Effeithiau Buddiol Cyfanswm Ffracsiwn Glycoside Ffenylethanoid Wedi'i Ynysu O Ficr-strwythur Cistanche Deserticola Ar Esgyrn mewn Llygod Mawr Ovariectomized

Lingling Yang, Shuqin Ding, Bo Zhang, Jingjing Liu, Yanhong Dong, Qiwen Tang, Pingping Yang, a Xueqin Ma

1 Adran Dadansoddi Fferyllol, Ysgol Fferylliaeth, Prifysgol Feddygol Ningxia, 1160 Stryd Shenli, Yinchuan 750004, Tsieina

2 Ysgol Meddygaeth Glinigol, Prifysgol Feddygol Ningxia, 692 Stryd Shenli, Yinchuan 750004, Tsieina

3 Labordy Allweddol Moderneiddio Meddygaeth Ethnig Hui, Y Weinyddiaeth Addysg, Prifysgol Feddygol Ningxia, 1160 Shenli Street, Yinchuan 750004, Tsieina

Erthygl mynediad agored yw hon a ddosberthir o dan y Creative Commons Attribution License, sy'n caniatáu defnydd, dosbarthiad ac atgynhyrchu anghyfyngedig mewn unrhyw gyfrwng ar yr amod bod y gwaith gwreiddiol yn cael ei ddyfynnu'n gywir.

Cyswllt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Haniaethol

Cynlluniwyd yr astudiaeth bresennol i amcangyfrif gweithgaredd gwrth-steoporotig cyfanswm ffracsiwn glycosid ffenylethanoid wedi'i ynysu oddi wrthCistancheanialwch(CDP) ar lygod mawr a achosir gan ofariectomi (OVX) yn ogystal â'r mecanweithiau cysylltiedig. Ar ôl 3 mis o weinyddiaeth lafar, adenillwyd y gostyngiad mewn dwysedd mwynau esgyrn, serwm Ca, a P mewn llygod mawr OVX a gwellwyd y micropensaernïaeth asgwrn trabeciwlaidd dirywiol yn rhannol gan ymyrraeth Cistanche deserticola (60, 120, a 240 mg/kg), y gweithgareddau o farcwyr atsugniad esgyrn yn is-reoleiddio, a bioactif y mynegai ffurfio esgyrn ei upregulated; yn y cyfamser, gostyngwyd cynnwys MDA, a chynyddwyd GSH gan driniaeth CDP. Yn gyfansoddiadol, nodwyd 8 cyfansoddyn glycosid ffenylethanoid ynCistancheanialwch(CDP), gyda chyfanswm y cynnwys wedi'i fesur fel 50.3 y cant trwy ddefnyddio'r dull HPLC. Yn fecanyddol,Cistancheanialwch(CDP)wedi gostwng lefelau TRAF6, RANKL, a RANK, gan felly atal RANKL/RANK/TRAF6-actifadu llwybrau signalau NF-κB a PI3K/AKT i lawr yr afon ac yn y pen draw atal gweithgareddau proteinau osteoclastogenig allweddol NFAT2 ac c. -Fos. Roedd yr holl ddata uchod yn awgrymu bod CDP yn arddangos effeithiau buddiol ar ficrostrwythur esgyrn mewn llygod mawr ovariectomized, a gallai'r effeithiau hyn fod yn gysylltiedig â llwybrau signalau NF-κB a PI3K/AKT a ysgogwyd gan rwymo RANKL, RANK, a TRAF6.

Cistanche tubulosayn cael llawer o effeithiau, cliciwch yma i wybod mwy

1. Rhagymadrodd

Mae osteoporosis ôl-fenopos, lle bydd 1 o bob 3 menyw dros 50 oed yn dioddef, yn dod yn brif berygl iechyd gan effeithio ar fwy na 200 miliwn o fenywod ledled y byd [1]. Ar y menopos, mae gostyngiad sydyn yn lefel yr estrogen fel arfer yn arwain at fwy o atsugniad esgyrn a achosir gan osteoclastogenesis gwell; yna, amharwyd ar y cydbwysedd rhwng ffurfio esgyrn a achosir gan osteoblast ac atsugniad esgyrn a achosir gan osteoclast, ac yn olaf, achosodd yr atsugniad cyflymach esgyrn osteoporosis a hyd yn oed toriad clun neu asgwrn cefn [2]. Credwyd bod gwahaniaethu'r osteoclast wedi'i sbarduno pan oedd actifydd derbynnydd ffactor niwclear kappa B (RANK) yn rhwym i RANKL, ligand RANK. Fodd bynnag, ni ellir gweithredu'r cyfuniad o RANK i RANKL oni bai bod ffactor necrosis protein tiwmor sy'n gysylltiedig â derbynnydd ffactor 6 (TRAF6) wedi'i ymuno ynddo [3], ac yna ysgogi llwybrau signalau i lawr yr afon gan gynnwys PI3K / AKT a NF-κB. Ac yn olaf, rheoleiddiwyd mynegiant ffactor niwclear celloedd T wedi'i actifadu c2 (NFAT2) a c-Fos [4] i fodiwleiddio gwahaniaethu'r osteoclast yn ogystal ag atsugniad esgyrn. Felly, credwyd bod y ffactorau a'r rheolyddion sy'n ymwneud yn uniongyrchol neu'n anuniongyrchol ag actifadu a gwahaniaethu osteoclast yn dargedau hanfodol ar gyfer atal colled esgyrn.

Yn wir, mae rhai cyffuriau therapi amnewid hormonau clinigol a synthetig fel valrate estradiol sy'n effeithiol wrth drin osteoporosis ôlmenopawsol. Yn anffodus, roedd rhai o'r rhain yn cynyddu'r risg o ganserau difrifol gan gynnwys canser y fron a chanser endometrial [5], a oedd yn cyfyngu ar eu cymwysiadau clinigol. Felly, mae angen dewis dewisiadau eraill gydag effeithiolrwydd a sgîl-effeithiau lleiaf posibl. Profwyd bod meddyginiaethau Tsieineaidd traddodiadol (TCM), yn ogystal â'r cyfansoddion bioactif ynysig a ffracsiynau [6-9], yn effeithiol ar gyfer anhwylderau amrywiol gan gynnwys osteoporosis ôlmenopawsol. Ymhlith y cydrannau a'r ffracsiynau bioactif hyn, credwyd bod cyfansoddion glycoside ffenylethanoid (PhG) ag effeithiolrwydd posibl yn gyfryngau addawol ar gyfer trin osteoporosis [10-12]. Mae strwythurau PhGs yn cynnwys aglycone asid cinnamig, grŵp ffenyl ethyl hydroxyl sy'n cael ei gyfuno â -glucopyranose, apiose, galactose, rhamnose, neu xylose trwy fond glycosidig. Maent yn bodoli'n eang mewn rhywogaethau meddyginiaethol o genwsCistanche[13]. CistancheanialwchMae YC Ma yn TCM swyddogol sy'n cael ei gofnodi mewn pharmacopeia Tsieineaidd, ac ar wahân i fod yn TCM pwysig [14], mae C deserticola hefyd yn berlysiau tonig gwrth-heneiddio gydag ychydig o sgîl-effeithiau sydd wedi'i ddatblygu'n hylif meddyginiaethol a hylif maethol a gymeradwywyd gan y Wladwriaeth Food a Gweinyddu Cyffuriau. Yn seiliedig ar y cofnod o ffarmacopeia Tsieineaidd, roedd C. deserticola wedi'i ddefnyddio'n draddodiadol gan frodorion i drin problemau diffyg hanfod yr arennau fel diffyg cyhyrau a gwendid meingefnol, a chyfansoddion glycosid ffenylethanoid gan gynnwys echinacoside ac acteoside yw'r prif gyfansoddion bioactif yn y perlysiau hwn. Yn ôl theori TCM o "arennau-llywodraethu-asgwrn," mae'r system esgyrn yn cael ei lywodraethu gan hanfod yr arennau [15], a gallai trafferthion sy'n gysylltiedig ag esgyrn fel osteoporosis gael eu hadennill gan berlysiau neu gyfansoddion sy'n meddu ar y gweithgaredd o faethu hanfod yr arennau. Felly, rhagdybiwyd bod cyfanswm y ffracsiwn glycosid ffenylethanoid wedi'i ynysu o C. deserticola, o leiaf yn rhannol, yn fuddiol wrth drin osteoporosis. Dyfeisiwyd yr arbrawf presennol felly i ddilysu ein rhagdybiaeth trwy ddefnyddio model llygod mawr ovariectomized (OVX); ar wahân i'r marcwyr atsugniad esgyrn a ffurfiant y mae'n rhaid eu hamcangyfrif, defnyddiwyd y mynegai gwrthocsidiad yn ogystal â llwybrau signalau a achosir gan RANKL/RANK/TRAF6- a ysgogwyd gan PI3K/AKT a NF-κB hefyd i ymchwilio i brif fecanweithiau'r bioactifedd antiosteoporotic .

