Mae Lefel Ymarfer Corff Priodol yn Gwanhau Dysbiosis Perfedd Ac Asid Valerig i Wella Niwroplastigedd A Gweithrediad Gwybyddol Ar ôl Llawdriniaeth mewn Llygod Rhan 4

Proffilio microbiota perfedd

Casglwyd feces ffres o lygod ar gyfer proffilio microbiota perfedd. Roedd llygod yn cael eu gosod yn unigol mewn cawell awtoclaf ar gyfer casglu feces a chaniatawyd iddynt ymgarthu'n rhydd. Casglwyd feces ar unwaith yn y tiwbiau Eppendorf di-haint ar rew sych ac yna eu storio ar −80 gradd nes eu prosesu ymhellach. Echdynnwyd DNA bacteria gyda phecyn ynysu pridd DNA Power Lyzer Power yn unol â'n protocolau blaenorol [11].

Mae ymchwil diweddar yn dangos bod microbiome y perfedd yn cael effaith bwysig iawn ar ein cof. Yn union, gall bacteria ym microbiota'r perfedd ddylanwadu ar system nerfol yr ymennydd dynol, a thrwy hynny newid ei swyddogaeth cof. Mae hwn yn ganfyddiad syfrdanol oherwydd mae'n golygu y gallwn wella ein cof trwy newid microbiome ein perfedd.

Felly, fel rhywun sy'n ceisio gwella eu cof, beth allwch chi ei wneud i wella microbiome eich perfedd? Mae'r ateb yn syml: canolbwyntio ar ddeiet cytbwys. Mae diet cytbwys nid yn unig yn helpu i reoleiddio cydbwysedd microbiota eich perfedd ond hefyd yn gwella pob agwedd ar weithrediad y corff.

Yn gyntaf, mae angen inni ganolbwyntio ar ddeiet amrywiol sy'n llawn ffibr dietegol. Gall diet â llawer o ffibr helpu i gynnal amrywiaeth microbiome eich perfedd, ffactor allweddol wrth hybu iechyd da. Ar yr un pryd, mae angen inni hefyd sicrhau ein bod yn bwyta digon o brotein o ansawdd uchel a brasterau iach yn ein prydau. Gall y maetholion hyn hyrwyddo swyddogaeth cof a dargludiad nerfau.

Yn ogystal, gall ymarfer corff rheolaidd a lleihau straen hefyd hyrwyddo cydbwysedd ac amrywiaeth ym microbiome y perfedd. P'un a yw'n anadlu'n ddwfn, yn fyfyrio, neu'n ymarfer yoga, mae'r rhain i gyd yn ffyrdd effeithiol o leihau straen. Gall ymarfer corff wella cyfangedd berfeddol, cynyddu bywiogrwydd berfeddol, a hyrwyddo dadwenwyno cylchol, a thrwy hynny helpu i hyrwyddo cydbwysedd ac amrywiaeth microbiota berfeddol.

Ar y cyfan, dylem ganolbwyntio nid yn unig ar ein diet a'n hiechyd corfforol ond hefyd ar ein microbiota perfedd. Gall newid ein harferion bwyta a lleihau straen hybu cydbwysedd ac amrywiaeth ym microbiota ein perfedd, a all ein helpu i wella cof a gweithrediad y system nerfol. Felly, gadewch i ni dalu sylw i iechyd ein perfedd gyda'n gilydd a gwella ein cof a ffitrwydd corfforol!

Gellir gweld bod angen i ni wella cof, a gall Cistanche deserticola wella cof yn sylweddol oherwydd bod Cistanche deserticola yn ddeunydd meddyginiaethol Tsieineaidd traddodiadol sydd â llawer o effeithiau unigryw, ac un ohonynt yw gwella cof. Daw effeithiolrwydd Cistanche deserticola o'r nifer o gynhwysion gweithredol sydd ynddo, gan gynnwys asid tannig, polysacaridau, glycosidau flavonoid, ac ati. Gall y cynhwysion hyn hybu iechyd yr ymennydd mewn amrywiaeth o ffyrdd.

