Mae Brechlynnau'n Cael Imiwnedd Cellog Traws-adweithiol Iawn i'r Amrywyn Omicron SARS-CoV-2

Cyswllt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-bost:audrey.hu@wecistanche.com

Jinyan Liu1*, Abishek Chandrashekar1*, Daniel Sellers1*, Julia Barrett1, Michelle Lifton1, Katherine McMahan1, Michaela Sciacca1,

Haley VanWyk1, Cindy Wu1, Jingyou Yu1, Ai-ris Y. Collier1, Dan H. Barouch1,2*

1 Canolfan Feddygol Diacones Beth Israel, Boston, MA, UDA;

2 Ragon Institute of MGH, MIT, a Harvard, Caergrawnt, MA, UDA

Dangoswyd bod yr amrywiad hynod dreigledig SARS-CoV-2 Omicron (B.1.1.529) yn osgoi ffracsiwn sylweddol o niwtraleiddio ymatebion gwrthgyrff a achosir gan frechlynnau cyfredol sy'n amgodio imiwnogen Spike WA1/20201, gan arwain at fwy o heintiau arloesol a llai o effeithiolrwydd brechlynnau. Mae ymatebion imiwn cellog, yn enwedig CD8 ynghyd ag ymatebion celloedd T, yn debygol o fod yn hollbwysig ar gyfer amddiffyniad rhag clefyd SARS-CoV-2 difrifol2-6. Yma rydym yn dangos bod imiwnedd cellog a achosir gan frechlynnau SARS-CoV-2 cyfredol yn draws-adweithiol iawn yn erbyn yr amrywiad SARS-CoV-2 Omicron. Dangosodd unigolion a dderbyniodd frechlynnau Ad26.COV2.S neu BNT162b2 ymatebion celloedd parhaol CD8 plus a CD4 plus T a ddangosodd groes-adweithedd helaeth yn erbyn amrywiadau Delta ac Omicron, gan gynnwys mewn isboblogaethau cellog cof canolog ac effeithydd. Ymatebion canolrifol CD8 a T celloedd T a oedd yn benodol i Omicron oedd 82-84 y cant o ymatebion cell WA1/2020-penodol CD8 plws T. Mae'r data hyn yn awgrymu y gallai brechlynnau cyfredol ddarparu amddiffyniad sylweddol rhag afiechyd difrifol gyda'r amrywiad SARS-CoV-2 Omicron er gwaethaf y gostyngiad sylweddol mewn niwtraleiddio ymatebion gwrthgyrff.

buddion iechyd cistanche: gwella imiwnedd

Mae astudiaethau diweddar wedi dangos bod gwrthgyrff niwtraleiddio sy'n deillio o frechlyn (NAbs) yn cael eu lleihau'n sylweddol i'r amrywiad Omicron SARS-CoV sydd wedi'i dreiglo'n fawr, gan arwain at ymlediad byd-eang cyflym, gan gynnwys heintiau arloesol mewn unigolion sydd wedi'u brechu'n llawn1. Er mwyn gwerthuso traws-adweithedd ymatebion imiwn cellog a ddeilliodd o frechlyn yn erbyn yr amrywiad SARS-CoV-2 Omicron, fe wnaethom asesu ymatebion celloedd T CD8 a mwy a CD4 plws mewn 51 o unigolion a gafodd eu brechu â'r Ad26 yn seiliedig ar fector adenovirws. Brechlyn COV2.S7 (Johnson & Johnson; N=20) neu'r brechlyn BNT162b2 sy'n seiliedig ar mRNA8 (Pfizer; N=31).

