Gall Acteoside, Cydran o Stachys Sieboldii MIQ, Fod Yn Asiant Antineffriticaidd Addawol: Effaith Acteoside Ar Nephritis Gwrth-GBM Cilgantaidd mewn Llygod Mawr

Am fwy o wybodaeth:ali.ma@wecistanche.com

Kazumi Hayashi, Tadashi Nagamatsu, Mikio Ito, Tomohisa Hattorian a Yoshio Suzuki

Adran Ffarmacoleg, Cyfadran Fferylliaeth, Prifysgol Meijo, 150 Yagotoyama, Tenpaku-Ku, Nagoya 468, Japan

ABSENOLDEB

Effeithiauacteosid(ACT) ar gwrth-GBM cilgantaiddneffritismewn llygod mawr eu hymchwilio. Pan gafodd llygod mawr eu trin âActeosideo'r diwrnod 1af ar ôl iv chwistrelliad o serwm gwrth-GBM,Acteosideyn atal dyrchafiad ysgarthiad protein i wrin. Yn yActeoside-yn cynnwys llygod mawr wedi'u trin, colesterol a creatinin a chynhyrchiant gwrthgyrff yn erbyn r-globulin cwningen yn y plasmas na rhai'r llygod mawr rheoli neffritig. Dangosodd arsylwi histolegol fod yr asiant hwn yn atal gorgellogedd ac amlder ffurfiant cilgant, adlyniad wal capilari i gapsiwl Bowman, a necrosis ffibrinoid yn y glomerwli. At hynny, roedd adneuon rat-IgG a C3 ar y GBM gryn dipyn yn llai yn yActeosidegrŵp wedi'i drin nag yn y grŵp nephritic rheoli. Pan ddechreuwyd y driniaeth o'r 20fed dydd ar ol iV chwistrelliad o serwm gwrth-GBM, trwy ba un yr oedd y clefyd wedi ei sefydlu,Acteosidearwain at effaith debyg ar ynefphriticllygod mawr fel y nodwyd uchod. Mae'r canlyniadau hyn yn awgrymu y gallai Acteoside fod yn feddyginiaeth ddefnyddiol yn erbyn glomerulonephritis sy'n datblygu'n gyflym, a nodweddir gan friwiau glomerwlaidd difrifol gyda chilgant gwasgaredig.

Geiriau allweddol: gwrth-GBM math cilgantaiddneffritis,Acteoside, Rat-IgG, Llygoden Fawr-C3

Cliciwch i ddefnyddiau Cistanche gydag Acteoside

Rhagnodir Chyorogi Stachys sieboldii MIQ (Labiatae) ar gyfer llawer o afiechydon, a defnyddir y cloron hwn fel bwyd gan Tsieineaidd, Rwsieg a Japaneaidd. Mae ymchwiliadau diweddar wedi dangos bod gan chyrogi weithred gwrth-anocsia (1), gweithredu ataliol ar weithgaredd hyaluronidase (2), a gweithredu gwrthimiwnedd (3).

Ar y llaw arall, crybwyllwyd bod yr ymateb imiwn yn cymryd rhan yn natblygiad neffritis. I'w roi'n fwy pendant, mae anaf glomerwlaidd yn cael ei gyfryngu gan ddyddodiad cymhleth imiwnedd yn y glomeruli, ac yna adwaith imiwn-llidiol, gan gynnwys actifadu cyflenwad a rhyddhau cyfryngwyr llidiol eraill. Mewn astudiaethau diweddar, mae llawer o sylw wedi'i dalu i gyfraniad yr ymateb imiwn trwy gyfrwng celloedd wrth ddatblygu glomerulonephritis (4, 5). Ar ben hynny, mae Neild et al. (6) fod ataliad swyddogaeth celloedd T gan cyclosporin A (CyA) yn rhwystro datblygiad dilynol briwiau glomerwlaidd mewn neffritis salwch acíwt. Fe wnaethom adrodd bod gan mizoribine (7), azathioprine (7), CyA (8), methylprednisolone (9), a rhai cydrannau planhigion (10) gamau gwrthimiwnedd yn dangos effaith lesol ar neffritis gwrth-GBM. Er bod yr asiantau gwrthimiwnedd hyn yn gweithredu'n antinphritig, mae'n anodd eu defnyddio mewn treialon clinigol oherwydd eu sgîl-effeithiau (11). Felly, disgwylir i asiant gwrthimiwnedd newydd ar gyfer trin neffritis yn y cam clinigol gael ei ddatblygu.

