A yw Saunas yn Fuddiol Neu'n Niweidiol ar gyfer Clefyd Amlycystig Arennau Dominyddol Awtosomaidd? Arholiad Gyda Llygoden Model Ⅰ

Cefndir cryno:Proteinau sioc gwres (Hsps), y mae mynegiant ohonynt yn cael ei achosi gantriniaeth thermol, swyddogaeth amddiffyn yr arennauganatal apoptosisacynnal hyfywedd tiwbaidd arennol. At hynny, yn ddiweddar, nodwyd y gall mynegiant Hsps fod yn darged therapiwtig ar gyfer clefyd yr arennau polycystig trech awtosomaidd (ADPKD). Fe wnaethom ymchwilio i'reffaith therapi sawna sychar lygod model ADPKD.

CLICIWCH YMA I GAEL DYFYNIAD O'R CYLCH ORGANIG NATURIOL GYDA 25% ECHINACOSIDE A 9% ACTEOSIDE AR ​​GYFER SWYDDOGAETH YR AREN

Dulliau a Chanlyniadau:Cafodd y llygod (llygod cyflog gwrywaidd DBA/2FG) eu categoreiddio yn dri grŵp: rheolaethau, TS: llygod cyflog yn destun sawna hirfaith gyda dŵr wedi'i weinyddu yn cynnwys swcros 4%, SW: llygod talu dŵr a weinyddir yn cynnwys swcros 4%. Roedd y grŵp TS yn destun sesiynau sawna ddwywaith yr wythnos am bedair wythnos. Cyrhaeddodd y grŵp TS dymereddau rhefrol o tua 39.{5}} gradd a chawsant eu cynnal nes iddynt gael eu tynnu'n ofalus o'r ddyfais pelydr isgoch pell. Ar ôl 4 wythnos o driniaeth sawna, pennwyd lefelau creatinin a gwaed-wrea-nitrogen (BUN) trwy ddull ensymatig. Dadansoddwyd y protein sioc gwres (HSP) neu dwf celloedd a phroteinau cysylltiedig â maint gan blotio gorllewinol. Roedd y grŵp TS yn arddangos lefelau creatinin a BUN ychydig yn uwch nag a wnaeth y grwpiau rheoli a SW, fodd bynnag, nid oedd y gwahaniaethau'n arwyddocaol. Fodd bynnag, gostyngodd ehangu codennau yn y grŵp TS yn sylweddol o'i gymharu â'r grŵp rheoli. Gostyngwyd mynegiant HSP90 ychydig yn y grwpiau TS a SW o'i gymharu â'r grŵp rheoli (p < 0.01 neu p < 0.001, vs. control), fel yr oedd mynegiant Erk , sy'n gysylltiedig â datblygiad systiau ac amlhau (p <0.05, TS vs rheolaeth). Roedd mynegiant Hsp27 a lefel ffosfforyleiddiad yn y grŵp SW yn debyg i lefel y grŵp rheoli. Fodd bynnag, roedd y grŵp TS wedi cynyddu lefelau Hsp27 a ffosfforyleiddiad (NS). Roedd mynegiant pro-caspase-3 yn y grŵp TS ychydig yn is nag yn y grŵp rheoli. Fodd bynnag, nid oedd unrhyw wahaniaethau yng ngweithgarwch caspase-3 ym mhob grŵp.

Casgliad:Dangosodd canfyddiadau'r astudiaeth hon y gallai 4 wythnos o driniaeth sawna achosi dadhydradu dros dro a chamweithrediad arennol cysylltiedig ac arwain at y risg o ysgogi twf syst trwy fynegiant Hsp27 cynyddol. Ar ben hynny, daethom i'r casgliad y gellid atal diffyg hylif a thwf codennau trwy gymryd swm priodol o ddŵr yn syth ar ôl triniaeth sawna.

