Cistanche Deserticola Polysacaridau Lliniaru Dirywiad Gwybyddol mewn Heneiddio Llygod Model Trwy Adfer Echel Microbiota-ymennydd Perfedd

Cyswllt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-bost:audrey.hu@wecistanche.com

Yuan Gao 1,*, Bing Li 1,*, Hong Liu 1, Yajuan Tian 2, Chao Gu 1, Xiaoli Du 1, Ren Bu 1, Jie Gao 1, Yang Liu 1, Gang Li 1

ABSENOLDEB

Mae tystiolaeth ddiweddar yn awgrymu y gallai newidiadau yn echel microbiota-ymennydd y perfedd ysgogi nam gwybyddol wrth heneiddio. Yn yr astudiaeth bresennol, gwelsom fod gweinyddu D-galactose am gyfnod hir i lygod yn achosi dirywiad gwybyddol, dysbiosis microbaidd y perfedd, llid ymylol, a straen ocsideiddiol. Yn y model hwn o ddirywiad gwybyddol sy'n gysylltiedig ag oedran,Cistanche deserticola polysacaridau(CDPS) gwell swyddogaeth wybyddol mewn llygod sy'n cael eu trin â galactos D trwy adfer homeostasis microbaidd yn y perfedd, a thrwy hynny leihau straen ocsideiddiol a llid ymylol. Diddymwyd effeithiau buddiol CDPS yn y llygod model heneiddio hyn trwy abladiad microbiota perfedd â gwrthfiotigau neu wrthmiwnedd â cyclophosphamide. Dangosodd proffilio metabolomig serwm fod lefelau creatinin, valine, L-methionine, o-Toluidine, N-ethylaniline, asid wrig a phroline i gyd wedi'u newid yn y llygod model sy'n heneiddio, ond fe'u hadferwyd gan CDPS. Dangosodd y canfyddiadau hyn fod CDPS yn gwella swyddogaeth wybyddol mewn model heneiddio a achosir gan D-galactose mewn llygod trwy adfer homeostasis echel microbiota- ymennydd y perfedd, a oedd yn lleddfu anghydbwysedd asid amino, llid ymylol, a straen ocsideiddiol. Felly mae CDPS yn dangos potensial therapiwtig i gleifion ag anhwylderau cof a dysgu, yn enwedig y rhai sy'n ymwneud â dysbiosis microbaidd y perfedd.

Cistanche deserticolapolysacaridau

RHAGARWEINIAD

Mae gweinyddu hirfaith o halwynau D-galactos (D-gal) a berylium yn achosi heneiddio mewn modelau anifeiliaid arbrofol a diwylliannau celloedd cynradd in vitro ac fe'i defnyddir i nodi mecanweithiau sy'n sail i'r broses heneiddio naturiol [1–4]. Mae astudiaethau blaenorol yn dangos bod dirywiad gwybyddol mewn llygod model heneiddio a achosir gan D-galactose yn gysylltiedig â lefelau protein llai o ffactor twf nerf (NGF) a mwy o rywogaethau ocsigen adweithiol (ROS) yn yr ymennydd, sydd ill dau yn achosi dirywiad y niwronau hippocampal ac yn lleihau niwrogenesis [3, 4]. Mae astudiaethau diweddar hefyd wedi dangos bod cyfansoddiad a nifer y microbiota perfedd dynol yn newid yn sylweddol yn ystod y broses heneiddio [5].

Cistanche deserticolayn berlysiau sy'n tyfu'n bennaf yn rhanbarth anialwch Gogledd-Orllewinol Tsieina ac yn cael ei ddefnyddio mewn meddygaeth Tsieineaidd traddodiadol. Fe'i gelwir yn gyffredin yn "ginseng yr anialwch." Mae detholiadau Cistanche deserticola yn cynnwys nifer o gyfansoddion sy'n weithredol yn ffarmacolegol, gan gynnwys glycosidau ffenylethanoid, iridoidau, lignose, oligosacaridau, polysacaridau, ac asidau amino; mae'r cyfansoddion hyn yn gysylltiedig ag eiddo gwrthlidiol, gwrth-ocsidiol, gwrth-senescent, neuroprotective, a immunomodulatory [6, 7]. Er enghraifft, mae polysacaridau a echdynnwyd o Cistanche deserticola wedi'u defnyddio mewn meddygaeth Tsieineaidd draddodiadol i drin canser y colon a'r rhefr [8]. Mae ystod eang o polysacaridau gwan wenwynig gyda bioaccharidau defnyddiol wedi'u hynysu o sawl organebau, megis polysacarid Chuanqiong, polysacarid Ganoderma lucidum, a polysacarid Lycium barbarum [9-11]. CDA-

Mae 0.05 yn galactoglucan sydd wedi'i ynysu o Cistanche deserticola sy'n hyrwyddo twf nifer o facteria coluddol buddiol, gan gynnwys sawl rhywogaeth o Bacteroides a Lactobacillus [12].

Mae mecanweithiau sylfaenol y broses heneiddio arferol hefyd yn gysylltiedig â nifer o afiechydon dynol megis anhwylderau niwro-ddirywiol, atherosglerosis coronaidd, diabetes math 2 (T2DM), a gorbwysedd [13, 14]. Mae astudiaethau diweddar wedi dangos bod newidiadau yn y fflora berfeddol yn chwarae rhan arwyddocaol mewn heneiddio dynol [15]. Mae sawl astudiaeth wedi dangos bod gweinyddu D-galactos am gyfnod hir mewn llygod arbrofol a llygod mawr yn dynwared y broses heneiddio arferol ac mae'n fodel defnyddiol i astudio ffenoteipiau sy'n gysylltiedig â heneiddio megis dirywiad gwybyddiaeth [16]. Ar ben hynny, mae llygod model heneiddio a achosir gan D-galactose yn dangos newidiadau yng nghyfansoddiad microbiota perfedd [17]. Felly, gwnaethom ragdybio y gallai newidiadau yng nghyfansoddiad microbiota'r perfedd achosi dirywiad gwybyddol yn y llygod model heneiddio a achosir gan D- galactose, ac ymchwilio i a allai polysacaridau deserticola Cistanche (CDPS) liniaru dirywiad gwybyddol trwy adfer dysbiosis microbiota perfedd.

Cistanche deserticola

CANLYNIADAU

Mae llygod model heneiddio a achosir gan D-galactos yn dangos dirywiad gwybyddol a dysbiosis microbaidd y perfedd

Dadansoddwyd perfformiad ymddygiadol llygod math gwyllt (WT) a’r rhai a gafodd eu trin â 150 mg D-gal fesul Kg o bwysau’r corff am 2 fis (model neu Weinyddiaeth Amddiffyn) gan ddefnyddio profion adnabod gwrthrychau newydd a drysfa ddŵr Morris (MWM). Gostyngwyd y gwerthoedd mynegai ffafriol yn y prawf adnabod gwrthrychau newydd yn sylweddol yn llygod grŵp Mod o'u cymharu â llygod grŵp WT (Ffigur 1A, 1B). Dangosodd canlyniadau profion MWM fod yr amser hwyrni dianc ar ôl y chweched diwrnod wedi cynyddu'n sylweddol yn y grŵp Mod o'i gymharu â'r grŵp WT (Ffigur 1C, 1D). At hynny, gostyngwyd croesfannau platfform targed ac amseroedd nofio o fewn y cwadrant targed yn sylweddol yn y grŵp Mod o'i gymharu â'r grŵp WT (Ffigur 1E, 1F). Dangosodd y canlyniadau hyn ddirywiad sylweddol yng ngalluoedd dysgu a chof y llygod model heneiddio a achosir gan D-gal.

