Acteoside: Ymchwil ar Weithgaredd Gwrthocsidiol a Gwrthorbwysedd

Cyswllt:joanna.jia@wecistanche.com

Gweithgareddau Gwrthocsidiol A Gwrthorbwyseddol Acteoside A'i Analogau

Chao-Hsiang CHEN1,2, Yin-Shiou LIN3, Mei-Yin CHIEN2,4, Wen-Chi HOU5,6,*, a Miao-Lin HU1,*

Haniaethol. ActeosideMae (Act), glycoside ffenylethanoid, yn gyfansoddyn gweithredol mewn sawl planhigyn a meddyginiaethau llysieuol traddodiadol. Gweithredu ynghyd â'i isomer strwythurol,isoacteoside(Isoact), ac analog, 6-O-acety-lacteoside (6-O-acetylact), eu defnyddio yn yr astudiaeth i ymchwilio i'rgwrthocsidiol, ensym gwrth-angiotensin-trosi (ACE), a gweithgareddau ataliol hemolysismewn vitroa gweithgaredd gwrthhypertensive yn erbyn llygod mawr gorbwysedd digymell (SHR)mewn vivo. Fe wnaethon ni ddangos bod Act, Isoact, a 6-O-acetylact i bob pwrpas yn ysbwriel 1,1-diphenyl-2-radicals picryl-hydrazyl (gydag IC50 yn 11.4, 9.48, a 9.55 μM, yn y drefn honno) a radicalau uwchocsid (gyda IC50 yn 66.0, 38.5. , a 39.1 μM, yn y drefn honno). Fel Isoact a 6-O- roedd gan acetylact weithgareddau radical-scavening tebyg, dim ond Act ac Isoact a ddefnyddiwyd ar gyfer yr astudiaethau canlynol. Roedd Act ac Isoact yn atal gweithgaredd xanthine oxidase gydag IC50 ar 53.3 a 62.2 μM, yn y drefn honno. Roedd Act ac Isoact hefyd yn atal gweithgarwch ACE yn sylweddol a'r hemolysis a achosir gan 2,2'-azo-bis(2-amidinopropane)dihydrochloride, ond roedd effeithiau Act yn gryfach nag Isoact. Yna fe wnaethom roi dos sengl o Act neu Isoact (pwysau corff 10 mg/Kg) i SHR ar lafar a mesur y newidiadau mewn pwysedd gwaed systolig (SBP) a phwysedd gwaed diastolig (DBP) dros 24 h. Dangosodd Act, ond nid Isoact, weithgaredd gwrthhypertensive wrth ostwng SBP a DBP. Mae’r canlyniadau’n awgrymu defnyddioldeb posibl y Ddeddf fel cynnyrch bwyd iechyd ar gyfergwrthocsidiolamddiffyn a rheoleiddio pwysedd gwaed.

Geiriau allweddol: Acteoside; Gweithgarwch gwrthhypertensive; Ensym trosi angiotensin (ACE); Gwrthocsidydd; Hemolysis.

acteosid cynhwysyn gweithredol mewn cistanche

Rhagymadrodd

Acteoside(Act), glycosid ffenylethanoid sy'n cynnwys asid caffeic, 3', 4'-dihydroxy ffenylethanol, glwcos, a rhamnose, ei ynysu gyntaf o flodau oSyringa Vul- garis(Birkofer et al., 1968), ac ynghyd ag isomer strwythurol oisoacteoside(Isoact) a deilliad o6-O-acetylacteoside(6-O-acetylact), wedi'i ddarganfod mewn llawer o blanhigion a meddyginiaethau llysieuol, megisLigstrum purpurascen(Wong et al., 2001),Callicarpa deuoliaeth(Koo et al., 2006; Lee et al., 2006),Cistanche anialwchaBoschniakia rosica(Wu et al., 2006),Scrophularia ningpoenis(Huang et al., 2008),Rehmannia glutinosa(Li et al., 2006). Adroddwyd bod y ddeddf yn dangos gweithgaredd antimetastatig ar gelloedd melanoma B16 mewn modelau llygod C57BL/6 (Ohno et al., 2002). Act, Isoact, a 6-O- dangoswyd bod asetylact yn atal IL-1 -mynegiant actifedig o CAM rhynggellog-1 a CAM fasgwlaidd-1 mewn celloedd endothelaidd gwythiennau bogail dynol (Chen et al., 2009). Mae'r Ddeddf hefyd yn amddiffyn celloedd endothelaidd pwlmonaidd buchol rhag straen ocsideiddiol a achosir gan radical hydroxyl (Chiou et al., 2004) ac yn atal cynhyrchu ocsid nitrig a TNF trwy rwystro actifadu AP-1 mewn macroffagau a ysgogir gan lipopolysaccharid (Rao et al. , 2009). Mae Act ac Isoact yn arddangos gweithgareddau niwro-amddiffynnolmewn vitro(Koo et al., 2005). Roedd Koo et al. (2006) fod Act a'i aglycones i bob pwrpas yn ysbori 1,1-diffenyl-2-picryl-hydrazyl (DPPH) ac ocsid nitrigmewn vitro. Fodd bynnag, ychydig o astudiaethau sydd wedi cymharu ochr yn ochr â'rmewn vitro gwrthocsidiolgweithgareddau Act a'i chyfansoddion sy'n gysylltiedig â strwythur megis Isoact a 6-O- asetylact.

