CD8 sy'n ymdreiddio tiwmor ynghyd ag Effeithiolrwydd Antitumor Cell T a Gorlifiad: Mewnwelediadau Moleciwlaidd Rhan 1

Haniaethol

Mae gan imiwnedd gwesteiwr rôl hanfodol yn rheolaeth glinigol canserau. Felly, mae'n fanteisiol dewis therapïau a all hyrwyddo marwolaeth celloedd tiwmor a hybu imiwnedd gwesteiwr ar yr un pryd. Mae'r micro-amgylchedd tiwmor deinamig (TME) yn pennu a fydd cyffur antineoplastig yn ennyn ymatebion imiwnedd ffafriol neu ddilornus o lymffocytau sy'n ymdreiddio i tiwmor (TILs). Mae celloedd CD8 plws T yn un o'r prif gelloedd imiwnedd tiwmor-ymdreiddio sy'n darparu ymatebion gwrth-tiwmor. Yma, rydym yn adolygu dylanwad ffactorau amrywiol yn y TME ar CD8 ynghyd â gorludded a goroesiad celloedd T a strategaethau posibl ar gyfer adfer swyddogaeth effeithydd cell CD8 ynghyd â T trwy imiwnotherapi.

Mae'r berthynas rhwng blinder celloedd ac imiwnedd yn agos iawn.

Celloedd yw'r unedau sylfaenol sy'n rhan o'n cyrff, ac mae eu cyflwr bywiog yn hollbwysig i'n hiechyd. Fodd bynnag, mae ein celloedd yn disbyddu dros amser. Gall y gostyngiad hwn fod oherwydd amrywiaeth o ffactorau megis llygredd amgylcheddol, diet anghytbwys, a straen.

Pan fydd celloedd yn disbyddu, maent yn mynd yn wan ac wedi blino'n lân, gan achosi i'n imiwnedd ddirywio. Mae angen celloedd ar ein corff i gynhyrchu celloedd imiwnedd i ymladd yn erbyn firysau a bacteria sy'n ymosod ar ein corff. Os nad yw ein celloedd yn gweithredu'n optimaidd, mae ein system imiwnedd yn dod yn gynyddol wan ac yn agored i haint. Bydd hyn yn ein gwneud yn fwy agored i afiechydon amrywiol, a fydd yn effeithio ar ein bywyd a'n gwaith.

Fodd bynnag, mae camau y gallwn eu cymryd i arafu disbyddu ein celloedd. Er enghraifft, cynnal arferion bwyta da a chymryd digon o faetholion a dŵr; ymarfer mwy i gynnal ffitrwydd corfforol; lleihau straen i gynnal cyflwr meddwl iach.

Yn ogystal, gallwn hefyd ddewis defnyddio rhai atchwanegiadau naturiol i helpu ein celloedd i aros yn fyw. Er enghraifft, olew pysgod, fitamin D a fitamin E, ac ati.

Mewn gair, os gallwn gymryd rhai mesurau effeithiol i gynnal bywiogrwydd celloedd, yna bydd ein imiwnedd yn gryfach ac yn gallu gwrthsefyll goresgyniad amrywiol firysau a bacteria yn well, i gynnal ein hiechyd a'n hapusrwydd. Gellir gweld bod angen inni wella ein himiwnedd. Gall Cistanche wella ein himiwnedd yn sylweddol. Gall y polysacaridau yn y cig reoleiddio ymateb imiwn y system imiwnedd ddynol, gwella gallu straen celloedd imiwnedd, a gwella imiwnedd celloedd imiwnedd. Effaith bactericidal.

Cliciwch budd-daliadau cistanche tubulosa

Ymlidiwr:

Mae therapïau canser yn dylanwadu ar blastigrwydd micro-amgylchedd tiwmor (TME) ac yn newid ymatebion gwrthtiwmor CD8 ynghyd â gell T. Felly, mae dealltwriaeth o blastigrwydd TME a'i effaith ar y system imiwnedd yn hanfodol ar gyfer dylunio therapi canser llwyddiannus.

Geiriau allweddol

lymffocytau ymdreiddio tiwmor; CD8 plws cell T; micro-amgylchedd tiwmor; imiwnotherapi; asiantau cemotherapiwtig.

Rhagymadrodd

Mae dealltwriaeth gywir o imiwnedd gwesteiwr a'i rôl mewn canser yn hanfodol ar gyfer therapi canser llwyddiannus. O ystyried pwysigrwydd aruthrol y system imiwnedd mewn therapi canser, mae nifer o gyffuriau imiwnofodwlaidd ac asiantau imiwnotherapiwtig wedi'u defnyddio i drin malaeneddau amrywiol. Enghreifftiau nodweddiadol o gyfryngau imiwnofodwlaidd yw cytocinau, gan gynnwys interfferonau (IFNs), interleukin-2 (IL-2), IL-11, ffactor sy'n ysgogi cytrefi granulocyte-macrophage (GM-CSF), a erythropoietin [1]. Yr enghraifft glasurol o gyffuriau immunomodulatory mewn defnydd clinigol yw thalidomide, lenalidomide, a pomalidomide [2].

Mae'r tri chyffur hyn yn achosi i IL-2 [2] ryddhau cellog. Yn debyg i gyffuriau imiwnofodiwleiddio, mae Gweinyddiaeth Bwyd a Chyffuriau'r UD (FDA) wedi cymeradwyo atalyddion pwynt gwirio imiwnedd a all dargedu moleciwlau cyd-ataliol celloedd T, gan gynnwys antigen 4 sy'n gysylltiedig â lymffocyt T sytotocsig (CTLA-4), protein marwolaeth celloedd wedi'i raglennu. (PD-1), a death-ligand 1 wedi'i raglennu (PD-L1).

Mae'r imiwnotherapiwteg hyn wedi profi effeithiolrwydd wrth wella effeithiau gwrth-tiwmor cell-T mewn amrywiol falaenau, gan gynnwys melanoma, canser yr ysgyfaint celloedd nad ydynt yn fach (NSCLC), a chanserau eraill [3]. Mae CTLA-4 a PD-1 yn rheoleiddio celloedd T ymylol a thiwmor-ymdreiddio. Yn y system imiwnedd ymylol, mae CTLA-4 yn rheoleiddio amlder celloedd T mewn nodau lymff yn ystod yr ymateb imiwn cynnar. Fodd bynnag, mae PD-1 yn gweithio yn ystod cyfnod diweddarach yr ymateb imiwn ac yn atal swyddogaeth celloedd T [4]. Mynegir CTLA-4 yn bennaf ar gelloedd T rheoleiddiol (Tregs); o fewn y tiwmorau, fodd bynnag, mae PD-1 yn cael ei fynegi'n bennaf ar gelloedd T wedi blino'n lân [3]. Mae sawl tiwmor yn mynegi PD-L1 ac yn rhyngweithio â chelloedd T gan fynegi PD-1; mae'r rhyngweithio hwn yn hyrwyddo swyddogaeth effeithydd celloedd T dan fygythiad [5].

Mae celloedd tiwmor yn ffafrio creu amgylchedd lleol protumorigenig, a elwir hefyd yn TME. Mae'r TME yn cwmpasu pibellau lymffatig a gwaed, matrics allgellog (ECM), celloedd stromal (ee, ffibroblastau), lymffocytau, neutrophils, celloedd lladd naturiol (NK), celloedd NK-T, macroffagau sy'n gysylltiedig â thiwmor (TAMs), RNAs, proteinau wedi'u secretu , ac organynnau bach [6]. Yn seiliedig ar bresenoldeb celloedd imiwnedd, mae TMEs yn cael eu dosbarthu fel anialwch llidus, anwybodus imiwnolegol, neu imiwn [7]. Yn seiliedig ar bresenoldeb ac absenoldeb ymdreiddiadau celloedd T, gellir rhannu'r TME llidus yn TME cell-inflamed TME yn erbyn celloedd nad ydynt yn TME. Mae TME â llid celloedd T yn cynnwys celloedd T a'u his-setiau a chemocinau [8].

Mae hefyd yn cynnwys macroffagau, celloedd B, a chelloedd plasma, tra bod y TME â llid celloedd nad yw'n TME yn cynnwys macroffagau yn bennaf [9]. Mewn cyferbyniad, mae diffyg marcwyr actifadu ar gelloedd T gan TME anwybodus imiwnolegol. Mae anwybodaeth imiwnolegol yn nodi cyflwr lle nad yw cydrannau system imiwnedd addasol yn gallu adnabod neu ymateb i bathogenau neu antigenau tiwmor [10]. Y TME imiwn-anialwch yw'r rhanbarth imiwn-esgeuluso o fewn y tiwmor sydd heb gelloedd T effaith swyddogaethol [11].

Mae ailraglennu trigolion TME yn effeithio'n uniongyrchol neu'n anuniongyrchol ar y celloedd imiwnedd a stromal, sydd o ganlyniad yn rheoleiddio twf a goroesiad celloedd canser [12]. Gellir ystyried y TME yn barth ymladd lle mae celloedd imiwn a di-imiwn lletyol yn rhyngweithio â chelloedd tiwmor, ac mae sawl cyfryngwr hydawdd, gan gynnwys ILs, yn cael eu rhyddhau. Mae plastigrwydd celloedd tiwmor yn achosi polareiddio'r TME naill ai i gyfeiriad gwrthimiwnedd neu ymfflamychol. Mae tirwedd gwrthimiwnedd TME yn gwanhau imiwnedd gwrth-tiwmor y gwesteiwr, gan arwain at ddatblygiad tiwmor a thwf celloedd canser [13]. Amlygir pwysigrwydd TME mewn niwroblastoma, sy'n effeithio'n bennaf ar blant.