Yna fe wnaethom ddadansoddi'r gwahaniaethau yn helaethrwydd a chyfansoddiad ffyla microbaidd y perfedd, genera a rhywogaethau yn samplau fecal y grwpiau Mod a WT o lygod gan ddefnyddio data dilyniannu RNA ribosomaidd 16S (rRNA) o samplau fecal. Y fflora coluddol pennaf yn llygod grŵp WT a Mod oedd Firmicutes a Bacteroides. Fodd bynnag, gostyngwyd helaethrwydd Bacteroides yn sylweddol a chynyddwyd helaethrwydd Firmicutes yn sylweddol yn y grŵp Mod o'i gymharu â'r grŵp WT (Ffigur 2A). Nesaf, gwnaethom gynnal dadansoddiad gwahaniaethol llinol (LDA) i bennu sgoriau maint effaith LDA (LEfSe) ac yna profion Kruskal-Wallis a Wilcoxon i werthuso digonedd cymharol gwahanol dacsa yn y llygod grŵp WT a Mod. Dangosir y canlyniadau LDA yn Ffigur 2B. Ar ben hynny, rydym yn adeiladu cladograms yn dangos gwahaniaethol cyfoethogi genera amrywiol a rhywogaethau sy'n perthyn i'r Bacteriodes a Firmicutes ffyla yn y WT a grwpiau model (Ffigur 2C). Yn gyffredinol, dangosodd ein canlyniadau nam ar allu gwybyddol a dysbiosis microbaidd y perfedd yn y llygod model heneiddio a achosir gan D-galactose.

Mae triniaeth CDPS yn gwella gallu gwybyddol yn y llygod model heneiddio a achosir gan D-gal

Fe wnaethom ddadansoddi a yw triniaeth CDPS yn lliniaru dirywiad gwybyddol mewn llygod model heneiddio a achosir gan D-gal. Yn ystod y

2 fis o weinyddiaeth, mesurwyd pwysau'r corff bob yn ail ddiwrnod. Roedd pwysau corff y model a grwpiau CDPS o lygod yn debyg (Ffigur 3A). Cynnal arbrofion ymddygiadol ar ôl y dos olaf. Dangosodd canlyniadau adnabod gwrthrychau newydd a phrofion drysfa ddŵr Morris fod cof tymor byr yn sylweddol uwch yn y grwpiau CDPS o lygod o'i gymharu â'r grŵp model o lygod; roedd cof hirdymor yn y grŵp CDPS o lygod yn uwch ond yn ystadegol ddibwys o'i gymharu â'r grŵp model o lygod (Ffigur 3B, 3C). Roedd hyn yn awgrymu bod triniaeth CDPS yn atal colli cof adnabod gwrthrychau tymor byr mewn llygod a gafodd eu trin â D-gal.

Gwerthuswyd dysgu gofodol a chof y llygod hyn gan brawf drysfa ddŵr Morris, a dangosodd y canlyniadau fod amserau cêl dianc grŵp llygod CDPS yn debyg i grŵp llygod WT ac yn sylweddol fyrrach na llygod grŵp Mod (Ffigur 3D ). Ymhellach, roedd amseroedd hwyrni dianc yn sylweddol is ar y chweched diwrnod ar ôl gweinyddu CDPS o gymharu â'r grŵp model (Ffigur 3E). Roedd yr amser nofio o fewn y cwadrant targed yn sylweddol uwch yn y grwpiau CH a CM o gymharu â'r grŵp model. Mae'r grŵp CL yn uwch na'r grŵp model ond dim arwyddocâd ystadegol (Ffigur 3F). At hynny, roedd nifer y croesfannau platfform yn sylweddol uwch yn y grwpiau CM a CL o gymharu â'r grŵp model. Fodd bynnag, mae'r grŵp CH yn uwch na'r grŵp model a dim arwyddocâd ystadegol (Ffigur 3G). Dangosodd y canlyniadau hyn fod triniaeth CDPS wedi gwella dysgu gofodol a chof yn y llygod model heneiddio a achosir gan D-gal.

Mae triniaeth CDPS yn adfer homeostasis o gyfansoddiad microbiota'r perfedd yn y llygod model D-galactos-heneiddio

Monosacaridau a polysacaridau yw'r maetholion hanfodol sydd eu hangen ar gyfer twf bacteria [18-21]. Adroddir hefyd bod CDPS yn rheoleiddio cyfansoddiad microbiota perfedd [22]. Felly, dadansoddwyd a oedd triniaethau CDPS yn lleddfu dysbiosis microbaidd y perfedd yn y grŵp model llygod trwy werthuso data dilyniannu rRNA16S o samplau feces o grwpiau llygod WT, model, a CDPS.

Yn gyntaf, fe wnaethom gyfrifo mynegeion amrywiaeth alffa i werthuso cyfoeth microbiota fecal cyffredinol a gwahaniaeth strwythurol ymhlith y grwpiau hyn. Fe wnaethom ddadansoddi mynegeion amrywiaeth alffa (-amrywiaeth) fel gwerthoedd mynegai rhywogaethau a arsylwyd, Shannon, Chao 1, ACE, a Simpson i bennu newidiadau yng nghyfansoddiad rhywogaethau bacteriol amrywiol yn samplau feces o wahanol grwpiau murine. Roedd y mynegeion -amrywiaeth (rhywogaethau a arsylwyd, mynegeion Shannon, Chao 1, ACE, a Simpson) yn uwch yn y grwpiau llygod WT a CDPS o gymharu â'r grŵp model, ond dim ond ar gyfer gwerthoedd mynegai Chao 1 rhwng y CM y gwelwyd arwyddocâd ystadegol. grŵp a grŵp Mod. Nododd fod gweinyddu gyda CDPS yn cynyddu'r cyfoeth microbiome (Ffigur 4A-4E). Nesaf, fe wnaethom ddadansoddi - mynegeion amrywiaeth i nodi gwahaniaethau yn y rhywogaethau microbaidd perfedd rhwng y grwpiau llygod WT, model, a CDPS gan ddefnyddio Graddio Aml-ddimensiwn Anfetrig (NMDS), Dadansoddiad Prif Gyfesurynnau (PCoA), a Dadansoddiad Prif Gydran ( PCA). Dangosodd PCA amrywiadau yng nghyfansoddiad microbaidd perfedd llygod y grŵp model yn ystod y broses heneiddio, gan gynnwys lleihau dimensiwn a chynnal patrymau a thueddiadau (Ffigur 4F). Nodwyd y gwahaniaethau yn y microbiota fecal rhwng y grwpiau WT, model, a CDPS yn seiliedig ar PCoA o'r pellteroedd UniFrac heb eu pwysoli ar gyfer y genynnau rRNA 16S (Ffigur 4G). Dangosodd dadansoddiad clystyru wahaniaethau sylweddol yn NMDS rhwng y grŵp model a'r grwpiau WT a CDPS (Ffigur 4H).

Fe wnaethon ni werthuso 10 ffyla uchaf microbiota'r perfedd a chanfod bod digonedd y ffyla Bacteroides yn sylweddol uwch yn y grŵp CH, CM, a CL o'i gymharu â'r grŵp model (Ffigur 4I). Roedd hyn yn awgrymu bod CDPS yn adfer homeostasis microbiota'r perfedd mewn llygod wedi'u trin â D-gal. Roedd y cladogramau yn dangos cyfoethogiad gwahaniaethol o wahanol fathau o genera a rhywogaethau sy'n perthyn i Bacteriodes a Firmicutes phyla yn y WT, model, a'r grwpiau CDPS (Ffigur 4J). Fel y dangosir yn y mapiau gwres, gostyngodd triniaethau CDPS niferoedd cymharol Thermoplasmata, Bacilli, Actinobacteria anhysbys, Fusobacteriia, ac Elusimicrobia anhysbys a chynyddodd niferoedd cymharol Methanobacteria, Spirochaetia, Deltaproteobacteria, heb eu hadnabod_Deferribacteres, Anerolinesphaeeria, Anerolinesphaeria, , Erysipelotrichia, a_Cyanobacteria anhysbys o gymharu â'r grŵp model (Ffigur 4K). Dangosodd y canlyniadau hyn fod triniaeth CDPS wedi adfer homeostasis microbiota'r perfedd yn sylweddol yn y llygod model heneiddio a achosir gan D-gal.

Mae triniaeth CDPS yn lleddfu niwroddirywiad yn y llygod model heneiddio a achosir gan D-gal trwy leihau straen ocsideiddiol

Aethom ati nesaf i ddadansoddi effeithiau CDPS ar lid trwy ddadansoddi lefelau serwm cytocinau pro-lid (IL-2 a TNF- ), a chytocinau gwrthlidiol (IL-4 ac IL-10). ) mewn gwahanol grwpiau o lygod. Roedd lefelau serwm IL-2 a TNF- yn sylweddol is ac roedd lefelau serwm IL-4 ac IL-10 yn sylweddol uwch yn y grŵp CH, CM, a CL o gymharu â’r model grwp. Dangosir bod gan CDPS effeithiau gwrthlidiol (Ffigur 5A-5D).