Defnyddiwyd sawl dosbarth o gyfryngau ffarmacolegol i drin pwysedd gwaed uchel (Mark a Davis, 2000). Mae gan un dosbarth o gyffuriau gwrthhypertensive, a elwir yn atalyddion ensymau trawsnewid angiotensin I (ACE) (hy atalyddion peptidase), nifer isel o sgîl-effeithiau andwyol a dyma'r dosbarth gwrth-hypertensive a ffefrir.

asiantau wrth drin cleifion â chlefydau eilaidd cydamserol (Fotherby a Panayiotou, 1999). Mae ACE (peptidyl-dipeptide hydrolase EC 3.4.15.1) yn exopeptidase Zn sy'n rhyddhau dipeptide, sy'n tynnu dipeptide o derfynfa C angiotensin I i ffurfio angiotensin II, cyfansoddyn gorbwysedd iawn. Amrywgwrthocsidiolpeptidau (glutathione llai a pheptidau sy'n gysylltiedig â charnosine) yn arddangos gweithgareddau ataliol ACE (Hou et al., 2003). Datblygwyd yr atalydd ACE llafar gweithredol cyntaf sydd ar gael yn glinigol, captopril, ar gyfer triniaethau gorbwysedd (Ondetti et al., 1977; Borer, 2007). Dywedwyd bod y ddeddf yn cael effeithiau ymlaciol cyfryngol nitrig ocsid ar gylchoedd aortig llawn endotheliwm llygod mawr DC (Wong et al., 2001). Roedd Ahmad et al. (1995) wedi adrodd bod y Ddeddf yn achosi gostyngiad dos-ddibynnol mewn pwysedd gwaed systolig (SBP) a phwysedd gwaed diastolig (DBP) yn dilyn ei chwistrelliad mewnwythiennol i lygod mawr Wistar anesthetaidd normotensive. Fodd bynnag, nid yw'n glir a yw Act a weinyddir ar lafar a/neu ei isomerau cysylltiedig yn wrthhypertensivemewn vivo. Yn yr astudiaeth bresennol, fe wnaethom ymchwilio i'rmewn vitro gwrthocsidiolgallu a gweithgareddau ataliol ACE yn ogystal â'rmewn vivogweithgarwch gwrth-hypertensive Act, Isoact, a/neu 6-O-asetylact gan ddefnyddio'r llygod mawr gorbwysedd digymell (SHRs). Disgwylir i'r astudiaethau hyn ddarparu data defnyddiol ar gyfer datblygu Act fel cynnyrch bwyd iechyd.

Defnyddiau a Dulliau

Defnyddiau

2,2'-azo-bis(2-amidinopropane)deuhydroclorid (AAPH), ACE (uned I, ysgyfaint cwningen), hydroxytoluen biwtylaidd (BHT), DPPH, N-(3-[{{7) Prynwyd }}furyl]acryloyl)-Phe-Gly- Gly (FAPGG), NADH, methosulfate phenazine (PMS), xanthine, a xanthine oxidase gan Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, UDA). Prynwyd Captopril oddi wrth Calbiochem Co. (CA, UDA). Act, Isoact, a 6-O-Asetylact (Ffigur 1) eu prynu oddi wrth Equal Corp (puriaethau > 98 y cant , Shanghai, Tsieina). Daeth cemegau ac adweithyddion eraill o Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, UDA).

Ysgafell gweithgaredd o Act, Isoact, a 6-O- asetylact yn erbyn dPPH radicaliaid gan sbectrophotometreg

Cyfrol (0.3 mL) o Act, Isoact, a 6-O-asetylact (crynnodiadau terfynol oedd 1.56 i 50 µM), BHT ac asid ascorbig (y crynodiadau terfynol oedd 2.4 i 60 µM) wedi'u hychwanegu at 0.1 mL o glustogfa Tris-HCl 1 M (pH 7.9 ) ac yna ei gymysgu â 0.6 mL o 100 µM DPPH mewn methanol i grynodiad terfynol o 60 µM am 20 munud o dan amddiffyniad golau ar dymheredd ystafell (Liu et al., 2004; Lin et al., 2008). Mesurwyd y gostyngiad mewn amsugnedd ar 517 nm a'i fynegi fel ΔA517 nm. Defnyddiwyd dŵr deionized fel arbrawf gwag. Cyfrifwyd gweithgaredd sborion DPPH radical (y cant) gyda'r hafaliad: (ΔA517blank − ΔA517sample) ÷ ΔA517blank × 100. Mae'r IC50 yn sefyll am y crynodiad o hanner ataliad.

Ataliol gweithgaredd o Act a Isoact yn erbyn xanthine ocsidas

Mesurwyd gweithgaredd xanthine oxidase trwy bennu ffurfiad asid wrig ar 295 nm gan ddefnyddio xanthine fel swbstrad (Kalckar, 1947). Roedd y gwahanol symiau o Act ac Isoact (y crynodiadau terfynol yn 25, 50, a 75 µM) wedi'u rhag-gymysgu â 50 μL o 1 mU/mL xanthine oxidase ar 4 gradd am 1 h, ac yna'r 300 μL o 1 mM xanthine eu hychwanegu. Cofnodwyd y newidiadau amsugnedd ar 295 nm dros 2 funud a'u mynegi fel ΔA295 nm/ min. Cyfrifwyd gweithgaredd ataliol xanthine oxidase ( y cant ) fel a ganlyn: (ΔA295 nm/min du − ΔA295 nm/ min sampl) ÷ ΔA295 nm/min du × 100. Defnyddiwyd dŵr deionized yn lle hydoddiant sampl fel arbrawf gwag. Mae IC50 yn sefyll am y crynodiad o hanner ataliad.