I Rhagymadrodd

Clefyd yr arennau polycystig trech awtosomaidd(ADPKD) yn anhwylder genetig a nodweddir gan dwf nifer o systiau yn y ddwy aren. Achosir ADPKD yn bennaf gan fwtaniadau mewn genynnau clefyd yr arennau polycystig 1 (PKD1) a PKD2, sy'n amgodio polycystin 1 (PC1) a PC2, yn y drefn honno. Dros y degawdau o hyd y clefyd, mae cleifion yn datblygu codennau arennol mawr llawn hylif sy'n amharu ar swyddogaeth yr arennau. Ar hyn o bryd, amcangyfrifir bod nifer y cleifion ag ADPKD yn Japan yn 31,000, sef tua 3-5% o'r holl gleifion dialysis). Mae tua 50% o gleifion ag ADPKD yn datblygu clefyd arennol cyfnod olaf erbyn 602 oed). Cymeradwywyd Tolvaptan, antagonist derbynnydd vasopressin 2 (V2), fel yr asiant therapiwtig cyntaf ar gyfer ADPKD, a dechreuodd ei ddefnydd clinigol ym mis Mai 2014 yn Japan). Er ei fod yn gyffur effeithiol sy'n lleihau cyfradd twf codennau, nid oes iachâd ar gyfer ADPKD ar hyn o bryd, ac nid yw'n bosibl atal sys rhag ffurfio yn yr arennau.

Mae therapi thermol, gan gynnwys balneotherapi (BT) a therapi sba (ST), wedi'i ddefnyddio'n aml yn fyd-eang fel ffisiotherapi neu therapi amgen. Mewn lleoliadau clinigol, prif amcan therapi thermol yw cyflawni canlyniadau triniaeth effeithiol heb niweidio meinweoedd arferol. Dangosodd adolygiad systematig diweddar fod BT a ST yn lleddfu poen yn sylweddol ac yn gwella ansawdd bywyd mewn clefydau cronig y system gyhyrysgerbydol neu feinwe gyswllt). Mae ysgogiad thermol yn achosi proteinau sioc gwres (Hsps) sy'n hanfodol ar gyfer goroesiad celloedd trwy eu swyddogaeth fel hebryngwyr protein. Mae rôl Hsps yn iechyd ac afiechyd yr arennau yn amrywio. Gall sefydlu Hsps fod naill ai'n fuddiol neu'n niweidiol i'r aren, yn dibynnu ar yr Hsps penodol, y math o gell, a'r cyd-destun). Mewn meinwe arennau, mae Hsps yn rhan bwysig o'r system amddiffyn fewngellol, sy'n cael ei actifadu gan wahanol fathau o straen cellog. Mae'r Hsps amrywiol y tu mewn i'r gell yn sefydlogi strwythurau celloedd ac yn gwella ymwrthedd celloedd i apoptosis a necrosis6), 7). Yn ystod y blynyddoedd diwethaf, adroddwyd bod HSPs yn chwarae rhan andwyol yn ADPKD, ac felly'n dargedau therapiwtig8), 9). Felly, ein nod oedd ymchwilio i effaith sawnau ar anifeiliaid model ADPKD, pan fydd y llwyth gwres sy'n codi'r tymheredd rhefrol tua 2 radd ac yn ei gynnal am tua 30 munud yn cael ei ailadrodd. II Defnyddiau a Dulliau 1. Llygoden fodel clefyd yr arennau polysystig dominyddol awtosomaidd (ADPKD) Cynhaliwyd yr holl weithdrefnau anifeiliaid yn unol â'r canllawiau ar gyfer gofalu a defnyddio anifeiliaid labordy a gymeradwywyd gan Brifysgol Gwyddor Iechyd Kumamoto (Rhif 18-07) . Defnyddiwyd llygod DBA/2FG-pcy (pcy) gwrywaidd10), 11) (8 wythnos oed, n=12) (Kyudo, Kumamoto, Japan) gyda phwysau corff cychwynnol o 20.9±0.7 g fel llygod model ADPKD yn hyn o beth. arbrawf. Defnyddiwyd llygod DBA gwrywaidd (8 wythnos, n=3) fel cyfeiriad ar gyfer model llygoden ADPKD. Mae Ffigur 1 yn dangos yr edrychiad a'r aren wedi'i dorri fel enghreifftiau nodweddiadol o lygod pcy (Ffig. 1A, B). Câi'r holl anifeiliaid eu cadw dan reolaeth lleithder a thymheredd gyda chylch golau/tywyll o 12:{{{{{{{{{{{{{{{12-}h) a chawsant fynediad am ddim i chow llygoden safonol a dŵr tap.