Mae straen ocsideiddiol yn cael ei achosi gan y cynhyrchiad cynyddol o rywogaethau ocsigen adweithiol (ROS) ac mae'n un o'r prif ffactorau sy'n hyrwyddo heneiddio [23]. Felly, dadansoddwyd effeithiau CDPS ar straen ocsideiddiol yn y model llygoden heneiddio a achosir gan D-gal trwy werthuso lefelau serwm yr ensym gwrthocsidiol, SOD, a'r cynnyrch perocsidiad lipid, malondialdehyde (MDA). Roedd lefelau serwm MDA yn sylweddol uwch a gostyngwyd lefelau serwm SOD yn sylweddol yn y grŵp Mod o'i gymharu â'r grŵp WT, ond, roedd triniaeth CDPS yn gwrthdroi'r effeithiau hyn (Ffigur 5E, 5F). Dangosodd y canlyniadau hyn fod straen ocsideiddiol yn uwch yn y llygod model heneiddio a achosir gan D-gal, ond cafodd ei leihau gan driniaeth CDPS.

At hynny, fe wnaethom asesu'r lefelau straen ocsideiddiol ym meinweoedd yr ymennydd trwy ddadansoddi lefelau'r cynnyrch protein ocsidiedig datblygedig (AOPP), perocsidiad lipid uniongyrchol (LPO), ac MDA yn ogystal â gweithgareddau ensymau gwrthocsidiol fel glutathione peroxidase (GSH-Px ) a superoxide dismutase (SOD) ym meinwe'r ymennydd homogenadau. Dangosodd ymennydd llygod grŵp Mod weithgareddau llai sylweddol o SOD a GSH-PX a lefelau uwch o AOPP, LPO ac MDA o'u cymharu â'r grŵp WT, ond cafodd yr effeithiau hyn eu gwrthdroi yn y grŵp CH, CM, a CL (Ffigur 6A - 6E).

At hynny, gwnaethom staenio adran yr ymennydd yn histolegol gyda staeniau H&E a Nissl i asesu effeithiau amddiffynnol CDPS ar ymennydd llygod model heneiddio a achosir gan D-gal. Dangosodd llygod grŵp Mod ostyngiad sylweddol yn y niferoedd a chyfaint niwronau, mwy o fwlch rhwng niwronau, trefniant afreolaidd o niwronau, a pyknosis niwclear yn rhanbarth CA1 hippocampus o'i gymharu â'r grŵp WT, ond gostyngwyd y newidiadau patholegol hyn yn sylweddol gan driniaethau CDPS. Ffigur 6F). Dangosodd y canlyniadau hyn fod triniaethau CDPS wedi lleihau straen ocsideiddiol a phatholeg yr ymennydd yn sylweddol yn y llygod model heneiddio a achosir gan D-gal.

Mae triniaeth CDPS yn lleihau llid ymylol a straen ocsideiddiol trwy gynnal homeostasis microbaidd yn y perfedd mewn llygod model a achosir gan D-gal

Nesaf, fe wnaethom ddadansoddi a oedd y newidiadau yng nghyfansoddiad microbiota'r perfedd yn gysylltiedig â llid ymylol cynyddol a straen ocsideiddiol yn ystod heneiddio. Tuag at hyn, fe wnaethom ddefnyddio coctel gwrthfiotig triphlyg (grŵp ABX) neu cyclophosphamide (grŵp Cy; gweler hefyd Defnyddiau a dulliau) i abladu microbiota'r perfedd neu ysgogi gwrthimiwnedd yn y llygod model heneiddio a driniwyd gan CDPS. Diddymodd y driniaeth wrthfiotig effeithiau buddiol triniaeth CDPS yn y llygod model sy'n heneiddio. Gwelsom nam ar ddysgu a chof (Ffigur 7A), a newidiadau yng nghyfansoddiad microbiota'r perfedd (Ffigur 7B, 7C) yn y grŵp ABX llygod o'i gymharu â'r grŵp sy'n cael ei drin gan CDPS. Mae'r canlyniadau uchod yn dangos na all hyd yn oed gweinyddu CDPS gynyddu gallu dysgu a chof llygod ar ôl newid fflora'r coluddion. Ar ben hynny, gwelsom lefelau uwch o cytocinau pro-llidiol yn yr ymennydd a serwm llygod grŵp ABX o'i gymharu â'r grŵp CDPS (Ffigur 7D-7N). Dangosodd canlyniadau grŵp ABX a grŵp CY, ar ôl i fflora berfeddol a swyddogaeth imiwnedd gael eu dinistrio, na allai hyd yn oed gweinyddu CDPS wella gallu dysgu a chof llygod. Roedd y canlyniadau hyn yn awgrymu bod triniaeth CDPS wedi lleihau llid ymylol, straen ocsideiddiol a dirywiad gwybyddol yn y llygod model heneiddio a achosir gan D-gal trwy atal dysbiosis perfedd.

Yna defnyddiwyd y cyffur gwrthimiwnedd, cyclophosphamide [24] i bennu rôl llid yn effeithiau buddiol CDPS. Roedd llygod CDPS a driniwyd â cyclophosphamide (Cy group) yn dangos nam ar allu dysgu a chof, newidiadau yng nghyfansoddiad microbiota'r perfedd, a lefelau afreolaidd o cytocinau pro- a gwrthlidiol yn yr ymennydd a serwm o'i gymharu â llygod math gwyllt a grŵp CDPS. Fodd bynnag, nid oes unrhyw arwyddocâd o gymharu â'r model a'r grŵp ABX. (Ffigur 7A–7N). Mae'r data hyn yn dangos bod newidiadau yng nghyfansoddiad microbiota'r perfedd yn cynyddu llid ymylol yn y llygod model heneiddio a achosir gan D-gal.

Mae CDPS yn atal heneiddio a achosir gan D-gal trwy reoleiddio metaboledd asid amino

Mae system imiwnedd y gwesteiwr yn cael ei ddylanwadu gan fetabolion a gynhyrchir gan ficrobiota'r perfedd [25]. Mae'r metabolion fecal yn cynrychioli darlleniad swyddogaethol o fetaboledd microbaidd y perfedd a chyfansoddiad microbaidd y perfedd [26]. Ar ben hynny, mae metabolion microbiota'r perfedd yn mynd i mewn i gylchrediad y gwaed ac yn effeithio ar fetaboledd ac iechyd y gwesteiwr [26, 27]. Nodwyd cyfanswm o 1058 o fetabolion mewn samplau serwm o lygod FWT, Mod, a CDPS. Yna, dadansoddwyd y metabolion hyn gan ddefnyddio BioCyc, Gwyddoniadur Genynnau a Genomau Kyoto (KEGG), a Chronfa Ddata Metabolome Dynol (HMDB) a chanfod bod 65 o fetabolion wedi'u mynegi'n wahaniaethol yn y grŵp Mod o'i gymharu â'r grŵp WT. Ar ben hynny, canfuom fod lefelau 8 metabolion (creatinin, valine, L-(-)-Methionine, o-Toluidine, N-Ethylaniline, asid wrig, proline, a phenylalanine) yn sylweddol wahanol ymhlith y grwpiau WT, Mod, a CDPS . Dangosodd dadansoddiad cyfoethogi llwybr o'r 8 metabolion hyn gan ddefnyddio MetaboAnalyst [28, 29] fod y metabolion hyn yn gysylltiedig ag arginine, histidine, arginine, proline, a metaboledd purin (Ffigur 8A, 8B). 7 metabolyn gwahanol o grŵp MOD a grŵp CDPS yn y grŵp WT.