2. Deunyddiau a Dull

2.1. Deunyddiau Planhigion a Pharatoi.

Mae cyfanswm o 30 kg o goesynnau oCistancheanialwchY.C. Casglwyd Ma o Sir Yongning ym mis Medi o 2015 gyda'r cyfesurynnau 106.026597 a 38.262816, Talaith Ningxia, Tsieina. Cafodd y perlysieuyn ei adnabod gan Dr. Lin Dong (Adran Pharmacognosy, Prifysgol Feddygol Ningxia), a sbesimen cyfatebol (#201509{{40}}1) ei gadw yn yr Adran Dadansoddi Fferyllol. Yn gyntaf, echdynnwyd 30.0 kg o powdr C. deserticola trwy ddefnyddio'r dull adlif gyda 70 y cant o ethanol fel toddydd; gosodwyd y gymhareb o ddeunydd i doddydd fel 1: 10, a'r amser adlif oedd 2 h am 3 gwaith. Yna, cyfunwyd yr holl hidlwyr a'u cyddwyso dan bwysau llai ar 60 gradd C. Yn ail, defnyddiwyd colofnau resin macroporous AB-8 ar gyfer y gwahaniad rhagarweiniol, a chymarebau gwahanol ethanol mewn dŵr (0 y cant, 20 y cant, 30 y cant , 40 y cant , 50 y cant , a 60 y cant , pob 60 L ) yn cael eu cyflogi ar gyfer eluting . Yn drydydd, cyfunwyd yr eluents 40 y cant a 50 y cant a'u puro ymhellach trwy ddefnyddio colofnau resin macroporous AB dro ar ôl tro gyda'r eluents o 0 y cant , 20 y cant , 30 y cant , 40 y cant , a 50 y cant ethanol mewn dŵr , a pob eluent oedd 12 L. Yn olaf, y ffracsiwn 40 y cant ei gasglu a'i gyddwyso o dan bwysau llai i gael 150 g gwaddod melyn golau ffenylethanoid glycoside ffracsiwn o C. deserticola (CDP, y cynnyrch oedd 0.5 y cant). Ar gyfer arbrofion in vivo, cyflogwyd 0.5 y cant o doddydd CMC-Na i ddiddymu CDP; gosodwyd gweinyddiaeth lafar i anifeiliaid fel 1 ml/100 g o bwysau'r corff; ar gyfer dadansoddiad blot Gorllewinol in vitro, diddymwyd CDP gyda DMSO ac yna ei wanhau gyda DMEM i gael y crynodiadau terfynol o 0.1 mg/mL, 0.01 mg/ml, a 0.001 mg/mL.

2.2. Cemegau a Thoddyddion.

Roedd valerate Estradiol (EV) yn dod o Delpharm Lille SAS, Ffrainc; phosphatase alcalin (ALP), gla-protein asgwrn (BGP), ffosffatase asid tartrate-gwrthsefyll (TRAP), a deoxypyridinoline (DPD) crosslink pecynnau ELISA o Xinyu Biological Engineering Co Ltd, Shanghai, China, 201605; malondialdehyde (MDA, 20181221), super ocsid dismutase (SOD, 20121218), a phecynnau adweithydd glutathione (GSH, 20181221) gan Sefydliad Peirianneg Biolegol Nanjing Jiancheng, Nanjing, Tsieina; lntact parathormone (l-PTH, NEWASHE7UZ), calcitonin (2L9ISN7AIU), ac estrogen-gysylltiedig alffa derbynnydd (ERR , Y3AY8QEWB3) crosslink ELISA citiau o Elabscience Biotechnology Co. Ltd., Wuhan, Tsieina; pecyn adweithydd cathepsin K ELISA o BioVision, America, 1l300141; gwrthgyrff cynradd o RANKL (GR3193842-5), RANK (AA02113656), TRAF6 (2), c-Fos (AG12059411), NFAT2 (AO11015648), NF-κB p65 (AH04138226), PI3 kinase (AG12059411) t. , AKT 1 (AF05173234), -actin (17AV0411), a gwrthgyrff eilaidd marchruddygl peroxidase-cyfuniad gafr gwrth gwningen IgG o ZSGB-BIO, Tsieina, 136080; cyfanswm pecyn profi tein BCA a'r pecyn masnachol ar gyfer canfod ffurfiant oclast oste a serwm buchol ffetws a chyfrwng Eagle's (DMEM) addasedig Dulbecco o HyClone, Logan, UT, UDA; bilen fflworid polyvinylidene (PVDF) o Millipore Life Sciences, Billerica, MA, UDA; penisilin a streptomycin o Gibco, Rockville, MD, UDA. Roedd yr holl gyfryngau cemegol eraill a ddefnyddiwyd o radd AR.

2.3. Mesuriad HPLC o Cistanche Deserticola P.

Defnyddiwyd offeryn HPLC Agilent 1220 i nodi a mesur cyfansoddiad CDP. Roedd yr amodau cromatograffaeth fel a ganlyn: colofn C18 (TSK-GEL, 4 6 I d × 250 mm, 5 μm); roedd elution graddiant yn cynnwys toddyddion A (acetonitrile) a B (dŵr yn cynnwys 0.5 y cant o asid asetig) (0-10 mun: 17-20 y cant A; 10-30 min: 20-25 y cant A; a 30-40 mun: 25-30 y cant A); y donfedd canfod oedd 333 nm; tymheredd amgylchynol; llif y gyfradd oedd 1.0 mL/mun; cyfaint pigiad sampl oedd 5 μL. Nodwyd wyth cyfansoddyn PhG, sef cistanoside F, echinacoside, 6′-acetylacteoside, cistanoside C, cistanoside A, acteoside, 2′-acetylacteoside, ac isoacteoside; trwy ddefnyddio'r sylweddau cyfeirio cyfatebol a dull safonol allanol, mesurwyd cynnwys yr 8 PhG uchod gan ddadansoddiad HPLC (Ffigur 1).