Pwrpas yr astudiaeth bresennol oedd egluro'reffaith gwrth-nephritig acteoside, elfen o chyorogi, ar neffritis gwrth-GBM cilgantaidd mewn llygod mawr.

DEUNYDDIAU A DULLIAU

Anifeiliaid

Mae Sprague Gwryw-Dawley yn straenio llygod mawr, yn pwyso tua. Defnyddiwyd 160 g (Nihon SLC, Hamamatsu), ar gyfer pob arbrawf. Cafodd yr anifeiliaid hyn eu cadw mewn ystafell aerdymheru ar 23 ± 1 C yn ystod y cyfnod arbrofol.

Cyffuriau

Dangosir strwythur cemegol acteoside (ACT) (Tsumura Co., Ltd., Tokyo) yn Ffig. 1. Echdynnwyd y gydran hon o ran awyr chyorogi (Stachys sieboldii MIQ). Gwiriwyd purdeb ACT gan HPLC (Colofn: TSK gel ODS-80TM (4.0 id x 250 mm); Cyfnod symudol: 20 y cant CH3CN/H2O, yn cynnwys 10 AcOH; Cyfradd llif: 0.7 ml/munud; Tymheredd: tymheredd yr ystafell; Canfod: UV 254 nm) yn Tsumura Co., Ltd Roedd gan ACT a ddefnyddiwyd yn yr arbrofion hyn burdeb o fwy na 9970. Diddymwyd ACT mewn dŵr distyll. Defnyddiwyd Dipyridamole (Dip) (Boehringer Ingelheim, yr Almaen) ac azathioprine (Aza) (Sigma, St. Louis, MO, UDA); Ataliwyd y cyffuriau hyn yn 1070 gwm Arabeg.

Ymsefydlu neffritis gwrth-GBM o fath cilgantaidd

Anwythwyd neffritis gwrth-GBM math crescentig trwy imiwneiddio'r llygod mawr a oedd wedi derbyn dos nephritogenig o serwm gwrth-lygod mawr cwningen GBM (gwrth-GBM) gyda r-globulin cwningen (rG) yn ôl addasiad bach o'r dull a adroddwyd yn flaenorol ( 12). Yn yr arbrawf hwn, roedd llygod mawr yn pwyso tua. Rhoddwyd 0.6 ml/anifail o serwm gwrth-GBM i wythïen y gynffon i 160 g.

Amcangyfrifwyd effaith cyffuriau prawf trwy eu gweinyddu o'r diwrnod 1af ar ôl y pigiad serwm gwrth-GBM (cyfnod heterologaidd) neu'r 20fed diwrnod ar ôl y pigiad serwm antiGBM (cyfnodau ymreolaethol). Yn yr arbrofion, casglwyd samplau wrin 24-awr, ac yna rhannwyd y llygod mawr yn 5 neu 6 grŵp o 8 llygod mawr fel bod y cynnwys protein ar gyfartaledd yn yr wrin 24-awr ym mhob grŵp ar a. lefel debyg.

Gwerthusiad o effaith antinffritig y cyffuriau prawf

Yn yr arbrawf o driniaeth gyffuriau o'r cyfnod heterologaidd, rhoddwyd 3, 10, neu 30 mg / kg / dydd o ACT neu 100 mg / kg / dydd o Dip ar lafar i bedwar grŵp, yn y drefn honno, mewn cyfaint o 1 ml fesul 100 g. o bwysau'r corff, bob dydd o'r diwrnod 1af neu'r diwrnod ar ôl pigiad iv o serwm gwrth-GBM i'r 40fed diwrnod. Yn yr arbrofion o driniaeth cyffuriau o'r cyfnod awtologaidd, rhoddwyd 3, 10, neu 30 mg / kg o ACT (A) neu 30 mg / kg / dydd o ACT, 100 mg / kg / dydd ar lafar i dri neu bedwar grŵp. Dip neu 50 mg/kg/dydd o Aza (B), yn y drefn honno, mewn cyfaint o 1ml fesul 100 g o bwysau'r corff, bob dydd o'r 20fed diwrnod ar ôl pigiad serwm gwrth-GBM i'r 40fed (A) neu'r 45ain. (B) dydd. Rhoddwyd y cerbyd (dŵr distyll) ar lafar i'r grŵp sy'n weddill yn lle cyffuriau prawf a gwasanaethodd fel y rheolaeth neffritig. Yn ogystal, defnyddiwyd grŵp heb ei drin (normal) i'w gymharu â'r grwpiau neffritig.