Yna fe wnaethom ddadansoddi a oedd newidiadau ym metabolaeth asid amino yn gysylltiedig â newidiadau yng nghyfansoddiad microbiota'r perfedd. Gwelsom fod 7 metabolyn gwahanol o grwpiau WT, Mod, a CDPS (creatinin, valine, L-(-)- Methionine, o-Toluidine, N-Ethylaniline, asid wrig, a proline) wedi gostwng yn sylweddol yn yr ABX, Cy, a grwpiau Mod o'u cymharu â grwpiau WT a CDPS. At hynny, nid oes unrhyw arwyddocâd rhwng grwpiau ABX a Cy (Ffigur 8C). Yn olaf, er mwyn archwilio mae cydberthynas rhwng metaboledd gwahaniaethol a chlefydau eraill sy'n gysylltiedig â heneiddio. Fe wnaethom ddadansoddi'r gydberthynas rhwng y saith metabolyn hyn a fynegwyd yn wahaniaethol a chlefydau dynol gan ddefnyddio cronfa ddata MetaboAnalyst a chanfod bod y metabolion hyn yn gysylltiedig â chlefyd Alzheimer (p=0.00173; Ffigur 8D, 8E). Yn gyffredinol, roedd y data hyn yn awgrymu bod CDPS yn amddiffyn rhag heneiddio a achosir gan D-gal trwy reoleiddio metaboledd asid amino.

TRAFODAETH

Mae dirywiad cynyddol mewn gweithrediad gwybyddol yn nodwedd nodweddiadol o heneiddio. Dangosodd astudiaethau blaenorol fod triniaeth CDPS wedi gwella dysgu a chof yn sylweddol yn y llygod model heneiddio [30-33]. Yn yr astudiaeth hon, gwnaethom ddangos bod triniaeth CDPS wedi gwella swyddogaeth wybyddol trwy atal llid ymylol a straen ocsideiddiol trwy adfer homeostasis microbaidd y perfedd yn y llygod model heneiddio a achosir gan D-gal (Ffigur 9). Dangosodd llygod mawr Sprague-Dawley a gafodd eu bwydo â polysacaridau Cistanche fwy o dwf mewn bacteria perfedd buddiol a gwell amrywiaeth microbaidd yn y perfedd [34]. Gwellodd CDA-0.05, polysacarid niwtral Cistanche, dwf Lactobacilli probiotig [22]. Roedd y data hyn yn awgrymu bod polysacaridau Cistanche yn gwella homeostasis bacteria perfedd.

Yn yr astudiaeth hon, gwnaethom ddangos bod gan CDPS effeithiau gwrthlidiol ac mae'n gwella gallu gwybyddol y llygod model heneiddio trwy fodiwleiddio digonedd o genera bacteriol perfedd fel Bacteroidetes, Firmicutes, a Proteobacteria. Felly, gall CDPs fod o fudd therapiwtig i glefydau sy'n gysylltiedig â heneiddio trwy ail-lunio cyfansoddiad microbiota'r perfedd [35, 36]. Ar ben hynny, mae astudiaethau blaenorol wedi dangos bod lefelau cytocinau llidiol yn y serwm a'r colon yn gysylltiedig â digonedd cymharol genera bacteriol fel Bacteroidetes, Firmicutes, a Proteobacteria [37, 38]. Ar ben hynny, mae cyfansoddiad microbaidd perfedd yn rheoleiddio swyddogaeth yr ymennydd trwy fodiwleiddio lefelau cylchredeg sawl cytocin [39-43]. Dangosodd ein canlyniadau fod triniaeth CDPS wedi lleihau digonedd cymharol Thermoplasmata, Bacilli, Actinobacteria anhysbys, Fusobacteriia, ac Elusimicrobia anhysbys, ac wedi cynyddu'r doreth gymharol o Methanobacteria, Spirochaetia, Deltaproteobacteria, Deferribacteres, Mollicutes, Antroaerophae, heb ei nodi. Erysipelotrichia, a_Cyanobacteria heb ei nodi.

Mae metabolion microbaidd perfedd yn cael eu rhyddhau i'r llif gwaed ac yn rheoleiddio iechyd a metaboledd y gwesteiwr [26, 27]. Gellir amcangyfrif metabolion microbaidd y perfedd trwy werthuso cyfansoddiad metabolion fecal, sy'n newid gyda newidiadau yng nghyfansoddiad microbau'r perfedd [44]. Mae astudiaethau diweddar wedi dangos bod lefelau plasma o citrulline, proline, arginine, asparagine, phenylalanine a threonine yn gysylltiedig ag anhwylderau niwroddirywiol gan gynnwys clefyd Alzheimer [45, 46]. Dangosodd ein hastudiaeth fod lefelau serwm creatinin, valine, L-methionine, o-Toluidine, N-ethylaniline, asid wrig, a phroline yn gysylltiedig â heneiddio a achosir gan D-gal mewn llygod.

Mae breichiau cynhenid ​​​​ac addasol y system imiwnedd yn chwarae rhan arwyddocaol wrth gynnal homeostasis lletyol-microbaidd yn yr arwyneb luminal berfeddol [47]. Mae'r microbiota berfeddol hefyd yn chwarae rhan arwyddocaol wrth reoleiddio'r system nerfol ganolog (CNS) ac imiwnedd trwy ryddhau cytocinau a metabolion i'r llif gwaed [48, 49]. Mae'r cytocinau pro-llidiol yn chwarae rhan allweddol mewn sawl clefyd niwroddirywiol [50-52]. Er enghraifft, mae dirywiad macwlaidd sy'n gysylltiedig ag oedran (AMD) a glawcoma yn gysylltiedig â chroniad allgellog o amyloid (A ) a dyddodiad mewngellol o tau hyper-ffosfforylaidd (p-tau) a haearn yn y celloedd ganglion retinol (RGC) [44]. Ar ben hynny, mae llid yn chwarae rhan sylweddol mewn pathogenesis sy'n gysylltiedig â glawcoma [53]. Mae nam ar y golwg yn symptom cynnar o glefyd Alzheimer (AD) ac fe'i hamlygir cyn dechrau dirywiad gwybyddol [54]. Dangosodd ein hastudiaeth fod CDPS yn amddiffyn rhag dirywiad gwybyddol a llid ymylol trwy gynnal homeostasis microbiota'r perfedd.

Mae nifer o gyfyngiadau i'r astudiaeth hon. Yn gyntaf, nid yw'r berthynas rhwng metaboledd asid amino a chyfansoddiad microbiota'r perfedd yn hysbys iawn. Yn ail, nid yw cyfansoddiad a strwythur moleciwlaidd CDPS yn hysbys. Felly, mae angen astudiaethau yn y dyfodol i archwilio ymhellach rôl reoleiddiol CDPS wrth liniaru TA trwy echel signalau microbiota-ymennydd perfedd.

I gloi, dangosodd ein hastudiaeth fod CDPS wedi gwella gallu gwybyddol mewn llygod model heneiddio a achosir gan D-gal trwy adfer homeostasis microbiota perfedd, a thrwy hynny adfer anghydbwysedd asid amino, llid ymylol, a straen ocsideiddiol. Mae'r canfyddiadau hyn yn awgrymu bod CDPS yn therapiwtig posibl i gleifion ag anhwylderau dysgu a chof, yn enwedig y rhai sy'n gysylltiedig â dysbiosis y perfedd.

DEUNYDDIAU A DULLIAU

Paratoi CDPS

Cafodd tua 1.0 kg o Cistanche deserticola wedi'i lanhau ei awyrsychu yn y ffwrn ar 40 gradd C a'i falurio'n bowdr crai. Echdynnwyd y powdr mewn ethanol poeth am 3 h. Hidlo'r gweddillion trwy rhwyllen i dynnu'r hidlif ac yna ei wanhau â dŵr (8X) a'i adlifo'n ddilyniannol am 2 h, 1.5 h, ac 1 h ar 90 gradd C. Ar bob pwynt amser, cafodd yr hydoddiant ei allgyrchu i wahanu'r uwchnatydd. a'i gyfuno â'r hidlydd brown-goch. Yna, cafodd yr hidlydd ei grynhoi o dan bwysau llai, ei oeri i dymheredd yr ystafell, ei ychwanegu'n araf at 95 y cant ethanol (3X), a'i ganiatáu i sefyll ar 4 gradd C am 24 h. Yna, cafodd yr hydoddiant ei allgyrchu ar 6000 r / min am 20 munud ar 4 gradd C. Casglwyd y gwaddod ar ôl echdynnu dŵr dro ar ôl tro a dyddodiad alcohol deirgwaith. Cafodd y gwaddod ei ailgyfansoddi mewn dŵr, ei ddadbroteineiddio, ei ddialyzed, a'i rewi-sychu i gael polysacarid Cistanche deserticola crai (CDPs). Roedd y cynnwys polysacarid yn fwy na 90 y cant fel y'i gwerthuswyd gan sbectrophotometreg uwchfioled.