Rhannwyd naw llygod pcy (8 wythnos oed) ar hap i'r tri grŵp canlynol- grŵp rheoli: llygod pcy fel rheolydd (n=3), grŵp TS: llygod pcy sy'n agored i ysgogiad thermol systemig dro ar ôl tro (n {{3}). }); a grŵp SW: llygod pcy y darparwyd dŵr yn cynnwys swcros 4% (n=3). Darparwyd dŵr yn cynnwys 4% o swcros i lygod yn y grŵp TS dros nos, yn dilyn ysgogiad thermol systemig i atal dadhydradu. Mewn astudiaeth flaenorol, roeddem wedi canfod bod y golled pwysau corff tua 3 - 4% ar ôl ysgogiad thermol systemig12). Pan roddwyd 4% o ddŵr swcros i lygod pcy, cynyddodd faint o ddŵr a ddefnyddiwyd yn sylweddol o 5.6 ± 0.6 mL i 7.4 ± 0.7 mL (p < 0.001 , Ffig. 1C). Dros nos roedd cymeriant dŵr swcros o 4% yn wir yn gymeriant hylif uchel sy'n cyfateb i 14 ± 7% o bwysau'r corff. Roedd y grŵp SW yn yfed dŵr dros nos ar yr un amlder â'r grŵp TS.

Ffig. 1 A: llygoden DBA (Lt) a llygoden 2FG-pcy (Rt). B: Arennau DBA (Lt) neu 2FG-pcy (Rt), Bar graddfa=1 cm. C: Cymeriant faint o ddŵr neu'r dŵr swcros 4% dros nos ar ôl sawna i lygod pcy yn 8 wythnos oed. Dangosir data fel cymedr ± SD. n=3. ＊＊＊ p < 0.001 (Dadansoddiad ystadegol yn defnyddio prawf T pâr).

2. ysgogiad thermol systemig (sawna)

Gosodwyd dwyster gwres y sawna gan gyfeirio at astudiaeth flaenorol13). Fodd bynnag, roedd tymheredd rhefrol rhai o'r llygod pcy yn uwch na 42 gradd oherwydd eu cyfaint corff bach o'i gymharu â rhai llygod arferol DBA a llygod 129X1/SvJ. Felly, ceisiwyd codi'r tymheredd rhefrol 1 gradd, ond oherwydd cyfyngiad rheolaeth y system sawna sych pelydr-is-goch pell (a ddarperir gan Brifysgol Kagoshima), roedd tymheredd y rhefr yn codi i tua 39 gradd. Ni chafwyd unrhyw adroddiadau ar amlder y sau nas ar gyfer ADPKD; felly, mabwysiadwyd yr amlder sawna lleiaf effeithiol (dwywaith/wythnos) a sefydlwyd mewn astudiaeth ar y berthynas rhwng ymdrochi mewn sawna a chlefyd cardiofasgwlaidd ac achosion eraill o farwolaethau gan Laukkanen et al.14). Yn benodol, derbyniodd y llygod driniaeth sawna ar 43 gradd am ddeg munud ac yna ar 37 gradd am 35 munud i godi'r tymheredd rhefrol o 37.1 ± 0.1 gradd i 39.3 ± 0.3 gradd gan ddefnyddio'r system sawna sych pelydr isgoch pell. Cadwyd tymereddau rhefrol llygod tua 39.0 gradd , nes iddynt gael eu tynnu allan o'r ddyfais sawna. Roedd y grŵp TS yn agored i'r sawna am bedair wythnos, ddwywaith yr wythnos.