Ysgafell gweithgaredd o Act, Isoact, a 6-O- asetylact yn erbyn uwchocsid radicaliaid gan sbectrophotometreg

Cynhyrchwyd y radical superocsid gan y system PMS-NA-DH (Liu et al., 2004; Lin et al., 2008). Pob sampl 0.2 mL, yn cynnwys symiau gwahanol o Act, Isoact, a 6-O-acetylate (y crynodiad terfynol oedd 15.6, 31.3, 62.5, 125, a 250 µM), eu hychwanegu yn eu trefn i 0.2 mL o 630 µM nitroblue tetrazolium, 0.2 ml o 33 µM PMS, a 0.2 ml o 156 µM NADH mewn byffer ffosffad 100 mM (pH 7.4). Defnyddiwyd dŵr deionized yn lle hydoddiant sampl fel arbrawf gwag. Defnyddiwyd asid asgorbig (y crynodiad terfynol oedd 6, 9, 12, a 24 µM) fel rheolydd positif. Cofnodwyd y newidiadau amsugnedd ar 560 nm yn ystod 2 funud a'u mynegi fel ΔA560 nm/min. Cyfrifwyd gweithgaredd sborionu radicalau superoxide (y cant) fel a ganlyn: (ΔA560 nm/min du − ΔA560 nm/min sampl) ÷ ΔA560 nm/min du × 100. Mae IC50 yn sefyll am y crynodiad o hanner ataliad.

penderfyniad o AcE ataliol gweithgaredd o Act a Isoact gan HPLC

Pob 50 µL o Ddeddf (0.2, 0.4, 0.5, a 2.0 µmôl) ac Isoact ({{ 11}}.1, 0.2, 0.5, 1.0, a 2.0 µmole) wedi'u rhag-gymysgu â 15 µL o 1U/mL ACE am 5 munud, ac yna 200 µL o 0.5 mM FAPGG eu hychwanegu a'u hadweithio ar dymheredd ystafell am 10 munud (Anzenbacherova et al., 2001). Ychwanegwyd y methanol 800 µL i atal yr adwaith. Roedd yr arbrawf gwag yn FAPGG yn unig. Yn yr arbrawf rheoli, ymatebodd ACE â FAPGG o dan yr un amodau. Gwahanwyd FAPGG a FAP yn gromatograffig ar system gromatograffig Hitachi (Japan) gyda dolen 10 µL. Perfformiwyd y dadansoddiad HPLC ar golofn Biosil Aqua-ODS-W 5 µ (Biotic Chemical Co, Ltd., Taiwan, 250 × 4.6 mm id), maint gronynnau 5 µm. Gwahanwyd y cymysgedd a adweithiwyd yn isocrataidd gyda chyfnod symudol yn cynnwys 0.02 M nonylamine (wedi'i addasu i pH 2.4 gydag asid ffosfforig) ac acetonitrile mewn cymhareb o 67.5: 32.5 (V / V) (Anzenbacherova et al., 2001). Y gyfradd llif oedd 1 mL/munud; y cyfaint pigiad oedd 10 µL; gosodwyd y synhwyrydd ar 345 nm. Cyfrifwyd yr ataliadau ACE ( y cant ) o Ddeddf ac Isoact fel a ganlyn: [(Ardal FAPGGblank − Ardal rheoli FAPGG) − (Ardal FAPGGblank − Arwynebedd y sampl FAPGG) ÷ (Ardal FAPGGblank - Arwynebedd rheolaeth FAPGG) × 100.

Ataliol gweithgaredd o Act a Isoact yn erbyn AAPH-gyfryngol hemolysis

Ocsidiad cadwyn radical rhydd o gelloedd gwaed coch llygod mawr (RBC) trwy hemolysis wedi'i gyfryngu gan AAPH (Miki et al., 1987). Rhoddwyd gwaed llygod mawr mewn tiwbiau heparinedig a'i allgyrchu ar 1000 ×gam 10 mun. Ar ôl cael ei olchi gyda 0.15 M NaCl deirgwaith, cafwyd y RBC llawn trwy allgyrchiad ar 1000 ×gam 10 mun. Roedd y symiau gwahanol o Act ac Isoact (y crynodiadau terfynol yn 2, 5, a 10 µM) yn gymysg 25 μL o 20 y cant o ataliad RBC (V / V, mewn 10 mM PBS) a 25 μL o hydoddiant AAPH 500 mM ar 37 gradd ar gyfer 0 , 1, 1.5, 2, 2.5, 3, a 3.5 h ag ysgwyd ysgafn. Cafodd pob cymysgedd ei allgyrchu ar 1000 ×gam 10 mun, a mesurwyd y supernatant yn 536 nm. Defnyddiwyd dŵr deionized yn lle hydoddiant AAPH neu hydoddiant sampl, yn y drefn honno, fel grŵp gwag neu fel grŵp rheoli. Cyfrifwyd yr ataliad hemolysis (y cant) ofAct ac Isoact ar 3 h neu ar 3.5 h fel a ganlyn: (ΔA536 nmcontrol − ΔA536 nmsample) ÷ ΔA536 nmcontrol × 100.

