="" prawf="" swm="" rheng="" kruskal-wallis="" h="" i="" gymharu="" grwpiau.="" defnyddiwyd="" y="" prawf="" χ2="" i="" gymharu="" rhwng="" grwpiau="" pan="" oedd="" y="" data="" yn="" ddata="" heb="" ei="" drefnu,="" a="" defnyddiwyd="" prawf="" χ2="" pearson="" os="" oedd="" cyfran="" y="" celloedd="" ag="" amlder="" damcaniaethol="">< 5="" yn="">< 20="" y="" cant="" .="" os="" oedd="" cyfran="" y="" celloedd="" ag="" amlder="" damcaniaethol="">< 5="" yn="" fwy="" na="" neu'n="" hafal="" i="" 20="" y="" cant="" ,="" defnyddiwyd="" union="" brawf="" fisher.="" defnyddiwyd="" p="">< 0.05="" i="" benderfynu="" bod="" y="" gwahaniaeth="" yn="" ystadegol="">
Ffigur 1 Newidiadau histopatholegol cytrefol.
CANLYNIADAU
Amodau cyffredinol
Un diwrnod ar ôl y gavage o loperamide o'i gymharu â'r grŵp arferol, roedd pwysau'r corff a phwysau'r stôl yn y grŵp model yn gostwng yn sylweddol (P < {{{{}}}}.05),="" ond="" nid="" oedd="" gwahaniaeth="" arwyddocaol="" yn="" ansawdd="" y="" stôl="" sgôr="" (p=""> 0.05). C. Arafodd triniaeth anialwch yn y grŵp model y gostyngiad ym mhwysau’r corff a phwysau’r stôl (P< 0.05),="" but="" the="" bodyweight="" in="" the="" blocker="" group="" was="" not="" significantly="" reduced.="" after="" 10="" d="" of="" treatment,="" compared="" with="" the="" normal="" group,="" the="" body="" weight="" and="" stool="" volume="" of="" rats="" in="" the="" model="" group="" were="" further="" significantly="" reduced,="" and="" the="" stools="" were="" dry="" and="" almost="" contained="" no="" water="" (p="" <="" 0.05).="" the="" body="" weight="" loss="" of="" rats="" was="" also="" significantly="" reduced="" by="" treatment="" with="" c.="" deserticola="" (p="" <="" 0.05).="" the="" bodyweight="" of="" rats="" in="" the="" blocker="" group="" was="" not="" significantly="" different="" from="" that="" in="" the="" model="" group="" (p="" >="" 0.05).="" on="" day="" 20="" before="" sampling,="" the="" bodyweight="" of="" rats="" in="" the="" model="" group="" was="" significantly="" lower="" than="" that="" in="" the="" normal="" group,="" and="" the="" stool="" quality="" score="" was="" significantly="" increased="" (p="" <="" 0.05),="" while="" the="" weight="" loss="" caused="" by="" constipation="" was="" inhibited="" by="" c.="" deserticola="" treatment,="" and="" the="" stool="" quality="" score="" was="" decreased="" (p="" <="">
Histopatholeg drefedigaethol
Dangosir staen hematocsilin ac eosin o feinwe colonig llygod mawr yn Ffigur 1. Yn y grŵp normal, roedd fili berfeddol yn gyfan, roedd mwcosa berfeddol yn gyfan ac yn barhaus, trefnwyd celloedd a chwarennau'n rheolaidd. Ni ymdreiddiwyd mwcosa a submucosa gan gelloedd llidiol, ac roedd strwythur meinwe yn normal. Yn y grŵp model, dinistriwyd berfeddolfili a mwcosa i raddau helaeth, cafodd fili lleol eu siedio a'u trefnu'n rhydd, a diflannodd rhan o'r strwythur chwarennol. Yn y grŵp C. deserticola, roedd staenio histopatholegol yn llai nag un y grŵp model, ond roedd necrosis mewn celloedd somegoblet. Ar ôl pigiad intraperitoneol yn y grŵp atalyddion, o'i gymharu â'r grŵp C.deserticola, roedd colled lleol o fili berfeddol o hyd, ac roedd toriad a cholli mwcosa berfeddol.
Ffigur 2 Mynegiad o ffactor bôn-gelloedd a chymhareb dwysedd optegol cymharol mewn meinwe colonig trwy ganfod immunohistochemical.