3. Trefn ddadansoddol

Cafwyd data ffisiolegol gan bob llygod ar ddiwedd y cyfnod astudio o bedair wythnos. Casglwyd samplau wrin pedair awr ar hugain mewn cewyll metabolig, a phenderfynwyd cymeriant hylif. Casglwyd samplau gwaed o'r fena cava israddol, a mesurwyd lefelau creatinin plasma a nitrogen wrea gwaed (BUN) gan ddefnyddio Dadansoddwr Awtomatig Biocemeg Hitachi 7180 (Hitachi High-Technologies Corporation, Tokyo, Japan), gyda Aqua-auto Kainos CRE Pecyn prawf -II neu becyn prawf UN-II (Kainos, Tokyo, Japan) gan ddefnyddio'r dull enzymatig.

4. Astudiaethau histolegol

Cafodd yr arennau eu gosod gyda hydoddiant byffer ffosffad paraformaldehyd o 4% a'u hymgorffori mewn paraffin. Cafodd samplau arennau eu rhannu ar gyfnodau 2-µm a’u staenio â hematoxylin ac eosin (H&E), a chafodd codennau tiwbylau eu mesur ar 2 adran/llygoden (arennau dde) gan ddefnyddio ImageJ (Sefydliadau Iechyd Cenedlaethol, Bethesda, Maryland, UDA). Cafodd ardaloedd â dagrau meinwe a swigod a nodwyd ar chwyddo uwch (× 40) eu heithrio o'r dadansoddiad, fel yr adroddwyd yn flaenorol15).

5. blotio gorllewinol

Perfformiwyd electrofforesis gel dodecyl sylffad-polyacrylamid sodiwm (SDS-PAGE) a blotio gan ddefnyddio gweithdrefnau safonol. Roedd aliwquots sy'n cynnwys 15 µg o brotein yn destun SDS-PAGE. Defnyddiwyd gwrthgyrff a godwyd yn erbyn y proteinau canlynol: Hsp27 (1:1,000, sc-9012, Santa Cruz Biotechnology), phospho-Hsp27 (1:1,000, #2401S, Technoleg Signalau Cell), cyfanswm-Akt (1:1,000, #9272, Cell Signaling Technology), ffosffo-Akt (1:1,000, #9275, Cell Signaling Technology), Erk1 /2 (1:1,000, #9102, Technoleg Signalau Cell), phospho-Erk1/2 (1:1,000, #9101, Cell Signaling Technology), mTOR (1:1 ,000, #2972, Cell Signaling Technology), phospho-mTOR (1:1,000, #2971, Cell Signaling Technology), caspase 3 (1:500, ab4051, Abcam, Caergrawnt, DU), caspase hollt-3 (1:1,000, #9661, Cell Signaling Technology), ac -actin (1:1,000, sc-130656, Biotechnoleg Santa Cruz). Canfuwyd blotiau gan ddefnyddio system canfod blotio gorllewinol ECL Prime (GE Healthcare, UK) yn unol â chyfarwyddiadau'r gwneuthurwr. Roedd y data'n dangos meintioli cymharol yn erbyn -actin, a ddefnyddiwyd fel rheolaeth fewnol.

6. Dadansoddiad ystadegol

Ar gyfer dadansoddiad ystadegol, cymharwyd data rhwng y grwpiau TS a SW gan ddefnyddio prawf Mann-Whitney U. Cymharwyd grwpiau gan ddefnyddio dadansoddiad un ffordd o amrywiant (ANOVA) ac yna prawf Tukey i nodi gwahaniaethau. Ystyriwyd bod gwahaniaethau yn ystadegol arwyddocaol yn p < {{ }}.05. Mynegir data fel cymedr ± gwyriad safonol (SD) neu gymedr ± gwall safonol y cymedr (SEM). Defnyddiwyd GraphPad Prism 6 (GraphPad Software, San Diego, CA, UDA) ar gyfer dadansoddiad ystadegol.

Gwasanaeth Cefnogol Wecistanche - Yr allforiwr cistanche mwyaf yn Tsieina:

E-bost:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Ffôn:+86 15292862950

Siop Am Fwy o Fanylebau:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop