Meddygaeth Tsieineaidd Cistanche Cyfansoddiad Cemegol A Dadansoddiad O Gydrannau Yn Y Corff Ⅲ

Pennod 3 Dadansoddiad meintiol o gydrannau aml-gydran Cistanche deserticola yn seiliedig ar RPLC-HILIC-MS/MS

Mae cyfansoddiad cemegol meddygaeth Tsieineaidd traddodiadol yn gymhleth ac mae'n cynnwys amrywiaeth o gyfansoddion megis metabolion cynradd ac eilaidd [55-561. Mae cyflawni dadansoddiad cynhwysfawr a dibynadwy o gydrannau cemegol meddygaeth Tsieineaidd traddodiadol (gan gynnwys cydrannau hydroffilig a hydroffobig) yn broblem dechnegol fawr o hyd. Ar ben hynny, mae cynnwys pob cydran mewn meddygaeth Tsieineaidd draddodiadol yn amrywio'n fawr, ac mae dulliau sbectrometreg màs hylif confensiynol yn anodd mesur cydrannau mawr ac olrhain yn gywir ar yr un pryd. 1571 Nid yw'r gwahaniad un golofn traddodiadol yn ddigon, a bydd y dadansoddiad o gyfansoddion olrhain mewn meddygaeth Tsieineaidd traddodiadol yn cael ei gyfyngu gan gysonion. Oherwydd ymyrraeth cyfansoddion, mae'r ffenomen gorgyffwrdd brig yn ddifrifol. Er bod amrywiaeth o dechnegau cromatograffaeth uwch wedi'u defnyddio i wella gwahaniad matricsau cymhleth, megis colofnau cromatograffaeth gronynnau craidd-cragen a submicron, colofnau cromatograffaeth rhyngweithio hydroffilig, ac ati, mae'n dal yn heriol cyflawni gwahaniad cynhwysfawr o wahanol gyfansoddion gan ddefnyddio a colofn sengl [58 -59. Mae cromatograffaeth aml-golofn sy'n cyfuno o leiaf ddau fecanwaith cromatograffig orthogonol, megis LC dau-ddimensiwn, LC cyfnewid colofn, ac LC dwy golofn tandem, wedi'i ystyried yn offeryn ymarferol a all ehangu cwmpas metabolion yn sylweddol. Nid oes amheuaeth y gall LC dau-ddimensiwn ac LC newid colofn gynyddu'n sylweddol gapasiti brig 160). Fodd bynnag, mae'r ddau ddull yn dibynnu ar falf, mae'r offeryniaeth yn gymhleth, ac yn cymryd llawer o amser, ac mae'r tiwbiau cysylltu a'r rheolyddion yn hawdd eu gosod. Mae gweddillion yn bodoli, ac mae'r ddau ddull hyn yn dueddol o gyflwyno cyfres o ffactorau ansicrwydd sy'n arwain at an-atgynhyrchadwyedd meintiol1571. Er na all cromatograffaeth-tandem rhyngweithio hydroffilig cam gwrthdroi (RPLC-HILIC) gynyddu'r cynhwysedd brig yn sylweddol, mae'r offer offeryn yn syml, nid oes unrhyw weddillion mewn tiwbiau a rheolyddion cysylltu, a gall barhau i wireddu'r newid o hydroffilig i hydroffobig. Cadw'n gynhwysfawr nifer fawr o gyfansoddion sy'n fras yn begynol [61-66. Yn ogystal, gellir defnyddio'r modd monitro adwaith lluosog (MRM) sy'n unigryw i'r sbectromedr màs pedwarpol triphlyg (QgQ) fel dimensiwn gwahanu arall i wella ymhellach allu gwahanu RPLC-HILIC. Yn fyr, mae RPLC-HILIC-MRM yn integreiddio manteision cynhenid ​​​​RPLC, HILIC a MRM a disgwylir iddo ddod yn ddull dadansoddol dibynadwy.