Cliciwch gwybod ffyrdd o wella gweithrediad yr ymennydd

Paratowyd llyfrgelloedd dilyniannu'r rhanbarth V3-V4 gor-amrywiol yn unol â chyfarwyddiadau system Illumina MiSeq. Yn gryno, defnyddiwyd 12.5 ng DNA fel templed DNA ar gyfer yr 16 S rRNA PCR cyntaf. Roedd y preimwyr a ddefnyddiwyd fel a ganlyn: F: 5′-TCGTCGGCAGCGTCAGATTGTTAAGAGACAGCCTACGGGNGGCWGCAG-3′ac R: 5′-GTCTCGTGGGCTCGGAGATGTTAAGAGACAGGACTACHVGGGTATCTAATCC-3′.
Yna cafodd yr amplicons eu glanhau â gleiniau AMPure XPmagnetic ac yna eu defnyddio ar gyfer Mynegai PCR trwy ddefnyddio Pecyn Nextera XTIndex. Defnyddiwyd pecyn assay Qubit dsDNA HS a TapeStation D1000ScreenTape sensitifrwydd uchel (Agilent, Blacksburg, VA, UDA) i fesur crynodiadau cynhyrchion PCR a normaleiddio'r swm ar gyfer paratoi llyfrgell.

Gweithredwyd dilyniannu ar becyn adweithydd Illumina MiSeq ganMiSeq v2 (500 o gylchoedd). Dadansoddwyd data gyda llif gwaith Metagenomics meddalwedd MiSeqReporter v2.5.1.3 (Illumina, San Diego, CA, UDA). Cafwyd y darlleniadau hir gyda rhanbarthau amrywiol iawn.

Cafodd y darlleniadau yr oedd eu sgôr phred ar gyfartaledd yn y ffenestr (5 bp mewn maint, hyd cam 1 bp) yn llai nag 20 eu tocio. trefnwyd dilyniannau o ansawdd uchel heb chimeras yn ôl digonedd o fawr i fach ac yna clystyrwyd gyda thebygrwydd o 97% i Unedau Tacsonomaidd Gweithredol (OTU). Ystyriwyd bod pob OTU yn cynrychioli rhywogaeth. Er mwyn osgoi gwyro'r dadansoddiad a achoswyd gan y gwahanol feintiau o ddata dilyniannu samplau, mewnbynnu'r nifer o Reads to OTU yn ôl y nifer dilyniant lleiaf a gyfatebwyd i OTU pan oedd y dyfnder dilyniant yn ddigonol. Dadansoddwyd amrywiaeth Alpha trwy lefelu ar hap.

Tynnwyd ARead o bob OTU fel dilyniant cynrychioliadol. Cymharwyd y dilyniant cynrychioliadol â chronfa ddata prosiect y gronfa ddata ribosomaidd. Dosbarthwyd rhywogaethau ar gyfer pob OTU, a chafwyd digonedd o rywogaethau ar gyfer dadansoddiad dilynol. Perfformiwyd dewis OTU gan ddefnyddio Uclust ar y platfform meddalwedd QIIME v1.9.1.

Defnyddiwyd amrywiaeth alffa gan gynnwys y mynegai Chao1 a'r mynegai cwmpas nwyddau ar gyfer dadansoddi amrywiaeth rhywogaethau mewn sampl. Defnyddiwyd dadansoddiad amrywiaeth beta i gymharu gwahaniaethau mewn amrywiaeth rhywogaethau ymhlith samplau a nodweddir gan brif ddadansoddiad cydgysylltu (PCoA) yn seiliedig ar bellter Bray-Curtis. Profwyd y gwahaniaethau rhwng y grwpiau gan ddadansoddiad o debygrwydd (ANOSIM).