Casgliadau wrin a gwaed

Cafwyd y samplau wrin {{0}}awr trwy gadw pob anifail mewn cawell metabolig unigol am 24 awr. Ar ddechrau'r casgliad wrin, derbyniodd pob anifail 8 ml o ddŵr distyll ar lafar heb ei fwydo. Yna cafodd yr wrin ei allgyrchu ar 3,000 rpm am 15 munud ar 41C a defnyddiwyd yr uwchnatant i ganfod protein. Ar ddiwrnod olaf yr arbrawf, tynnwyd 2.0 ml o waed o wythïen arennol pob llygoden fawr anestheteiddiedig gyda chwistrell untro a'i roi mewn tiwb yn cynnwys 0.125 ml o heparin. Cafodd y gwaed ei allgyrchu ar 5,000 rpm i gael plasma ar gyfer pennu rhai paramedrau.

Penderfyniadau o brotein wrinol a cholesterol plasma a chynnwys creatinin

Pennwyd yr ysgarthiad protein wrinol gan ddull Kingsbury et al. (13) ac wedi'i fynegi fel mg/24 awr wrin. Penderfynwyd ar y cynnwys colesterol gyda phecyn assay masnachol (Determine TC-5; Kyouwa Medix Co., Ltd, Tokyo) (14) a'i fynegi fel plasma mg/dl. Pennwyd y cynnwys creatinin trwy ddefnyddio pecyn pennu creatinin (CRE-EN; Kainos, Inc., Tokyo) a'i fynegi fel mg/dl plasma/100 g pwysau corff.

Mesur titer gwrthgorff plasma yn erbyn -G

Pennwyd y titer gwrthgorff plasma yn erbyn rG gan hemagglutination anuniongyrchol gan ddefnyddio celloedd gwaed coch defaid sensiteiddiedig (15).

Mae mesur plasma yn ategu lefel CH50

Penderfynwyd ar lefel cyflenwad plasma CH50 gan ddull Mayer (16).

Asesiad o baramedrau histopatholegol

Ar gyfer yr astudiaeth ficrosgopig ysgafn, cafodd yr arennau eu hynysu oddi wrth lygod mawr wedi'u hanestheteiddio â phentobarbital, yna eu dadhydradu a'u gosod yn trochi'r meinweoedd fesul cam i wahanol draddodiadau pryder alcohol ethyl o isel i uchel. Yna cafodd y meinweoedd eu mewnblannu mewn paraffin a'u rhannu'n 2 i 3 tafell em-trwchus. Yn yr astudiaethau o neffritis gwrth-GBM cilgantaidd, cafodd yr adrannau eu staenio â hematocsilin ac eosin a thrichrome Masson. Arsylwyd nifer y niwclysau (gorgellogedd), ffurfiant cilgant, adlyniad capsiwl Bowman i'r wal capilari (adlyniad), a necrosis ffibrinoid yn y glomeruli o dan ficrosgop ysgafn. Ar gyfer asesu'r paramedrau hyn, dewiswyd trawstoriad cyhydeddol trwy ddulliau samplu ar hap. Arsylwyd hanner cant o glomeruli / trawstoriadau, a mynegwyd cyfradd ymddangosiad ffurfiant cilgant, adlyniad, a necrosis ffibrinoid fel canrannau'r glomeruli (amlder) sy'n cael y newidiadau morffolegol hyn fel y disgrifiwyd yn flaenorol (17). Perfformiwyd y gwerthusiad gan berson gwahanol nad oedd yn gwybod pwy oedd pob sampl. Ar gyfer asesu gorgellogedd, dewiswyd trawstoriad cyhydeddol trwy ddull samplu ar hap. Cafodd nifer y niwclysau (gan gynnwys niwclysau celloedd glomerwlaidd a lewcocytes alltud) ei gyfrif a'i fynegi fel y nifer cymedrig fesul trawstoriad glomerwlaidd mewn 10 glomerwli/adran.

Imiwnohistocemeg

Mewn meinweoedd ar gyfer staenio imiwnoenzymatig llygod mawr-IgG, torrwyd y darnau paraffin fel y disgrifiwyd uchod, a chafodd yr adrannau eu trin â 0.1 y cant proteas yn 0.05 M Tris- HCl byffer am 7 munud ac yna golchi mewn halwynog oer 0.01 M ffosffad-buffered (PBS), pH 7.4. Yna deorwyd yr adrannau â gwrthgorff monoclonaidd llygoden IgG gwrth-lygod (mAb) (Cappel, West Clester, PA, UDA) ar wanhad o 1:100 am 90 munud. Golchwyd yr adrannau eto gyda PBS, eu trin â 0.3 y cant o hydrogen perocsid mewn methanol am 20 munud i rwystro peroxidase mewndarddol, a'u deor ag IgG gwrth-lygoden wedi'i buro affinedd biotinylated a peroxidase marchruddygl â 3,3'-diaminobenzidine tetrahydrochloride (DAB) (Vecta staen ABC Kit; sefydliad Vector, Burlingame, CA, UDA). Cyflawnwyd pob cam ar dymheredd ystafell.