Er bod oncogene MYCN wedi'i dreiglo mewn llawer o gleifion, mae therapi wedi'i dargedu gan MYCN yn methu â dylanwadu ar niwroblastoma. Fodd bynnag, nid yw mwtaniad MYCN yn gyfrifol am falaenau niwroblastoma yn unig; mae'r TME hefyd yn cyfrannu'n sylweddol at tumorigenesis neuroblastoma, ac, felly, dylid ystyried strategaethau i dargedu celloedd tiwmor a TME [14,15]. Yn debyg i MYCN, mae c-MYC yn broto-oncogene arall sydd â rôl bwysig wrth reoleiddio'r ymateb imiwn yn y TME [16]. c-MYC yn rhwystro imiwnotherapi canser ac, felly, gall yr atalydd Myc, MYCi361, a'i analog gwell, MYCi975, sensiteiddio tiwmorau i imiwnotherapi gwrth-PD1 [17]. Mewn cyferbyniad â c-MYC, mae colli phosphatase a homolog tensin (PTEN) yn y tiwmor yn gysylltiedig â TME gwrthimiwnedd [18]. Yn debyg i golli PTEN, adroddwyd bod colli kinase afu B1 (LKB1), kinase serine / threonine, hefyd yn rheoleiddio TME ac yn achosi dadreoleiddio secretion cytocin a chemocin, gan gynnwys CCL2, a mwy o recriwtio macroffagau protumorigenig [19 ].

Mae'r dull imiwnotherapiwtig o gymell marwolaeth celloedd tiwmor trwy ymdreiddio i gelloedd T tiwmor, gan dargedu antigenau penodol a fynegir ar gelloedd tiwmor, yn faes sy'n dod i'r amlwg i drin gwahanol falaeneddau. Dangosodd astudiaethau diweddar fod blinder a namau swyddogaethol celloedd T mewn TME yn nodweddion diffiniol llawer o ganserau. Felly, bydd dealltwriaeth drylwyr o briodweddau cynhenid ​​celloedd T, megis eu swyddogaethau goroesi ac effeithydd, yn sylfaenol ar gyfer adfer ymateb imiwnedd antitumor [20]. Mae presenoldeb celloedd imiwnedd, yn enwedig celloedd T o fewn TME, yn pennu a yw'r tiwmor yn boeth (celloedd T yn llidus) neu'n oer (cell T heb fod yn llidus) [8].

Mae tiwmorau poeth yn mynegi cemocinau, marcwyr celloedd T, a llofnodion IFN I sy'n rheoleiddio imiwnedd tiwmor cyffredinol [8]. Mae melanoma metastatig yn dangos pwysigrwydd TIL mewn imiwnedd tiwmor, lle mae ymdreiddiad celloedd T yn cael ei ystyried yn biomarcwr prognostig mewn ymateb i therapi. Fodd bynnag, dangosodd y dadansoddiad o CD8 rhyngdiwmoraidd a chyfrif celloedd T heterogenedd ar gyfer metastasisau cydamserol a metacronaidd. Mewn tiwmorau cydamserol, roedd CD8 ynghyd â dwysedd celloedd T yn gymaradwy; fodd bynnag, mewn tiwmorau metachronous, roedd dwysedd celloedd CD8 ynghyd â T yn amrywiol [21]. Mae'r arsylwadau hyn yn awgrymu bod heterogenedd mewn CD8 ynghyd â ymdreiddiad celloedd T i diwmorau yn rheoli imiwnedd gwahaniaethol.

Mae imiwnedd tiwmor yn broses aml-gam. Yn ystod y cam cychwynnol, mae celloedd tiwmor â threiglad(au) oncogenig yn mynegi antigenau penodol sy'n gwahaniaethu celloedd canser o gelloedd iach ac yn helpu celloedd imiwnedd (hy, celloedd sy'n cyflwyno antigen; APCs) i adnabod yr antigenau tiwmor penodol. Mae APCs yn cyflwyno antigenau tiwmor i gelloedd T yn y nodau lymff, ac mae'r rhyngweithio hwn rhwng APCs a chelloedd T yn arwain at breimio celloedd T ac actifadu. Mae'r celloedd T actifedig yn mudo ac yn ymdreiddio i'r tiwmor trwy'r cylchrediad. Mae'r celloedd T sy'n ymdreiddio tiwmor yn adnabod antigen(au) penodol ar gelloedd canser ac yn y pen draw yn eu dinistrio. Mae'r celloedd tiwmor sy'n marw yn rhyddhau antigen(au) ymhellach, sy'n sicrhau'r cylch imiwnedd tiwmor [22].

Mae sawl ffactor, gan gynnwys cytocinau, kinases, a metabolion cellog, yn rheoleiddio goroesiad ac effaithydd celloedd T sy'n ymdreiddio â thiwmor. Yn yr adolygiad hwn, rydym yn trafod amrywiol ffactorau sy'n deillio o TME sy'n dylanwadu ar CD8 sy'n ymdreiddio i tiwmor ynghyd â chamweithrediad celloedd T ac yn ystyried gwahanol strategaethau a all helpu i adfer eu swyddogaeth a'u goroesiad i wella effeithiolrwydd imiwnotherapi ymhellach.

Ymdreiddiad CD8 ynghyd â chelloedd T mewn tiwmorau solet

Mae croessiarad rhwng y system imiwnedd ymylol a TME yn hanfodol ar gyfer ymatebion gwrth-tiwmor celloedd effaithydd CD8 ynghyd â T. Felly, mae dealltwriaeth gywir o gelloedd T ymylol a thiwmor-ymdreiddio yn hanfodol o safbwynt therapiwtig. Mae preimio, ehangu a mudo celloedd T sy'n benodol i antigenau tiwmor yn digwydd yn yr organ lymffoid ymylol lleol, yn enwedig mewn nodau lymff sy'n draenio tiwmor (dLN). Mae celloedd T preswyl dLN yn cael eu hactifadu gan antigenau hydawdd y tiwmor, darnau tiwmor, a chelloedd tiwmor apoptotig.

Gall celloedd dendritig (DCs) hefyd gludo peptidau antigenig tiwmor o'r tiwmor i dLN [23]. Yn ystod cyfnodau hwyr canser, mae celloedd CD8 ynghyd â T yn organau lymffoid llygod sy'n dwyn tiwmor a chleifion yn colli eu swyddogaeth effeithydd, gan leihau'r ymateb antitumor yn y pen draw [24]. Mae TILs yn un o gydrannau annatod a hanfodol y TME. Mae celloedd imiwnedd mononiwclear sy'n ymdreiddio â thiwmor yn ffurfio ffracsiwn sylweddol o TILs ac yn gweithredu fel dangosydd rhagfynegol o effeithiolrwydd cyffuriau mewn sawl canser. Mae gan TILs rôl hanfodol wrth greu naill ai TME pro- neu antitumorigenig, gan effeithio ar ddilyniant tiwmor ac ymwrthedd therapi [25]. Mae lymffocytau T yn gydrannau arwyddocaol o TILs, ac mae CD4 plus , CD8 plus , a Tregs i'w gweld yn aml mewn canser amrywiol. Mae gan gelloedd CD8 ynghyd â T rôl hanfodol mewn ymatebion imiwnedd gwrth-tiwmor lletyol ar y cyd â chelloedd CD4 a T. Mae celloedd CD8 ynghyd â T yn rhyddhau gransym B, perforin, ac IFN-, ac yn gweithredu fel celloedd sytotocsig sy'n lladd celloedd canser yn y pen draw. Dangosodd dadansoddiadau o setiau data Atlas Genom Canser (TCGA) gan ddefnyddio Platfform Oncomine (Thermo Fisher, Ann Arbor, MI, UDA) ar gyfer mynegiant genynnau CD8 mewn malaeneddau fel tiwmorau ymennydd, y fron, colon a'r rhefr (CRC), a thiwmorau ofari, fod mynegiant genynnau CD8 yn cael ei isreoleiddio yn yr ymennydd, CRC, a chanser yr ofari, ond heb ei newid mewn canser y fron (Ffigur 1a–d).

Fodd bynnag, ni awgrymodd dadansoddiadau mewn melanoma a chanserau'r ysgyfaint gan ddefnyddio setiau data TCGA unrhyw wahaniaeth mawr yn rhif copi CD8A rhwng meinweoedd normal a malaen (Ffigur 1e,f). Mae setiau data TCGA yn dangos heterogenedd mynegiant genynnau CD8 mewn gwahanol falaeneddau. Celloedd cof T yw celloedd CD8 plws T sy'n preswylio tiwmoriaid (TILs) yn bennaf ac, felly, fe'u gelwir yn gelloedd T cof preswyl-meinwe (TRM). Nodweddir celloedd TRM gan fynegiant uchel marcwyr arwyneb CD103 a / neu CD49a integrins, a marciwr actifadu celloedd T, CD69 [26]. Cyflwynir mecanweithiau CD8 antigen-benodol ynghyd ag actifadu celloedd T, ehangu, a mudo i'r tiwmor yn Ffigur 2.
Ar wahân i gelloedd TRM T, mae nifer o ffenoteipiau eraill o gelloedd CD8 ynghyd â T yn y TME. Yn nodedig, ystyrir bod y ffenoteip cell CD8 ynghyd â choesyn T yn bwysig ar gyfer ymatebion gwrth-tiwmor [6]. Mae celloedd CD8 plws T tebyg i goesyn yn gwahaniaethu i gelloedd effaith sytotocsig CD8 ynghyd â T ac yn lleoleiddio yn y gilfach tiwmor, lle mae poblogaethau APC yn doreithiog [6]. Fodd bynnag, mae rhai malaeneddau lle mae APCs o fewn tiwmorau yn fach iawn ac yn cyfateb i lai o CD8 ynghyd â ymdreiddiad celloedd T, gan arwain at ddihangfa imiwnedd gan diwmorau. Yn absenoldeb APCs digonol, mae gweithrediad celloedd CD8 a T yn cael ei beryglu'n sylweddol.