FAINT O HYD MAE'N EI GYMRYD I CISTANCHE WEITHIO?

Mae cynnwys pob cydran o feddyginiaeth draddodiadol Tsieineaidd yn amrywio'n fawr. O'i gymharu â'r prif gydrannau, mae pobl yn talu mwy o sylw i ddatblygiad dulliau mwy sensitif i gwblhau'r gwaith o ganfod y cyfansoddion hybrin neu hyd yn oed hybrin hyn. Mae modd MRM yn cael ei argymell yn aml oherwydd ei sensitifrwydd rhagorol a'i ystod ddeinamig llinol dda167. Fodd bynnag, ac oherwydd dirlawnder lluosi electron terfynol siambr Q3 y sbectromedr màs QqQ, mae'r ystod linellol fel arfer yn cael ei gulhau, ac ni all terfyn uchaf y meintioli (ULOQ) gwmpasu cynnwys rhai cyfansoddion mawr yn llawn heb fonitro'n ddibynadwy. y cydrannau hybrin hyn. Felly, gall atal cynhyrchu ïonau cynnyrch ehangu ULOO. Gan ddefnyddio paramedrau cyfansawdd gwan fel parau ïon,depoential(DP) aegni gwrthdrawiad(CE) yn gallu lleihau nifer yr ïonau cynnyrch targed a thrwy hynny ehangu'r ULOQ[68-69]

Y feddyginiaeth Tsieineaidd draddodiadolCistanches Herbayw'r coesyn cigog sych gyda dail cennog yPlanhigyn cistanches. Mae'n un o'r meddyginiaethau Tsieineaidd traddodiadol a ddefnyddir yn gyffredin ac fe'i gelwir yn "ginseng anialwch". Mae glycosidau ffenylethanoid bob amser wedi bod yn bwnc ymchwil poeth yn Cistanche deserticola, ond yn y blynyddoedd diwethaf, mae effeithiau ffarmacolegol cydrannau hydroffilig eraill fel mannitol hefyd wedi'u cydnabod yn dda! 70-721. Fodd bynnag, yn ein dadansoddiad meintiol CH arferol, mae cynnwys prif gydrannau megisechinaceaside,verbscoside, ac roedd mannitol weithiau'n rhy uchel i ragori ar ystod mesur y synhwyrydd UV neu'r synhwyrydd gwasgaru golau anweddol (ELSD). Felly, o safbwynt gwerthuso ansawdd cyffredinol, mae'n bwysig sefydlu dull dadansoddol a all fonitro cydrannau hydroffilig a hydroffobig ar yr un pryd a meintioli'r prif gydrannau a'r cydrannau hybrin yn gywir.

Sefydlodd yr arbrawf yn y bennod hon ddull dibynadwy sy'n addas ar gyfer dadansoddi matricsau cymhleth - sbectrometreg màs hylif RPLC-HILIC-MS/MS (rhyngweithiad hydroffilig cam-hydroffilig gwrthdroi-sbectrometreg màs tandem wedi'i gyplysu'n gyfresol), a lwyddodd i ganfod 23 polaredd yn Cistanche deserticola . Gwahanu, dadansoddi a phennu cynnwys ystod eang o gyfansoddion ar yr un pryd (yn cynnwys cydrannau hydroffilig a hydroffobig); tra'n defnyddio modd SMRM i sicrhau bod y dull hwn yn atgynhyrchu, gan ddefnyddio gwerthoedd CE priodol a pharau ïon gwahanol i ehangu'r côn pinwydd Mae ULOQ prif gydrannau fel inulin a verbascoside yn galluogi meintioli prif gydrannau a chydrannau hybrin ar yr un pryd yn Cistanche deserticola, gan ddarparu a offeryn ymarferol ar gyfer gwella rheolaeth ansawdd Cistanche deserticola a helpu i gyflawni metaboledd targedig eang o blanhigion. Genomeg.