2.4. Protocol Arbrofol Anifeiliaid.

Bwriadwyd cyfanswm o 60 o lygod mawr Sprague-Dawley benywaidd 3 mis oed o ganol profion anifeiliaid ym Mhrifysgol Feddygol Ningxia, gyda phwysau corff cychwynnol cyfartalog o tua 234 ± 25 g. Cafodd y llygod mawr eu cartrefu mewn amgylchedd safonol di-batogenau penodol i ddod i'r arfer am 1 wythnos. Yna, cafodd pob un o'r llygod mawr eu hanestheteiddio (hydrad cloral, 100 mg/kg, ip) yn unig neu sham ovariectomized (SHAM), neu cafodd dwy ofari eu tynnu ac yna eu rhannu ar hap yn 5 is-grŵp: wedi'u trin ar lafar â cherbyd (0.5 y cant CMC- Na) fel y grŵp model (OVX), valerate estradiol (1 mg / kg / dydd) fel y grŵp positif (EV), a 60, 120, a 240 mg / kg / dydd o CDP mor isel (CDPL), grwpiau dos cymedrol (CDPM), ac uchel (CDPH), yn y drefn honno. Roedd yr holl lygod mawr yn cael eu rhoi ar lafar bob dydd ac yn para am 3 mis gyda'r dos yn cael ei addasu bob pythefnos a oedd yn dibynnu ar newid pwysau'r corff cyfan. Ar ddiwrnod olaf yr arbrawf anifeiliaid, cafwyd 24-awr wrin trwy ddefnyddio cewyll metabolig; casglwyd serwm o rydweli femoral llygod mawr anesthetig; cafodd y femora dde, tibia, a'r holl organau eu dyrannu a'u storio ar -80 gradd C i'w dadansoddi ymhellach. Cymeradwywyd yr arbrofion anifeiliaid a gynhaliwyd gennym gan Bwyllgor Sefydliadol Gofal a Defnydd Anifeiliaid Prifysgol Feddygol Ningxia.

2.5. Penderfyniad Dwysedd Mwynau Esgyrn a Dadansoddiad Micro-CT.

Yn gyntaf, defnyddiwyd peiriant amsugniad pelydr-X ynni deuol (Lunar, UDA) i amcangyfrif cyfanswm dwysedd mwynau esgyrn ffemwr dde pob llygoden fawr; yn ail, defnyddiwyd yr un ffemwr i amcangyfrif y ddelwedd 3D o ficrosaernïaeth esgyrn trabeciwlaidd trwy ddefnyddio cyfarpar sganiwr micro-CT (GE, America). Gosodwyd y datrysiad isotropig fel 14 μm i gael delwedd 3D delfrydol; dewiswyd y rhanbarth o ddiddordeb (ROI) trwy osod yr un cyfesurynnau ym mhlât twf ffemwr pob sampl; a'r paramedrau morffometrig asgwrn gan gynnwys gwahaniad trabeciwlaidd (Tb. sp), rhif trabeciwlaidd (Tb. N), trwch trabeciwlaidd (Tb. Th), cynnwys mwynau esgyrn (BMC), dwysedd mwynau meinwe (TMD), a chynnwys mwynau meinwe (TMC). ) a gafwyd trwy ddadansoddi'r ROI.

2.6. Assay Biocemegol Serwm ac Wrin.

Pennwyd gweithgareddau serwm cathepsin K, TRAP, SOD, a GSH, yn ogystal â chynnwys serwm PTH, calcitonin, ERR, MDA, BGP, a DPD wrin, trwy ddefnyddio citiau adweithydd cyfatebol yn unol â chyfarwyddyd y gwneuthurwr, a'r Amcangyfrifwyd lefel ffosffatase alcalïaidd (ALP) a chynnwys calsiwm serwm ac wrin (Ca) a ffosfforws (P) trwy gyflogi peiriant awtomatig (Ciba-Corning 550 Diagnostics Corp., Oberlin, OH, UDA).

2.7. Dadansoddiad Blotiau Gorllewinol.

Anwythwyd osteoclastau trwy ddefnyddio celloedd RAW 264.7 wedi'u hychwanegu gyda ffactor ysgogi cytrefi macrophage (MCSF) a RANKL. Yn gryno, cafodd celloedd 1 × 107 RAW 264.7 eu meithrin mewn 6-plât ffynnon ym mhresenoldeb 30 ng/mL o MCSF a 25 ng/mL o RANKL. Ar ôl 6 diwrnod o ymsefydlu, canfuwyd y celloedd osteoclast aeddfed trwy ddefnyddio'r dull lliw TRAP gyda'r pecyn cyfatebol, yna eu trin â CDP (0.1, 0.01, a 0.001 mg/mL , yn y drefn honno) am 24 h; yna, cafodd y celloedd eu gorchuddio â byffer lysis sy'n cynnwys 0.5 mmol fflworid ffenylmethylsulfonyl, proteas, ac atalyddion ffosffatas. Yna gwahanwyd y lysate trwy ddefnyddio 10 y cant SDS-PAGE a'i drosglwyddo i bilen PVDF, a gafodd ei archwilio ag AKT1, NF-κB-p65, RANKL, PI3K-p85, RANK, NFAT2, TRAF6, c-Fos, a -actin (1: 400) ar ôl blocio gyda llaeth nonfat 5 y cant am 2 h. Cafodd yr un pilenni eu tynnu a'u harchwilio eto gyda'r 9 gwrthgyrff cyfatebol uchod, yn y drefn honno, ac yna eu canfod gan feddalwedd Image Lab ar y diwedd. Ailadroddwyd yr arbrofion dair gwaith.

2.8. Dadansoddiad Ystadegol.

Dadansoddwyd yr holl ddata a gafwyd o arbrofion in vivo ac in vitro, a ddisgrifir fel y cymedr ± SD, gan ddefnyddio ANOVA un ffordd ac yna prawf Dunnett (meddalwedd SPSS 22.0, SPSS, UDA); p < 0="" 05="" yn="" ystadegol="">

Canlyniadau

3.1. Cyfansoddiad Cemegol Cistanche Deserticola P.

Trwy ddefnyddio'r dull HPLC, wythglycoside ffenylethanoidcanfuwyd cyfansoddion yn y ffracsiwn hwn, fel y dengys Ffigur 1. Trwy ddefnyddio cyfeiriadau safonol a dull safonol allanol, cafodd y cyfansoddion a'u cynnwys eu hadnabod a'u mesur fel a ganlyn: (1) acteoside F (3.6 y cant), (2) echinacoside (8.8 y cant), (3) cistanoside A (5.{ {9}} y cant ), (4) acteoside (13.3 y cant ), (5) isoacteoside (3.3 y cant ), (6) acteoside C (3.6 y cant ), (7) 2′-acetylacteoside (9.9 y cant ), a (8 ) 6′-asetylacteoside (3.2 y cant ). Mesurwyd cyfanswm cynnwys yr wyth cydran hyn fel 50.7 y cant.