Yn ddiddorol, gall celloedd CD8 plws T sy'n ymdreiddio tiwmor hefyd wasanaethu fel actifadu gwylwyr lle gall celloedd T a weithredir ar gyfer antigen penodol hefyd ymateb yn erbyn yr antigen(au) digyswllt [27]. Er enghraifft, yn CRC a chanser yr ysgyfaint, mae celloedd CD8 a T sy'n ymdreiddio tiwmor yn dangos adweithedd ag antigenau tiwmor yn ogystal ag antigenau digyswllt, fel firws Epstein-Barr (EBV), sytomegalofirws dynol (HCMV), neu firws ffliw [28]. Gallai presenoldeb celloedd gwylwyr CD8 ynghyd â T mewn tiwmor atal ei imiwn rhag dianc. Mae'r olaf yn ffenomen protumor sy'n arwain at dwf celloedd tiwmor a goroesiad, a methiant i ymateb i'r ymatebion antitumor a ysgogwyd gan CD8 ynghyd â chelloedd T. Mae'r ymdreiddiad is o gelloedd CD8 plws T hefyd yn cael ei reoleiddio gan fecanweithiau atal imiwnedd, wedi'i gyfryngu trwy indoleamine-2, 3-dioxygenase (IDO), PD-L1/B7-H1, a FoxP3 plus Tregs [29]. Mae radiotherapi canser hefyd yn effeithio ar ymdreiddiad tiwmor o gelloedd CD8 ynghyd â T.

Mae radiotherapi yn achosi niwed i bibellau gwaed yn y TME, sy'n caniatáu ymdreiddiad TAMs, celloedd atal sy'n deillio o myeloid (MDSCs), a Tregs sydd yn y pen draw yn gwanhau ymdreiddiad celloedd CD8 ynghyd â T i'r tiwmor, gan achosi gwrthimiwnedd [30]. Mae celloedd CD8 plws T sy'n ymdreiddio tiwmor yn bwysig yn prognostig ac yn rhagfynegol mewn malaeneddau'r fron [31]. Mae gwerth rhagfynegol TILs yn arbennig o berthnasol mewn canserau'r fron triphlyg-negyddol (TNBCs) a chanserau'r fron ffactor twf epidermaidd dynol 2 (HER2 plws) [32]. Mae TNBCs yn ganserau'r fron sy'n bennaf lymffosyt, sy'n dangos clystyrau o ymdreiddiadau lymffocyte [33]. Yn ddiddorol, mae ymdreiddiad celloedd T i diwmorau TNBC yn gysylltiedig â goroesiad cyffredinol [34]. Fodd bynnag, mewn HER2 ynghyd â chanser y fron, nid yw ymdreiddiad lymffocyt yn cydberthyn yn uniongyrchol â goroesi [35]. Yn debyg i TNBCs, mae cynnydd mewn TILs, a llai o Tregs yn cyfateb i well goroesiad mewn cleifion â chanser yr ofari [36]. Yn wahanol i TNBC, nid oes gan adenocarcinoma dwythellol pancreatig (PDAC) ymdreiddiad tiwmor diffiniedig o gelloedd CD8 ynghyd â T; fodd bynnag, mae PDAC TME yn gorlifo â chelloedd llidiol. Yn PDAC, mae presenoldeb ymdreiddiadau ymfflamychol yn TME yn cyflymu twf tiwmor a metastasis ac yn atal swyddogaeth effeithydd celloedd CD8 a T sytotocsig [37]. \

Mae'r enghreifftiau hyn gyda'i gilydd yn awgrymu bod gan gelloedd CD8 a T sy'n ymdreiddio tiwmor rôl hanfodol mewn atchweliad tiwmor a goroesiad cyffredinol. Fodd bynnag, mae ymdreiddiad heterogenaidd celloedd CD8 ynghyd â T i diwmorau yn parhau i fod yn aneglur mewn gwahanol diwmorau. Gallai'r dosbarthiad hwn gael ei reoleiddio gan sawl ffactor, gan gynnwys cytocin milieu mewn TME, statws kinases protein, a newid statws metabolig.

Cytocinau a'u rôl mewn CD8 ynghyd â ymdreiddiad celloedd T i diwmor

Mae cytocinau yn grŵp o broteinau cyfriniol bach a wneir gan wahanol fathau o gelloedd, gan gynnwys celloedd imiwn a thiwmor. Mae cytocinau yn rheoleiddwyr hanfodol o blastigrwydd TME ac mae ganddynt rôl arwyddocaol mewn swyddogaeth ymdreiddiad ac effeithydd CD8 ynghyd â cell T (Tabl 1). Mae IL-2 yn rheoleiddio actifadu ac amlhau celloedd T CD8 ynghyd â T ac yn ysgogi ymatebion gwrth-tiwmor CD8 ynghyd â gell T [38].

Mae hefyd yn synergeiddio ag IL-12 ac IFN- yn y swyddogaeth sytotocsig ychwanegol o CD8 a chelloedd T sy'n ymdreiddio tiwmor [39]. Mewn cyferbyniad â'r cytocinau hyn, mae sawl cytocinau eraill, gan gynnwys IL-10 ac IL-35, yn atal swyddogaeth gwrth-tiwmor celloedd CD8 a chelloedd T sy'n ymdreiddio â thiwmor [40]. Mae IL-10 yn cytocin gwrthimiwnedd sy'n effeithio ar CD8 ynghyd ag adweithio tiwmor cell T yn bennaf trwy dymheru cynhyrchu IFN [41]. Mae IL-10 ac IL-35 yn cael eu rhyddhau gan Tregs ac yn dadreoleiddio proteinau cyd-ataliol, megis mynegiant PD-1, PD-L1, a CTLA{-4 ar CD8 sy'n ymdreiddio i diwmorau ynghyd â chelloedd T. Mae moleciwlau cyd-ataliol celloedd T yn hyrwyddo camweithrediad mewn actifadu celloedd T, ehangu, swyddogaeth effeithydd, a goroesiad. Mae'r rhwydwaith cyfun o broteinau cyd-ataliol IL-10 ac IL{-35 yn atal swyddogaeth yr effeithydd ac yn achosi blinder mewn celloedd CD8 a chelloedd T sy'n ymdreiddio â thiwmor [40]. Yn ogystal â rhyddhau IL-10 ac IL-35, mae Tregs hefyd yn rhyngweithio â CD11c a DCs ac yn lleihau actifadu ac ehangu celloedd CD8 ynghyd â T yn y tiwmor. Dangosodd astudiaethau diweddar fod disbyddiad Tregs yn PDAC yn cynyddu ymdreiddiad IFN{- -cynhyrchu celloedd CD8 a T sytotocsig i mewn i'r tiwmor [42]. Mae cytocin hanfodol arall, trawsnewid ffactor twf-beta (TGF-), hefyd yn cael rolau mewn twf tiwmor / goroesi ac imiwnedd lletyol. Mae TGF- yn cymell gwrthimiwnedd yn y gwesteiwr ac yn helpu'r tiwmor i ddianc o'r system imiwnedd [43]. Felly, adroddwyd bod TGF- gwanhau yn hyrwyddo CD8 ynghyd ag ymatebion gwrth-tiwmor cell T [43].

Yn yr un modd, dangosodd astudiaeth mewn model murine o PDAC fod trosglwyddo mabwysiadol TGF-ansensitif CD8 ynghyd â chelloedd T yn achosi atchweliad tiwmor [44]. Mae IL-4 ac IL-12 yn yr un modd yn effeithio'n andwyol ar swyddogaeth effeithydd cell CD8 ynghyd â T trwy ddylanwadu ar ehangu CD8 ynghyd â Tregs gyda Foxp3−IL-10 ynghyd â ffenoteip [45]. Adroddir bod ffactor necrosis tiwmor alffa (TNF- ) a ryddhawyd gan ganser a chelloedd stromal yn achosi apoptosis mewn celloedd CD8 ynghyd â T tiwmor sy'n ymdreiddio i mewn [46].

Ochr yn ochr â sytocinau gwrthimiwnedd, mewn TME, mae cytocinau gwrthlidiol yn bresennol sy'n helpu i adfer swyddogaeth celloedd T sytotocsig CD8 ynghyd â T. Mae'r cytocin pleiotropig, IL-15, yn cael ei gyfrinachu gan wahanol fathau o gelloedd imiwn a di-imiwn ac mae'n gysylltiedig â llid ac imiwnedd amddiffynnol [47]. Mae IL{5}} yn cymell NK, NK-T, a chelloedd CD8 sytotocsig ynghyd â T, ac fe'i hystyrir yn ymgeisydd posibl ar gyfer imiwnotherapi canser [48]. Mae rôl IL-15 o ran hybu ymatebion gwrth-tiwmor wedi'i dangos mewn canser yr ofari. Antigen tiwmor ofarïaidd wedi'i lwytho ar DCs dynol aeddfed cytocin, ynghyd â chyfuniad o IL-15 ac atalydd p38, ymatebion cyfryngol CD4 a Th17- a CD8 ynghyd â sytowenwyndra cell T [49].