Grwpio anifeiliaid a thriniaethau

Prynwyd llygod Kunming gwrywaidd wyth wythnos oed (Trwydded SCXK Rhif.2019-0010) oddi wrth SPF Biotechnology Co. Ltd (Beijing, Tsieina), mewn ystafell a reolir gan olau a thymheredd, a'u bwydo â bwyd a dŵr. Cynhaliwyd yr holl arbrofion anifeiliaid yn unol â phrotocolau a gymeradwywyd gan Bwyllgor Gofal a Defnydd Anifeiliaid Sefydliadol Prifysgol Feddygol Inner Mongolia. Cynhaliwyd yr arbrofion yn unol â Chanllaw'r Sefydliad Cenedlaethol dros Iechyd (NIH) ar gyfer Gofalu a Defnyddio Anifeiliaid Labordy.

Ar ôl 1 wythnos o addasu i'r amgylchedd newydd, rhannwyd 120 o lygod i'r 7 grŵp canlynol: (1) rheoli math gwyllt (WT); grŵp model (150 mg/Kg/dydd D-gal; Mod); (3) CH: D-gal ynghyd â 100 mg/kg CDPS; (4) CM: D-gal ynghyd â 50 mg/kg CDPS; (5) CL: D-gal ynghyd â 25 mg/kg CDPS; (6) Grŵp ABX: gwrthfiotigau ynghyd â D-gal ynghyd â CDPS 50 mg/Kg; (7) Cy grŵp: cyclophosphamide ynghyd â D-gal ynghyd â 50mg/kg CDPS.

Derbyniodd y llygod o'r grwpiau model, ABX, Cy, a CDPS chwistrelliadau isgroenol o hydoddi halwynog

150 mg/kg D-gal bob dydd am 2 fis. Chwistrellwyd y grŵp WT yn isgroenol gyda chyfaint cyfartal o halwynog am 2 fis. Roedd llygod grŵp CDPS hefyd yn cael eu rhoi bob dydd gyda phigiadau intragastrig yn cynnwys 1{{10}}0 mg/kg, 50 mg/Kg neu 25 mg/Kg CDPS am 2 fis . Derbyniodd llygod y grŵp ABX ddŵr yfed gyda 0.1 mg/mL ampicillin a 0.5 mg/mL streptomycin am 2 fis yn ogystal â phigiadau D-gal a CDPS. Cyn rhoi D-gal, derbyniodd y llygod bigiadau yn cynnwys 0.1 mg / mL ampicillin, 0.5 mg / mL streptomycin, a 0.1 mg / mL colistin am 7 diwrnod yn y grŵp ABX. Derbyniodd llygod grŵp Cy bigiadau mewnperitoneol o 20 mg/Kg cyclophosphamide bob yn ail ddiwrnod (qod) am 2 fis yn ogystal â phigiadau dyddiol o D-gal a CDPS.

Prawf adnabod gwrthrych newydd

Cynnal arbrofion ymddygiadol ar ôl y dos olaf. Roedd y prawf adnabod gwrthrychau yn cynnwys camau ymgyfarwyddo, hyfforddi a phrofi. Yn ystod y cam ymgyfarwyddo, cafodd llygod eu cadw mewn siambr brofi wag am 10 munud am ddau ddiwrnod. Yna, ar y trydydd diwrnod (diwrnod hyfforddi), gosodwyd dau wrthrych o'r un maint, siâp a lliw (A1 ac A2) ar ddau ben y siambr. Yna rhoddwyd 10 munud i bob llygoden archwilio'r ddau wrthrych tebyg. Ar ôl 1-awr (ar y trydydd diwrnod) a 24-awr (ar y pedwerydd diwrnod) cyfnodau hyfforddi-i-brofi, disodlwyd un o'r gwrthrychau tebyg (A1 neu A2) â B neu C gwrthrych sy'n wahanol o ran maint, lliw a siâp ar ddiwrnod y prawf. Yn ystod y cam profi, profwyd pob llygoden am 5 munud a chyfrifwyd y mynegai ffafriol i bennu cof adnabod gwrthrych newydd (B neu C) gan ddefnyddio'r fformiwla ganlynol: Mynegai ffafriol=Amser ar wrthrych B neu C/( Amser ar wrthrych B neu C ynghyd ag Amser ar wrthrych A) × 100 y cant .

Prawf dwr drysfa Morris

Cynhaliwyd prawf drysfa ddŵr Morris mewn pwll crwn a oedd yn 45 cm o ddyfnder a 90 cm mewn diamedr. Mae'r protocol a ddisgrifiwyd gan Ruediger S, et al. (2011) [55] a Wood RA, et al. (2018) [56] yn gyflogedig yma. Dyfnder y dŵr yn y pwll oedd 30 cm, a thymheredd y dŵr oedd 20 ± 1 gradd C. Roedd y platfform yn 6 cm mewn diamedr ac 1cm o dan y dŵr. Yr amser ar gyfer hyfforddi a phrofi oedd 60 s yr un. Ar gyfer hyfforddiant, fe wnaethom gynnal pedwar treial o 60 s yr un gyda llwyfan cudd bob dydd am bum diwrnod di-dor. Os na ddarganfuwyd y platfform gan y llygod mewn 60 s, cawsant eu harwain i'r platfform a'u gosod ar y platfform am 5 s. Yn ystod y cam profi, cofnodwyd a dadansoddwyd yr hwyrni i gyrraedd y platfform cudd mewn sesiynau hyfforddi a threialu stilio, nifer y croesfannau dros leoliad y platfform a dynnwyd, a'r amser a dreuliwyd yn y cwadrant targed (llwyfan).

Profion ELISA

Dadansoddwyd lefelau serwm cytocinau pro-llidiol megis IL-2(), IL-4, IL-10, a TNF- ar gyfer pob grŵp o lygod gan ddefnyddio citiau ELISA a brynwyd o Shanghai Yi Li Biological Technology Co, Ltd (Shanghai, Tsieina) yn unol â chyfarwyddiadau'r gwneuthurwr. Dadansoddwyd gweithgaredd ensym gwrthocsidiol, superoxide dismutase (SOD), a lefelau cynnyrch perocsidiad lipid, malondialdehyde (MDA), yn serwm pob grŵp o lygod gan gitiau assay a brynwyd gan Sefydliad Biobeirianneg Nanjing Jiancheng (Nanjing, Tsieina) . Amcangyfrifwyd lefelau cynhyrchion protein ocsideiddio uwch (AOPP) yn y samplau hippocampus murine gan ddefnyddio pecyn ELISA o Shanghai Yi Li Biological Technology Co Ltd (Shanghai, Tsieina) yn unol â chyfarwyddiadau'r gwneuthurwr.

Amcangyfrif o straen ocsideiddiol mewn ymennydd murine

Fe wnaethom homogeneiddio meinwe hippocampus 10 0 mg gyda halwynog wedi'i oeri iâ 0.9 ml a chafodd y homogenad ei allgyrchu ar 12000 rpm am 30 munud ar 4 gradd C. Dadansoddwyd y cynnwys protein yn y supernatant gan ddefnyddio Pecyn Assay Protein BCA ( Beyotime Biotechnology, Shanghai, Tsieina). Dadansoddwyd lefelau perocsidiad lipid (LPO) a malondialdehyde (MDA), a gweithgareddau GSH-Px a SOD yn y samplau hippocampus yn ôl lliwimetreg gan ddefnyddio citiau o Sefydliad Biobeirianneg Nanjing Jiancheng (Nanjing, Tsieina) yn unol â chyfarwyddiadau'r gwneuthurwr.

Cyfansoddiad microbiota perfedd

Casglwyd samplau fecal o bob llygod a'u storio ar unwaith ar -80 gradd C. Cafodd rhanbarth V3 plus V4 o'r genyn rRNA 16S ei ddilyniannu gan ddefnyddio Illumina MiSeq (Beijing Novogene Co. Ltd., Beijing, Tsieina) a'i ddadansoddi gan ddefnyddio'r Llwyfan agored QIIME i bennu proffiliau microbiota'r perfedd.