Proffilio plasma SCFA

Mesurwyd crynodiadau plasma SCFA gan ddefnyddio sbectrometreg màs gascromatograffeg 7890-5977 (GC-MS, Agilent, Blacksburg, VA, UDA).Casglwyd samplau plasma o lygod ar y pwyntiau amser a ddisgrifiwyd uchod, a storiwyd ar −8{ {20}} gradd yn gyflym, ac yna dadmer i dymheredd ystafell ar gyfer prosesu. Yn gryno, roedd sampl plasma 100 ul wedi'i gymysgu â vortex gyda 900 ulethanol (yn cynnwys 0.5% HCl, V/V). Cymhwyswyd triniaeth uwchsonig am 40 munud ac yna cafodd y samplau eu centrifugio ar 14,000 RPM am 10 munud. Mesurwyd uwchnatur y samplau gan ddadansoddiad GC-MS ar anAgilent 7890–5977 GC-MS gydag ioneiddiad trawiad electronau ac a Colofn DB-FFAPcapillary (30 m × 0.25 mm × 0.25 μm).

meintioliad asid valeric cortical

Pennwyd faint o asid valeric yn y cortecs cerebral a gynaeafwyd 24 awr ar ôl y pigiad intraperitoneol diwethaf o asid valeric gan ddulliau tebyg i'r hyn a adroddwyd o'r blaen [51, 52]. Yn gryno, mae 0.1 g cortecs cerebral yn golchiomogenized mewn 500 µl acetonitrile dyfrllyd. Echdynnwyd y supernatant gyda byffer echdynnu 8 ml (hecsan: ether diethyl=1:1) a'i allgyrchu ar 1800 g am 5 munud. Casglwyd 7.5 ml uwchnatant, wedi'i gymysgu â 93 µl 20 mMKOH mewn methanol, a'i sychu ar 40 gradd o dan nwy nitrogen. Cafodd y gweddillion sych eu hailgyfansoddi mewn 50 µl 2.5% 18-Coron-6 mewn acetonitrile a chafodd ei ddeillio ymhellach â 9-cloromethyl anthracene mewn asetonitrile gan ychwanegu oftetramethylamonium hydrocsid.

Yn olaf, cafodd hydoddiant deilliadu 30 µl ei lwytho i golofn Acclaim C18 (3 µm, 4.6 × 100 mm, Thermo Scientific) a'i wahanu mewn cromatograffaeth hylif perfformiad uchel Ultimate 3000 (HPLC, Thermo Scientific) gyda synhwyrydd UV-weladwy. Canfuwyd y brig o asid valeric derivatized ar donfedd o 254 nm. 2-Ychwanegwyd asid ethylbutyric (2-EA) fel rheolydd cyfeirio mewnol. Mesurwyd arwynebedd brig asid valeric fel mAU* min a normaleiddiwyd ei arwynebedd brig ym mhob sampl ag arwynebedd 2-EA yn y sampl. Cyflwynwyd y canlyniadau terfynol fel cymarebau o'r grŵp asid valeric i'r grŵp NS.

Cynaeafu meinwe ymennydd

Cafodd llygod eu pwyso a'u hanestheteiddio ag isoflurane am 6 h, 24 h, 48 h, 72h, 96 h, a 7 diwrnod ar ôl llawdriniaeth a'u darlifo â 4 gradd NS ar gyfer cynaeafu meinwe'r ymennydd. Defnyddiwyd yr hippocampi hyn ar gyfer dadansoddiad ELISA neu assay RNA. Defnyddiwyd yr ymennydd cyfan yn Bregma −3 i −6 mm ar gyfer atal imiwn-fflworoleuol. Perfformiwyd yr holl weithdrefnau dyrannu ar rew.

paratoi llyfrgell mRNA a dilyniannu Illumina Hiseq

The hippocampi harvested at 24 h after surgery from the control group, surgery group, and Exe+Sur group in the first experiment were placed in liquid nitrogen for 1 h and then stored in a −80 °C freezer quickly for no >1 wythnos. Perfformiwyd puro RNA, trawsgrifio cefn, adeiladu llyfrgell, a dilyniannu yn WuXi NextCODE yn Shanghai yn unol â chyfarwyddiadau'r gwneuthurwr (Illumina).

