Rhan 1|Mae Fformiwla Llysieuol Tsieineaidd, Tonic The Kindney, yn Gwella Atroffi Cyhyrau Trwy Broses Rheoli Ansawdd Mitocondriaidd mewn 5/6 o Lygod Mawr Nephrectomized

Cyswllt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-bost:audrey.hu@wecistanche.com

Dongtao Wang1,3, Jianping Chen2, Xinhui Liu1, Ping Zheng1, Gaofeng Song1, Tiegang Yi1,2 a Shunmin Li1

Mae atroffi cyhyr yn un o gymhlethdodau difrifol clefyd cronig yn yr arennau (CKD). Mae dadreoleiddio'r broses rheoli ansawdd mitocondriaidd (MQC), gan gynnwys biogenesis mitocondriaidd gostyngol, amharu ar ddeinameg mitocondriaidd ac ysgogi mitophagi, yn chwarae rhan bwysig wrth gyfryngu gwastraffu cyhyrau. Nod yr astudiaeth hon oedd arsylwi effeithiau decoction Jian-Pi-Yi-Shen (JPYS) ar atroffi cyhyrau mewn llygod mawr CKD ac archwilio ei fecanwaith posibl ar reoleiddio prosesau MQC. Dyrannwyd y 5/6 o lygod mawr nephrectomized ar hap yn 2 grŵp: grŵp CKD a grŵp JPYS. Ar ben hynny, grŵp ffug oedd llygod mawr a weithredir â ffug. Cafodd pob llygod mawr eu trin am 6 wythnos. Dangosodd y canlyniadau fod gweinyddu decoction JPYS yn atal colli pwysau'r corff, colli cyhyrau, gostyngiad mewn maint ffibr cyhyrau, diraddio protein cyhyrau, a mwy o synthesis protein cyhyrau. Yn ogystal, cynyddodd decoction JPYS y cynnwys mitocondriaidd a phroteinau biogenesis ac is-reoleiddiwyd y proteinau awtoffagi a mitophagi. Ar ben hynny, cynyddodd decoction JPYS broteinau ymasiad mitocondriaidd, tra'n lleihau proteinau ymholltiad mitocondriaidd. I gloi, cynyddodd decoction JPYS gynnwys mitocondriaidd a biogenesis, adferodd y cydbwysedd rhwng ymholltiad ac ymasiad, ac atal y llwybr awtoffagy-lysosome (mitoffagi). Gyda'i gilydd, dangosodd ein data fod decoction JPYS yn fuddiol i atroffi cyhyrau mewn CKD, a allai fod yn gysylltiedig â modiwleiddio proses MQC.

Mae Cistanche tubulosa yn atal clefyd yr arennau, cliciwch yma i gael y sampl

Clefyd cronig yn yr arennau(CKD) yn cael ei nodweddu gan golled gynyddol mewn gweithrediad arennol dros gyfnod o fisoedd neu flynyddoedd. Mae astudiaethau enfawr wedi'u dangos bod ei fecanwaith gweithredu yn gysylltiedig â chroniad gormodol o fatrics allgellog a cholli podocyt a llid yn ogystal â chamweithrediad metaboledd lipid a metaboledd amino1-6. Nododd rhai adroddiadau fod CKD yn gysylltiedig ag atroffi cyhyr, sy'n cyfateb yn uniongyrchol i farwolaethau ac afiachusrwydd7. Mae ysgogiadau posibl atroffi cyhyr mewn CKD yn cynnwys asidosis, cynhyrchu angiotensin II, llid, uwch-reoleiddio'r systemau ubiquitin-proteasome, ac awtoffagy-lysosome (UPS ac ALS), a dadreoleiddio prosesau rheoli ansawdd mitocondriaidd (MQC)8, 9. Yn anffodus , ymyriadau ataliol a therapiwtig sy'n rhwystro atrophy cyhyrau yn dal i fod yn y camau datblygu cychwynnol. Derbyniodd mwy a mwy o gleifion therapïau cyflenwol neu amgen fel meddygaeth Tsieineaidd draddodiadol (TCM)10–14. Archwiliwyd ameddygaeth Tsieineaidd traddodiadol, Jian-Pi-Yi-Shen (JPYS) decoction, byddai atal atroffi cyhyrau drwy fodiwleiddio'r broses MQC.