Yn dilyn brechiad BNT162b2, gwelsom ymatebion WA1/2020-NAb penodol uchel ym mis 1, wedi'i ddilyn gan ostyngiad sydyn erbyn mis 8, fel y disgwyliwyd9,10 (Ffig. 1a). Yn dilyn brechiad Ad26.COV2.S, cafwyd ymatebion sylweddol is cychwynnol WA1/{2NAb penodol ym mis 1, ond roedd yr ymatebion hyn yn fwy parhaol ac yn parhau ym misoedd 89,11 (Ffig. 1a). Fodd bynnag, ychydig iawn o NAbs traws-adweithiol penodol i Omicron a welwyd ar gyfer y ddau frechlyn (Ffig. 1a), yn gyson â data diweddar yn absenoldeb hwb ychwanegol1. Aseswyd ymatebion gwrthgorff rhwymol parth derbynnydd (RBD)-benodol gan ELISA a dangoswyd tueddiadau tebyg, gydag ychydig iawn o wrthgyrff rhwymo Omicron-benodol traws-adweithiol (Ffig. 1b). Mewn cyferbyniad ag ymatebion gwrthgorff, aseswyd ymatebion imiwn cellog Spike-benodol gan Dangosodd profion peptid cyfun IFN-g ELISPOT groes-adweithedd sylweddol i Omicron (Data Estynedig Ffig. 1). Y tro nesaf fe wnaethom asesu ymatebion celloedd T CD8 a mwy Spike-benodol trwy brofion staenio cytocin mewngellol. Ad26.COV2.S canolrif ysgogedig Spike-benodol IFN-g CD8 ynghyd ag ymatebion cell T o 0.061 y cant , 0.062 y cant , a {{ 72}}.051 y cant yn erbyn WA1/2020, Delta, ac Omicron, yn y drefn honno, ym mis 8 yn dilyn y brechiad (Ffig. 2a). BNT162b2 canolrif ysgogedig Spike-benodol IFN-g CD8 ac ymatebion cell T o 0.028 y cant a 0.023 y cant yn erbyn WA1/2020 ac Omicron, yn y drefn honno, ym mis 8 yn dilyn brechiad (Ffig. 2a). Mae'r data hyn yn awgrymu bod ymatebion celloedd CD8 plws T penodol i Omicron 82-84 y cant yn draws-adweithiol gydag ymatebion cell WA1/2020-CD8 a T penodol. Roedd ymatebion cell IFN-g CD4 ynghyd â T Spike-benodol a gafwyd gan Ad26.COV2.S yn ganolrif o 0.026 y cant, 0.030 y cant, a 0.029 y cant yn erbyn WA1/2020, Delta, ac Omicron, yn y drefn honno, a chan BNT162b2 yn ganolrif o 0.033 y cant a 0.027 y cant yn erbyn WA1/2020 ac Omicron, yn y drefn honno, gan nodi traws-adweithedd sylweddol o CD4 ynghyd ag ymatebion celloedd T hefyd (Ffig. 2b). Sylweddolwyd traws-adweithedd Omicron sylweddol hefyd ar gyfer Spike-benodol TNF-a ac IL-2 secretu CD8 plus a CD4 ynghyd ag ymatebion celloedd T (Data Estynedig Ffig. 2).

Dangosodd dadansoddiad atchweliad llinol fod ymatebion cell CD8 ynghyd â T penodol i Omicron yn cydberthyn ag ymatebion celloedd CD8 plws T penodol WA1/2020- ar gyfer y brechlyn Ad26.COV2.S ar gyfer y ddau bwynt amser (R=0.78, P<0.0001, slope="" 0.75)="" and="" the="" bnt162b2="" vaccine="" (r="0.56,"><0.0001, slope="" 0.81),="" although="" two="" individuals="" had="" undetectable="" omicron-specific="" cd8+="" t="" cell="" responses="" following="" bnt162b2="" vaccination="" (fig.="" 3a).="" similarly,="" omicron-specific="" cd4+="" t="" cell="" responses="" correlated="" with="" wa1/2020-specific="" cd4+="" t="" cell="" responses="" for="" both="" the="" ad26.cov2.s="" vaccine="" (r="0.79,"><0.0001, slope="" 0.83)="" and="" the="" bnt162b2="" vaccine="" (r="0.90,"><0.0001, slope="" 0.88)="" (fig.3b).="" spike-specific="" ifn-g="" cd8+="" and="" cd4+="" t="" cell="" central="" memory="" and="" effector="" memory="" subpopulations="" elicited="" by="" ad26.cov2.s="" also="" showed="" extensive="" cross-reactivity="" to="" delta="" and="" omicron.="" at="" month="" 8,="" cd8+="" central="" memory="" responses="" were="" 0.076%,="" 0.054%,="" and="" 0.075%,="" cd8+="" effector="" memory="" responses="" were="" 0.168%,="" 0.143%,="" and="" 0.146%,="" cd4+="" central="" memory="" responses="" were="" 0.030%,="" 0.035%,="" and="" 0.038%,="" and="" cd4+="" effector="" memory="" responses="" were="" 0.102%,="" 0.094%,="" and="" 0.083%,="" against="" wa1/202,="" delta,="" and="" omicron,="" respectively="" (fig.="">