Paratowyd y llyfrgelloedd dilyniannu â ffocws mRNA o gyfanswm RNA gan ddefnyddio Pecyn paratoi sampl RNA Illumina TruSeq®. PolyA mRNA ei buro o RNA cyfanswm gan ddefnyddio oligo-dTattached gleiniau magnetig ac yna darnio gan byffer darnio.Gan gymryd y darnau byr hyn fel templedi, cDNA llinyn cyntaf yn synthesizedusing transcriptase cefn a paent preimio ar hap, ac yna ail-strandcDNA synthesis. Yna bu'r cDNA wedi'i syntheseiddio yn destun atgyweiriad terfynol, ffosfforyleiddiad, ac ychwanegiad sylfaen 'A' yn unol â phrotocol adeiladu llyfrgell Illumina.

Ychwanegwyd addaswyr dilyniannu Illumina at ddarnau thecDNA. Ar ôl mwyhau PCR ar gyfer cyfoethogi DNA, defnyddiwyd yr AMPure XPBeads (Beckman) i lanhau'r darnau targed o 20 0–300 bp.Ar ôl adeiladu'r llyfrgell, defnyddiwyd Assay Qubit 3.0 fluorometer dsDNA HS (Thermo Fisher Scientific). Fe'i defnyddiwyd i feintioli crynodiadau o lyfrgelloedd dilyniannu dilynol, tra bod y dosbarthiad maint yn cael ei ddadansoddi gan ddefnyddio Agilent BioAnalyzer 2100 (Agilent). Cyflawnwyd dilyniannu gan ddefnyddio system Illumina yn dilyn protocolau a ddarparwyd gan Illumina ar gyfer dilyniant pen parau 2 × 150 yn WuXi NextCODEin Shanghai, Tsieina.

Mynegiant mRNA hippocampal yn ôl adwaith polymerasechain meintiol (Q-PCR)

Cynaeafwyd yr hippocampus am 24 h ar ôl llawdriniaeth gan y grŵp rheoli, grŵp ymarfer corff, grŵp llawdriniaeth, grŵp Exe+Sur, grŵp Trans-Control+Sur, grŵp Trans-Exe+Sur, grŵp Exe+Sur+NS, ac Exe+Sur+ Rhoddwyd grŵp Val mewn nitrogen hylif am 1 h, ac yna ei storio mewn rhewgell −80 gradd am ddim mwy na 3 diwrnod. Perfformiwyd echdynnu RNA, trawsgrifiad gwrthdro RNA-i-cDNA, andq-PCR fel y disgrifiwyd gennym yn flaenorol [49, 53]. Yn fyr, cafodd RNA ei dynnu gan git RNeasy Micro. Cwblhawyd trawsgrifio o chwith trwy ddefnyddio MasterMix All-in-One 5X. Yn olaf, defnyddiwyd system amser real cysylltu CFX (Bio-Rad) ar gyfer meintioli meintiol. Preimio ar gyfer qPCR oedd: C3ar1-F:TGGGCTGGTGCTGGGGTAG a C3ar1-R: GATGGCGAAGGCGGGTTCTCAC. Cyfrifwyd mynegiant genynnau cymharol ar gyfer C3ar1 gan ddefnyddio'r cylch trothwy cymharol ΔΔCt a genyn cadw tŷ -actin ar gyfer normaleiddio mynegiant genynnau. Mae'r lefelau mRNA ar gyfer genynnau targed yn cael eu mynegi fel codiadau plyg o'u cymharu â'r grŵp perthnasol, yn y drefn honno.