Mae'r UPS yn cael ei gydnabod fel y prif gyfrannwr at broteolysis cyhyrau, sy'n gyfrifol am 50 y cant neu fwy o gyfanswm diraddiad protein mewn cyhyrau ysgerbydol. Yr UPS yw'r prif lwybr diraddio protein mewngellol, sy'n 1Adran Neffroleg, Ysbyty Meddygaeth Tsieineaidd Traddodiadol Shenzhen, Prifysgol Meddygaeth Tsieineaidd Guangzhou, Shenzhen, 518033, Tsieina. 2Shenzhen Labordy Allweddol o Ysbyty Paratoi Meddygaeth Tsieineaidd, Shenzhen Ysbyty Meddygaeth Tseiniaidd Traddodiadol, Guangzhou Prifysgol Meddygaeth Tsieineaidd, Shenzhen, 518033, Tsieina. 3Adran Neffroleg, Ysbyty Cysylltiedig Ruikang, Prifysgol Meddygaeth Tsieineaidd Guangxi, Nanning, 530011, Tsieina. Cyfrannodd Dongtan Wang a Jianping Chen yn gyfartal at y gwaith hwn. Dylid cyfeirio gohebiaeth a cheisiadau am ddeunyddiau at DW a all ddiraddio'r proteinau myofibril yn eu cydrannau (actin, myosin, troponin, a tropomyosin)15. Mae'r proteinau hyn yn cael eu targedu a'u diraddio gan ddau ligas E3 ubiquitin(Ub) sy'n benodol i gyhyrau, atroffi cyhyrau F-Box (MAFbx/ Atrogin-1) a phrotein bys RING cyhyr-benodol (MuRF1)16, 17. Yn gyfochrog â'r uwchlaw'r llwybr, credir bod ALS yn targedu ac yn hollti proteinau hirhoedlog, sytoplasm swmp, ac organynnau trwy'r peiriannau lysosomaidd18. Mae gweithrediad genynnau UPS ac ALS fel arfer yn cael ei rwystro gan Akt trwy reoleiddio negyddol ffactorau trawsgrifio Forkhead blwch O (FoxO), gan gynnwys FoxO1, FoxO3a, a FoxO4. Mae gweithgarwch trawsleoli a thrawsgrifio aelodau FoxO yn ddigon i gynyddu mynegiant atrogin-1 a MuRF1, ac achosi atroffi cyhyrau.

Mae prosesau MQC yn cael eu rheoleiddio'n dynn gan nifer o brosesau, ee biogenesis, ymasiad, ymholltiad, a mitophagi. Hysbysir fodafiechydon cronigactifadu ymateb mitocondriaidd sy'n lleddfu "ansawdd" celloedd mitocondria cyhyr ysgerbydol ar lefelau moleciwlaidd gwahanol: (i) biogenesis trwy weithrediad cydweithredydd gama derbynnydd perocsisome a weithredir gan amlhaurydd allweddol y rheolyddion 1-alpha (PGC{2 }} ), ffactor resbiradol niwclear 1/2 (NRF-1/2), adenosine 5′-monophosphate (AMP) kinase protein-activated (AMPK ), a synthesis ATP; (ii) dynameg gan yr ailfodelu mitocondriaidd proteinau GTPase megis mitofusin-2 (Mfn-2) ac atroffi optig 1 (OPA-1) ar gyfer ymasiad a phrotein sy'n gysylltiedig â dynamin 1 (DRP{{). 16}}) ac ymholltiad 1 (Fis-1) ar gyfer ymholltiad; (iii) trosiant mitocondria a ddifrodwyd gan feitoffagi trwy kinase tybiedig 1(PINK1), Parkin a Bnip3/Nix (BNIP3L) a achosir gan PTEN; a (iv) rheoli ansawdd trwy ddiraddio proteinau wedi'u cam-blygu neu eto gyfran o mitocondria wedi'i niweidio gan y system proteolytig gyda hebryngwyr a phroteasau20. Dywedwyd bod biogenesis mitocondriaidd wedi'i leihau yn gysylltiedig ag atroffi cyhyr, a hyrwyddwyd gan PGC-1 ac AMPK 21, 22. Fodd bynnag, mae'r broses MQC gan gynnwys ymasiad mitocondriaidd, ymholltiad, biogenesis, a mitophagi mewn atroffi cyhyrau CKD yn aneglur o hyd.