Gwrth-hypertensive effeithiau o Act a Isoact ymlaen SHr

Penderfynwyd ar effeithiau Deddf, Isoact, a captopril a weinyddir ar lafar trwy diwb bwydo (2.0 × 80 mm) ar y SBP llai a'r DBP llai yn unol â dull adroddiadau blaenorol (Lin et al., 2006; Lin et al., 2008; Han et al., 2011). Roedd yr holl weithdrefnau arbrofol ar anifeiliaid yn dilyn canllawiau cyhoeddedig (Cyngor Gwyddoniaeth Cenedlaethol, 1994). Roedd y SHRs gwrywaidd (8 wythnos oed, Canolfan Anifeiliaid y Labordy Cenedlaethol, Taipei) yn cael eu cadw'n unigol mewn cewyll dur a gadwyd ar 24 gradd gyda chylch tywyll golau 12-h ac roedd ganddynt fynediad am ddim i chow llygoden / llygoden fawr ( Prolab RMH2500, 5P14 Diet, PMI Nutrition International, Brentwood, MO) a dŵr. Rhannwyd SHRs ar hap yn driniaethau rheoli a sampl ar gyfer penderfyniadau SBP a DBP (chwe llygoden fawr fesul grŵp). Ar gyfer arbrawf gwrthhypertensive tymor byr, rhoddwyd 0.5 mL o Ddeddf 10 mg neu Iso-act/Kg o SHR neu 5 mg captopril/Kg o SHR ar lafar unwaith, a mesurwyd pwysedd gwaed y gynffon yn 2, 4, 6, a 24 h ar ôl un weinyddiaeth lafar. Defnyddiwyd y dŵr distyll 0.5 ml ar gyfer arbrawf gwag. Defnyddiwyd mesurydd pwysedd gwaed anuniongyrchol (BP-98A, Softron Co. Ltd. Tokyo, Japan) i fesur SBP a DBP bedair gwaith ar bob penderfyniad ar gyfer pob triniaeth.

data dadansoddi

Cyflwynir gwerthoedd fel modd ± DC a'u dadansoddi gan ddefnyddio ANOVA unffordd, wedi'i ddilyn gan brawf post hoc Tukey ar gyfer cymariaethau cymedrig lluosog. Y myfyrwyrt-perfformiwyd prawf, pan gymharwyd dau grŵp o ddata yn unig (fel rhwng Act ac Isoact ar yr un crynodiad). Ystyrir bod gwerth-p < 0.05="" yn="" ystadegol="" arwyddocaol.="" perfformiwyd="" y="" dadansoddiad="" ystadegol="" gan="" ddefnyddio="" spss="" ar="" gyfer="" windows,="" fersiwn="" 10="" (spss,="" inc.,="" chicago,="" il,="">

acteosidmewn cistanche i wella cof

Canlyniadau

Ysgafell gweithgaredd o PPH a uwchocsid radicaliaid

Act, Isoact, a 6-O- Arddangosodd asetylact weithgareddau sborion DPPH sy'n dibynnu ar ddos ​​ar pH 7.9 (Ffigur 2). Y gwerthoedd IC50 oedd 11.4, 9.48, a 9.55 µM, yn y drefn honno, ar gyfer Act, Isoact, a 6-O-asetylact. Gwerthoedd IC50 rheolyddion positif asid asgorbig a BHT oedd 13.1 a 18.5 µM, yn y drefn honno.

Gwaharddiad o xanthine ocsidas gweithgaredd

Dangoswyd bod Act ac Isoact yn arddangos ataliad dos-ddibynnol o xanthine oxidase (Ffigur 3). Cyfrifwyd yr IC50 i fod yn 53.3 a 62.2 µM, yn y drefn honno, ar gyfer Act ac Isoact.

Gwaharddiad o uwchocsid digyfnewid gweithgaredd

Oherwydd bod Act ac Isoact yn atal gweithgaredd xanthine oxidase, fe wnaethom ddefnyddio'r system PMS-NADH i gynhyrchu radicalau uwchocsid (Liu et al., 2004; Lin et al., 2008). Act,

Isoact, a 6-O-Asetylact arddangos gweithgareddau sborionu radical superoxide dos-ddibynnol (Ffigur 4). Gwerthoedd IC50 oedd 66.0, 38.5, a 39.1 µM, yn y drefn honno, ar gyfer Act, Isoact, a 6-O-asetylact. Gwerthoedd IC50 rheolaeth bositif ar asid asgorbig oedd 9.0 µM. O ganlyniadau Ffigurau 2 a 4, roedd yn amlwg bod Isoact a 6-O- roedd gan asetylate weithgareddau chwilota radical tebyg yn erbyn radicalau DPPH a superoxide, ac felly dim ond Act ac Isoact a ddewiswyd ar gyfer dangosiadau gweithgaredd biolegol pellach.

AcE ataliol gweithgareddau o Act a Isoact

Yn y prawf rhagarweiniol, canfuom fod Act ac Isoact yn ymyrryd ag amsugnedd y swbstrad ACE FAPGG a'i gynnyrch hydrolyzed FAP ar 345 nm fel y'i defnyddiwyd ar gyfer assay sbectrophotometrig parhaus (Holmquist et al., 1979). Felly, defnyddiwyd y gwahaniad ynghyd â chanfod Act neu Isoact a FAPGG gan HPLC i fonitro gweithgareddau ataliol ACE. Mae Ffigur 5A i Ffigur 5D yn gromatogramau HPLC nodweddiadol o gymysgeddau adwaith 10 µl o brawf gwag (FAPGG yn unig, Ffigur 5A); prawf rheoli (ail-actiodd ACE gyda FAPGG i gynhyrchu FAP, Ffigur 5B); 0.5 µmôl o Ddeddf (312.5 µg), ACE a FAPGG (Ffigur 5C); a 0.5 µmole o Isoact (312.5 µg), ACE a FAPGG (Ffigur 5D). Arwynebedd FAPGG yn Ffigur 5B oedd yr isaf a'r ardal yn Ffigur 5A oedd yr uchaf o bedwar cromatogram HPLC nodweddiadol. Mae meysydd FAPGG yn Ffigurau 5C a 5D yn dibynnu ar weithgareddau ataliol ACE mewn gwahanol grynodiadau o Act ac Isoact. Dangosir ataliadau ACE a gyfrifwyd o Act ac Isoact yn Ffigur 5E. Dangosodd y ddeddf weithgareddau ataliol ACE uwch nag Isoact, a chyfrifwyd bod yr IC50 o'r cyntaf yn 472 µM fesul arwynebedd yn y cromatogramau HPLC.