Mae ein data yn dangos bod Ad26.COV2.S a BNT162b2 yn ennyn imiwnedd cellog traws-adweithiol yn fras yn erbyn amrywiadau SARS-CoV-2 gan gynnwys Omicron. Mae cysondeb yr arsylwadau hyn ar draws dwy dechnoleg platfform brechlyn gwahanol (fector firaol ac mRNA) yn awgrymu cyffredinoli'r canfyddiadau hyn. Mae traws-adweithedd helaeth ymatebion celloedd T CD8 plus a CD4 plws penodol i Omicron yn cyferbynnu'n fawr â'r ymatebion gwrthgyrff niwtraleiddio a rhwymol sy'n benodol i Omicron sy'n lleihau'n sylweddol. Mae'r data hyn yn gyson ag astudiaethau blaenorol sy'n dangos mwy o draws-adweithedd o ymatebion imiwn cellog a achosir gan frechlyn o'i gymharu ag ymatebion imiwn humoral yn erbyn amrywiadau SARS-CoV-2 Alpha, Beta, a Gamma12. Mae'r 82-84 y cant o draws-adweithedd o CD8 ynghyd ag ymatebion celloedd T i Omicron yn gyson â rhagfynegiadau damcaniaethol yn seiliedig ar dreigladau Omicron6.

Mae astudiaethau rhag-glinigol wedi dangos bod celloedd CD8 a T yn cyfrannu at amddiffyniad rhag SARS-CoV-2 mewn macaques rhesws, yn enwedig pan nad yw ymatebion gwrthgyrff yn optimaidd5. Mae ymatebion celloedd T CD8 plws a CD4 plws gwydn hefyd wedi'u hadrodd yn dilyn haint a brechu2- 4,6,9,11,13,14. O ystyried rôl celloedd CD8 ynghyd â T wrth glirio heintiau firaol, mae'n debygol bod imiwnedd cellog yn cyfrannu'n sylweddol at amddiffyniad brechlyn rhag clefyd SARS-CoV-2 difrifol. Gall hyn fod yn arbennig o berthnasol i Omicron, sy'n osgoi cyfran sylweddol o ymatebion gwrthgyrff. Mae ein data yn awgrymu y gallai brechlynnau presennol ddarparu amddiffyniad sylweddol rhag afiechyd difrifol oherwydd yr amrywiad SARS-CoV-2 Omicron er gwaethaf llai o niwtraleiddio ymatebion gwrthgyrff a mwy o heintiau arloesol.

powdr cistanche

Dulliau

Astudiwch y boblogaeth

Cafwyd samplau gan unigolion a gafodd y brechlyn BNT162b2 o fiostorfa sbesimenau Canolfan Feddygol Diacones Beth Israel (BIDMC). Cafwyd samplau gan unigolion a dderbyniodd Ad26.COV2.S o astudiaeth COV1001 (NCT04436276). Cymeradwywyd y ddwy astudiaeth gan fwrdd adolygu sefydliadol BIDMC. Rhoddodd yr holl gyfranogwyr ganiatâd gwybodus. Cafodd unigolion eu heithrio o'r astudiaeth hon os oedd ganddynt hanes o heintiau SARS-CoV- 2, os oeddent wedi derbyn brechlynnau COVID-19 eraill neu wedi derbyn meddyginiaethau gwrthimiwnedd. Assay niwtraleiddio gwrthgyrff pseudofeirws