Adroddwyd bod TCM yn effeithiol ar gyfer trin atroffi cyhyrau23-26. Fodd bynnag, ychydig o wybodaeth oedd ar gael yn y llenyddiaeth ynghylch a allai meddygaeth lysieuol Tsieineaidd ag effaith atroffi gwrth-gyhyr effeithio ar broses MQC mewn CKD. Mae decoction JPYS wedi'i ddefnyddio'n helaeth wrth drin diffyg maeth â syndrom diffyg qi dueg ac arennau yn CKD ers blynyddoedd lawer. Fodd bynnag, mae angen astudiaeth bellach o'i fecanwaith gwrth-diffyg maeth a gwrthdroi atroffi cyhyrau manwl o hyd. Yma, ein nod oedd archwilio sut mae dadreoleiddio proses MQC yn achosi gwastraffu cyhyrau ac a yw decoction JPYS yn atal atroffi cyhyrau trwy fodiwleiddio'r broses MQC yn effeithiol.

dyfyniad cistanche tubulosa: trin clefydau cronig yn yr arennau

Canlyniadau

Newidiadau mewn swyddogaeth arennol.

Ar ddiwedd yr astudiaeth, dangosodd y grŵp CKD lefelau creatinin serwm (Scr) sylweddol uwch a nitrogen wrea gwaed (BUN) o gymharu â'r grŵp ffug. Yn ddiddorol, canfuwyd bod decoction JPYS yn lleihau lefelau Scr a BUN. Fodd bynnag, nid oedd lefel yr albwmin serwm (ALB) yn wahanol iawn rhwng pob grŵp (Tabl 1).

Mae decoction JPYS yn gwella atroffi cyhyrau.

Roedd pwysau corff y grŵp CKD yn sylweddol is na phwysau corff y grŵp ffug ar ddechrau'r driniaeth; fodd bynnag, nid oedd unrhyw wahaniaethau ym mhwysau'r corff rhwng grwpiau CKD a JPYS. Yn ddiddorol, dangosodd grŵp JPYS welliant amlwg ym mhwysau'r corff ar driniaeth 5 a 6 wythnos o'i gymharu â'r grŵp CKD (Ffig. 1a). Roedd y cynnydd ym mhwysau'r corff o ychwanegu JPYS yn cynnwys cynnydd ym mhwysau cyhyrau gastrocnemius (Gastroc) a tibialis anterior (TA) yn y grŵp CKD (Ffig. 1b,c). Cadarnhawyd bod màs cyhyr gwell yn y grŵp JPYS gan gynnydd yn arwynebedd trawsdoriadol cyfartalog myofibrau mewn cyhyrau TA yn y grŵp CKD (Ffig. 1d,e).

Mae decoction JPYS yn cynyddu synthesis protein ac yn atal diraddio protein.

Roedd y gyfradd synthesis protein yn is yn y grŵp CKD na chyfradd y grŵp ffug, a chanfuwyd bod decoction JPYS yn cynyddu cyfradd synthesis protein (Ffig. 2a). Ar y llaw arall, roedd y gyfradd diraddio protein yn uwch yn y grŵp CKD nag yn y grŵp ffug, a gafodd ei atal yn llwyr gan ddecoction JPYS (Ffig. 2b).

Mae decoction JPYS yn atal system ubiquitin-proteasome ac actifadu FoxO3a.

Cyflwynir marcwyr protein yn y system ubiquitin-proteasome cyhyr a FoxO3a yn Ffig. 3a. Dangosodd grŵp CKD gynnydd yn y mynegiant o Atrogin-1 a MuRF-1, a diddymwyd y newidiadau hyn gan ddecoction JPYS (Ffig. 3b,c). Hefyd, i gadarnhau perthnasedd y newidiadau mewn proteolysis cyhyrau a welwyd yn y llygod mawr CKD, fe wnaethom fesur gweithgareddau'r proteasome 20 S. Roedd gweithgareddau tebyg i gymotrypsin a thrypsin yn uwch yn y grŵp CKD nag yn y grŵp ffug, tra'n cael eu gwanhau gyda decoction JPYS (Ffig. 3g,h). Yn ogystal, gostyngwyd y gymhareb ffosfforyleiddiad (p)-FoxO3a a p-FoxO3a/FoxO3a yn y grŵp CKD, tra bod decoction JPYS yn sbarduno cynnydd o gymharu â'r grŵp CKD (Ffig. 3d,f). Fel y dangosir yn Ffig. 3e, cafodd cynnwys protein gwaelodol FoxO3a ei uwch-reoleiddio yn y grŵp CKD, a chafodd hyn ei atal hefyd gan ddecoction JPYS.

Mae decoction JPYS yn gwella cynnwys mitocondriaidd cyhyrau a nodweddion morffolegol cyhyrau aberrant.