Dadansoddiad LC/MS o fetabolion serwm

Deorwyd samplau serwm am 10 munud gyda methanol wedi'i oeri ymlaen llaw mewn cymhareb o 1:3 i waddodi'r proteinau. Cafodd y samplau eu centrifugio ar 12000r/munud am 15 munud ar 4 gradd C. Dadansoddwyd y supernatants gan Thermo Scientific Dionex UltiMate3000 Cromatograffaeth Hylif Cydraniad Cyflym a sbectrwm màs QExactive. Dangosir yr amodau cromatograffig yn Nhabl 1. Gwahanwyd y dadansoddiadau mewn colofn gromatograffig XBridge BEH Amide (2.1 × 100 mm; Waters Co., Aberdaugleddau, MA, UDA) gan ddefnyddio asid fformig 0.1 y cant ac asetonitrile fel cyfnodau symudol A a B, yn y drefn honno. Gosodwyd y gyfradd llif ar 0.4 ml/munud, cyfaint y pigiad oedd 5 µl, a gosodwyd tymheredd y golofn ar 25 gradd C (Tabl 1). Cafwyd y signalau sbectrwm màs gan ddefnyddio'r moddau sganio ïon positif a negyddol. Dangosir y foltedd chwistrellu ïon a pharamedrau MS penodol eraill yn Nhabl 2.

Dadansoddiad ystadegol

Statistical analysis was performed using the SPSS 13.0 software (SPSS Inc., Chicago, Illinois, USA). The data plots were generated using GraphPad Prism 8.0.1 (GraphPad Software, La Jolla, California, USA). Partial least squares discriminant analysis (OPLS-DA) of SIMCA-P+13.0 (Umetrics, AB, Umeå, Sweden) and Principal Components Analysis (PCA) were used to assess normalized GC-MS spectral data. Variable Influence on Projection (VIP) values were used to identify significant variables with VIP values >1.0 a t< 0.05.="" these="" significant="" variables="" were="" used="" to="" identify="" the="" spectral="" peaks.="" the="" student's="" t-test="" was="" used="" to="" analyze="" differences="" between="" two="" groups="" of="" data.="" the="" taxonomic="" rank="" differential="" between="" groups="" was="" determined="" using="" student's="" test="" (v3.1.2;="" r="" programming="" language).="" the="" correlation="" between="" genera="" abundance="" and="" mouse="" behavior="" was="" calculated="" using="" spearman="" correlation="" coefficients="" (r="" language).="" p="" <="" 0.05="" was="" considered="" statistically="" significant.="" the="" data="" are="" presented="" as="">

CYFEIRIADAU

1. Coates SS, Lehnert BE, Sharma S, Kindell SM, Gary RK. Mae beryllium yn achosi heneiddedd cynamserol mewn ffibroblastau dynol. J Pharmacol Exp Ther. 2007; 322:70-79. https://doi.org/10.1124/jpet.106.118018 PMID:17395767

2. Shwe T, Pratchayasakul W, Chattipakorn N, Chattipakorn SC. Rôl heneiddio ymennydd a achosir gan D-galactos a'i botensial a ddefnyddir ar gyfer ymyriadau therapiwtig. Exp Gerontol. 2018; 101:13-36. https://doi.org/10.1016/j.exger.2017.10.029 PMID:29129736

3. Ho SC, Liu JH, Wu RY. Sefydlu'r effaith heneiddio mimetig mewn llygod a achosir gan D-galactos. Biogerontoleg. 2003; 4:15-18. https://doi.org/10.1023/a:1022417102206 PMID:12652185

4.Song X, Bao M, Li D, Li YM. Glyciad uwch mewn model heneiddio llygoden a achosir gan D- galactos. Mech Heneiddio Dev. 1999; 108:239–51.

https://doi.org/10.1016/s0047-6374(99)00022-6 PMID:10405984

5. Yamauchi T, Oi A, Kosakamoto H, Akuzawa-Tokita Y, Murakami T, Mori H, Miura M, Obata F. Rhywogaethau Bacteraidd Perfedd Effaith Nodedig Host Purine Metabolites yn ystod Heneiddio yn Drosophila. iGwyddoniaeth. 2020; 23:101477. https://doi.org/10.1016/j.isci.2020.101477 PMID:32916085

6. Comisiwn Pharmacopoeia Tsieineaidd, Pharmacopeia Gweriniaeth Pobl Tsieina Ver. 2015. Gwasg Gwyddoniaeth a Thechnoleg Feddygol Tsieina, Beijing, Tsieina. 2015.

7. Wang N, Ji S, Zhang H, Mei S, Qiao L, Jin X.Herba Cistanches: Wrth heneiddio. Heneiddio Dis. 2017; 8:740-59. https://doi.org/10.14336/AD.2017.0720 PMID:29344414

8. Fu Z, Fan X, Wang X, Gao X.Cistanches Herba: Trosolwg o'i eiddo cemeg, ffarmacoleg a ffarmacocineteg. J Ethnopharmacol. 2018; 219:233–47.

https://doi.org/10.1016/j.jep.2017.10.015 PMID:29054705

9. Zhong C, Liu Z, Zhang X, Pu Y, Yang Z, Bao Y. Priodweddau ffisegemegol polysacaridau o Ligusticum chuanxiong a dadansoddiad o'u potensial gwrth-tiwmor trwy immunoregulation. Swyddogaeth Bwyd. 2021; 12:1719–31. https://doi.org/10.1039/d0fo02978e

PMID: 33502414

10.Shi YJ, Zheng HX, Hong ZP, Wang HB, Wang Y, Li FY, Li ZH. Effeithiau gwrth-diwmor gwahanol bowdr sborau Ganoderma lucidum mewn biobrofion sy'n seiliedig ar gelloedd a pysgod sebra. J Integr Med. 2021; 19:177-84. https://doi.org/10.1016/j.joim.2021.01.004 PMID:33495135

11. Zhang Z, Liu H, Yu B, Tao H, Li J, Wu Z, Liu G, Yuan C, Guo L, Cui B. Mae polysacarid barbarum Lycium yn gwanhau anaf myocardaidd mewn mic braster uchel sy'n cael eu bwydo â diet trwy drin y perfedd microbiome a metabolom fecal. Bwyd Res Int. 2020; 138:109778. https://doi.org/10.1016/j.foodres.2020.109778 PMID:33288164

12. CB Newgard, NE Sharpless. Dod i oed: ysgogwyr moleciwlaidd heneiddio a chyfleoedd therapiwtig. J Clin Buddsoddi. 2013; 123:946-50. https://doi.org/10.1172/JCI68833 PMID: 23454756

13. Wang H, Dwyer-Lindgren L, Lofgren KT, Rajaratnam JK, Marcus JR, Levin-Rheithor A, Levitz CE, Lopez AD, Murray CJ. Marwolaethau oedran-benodol a rhyw-benodol mewn 187 o wledydd, 1970-2010: dadansoddiad systematig ar gyfer Astudiaeth Baich Clefydau Byd-eang 2010. Lancet. 2012; 380:2071–94.

https://doi.org/10.1016/S0140-6736(12)61719-X PMID:23245603

14. Qabazard B, Stürzenbaum SR. H2S: Dull Newydd o Wella Hyd Oes a Heneiddio'n Iach? Handb Exp Pharmacol. 2015; 230:269–87. https://doi.org/10.1007/978-3-319-18144-8_14 PMID:26162840

15. Walrath T, Dyamenahalli KU, Hulsebus HJ, McCullough RL, Idrovo JP, Boe DM, McMahan RH, Kovacs EJ. Newidiadau cysylltiedig ag oedran mewn imiwnedd berfeddol a'r microbiome. J Leukoc Biol. 2020. [Epub o flaen llaw]. https://doi.org/10.1002/JLB.3RI0620-405RR PMID:33020981

16. Mishra B, Manmode S, Walke G, Chakraborty S, Neralkar M, Hotha S. Synthesis o'r motiff tetrasaccharid craidd hyper-ganghennog o glorofeirysau. Org Biomol Chem. 2021; 19:1315–28. https://doi.org/10.1039/d0ob02176h PMID:33459320

