Datblygiad Therapi ar gyfer Atroffi Cyhyrau'r Sbinol: Safbwyntiau Ar Gyfer Dystroffiau Cyhyrol Ac Anhwylderau Niwro-ddirywiol Rhan 10

Triniaethau ASO ar gyfer nychdod cyhyrol

Mae nychdod cyhyrol Duchenne (DMD) a nychdod cyhyrol Becker (BMD), y ddau fath o nychdod cyhyrol sy'n gysylltiedig â X yn cael eu hachosi gan fwtaniadau yn y genyn Dystroffin. Mae DMD yn digwydd gydag achosion o tua 1:5000, tra bod BMD yn effeithio ar blant ag achosion o 1:30,000 [155].

Mae nychdod cyhyrol Duchenne yn glefyd genetig prin sy'n achosi gwendid cyhyrau, blinder, anystwythder, a symptomau eraill. Fodd bynnag, gall y rhan fwyaf o gleifion barhau i gynnal eu bywydau a'u galluoedd ymarfer trwy driniaeth â chyffuriau a hyfforddiant adsefydlu, ac efallai na fydd effaith fawr ar eu perthynas â'r cof.

Gall llawer o bobl â nychdod cyhyrol Duchenne ddangos sgiliau cof rhagorol yn yr ysgol, gwaith a bywyd. Mae ymchwil yn dangos bod gan hyn lawer i'w wneud â'u galluoedd hunanreoli a'u strategaethau ymdopi. Oherwydd bod y clefyd yn achosi blinder cyhyrau a gwendid, yn aml mae angen i gleifion fod yn fwy trefnus ynghylch eu hamser a'u gweithgareddau i wneud y gorau o'u horiau mwyaf egnïol. Mae'r gallu hwn hefyd yn ymarfer eu galluoedd hunanreolaeth a hunanreoli, sydd yn ei dro yn helpu i wella eu cof a'u galluoedd dysgu.

Felly, er y bydd nychdod cyhyrol Duchenne yn cael effaith benodol ar iechyd corfforol pobl, nid yw'n golygu y bydd cleifion yn anochel ar ei hôl hi o gymharu â phobl gyffredin o ran cof a galluoedd dysgu. I'r gwrthwyneb, maent yn dueddol o fod â manteision cryfach mewn strategaethau hunanreoli ac ymdopi, sydd hefyd yn eu helpu i gyflawni canlyniadau gwell mewn astudio a chystadleuaeth yn y gweithle. Felly, dylem drin y clefyd hwn a chleifion ag agwedd gadarnhaol, a rhoi mwy o gefnogaeth ac anogaeth iddynt, fel y gallant gael bywyd iachach a boddhaus. Gellir gweld bod angen i ni wella'r cof, a gall Cistanche deserticola wella'r cof yn sylweddol, oherwydd mae gan Cistanche deserticola effeithiau gwrthocsidiol, gwrthlidiol a gwrth-heneiddio, a all helpu i leihau ocsidiad ac adweithiau llidiol yn yr ymennydd, a thrwy hynny amddiffyn y iechyd y system nerfol. Yn ogystal, gall Cistanche deserticola hefyd hyrwyddo twf ac atgyweirio celloedd nerfol, gan wella cysylltedd a swyddogaeth rhwydweithiau niwral. Gall yr effeithiau hyn helpu i wella cof, dysgu a chyflymder meddwl, a gallant hefyd atal datblygiad camweithrediad gwybyddol a chlefydau niwroddirywiol.

Cliciwch Gwybod i wella cof tymor byr

Mae'r ffurf ddifrifol, DMD, fel arfer yn dechrau cyn 4 blynedd. Mae bechgyn yr effeithir arnynt yn colli trosglwyddiad tua 12 oed ac yn cael awyriad erbyn 18 oed [119]. Y rhychwant oes cyfartalog heddiw yw 20-30 mlynedd oherwydd datblygiadau mewn gofal cardiaidd ac anadlol.

Mewn cyferbyniad â SMA, mae sbectrwm treigladau mewn DMD yn eang ac yn amrywio o dreigladau pwynt i ddileu yn ogystal â mewnosodiadau bach i ddyblygu [24]. Mae'r genyn dystroffin yn un o'r genynnau dynol mwyaf sy'n cynnwys 79 exon a thua 2.4 miliwn o barau sylfaen [2, 24, 41]. Prif rôl y protein dystroffin yw cysylltu'r actin-cytoskeleton â'r matrics allgellog mewn cyhyrau cardiaidd ac ysgerbydol trwy ffurfio rhyngweithiadau â'r subsarcolemmalactin a'r cymhleth dystroffin-glycoprotein oligomerig mawr (DPG).

Mae hyn yn rheoleiddio gweithrediad priodol ffibrau cyhyrau. Mae diffygion y DPG yn arwain at wendid cyhyrau oherwydd difrod a achosir gan gyfangiad, necrosis, a llid, a disodli myofibrau swyddogaethol gan feinwe gyswllt ffibrog a brasterog [29].