Mae celloedd cynorthwywyr Th17 yn is-set o gelloedd CD4 ynghyd â T sy'n rhyddhau cytocin proinflammatory, IL-17, sydd hefyd yn cynyddu imiwnedd gwrth-tiwmor. Mewn model canser ofarïaidd, mae IL-17 mewn ymatebion imiwn gwrth-tiwmor a achosir gan TME [49]. Mae IL{5}}, a elwir hefyd yn IFN- -ffactor ysgogi (IGIF), yn cytocin gwrth-tiwmor ac yn hyrwyddo actifadu celloedd T [50]. Mewn modelau tiwmor syngeneig a dyneiddiol, arweiniodd rhwystredigaeth ectoenzyme CD39 at ryddhau IL-18 gweithredol ac ysgogodd ehangu CD8 sy'n ymdreiddio tiwmor ynghyd â chelloedd effeithydd T [51]. Felly, mae diddordeb cynyddol mewn adnabod cytocinau yn y TME i ddeall eu swyddogaethau wrth reoleiddio celloedd CD8 a T sy'n ymdreiddio tiwmoriaid ac y gellid eu defnyddio i newid dynameg TME i adfer effeithiolrwydd gwrth-tiwmor celloedd CD8 ynghyd â T.

Mae gan cytocinau pwysau moleciwlaidd bach, a elwir hefyd yn gemocinau, rôl reoleiddiol mewn mudo celloedd T. Mae mudo cell Effector T yn gam hanfodol ar gyfer ymateb gwrth-tiwmor. Mae cemocinau yn rheoleiddio ymdreiddiad celloedd T yn y TME. Mae'r cysylltiad rhwng ymdreiddiad celloedd T a derbynnydd chemokine CXCR3 a ligandau CXCL9, CXCL10, a CXCL11 wrth recriwtio celloedd CD8 plus T, celloedd Th1, a chelloedd NK wedi'i adrodd mewn tiwmorau [52]. Mae cemocinau a fynegir mewn melanomas yn cynnwys CCL2, CCL3, CCL4, CCL5, CCL19, CCL21, CXCL9, CXCL10, CXCL11, a CXCL13, ac maent yn gysylltiedig ag ymdreiddiad lymffocytau [53]. Yn ddiddorol, mae mynegiant trawsgrifiad CD8 yn gysylltiedig yn dynn â mynegiant uwch CCL2, CCL4, CCL5, CCL19, CCL21, CXCL9, CXCL10, CXCL11, CXCL13, a XCL2 mewn lymffocytau sy'n ymdreiddio i diwmorau melanoma [53].

O ystyried rôl hanfodol cytocinau/cemocinau wrth reoleiddio ymatebion antitumor o gelloedd CD8 a T, mae therapi sy'n seiliedig ar cytocinau wedi'i ddefnyddio mewn canserau amrywiol. Un o'r therapïau cyntaf yn seiliedig ar cytocin mewn canser oedd therapi seiliedig ar IL-2-. Mae triniaeth IL-2 systemig wedi'i defnyddio i ysgogi ymateb imiwn gwrthganser mewn melanoma metastatig a chanser arennol; fodd bynnag, mae triniaeth IL-2 systemig (hy, aldesleukin) yn gysylltiedig â gwenwyndra [54]. Fodd bynnag, dangosodd y dos isel IL-2-deilliad PEGylated IL-2 (hy, NKTR-214) effeithiolrwydd gwrth-tiwmor addawol gyda gwenwyndra derbyniol [54]. Mae'r canlyniadau hyn sy'n dod i'r amlwg yn awgrymu dyfodol therapiwtig addawol ar gyfer therapi canser sy'n seiliedig ar cytocin i wella effeithiau gwrth-tiwmor cell T.

Imiwnotherapiwteg i gryfhau celloedd CD8 a T sy'n ymdreiddio â thiwmor

Mae ymchwil sylweddol wedi canolbwyntio ar ddod o hyd i ddulliau imiwnotherapiwtig i gynyddu ac adfer swyddogaethau celloedd CD8 ynghyd â thiwmor T ar gyfer therapi canser. Mae camweithrediad celloedd T CD8 ynghyd â T yn gymharol gyffredin mewn tiwmorau solet ac, felly, awgrymwyd sawl dull i gynyddu ymdreiddiad celloedd CD8 ynghyd â T ac adfer ei swyddogaethau. Mae rhai o'r dulliau a brofwyd yn cynnwys y defnydd therapiwtig o wrthgyrff atalydd pwynt gwirio (CPI), moleciwlau cyd-symbylol celloedd T, gwrthgyrff agonistaidd, celloedd derbynyddion antigen chimerig (CAR)-T, celloedd T wedi'u trawsgludo gan TCR, a therapi canser sy'n seiliedig ar TIL. Ffigur 3).

Targedu echelin gyd-ataliol celloedd T ar gyfer therapi canser

Adroddir bod mynegiant moleciwlau cyd-ataliol cell T (PD1, PD-L1, a CTLA-4) yn gwanhau actifadu celloedd T, swyddogaethau a goroesiad. Yn bwysig, mae blocâd o'r moleciwlau cydataliol hyn yn ailraglennu swyddogaethau cell T mewn sawl canser [55]. Fodd bynnag, mae gwarchae o'r fath wedi dangos budd cyfyngedig yn erbyn rhai mathau o ganser hematolegol a solet.

Mae'r moleciwlau cyd-ataliol cell T, CTLA-4, a PD1, yn rheolyddion hanfodol goddefgarwch canolog ac ymylol. Mae ehedyddion celloedd T yn tarddu o fêr esgyrn ac yn cael eu datblygu yn y thymws, lle mae celloedd T anaeddfed yn amlhau ac yn cynhyrchu ystod o TCRs oherwydd ailgyfuno segmentau genynnau TCR [56]. Mae'r celloedd T sy'n gallu rhwymo i hunan-antigesau yn cael eu dileu i atal awto-adweithioldeb trwy broses a elwir yn 'goddefgarwch canolog'. Er bod hyn yn ddefnyddiol i atal adweithedd hunanimiwn, nid yw'n addas ar gyfer yr ymateb gwrthganser [57]. Mae CTLA-4 yn ymwneud yn sylweddol â goddefgarwch canolog ac, yn ystod datblygiad celloedd T, mae CTLA-4 yn rheoleiddio celloedd T effeithydd a rheoliadol [58]. Un o'r mecanweithiau y mae CTLA-4 yn ei ddefnyddio i reoleiddio goddefgarwch celloedd T yw trwy gynyddu'r trothwy actifadu celloedd T. Mae'r ymateb imiwn lleiaf sy'n deillio o'r trothwy actifadu cynyddol o gelloedd T yn erbyn hunan-peptid (au) yn ffafriol ar gyfer imiwnedd gwesteiwr [58]. Fodd bynnag, mae swyddogaeth CTLA-4 yn hanfodol ar gyfer homeostasis cell T ac, felly, mae'r mynegiant gorau posibl o CTLA-4 yn bwysig ar gyfer canlyniadau therapiwtig boddhaol. Mae colli CTLA yn enetig-4 yn arwain at amlhau celloedd T heb ei reoli, gan arwain at gymhlethdodau iechyd a hyd yn oed marwolaeth [59].

Mae echel gyd-ataliol cell T arall, PD1/PD-L1, hefyd yn gysylltiedig â rheoleiddio goddefgarwch canolog. Mae'r echel hon yn rheoleiddio trosglwyddiad thymocytes o'r thymig dwbl negatif (DN) i'r cyfnod dwbl positif (CD4 ynghyd â CD8 plws ) celloedd T. Mae'r trawsnewidiad hwn yn cael ei hybu gan golli PD-1, sy'n awgrymu bod PD-1 yn ymwneud â rheoleiddio'r repertoire celloedd T [60]. Mae celloedd T naïf sy'n cael eu rhyddhau o'r thymws i'r organau ymylol, dueg a lymffoid yn rhyngweithio â APCs, gan gyflwyno peptid(au) antigenig tramor neu antigen(au) tiwmor. Weithiau, mae celloedd T naïf yn ymateb yn erbyn hunan-peptidau oherwydd bod rhai TCRs yn cydnabod yr hunan-brotein [61]. Er mwyn atal awto-adweithedd celloedd T o'r fath, mae nifer o foleciwlau cyd-ataliol yn atal actifadu celloedd T, a elwir yn goddefgarwch ymylol [62]. Mae'r moleciwlau cyd-ataliol hyn, gan gynnwys CTLA-4 a PD-1, yn rheoleiddio actifadu celloedd T mewn gwahanol gamau. Mae CTLA-4 a PD-1 yn rheoleiddio ffenoteipiau celloedd CD4 plws a CD8 plws T, yn y drefn honno [59]. Mae CTLA-4 yn rheoleiddio actifadu celloedd T ar gamau cynnar meinweoedd lymffoid, tra bod PD-1 yn rheoleiddio actifadu celloedd T ar gamau actifadu hwyr mewn meinwe ymylol [63].