Ataliol gweithgaredd o Act a Isoact yn erbyn AAPH-gyfryngol hemolysis

Gwerthuswyd gweithgareddau ataliol Act ac Isoact yn erbyn hemolysis wedi'i gyfryngu gan AAPH mewn crynodiadau o 2, 5, a 10 µM dros 3.5 h (Miki et al., 1987). Mae canlyniadau Ffigur 6A yn dangos bod yr hemolysis mewn llygod mawr RBC wedi cynyddu'n ddramatig (yn mynegi fel ΔA536 nm) ar ôl 3-h neu 3.5-h adweithiau ym mhresenoldeb radicalau AAPH (fel grwpiau rheoli, symbol cylch gwyn). ). Ychydig iawn o hemolysis a welwyd, os o gwbl, yn absenoldeb radicalau AAPH yn ystod yr adwaith 3.5-h (fel grwpiau gwag, symbol cylch du). Felly, cyfrifwyd ataliad hemolysis Act ac Isoact ar 3 h neu ar 3.5 h fel a ganlyn: (ΔA536 nmcontrol − ΔA536 nmsample) ÷ ΔA536 nmcontrol × 100. Ffigur 6B

yn dangos bod Act ac Isoact ar 2, 5 a 10 µM wedi dangos ataliad canolbwyntio-ddibynnol ar hemolysis a achosir gan AAPH, gydag effeithiau ataliol Act yn sylweddol gryfach na rhai Isoact ym mhob crynodiad a ddefnyddiwyd.

Gwrth-hypertensive effeithiau o Act a Isoact ymlaen SHr

Derbyniodd SHRs un weinyddiaeth lafar o Act ac Isoact (10 mg/Kg SHR), a chofnodwyd newidiadau mewn SBP a DBP dros 24 h. Fe wnaethom adrodd yn flaenorol bod pwysedd gwaed (SBP a DBP) SHR yn newidiol yn ystod 24-h (Lin et al., 2006; Han et al., 2011). Felly, defnyddiwyd cymhariaeth ar amser penodol (fel 2, 4, 6, 8, a 24 h) rhwng gwag a sampl yn lle cyn ac ar ôl gweinyddiaeth lafar ei hun. Canfuwyd bod Act, ond nid Isoact, i bob pwrpas wedi lleihau SBP a DBP o SHR o gymharu â'r grŵp gwag (dŵr distyll). Gostyngwyd SBP yn sylweddol yn y grŵp Deddf yn 2, 4, a 6 h gan 18.8, 16.5, a 14.9 mmHg, yn y drefn honno, ond nid oedd gostyngiad SBP (3.3 mmHg) ar 24 h ar ôl triniaeth Ddeddf yn sta-

yn artistig arwyddocaol (Ffigur 7A). Fel y dangosir yn Ffigur 7B, gostyngwyd DBP yn y grŵp Deddf ar 2, 4 a 6 h (o 8.5, 7.6, a 12.0 mmHg, yn y drefn honno), er mai dim ond y canlyniad a gafwyd ar 6 h oedd yn ystadegol arwyddocaol (P< 0.05).="" nodwyd="" bod="" act="" a="" captopril="" (fel="" rheolaeth="" gadarnhaol)="" yn="" cael="" effeithiau="" tebyg="" ar="" sbp="" yn="" y="" camau="" cynnar="" (2,="" 4,="" a="" 6="" h)="" ar="" ôl="" gweinyddiaeth="">

acteosidmewn cistanche yn cael effeithiau da ar gwrthocsidiol

TRAFODAETH

Mae rhywogaethau ocsigen gweithredol ac adweithiau radical-gyfryngol rhydd yn ymwneud â phrosesau dirywiol neu patholegol megis heneiddio, canser, clefyd coronaidd y galon, a chlefyd Alzheimer (Ames, 1983; Gey, 1990; Smith et al., 1996). Mae sawl adroddiad wedi canolbwyntio ar sgrinio'rgwrthocsidiolgweithgareddau o adnoddau naturiol. Yn yr astudiaeth bresennol, gwnaethom yn gyntaf gymharu'rgwrthocsidiolgweithgareddau Act, Isoact, a 6-O-asetylate. Isomers adeileddol yw Act ac Isoact lle mae cyfansoddyn moiety asid caffeic wedi'i fondio â'r grŵp C-4 hydroxyl o glwcos yn y cyntaf ac â'r grŵp C-6 hydrocsyl o glwcos yn yr olaf. Tra bod cyfansoddion rhamnose a 3',4'- dihydroxy phenyl ethanol, yn y drefn honno, wedi'u bondio â'r grwpiau hydrocsyl C-3 a C-1 o'r moiety glwcos yn yr un moleciwl Act ac Isoact, { {8}}O-acetylact yn ddeilliad Deddf lle mae asid asetig wedi'i fondio i'r grŵp C-6 hydrocsyl yn y moiety glwcos (Ffigur 1). Roedd Koo et al. (2006) fod Act a'i aglycones yn arddangos gweithgareddau chwilota DPPH, a threfn y gweithgareddau hyn (a fynegir fel IC50) oedd Deddf (1.28 µM) > asid caffeic (2.22 µM) > 3',4'-dihydroxy ffenyl ethanol ( 7.72 µM) > -tocopherol (15.1 µM). Yn yr adroddiad presennol (Ffigur 2), trefn gweithgareddau sborion DPPH (a fynegir fel IC50) yw 6-O-asetylate (9.55 µM) ≈ Isoact (9.48 µM) > Deddf (11.4 µM). Roedd y gwerthoedd hyn yn debyg neu'n well na rhai asid asgorbig (IC50 o 13.1 µM) a BHT (IC50 o 18.5 µM) ar gyfer sborionu radicalau DPPH. Gallai’r IC50 Deddf uwch yn yr adroddiad presennol ddod o’r crynodiad terfynol o 60 µM DPPH yn lle 30 µM a ddefnyddiwyd o Koo et al. adroddwyd (2006). Gan fod dywediad radical DPPH yn perthyn i'r adwaith trosglwyddo electron (Huang et al., 2005), dyfalir bod y deilliad mewn grŵp hydrocsyl C-6 o'r moiety glwcos, megis grŵp asetyl yn {{21} }}O- gall lleithder asetylad ac asid caffeic mewn Isoact, ddarparu adwaith trosglwyddo electron yn haws na'r rhai o'r grŵp hydrocsyl rhydd C-6 yn y moiety glwcos of Act ar gyfer y prawf sborion DPPH.