Mae difrifoldeb afiechydon yn dibynnu'n fawr ar swyddogaethau gweddilliol y protein dystroffin cwtogi, sy'n deillio o enyn theutant. Yn ddiddorol, nid yn unig y mae ffurfiau ysgafn o'r afiechyd wedi'u canfod mewn cleifion â threigladau pwynt sydd â chanlyniadau bach yn unig ar gyfer strwythur a swyddogaeth protein ond hefyd mewn cleifion BMD lle nad yw parthau lluosog wedi'u hamgodio gan exon yn cael eu trawsgrifio, gan arwain at mRNA dystroffin cwtog iawn o ddim ond 8.8 kb[79].

Mae'r arsylwi hwn wedi paratoi'r ffordd i amddiffyn is-barthau hanfodol o fewn y protein dystroffin a thrawsgrifiadau exons o fewn y trawsgrifiadau sy'n swyddogaethol bwysig ac y mae angen iddynt fod yn bresennol ar gyfer lliniaru difrifoldeb y clefyd. Yn yr un modd, mae'r canfyddiadau hyn yn sail ar gyfer dylunio genynnau artiffisialmini-dystroffin y gellid eu defnyddio ar gyfer therapi genynnau trwy fectorau firaol na all ond cario cDNAs o hyd cyfyngedig [52].

Exon sgipio

Mae cadw neu gadw'r ffrâm darllen agored (ORF) yn opsiwn i gyfyngu ar ganlyniadau ffisiolegol colli dystroffin mewn cleifion DMD â threigladau nonsens. Gellir cyfryngu cadw'r ORF trwy gyflenwi ASO.

Mae rhwymo'r ASOs i'r trawsgrifiad cyn-mRNA dystroffin yn achosi dileu / hepgor exon(au) penodol a gall felly adfer yr ORF [72]. Mae ORF byrrach o ganlyniad yn cynhyrchu ffenoteip tebyg i'r hyn a ddisgrifir ar gyfer y ffurf fwynach o DMD-y BMD.Tree ASOs gydag asgwrn cefn morpholinooligomer phosphorodiamidate (PMO) a ddefnyddir ar gyfer sgipio exon-elegize (exon 51), Goodison (exon 53), aviltolarsen (exon). 53) - wedi'u cymeradwyo gan yr FDA.

Fodd bynnag, mae'r ASOs hefyd yn dangos rhai cyfyngiadau [75,306] [1]. Gan fod gan gleifion DMD amrywiadau mewn llawer o wahanol exons sy'n achosi amhariadau lluosog ar y ffrâm ddarllen, dim ond i is-set o gleifion DMD y mae triniaethau un-exon o'r fath yn berthnasol.

Mae sgipio aml-exon wedi'i gynnig i oresgyn cwmpas cyfyngedig sgipio sengl trwy dargedu cleifion DMD ag ecsonau amrywiol[16]. Gall coctel o ASOs sy'n targedu'r amrywiol fannau problemus o exons 45-55 hepgor yr exons hyn yn effeithlon mewn celloedd cyhyrau cleifion DMD anfarwol a modelau llygoden [73, 167].

Fodd bynnag, mae gan gymysgedd o nifer o ASOs hefyd risg uwch ar gyfer effeithiau oddi ar y targed. Mae angen profi hyn mewn treialon clinigol. Os caiff y cyllid hwn ei drosi'n llwyddiannus i'r clinig, gallai fod yn ddefnyddiol i fwy na 65% o gleifion DMD [74].

Golygu genom

Mae golygu genom gyda CRISPR-Cas9 yn ymddangos fel opsiwn deniadol ar gyfer adferiad ORF o'r genyn dystroffin. Nid oes angen ail-chwistrelliadau wrth gymhwyso CRISPR-Cas9 oherwydd targedir DNA yn lle cyn-mRNA. Gallai'r dull hwn hefyd fod yn ddefnyddiol ar gyfer trin cleifion â dyblygu mewn rhai exons o'r genyn DMD gan ei fod yn caniatáu cael gwared ar exons ychwanegol a mewnosodiadau genynnau eraill.

Dangoswyd bod y defnydd o ganllaw amlblecs-RNA (gRNA) sy'n targedu'r exons amrywiol-dueddol 45-55 neu 47-58, yn adfer mynegiant dystroffin [306] mewn myoblastau diwylliedig sy'n deillio o gleifion. Pan gafodd y myoblastau hyn eu mewnblannu i lygod, cynhaliwyd mynegiant [226].
Fodd bynnag, gan fod Cas9 yn cymell toriadau llinyn dwbl (DSBs) gan y gRNA mewn modd wedi'i dargedu, mae torri DNA o'r targed yn parhau i fod yn broblem. Ar hyn o bryd, nid oes unrhyw ddulliau golygu genom sy'n treialu clinigol ar gyfer DMD [75].