Adroddir mai un o fecanweithiau goddefgarwch imiwnedd ymylol yw'r rhyngweithio rhwng PD-L1 ar APCs a PD{2}} ar gelloedd T sy'n gwanhau ymateb imiwn celloedd T yn erbyn hunan-antigen(au) [64]. Mae mecanweithiau goddefgarwch ymylol eraill yn cynnwys blinder celloedd T a chynnydd yn y boblogaeth celloedd Treg [65]. Dangosodd triniaeth â gwrthgorff gwrth-CTLA-4 mewn model tiwmor actifadu swyddogaeth celloedd T yr effeithydd, hyrwyddo disbyddiad Treg, a gwella'r ymateb imiwn gwrth-diwmor ac atchweliad tiwmor [66,67]. Er bod CTLA-4 yn disbyddu Tregs yn TME, nid yw gwrth-CTLA-4 yn gysylltiedig â disbyddiad Treg yn y system ymylol. Mae disbyddiad ymylol Tregs hefyd yn gysylltiedig â phresenoldeb y derbynnydd Fc mewn celloedd cynnal. Felly, mae effeithiolrwydd imiwnotherapi gwrth-CTLA yn seiliedig ar wrthgyrff mewn tiwmorau llidus o bosibl yn dibynnu ar rwymo derbynnydd gama Fc (Fc R) [68]. O ystyried rôl reoleiddiol wahaniaethol PD-1 a CTLA-4 mewn goddefgarwch imiwn, awgrymir eu rhwystredigaeth gyfunol i ddarparu ymateb gwrth-tiwmor sylweddol trwy gynyddu cymhareb celloedd imiwnedd yr effeithydd: atalydd [69].

Mae rhwystriad echelin gyd-ataliol celloedd T PD-1/PD-L1 wedi'i dargedu i wella ymdreiddiad celloedd T CD8 ynghyd â thiwmorau ac adfer ymatebion imiwn gwrth-tiwmor [70]. Mae PD-1 yn effeithio'n wahanol ar CD8 ynghyd â swyddogaeth effeithydd celloedd T mewn gwahanol fathau o ganser [71–74]. Er enghraifft, mewn rhai isdeipiau canser y fron, waeth beth fo'r mynegiant PD-1 ar gelloedd CD8 ynghyd â T, nid yw swyddogaeth yr effeithydd wedi'i newid [74]. Mewn cyferbyniad, mewn melanoma, mae presenoldeb PD-1 ar gelloedd CD8 ynghyd â T yn lleihau swyddogaeth effeithydd celloedd T [75,76]. Yn yr un modd, mae blocâd moleciwl cyd-ataliol cell T arall, CTLA-4, yn hyrwyddo atchweliad tiwmor yn effeithiol trwy adfer swyddogaeth cytotocsig celloedd CD8 ynghyd â thiwmor T mewn canserau lluosog [77,78]. Mewn modelau anifeiliaid canser ofarïaidd CT26 ac ID8-VEGF, dangosodd PD-1 rôl reoleiddiol yn swyddogaeth celloedd T Foxp3 ynghyd â Treg a CD8 ynghyd â T, tra bod mynegiant cynyddol CTLA-4 yn gysylltiedig â camweithrediad celloedd effaithydd CD8 ynghyd â T. Cafodd camweithrediadau celloedd T CD8 ynghyd â T, yn enwedig eu lledaeniad a'r priodwedd i ryddhau cytocinau, eu rhwystro'n ddifrifol mewn celloedd PD-1 ynghyd â CTLA-4 plws CD8 plws T o gymharu â naill ai PD-1 a CD8 plus neu CTLA4 plws CD8 plws celloedd T.

Mae'r canlyniadau hyn yn awgrymu bod gorfynegiant cyfun o PD-1 a CTLA-4 ar CD8 ynghyd â chelloedd T yn effeithio'n andwyol ar ymatebion imiwnedd gwrth-tiwmor CD8 ynghyd â gell T yn ystod therapi canser [78]. Mae aelodau'r system imiwnedd gynhenid, DCs a chelloedd NK, ac aelodau'r system imiwnedd addasol, celloedd cynorthwyydd T (CD4 ynghyd ag is-set cell T), yn hwyluso preimio celloedd CD8 ynghyd â T ar gyfer antigen tiwmor. Mae PD-1 a CTLA-4 yn cyfyngu ar CD8 ynghyd â phreimio celloedd T ac, felly, yn cynyddu blinder celloedd CD8 ynghyd â thiwmoriaid T [79]. Yn ogystal, gall PD-1 a CTLA-4 groessiarad â phroteinau eraill i wneud celloedd CD8 a T yn gamweithredol. Mae ffactor twf endothelaidd fasgwlaidd (VEGF) a derbynnydd semafforin, niwropilin-1 (Nrp-1), yn cael eu gorfynegi ar gelloedd CD8 plws T sy'n ymdreiddio â thiwmor ac, ynghyd â PD-1 neu CTLA{{ 22}}, yn effeithio'n andwyol ar swyddogaethau cell T [80]. Mewn canser yr ysgyfaint dynol, mae Nrp-1 yn bresennol ar CD8 a PD-1 ynghyd â chelloedd (hy, Nrp1 a PD-1 ynghyd â chelloedd CD8 a T) ac yn rhyngweithio â semafforin 3A ar gelloedd tiwmor. Arweiniodd rhyngweithio Nrp-1 â semafforin 3A at wanhau CD8 ynghyd â mudo celloedd T a sytowenwyndra. Ym model melanoma B16F10, mae celloedd CD8 plws T, sy'n mynegi Nrp1 a PD-1 (hy, Nrp1 a PD-1 ynghyd â CD8 a mwy) yn bresennol yn y tiwmor ac yn arddangos cyflwr blinedig, fel y dangosir gan uwch. mynegiant GGLl-3, Tim-3, a CTLA-4 [80].

Mae ymdreiddiad celloedd CD8 a T i diwmorau hefyd yn cael ei reoleiddio gan signalau WNT/ -catenin. Mewn melanoma metastatig dynol, mae uwchreoleiddio signalau WNT/ -catenin cynhenid ​​​​yn gysylltiedig ag absenoldeb llofnod genyn cell T [81]. Yn yr un modd, ym model melanoma awtocthonaidd y llygoden, fe wnaeth mwy o signalau tiwmor-gynhenid ​​WNT/ -catenin achosi disbyddiad celloedd T ac ymwrthedd i therapi gwrth-PD-1 neu wrth-CTLA{-4 [81].

Mae'r rhwystr o PD{0}} wedi dangos effeithiolrwydd cyfyngedig yn y clinig ar gyfer rhai mathau o ganser. Felly, bydd deall yn llawn y mecanweithiau moleciwlaidd sy'n cael eu cyfryngu gan atalyddion pwynt gwirio yn caniatáu i strategaethau newydd gael eu datblygu i adfer swyddogaethau celloedd CD8 ynghyd â T. Felly, defnyddiwyd cyfryngau ffarmacolegol eraill i gynyddu effeithiolrwydd atalyddion pwynt gwirio. Er enghraifft, ni ddangosodd gwarchae PD-1 yn unig mewn canser y colon CT26, adenocarcinoma mamari TSA, a modelau llygoden canser y colon MCA38 fuddion therapiwtig sylweddol. Fodd bynnag, dangosodd y driniaeth gyfunol o PD-1 a chwistrelliad intratumoral yr agonist derbynnydd 9 (TLR9) hynod interferometrig tebyg i doll, SD101, ymatebion gwrth-tiwmor mesuradwy gan gelloedd T intratumoral CD8 ynghyd â T [82]. Mewn model llygoden canser pancreatig, roedd TGF- yn y TME yn rhwystro effeithiolrwydd y driniaeth gyfun o gemcitabine a gwrth-PD-1. Fodd bynnag, cynyddodd y driniaeth gyfunol hon gelloedd CD8 sytotocsig intratumoral ynghyd â T a llai o faich tiwmor pan gafodd TGF ei rwystro [83]. Mae Gweinyddiaeth Bwyd a Chyffuriau yr Unol Daleithiau (FDA) wedi cymeradwyo gwrthgyrff ataliol yn erbyn CTLA-4 (hy, Ipilimumab), PD1 (hy, nivolumab, pembrolizumab, a cemiplimab), a PD-L1 (hy, atezolizumab, nivolumab, a durvalumab). Mae Tabl 2 yn rhoi enghreifftiau o dreialon clinigol ar gyfer tiwmorau solet, gan dargedu proteinau cyd-ataliol neu gyd-ysgogol cell T.

Gorludded celloedd T yw camweithrediad neu ddileu corfforol celloedd T mewn ymateb i antigen(au) penodol yn ystod clefydau cronig, gan gynnwys haint firaol a chanser [84]. Mae celloedd T sy'n cael eu blinder yn colli eu gallu amlhau a'u swyddogaethau effeithydd, ac mae eu cof yn cael ei beryglu [85]. Nodweddir celloedd T blinedig gan fynegiant cynyddol o dderbynyddion cyd-ataliol, gan gynnwys PD-1, CTLA-4, genyn actifadu lymffocytau-3 (LAG3; CD223), parth imiwnoglobwlin cell T a mwcin{ {8}} (TIM-3), CD39, CD96, CD160, imiwnoreceptor cell T gyda pharthau Ig ac ITIM (TIGIT), 2B4 (CD244), a attenuator lymffocyt B a T (BTLA) [85].