Cafodd meinweoedd ar gyfer staenio imiwn-ensymatig antigen niwclear celloedd lluosog (PCNA), sy'n arwydd ar gyfer amlhau celloedd, eu gosod mewn fformalin 10 y cant yn PBS, a chafodd y meinweoedd wedi'u mewnosod â pharaffin eu staenio gan yr un weithdrefn â'r un ar gyfer rat-IgG ac eithrio y defnydd o mAb (19A2; Coulter Immunology, Hialeah, FL, UDA) i'r PCNA.

Meintioli llygod mawr-IgG, C3, a PCNA ar adrannau meinwe

Mesurwyd cyfanswm arwynebedd llygod mawr gwrthimiwnedd-IgG a C3 yn y glomerwlws mewn 30 glomeruli fesul adran gan ddefnyddio dadansoddwr delwedd (dadansoddwr delwedd Toyobo V1; Toyobo Co., Ltd., Tokyo) a'i gyflwyno fel croestoriad mm2/glomerwlaidd (GCS). ). Cafodd celloedd PCNA-positif yn y glomerulus eu cyfrif gyda'r dadansoddwr delwedd, a mynegwyd y canlyniadau fel nifer y celloedd / GCS

Dadansoddiadau ystadegol

Mae'r data'n cynrychioli'r cymedrig ± SD, a gwerthuswyd y canlyniadau'n ystadegol gan ANOVA. Pan oedd y canlyniadau hyn yn barametrig, cafodd y rhain eu gwerthuso'n ystadegol gan brawf Duncan. Pan nad oedd y canlyniadau'n barametrig, cawsant eu gwerthuso'n ystadegol gan brawf Kruskal-Wallis. Cyfrifwyd y ganran ataliol fel a ganlyn:

Canran ataliol ( y cant )=(Cyffur Rheoli -Test) x 100 / (Rheoli -Normal)

CANLYNIADAU

Effaith Acteoside mewn neffritis gwrth-GBM cilgantaidd

Ysgarthiad protein wrinol (Ffig. 2 a 3): Pan ddechreuwyd y driniaeth gydag ACT o'r diwrnod ar ôl y pigiad serwm gwrth-GBM (cyfnod heterologaidd), gwelwyd yr ataliad sylweddol cyntaf ar y protein wrinol ar y 5ed diwrnod ar 30 mg /kg, po; ar yr 20fed diwrnod ar 3 a 10 mg / kg, po; ac ar y 40fed diwrnod gyda Dip ar 100 mg/kg, po

Pan roddwyd ACT o'r 20fed diwrnod ar ôl y pigiad serwm antiGBM (cyfnod ymreolaethol), roedd ACT ar 10 a 30 mg / dydd yn atal dyrchafiad yr ysgarthiad protein i wrin erbyn y 30fed diwrnod. Ar y llaw arall, roedd Aza ar 50 mg/kg yn wannach nag ACT ar 30 mg/kg, er nad oedd yn arwyddocaol, ac ni chafodd Dip unrhyw effaith.

Colesterol plasma a chynnwys creatinin (Tabl 1): Penderfynwyd ar y cynnwys colesterol plasma a creatinin ar y 40 neu 45 diwrnod. Roedd y cynnwys colesterol plasma yn y llygod mawr rheoli nephritig yn sylweddol uwch. Mewn cyferbyniad, gostyngwyd uchder y cynnwys colesterol gydag ACT (30 mg/kg) o'r cyfnod heterologaidd 60 y cant o'r lefel reoli a chyda ACT (30 mg/kg) o'r cyfnod hunanlogaidd gan 62'o o'r rheolaeth. lefel. Roedd y cynnwys creatinin plasma yn y llygod mawr nephritig hefyd yn uchel. Ar y llaw arall, yn yr ACT (30 mg/kg) o'r ddau lygod mawr a gafodd eu trin yn raddol, roedd y cynnwys creatinin plasma yn debyg i gynnwys llygod mawr arferol.