Canfod mynegiant ffactor bôn-gelloedd a staenio trwy imiwnohistocemegol protein C-kit
Dangosodd staenio imiwnohistocemegol fod SCF a C-kit wedi'u mynegi yng nghlon y grŵp rheoli. O'i gymharu â'r grŵp rheoli, gostyngwyd mynegiant SCF a C-kit yn y grŵp model yn sylweddol (P < 0.{5}}5).="" o="" gymharu="" â'r="" grŵp="" model,="" cynyddwyd="" mynegiant="" scf="" a="" c-kit="" yn="" y="" grŵp="" c.="" deserticola="" yn="" sylweddol="" (p="">< 0.05).="" nid="" oedd="" unrhyw="" wahaniaeth="" o="" ran="" mynegiant="" scf="" a="" c-kit="" rhwng="" y="" blocwyr="" a'r="" grwpiau="" model="" (p="">< 0.05,="" ffigurau="" 2="" a="">
RT-qPCR
RT-qPCR showed that expression of C-kit mRNA in the model group was significantly lower than in the normal group (Figure 4, P < 0.05). Compared with the model group, C-kit in the C. deserticola group was significantly increased (P < 0.05). There was no significant difference in C-kit mRNA level between the model and blocker groups (P >0.05). Roedd y canlyniadau hyn yn dangos bod mynegiant C-kit a addaswyd gan C. deserticola yn cymryd rhan mewn gwella rhwymedd, a bod atalyddion yn atal effeithiolrwydd C. anialwch.
manteision cistanche salsa
Blotio gorllewinol
Dangosodd blotio gorllewinol fod protein AQP3 wedi'i fynegi ar lefel isel yn y grŵp rheoli arferol, tra'i fod wedi cynyddu'n sylweddol yn y grŵp model o'i gymharu â'r grŵp rheoli (Ffigur 5) (P < 0.{6}}5)="" .="" gostyngodd="" mynegiant="" protein="" aqp3="" ar="" ôl="" triniaeth="" gyda="" c.="" deserticola,="" a="" llesteiriwyd="" effaith="" ataliol="" c.deserticola="" ar="" fynegiant="" aqp3="" gan="" driniaeth="" atalydd="" (p="">< 0.05).="" roedd="" mynegiant="" cx43="" i'r="" gwrthwyneb="" i="" aqp3.="" roedd="" y="" canlyniadau="" hyn="" yn="" awgrymu="" bod="" effaith="" ffarmacoleg="" c.="" deserticola="" ar="" lygod="" mawr="" â="" sc="" yn="" cael="" ei="" gyflawni="" trwy="" hyrwyddo="" mynegiant="" cx43="" ac="" atal="" mynegiant="" aqp3="" (ffigurau="">
Microsgopeg electron trosglwyddo
Ar ôl sefydlu loperamid, digwyddodd chwydd mitocondriaidd ac awtophagi yn rhai o'r celloedd epithelial mwcosaidd colonig yn y grŵp model. Gostyngodd nifer a hyd microfili berfeddol, a digwyddodd pyknosis cell goblet (Ffigur 8). Ar ôl triniaeth gyda C. deserticola, cynyddodd nifer y microvilli berfeddol. Roedd Themicrovilli wedi'u trefnu'n daclus, ac roedd y strwythur yn gyflawn. Mae'r celloedd goblet hyd byrrach, morffoleg afreolaidd o mitocondria, a pyknosis difrifol o gobletcells.
Ffigur 3 Mynegiant C-kit a chymhareb dwysedd optegol cymharol mewn meinwe colonig trwy ganfod immunohistochemical.
TRAFODAETH
Mae rhwymedd yn gyffredin ymhlith y boblogaeth oedrannus ac mae'n un o'r symptomau cyffredin sy'n effeithio ar statws iechyd ac ansawdd bywyd pobl oedrannus[10,11]. Credai intermau meddygaeth Tsieineaidd draddodiadol, Bai et al[12] mai pathogenesisof SC sylfaenol oedd camweithrediad swyddogaeth dargludiad y coluddyn mawr, methiant y corff henaint, colli swyddogaethau'r afu a'r arennau'n raddol, diffyg qi a gwaed, a cholli hylif y corff. , a arweiniodd at garthion sych, gan arwain at rwymedd[13]. Mae SC yn rhoi pwysau ar gleifion a'u teuluoedd mewn sawl agwedd, ac mae'n bwysig archwilio ei bathogenesis.
Mae gan C. deserticola swyddogaethau tonhau aren Yang, bod o fudd i waed, a rheoleiddio imiwnedd y corff[14]. C. deserticola a decoction llysieuol Tsieineaidd yn cynnwysC. Mae deserticola wedi cael eu defnyddio'n helaeth wrth drin rhwymedd, ac mae'r effaith glinigol yn rhyfeddol. Canfu Du et al[15] mewn model llygod mawr o ddiffyg Yang a rhwymedd fod C. deserticola wedi gwella osgled crebachiad y colon ynysig, wedi cryfhau cyfangedd y llwybr berfeddol, ac wedi dychwelyd lefel yr hormonau gastroberfeddol i normal. Yn ogystal, mae ffibr dietegol C. deserticola, sgil-gynnyrch prosesu o C. deserticola, yn gwella gallu feces i ddal dŵr ac mae ganddo'r fantais o ddos isel ac effaith dda ar faethu'r coluddion a gwella ymgarthion[16]. Canfu ein hastudiaeth fod triniaeth C. deserticola wedi gwella lleithder fecaloid a histopatholeg colonig llygod mawr gyda rhwymedd.