Mae’n bosibl y bydd y defnydd therapiwtig o atalyddion pwynt gwirio imiwnedd PD-1 a moleciwlau eraill yn gallu ailfywiogi celloedd T wedi disbyddu a darparu budd clinigol i gleifion â malaeneddau amrywiol (Tabl 3) [86–107]. Yn anffodus, nid yw canlyniadau blocâd pwynt gwirio seiliedig ar PD yn effeithiol ar gyfer pob claf, ac nid yw gorludded celloedd T bob amser yn cael ei wrthdroi mewn cleifion â malaeneddau datblygedig [108]. Yn ddiweddar, adroddwyd am TILs tiwmor-adweithiol sydd â nodweddion celloedd cof wedi blino'n lân ynghyd â mynegiant PD-1 a ffactor cell T 1 (Tcf1). Mae PD1 ynghyd â TCf1 ynghyd â TILs yn gysylltiedig ag amlhau a achosir gan imiwnotherapi [109]. Mewn rhai cleifion â chanser, mae mynegiant PD-1 yn uwch ar gelloedd T actifedig a gweithredol CD8 ynghyd â T. Felly, nid yw imiwnotherapi sy'n seiliedig ar wrthgyrff gwrth-PD1 yn effeithiol yn y cleifion hyn i adfywio celloedd T sydd wedi blino'n lân [110].

Ar yr un pryd, dangosodd astudiaeth mewn modelau tiwmor llygoden syngeneig na allai imiwnotherapi seiliedig ar rwystr PD1 adennill PD camweithredol-1 ynghyd â chelloedd CD38 ynghyd â CD8 ynghyd â T [111]. Gallai methiant imiwnotherapi seiliedig ar rwystr pwynt gwirio i ailfywiogi celloedd T blinedig fod yn gysylltiedig â mecanweithiau ymwrthedd cynhenid ​​ac anghynhenid. Mae mecanwaith blinder celloedd T yn wahanol mewn gwahanol ganserau. Er enghraifft, awgrymodd astudiaeth mewn llinellau celloedd melanoma (B16F10), y fron (E0771), a charsinoma'r ysgyfaint (LLC) fod gan bob tiwmor lofnod blinder TIL nodweddiadol a gwahanol [88].

Fel datblygiad ym maes gorludded ac ailfywiogi celloedd T, mae asesiad trwybwn uchel sy'n berthnasol yn ffisiolegol i nodi'r modulatyddion gorludded celloedd T y gellir ei ddefnyddio i sgrinio moleciwlau bach a all wrthdroi blinder celloedd T yn y firws choriomeningitis lymffosytig. model (LCMV) [112]. Credir y gellid defnyddio dull wedi'i resymoli gan ddefnyddio cyfuniad o atalyddion moleciwlaidd bach a phwynt gwirio i adfywio celloedd CD8 plws T wedi'u disbyddu mewn imiwnotherapi canser.

Targedu echelin cyd-symbyliad cell T mewn therapi canser

Yn ogystal â threialon clinigol gydag asiantau gwrth-PD-1 a gwrth-CTLA{-4, mae treialon eraill sy'n targedu proteinau cyd-ysgogol celloedd T yn mynd rhagddynt (Tabl 2). Enghreifftiau o foleciwlau cyd-symbyliad cell-T y gellir eu targedu i adfer swyddogaethau cell-T yw 4-1BB, OX40, CD40, CD27, CD70, cyd-symbylydd cell T anwythol (ICOS), a glucocorticoid a achosir. protein sy'n gysylltiedig â ffactor necrosis tiwmor sy'n gysylltiedig â derbynnydd (GITR) [113-115]. Mae actifadu 4-1BB, aelod o deulu TNFR, yn cynyddu sytowenwyndra celloedd CD8 ynghyd â T trwy anwythiad IFN- [116]. Mae treialon clinigol gyda'r gwrthgyrff monoclonaidd agonistaidd (mAbs) utomilumab (PF-05082566) a sarilumab (BMS-663513) sy'n ysgogi 4-1BB yn mynd rhagddynt ar gyfer canserau lluosog [117]. Er bod treialon clinigol wedi dangos ymatebion gwrth-tiwmor cadarn, gwelwyd gwenwyndra sylweddol hefyd oherwydd rhyngweithiadau Fc R â thargedau amhenodol.

Er mwyn lleihau/goresgyn gwenwyndra annerbyniol 4-1BB agonistic mAbs, defnyddiwyd gwrthgorff agonistig 4-1BB-agonistaidd di-fc wedi'i dargedu a oedd yn sicrhau gwell effeithiolrwydd therapiwtig [118]. Mae OX40 yn foleciwl cyd-ysgogol cell T arall ar wyneb celloedd T wedi'u actifadu. Mae'r rhyngweithio rhwng OX40 a'i ligand, OX40L, yn hyrwyddo ehangu celloedd T ac ataliad Treg i gynyddu ymatebion antitumor [119]. O ystyried rôl ganolog OX40 wrth reoleiddio swyddogaeth effeithydd celloedd T CD8 ynghyd â T, mae mAb agonistaidd gwrth-OX40 o dan dreialon clinigol ar gyfer canser. 4-1Mae mAbs agonistaidd BB ac OX40 hefyd wedi cael eu dangos i adfer camweithrediad celloedd T a achosir gan atalydd MEK [120]. Mae echel cyd-symbyliad cell T arall, CD40LCD40, hefyd wedi'i adrodd yn cefnogi marwolaeth celloedd canser a achosir gan atalydd MEK mewn modelau anifeiliaid. Yn y model anifail canser pancreatig mutant a yrrir gan KRas, dangosodd cyfuniad o atalydd MEK a gwrth-CD40 mAb agonistaidd ymatebion gwrth-tiwmor cadarn [121]. Mae echelin CD27-CD70 hefyd yn bwysig mewn actifadu celloedd T, ac adroddir mynegiant cynyddol o CD70 a CD27 mewn canserau hematolegol a solet [113,122].

Mewn canser thyroid papilari, canfuwyd mynegiant CD70 ar gelloedd tiwmor, tra bod mynegiant y derbynnydd CD70, CD27, yn bennaf ar lymffocytau intratumoral [123]. Mae GITR yn foleciwl cyd-ysgogol arall sy'n cymryd rhan mewn actifadu celloedd T. Cynyddodd ataliad cyfunol PD-1 a GITR yn synergyddol ymdreiddiad tiwmor celloedd T ac ymatebion gwrth-diwmor gwydn gan CD8 ynghyd â chelloedd T [124]. Mae ICOS yn foleciwl cyd-ysgogol ychwanegol sy'n bresennol mewn celloedd T actifedig ac mae hefyd wedi'i dargedu mewn canser [125]. Yn ddiddorol, dangosodd y defnydd cyfunol o ataliad ICOS aptamer a CTLA{-4 ymatebion antitumor cryf gan gelloedd T sytotocsig [126]. O ystyried pwysigrwydd moleciwlau cyd-symbyliad celloedd T mewn imiwnotherapi canser, mae ymchwil ar-imiwnoleg gyfredol wedi canolbwyntio ar ddod o hyd i therapiwteg newydd i sbarduno llwybrau cyd-symbyliad celloedd T.

Mae nifer o astudiaethau cyn-glinigol a threialon clinigol ar y gweill i brofi effeithiolrwydd therapiwtig derbynyddion imiwnedd cyd-ataliol neu symbylol. Fodd bynnag, hyd yn hyn, dim ond gwrth-PD1/PD-L1 a gwrth-CTLA-4 imiwnotherapi canser sy'n seiliedig ar wrthgyrff y mae'r FDA wedi'i gymeradwyo at ddefnydd clinigol mewn rhai malaeneddau datblygedig. Nid yw'r rhan fwyaf o'r asiantau imiwnotherapiwtig sy'n targedu moleciwlau symbylol wedi'u cymeradwyo'n glinigol eto. Gallai fod sawl rheswm dros yr oedi wrth ddefnyddio gwrthgyrff agonistaidd mewn clinigau, gan gynnwys fformat gwrthgyrff deufalent traddodiadol a moleciwlau cyd-ysgogol ar Tregs [127].

Yn y fformat gwrthgyrff deufalent traddodiadol, mae derbynyddion gama Fc gwahaniaethol (Fc R) yn bryder mawr. Mae Fc R yn rheoleiddio actifadu celloedd effaithydd T a achosir gan wrthgyrff ac ymateb antitumor [127]. Er enghraifft, mae cyflawni gweithgaredd antitumor 4-1gwrthgorff agonistaidd BB yn gofyn am ddihysbyddiad Treg sy'n ddibynnol ar Fc ac agoniaeth Fc R-annibynnol 4-1BB agoniaeth [128]. Un o'r prif resymau dros fethiant gwrthgyrff agonistaidd yn erbyn moleciwlau cyd-ysgogol yw bod Tregs yn mynegi sawl moleciwlau cyd-ysgogol [128]. Mae'n bosibl y gallai gwrthgyrff agonistaidd cyd-symbyliad fod yn opsiwn therapiwtig effeithiol mewn canser; fodd bynnag, bydd angen dealltwriaeth fecanistig fanwl ar gyfer eu cymhwysiad clinigol.

Therapi celloedd CAR-T mewn canser

Mae trosglwyddiad mabwysiadol celloedd T peirianyddol wedi dangos manteision clinigol i rai cleifion â chanser. Mewn canser hematolegol, mae trosglwyddiad mabwysiadol lymffocytau cytotocsig sy'n targedu celloedd tiwmor wedi bod yn llwyddiannus [129]. Gellir trin TCRs i wella eu goroesiad a'u swyddogaeth effaith. Felly, mae celloedd CAR-T sy'n dwyn penodoldeb yn erbyn antigenau tiwmor wedi'u datblygu ac wedi dangos canlyniadau addawol mewn canserau hematolegol. Fodd bynnag, mae celloedd CAR-T i drin canserau solet yn dal i fod yn y camau cynnar, heb unrhyw lwyddiant hyd yn hyn. Y prif reswm dros eu methiant yn erbyn tiwmorau solet yw bod yr amgylchedd gwrthimiwnedd o fewn TME yn ffafrio twf tiwmor trwy hyrwyddo camweithrediad celloedd T CD8 ynghyd â T. Mae celloedd CAR-T yn TME yn cael eu gwthio i ddod yn foleciwlau arwyneb cyd-ataliol cell T anweithredol a mynegiannol [130,131]. Felly, mae ymdrechion hefyd yn cael eu gwneud i wella trosglwyddiad mabwysiadol TILs sy'n targedu neoantigens mewn amrywiol falaeneddau [132].