3.2. Effeithiau Cistanche Deserticola P ar Ddwysedd Mwynau Esgyrn a Microsaernïaeth Trabecula.

Dangosir cyfanswm dwysedd mwynau esgyrn y llygod mawr mewn gwahanol is-grwpiau yn Ffigur 2. Gwelwyd tuedd ostyngol yng nghynnwys dwysedd mwynau esgyrn ymhlith llygod mawr y grŵp model OVX, a ostyngodd bron i 12.0 y cant ar ôl 12 wythnos o'r llawdriniaeth o'i gymharu â llygod mawr y grŵp SHAM (p < 0="" 001).="" roedd="" yr="" holl="" lygod="" mawr="" a="" driniwyd="" gan="" cdp="" yn="" arddangos="" dwysedd="" mwynau="" esgyrn="" wedi="" cynyddu'n="" sylweddol="" 11.2="" y="" cant="" ,="" 12.="" {="" {="" }}="" y="" cant="" ,="" a="" 10.7="" y="" cant="" (p="">< {="" {="" {="" }}="" )="" ),="" yn="" y="" drefn="" honno,="" o="" gymharu="" â="" llygod="" mawr="" y="" model="" ovx="" grwp.="" ar="" ben="" hynny,="" yn="" gyson="" â="" data="" cyfanswm="" dwysedd="" mwynau="" esgyrn,="" dangosodd="" adluniad="" micro-ct="" yn="" ogystal="" â="" phenderfyniad="" histomorffometrig="" y="" forddwyd="" fod="" y="" llygod="" mawr="" yn="" y="" grŵp="" ovx="" yn="" dangos="" dirywiad="" amlwg="" mewn="" pensaernïaeth="" trabeciwlar="" a="" amlygwyd="" gan="" y="" gostyngiad="" nodedig="" yn="" nifer="" ac="" arwynebedd="" y="" trabecula="" hefyd.="" fel="" cynnydd="" sylweddol="" tb.="" sp="" o'i="" gymharu="" â="" llygod="" mawr="" y="" grŵp="" sham.="" roedd="" triniaeth="" gyda="" cdp="" yn="" atal="" y="" dirywiad="" a="" achoswyd="" gan="" ovx="" mewn="" pensaernïaeth="" trabeciwlar;="" fel="" y="" dengys="" ffigur="" 3,="" mae'r="" bmc,="" tmc,="" a="" tb.="" cynyddwyd="" gwerthoedd="" n="" yn="" sylweddol="" ac="" ardal="" tb.="" gostyngodd="" sp="" yn="" sylweddol,="" tra="" bod="" gwerthoedd="" tmd="" a="" tb.="" nid="" oedd="" yn="" ymddangos="" bod="" y="" gweithrediad="" ovx="" a'n="" hymyriad="" cdp="" wedi="" effeithio'n="" sylweddol="">

3.3. Effeithiau Cistanche Deserticola P ar Baramedrau Biocemegol Wrin a Serwm.

Fel y dengys Ffigur 4, canfuwyd tueddiadau gostyngiad sylweddol yn lefel wrinol P a chynnwys serwm calcitonin mewn llygod mawr yn y grŵp model OVX, a oedd bron i 30 y cant a 60 y cant yn llai na llygod mawr SHAM (p < 0="" 001="" ),="" yn="" y="" drefn="" honno,="" ond="" ni="" welwyd="" unrhyw="" dueddiadau="" cynyddol="" neu="" ostyngiad="" amlwg="" yn="" lefelau="" wrinol="" ca="" a="" serwm="" ca="" yn="" ogystal="" â="" serwm="" p="" a="" serwm="" pth="" rhwng="" grwpiau="" ovx="" a="" sham.="" roedd="" triniaeth="" gyda="" cdp="" yn="" atal="" colli'r="" serwm="" p="" a="" ca="" mewn="" llygod="" mawr="" ovx="" yn="" sylweddol,="" fel="" y="" gwelir="" yn="" y="" lefelau="" o="" serwm="" p="" a="" ca="" wedi'u="" huwchreoleiddio'n="" arbennig="" (p="">< 0="" 05)="" o="" gymharu="" â="" llygod="" mawr="" y="" grŵp="" model="" ovx.="" yn="" ogystal,="" gwelwyd="" tueddiadau="" cynyddol="" o="" galcitonin="" ond="" nad="" oeddent="" yn="" ystadegol="" arwyddocaol="" yn="" y="" grwpiau="" dos="" isel="" ac="" uchel="" o="" cdp="" o="" gymharu="" â'r="" grŵp="" model="">

3.4. Effeithiau Cistanche Deserticola P ar Ffurfiant Esgyrn a Marcwyr Adsugniad Esgyrn.

Disgrifiwyd effeithiau buddiol CDP ar y mynegai ffurfio esgyrn, yn ogystal â dylanwadau ataliad ar farcwyr atsugniad esgyrn, yn Ffigur 5. Ynglŷn â'r marcwyr ffurfio esgyrn, ni chafodd lefelau BGP serwm bron eu dylanwadu gan y llawdriniaeth ovariectomized a dystiolaethwyd gan nad ydynt yn newidiadau sylweddol a arsylwyd yn yr holl grwpiau a gafodd eu trin, tra bod gwelliannau ystadegol arwyddocaol o serwm ALP wedi'u sicrhau mewn dosau isel (60 mg/kg) a chymedrol (120 mg/kg) o grwpiau ymyrraeth CDP pan o'i gymharu â llygod mawr y grŵp SHAM (p < 0="" 01).="" o="" ran="" y="" mynegai="" atsugniad="" esgyrn,="" roedd="" lefelau="" serwm="" cathepsin="" k="" a="" dpd,="" yn="" ogystal="" â="" trap="" mewn="" llygod="" mawr="" o'r="" grŵp="" model="" ovx,="" wedi'u="" gwella'n="" sylweddol="" gan="" tua="" 75.0="" y="" cant,="" 41.4="" y="" cant,="" a="" 21.0="" y="" cant,="" yn="" y="" drefn="" honno,="" o="" gymharu="" â="" llygod="" mawr="" sham="" ,="" a="" phan="" gafodd="" ei="" drin="" â="" cdp,="" yn="" enwedig="" y="" dos="" isel="" o="" 60="" mg="" kg,="" cafodd="" priodweddau="" cathepsin="" k="" a="" dpd="" yn="" ogystal="" â="" trap="" yn="" y="" grŵp="" model="" ovx="" eu="" rhwystro'n="" arbennig="" gan="" 67.3="" y="" cant,="" 41.4="" y="" cant,="" a="" 25.9="" y="" cant,="" yn="" y="" drefn="" honno,="" fel="" o'i="" gymharu="" â'r="" llygod="" mawr="" yn="" y="" grŵp="" model="">

3.5. Effeithiau Cistanche Deserticola P ar y Vagina a'r Groth yn ogystal â Phwysau'r Corff Cyfan.

Gwelwyd gwahaniaethau ansylweddol ym mhwysau corff cyfan cychwynnol llygod mawr cyn triniaeth mewn chwe grŵp (Ffigur 6). Fodd bynnag, arweiniodd y llawdriniaeth ovariectomized at gynnydd sylweddol ym mhwysau corff terfynol llygod mawr yn y grŵp model OVX, sef bron i 36.0 y cant , tra bu gostyngiad sylweddol ym mhwysau gwlyb y groth a'r fagina bron i 9{4 }}.0 y cant a 60.0 y cant , yn y drefn honno, o gymharu â llygod mawr SHAM (p < 0="" 001).="" er="" nad="" oedd="" cynnwys="" err="" yn="" dangos="" unrhyw="" wahaniaeth="" arwyddocaol="" rhwng="" grwpiau="" ovx="" a="" sham,="" cynyddodd="" pob="" un="" o'r="" grwpiau="" triniaeth="" gan="" gynnwys="" cdp="" ac="" ev="" lefel="" yr="" err="" yn="" sylweddol.="" ar="" ben="" hynny,="" pan="" gafodd="" ei="" drin="" ag="" ev,="" enillodd="" yr="" uchod="" bwysau'r="" corff="" cyfan,="" yn="" ogystal="" â="" cholli="" pwysau'r="" fagina="" a="" chroth="" llygod="" mawr="" ovx,="" yn="" cael="" eu="" gwrthdroi'n="" rhannol="" (p=""><0 001)="" ​​ond="" ni="" chawsant="" eu="" heffeithio="" gan="" ymyrraeth="">