Gweithred, 6-Oadroddwyd bod -acetylate ac Isoact yn meddu ar weithgaredd sborion superoxide in vitro gan ddefnyddio'r system xanthine/xanthine oxidase i gynhyrchu radicalau superoxide (Wang et al., 1996; Gao et al., 1999). Fodd bynnag, nododd ein hastudiaeth bresennol fod Act yn arddangos gweithgareddau ataliol xanthine oxidase (Ffigur 3). Felly, cynhyrchwyd y radical superoxide trwy ddefnyddio'r system PMS-NADH yn yr adroddiad presennol (Liu et al., 2004; Lin et al., 2008) yn lle'r system xanthine/xanthine oxidase. Yn wir, gan ddefnyddio'r system xanthine/xanthine oxidase i gynhyrchu radicalau superoxide, mae Wang et al. (1996) wedi cael Deddf IC50 o 63 µM yn erbyn radicalau superoxide, ac mae'r gwerth hwn yn agos at y gwerth ar gyfer atal gweithgaredd xanthine oxidase trwy Ddeddf, fel yr adroddwyd yn yr astudiaeth bresennol (53.3 µM). Adroddwyd bod asid caffeic yn arddangos gweithgareddau ataliol xanthine oxidase (Chiang et al., 1994). Gellir dyfalu y gallai fod gan y gweithgareddau chwilota uwchocsid gan ddefnyddio system cynhyrchu xanthine/xanthine oxidase o rai ffytogemegau â strwythurau sy'n gysylltiedig ag asidau caffeig, megis Act neu Isoact (Wang et al., 1996; Gao et al., 1999). wedi'i gyfrannu, yn rhannol o leiaf, ar ataliadau xanthine oxidase. Yn ddiddorol, Wang et al. (1996) nad oedd Deddf (0.5 a 2.5 mM) yn atal gweithgaredd xanthine oxidase a bennwyd gan electrod ocsigen ar gyfer defnydd ocsigen yn ystod ocsidiad xanthine. Felly, mae'n bwysig cofio y gall gwahanol ddulliau ar gyfer asesu gweithgaredd sborion superocsid gynhyrchu data gwrth-ddweud.

Mae Li et al. (1993) wedi nodi graddau tebyg o ataliad Deddf ac Isoact yn erbyn hemolysis wedi'i gyfryngu gan AAPH yn RBC llygod. Fodd bynnag, fe wnaethom ddangos yma fod Act yn arddangos llawer uwch o weithgaredd ataliol yn erbyn hemolysis a achosir gan AAPH yn RBC llygod mawr nag a wnaeth Isoact (Ffigur 6). Nid yw'n glir a allai anghysondeb o'r fath fod oherwydd y gwahaniaeth mewn rhywogaethau cnofilod.

Mae Kang et al. (2003) fod Act yn arddangos gweithgareddau ataliol ACE, a bod yr IC50 yn 373.3 µg/mL a gyfrifwyd i fod yn 598 µM gan ddefnyddio Hip-His-Leu fel swbstradau. Yn yr adroddiad presennol, dangosodd y Ddeddf weithgareddau ataliol ACE uwch nag a wnaeth Isoact, a chyfrifwyd bod yr IC50 o’r cyntaf yn 472 µM fesul arwynebedd yn y cromatogramau HPLC (Ffigur 5). Adroddwyd bod y ddeddf yn cael effeithiau ymlaciol cyfryngol nitrig ocsid ar gylchoedd aortig endotheliwm-cyfan o lygod mawr DC (Wong et al., 2001). Er y dangoswyd bod Act yn wrthhypertensive mewn llygod mawr Wistar,

defnyddiodd yr astudiaeth chwistrelliad mewnwythiennol o Act i lygoden fawr anesthetaidd er mwyn diystyru'r ffactor arsugniad (Ahmad et al., 1995). Yma, fe wnaethom weinyddu Act ar lafar i SHRs a phennu newidiadau mewn pwysedd gwaed. Canfuom fod y ffaith gweinyddiaeth lafar, ond nid Isoact, yn arddangos effeithiau gwrthhypertensive trwy ostwng SBP a DBP dros 24 awr ar ôl un weinyddiaeth (Ffigur 7). Cafodd gweithred ar ddogn o 10 mg/kg o bwysau'r corff effaith sy'n agos at yr un o captopril yn y dos o 5 mg/kg SHR wrth ostwng SBP ac roedd yn well na captopril wrth ostwng DBP.