17. Gao Y, Liu Y, Ma F, Haul M, Cân Y, Xu D, Mu G, Tuo Y. Mae lactobacillus plantarum Y44 yn lleddfu straen ocsideiddiol trwy reoleiddio microbiota perfedd a swyddogaeth rhwystr colonig mewn llygod Balb/C gyda d-galactos isgroenol pigiad. Swyddogaeth Bwyd. 2021; 12:373-86. https://doi.org/10.1039/d0fo02794d

PMID:33325942

18. Francisco ÉC, Franco TT, Wagner R, Jacob-Lopes E. Asesiad o wahanol garbohydradau fel ffynhonnell carbon alldarddol wrth dyfu cyanobacteria. Bioprocess Biosyst Eng. 2014; 37:1497–505. https://doi.org/10.1007/s00449-013-1121-1 PMID:24445336

19. Uhde A, Youn JW, Maeda T, Clermont L, Matano C, Krämer R, Wendisch VF, Seibold GM, Marin K. Glucosamine fel ffynhonnell carbon ar gyfer cynhyrchu asid amino Corynebacterium glutamicum. Appl Microbiol Biotechnol. 2013; 97:1679–87. https://doi.org/10.1007/s00253-012-4313-8 PMID:22854894

1. Ladevèze S, Laville E, Despres J, Mosoni P, Potocki- Véronèse G. Mannoside adnabod a diraddio gan facteria. Biol Parch Camb Philos Soc. 2017; 92: 1969-90.

https://doi.org/10.1111/brv.12316 PMID:27995767

2. Limoli DH, Jones CJ, Wozniak DJ. Polysacaridau Allgellog Bacteraidd mewn Ffurfiant a Swyddogaeth Bioffilm. Sbectr Microbiol. 2015; 3:10.1128. https://doi.org/10.1128/microbiolspec.MB-0011-2014 PMID:26185074

3. Zeng H, Huang L, Zhou L, Wang P, Chen X, Ding K. Galactoglucan wedi'i ynysu oddi wrth Cistanche deserticola Y.

C. Ma. a'i bioactifedd ar straenau bacteria berfeddol. Polym Carbohydrad. 2019; 223:115038. https://doi.org/10.1016/j.carbpol.2019.115038 PMID:31426978

4. Subramanian V, Rodemoyer B, Shastri V, Rasmussen LJ, Desler C, Schmidt KH. Mae diffyg hofrennydd DNA syndrom Bloom yn gysylltiedig â straen ocsideiddiol a newidiadau rhwydwaith mitocondriaidd. Cynrychiolydd Gwyddonol 2021; 11:2157.

https://doi.org/10.1038/s41598-021-81075-0 PMID:33495511

5. Mashima K, O I, Fujiwara K, Izawa J, Takayama N, Nakano H, Kawasaki Y, Minakata D, Yamasaki R, Morita K, Ashizawa M, Yamamoto C, Hatano K, et al. Cymhariaeth o alemtuzumab, globulin gwrth-thymocyte, a cyclophosphamide ôl-drawsblaniad ar gyfer clefyd impiad yn erbyn gwesteiwr a impiad-yn-erbyn-lewcemia mewn modelau murine. PLoS Un. 2021; 16:e0245232. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0245232 PMID:33428661

6. Rooks MG, Garrett WS. Microbiota perfedd, metabolion ac imiwnedd gwesteiwr. Nat Parch Immunol. 2016; 16:341-52. https://doi.org/10.1038/nri.2016.42 PMID:27231050

7. Zierer J, Jackson MA, Kastenmüller G, Mangino M, T Long, Telenti A, Mohney RP, Small KS, Bell JT, Steves CJ, Valdes AC, Spector TD, Menni C. Mae'r metabolome fecal fel readout swyddogaethol o'r microbiome perfedd. Nat Genet. 2018; 50:790-95. https://doi.org/10.1038/s41588-018-0135-7 PMID:29808030

8. Wilmanski T, Rappaport N, Earls JC, Magis AT, Manor O, Lovejoy J, Omenn GS, Hood L, Gibbons SM, Pris ND. Mae metabolome gwaed yn rhagweld microbiome perfedd - amrywiaeth mewn bodau dynol. Nat Biotechnol. 2019; 37:1217–28.

https://doi.org/10.1038/s41587-019-0233-9 PMID:31477923

9. Chagoyen M, Pazos F. MBRole: dadansoddiad cyfoethogi o ddata metabolomig. Biowybodeg. 2011; 27:730-31. https://doi.org/10.1093/bioinformatics/btr001 PMID:21208985

10. Xia J, Wishart DS. Defnyddio MetaboAnalyst 3.0 ar gyfer Dadansoddiad Data Metabolomeg Cynhwysfawr. Biowybodeg Curr Protoc. 2016; 55:14.10. https://doi.org/10.1002/cpbi.11 PMID:27603023

11. Miao X, Zhang H, Wu Y, Liu D, Zhang X, Li G. Effaith amddiffynnol Cistanche verbascum glycosides ar anaf celloedd nerfol PC12 a achosir gan D-galactose. Cyfnodolyn Fferyllol Tsieineaidd. 2017; 52:2071–78.

12. Wu Y, Zhang H, Bu R, Ma H, Su M, Li G. Ymchwil ar effaith amddiffynnol polysacarid deserticola Cistanche ar y model heneiddio acíwt a achosir gan D-galactose. Bwletin Ffarmacol Tsieineaidd. 2017; 33:927-33.

13. Yin R, Li G, Yu T, Ma H, Ma T, Guo M. Effaith amddiffynnol polysacaridau cistanche Cistanche ar blastigrwydd synaptig mewn llygod â dysgu a achosir gan scopolamine a nam ar y cof. Bwletin Ffarmacol Tsieineaidd. 2014; 30:801-07.

14. Ma H, Yin R, Guo M, Bao Y, Cui Z, Li G. Effaith polysacaridau cistanche Cistanche ar fynegiant CREB mewn llygod model heneiddio a achosir gan D-galactos. Chinese Journal of Arbrofol E-Meddygaeth Tsieineaidd Traddodiadol. 2014; 20:137-41.

15. Fu Z, Han L, Zhang P, Mao H, Zhang H, Wang Y, Gao X, Liu E. polysacaridau Cistanche yn gwella amsugno echinacoside in vivo ac yn effeithio ar y microbiota perfedd. Int J Biol Macromol. 2020; 149:732 40.

https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2020.01.216 PMID:31987946

16. Bajaj JS, Gillevet PM, Patel NR, Ahluwalia V, Ridlon JM, Kettenmann B, Schubert CM, Sikaroodi M, Heuman DM, Crossey MM, Bell DE, Hylemon PB, Fatouros PP, Taylor-Robinson SD. Dadansoddiad bioleg systemau hydredol o dynnu'n ôl lactwlos mewn enseffalopathi hepatig. Metab Ymennydd Dis. 2012; 27:205–15. https://doi.org/10.1007/s11011-012-9303-0 PMID:22527995

17. Qian Y, Yang X, Xu S, Wu C, Song Y, Qin N, Chen SD, Xiao Q. Newid y microbiota fecal mewn cleifion Tsieineaidd â chlefyd Parkinson. Imiwn Ymddygiad Ymennydd. 2018; 70: 194-202. https://doi.org/10.1016/j.bbi.2018.02.016 PMID:29501802

18. Sjögren YM, Tomicic S, Lundberg A, Böttcher MF, Björkstén B, Sverremark-Ekström E, Jenmalm MC. Dylanwad microbiota perfedd cynnar ar aeddfedrwydd mwcosaidd plentyndod ac ymatebion imiwn systemig. Alergedd Clin Exp. 2009; 39:1842–51. https://doi.org/10.1111/j.1365-2222.2009.03326.x PMID:19735274

19. Uhde A, Youn JW, Maeda T, Clermont L, Matano C, Krämer R, Wendisch VF, Seibold GM, Marin K. Glucosamine fel ffynhonnell carbon ar gyfer cynhyrchu asid amino Corynebacterium glutamicum. Appl Microbiol Biotechnol. 2013; 97:1679–87. https://doi.org/10.1007/s00253-012-4313-8 PMID:22854894

20.Ladevèze S, Laville E, Despres J, Mosoni P, Potocki- Véronèse G. Mannoside adnabod a diraddio gan facteria. Biol Parch Camb Philos Soc. 2017; 92: 1969-90. https://doi.org/10.1111/brv.12316 PMID:27995767