3.6. Effeithiau Cistanche DeserticolaP ar Lefelau Serwm MDA, SOD, a GSH.

Nid oedd unrhyw wahaniaeth ystadegol arwyddocaol rhwng priodweddau serwm SOD a GSH rhwng y grwpiau model SHAM ac OVX; fel y disgrifir yn Ffigur 7, gellir gweld tuedd gynyddol mewn GSH rhwng y ddau grŵp uchod. Yn ogystal, cafodd lefel y serwm MDA ei uwchreoleiddio'n sydyn bron i 50 y cant yn llygod mawr y grŵp model OVX o'i gymharu â llygod mawr SHAM. Ni chafodd gweithgaredd SOD ei ddylanwadu gan driniaeth CDP, tra bod eiddo GSH wedi'i wella'n sylweddol gan ymyrraeth CDP, a gostyngodd CDP lefel MDA yn sylweddol 33.9 y cant a 42.4 y cant ar y dosau o 60 a 240 mg / kg, yn y drefn honno ( p < 0="">

3.7. Effeithiau Cistanche deserticola P ar Lefelau Mynegiant Protein.

Roedd ein data, a ddangosir yn Ffigur 8, yn awgrymu bod triniaeth CDP wedi gostwng yn sylweddol lefelau protein TRAF6, RANK, a RANKL o gymharu â'r rheolaeth. Cafodd y llwybrau signal i lawr yr afon gan gynnwys NF-κB eu hatal, ac ysgogwyd PI3K / AKT gan ymyrraeth CDP, a ddangoswyd gan fynegiant is-reoleiddio NF-κB-p65, tra bod PI3K-p85 ac AKT1 wedi'u huwchreoleiddio. O ganlyniad, gostyngwyd mynegiant NFAT2 yn sylweddol, a chynyddwyd c-Fos ar ôl triniaeth gyda CDP mewn crynodiad o 0.001-0.1 mg/mL. Disgrifir mecanwaith a awgrymir yn Ffigur 9, lle bu CDP yn is-reoleiddio lefelau RANKL a RANK, gan arwain at leihau meintiau rhwymol y ligand hwn â'i dderbynnydd, a lleihawyd cysylltiad RANKL â RANK ymhellach trwy is-reoleiddio TRAF6, ac yna atal y llwybrau i lawr yr afon gan gynnwys y llwybr NF-κB tra bod y llwybr signal PI3K / AKT wedi'i ysgogi, sydd o'r diwedd yn arwain at ostyngiad mewn mynegiant NFAT2 a chynnydd yn y lefel c-Fos.

4. Trafodaeth

Mae glycosidau ffenylethanoid yn gydrannau sy'n hydoddi mewn dŵr sy'n digwydd yn naturiol ac sy'n bodoli'n eang yn y deyrnas planhigion meddyginiaethol [11]. Hyd yn hyn, roedd cyfansoddion glycosidau ffenylethanoid wedi denu mwy a mwy o ymchwilwyr oherwydd eu rôl amlwg wrth drin anhwylderau ac annormaleddau dynol amrywiol [13]. Nodwyd nifer y ffracsiynau a chyfansoddion bioactif antiosteoporotic, gan gynnwys glycosidau polyphenol a ffenylethanoid, a'u hynysu o ddwsinau o berlysiau meddyginiaethol naturiol [5, 10, 12, 16, 17]. Mae C. deserticola yn adnabyddus fel "ginseng yr anialwch" a oedd yn awgrymu proffil diogelwch y TCM bwytadwy hwn [18, 19]. Fel perlysiau tonic cyffredinol a bwyd iechyd naturiol sydd wedi'i ddefnyddio ers amser maith mewn gwledydd Asiaidd, arddangosodd C. deserticola swyddogaeth fuddiol ar gyfer gwella cryfder yr arennau. Canfuwyd bod TCM, a ddefnyddir yn draddodiadol i fywiogi a chadw hanfod yr arennau, fel arfer yn cael ei ddefnyddio i drin osteoporosis, roedd data cyhoeddedig in vitro ac in vivo wedi profi gweithgaredd gwrth-asteoporotig C. deserticola [20–23], a chyfansoddion glycosid ffenylethanoid gan gynnwys echinacoside ac acteoside yw'r prif gydrannau bioactif sy'n bodoli yn y planhigyn meddyginiaethol bwytadwy hwn; roedd pob un ohonynt yn awgrymu bod nid yn unig echinacoside ac acteoside eu hunain ond hefyd gydrannau glycosid ffenylethanoid eraill sydd wedi'u cynnwys yn C. deserticola yn cael eu hystyried yn gyfrifol am eiddo gwrth-steoporotig y perlysiau hwn. Yn ein hastudiaeth bresennol, defnyddiwyd resin macroporous diogelwch ffafriol i ynysu a chyfoethogi'r ffracsiwn glycoside ffenylethanoid o C. deserticola, a thrwy ddefnyddio'r dull HPLC, wyth prif gydran glycoside ffenylethanoid, sef, acteoside F, echinacoside, cistanoside A, acteoside, canfuwyd isoacteoside, acteoside C, 2′-acetylacteoside, a 6′-acetylacteoside, yn y ffracsiwn glycoside ffenylethanoid ynysig, ac roedd y cynnwys yn 3.6 y cant, 8.8 y cant, 5.0 y cant, 13.3 y cant, 3.3 y cant, 3.6 y cant, 3.6 y cant, 3.6 y cant, 3.6 y cant, 3.6 y cant, 3.6 y cant, 3.6 y cant, 3.6 y cant, 3.6 y cant, 3.6 y cant, 3. a 3.2 y cant , yn y drefn honno. Profwyd bod Echinacoside, un o'r prif gyfansoddion gweithgaredd a gofnodwyd yn C. deserticola [14], yn meddu ar weithgaredd gwrth-ysteoporotig; fodd bynnag, roedd y dos o 270 mg / kg mor uchel a oedd yn cyfyngu ar ei gymhwysiad clinigol pellach [24]. Yn yr arbrofion presennol, defnyddiwyd cyfanswm y ffracsiwn glycosid ffenylethanoid gyda dos is o 60-240 mg/kg pwysau corff/- diwrnod ar lygod mawr OVX, ac roedd cynnwys yr etholwyr a nodwyd bron i 50 y cant yn bur yn y ffracsiwn hwn trwy ddefnyddio y dull HPLC.