Cytocinau a phenderfyniad GDNF yn yr hippocampus

Canfuwyd IL{{{{{0}} , IL-6, C3, a GDNF yn yr hippocampus drwy ddefnyddio ELISAkits. Ar gyfer profi'r IL-1 , IL,-6, a GDNF, cafodd meinweoedd yr ymennydd eu homogeneiddio ar iâ yn y byffer RIPA sy'n cynnwys 25 mM Tris-HCl gyda pH 7.6, 150 mMNaCl, 1% sodiwm deoxycholate, 0.1% SDS ac atalydd proteas sy'n cynnwys 10 mg/ml aprotinin, 5 mg/ml pepstatin, 5 mg/ml leupeptin a 1 mM ffenylmethane sulfonyl fflworid.

Ar gyfer profion C3, cafodd meinweoedd yr ymennydd eu homogeneiddio ar rew yn y byffer PTR (a gyflenwir yn y pecyn). Casglwyd yr uwchnatant ar gyfer canfod ELISA ar ôl i'r homogenad gael ei allgyrchu yn 13,000 g am 20 munud ar 4 gradd a phenderfynwyd crynodiad y protein gan assay protein BCA (Bio-Rad, Hemel Hempstead, Herts, UK). Canfuwyd IL-1 , IL6, C3, a GDNF yn uwchnatur yr ymennydd yn unol â chyfarwyddyd y gwneuthurwr ar gyfer ELISA, a normaleiddiwyd y swm ohonynt ym mhob sampl yn yr ymennydd gan gyfanswm ei gynnwys protein a'i fynegi fel td/ mg o brotein.

Blotio gorllewinol

Perfformiwyd blotio gorllewinol fel y disgrifiwyd yn flaenorol [49]. Yn gryno, pennwyd crynodiadau protein o samplau gan ddefnyddio assay protein BCA. Bu ugain microgram o bob sampl yn destun dadansoddiad Westernblotting gan ddefnyddio'r gwrthgyrff sylfaenol canlynol: protein dwysedd polyclonalanti-postynaptig cwningen 95 (PSD95) ar wanediad 1:1000, gwanhau cwningenpolyclonaidd gwrth-synapsin 1 ar 1:1000 a gwrth-gwningen- - tubulinantibody ar 1:1000 gwanhau. Cafodd delweddau eu sganio gan sganiwr Image Master II (GE Healthcare, Milwaukee, WI, UDA) a'u dadansoddi gan ddefnyddio meddalwedd ImageQuant TL v2003.03 (GE Healthcare). Cafodd signalau band y proteinau â diddordeb eu normaleiddio i rai'r tiwbin cyfatebol a'u mynegi fel ffracsiynau o'r sampl rheoli o'r un geliau.

Staenio imiwnofflworoleuol

Perfformiwyd y labelu immunofluorescent a meintioli'r staenio fel yr ydym wedi'i ddisgrifio o'r blaen [6, 54]. Yn gryno, gosodwyd yr ymennydd mewn paraformaldehyde 4% ar 4 gradd am 24 awr ac yna deorwyd mewn swcros 30% dros nos ar 4 gradd cyn cael ei rewi yn y cyfansoddyn tymheredd torri gorau posibl. Torrwyd darnau coronaidd 20-µm o drwch yn ddilyniannol o Bregma −3 i −6mm drwy ddefnyddio cryostat a'i osod ar sleidiau microsgop.

Ar ôl cael ei olchi mewn halwynog wedi'i glustogi Tris (TBS), cafodd adrannau eu rhwystro mewn 10% donkeyserum ynghyd ag 1% o albwmin serwm buchol (BSA) mewn TBS yn cynnwys 0.3% triton-X100 am 2 awr ar dymheredd ystafell ac yna eu deor yn 4 gradd dros nos gyda'r gwrthgyrff cynradd canlynol: gwrthgorff gwrth-C3 monoclonaidd cwningen (1:50), gwrthgorff gwrth-GFAPmonoclonaidd gafr (1:200), gwrthgorff gwrth-C3ar monoclonaidd llygod mawr (1:50) a gwrth-Iba monoclonaidd cwningen{{ 21}} gwrthgorff (1:200).