Titer gwrthgyrff plasma yn erbyn rG: Roedd llygod mawr Nephritig wedi dangos cynhyrchiad gwrthgyrff cyflym iawn. Cafodd y cynhyrchiad gwrthgyrff carlam ei atal i 72 y cant o'r lefel reoli gan y driniaeth ag ACT (10 a 30 mg / kg) o'r cyfnod heterologaidd (Tabl 2), ACT (30 mg / kg) o'r cyfnod awtologaidd, ac Aza i 70 a 51 y cant o'r lefel reoli, yn y drefn honno (data heb ei ddangos), ac ni chafodd ei effeithio gan Dip.

Arsylwi histolegol (Tabl 3, Ffig. 4 a 5): Datgelodd archwiliad microsgopig ysgafn o'r glomeruli nephritig briwiau a nodweddir gan ffurfiant cilgant difrifol, adlyniad, necrosis ffibrinoid, a lluosogiad o gelloedd mesangial. Dangosodd arsylwi histolegol fod ACT (o'r cyfnod heterologaidd ac awtologaidd) wedi atal gorgelloedd ac amlder ffurfio cilgant, adlyniad, a necrosis ffibrinoid yn y glomeruli erbyn y 40fed neu'r 45ain diwrnod. Roedd briwiau llygod mawr neffritig a gafodd eu trin gan Dip ac Aza hefyd yn llai na rhai'r llygod mawr rheoli nephritig. Fodd bynnag, pan gafodd llygod mawr neffritig eu trin â Dip o'r cyfnod awtologaidd, ychydig o effaith a gafodd newidiadau histolegol gan Dip (data heb ei ddangos).

Gwelwyd amlhau celloedd glomerwlaidd, sef y cynnydd mewn celloedd PCNA-positif yn y glomeruli, ynllygod mawr neffritig. Mewn cyferbyniad, ar y 30ain diwrnod, gostyngiad o 52 y cantsylwyd ar ymlediad celloedd, ac roedd hyn yn gysylltiedig with gostyngiad sylweddol mewn cel glomerwlaiddlularity o gymharu â'r rheolaeth (Tabl 3).

Dyddodiad adweithydd imiwnedd (Tabl 2 a Ffig. 6): Roedd yn bosibl arsylwi dyddodion llygod mawr-IgG a C3 ar y GBM yn y llygod mawr rheoli nephritig; fodd bynnag, ni chawsant eu canfod mewn llygod mawr arferol. Gwnaeth ACT (30 mg/kg) o'r cyfnod heterologaidd leihau dyddodiad llygod mawr-IgG ar y GBM 72 y cant o'r lefel reoli. Ar ben hynny, gostyngodd ACT (3, 10, a 30 mg/kg) o'r cyfnod heterologaidd ddyddodiad llygod mawr-C3 ar y GBM 60 i 69 y cant erbyn y 40fed diwrnod. Hyd yn oed pan roddwyd ACT o'r cyfnod awtologaidd, roedd ataliad dyddodiad rat-IgG a C3 yn debyg i'r canlyniadau uchod. Nid oedd y pant yn effeithio ar ddyddodiad llygod mawr-IgG a C3. Fodd bynnag, gostyngodd Aza dyddodiad llygod mawr-IgG a C3 ar y GBM gan 67 a 68 y cant , yn y drefn honno (data heb ei ddangos).

Effaith ACT ar weithgarwch ategu a dyddodion C3 ar y GBM mewn neffritis gwrth-GBM o'r math gwreiddiol (Ffig. 7)

Anwythwyd neffritis gwrth-GBM math gwreiddiol mewn llygod mawr trwy chwistrelliad o 0.6 ml o serwm gwrth-GBM i mewn i wythiennau eu cynffon, fel y disgrifiwyd yn flaenorol (18). Cafodd llygod mawr Nephritig eu rhag-drin a'u hôl-drin gydag ACT ar 30 mg/kg, ffactor gwenwyn po a cobra (CVF) (Sigma) ar 10 ffigys/llygoden fawr, ip, dair gwaith, bob 8 awr. Roedd triniaethau ACT a CVF yn lleihau ysgarthiad protein wrinol gyda chanran ataliol o tua. 35 gradd a 71 y cant , yn y drefn honno. Roedd y CH50 mewn llygod mawr rheoli nephritig yn sylweddol is nag yn y llygod mawr arferol erbyn 24 awr ar ôl sefydlu neffritis. Ataliodd ACT y gostyngiad CH50 a mwy o ddyddodiad C3 ar y GBM mewn llygod mawr rheoli neffritig. Diddymodd CVF y dyddodiad CH50 a C3. Ar ben hynny, yn yr arbrawf in vitro, rhwystrodd ACT y activation cyflenwad o 37 y cant . Pan roddwyd ACT i lygod mawr arferol, gostyngodd ACT yr actifadu cyflenwad yn yr arbrawf ex vivo (data heb ei ddangos).