Roedd yn hysbys iawn y gall OVX achosi osteoporosis, a chredwyd bod llygoden fawr OVX yn fodel clasurol ac addas i efelychu osteoporosis ôlmenopawsol dynol. Ar yr un pryd, gwelwyd gostyngiad sylweddol yn nwysedd mwynau esgyrn, microarchitecture esgyrn trabeciwlaidd, pwysau gwlyb y groth a'r fagina, a lefel estrogen, yn ogystal â'r gwelliant amlwg mewn atsugniad esgyrn a phwysau'r corff, ar ôl llawdriniaeth ovariectomi, ac roedd y rhain yn rhan oherwydd colled estrogen [25]. Roedd ein data, hyd yn hyn, yn dangos yn glir bod OVX yn wir wedi achosi osteoporosis ar ôl diwedd y mislif a bod dirywiad sydyn yn ansawdd yr esgyrn, micro-bensaernïaeth esgyrn, a phwysau gwlyb y groth a'r fagina bob amser yn cyd-fynd ag ef. Gan fod EV yn asiant amnewid hormonau cyffredinol sydd wedi'i ddefnyddio yn y practis clinigol, fe'i defnyddiwyd fel rheolaeth gadarnhaol yn ein harbrawf in vivo, ac enillodd pwysau'r corff ac atroffi'r groth, yn ogystal â dirywiad mewn dwysedd mwynau esgyrn a micro-bensaernïaeth esgyrn trabeciwlar. , yn cael eu gwrthdroi yn ôl y disgwyl gan ychwanegiad EV. Yn wahanol i'r rheolaeth gadarnhaol, nid oedd triniaeth CDP yn effeithio ar y gostyngiad yn y pwysau o'r fagina a'r groth, yn ogystal â phwysau corff cyfan llygod mawr yn y grŵp model OVX, a oedd yn awgrymu y gallai CDP wella ffurfiant esgyrn heb achosi sgîl-effeithiau. ar y corff a meinweoedd organig groth. Er bod lefelau ERR wedi'u huwchreoleiddio'n sylweddol gan driniaeth CDP, roedd yn union fel effaith ffyto-estrogen na welwyd unrhyw sgîl-effeithiau ar feinweoedd organig y groth a'r fagina. Yn ogystal, roedd triniaeth CDP wedi cryfhau'n sylweddol ansawdd yr asgwrn mewn llygod mawr OVX a oedd wedi'i ddirywio gan lawdriniaeth ofariectomi.

Yn ogystal, defnyddiwyd lefelau P a Ca mewn wrinol a serwm llygod mawr OVX hefyd i adlewyrchu'r effaith antiosteoporotig, ac roedd y crynodiadau o Ca a P anorganig fel arfer yn dibynnu ar lefelau calcitonin a PTH [26]. Yn yr astudiaeth bresennol, er na chafwyd unrhyw dueddiadau sy'n dirywio neu'n cynyddu'n sylweddol yn lefel ysgarthiad wrinol Ca, serwm P, serwm Ca, a PTH mewn llygod mawr o'r grŵp model OVX, mae'r lefelau wrinol sylweddol o P a calcitonin (p <{ {1}})="" arsylwyd.="" yn="" gyson="" â'r="" data="" cyhoeddedig="" bod="" diffyg="" estrogen="" a="" achosir="" gan="" lawdriniaeth="" ovariectomi="" bob="" amser="" yn="" arwain="" at="" ostyngiad="" yn="" lefel="" calcitonin="" yn="" y="" gwaed,="" arweiniodd="" y="" gostyngiad="" hwn="" o="" galcitonin="" serwm="" yn="" olaf="" at="" gynnydd="" yn="" lefel="" pth,="" lle="" credwyd="" mai="" ca="" oedd="" prif="" reoleiddiwr="" secretion="" pth.="" oherwydd="" nad="" oedd="" y="" crynodiad="" o="" pth="" yn="" dangos="" unrhyw="" wahaniaeth="" arwyddocaol="" rhwng="" y="" grwpiau="" ovx="" a="" sham="" yn="" yr="" astudiaeth="" bresennol,="" nid="" oedd="" lefel="" y="" ca="" mewn="" serwm="" ac="" wrin="" hefyd="" yn="" dangos="" unrhyw="" newidiadau="" amlwg="" rhwng="" y="" ddau="" grŵp="" uchod.="" fodd="" bynnag,="" cafwyd="" gostyngiad="" sylweddol="" yn="" y="" duedd="" ar="" lefel="" y="" calcitonin="" rhwng="" y="" grwpiau="" ovx="" a="" sham,="" ac="" o="" ganlyniad,="" gostyngwyd="" cynnwys="" p="" yn="" wrin="" ovx="" yn="" sylweddol.="" roeddem="" yn="" credu="" y="" gallai'r="" data="" uchod="" esbonio'r="" ffenomen="" gwrthgyferbyniol="" pam="" nad="" oedd="" ysgarthiad="" wrinol="" y="" lefel="" ca="" mewn="" llygod="" mawr="" ovx="" yn="" dangos="" unrhyw="" newid="" amlwg="" o'i="" gymharu="" â="" llygod="" mawr="" sham,="" a="" gallai'r="" ffenomen="" hon="" hefyd="" fod="" yn="" gysylltiedig="" â="" chyfradd="" gynyddol="" trosiant="" esgyrn="" [27]="" .="" ar="" ôl="" triniaeth="" gyda="" cdp,="" cafodd="" lefelau="" p="" a="" ca="" mewn="" serwm="" eu="" huwchreoleiddio'n="" sylweddol,="" a="" chafodd="" cynnwys="" p="" mewn="" wrin="" ei="" isreoleiddio="" mewn="" llygod="" mawr="" ovx,="" a="" oedd="" yn="" adlewyrchu="" y="" gallai="" cdp="" nid="" yn="" unig="" atal="" ysgarthiad="" elfen="" mwynau="" esgyrn="" ond="" hefyd="" wella="" cynnwys="" serwm="" y="" rheini="" elfennau,="" gan="" felly="" atal="" colli="" esgyrn="" yn="">

Ar ben hynny, defnyddiwyd y marcwyr ffurfio esgyrn ac atsugniad, yn ogystal â'r ensymau gwrthocsidiol gan gynnwys SOD a GSH, i egluro mecanweithiau gwrth-asteoporotig sylfaenol CDP. Yn debyg i'r data a gyhoeddwyd, roedd lefel yr ALP mewn llygod mawr yn y grŵp model OVX yn dangos tuedd gynyddol anstatudol sy'n dangos cyfradd cyflymach o drosiant esgyrn mewn osteoporosis ôlmenopawsol [10]. Fodd bynnag, ar ôl triniaeth gyda'r CDP (60, 120, a 240 mg / kg / dydd), cafodd eiddo ALP ei wella'n sylweddol. Roedd yn hysbys bod OVX wedi achosi dirywiad sydyn mewn lefelau estrogen sydd fel arfer yn arwain at fwy o atsugniad esgyrn a straen ocsideiddiol [28], a ddangosir gan lefelau TRAP, cathepsin K, a DPD yn ogystal ag MDA sydd wedi'u huwchreoleiddio'n arbennig mewn llygod mawr o'r clefyd. Grŵp model OVX. Fodd bynnag, cafodd y dirywiadau hynny eu gwella'n rhannol gan ymyrraeth CDP. Yn ogystal, dangosodd triniaeth llygod mawr OVX gyda CDP (60 a 240 mg/kg) gynnydd sylweddol mewn gweithgaredd GSH (p < 0="" 05).="" roedd="" y="" canlyniadau="" uchod="" yn="" awgrymu="" bod="" cdp="" yn="" arddangos="" effaith="" therapiwtig="" ar="" osteoporosis="" a="" achosir="" gan="" ovx="" ac="" roedd="" yr="" effeithiau="" hyn="" trwy="" wella="" ffurfiant="" esgyrn="" ac="" atal="" atsugniad="" esgyrn="" yn="" ogystal="" â="" gwella'r="" system="" gwrthocsidiol="">