Cafodd adrannau eu rinsio TBS gyda 0.1% Triton-x 100. Roedd gwrthgorff gwrth-gwningen IgG asyn wedi'i gyfuno â Alexa Fluor 594 (1:200), gwrthgorff IgG gwrth-gafr asyn wedi'i gyfuno ag Alexa Fluor 488 (1:200) , gwrthgorff IgG gwrth-lygod asyn wedi'i gyfuno â AlexaFluor 594 (1:200) neu wrthgorff gwrth-gwningen IgG asyn wedi'i gyfuno â AlexaFluor 647 (1:200) eu deor gyda'r adrannau am 1 awr ar dymheredd ystafell yn y tywyllwch.

Golchwyd yr adrannau mewn TBS, eu deor â Hoechst 33342(1:1000) ar gyfer staenio niwclear, eu rinsio, a'u gosod â chyfrwng mowntio Vectashield (H-1000; Vector Labs, Burlingame, CA). Caffaelwyd delweddau o imiwno-sain gan z-stack gyda system microsgopeg LSM710 (ZEISS), a chafodd rheolaeth anegyddol hepgor y deoriad gyda'r gwrthgorff cynradd ei gynnwys ym mhob arbrawf.

Perfformiwyd y meintioliad fel y disgrifiwyd yn flaenorol [6, 54]. Yn gryno, lluniwyd yr holl ranbarth gyrus dentate (DG) a orchuddiwyd gan 2-3 maes nad oedd yn gorgyffwrdd o bob un o chwe adran hippocampus dilyniannol un llygoden. Ystyriwyd bod nifer y picseli perimage gyda dwyster uwchlaw lefel trothwy a bennwyd ymlaen llaw yn ardal wedi'i staenio'n gadarnhaol ar gyfer marciwr diddordeb a'i fesur gan ddefnyddio theImage-pro plus 6.0 (Media Cybernetics, Inc., Rockville, MD, USA) a yn cael ei gyflwyno fel canran o arwynebedd positif yn yr ardal gyfan. Yna, cyfartaleddwyd chwe mesuriad fesul llygoden i adlewyrchu lefel y staenio positif. Perfformiwyd yr holl ddadansoddiadau meintiol mewn modd dall.

Gweinyddu BrdU a staenio imiwnfflworoleuol

Saith diwrnod ar ôl llawdriniaeth, rhoddwyd 7 pigiad mewnperitoneol yn olynol i lygod o 80 mg/kg 5′-bromo-2′- deoxyuridine (BrdU) am hanner dydd unwaith y dydd fel y disgrifiwyd yn flaenorol [14]. Cafodd llygod eu haberthu 5 diwrnod yn ddiweddarach i gynaeafu'r hippocampus. Roedd yr hippocampus yn sefydlog mewn 4% paraformaldehydein 0.1 M ffosffad-buffered halwynog ar 4 gradd am 24 h a fewnosod mewnparaffin. Cafodd adrannau ymennydd coronaidd pum-micron trwchus eu torri'n ddilyniannol o Bregma −2 i -4 mm. Perfformiwyd adalw antigen trwy adrannau deor gyda byffer citrad sodiwm yn cynnwys 10 mM sodiumcitrate, 0.05% Tween 20 (pH 6.0) ar 95-100 gradd am 20 munud.