I gloi, arddangosodd Actgwrthocsidiolgweithgareddau, gweithgareddau ataliol ACE, ac effeithiau gwrthgorbwysedd ar SHRs. Bydd y canlyniadau a gyflwynir yma o fudd i'r ymdrech i ddatblygu meddyginiaethau llysieuol neu gynhyrchion cysylltiedig gan ddefnyddio'r Ddeddf, sydd wedi'i ganfod mewn llawer o blanhigion a meddyginiaethau llysieuol, ar gyfer amddiffyniad gwrth-ocsidydd ac effeithiau therapiwtig yn y dyfodol.

Cistancheacteosidar gyfer gwrthocsidiad a gwrth-heneiddio

1 Adran Gwyddor Bwyd a Biotechnoleg, Prifysgol Genedlaethol Chung Hsing, Taichung, Taiwan

2Ko Da Fferyllol Co., Ltd, Tao-Yuan, Taiwan

3Ysgol Fferylliaeth, Prifysgol Feddygol Taipei, Taipei, Taiwan

Sefydliad 4Graduate Deunyddiau Biofeddygol a Pheirianneg, Prifysgol Feddygol Taipei, Taipei, Taiwan

5 Canolfan Ymchwil Meddygaeth Lysieuol Traddodiadol, Ysbyty Prifysgol Feddygol Taipei, Taipei, Taiwan

6Sefydliad Ffarmacognosy Graddedig, Prifysgol Feddygol Taipei, Taipei, Taiwan

(Derbyniwyd 12 Mawrth, 2012; Derbyniwyd 20 Ebrill, 2012)

LLENYDDIAETH A DYNODWYD

Ahmad, M., GH Rizwani, K. Aftab, VU Ahmad, AH Gilani, a SP Ahmad. 1995.Acteoside: cyffur gwrthhypertensive newydd. Phytother. Res. 9: 525-527.

Ames, BN 1983. Carsinogenau dietegol ac anticarsinogenau: radicalau ocsigen a chlefydau dirywiol. Gwyddoniaeth 221:1256-1264.

Anzenbacherova, E., P. Anzenbacher, K. Macek, a J. Kvetina. 2001. Pennu atalyddion ensym (angiotensin convertase) yn seiliedig ar adwaith ensymatig ac yna HPLC.J. Fferyllfa. Biomed. Rhefrol. 24: 1151-1156.

Birkofer, L., C. Kaiser, ac U. Thomas. 1968.Acteosidea neoacteoside: Zuckerester aus Syringa vulgaris. Naturforsc- hongian 23B: 1051-1058.

Borer, JS 2007. Ataliad ensymau sy'n trosi angiotensin: datblygiad nodedig mewn triniaeth ar gyfer clefydau cardiofasgwlaidd. Eur. Calon J. Suppl. 9(Suppl. E): E2-E9.

Chen, CH, TY Song, YC Liang, ac ML Hu. 2009.Acteosideac 6-Mae O-acetylacteoside yn dadreoleiddio moleciwlau adlyniad celloedd a achosir gan IL-1 trwy ataliad o ERK a JNK mewn celloedd endothelaidd fasgwlaidd dynol. J. Amaeth. Bwyd

Cemeg. 57: 8852-8859.

Chiang, HC, YJ Lo, a FJ Lu. 1994. Atalyddion Xanthine oxidase o ddail Alsophila spinulosa (Hook) Tryon. J. Ataliad Ensym. 8: 61-71.

Chiou, WF, LC Lin, a CF Chen. 2004.Acteosideyn amddiffyn celloedd endothelaidd rhag straen ocsideiddiol a achosir gan radicalau rhydd. J. Pharm. Ffarmacol. 56: 743-748.

Fotherby, MD a B. Panayiotou. 1999. Therapi gwrthhypertensive i atal strôc: beth, pryd, ac i bwy? Cyffuriau 58: 663-674.

Gao, JJ, K. Igalashi, ac M. Nukina. 1999. Gweithgaredd chwilota radical o glycosidau ffenylpropanoid yn Caryopteris incana. Biosci. Biotechnol. Biocemeg. 63: 983-988.

Gey, KF 1990. Mae'rgwrthocsidiolrhagdybiaeth o glefyd cardiofasgwlaidd: epidemioleg a mecanweithiau. Biocemeg. Soc. traws. 18: 1041-1045.428 Botanical Studies, Vol. 53, 2012

Han, CH, JC Liu, KH Chen, YS Lin, CT Chen, CT Fan, HL Lee, DZ Liu, a WC Hou. 2011. Gweithgareddau gwrthhypertensive garlleg wedi'i brosesu ar lygod mawr gorbwysedd digymell a bodau dynol gorbwysedd. Bot. Bridfa. 52: 277-283.

Holmquist, B., P. Bunning, a JF Riordan. 1979. Assay sbectrophotometrig parhaus ar gyfer ensym trosi angiotensin. Rhefrol. Biocemeg. 95: 540-548.

Hou, WC, HJ Chen, ac YH Lin. 2003. Peptidau gwrthocsidiol gyda gweithgareddau ataliol ensymau sy'n trosi angiotensin a chymwysiadau ar gyfer puro ensymau sy'n trosi angiotensin. J. Amaeth. Cemegydd Bwyd. 51: 1706-1709.

Huang, D., B. Ou, ac RL Prior. 2005. Y cemeg y tu ôlgwrthocsidiolprofion gallu. J. Amaeth. Cemegydd Bwyd. 53: 1841-1856.