Adran 1 Deunyddiau Arbrofol

1. Offeryn

Mae sbectromedr màs hylif HPLC-Qtap-MS wedi'i gyfarparu â Shimadzu HPLC (wedi'i gyfarparu â 2 bwmp ADxR LC-20, samplwr awtomatig SIL-20ACxR, synhwyrydd UV SPD-M20A, CTO-20AC thermostat, DGU{8}}A3R degassing online Mae'n cynnwys peiriant, CBM-20Rheolydd, Shimadzu Corporation, Japan) a sbectromedr màs SCIEX5500 Qtrap (ffynhonnell ïon ESI, SCIEX, Foster City, CA, UDA) . Cwblhawyd caffael data a chyfrifo gan feddalwedd Analyst Software1.6.2. System puro dŵr ultrapure Mili-Q (Cwmni Milipore, UDA), cydbwysedd dadansoddol electronig Mettler ME204 (Cwmni Mettler Toledo, y Swistir), echdynnu ultrasonic (230V, Bransonmodel 5510, Danburry, CT, UDA).

2. Deunyddiau ac adweithyddion

Colofn Dyfroedd Acquity UPLC HSS T3 (2.1 x 100 mm, 1.8 μm), Colofn Dyfroedd XBridge Amide (4.6mmx150mm, 3.5 μm).Polyetheretherketone(PEEK) piblinell (Cwmni Agilent, UDA). Prynwyd gradd cromatograffaeth a gradd sbectrometreg màs methanol, acetonitrile, ac asid ffurfig gradd sbectrometreg màs gan ThermoFisher (Pittsburgh, PA, UDA), a'r dŵr oedd dŵr ultrapure Milli-Q (Millipore, Bedford, MA, UDA) a wnaed yn y labordy . Prynwyd Niacin (asid nicotinig, cLogP, 0.799), asid succinic (cLogP, -0.526) gan Sigma-Aldrich Company (St. Louis, MO, USA): uridine (cLogP, -2.219), adenoid Adenosine (cLogP, -2.158), inosine (cLogP, {{10}}.106) a guanosin (cLogP , -3.326) eu prynu oddi wrth Beijing Xinjingke Biotechnology Co., Ltd. Salidroside (cLogP -0.296), 6-deoxycatalpol (cLogP, -3.071), phenylalanine (cLogP, -1.556), 8-asid epi-loganic (cLogP , -2.366), mannitol (cLogP, -2.046), swcros (cLogP , -3.087), gluroside (cLogP, -1.757), alaschanioside A (alaschanioside A, cLogP -0.971 ), echinacoside (echinacoside, cLogP, -1 .811), asid ferulic (cLogP, 1.421), acteoside (cLogP, -0.890), isoacteoside (cLogP, -0.057) a Pinoresinol- -D-glucopyranoside (cLogP, Darparwyd -0.384) gan Labordy Allweddol Cyffuriau Naturiol a Biomimetig Prifysgol Peking, cistanoside F (cistanoside F, cLogP, -2.211) Prynwyd oddi wrth Chengdu Mansite Biotechnology Co., Ltd., cistanoside A (cistanoside A, cLogP, -1.365), 2'-acetylacteoside (cLogP, -0.040) a liquiritin apioside (cLogP, -0.267) eu prynu o Shanghai Prynwyd Shidande Biotechnology Co, Ltd, a tubuloside A (tubulosideA, cLogP, 0.287) o Chengdu Weiqi Biotechnology Co, Ltd Profwyd purdeb yr holl sylweddau cyfeirio gan HPLC-DAD-IT-TOF-MS, a'r roedd purdeb yn fwy na 98%. Cyfrifwyd holl werthoedd cLogP sylweddau rheoli gan feddalwedd ChemBioDraw Ultra14.0 (CambridgeSoftCambridge, MA, USA).