Aseswyd cynnwys mitocondriaidd gan ddefnyddio staen SDH o gyhyrau Gastroc (Ffig. 4a). Roedd gweithgaredd SDH, sy'n cynrychioli'r swm mitocondriaidd, wedi'i leihau'n sylweddol yn y grŵp CKD ac roedd decoction JPYS yn gwrthdaro â'r ymateb hwn (Ffig. 4b). Ar y llaw arall, datgelodd staenio SDH fod ffibrau cyhyrau math I (ocsidiol araf) ac I (glycolytig ocsidiol cyflym), sy'n ffibrau cyfoethog mitocondria, wedi gostwng yn sylweddol, a chynyddwyd ffibrau math IIb (glycolytig cyflym) yn y grŵp CKD. . Yn ddiddorol ddigon, dangosodd decoction JPYS newid yn y math o ffibr cyhyrau yn y grŵp CKD, a nodweddir gan ostyngiad mewn ffibrau math IIb a chynnydd sylweddol mewn ffibrau cyhyrau math I a IIa (Ffig. 4c). Yn gyson â'r gostyngiad mewn gweithgaredd SDH, datgelodd morffolegol TEM hefyd newidiadau mawr ar y lefel sarcomeric, gydag annormaleddau'n gyson â llai a llai o mitocondria (saethau du; Ffig. 4e,f) a chyda llinellau Z llawer teneuach (saethau gwyn; Ffig. 4d) yn y grŵp CKD. Yn yr un modd, roedd y band I, a gyfansoddwyd yn bennaf o ffilamentau actin tenau, yn ymddangos yn deneuach neu'n gwbl absennol yn y grŵp CKD (cromfachau; Ffig. 4d). Yn bwysig, cafodd y newidiadau hyn eu hatal gan driniaeth decoction JPYS.

atal afiechydon yr arennau: cistanche tubulosadyfyniad

Mae decoction JPYS yn cynyddu biogenesis mitocondriaidd.

Cyflwynir marcwyr protein mewn biogenesis mitocondriaidd cyhyr yn Ffig. 5a. Gellir defnyddio protein Te Cox IV yn effeithiol fel rheolaeth llwytho mitocondriaidd ac mae'n cynrychioli cynnwys mitocondriaidd, a oedd yn gyson â chanlyniadau gweithgaredd SDH (Ffig. 5b). Yn ogystal, gostyngwyd proteinau biogenesis mitocondriaidd NRF-1 a PGC-1 yn y grŵp CKD a chafodd y newidiadau hyn eu gwrthdroi gyda decoction JPYS (Ffig. 5c-e). Fodd bynnag, nid oedd y lefelau protein ar gyfer y dogn ATP5B a p-AMPK / AMPK wedi newid o bob grŵp (Ffig. 5d-f).

Mae decoction JPYS yn atal llwybr awtoffagi a mitoffagi.

Canfuwyd awtophagi te a phroteinau cysylltiedig â mitophagi gan blotio Gorllewinol (Ffig. 6a). Cafodd lefel te o brotein Beclin-1 a dogn LC3II/LC3I eu huwch-reoleiddio yn y grŵp CKD a chafodd hyn ei arafu gan ddecoction JPYS (Ffig. 6b,c). Canfuwyd bod cyfraniad yr addasydd autophagy p62 yn anhepgor ar gyfer mitoffagi, a gynyddwyd yn y grŵp CKD a'i wanhau gan ddecoction JPYS (Ffig. 6d). Yn ddiddorol, cynyddwyd lefelau proteinau PINK1 a Parkin yn sylweddol yn y grŵp CKD, ac ataliwyd y newidiadau hyn gan JPYS decoction (Ffig. 6f,g). Fodd bynnag, nid oedd unrhyw wahaniaethau mewn mynegiant BNIP3L rhwng pob grŵp (Ffig. 6e).

Mae decoction JPYS yn lleihau ymholltiad mitocondriaidd ac yn cynyddu ymasiad mitocondriaidd.

Canfuwyd ymasiad mitocondriaidd te a phroteinau cysylltiedig ag ymholltiad trwy blotio'r Gorllewin (Ffig. 7a). Proteinau ymholltiad allweddol Roedd lefelau Fis-1 a Drop-1 yn sylweddol uwch yn y grŵp CKD, tra bod y newidiadau hyn wedi'u rhwystro gan driniaeth JPYS (Ffig. 7b,c). Fodd bynnag, gostyngwyd y proteinau ymasiad allweddol lefelau OPA-1 a Mfn{-2 yn y grŵp CKD, ac ataliwyd y gostyngiad hwn gan driniaeth JPYS (Ffig. 7d,e).

atal methiant yr arennau dyfyniad cistanche tubulosa