TRAFODAETH

Mae glomerulonephritis sy'n datblygu'n gyflym a chlefydau'r arennau yn syndrom Goodpasture yn glefydau malaen sy'n mynd yn fethiant arennol 2 neu 3 mis ar ôl i'r clefyd ddatblygu (19). Roedd nodweddion y neffritis hwn yn cynnwys gorgellog, ymdreiddiad amlwg o neutrophils a monocytes, a ffurfiant cilgant yn y glomeruli. Mae therapi coctel gydag asiantau gwrthimiwnedd, cyffuriau gwrthblatennau, a steroidau wedi'u cymhwyso'n bennaf at y clefyd hwn. Ar y llaw arall, er bod CyA yn gwrthimiwnydd rhagori sy'n cael effaith fuddiol ar neffritis arbrofol (6, 8), dywedwyd bod CyA yn achosi camweithrediad yr arennau ac yn achosi newid histolegol anwrthdroadwy yn y glomeruli (11). Mae gan Methylprednisolone lawer o sgîl-effeithiau. At hynny, mae'r ffenomen adlam a'r syndrom tynnu'n ôl ar ôl triniaeth hir gyda'r feddyginiaeth hon yn ddwy o'r problemau. Felly, rhaid datblygu asiant gwrthimiwnedd newydd ar gyfer trin neffritis sydd â llai o sgîl-effeithiau.

Mae neffritis gwrth-GBM math crescentig yn fodel arbrofol sy'n dangos newidiadau histolegol a phatholegol tebyg i'r rhai mewn glomerwloneffritis sy'n datblygu'n gyflym a chlefyd yr arennau o syndrom Goodpasture (20). Mae datblygiad a dilyniant y neffritis hwn yn cynnwys 2 gam sy'n cael eu cyfryngu gan ymatebion imiwn. Mae'r adwaith cynnar, y cyfnod heterologous fel y'i gelwir, yn ganlyniad i ddyddodiad gwrthgorff gwrth-GBM, wedi'i ddilyn gan groniad cyd-ddibynnol o granulocytes polymorphonuclear (21, 22). Mae'r cyfnod hwyr (cyfnod awtologaidd) yn datblygu trwy rwymo gwrthgyrff awtologaidd a adneuwyd ar hyd y GBM a'r mewnlifiad o monocytau / macroffagau i'r glomeruli yn dilyn yr adwaith hwn (22, 23). Mae'r neffritis hwn yn cael ei nodweddu gan brotein wrinol deuffasig a gorgelledd sy'n cynnwys ffurfio cilgant a necrosis ffibrinoid. Credir bod y ffurfiant cilgant yn cael ei gyfryngu gan facroffagau mudol a chelloedd epithelial lluosog (22, 24).

Fe wnaethom adrodd yn flaenorol bod mizoribine ac Aza, asiant gwrthimiwnedd (7), yn atal codiad gwrthgorff plasma yn erbyn cwningen IgG a Pachyman, prif gydran Poria cocos (18), wedi gostwng gradd dyddodiad C3 ar y GBM, ac roedd y ddau yn hynod effeithiol yn erbyn neffritis gwrth-GBM.

Roedd triniaethau ACT yn atal datblygiad glomerwloneffritis gwrth-GBM fel yr aseswyd gan ostyngiad mewn proteinwria a cholesterol plasma, atal nam swyddogaeth arennol, ac atal newidiadau histolegol cynyddol gan gynnwys datblygu cilgantau glomerwlaidd a gorgelledd. Ar y 40fed diwrnod, gostyngodd ACT ar 30 mg/kg yn unig swm y dyddodiad llygod mawr-IgG ar y GBM wedi'i gyfryngu gan atal cynhyrchu gwrth-gorff yn y model neffritig hwn. Ar y llaw arall, gostyngwyd swm y dyddodion C3 ar y GBM gan ACT ar 3, 10, neu 30 mg/kg. Ar ben hynny, rhwystrodd ACT yn sylweddol actifadu cyflenwad mewn arbrofion in vitro ac ex vivo. Ataliwyd gostyngiad CH50 mewn llygod mawr rheoli neffritig gan ACT. Mae'r data uchod yn awgrymu bod ACT yn atal anaf arennol trwy atal actifadu cyflenwad, oherwydd bod cymhleth ymosodiad pilen ategu (MAC) yn ymwneud â pathogenesis anaf glomerwlaidd (25), ac mae gan y MAC sublytig gyfryngwyr llidiol posibl a allai fod yn gysylltiedig â difrod glomerwlaidd, amlhau celloedd mesangial a thrylediadau matrics allgellog, megis rhywogaethau ocsigen adweithiol (26), proteas (27), prostaglandinau (28) a interleukin -1 fel cytocinau (29), yn ogystal â cholagen (30).