Defnyddiwyd y ffugfeirysau SARS-CoV sy'n mynegi genyn gohebydd luciferase i fesur gwrthgyrff niwtraleiddio ffug-feirws. Yn gryno, mae'r pecyn yn adeiladu psPAX2 (Rhaglen Adnodd ac Adweithydd AIDS), gohebydd luciferase plasmid pLentiCMV Puro-Luc (Addgene), a spike protein-expressing pcDNA3.1-SARS-CoV{8}} Roedd SΔCT yn cyd- wedi'i drawsnewid i gelloedd HEK293T (ATCC CRL_3216) gyda lipofectamine 2000 (ThermoFisher Scientific). Cynhyrchwyd ffugfeirysau o amrywiadau SARS-CoV-2 trwy ddefnyddio straen WA1/2020 (Wuhan/WIV04/2019, ID derbyn GISAID: EPI_ISL_402124), amrywiad B.1.1.7 (Alpha, ID derbyn GISAID: EPI_ISL_601443), amrywiad B.1.351 (Beta, ID derbyn GISAID: EPI_ISL_712096), B.1.617. 2 (Delta, ID derbyn GISAID: EPI_ISL_2020950), neu B.1.1.529 (Omicron, ID GISAID: EPI_ISL_7358094.2). Casglwyd y supernatants yn cynnwys y firysau ffug-deip 48h ar ôl trawsgludiad; firysau ffug-deip yn cael eu puro trwy hidlo gyda hidlydd 0.{{45-μm. Er mwyn pennu gweithgaredd niwtraleiddio serwm dynol, cafodd celloedd HEK293T-hACE2 eu hadu mewn 96-blatiau meithrin meinwe ffynnon ar ddwysedd o 1.75 × 104 o gelloedd y ffynnon dros nos. Paratowyd gwanediadau cyfresol tri-phlyg o samplau serwm anweithredol â gwres a'u cymysgu â 50 ul o ffugfeirws. Deorwyd y gymysgedd ar 37 gradd am 1 awr cyn ychwanegu at gelloedd HEK293T-hACE2. Ar ôl 48 h, cafodd celloedd eu gosod yn Steady-Glo Luciferase Assay (Promega) yn unol â chyfarwyddiadau'r gwneuthurwr. Diffiniwyd lefelau niwtraliad SARS-CoV-2 fel y gwanhad sampl lle gwelwyd gostyngiad o 50 y cant (NT50) mewn unedau golau cymharol o gymharu â chyfartaledd y ffynhonnau rheoli firws.

Assay immunosorbent-gysylltiedig ag ensymau (ELISA)

SARS-CoV-2 parth rhwymo derbynnydd pigyn (RBD)-benodol gwrthgyrff mewn serwm eu hasesu gan ELISA. 96-cafodd platiau ffynnon eu gorchuddio â 2 ug/mL o SARS-CoV-2 WA1/2020, B.1.617.2 (Delta), B.1.351 (Beta), neu B.1.1.529 (Omicron) protein RBD mewn halwynog byffer ffosffad 1 × Dulbecco (DPBS) a'i ddeor ar 4 gradd dros nos. Ar ôl deori, golchwyd platiau unwaith gyda byffer golchi (0.05 y cant Tween 20 mewn 1 × DPBS) a'u rhwystro â 350 μL o doddiant bloc casein fesul ffynnon am 2 i 3 awr ar dymheredd yr ystafell. Yn dilyn deori, cafodd hydoddiant bloc ei daflu a chafodd platiau eu blotio'n sych. Ychwanegwyd gwanediadau cyfresol o serwm anweithredol â gwres wedi'i wanhau ym mloc Casein at ffynhonnau, a deorwyd platiau am 1 awr ar dymheredd yr ystafell, cyn 3 golchiad arall a deor 1-awr gyda gwanhad o 1:4000 o wrth-. dynol IgG marchruddygl peroxidase (HRP) (Invitrogen, ThermoFisher Scientific) ar dymheredd ystafell yn y tywyllwch. Golchwyd platiau 3 gwaith, ac ychwanegwyd 100 μL o ateb SureBlue Start SeraCare KPL TMB at bob ffynnon; ataliwyd datblygiad plât trwy ychwanegu 100 μL o hydoddiant SeraCare KPL TMB Stop fesul ffynnon. Cofnodwyd yr amsugnedd ar 450 nm, gyda chyfeiriad ar 650 nm, gyda darllenydd microplate VersaMax (Dyfeisiau Moleciwlaidd). Ar gyfer pob sampl, cyfrifwyd titer diweddbwynt ELISA gan ddefnyddio ffit cromlin logistaidd paramedr 4- i gyfrifo'r gwanhad serwm cilyddol sy'n rhoi gwerth amsugnedd cywiredig (450 nm-650 nm) o 0.2. Adroddwyd ar deitlau pwynt terfyn rhyngosod.

dyfyniad cistanche deserticola: gwella imiwnedd

Assay imiwno-fan a'r lle sy'n gysylltiedig ag ensymau (ELISPOT).