Fe wnaeth actifadu RANK gan ei ligand RANKL ysgogi mynegiadau NFAT2 a c-Fos trwy signalau PI3K / AKT a NF-κB [29]. Profwyd bod NF-κB yn hanfodol ar gyfer osteoclastogenesis gan y gallai tarfu ar NF-κB arwain at wahaniaethiad osteoclast amhariad gyda ffenoteip osteoporotig, a c-Fos wedi'i uwchreoleiddio gan NF-κB ac ymadroddion NFAT2 wedi'u dadreoleiddio yn ystod osteoclastogenesis a achosir gan RANKL/RANK/TRAF. I amcangyfrif dylanwad buddiol CDP ar osteoclastogenesis NFAT2 ac c-Fos-mediated, dadansoddwyd lefelau mynegiant RANKL a RANK. Yn ddisgwyliedig, roedd CDP yn atal NFAT2 yn sylweddol ac yn ysgogi lefelau c-Fos trwy is-reoleiddio ymadroddion RANKL a RANK. Yn y cyfamser, nid oedd gan RANK ei hun eiddo kinase cynhenid ​​​​oni bai ei fod yn ymuno â TRAF6 i sbarduno'r signalau i lawr yr afon [3]. Roedd CDP hefyd yn is-reoleiddio mynegiant TRAF6, a arweiniodd at leihau'n sylweddol y meintiau rhwymo o RANKL a RANK. Roedd mecanwaith gwrth-ysteoporotig rhagdybiedig o CDP ar lygod mawr OVX yn cwmpasu'r llwybrau signalau uchod, a disgrifiwyd rheolyddion yn Ffigur 9. Yn gryno, gostyngodd CDP lefelau TRAF6, RANKL, a RANK, gan atal y llwybrau signalau i lawr yr afon gan gynnwys PI3K/AKT ac NF-κB sy'n yn cael eu sbarduno gan RANKL/RANK, ac yn olaf wedi lleihau ymadroddion a gweithgareddau'r proteinau osteoclastogenig allweddol NFAT2 a c-Fos. Felly, roedd cliwiau data lluosog yn awgrymu effaith fuddiol CDP ar fetaboledd esgyrn llygod mawr OVX yn bennaf trwy lwybrau cyfryngol RANKL/RANK/TRAF{6-PI3K/AKT ac NF-κB).

5. Casgliad

I grynhoi, dangosodd cyfanswm y glycosidau ffenylethanoid, wedi'u hynysu o C. deserticola, effeithiau buddiol sylweddol ar osteoporosis postmenopausal llygod mawr OVX, ac roedd y potensial therapiwtig i atal colled esgyrn yn bennaf trwy ysgogi ffurfio esgyrn ac atal atsugniad esgyrn yn ogystal â gwella'r gwrthocsidydd esgyrn system; gall y mecanweithiau fod yn gysylltiedig ag actifadu NF-κB a achosir gan RANKL/RANK/TRAF ac anactifadu PI3K/AKT yn ogystal ag ysgogiad c-Fos ac ataliad NFAT2, ac yn olaf, rhwystrwyd gwahaniaethu osteoclast.

Byrfoddau

AKT: Protein kinase B

ALP: phosphatase alcalïaidd

BGP: protein GLA asgwrn

BMC: Cynnwys mwynau asgwrn

CDP: Ffracsiwn glycoside phenylethanoid o C. deserticola

CK: Cathepsin K

CT: Calcitonin

DPD: Deoxypyridinoline

ERR : derbynnydd alffa sy'n gysylltiedig ag estrogen

EV: valerate Estradiol

GSH: Glutathione l-PTH: parathormone cyfan

MCSF: Ffactor sy'n ysgogi cytref Macrophage

MDA: Malondialdehyde

NFAT2: Ffactor niwclear celloedd T actifedig c2

NF-κB: Ffactor niwclear-kappa B

OPG: Osteoprotegerin

OVX: Ovariectomized

PhGs: glycosidau ffenylethanoid

PI3K: Phosphoinositide 3-kinase

RANK: ysgogydd derbynnydd ffactor niwclear-kappa B

RANKL: ysgogydd derbynnydd ffactor niwclear-kappa

B ligand ROI: Rhanbarth diddordeb

SOD: Superoxide dismutase

Tb. N: Rhif trabeciwlar

Tb.Sp: Gwahaniad trabeciwlar

Tb.Th: Trwch trabecular

TCM: Meddygaeth Tsieineaidd draddodiadol

TMC: Cynnwys mwynau meinwe

TMD: Dwysedd mwynau meinwe

TNF: Ffactor necrosis tiwmor

TRAF6: Ffactor necrosis tiwmor sy'n gysylltiedig â derbynnydd ffactor 6

TRAP: ffosffatas asid sy'n gwrthsefyll tartrate.

Argaeledd Data

Mae'r data a ddefnyddiwyd i gefnogi canfyddiadau'r astudiaeth hon ar gael gan yr awdur cyfatebol ar gais.

Gwrthdaro Buddiannau

Nid oedd gan yr awduron unrhyw wrthdaro buddiannau.

Cyfraniadau Awduron

Cynlluniodd a goruchwyliodd XM yr arbrofion; Perfformiodd SD ac LY y rhan fwyaf o'r arbrofion a drafftio'r llawysgrif; Perfformiodd BZ a JL ddadansoddiad blot y Gorllewin a chymryd rhan mewn arbrofion anifeiliaid; Dadansoddodd YD y data; Diwygiodd QT a PY y llawysgrif. Adolygodd pob awdur y llawysgrif. Cyfrannodd Lingling Yang a Shuqin Ding yn gyfartal i'r llawysgrif.

Diolchiadau

Cefnogwyd y gwaith hwn gan grantiau gan Sefydliad Technoleg Gwyddoniaeth Addysg Uwch Ningxia (NGY2017090), Sefydliad Cenedlaethol Gwyddoniaeth Naturiol Tsieina (Rhif 81560684), Rhaglen Ymchwil a Datblygu Allweddol Ningxia (2018BHF2001), Ymchwil Allweddol Ningxia a Rhaglen Dyfeisio Cydweithrediad Gwyddoniaeth a Thechnoleg y Dwyrain a'r Gorllewin (Rhifau 2017BY084 a 2017BY079), a Sefydliad West Light yr Academi Gwyddorau Tsieineaidd - Gwyddonwyr Ifanc Gorllewin 2017.

Cyfeiriadau

[1] LJ Melton III, EA Chrischilles, C. Cooper, AW Lane, a BL Riggs, "Safbwynt. Faint o fenywod sydd ag osteoporosis ?," Journal of Esgyrn a Mwynau Ymchwil , cyf. 7, dim. 9, tt 1005–1010, 1992.

[2] S. Schnell, SM Friedman, DA Mendelson, KW Bingham, ac SL Kates, "Marwolaethau 1-blwyddyn cleifion a gafodd driniaeth mewn rhaglen torri clun ar gyfer henoed," Llawfeddygaeth Orthopedig Geriatrig ac Adsefydlu, cyf. 1, dim. 1, tt 6–14, 2010.

[3] EM Tan, L. Li, IR Indran, N. Chew, ac EL Yong, "TRAF6 cyfryngu atal osteoclastogenesis ac atal colled esgyrn a achosir gan ofariectomi gan prenylflavonoid newydd," Journal of Bone and Mineral Research, cyf. 32, na. 4, tt. 846–860, 2017.

[4] JH Kim ac N. Kim, "Rheoliad NFATc1 mewn gwahaniaethu osteoclast," Journal of Bone Metabolism, cyf. 21, na. 4, tt 233–241, 2014.

[5] C. Ye, XQ Ma, CL Hu et al., "Gweithgaredd gwrth-steoporotig a chyfansoddion Podocarpium podocarpus," Phytomedicine, cyf. 22, na. 1, tt 94–102, 2015.