Credir bod y rhesymau eraill dros fethiant therapi celloedd CAR-T mewn tiwmorau solet yn cynnwys cydrannau desmoplastig (hy, meinwe ffibrog neu gysylltiol), sy'n atal celloedd CAR-T rhag mynd i mewn i diwmorau. Adroddwyd bod hypothermia ysgafn yn dileu uniondeb desmoplastig mewn tiwmorau. Arweiniodd cynnwys hyperthermia ysgafn a therapi celloedd CAR-T at fwy o ymdreiddiad celloedd T i diwmorau melanoma dynol [133]. Yn debyg i hypothermia ysgafn, mae cytocinau, ac asiantau cemotherapiwtig hefyd wedi'u defnyddio i wella ymdreiddiad celloedd CAR-T o diwmorau amrywiol.

Er enghraifft, roedd triniaeth gyfunol o IL-12 â'r asiant cemotherapiwtig doxorubicin yn gwella ymdreiddiad celloedd CD8 ynghyd â T i diwmorau, gan arwain at effeithiau gwrthganser cadarn [134]. Gallai dull arall o wella effeithiolrwydd therapi celloedd CAR-T mewn canser fod yn ddefnydd cyfunol o gelloedd CAR-T ynghyd â blocâd moleciwlau cyd-ataliol celloedd T. Mae sawl treial clinigol ar gyfer cymhwyso celloedd CAR-T yn unig neu mewn cyfuniad â CPI yn mynd rhagddynt mewn tiwmorau solet. Mae Tabl 4 yn rhoi enghreifftiau o dreialon clinigol o gelloedd CAR-T yn erbyn tiwmorau solet. Mewn sawl treial clinigol CAR-T cyfredol, adroddwyd am effeithiau andwyol oherwydd trosglwyddiad mabwysiadol. Felly, bydd dulliau newydd o ddefnyddio imiwnotherapi celloedd CAR-T gyda llai o effeithiau andwyol yn hanfodol.

Therapi canser gan ddefnyddio celloedd T wedi'u trawsgludo gan TCR

CAR-T cell therapy targets surface molecules of immune cells and cannot target intracellular peptide(s) presented by major histocompatibility complexes (MHCs). Therefore, to target intracellular peptides presented by MHCs, TCR-transduced T cells have been developed [135]. These cells are generated from patient T cells and are designed to encode the TCRαβ protein, which targets tumor or virus-infected cells [136]. The large-scale production of TCR-transduced cells is achieved using semiautomated devices and modular systems [136]. TCR-transduced T cells showed prolonged survival (i.e., >18 mis) ac actifadu hyd yn oed ar ôl yr ail gyfarfod ag antigen(au) [137].

Several tumor antigens have been used to generate TCR-transduced T cells, including trophoblast glycoprotein (TPBG) in renal cancer [138], placenta-specific 1 (PLAC1) in breast cancer [139], nucleophosmin 1 (NPM1) in acute myeloid leukemia (AML) [140], NY-ESO-1 in synovial cell sarcoma, in patients with melanoma and common epithelial tumors [141], and MAGE-A4 in esophageal cancer [142], and effectively demonstrated antitumor responses in preclinical studies. Diffuse intrinsic pontine glioma is a lethal cancer prevalent in children. In >Adroddwyd am 70 y cant o achosion glioma pontine cynhenid ​​gwasgaredig, amnewidiad asid amino o lysin (K) i fethionin (M) ar safle 27 o amrywiad histone 3 3 (H3.3). Yn ddiddorol, cynigiwyd celloedd T a drosglwyddwyd gan TCR yn erbyn peptidau synthetig â threiglad H3.3K27M i drin celloedd HLAA2 ynghyd â H3.3K27M ynghyd â glioma [143]. Mae treialon clinigol ar y gweill i ddilysu effeithiolrwydd therapiwtig therapi canser sy'n seiliedig ar gelloedd T a drosglwyddir gan TCR mewn cleifion â malaeneddau amrywiol, gan gynnwys sarcoma celloedd synofaidd metastatig, melanoma, a chanser esoffagaidd [141,142]. Gyda'i gilydd, mae therapi celloedd T a drosglwyddir gan TCR yn arf therapiwtig pwerus gyda'r potensial i wella ymatebion gwrth-tiwmor trwy gyfrwng celloedd T.

Therapi canser gan ddefnyddio TILs

Mae imiwnotherapïau canser sy'n seiliedig ar gelloedd T CAR a TCR-transduced yn ddefnyddiol i dargedu antigenau arwyneb ac mewngellol; fodd bynnag, mae trosglwyddiad mabwysiadol o TILs wedi'i gynnig a all dargedu antigenau tiwmor yn benodol [144]. Mewn therapi canser sy'n ddibynnol ar TIL, mae'r cam cychwynnol yn cynnwys nodi proteinau treigledig yn y tiwmor. Yna mae'r protein wedi'i dreiglo'n cael ei fewnosod mewn APCs awtologaidd, fel DCs. Mae camau pellach yn cynnwys cyd-ddiwylliant TILs awtologaidd gydag APCs llawn antigen a dewis TILs antigen-benodol. Mae eu hehangu yn dilyn dewis TILs antigen-benodol. Defnyddir y celloedd T estynedig ar gyfer trallwysiad mewn cleifion sy'n rhoi gwaed [132]. Mae effeithiolrwydd imiwnotherapi sy'n seiliedig ar TIL wedi'i werthfawrogi mewn canserau amrywiol, gan gynnwys melanoma metastatig a charsinomâu cysylltiedig â firws papiloma dynol metastatig (HPV), canser yr ofari a chanser y fron [145-148].

Mae nifer o dreialon clinigol ar y gweill i sefydlu effeithiolrwydd gwrth-tiwmor imiwnotherapi canser sy'n seiliedig ar TIL yn unig neu mewn cyfuniad ag asiantau gwrthganser eraill mewn cleifion â malaeneddau gwahanol, gan gynnwys carsinoma celloedd cennog metastatig y pen a'r gwddf (IDNCT03083873), carsinoma ceg y groth (IDNCT03108495), canser yr ofari. , canser thyroid anaplastig, osteosarcoma, neu sarcomas esgyrn a meinwe meddal arall (IDNCT03449108). Gyda'i gilydd, mae gan therapi canser sy'n seiliedig ar TIL y potensial i drin cam datblygedig amrywiol falaenau solet na ellir eu trin.

Modulators sy'n dod i'r amlwg o CD8 ynghyd â swyddogaeth cell T

Rōl kinases protein mewn CD8 ynghyd ag ymdreiddiad tiwmorau mewn celloedd T

Mae swyddogaeth effeithydd celloedd T CD8 ynghyd â T yn cael ei reoleiddio gan amrywiol ffactorau, megis derbynyddion antigen, moleciwlau cyd-ysgogol, cytocinau, a chinasau protein [149]. Yn ddiddorol, adroddwyd bod sawl MAPK i fyny'r afon wedi'u treiglo neu eu huwchreoleiddio mewn canserau lluosog [77,150,151]. Fodd bynnag, nid yw ymdrechion i atal MAPKs i fyny'r afon ac i lawr yr afon wedi bod yn llwyddiannus oherwydd ymwrthedd i gyffuriau dilynol a'u heffaith ar atal y compartment imiwnedd. Y prif reswm dros fethiant atalyddion MAPK yw diffyg dealltwriaeth o effeithiau ataliad MAPK ar CD8 ynghyd â swyddogaeth celloedd T a goroesiad. Mae sawl enghraifft yn awgrymu y bydd deall rolau kinases protein mewn bioleg celloedd T yn helpu i strategaethu ymatebion gwrth-tiwmor cynyddol, efallai gydag asiant(ion) ychwanegol. Er enghraifft, mae antigen sy'n gysylltiedig â swyddogaeth lymffocyt yn cyfryngu actifadu celloedd T trwy signalau ERK1/2 ar ymgysylltiad TCR [152].