Gwnaethpwyd dadnatureiddio DNA trwy ddeor ag 1 N HCl ar rew am 3 munud, 2 N HCL ar dymheredd ystafell am 3 munud, ac ar 37 gradd am 6 munud. Cafodd adrannau eu rhwystro gyda serwm asyn 5% mewn halwynog wedi'i glustogi ffosffad (PBS) sy'n cynnwys 0.5% triton-X 100 am 2 h ar dymheredd ystafell. Yna deorwyd yr adrannau dros nos ar 4 gradd gyda'r gwrthgyrff sylfaenol canlynol: gwrthgorff gwrth-BrdU ratmonoclonal (1:100), a gwrthgorff gwrth-GFAPantibody monoclonaidd gafr (1:200). Deorwyd yr adrannau â llygod mawr gwrth-asyn IgGantibody ynghyd â Alexa Fluor 594 (1:200) neu asyn gwrth-gafr IgGantibody wedi'i gyfuno â Alexa Fluor 488 (1:200) am 1 awr ar dymheredd ystafell mewn ystafell dywyll. Ar ôl cael ei olchi mewn PBS, cafodd adrannau eu gwrth-wrthsefyll â Hoechst 33342 (1:1000), eu rinsio, a'u gosod gyda chyfrwng mowntio Vectashield (Vector Labs).

Cafwyd delweddau gyda microsgop afflworoleuedd gyda chamera dyfais cyplydd gwefr (High MagOlympus BX51) a system microsgopeg confocal LSM710 (ZEISS). Roedd rheolaeth anegyddol yn hepgor y deoriad gyda'r gwrthgorff cynradd wedi'i gynnwys ym mhob arbrawf. Ar gyfer pob ymennydd llygoden, defnyddiwyd chwe adran hippocampal dilyniannol ar gyfer cyfrif celloedd. Cafodd nifer yr holl gelloedd wedi'u staenio'n gadarnhaol ar gyfer marciwr â diddordeb neu'r cyfuniad o ddau farciwr ym mharth is-gronynnog y DG ym mhob adran ei gyfrif. Perfformiwyd y dadansoddiadau meintiol mewn modd dall.

Golgi staen

Perfformiwyd staenio Golgi gan ddefnyddio'r FD Rapid GolgiStainTM Kit. Pedwar diwrnod ar bymtheg ar ôl llawdriniaeth, cafodd ymennydd 6 llygod ym mhob grŵp eu trochi yn y toddiant trwytho (atebion A a B: 1:1) am 2 wythnos ac yna eu trosglwyddo i hydoddiant C am 3 diwrnod. Torrwyd adrannau coronaidd yr ymennydd ar drwch o 100 μm ac o gwmpas −2.7 mm o bregma ar vibratome (Microslicer® 10110, Ted Pella, Inc. California, UDA).

Fel y disgrifiwyd o'r blaen[55, 56], dewiswyd mwy na 10 niwronau unigol dda yn rhanbarth DG thehippocampus ar hap o bob llygoden, a chymerwyd delweddau sganio haenau lluosog dilyniannol ar gyfwng 2.0 μma ar hyd yr echelin z (3DHISTECH, Pannoramic MIDI, Hwngari) gyda 20 × amcan. Cafodd y ffeiliau sganio aml-haen eu disodli i ddod yn un ffeil sganio glir y gellir ei gweld gyda Caseviewer (3DHISTECH, Hwngari) ar gyfrifiadur. Mesurwyd cyfanswm y cangen a'r hyd dendritig gan feddalwedd Fiji (Fiji-win64, NIH, UDA). Amcangyfrifwyd cymhlethdod cyfanswm y coed dendritig (croestoriadau) gan ddefnyddio dadansoddiad Sholl. Mesur dwysedd forspin, dewiswyd 5 niwron o bob anifail.

Tynnwyd ffotograffau o bum maes microsgopig a ddewiswyd ar hap yn y dendritau apigol neu waelodol o'r ffeiliau sganio. Cafodd y niferoedd meingefn mewn 40 μmsegments eu cyfrif gan arsylwr a oedd yn ddall i aseiniad grŵp. Mynegwyd y canlyniadau fel nifer y meingefnau/10 μmegments. Cyfartaleddwyd data niferoedd cangen dendritig, hyd, a chroestoriadau yn ogystal â dwysedd meingefn o un llygoden i adlewyrchu lefel y llygoden.