Credir bod cysylltiad agos rhwng actifadu cyflenwadau a ymdreiddiad leukocyte. Mewn astudiaethau diweddar, dywedwyd bod C5a wedi ysgogi adlyniad monocyte a neutrophil i gelloedd mesangial a chelloedd endothelaidd, yn y drefn honno (31, 32). Felly, mewn astudiaeth bellach, rydym yn mynd i ymchwilio i effaith ACT ar gronni leukocytes yn y glomeruli.

CYFEIRIADAU

1 Yamahara J, Kitani T, Kobayashi H a Kawahara Y: Astudiaethau ar Stachys sieboldii MIQ. II Gweithredu gwrth-anocsia a'r cyfansoddion gweithredol. Yakugaku Zasshi 110, 932-935 (1990) (Saesneg Abstrin)

2 Takeda Y, Fujita T, Satoh T, a Kakegawa H: Ar gyfansoddion glycosidig Stachys sieboldii MIQ. a'u heffeithiau ar weithgaredd hyaluronidase. Yakugaku Zasshi 105, 955-959 (1985) (Abstr yn Saesneg)

3 Sasaki H, Nishimura H a Morita T: Egwyddorion gwrthimiwnedd Rehmannia gluttons var. hueichingensis. Planta Med 55, 458-462 (1989)

4 Saito T ac Atkins RC: Cyfraniad leucocytes mononiwclear i ddilyniant sglerosis glomerwlaidd ffocal arbrofol. Arennau Int 37, 1076-1083 (1990)

5 Tipio PG, Neale TJ, a Holdsworth SR: Cyfranogiad lymffocyt T mewn glomerwloneffritis arbrofol a achosir gan wrthgyrff. Arennau Int 27, 530-537 (1985)

6 Neild GH, Ifori K, a Williams DG: Mae Cyclosporin A yn atal salwch serwm sactus mewn cwningod. Clin Exp Immunol 52, 586-594 (1983)

7 Okamoto K, Ito M a Suzuki Y: Astudiaethau ar effaith antinphritig ar mizoribine (p-INN, Bredinin®), asiant gwrthimiwnedd newydd, ac azathioprin (2): Effaith ar neffritis gwrth-GBM cilgantaidd mewn llygod mawr. Jpn J Pharmacol 34, 33-41 (1984)

8 Nagamatsu T, Kojima N, Kondo N, Hattori T, Kojima R, Ito M, a Suzuki Y: Atal gan cyclosporin A neffritis gwrth-GBM mewn llygod mawr. Jpn J Pharmacol 58, 27-36 (1992)

9 Taniguchi H, Nagamatsu T, Kojima R, Ito M, a Suzuki Y: Camau antinffritig wedi'u marcio ac effeithiau llai andwyol methylprednisolone syltanad trwy weinyddiaeth ysbeidiol mewn llygod mawr. Jpn J Pharmacol 64, 79-88 (1994)

10 Hattori T, Furuta K, Hayashi K, Nagamatsu T, Ito N, a Suzuki Y: Astudiaethau ar effeithiau antinffritig cydrannau planhigion (6): Effeithiau antinffritig a mecanweithiau diod fferolen (OB-5) ar gilgantaidd- math gwrth-GBM neffritis mewn llygod mawr (2). Jpn J Pharmacol 60, 187-195 (1992)

11 Mason J: Effeithiau Sandimiwn ar yr aren. Clin Res Bull 6, 47-51 (1989)

12 Ito M, Yamada H, Okamoto Y, a Suzuki Y: neffritis math cilgantaidd a achosir gan serwm pilen islawr gwrth-glomerwlaidd (GBM) mewn llygod mawr. Jpn J Pharmacol 33, 1145-1154 (1983)

13 Kingsbury FB, Clark CP, Williams G a Post AL: Penderfyniad cyflym albwmin yn yr wrin. J Lab Clin Med 11, 981-989 (1926)

14 Zurkowski P: Dull cyflym o ganfod colesterol gydag un adweithydd. Clin Chem 10, 451-453 (1964)

15 Mcleish KR, Clark CP, Williams G a Post AL: Atal synthesis gwrthgyrff gan prostaglandin E fel mecanwaith ar gyfer atal glomerulonephritis imiwn-gymhleth murine. Lab Invest 47, 147-152 (1982)