Safbwyntiau therapïau genynnol AAV y tu hwnt i SMA

Yn achos LOF sy'n seiliedig ar fwtaniad, mae angen i ddulliau therapiwtig perthnasol ailsefydlu swyddogaeth genynnau. Yn achos SMA, darparodd therapi genynnau scAAV9-SMN11 dystiolaeth bod y dull hwn yn ymarferol ar gyfer trin clefyd niwroddirywiol.

Roedd yn ymddangos bod y dos o bwysau corff 1.1 × 1014 vg/kg yn ddigon i drosglwyddo'r genein i nifer o motoneuronau sy'n berthnasol yn glinigol a chynnal effeithiau andwyol megis anaf difrifol i'r afu acíwt ar lefel isel.

Mae cynnydd yn lefelau transaminase yr afu wedi'i drafod o ganlyniad i ymateb imiwn enfawr yn erbyn gronynnau firaol [195]. Yn anffodus, yn achos anhwylder niwrogyhyrol arall - myopathi myotubwlar X-linked - roedd dosbarthiad systemig dos uchel o ronynnau AAV8 yn cynnwys y cDNA ar gyfer myotubularin-1 yn angheuol. Bu farw dau o chwe chlaf a gafodd ddos ​​o 2 × 1014 mg/kg neu fwy o ddiffyg gweithrediad yr iau cynyddol ac yna sepsis; rhagdybir bod AAVs yn niweidio celloedd yr afu yn uniongyrchol [117].

Tus, mae AAVs ar un ochr cerbydau trosglwyddo genynnau effeithiol ond ar yr ochr arall yn dioddef anfantais o adweithiau llidiol difrifol, yn enwedig mewn triniaethau systemig gyda dosau uchel. Mae strategaethau wedi'u cynnig i nodi cleifion sy'n agored i sgîl-effeithiau difrifol [57, 58], ac i goresgyn y broblem hon trwy fodiwleiddio'r adwaith imiwn tuag at ymateb llaith.

Gellid cyflawni hyn naill ai drwy leihau imiwnoglobwlinau drwy gyfrwng plasmapheresis; neu hyd yn oed yn fwy penodol, trwy ddefnyddio'r hollti metalloproteases IgG IdeS neu IdeZ [63]. Gallai dulliau o’r fath i leihau AAV-autoantibodies helpu i leihau sgil-effeithiau therapïau genynnau seiliedig ar AAV ar gyfer anhwylderau fel DMD lle mae angen triniaeth systemig gyda niferoedd uchel o ronynnau firws.
Ar ben hynny, gall fod yn fuddiol i therapïau ar gyfer anhwylderau sy'n dechrau mewn oedolion pan ddisgwylir i gleifion fod wedi datblygu teitrau gwrthgyrff AAV uchel o ganlyniad i amlygiadau blaenorol lluosog i firysau o'r fath. Gallai strategaeth arall fod yn chwistrelliad lleol, naill ai trwy gymhwyso'r firysau ailgyfunol trwy gymhwyso'r firws ailgyfunol neu chwistrelliad i'r manga cisterna. .

Mae'r dull hwn yn cael ei ddilyn ar hyn o bryd gyda threial therapi genynnol AAV1-i gynyddu mynegiant Progranulin mewn cleifion â dementia blaen-amgylcheddol â threigladau granwlin [120] (Datganiad i'r wasg Ionawr 28ain, 2021: Mae Passage Bio-Passage Bio yn Derbyn Clirio IND gan yr FDA Cais am Ymgeisydd Therapi Genynnau PBFT02 ar gyfer Trin Cleifion â Dementia Ffrynt-amerol â Mudiadau Granwlin).

Bydd yn dangos sut mae'r system imiwnedd yn ymateb pan fydd gronynnau AAV yn cael eu chwistrellu i'r CSF, faint o gelloedd ymennydd sy'n gallu cymryd y gronynnau firaol i gynhyrchu'r trawsgenyn, a pha lefelau mynegiant trawsgen sy'n angenrheidiol ar gyfer effaith glinigol berthnasol.

Mewn astudiaeth a adroddwyd gan Mueller et al., cafodd dau glaf ALS eu trin ag un trwyth mewnthecal o AAVrh10 yn cynnwys microRNAs i dargedu SOD1. Nodwyd dirywiad yn y trawsgrifiadau SOD1 a phrotein mewn samplau awtopsi llinyn asgwrn y cefn trwy blot gorllewinol un o'r cleifion hyn.

Dangosodd yr un claf welliannau dros dro yng nghryfder ei goes dde ond dim newid yn ei allu hanfodol, tra bod yr ail glaf wedi cynnal capasiti hanfodol sefydlog dros y 12-cyfnod arsylwi mis [214].

Cynigiodd yr awduron y gallai trwyth intrathecal o ficroRNAs a ddarperir gan AAV ar gyferSOD1 fod â'r potensial ar gyfer effeithiau buddiol parhaus, ond efallai y bydd angen gwrthimiwnedd.

For more information:1950477648nn@gmail.com