Dadansoddiad ystadegol

Ni wnaethpwyd cyfrifiad maint sampl ar gyfer pob arbrawf. Roedd pennu maint sampl yn seiliedig yn bennaf ar ein profiad: defnyddiwyd meintiau sampl mwy ar gyfer arbrofion sy'n profi dysgu a chof na'r rhai ar gyfer astudiaethau biocemegol. Cafodd yr holl ddata a gasglwyd ei gynnwys mewn dadansoddiadau. Roedd data coll yn cynnwys yr anifeiliaid a oedd yn bodloni meini prawf gwahardd a bennwyd ymlaen llaw ar gyfer hyfforddiant ymarfer corff ac anifeiliaid a fu farw cyn y cyfnod arsylwi arfaethedig. Mae nifer yr anifeiliaid a gyfrannodd ddata i'w dadansoddi ar gyfer pob cyflwr arbrofol yn cael ei ddatgan yn chwedloniaeth.

Cyflwynir y canlyniadau fel modd ± SD (data dosbarthiad arferol) neu ganolrif ± amrediad rhyngchwartel (nid data dosbarthiad normal) gyda chyflwyniad data anifeiliaid unigol yn y graff bar ac yn golygu ± SD yn y plotiau llinell. Dadansoddwyd data o sesiynau hyfforddi BarnesMaze trwy ddadansoddiad dwy ffordd dro ar ôl tro o amrywiant (ANOVA) yn dilyn prawf Tukey.

Dadansoddwyd data microbiota perfedd fel y disgrifiwyd yn yr adran Proffilio microbiota perfedd. Dadansoddwyd y data arall gan ANOVA unffordd ac yna prawf Tukey pe bai'r data'n cael eu dosbarthu'n normal, gan ANOVA un ffordd ar reng ac yna'r profwr Tukey Myfyriwr-Newman-Keuls Method pe na bai'r data'n cael ei ddosbarthu fel arfer, gan ANOVA dwyffordd. , trwy brawf-t neu brawf swm rheng. Diffiniwyd gwahaniaeth arwyddocaol fel P < 0.05 yn seiliedig ar ddamcaniaethu dwy gynffon.

Ni pherfformiwyd addasiadau ar gyfer cymariaethau lluosog. Perfformiwyd dadansoddiadau ystadegol gyda SigmaStat (Systat Software, Inc., Point Richmond, CA, UDA).

CYFEIRIADAU

1. Moller JT, Cluitmans P, Rasmussen LS, Houx P, Rasmussen H, Canet J, et al. Camweithrediad gwybyddol hirdymor ar ôl llawdriniaeth yn yr astudiaeth ISPOCD1 henoed. Ymchwilwyr ISPOCD. Astudiaeth ryngwladol o gamweithrediad gwybyddol ôl-lawdriniaethol. Lancet.1998;351:857–61.

2. Monk TG, Weldon BC, Garvan CW, Dede DE, van der Aa MT, Heilman KM, et al. Rhagfynegwyr camweithrediad gwybyddol ar ôl llawdriniaeth fawr nad yw'n gardiaidd. Anesthesioleg. 2008; 108:18-30.

3. Newman MF, Kirchner JL, Phillips-Bute B, Gaver V, Grocott H, Jones RH, et al. Asesiad hirhoedlog o swyddogaeth niwrowybyddol ar ôl llawdriniaeth ddargyfeiriol-rhydweli coronaidd. N. Eng J Med. 2001; 344: 395-402.

4. Neuadd M, Schwartzman A, Zhang J, Liu X. Data llawdriniaeth ddydd o ysbytai a chanolfannau llawdriniaethau dydd: 2010. Adroddiad Ystadegau Iechyd Gwladol 2017.

5. Li Y, Chen D, Wang H, Wang Z, Cân F, Li H, et al. Effeithiau esthetig mewnwythiennol yn erbyn anweddol ar wybyddiaeth ar ôl llawdriniaeth mewn cleifion oedrannus sy'n cael llawdriniaeth abdomenol laparosgopig. Anesthesioleg. 2021; 134:381-94.

For more information:1950477648nn@gmail.com