Huang, CG, YJ Shang, J. Zhang, JR Zhang, WJ Li, a BH Jiao. 2008. Effeithiau hypowresmig glycosidau ffenylpropanoidacteosido Scrophularia ningpoenis ar lefelau asid serwm wrig mewn llygod potasiwm ocsonad-drin. Amer. J.

Gên. Med. 36: 149-157.

Lee, KY, EJ Jeong, HS Lee, ac YC Kim. 2006.Acteosideo Callicarpa dichotoma yn gwanhau namau cof a achosir gan scopolamine. Biol. Pharm. Tarw. 29: 71-74.

Li, J., P. Wang, R. Zheng, Z. Liu, a Z. Jia. 1993. Amddiffyn glycosidau ffenylpropanoid rhag Pedicularis rhag hemolysis ocsideiddiol in vitro. Med Planta. 59: 315-317.

Li, H., GX Chou, ZT Wang, a ZB Hu. 2006. HPLC i derfynuacteosidyn Radix Rehmanniae. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi 31: 822-824.

Lin, SY, CC Wang, YL Lu, WC Wu, a WC Hou. 2008.Gwrthocsidydd, gwrth-semicarbazide-sensitif amin oxidase, a gweithgareddau gwrth-hypertensive o geraniin ynysig o Phyllanthus urinaria. Cemegydd Bwyd. Gwenwynig. 46: 2485-2492.

Liu, DZ, YS Lin, a WC Hou. 2004. Monohydroxamates o asid aspartic ac asid glutamic arddangosgwrthocsidiola gweithgareddau atal ensymau sy'n trosi angiotensin. J. Agric.Food Chem. 52: 2386-2390.

Kalckar, HM 1947. Sbectrophotometreg gwahaniaethol cyfansoddion purin trwy gyfrwng ensym penodol. J. Biol. Cemeg.167: 429-443.

Kang, DG, YS Lee, HJ Kim, YM Lee, a HS Lee. 2003. Angiotensin-trosi ensym glycosidau ffenylpropanoid ataliol o Clerodenron trichotomum. J. Ethnopharmacol. 89: 151-154.

Koo, KA, SH Sung, JH Park, SH Kim, KY Lee, ac YC Kim. 2005. Gweithgareddau niwro-amddiffynnol in vitro o glycosidau ffenylethanoid o Callicarpa dichotoma. Planta Med.71: 778-780.

Koo, KA, SH Kim, TH Oh, ac YC Kim. 2006.Acteosideac mae ei aglycones yn amddiffyn diwylliannau sylfaenol celloedd cortigol llygod mawr rhag excitotoxicity a achosir gan glwtamad. Gwyddor Bywyd. 79:709-716.

Lin, CL, SY Lin, YH Lin, a WC Hou. 2006. Effeithiau protein storio cloron iam (Dioscorea alata cv. Tainong Rhif 1) a'i hydrolysadau peptig ar lygod mawr gor-denus yn ddigymell. J. Sci. Bwyd Amaeth. 86: 1489-1494.

Mark, KS a TP Davis. 2000. Strôc: datblygu, atal a thrin ag atalyddion peptidase. Peptidau 21:1965-1973.

Miki, M., H. Tamai, M. Mino, Y. Yamamoto, ac E. Niki. 1987. Ocsidiad cadwyn radical rhad ac am ddim o gelloedd gwaed coch llygod mawr gan ocsigen moleciwlaidd a'i ataliad gan -tocopherol. Arch Biochem. Bioffys. 258: 373-380.

Cyngor Gwyddoniaeth Cenedlaethol. 1994. Canllaw ar gyfer gofalu am anifeiliaid labordy a'u defnyddio. Cyngor Gwyddoniaeth Cenedlaethol, Taiwan.

Ohno, T., M. Inoue, Y. Ogihara, ac I. Saracoglu. 2002. Mae gweithgaredd gwrth-fetastatig oacteosid, mae glycoside ffenylethanoid.Biol. Pharm. Tarw. 25: 666-668.

Vendetti, MA, B. Rubin, DW Cushman. 1977. Dyluniad atalyddion penodol ensym trosi angiotensin: dosbarth newydd o gyfryngau gwrthhypertensive sy'n weithredol yn y geg. Gwyddoniaeth 196: 441-444.

Rao, YK, SH Fang, SC Hsieh, TH Yeh, ac YM Tzeng. 2009. Cyfansoddiadau Anisomeles India a'u gweithgareddau gwrthlidiol. J. Ethnopharmacol. 121: 292-296.

Smith, MA, G. Perry, PL Richey, LM Sayre, VE Anderson, MF Beal, ac N. Kowal 1996. Difrod ocsideiddiol yn Alzheimer's. Natur 382: 120-121.Wang, P., J. Kang, R. Zheng, Z. Yang, J. Lu, J. Gao, a Z. Jia.

1996. Effeithiau chwilota ffenylpropanoid glycoside o Pedicularis ar superoxide anion a hydroxyl radical trwy'r dull trapio sbin. Biocemeg. Ffarmacol. 51: 687- 691.

Wong, IYF, Y. Huang, ZD He, CW Lau, a ZY Chen. 2001. Effeithiau ymlaciol echdynnu Ligstrum purpurascens a'u puroacteosidmewn modrwyau aortig llygod mawr. Med Planta. 67:317-321.

Wu, YT, LC Lin, JS Sung, a TH Tsai. 2006. Penderfynuacteosidyn Cistanche deserticola a Boschniakia rossica a'i ffarmacocineteg mewn llygod mawr sy'n symud yn rhydd gan ddefnyddio LC-MS/MS. J. Chromatogr. B 844: 89-95.