Mae ICCs i'w cael ledled y llwybr berfeddol ac maent yn chwarae rhan hanfodol yn rheolaeth niwral symudiad berfeddol fel rheolyddion calon a thrawsyriant nerf berfeddol [17]. Mae derbynnydd codio proto-oncogene tyrosine kinase, C-kit, yn cael ei fynegi gan ICCs, a SCFis yn ligand o C-cit[18]. Mae'r system SCF/C-kit yn hanfodol i ddatblygiad ICCs. Mae llwybr signalau SCF/C-kit wedi'i ddadansoddi yn ystod triniaeth aciwbigo ar gyfer rhwymedd trosglwyddo araf mewn llygod mawr[19]. Cynyddodd electroaciwbigo yn Tianshu y nifer o ICCs colon mewn llygod a driniodd ACK, mynegiant uwch-reoledig o broteinau SCF a C-kit, a gwrthdroi ffenoteip ICC. Gall presgripsiwn ar gyfer bywiogi qi a dueg gynyddu mynegiant ICC mewn meinwe colonig ac uwchreoleiddio mynegiant C-kit a SCF mRNA, gan wella symptomau rhwymedd[20]. Yn ein hastudiaeth, dangosodd imiwn-histochemistry fod C. deserticola wedi uwch-reoleiddio mynegiant SCF a phrotein C-kit yn sylweddol mewn model llygod mawr o SC, andRT-qPCR yn dangos bod C. deserticola wedi uwchreoleiddio mynegiant C-kitmRNA yn sylweddol. Roedd atalydd C-kit yn atal uwch-reoleiddio mynegiant SCF a C-kit a achosir gan C. deserticola.
Mae cysylltiad agos rhwng cynnwys dŵr fecal a chludiant dŵr colonig ag AQPs, sy'n chwarae rhan bwysig ym metaboledd dŵr berfeddol[21]. Mewn astudiaeth o lygod mawr â rhwymedd trafnidiaeth araf, fe wnaeth decoction decoction wella symptomau rhwymedd yn sylweddol trwy reoleiddio amsugniad dŵr perfeddol trwy is-reoleiddio AQP3 ac AQP4[22]. Mewn model llygod mawr o rwymedd swyddogaethol, gellir gwireddu mecanwaith trin Hylif Llafar Xiaofu Tongjie ar gyfer rhwymedd swyddogaethol trwy reoleiddio mynegiant polypeptid coluddol fasoweithredol ac AQP3 yn y colon[23]. Mae Gapjunctions yn chwarae rhan hanfodol wrth gyfryngu crebachiad cydamserol celloedd cyhyrau llyfn. Cx43 yw'r protein pwysicaf yn ystod y broses honno[24]. Gall colli Cx43expression fod yn rhannol gyfrifol am gamweithrediad echddygol y cyhyrau llyfn[25]. Gall atgyweirio strwythur rhwydwaith y system nerfol berfeddol mewn llygod mawr â chludiant araf, wella mynegiant Cx43 ac ati a symptomau rhwymedd[26]. Mae'r canlyniadau hyn yn dangos bod y cynnydd mae mynegiant AQP3 yn lleihau cynnwys dŵr fecal, gan arwain at rwymedd, a all fod yn fecanwaith rhwymedd pwysig. Gall mynegiant Cx43 fod yn gysylltiedig â chrebachiad cyhyr llyfn berfeddol a lleihau'r achosion o rwymedd. Yn ein hastudiaeth, dangosodd blotting gorllewinol fod mynegiant Cx43 wedi'i gynyddu a mynegiant AQP3 wedi'i atal gan driniaeth C.deserticola, a arweiniodd at fwy o gyfangiad cyhyrau llyfn a llai o amsugno dŵr, ac roedd triniaeth atalydd yn gwrthdroi'r effeithiau hyn.
Am fwy o wybodaeth, cliciwch yma.
CASGLIAD
I gloi, gall C. deserticola atal mynegiant AQP3 a hyrwyddo mynegiant Cx43 trwy'r llwybr SCF/C-kit, a thrwy hynny wella byloperamine a achosir gan rwymedd a lleihau difrod meinwe colonig mewn llygod mawr oedrannus. Darparodd yr astudiaeth hon sail ddamcaniaethol dda ar gyfer y defnydd clinigol o C. deserticola.