16 Mayer MM: Ategu ac ategu gosodiad. Yn Experimental Immunochemistry, tt 133-240, Charles C. Thomas, Springfield (1961)

17 Hattori T, Ito M, Nagamatsu T, a Suzuki Y: Astudiaethau ar effaith gwrth-nephritig TJ-8014, meddyginiaeth lysieuol Japaneaidd newydd (3): Effeithiau ar neffritis gwrth-GBM cilgantaidd mewn llygod mawr. Jpn J Pharmacol 52, 131-140 (1990)

18 Hattori T, Hayashi K, Nagao T, Furuta K, Ito M, a Suzuki Y: Astudiaethau ar effeithiau antinphritic o gydrannau planhigion (3): Effaith pachyman, prif gydran Poria cocos Wolf ar darddiad nal-math gwrth-GBM neffritis mewn llygod mawr a'i fecanweithiau. JpnJ Pharmacol 59, 89-96 (1992)

19 Shibata S, Miyakawa Y, Naruse T, Nagasawa T, a Takuma T: Glycoprotein sy'n achosi gwrthgorff neffrotocsig: ​​Ei ynysu a'i buro o bilen islawr glomerwlaidd llygod mawr. J Immunol 102, 593 601 (1969)

20 Falk RJ: Clefyd arennol sy'n gysylltiedig â ANCA. Arennau Int 38, 998-1010 (1990) 21 Mulligan MS, Johnson KJ, Todd RF III, Issekutz TB, Miyasaka M, Tamatani T, Smith CW, Anderson DC a Ward PA: Gofynion ar gyfer moleciwlau adlyniad leukocyte mewn neffritis nephrotoxic. J Clin Invest 91, 577-587 (1993)

22 Nahas AME: Ffactorau twf a sglerosis glomerwlaidd. Arennau Int 41, Sup 36, S15-S20 (1992)

23 Boyce NW, Holdsworth SR, CD Dijkstra, ac Atkins RC: Meintoli ffagosytau mononiwclear mewnglomerwlaidd mewn glomerwloneffritis arbrofol yn y llygoden fawr gan ddefnyddio gwrthgyrff monoclonaidd penodol. Patholeg 19, 290-293 (1987)

24 Becker GJ, Hancock WW, Stow JL, Glasgow EF, Atkins RC a Thomson NM: Cynnwys macrophage mewn glomerwloneffritis cymhleth imiwnedd cronig arbrofol. Nephron 32, 227-233 (1982) 25 Perkinson DT, Baker PT, Couser WG, Johnson BJ ac Adler S: Membrane ymosodiad dyddodiad cymhleth mewn anaf glomerwlaidd arbrofol. Am J Pathol 120, 121-128 (1985)

26 Alder S, Baker PJ, Johnson RJ, Ochi RF, Pritzl P, a Couser WG: Mae cymhleth ymosodiad pilen ategol yn ysgogi cynhyrchu metabolion ocsigen adweithiol gan gelloedd mesangial llygod mawr diwylliedig. J Clin Invest 77, 762-767 (1986)

27 Johnson RJ, Couser WG, ac Alpers CE: Gall y proteas neutro ffilistin dynol, esteras, a cathepsin G gyfryngu anaf glomerwlaidd in vivo. J Exp Med 168, 1169-1174 (1988)

28 Cybusky AV, Lieberthal W, Quigg RJ, Rennke HG, a Salant DJ: Rôl i thromboxane mewn anaf glomerwlaidd sy'n cyd-fynd â chyfryngu. Am J Pathol 128, 45-51 (1987)

29 Lovett D, Hansch G, Resch K, a Gemsa D: Ysgogi celloedd mesangial glomerwlaidd gan gydrannau cyflenwad terfynol. Ysgogi rhyddhau ffactor prostanoid a rhyngleukin-l-debyg. Imiwnobioleg 168, 34-35 (1986)

30 Mae Torbohm I, Schonermark M, Wingen AM, Berger B, Rother K a Hansch GM: C5b_8 a C5b_9 yn modiwleiddio rhyddhau colagen celloedd epithelial glomerwlaidd dynol. Arennau Int 37, 1098-1104 (1990)

31 Lo SK, Detmers PA, Levin SM, a Wrigh SD: Adlyniad dros dro o niwtroffiliau i'r endotheliwm. J Exp Med 169, 1779 -1793 (1989) 32 Brady HR, Denton MD, Jimenez W, Takata S, Palliser D a Brenner BM: Mae cemoattractants yn ysgogi adlyniad monocyte i gelloedd mesangial dynol ac anaf celloedd mesangial. Arennau Int 42, 480-487 (1992)