Ar ben hynny, mae ligation moleciwl adlyniad rhynggellog-1 (ICAM-1) â LFA-1 yn cynyddu signalau ERK1/2 i wella actifadu celloedd T CD8 ynghyd â T [152]. Mae gan Jun N-terminal kinase (JNK), MAPK, rôl baradocsaidd wrth reoleiddio celloedd T CD4 plus a CD8 plus [153]. Dangosodd astudiaeth in vivo gan ddefnyddio B16, llinell gell melanoma, ac EL-4, llinell gell lymffoma, fod llygod cnwd JNK yn agored i dwf tiwmor, yn benodol oherwydd CD8 ynghyd â chamweithrediad celloedd T [ 153]. Mae treigladau yn y proto-oncogene BRAF, sef serine/threonine kinase, yn chwarae rhan hanfodol mewn oncogenesis. Dangosodd astudiaeth fod celloedd melanoma a gafodd eu trin yn y tymor byr (3-7 diwrnod) ag atalydd BRAF yn cael eu cydnabod yn effeithlon gan gelloedd CD8 a TIL awtologaidd (TILs). Fodd bynnag, roedd celloedd melanoma a gafodd eu trin yn y tymor hir (14-21 diwrnod) ag atalydd BRAF yn cael eu cydnabod yn wan gan gelloedd CD8 a TIL awtologaidd (TILs). Mae'r canlyniadau hyn yn awgrymu bod ataliad BRAF yn modiwleiddio mynegiant antigen tiwmor yn wahaniaethol ac yn cyfryngu ymwrthedd tiwmor, efallai trwy leihau CD8 swyddogaethol ynghyd â chelloedd T [154]. Dangosodd astudiaeth arall gan ddefnyddio atalyddion BRAF a MEK (dabrafenib a trametinib, yn y drefn honno) effaith wahaniaethol ar gelloedd T CD8 ynghyd â T [77]. Triniaeth Dabrafenib mewn celloedd T a weithredir gan bobl (in vitro), a ysgogwyd gan ffosfforyleiddiad ERK (hy, activation), ac nid oedd yn atal swyddogaeth celloedd T CD8 ynghyd â T.

Fodd bynnag, gostyngodd triniaeth trametinib ffosfforyleiddiad ERK, amlhau celloedd T, a mynegiant cytocin [77]. Fodd bynnag, cynyddodd cyfuno trametinib ag atalyddion pwynt gwirio ar gyfer PD-1 neu CTLA-4 ymdreiddiad celloedd T8 ynghyd â T a hyrwyddo ymateb antitumor cadarn mewn model tiwmor CT26 [77]. Adroddir hefyd bod actifadu celloedd T yn cymell signalau i lawr yr afon wedi'u cyfryngu gan brotein tyrosine kinase TCR-ZAP, sy'n rheoleiddio symudedd celloedd T, adlyniad, a chynhyrchu cytocin. Mae Rasal1, protein sy'n ysgogi GTPase, yn clymu â'r protein rhwymo TCR-ZAP{-70 ac yn atal y llwybr Ras-ERK, actifadu celloedd T, ac ymatebion gwrth-tiwmor [155]. Mynegir Rasal1 ar gelloedd T wedi'u actifadu, ac mae ei grynodiad wedi'i achosi gan CD8 ynghyd â ymdreiddiad celloedd T mewn tiwmorau lymffoma melanoma B16 ac EL [155]. Ar ôl actifadu wedi'i gyfryngu gan TCR, dangosodd CD8 a chelloedd T sy'n ymdreiddio â thiwmor lai o fynegiant o ERK a'r protein tyrosine kinase, ITK. Fodd bynnag, mewn celloedd CD8 plws T splenig, nid oedd unrhyw newidiadau o'r fath mewn mynegiant ERK ac ITK kinase, sy'n awgrymu bod kinases ERK ac ITK yn cael eu rheoleiddio'n wahaniaethol mewn celloedd CD8 ynghyd â thiwmor sy'n ymdreiddio â thiwmor [156]. Gall Sorafenib, atalydd multikinase a therapi llinell gyntaf ar gyfer carcinoma hepatogellog (HCC), ddarparu budd cyfyngedig i gleifion â HCC. Roedd llwyddiant triniaeth sorafenib yn gysylltiedig â statws activation ERK yn HCC [157].

Dangosodd y dadansoddiadau o samplau HCC dynol a llygoden a gafodd eu trin â sorafenib ddau ffenoteip heterogenaidd o ERK gweithredol a PD-1 o fewn yr un tiwmor. Y ffenoteip cyntaf oedd pERKlowPD-1 plws , lle roedd ymdreiddiad tiwmor o gelloedd CD8 a T yn uchel iawn ac roedd gan y celloedd CD8 plws T hyn fynegiant uwch o PD{4}}. Mynegiad isel o PD1 oedd gan yr ail ffenoteip, pERKhighPD-1−. Yn ddiddorol, dangosodd y ffenoteip pERKlowPD-1 ynghyd â chyfraddau goroesi cyffredinol a di-glefyd o gymharu â ffenoteip pERKhighPD-1--. Yn bwysig, roedd gan y ffenoteip pERKhighPD-1− gelloedd CD8 plws T gyda mynegiant isel o PD-1, sy'n awgrymu bod statws PD-1 ar gelloedd CD8 a T sy'n ymdreiddio â thiwmor yn ffactor penderfynol. am ymatebion antitumor [158]. Mae MAP2K (neu MEK) yn rheolydd i fyny'r afon o MAPK. Ataliad wedi'i dargedu o ataliad tiwmor a achosir gan MEK a hyd oes cynyddol ac ymdreiddiad celloedd CD8 a T; fodd bynnag, roedd ataliad MEK yn gwanhau preimio celloedd T mewn nodau lymff [151]. Mewn model tiwmor CT26 mewn llygod BALB / c, dangosodd therapi cyfun o gwrth-PD-L1 gydag atalydd MEK effeithiolrwydd antitumor cadarn a gwydn, gan gynnwys rhyddhad cyflawn o diwmorau mewn rhai llygod [151]. Mae gan aelod arall o'r teulu MAP3K, Mixed Lineage Kinase-3 (MLK3), rôl baradocsaidd wrth reoleiddio marwolaeth celloedd canser [159] ac mae'n atal actifadu celloedd T a sytowenwyndra [160].

Gan ddefnyddio llinell gell canser y fron murine, model xenograft 4T1 mewn llygod Balb / c, dangoswyd bod ataliad MLK3 yn achosi ymdreiddiad tiwmor o gelloedd CD8 sytotocsig ynghyd â T [160]. Mae ataliad MLK3 hefyd yn cynyddu mynegiant CD70 ar gelloedd CD8 ynghyd â T, sy'n gysylltiedig â mwy o apoptosis o'r celloedd hyn [161]. Yn ddiddorol, mewn model in vivo TNBC, roedd triniaeth gyfunol ag atalydd ffarmacolegol MLK3 ac antagonist CD70 yn hyrwyddo goroesiad cell CD8 ynghyd â T, ymdreiddiad tiwmor, ac effeithiolrwydd antitumor [161]. Mae MAP4K4 hefyd yn rheolydd MAPKs i fyny'r afon. Roedd mynegiant uwch-reoledig MAP4K4 yn atal LFA-1 yn ystod actifadu celloedd T, tra bod abladiad o MAP4K4 wedi cynyddu mynegiant LFA-1 ar CD8 a chelloedd T. Roedd y mynegiant LFA cynyddol-1 ar gelloedd T yn gysylltiedig â mwy o ryngweithio celloedd T ag APCs, a gynyddodd swyddogaeth effeithydd celloedd T CD8 ynghyd â T [162].

Mae aelod o'r teulu derbynnydd tyrosine kinase (RTK), derbynnydd ffactor twf epidermaidd (EGFR), yn cael ei or-ddweud mewn celloedd canser epithelial. Dangosodd astudiaeth a gynhaliwyd i ddeall sut mae atalyddion tyrosine kinase EGFR (TKIs) yn dylanwadu ar MHC-I sylweddol mewn celloedd NSCLC fod atal EGFR yn NSCLC yn cynyddu mynegiant genynnau a phrotein arwyneb MHC-I. Mae celloedd T yn adnabod antigenau tiwmor a gyflwynir gan y moleciwl MHC-I ar APCs ac yn darparu ymateb antitumor. Roedd yr atalydd ERK-MEK, trametinib, yn gallu cynyddu MHC-I, tra bod yr atalydd phosphatidylinositol 3-kinase buparlisib yn analluog i ysgogi mynegiant MHC-I yn NSCLC. Mae'r canlyniadau hyn yn awgrymu bod ataliad MEKERK yn cymell mynegiant MHC-I a weithredir gan EGFR [163].

Mae llwybr signalau Janus kinase / transducers signal ac ysgogwyr trawsgrifio (JAK / STAT) yn rheoleiddio ystod o sytocinau a ffactorau twf. Fodd bynnag, ni ddangosodd atalyddion JAK2 yn TNBC unrhyw effeithiolrwydd, efallai oherwydd bod celloedd TNBC wedi caffael ymwrthedd i gyffuriau trwy gyfryngu â ffactor twf sy'n deillio o blatennau (PDGFR). Er mwyn goresgyn methiant yr atalydd JAK2 fel asiant sengl, cynyddodd therapi cyfuniad triphlyg gydag atalyddion PDGFR, JAK2, a MEK1/2 yn sylweddol CD8 ynghyd â chelloedd T sy'n ymdreiddio â thiwmor [164]. Mae llwybr JAK/STAT yn cael ei wanhau gan SH sy'n anwythol i cytocin sy'n cynnwys protein (CISH) [165]. Roedd is-reoleiddio mewn signalau JAK/STAT yn ysgogi gweithrediad cyfryngol TCR o gelloedd CD8 a chelloedd T sy'n ymdreiddio tiwmor [165,166]. Yn ddiddorol, mae sefydlu CISH yn ymwneud â datblygu ffactor ysgogi cytrefi granulocyte-macrophage (GM-CSF) - wedi'i gyfryngu, ac actifadu celloedd T sytotocsig wedi'i gyfryngu gan DC [165]. Felly, mae'n amlwg bod gan kinases protein rôl hanfodol yn CD8 ynghyd â ymdreiddiad tiwmor cell T, goroesiad, ac ymatebion antitumor. Felly, gallai dealltwriaeth gywir o kinases protein arwain at reoli gwahanol fathau o ganser.

For more information:1950477648nn@gmail.com