[6] SA Jang, HS Song, JE Kwon, et al., "Mae asid protocatechuic yn gwanhau colled esgyrn trabeciwlaidd mewn llygod ovariectomized," Meddygaeth Oxidative a Hirhoedledd Cellog, cyf. 2018, ID Erthygl 7280342, 11 tudalen, 2018.

[7] AB Abdel-Naim, AA Alghamdi, MM Algandaby, et al., "Mae Rutin ynysig o Chrozophora tinctoria yn gwella amlder celloedd esgyrn a marcwyr ossification," Meddygaeth Oxidative a Hirhoedledd Cellog, cyf. 2018, ID Erthygl 5106469, 10 tudalen, 2018.

[8] J. Wattanathorn, C. Thipkaew, W. Thukham-mee, S. Muchimapura, P. Wannanon, a T. Tong-un, "Mae dyfyniad dail Morindacirifolia L. yn amddiffyn rhag isgemia cerebral ac osteoporosis mewn model arbrofol in vivo o menopos," Meddygaeth Ocsidiol a Hirhoedledd Cellog, cyf. 2018, ID Erthygl 1039364, 13 tudalen, 2018.

[9] S. Sungkamanee, J. Wattanathorn, S. Muchimapura, a W. Thukham-mee, "Effaith antiosteoporotic dyfyniad cyfun o Morus alba a Polygonum odoratum," Oxidative Meddygaeth a Cellog Hirhoedledd, cyf. 2014, ID Erthygl 579305, 9 tudalen, 2014.

[10] J. Liu, Z. Zhang, Q. Guo, Y. Dong, Q. Zhao, ac X. Ma, "Mae Syringin yn atal colled esgyrn mewn llygod ovariectomized trwy ataliad cyfryngol TRAF6 o NF-κB ac ysgogi PI3K/AKT , " Phytomeddygaeth, cyf. 42, tt 43–50, 2018.

[11] Mae CW Lu, SK Huang, TY Lin, a SJ Wang, "Echinacoside, cyfansoddyn gweithredol o Herba Cistanche, yn atal gweithgaredd epileptiform mewn niwronau pyramidaidd hippocampal CA3," The Korean Journal of Physiology & Pharmacology , cyf. 22, na. 3, tt 249–255, 2018.

[12] X. Xu, Z. Zhang, W. Wang, H. Yao, a X. Ma, "Effaith therapiwtig cistanoside A ar metaboledd esgyrn llygod ovariectomized," Moleciwlau, cyf. 22, na. 2, t. 197, 2017.

[13] K. Alipieva, L. Korkina, IE Orhan, a MI Georgiev, "Verbascoside - adolygiad o'i ddigwyddiad, (bio)synthesis ac arwyddocâd ffarmacolegol," Biotechnology Advances, cyf. 32, na. 6, tt 1065–1076, 2014.

[14] Pwyllgor Golygyddol Pharmacopoeia Tsieineaidd, Pharmacopeia Gweriniaeth Pobl Tsieina, Gwasg Gwyddoniaeth a Thechnoleg Feddygol Tsieina, Beijing, Tsieina, 10fed argraffiad, 2015.

[15] H. Zhang, WW Xing, YS Li et al., "Effeithiau paratoad llysieuol Tsieineaidd traddodiadol ar osteoblasts ac osteoclasts," Maturitas, cyf. 61, na. 4, tt. 334–339, 2008.

[16] X. Ma, J. Liu, L. Yang, B. Zhang, Y. Dong, a Q. Zhao, "Cynomorium songaricum yn atal atsugniad esgyrn mewn llygod mawr ofariectomized trwy RANKL/RANK/TRAF6 ataliad cyfryngol o PI3K/AKT a llwybrau NF-κB," Gwyddorau Bywyd, cyf. 209, tt 140–148, 2018.

[17] XQ Ma, T. Han, X. Zhang, et al., "Kaempferitrin atal colled esgyrn mewn llygod mawr ovariectomized," Phytomedicine, cyf. 22, na. 13, tt 1159–1162, 2015.

[18] PL Liao, CH Li, LS Tse, JJ Kang, ac YW Cheng, "Asesiad diogelwch o gynnyrch bwyd iechyd Cistanche tubulosa Memoregain®: genowenwyndra a 28-prawf gwenwyndra dos dro ar ôl tro," Bwyd a Tocsicoleg Cemegol , cyf. 118, tt 581–588, 2018.

[19] CC Wong, HB Li, KW Cheng, a F. Chen, "Arolwg systematig o weithgaredd gwrthocsidiol o 30 o blanhigion meddyginiaethol Tsieineaidd gan ddefnyddio'r ferric lleihau assay pŵer gwrthocsidiol," Cemeg Bwyd, cyf. 97, na. 4, tt. 705–711, 2006.

[20] D. Song, Z. Cao, Z. Liu, et al., "Mae polysacarid Cistanche deserticola yn gwanhau osteoclastogenesis ac atsugniad esgyrn trwy atal signalau RANKL a chynhyrchu rhywogaethau ocsigen adweithiol," Journal of Cellular Physiology, cyf. 233, na. 12, tt 9674–9684, 2018.

[21] HD Liang, F. Yu, ZH Tong, Pencadlys Zhang, a W. Liang, "Cistanches Herba dyfyniad dyfrllyd yn effeithio ar serwm BGP a TRAP a mêr esgyrn Smad1 mRNA, Smad5 mRNA, TGF- 1 mRNA, a TIEG1 lefelau mynegiant mRNA mewn clefyd osteoporosis," Adroddiadau Bioleg Foleciwlaidd, cyf. 40, na. 2, tt 757–763, 2013.

[22] TM Li, HC Huang, CM Su et al., "Cistanche deserticola dyfyniad yn cynyddu ffurfio esgyrn yn osteoblasts," Journal of Fferylliaeth a Ffarmacoleg, cyf. 64, na. 6, tt 897–907, 2012.

[23] H. Liang, F. Yu, Z. Tong, a Z. Huang, "Effaith Cistanches Herba dyfyniad dyfrllyd ar golled esgyrn yn llygod mawr ovariectomized," International Journal of Molecular Sciences, cyf. 12, na. 8, tt 5060–5069, 2011.

[24] F. Li, X. Yang, Y. Yang, et al., "Gweithgaredd antiosteoporotic o echinacoside mewn llygod mawr ovariectomized," Phytomedicine, cyf. 20, na. 6, tt 549–557, 2013.

[25] H. Nian, MH Ma, SS Nian, a LL Xu, "Gweithgarwch antiosteoporotic icariin mewn llygod mawr ovariectomized," Phytomedicine, cyf. 16, na. 4, tt. 320–326, 2009.

[26] SR Fahmy, AC Soliman, AA Sayed, a M. Marzouk, "Mecanwaith antiosteoporotic posibl o dyfyniad arietinum Cicer mewn llygod mawr ovariectomized," International Journal of Clinical and Experimental Pathology , cyf. 8, dim. 4, tt 3477–3490, 2015.

[27] R. Swaminathan, "Marcwyr biocemegol o drosiant esgyrn," Clinica Chimica Acta, cyf. 313, na. 1-2, tt. 95–105, 2001.

[28] S. Muthusamy, I. Ramachandran, B. Muthusamy, et al., "Ovariectomy yn cymell straen ocsideiddiol ac yn amharu ar system gwrthocsidiol esgyrn mewn llygod mawr sy'n oedolion," Clinica Chimica Acta, cyf. 360, na. 1-2, tt. 81–86, 2005.

[29] WJ Boyle, WS Simonet, a DL Lacey, "Gwahaniaethu ac ysgogi osteoclast," Natur, cyf. 423, rhif. 6937, tt 337–342, 2003.