Roedd platiau ELISPOT wedi'u gorchuddio â gwrthgorff IFN-monoclonaidd gwrth-ddynol llygoden o MabTech ar 1 µg/wel a'u deor dros nos ar 4 gradd . Golchwyd platiau gyda DPBS a'u rhwystro â chyfryngau R10 (RPMI gyda 10 y cant o FBS anweithredol â gwres gydag 1 y cant o streptomycin penisilin 100x, 1M HEPES, 100mM Sodiwm pyruvate, 200mM L-glutamin, a 0.1 y cant o 55mM y cant o streptomycin). 2-Mercaptoethanol) am 2-4 h ar 37 gradd . Paratowyd peptidau S cyfun SARS-CoV-2 o SARS-CoV-2 WA1/2020, B.1.617.2 (Delta), neu B.1.1.529 (Omicron) (Biocemegion yr 21ain Ganrif) a ar blatiau mewn crynodiad o 2 µg/wel, ac ychwanegwyd 100,000 o gelloedd/ffynnon at y plât. Cafodd y peptidau a'r celloedd eu deor am 15-20 h ar 37 gradd . Perfformiwyd pob cam ar ôl y deor hwn ar dymheredd ystafell. Golchwyd y platiau gyda byffer golchi ELISPOT a'u deor am 2-4 h gyda gwrthgorff monoclonaidd IFN- gwrth-ddynol llygoden Biotinylated o MabTech (1 µg/mL). Golchwyd y platiau yr eildro a'u deor am 2-3 h gydag AP gwrth-fiotin Goat cyfun o Rockland, Inc. (1.33 µg/mL). Dilynwyd y golchiad terfynol gan ychwanegu hydoddiant swbstrad Nitor-glas Tetrazolium Chloride/{5-Bromo{{-4-chloro 3' halen p-toluidine ffosffad indolyl (cromagen NBT/BCIP) am 7 munud. Taflwyd y cromagen a golchwyd y platiau â dŵr a'u sychu mewn lle gwan am 24 awr. Cafodd platiau eu sganio a'u cyfrif ar Ddadansoddwr Imiwnobot Cellular Technologies Limited.

Assay staenio cytocin mewngellol (ICS).

Cafodd ymatebion celloedd CD4 plus a CD8 plus T eu meintioli gan brofion staenio cytocin mewngellol wedi'u hysgogi gan beptid (ICS) cyfun. Roedd pyllau peptid yn cynnwys 15 peptid asid amino yn gorgyffwrdd gan 11 asid amino yn rhychwantu'r SARS-CoV-2 WA1/2020, B.1.617.2 (Delta), neu B.1.1 .529 (Omicron) Proteinau pigyn (Biocemegion yr 21ain Ganrif). 10Cafodd 6 o gelloedd mononiwclear gwaed ymylol eu hail-atal mewn 100 µL o gyfrwng R10 wedi'i ategu gan wrthgorff monoclonaidd CD49d (1 µg/mL) a gwrthgorff monoclonaidd CD28 (1 µg/mL). Aseswyd pob sampl gyda ffug (100 µL o R10 ynghyd â 0.5 y cant DMSO; rheolaeth cefndir), peptidau (2 µg/mL), a/neu asetad myristate phorbol 10 pg/mL (PMA) ac ionomycin 1 µg/ml (Sigma-). Aldrich) (100µL; rheolaeth gadarnhaol) a'i ddeor ar 37 gradd am 1 h. Ar ôl deori, ychwanegwyd 0.25 µL o GolgiStop a 0.25 µL o GolgiPlug mewn 50 µL o R10 at bob ffynnon a'u deor ar 37 gradd am 8 h ac yna eu dal ar 4 gradd dros nos. Y diwrnod wedyn, golchwyd y celloedd ddwywaith gyda DPBS, eu staenio â llifyn dŵr byw / marw am 10 munud ac yna eu staenio â theitrau rhagderfynedig o wrthgyrff monoclonaidd yn erbyn CD279 (clôn EH12.1, BB700), CD4 (clôn L200, BV711), CD27 (clôn M-T271, BUV563), CD8 (clôn SK1, BUV805), CD45RA (clôn 5H9, APC H7) am 30 munud. Yna golchwyd celloedd ddwywaith gyda byffer FBS/DPBS o 2 y cant a'u deor am 15 munud gyda 200 µL o BD CytoFix/CytoPerm Fixation/Permeabilization solution. Cafodd celloedd eu golchi ddwywaith gyda byffer 1X Pyrm Wash (BD Perm/WashTM Buffer 10X yn y pecyn CytoFix/CytoPerm Fixation/Permeabilization wedi'i wanhau â dŵr MilliQ a'i basio trwy hidlydd 0.22µm) a'i staenio â mewngellol â gwrthgyrff monoclonaidd yn erbyn IFN- (clôn B27; BUV395), a CD3 (clôn SP34.2, Alexa 700), am 30 munud. Golchwyd celloedd ddwywaith gyda byffer Perm Wash 1X a'u gosod gyda 250µL o fformaldehyd 1.5 y cant wedi'i baratoi'n ffres. Trosglwyddwyd celloedd sefydlog i blât gwaelod crwn 96-a'u dadansoddi gan system BD FACSymphony™. Dadansoddwyd data gan ddefnyddio FlowJo v9.9.

atodiad cistanche:gwella imiwnedd

Cyfeiriadau

1. Cele S, Jackson L, Khan K, et al. SARS-CoV-2 Mae gan Omicron ddihangfa helaeth ond anghyflawn o niwtraliad Pfizer BNT162b2 ac mae angen ACE2 ar gyfer haint. medRxiv 2021.

2. Dan JM, Mateus J, Kato Y, et al. Cof imiwnolegol i SARS-CoV-2 wedi'i asesu am hyd at 8 mis ar ôl haint. Gwyddoniaeth 2021;371.

3. Sette A, Crotty S. Imiwnedd addasol i SARS-CoV-2 a COVID-19. Cell 2021; 184:861-80.

4. Goel RR, Peintiwr MM, Apostolidis SA, et al. Mae brechlynnau mRNA yn ysgogi cof imiwnedd parhaol i SARS-CoV-2 ac amrywiadau sy'n peri pryder. Gwyddoniaeth 2021; 374: abm0829.

5. McMahan K, Yu J, Mercado NB, et al. Cydberthynas amddiffyniad yn erbyn SARS-CoV-2 mewn macaques rhesws. Natur 2021; 590:630-4.

6. Grifoni A, Weiskopf D, Ramirez SI, et al. Targedau Ymatebion Cell T i SARS-CoV-2 Coronafeirws mewn Pobl â Chlefyd COVID-19 ac Unigolion Heb eu Datguddio. Cell 2020; 181:1489-501 e15.

7. Sadoff J, Gray G, Vandebosch A, et al. Diogelwch ac Effeithiolrwydd Brechlyn Dos Sengl Ad26.COV2.S yn erbyn Covid-19. N Eng J Med 2021; 384:2187-201.

8. Polack FP, Thomas SJ, Kitchin N, et al. Diogelwch ac Effeithlonrwydd Brechlyn Covid-19 BNT162b2 mRNA. N Eng J Med 2020.

9. Collier AY, Yu J, McMahan K, et al. Cineteg Wahanol Ymatebion Imiwnedd a Ddeillir gan Frechlynnau Covid-19. N Eng J Med 2021; 385:2010-2.

10. Falsey AR, Frenck RW, Jr., Walsh EE, et al. SARS-CoV-2 Niwtraleiddio gyda BNT162b2 Dos Brechlyn 3. N Engl J Med 2021.

11. Barouch DH, Stephenson KE, Sadoff J, et al. Ymatebion Imiwnedd Humoral a Cellog Gwydn 8 Mis ar ôl Brechu Ad26.COV2.S. N Eng J Med 2021; 385:951-3.

12. Alter G, Yu J, Liu J, et al. Imiwnogenigrwydd brechlyn Ad26.COV2.S yn erbyn amrywiadau SARS-CoV-2 mewn bodau dynol. Natur 2021; 596:268-72.

13. Poon MML, Rybkina K, Kato Y, et al. Mae haint SARS-CoV-2 yn cynhyrchu cof imiwnolegol lleoledig meinwe mewn pobl. Imiwnoleg gwyddoniaeth 2021; 6: eabl9105.

14. Vidal SJ, Collier AY, Yu J, et al. Cydberthynas Niwtraleiddio yn erbyn SARS-CoV-2 Amrywiadau o Bryder yn ôl Sera Pandemig Cynnar. J Firol 2021; 95: e0040421.

budd atodiad cistanche:gwella imiwnedd