21.Limoli DH, Jones CJ, Wozniak DJ. Polysacaridau Allgellog Bacteraidd mewn Ffurfiant a Swyddogaeth Bioffilm. Sbectr Microbiol. 2015; 3:10.1128. https://doi.org/10.1128/microbiolspec.MB-0011-2014 PMID:26185074

22. Zeng H, Huang L, Zhou L, Wang P, Chen X, Ding K. Galactoglucan ynysig o Cistanche deserticola YC Ma. a'i bioactifedd ar straenau bacteria berfeddol. Polym Carbohydrad. 2019; 223:115038. https://doi.org/10.1016/j.carbpol.2019.115038 PMID:31426978

23.Subramanian V, Rodemoyer B, Shastri V, Rasmussen LJ, Desler C, Schmidt KH. Mae diffyg hofrennydd DNA syndrom Bloom yn gysylltiedig â straen ocsideiddiol a newidiadau rhwydwaith mitocondriaidd. Cynrychiolydd Gwyddonol 2021; 11:2157.

https://doi.org/10.1038/s41598-021-81075-0 PMID:33495511

24.Mashima K, O I, Fujiwara K, Izawa J, Takayama N, Nakano H, Kawasaki Y, Minakata D, Yamasaki R, Morita K, Ashizawa M, Yamamoto C, Hatano K, et al. Cymhariaeth o alemtuzumab, globulin gwrth-thymocyte, a cyclophosphamide ôl-drawsblaniad ar gyfer clefyd impiad yn erbyn gwesteiwr a impiad-yn-erbyn-lewcemia mewn modelau murine. PLoS Un. 2021; 16:e0245232. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0245232 PMID:33428661

25. Rooks MG, Garrett WS. Microbiota perfedd, metabolion ac imiwnedd gwesteiwr. Nat Parch Immunol. 2016; 16:341-52. https://doi.org/10.1038/nri.2016.42 PMID:27231050

26.Zierer J, Jackson MA, Kastenmüller G, Mangino M, T Long, Telenti A, Mohney RP, KS Bach, Bell JT, Steves CJ, Valdes AC, Spector TD, Menni C. Mae'r metabolome fecal fel readout swyddogaethol o'r microbiome perfedd. Nat Genet. 2018; 50:790-95. https://doi.org/10.1038/s41588-018-0135-7 PMID:29808030

27. Wilmanski T, Rappaport N, Earls JC, Magis AT, Manor O, Lovejoy J, Omenn GS, Hood L, Gibbons SM, Price ND. Mae metabolome gwaed yn rhagweld microbiome perfedd - amrywiaeth mewn bodau dynol. Nat Biotechnol. 2019; 37:1217–28.

https://doi.org/10.1038/s41587-019-0233-9 PMID:31477923

28. Chagoyen M, Pazos F. MBRole: dadansoddiad cyfoethogi o ddata metabolomig. Biowybodeg. 2011; 27:730-31. https://doi.org/10.1093/bioinformatics/btr001 PMID:21208985

29. Xia J, Wishart DS. Defnyddio MetaboAnalyst 3.0 ar gyfer Dadansoddiad Data Metabolomeg Cynhwysfawr. Biowybodeg Curr Protoc. 2016; 55:14.10. https://doi.org/10.1002/cpbi.11 PMID:27603023

30. Miao X, Zhang H, Wu Y, Liu D, Zhang X, Li G. Effaith amddiffynnol Cistanche verbascum glycosides ar anaf celloedd nerfol PC12 a achosir gan D-galactose. Cyfnodolyn Fferyllol Tsieineaidd. 2017; 52:2071–78.

31. Wu Y, Zhang H, Bu R, Ma H, Su M, Li G. Ymchwil ar effaith amddiffynnol polysacarid deserticola Cistanche ar y model heneiddio acíwt a achosir gan D-galactose. Bwletin Ffarmacol Tsieineaidd. 2017; 33:927-33.

32. Yin R, Li G, Yu T, Ma H, Ma T, Guo M. Effaith amddiffynnol polysacaridau cistanche Cistanche ar blastigrwydd synaptig mewn llygod â dysgu a achosir gan scopolamine a nam ar y cof. Bwletin Ffarmacol Tsieineaidd. 2014; 30:801-07.

33. Ma H, Yin R, Guo M, Bao Y, Cui Z, Li G. Effaith polysacaridau cistanche Cistanche ar fynegiant CREB mewn llygod model heneiddio a achosir gan D-galactos. Chinese Journal of Arbrofol E-Meddygaeth Tsieineaidd Traddodiadol. 2014; 20:137-41.

34. Mae Fu Z, Han L, Zhang P, Mao H, Zhang H, Wang Y, Gao X, Liu E. polysacaridau Cistanche yn gwella amsugno echinacoside in vivo ac yn effeithio ar y microbiota perfedd. Int J Biol Macromol. 2020; 149:732-40. https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2020.01.216 PMID:31987946

35.Bajaj JS, Gillevet PM, Patel NR, Ahluwalia V, Ridlon JM, Kettenmann B, Schubert CM, Sikaroodi M, Heuman DM, Crossey MM, Bell DE, Hylemon PB, Fatouros PP, Taylor-Robinson SD. Dadansoddiad bioleg systemau hydredol o dynnu'n ôl lactwlos mewn enseffalopathi hepatig. Metab Ymennydd Dis. 2012; 27:205–15. https://doi.org/10.1007/s11011-012-9303-0 PMID:22527995

36. Qian Y, Yang X, Xu S, Wu C, Song Y, Qin N, Chen SD, Xiao Q. Newid y microbiota fecal mewn cleifion Tsieineaidd â chlefyd Parkinson. Imiwn Ymddygiad Ymennydd. 2018; 70: 194-202. https://doi.org/10.1016/j.bbi.2018.02.016 PMID:29501802

37.Sjögren YM, Tomicic S, Lundberg A, Böttcher MF, Björkstén B, Sverremark-Ekström E, Jenmalm MC. Dylanwad microbiota perfedd cynnar ar aeddfedrwydd mwcosaidd plentyndod ac ymatebion imiwn systemig. Alergedd Clin Exp. 2009; 39:1842–51. https://doi.org/10.1111/j.1365-2222.2009.03326.x PMID:19735274

38.Rangel I, Ganda Mall JP, Willén R, Sjöberg F, Hultgren- Hörnquist E. Mae graddau colitis yn cydberthyn â chyfansoddiad microbaidd ac ymatebion cytocin mewn colon a chaecum o lygod diffygiol G i2-. FEMS Microbiol Ecol. 2016; 92:ffiw098. https://doi.org/10.1093/femsec/fiw098 PMID:27162181

39. Larbi A, Pawelec G, Witkowski JM, Schipper HM, Derhovanessian E, Goldeck D, Fulop T. Sifftiau dramatig mewn cylchredeg CD4 ond nid is-setiau celloedd T CD8 mewn clefyd Alzheimer ysgafn. J Alzheimers Dis. 2009; 17:91-103.

https://doi.org/10.3233/JAD-2009-1015 PMID:19494434

40.West CE, Rydén P, Lundin D, Engstrand L, Tulic MK, Prescott SL. Microbiome perfedd a phatrymau ymateb imiwn cynhenid ​​mewn ecsema sy'n gysylltiedig ag IgE. Alergedd Clin Exp. 2015; 45:1419–29. https://doi.org/10.1111/cea.12566 PMID: 25944283

41. Wong ML, Inserra A, Lewis MD, Mastronardi CA, Leong L, Choo J, Kentish S, Xie P, Morrison M, Wesselingh SL, Rogers GB, Licinio J. Mae signalau inflammasome yn effeithio ar orbryder- ac ymddygiad iselder tebyg a'r perfedd cyfansoddiad microbiome. Seiciatreg Mol. 2016; 21:797-805.

https://doi.org/10.1038/mp.2016.46 PMID:27090302

42. Abildgaard A, Elfving B, Hokland M, Wegener G, Lund S. Mae triniaeth probiotig yn lleihau ymddygiad tebyg i iselder mewn llygod mawr yn annibynnol ar ddeiet. Seiconeuroendocrinoleg. 2017; 79:40–48. https://doi.org/10.1016/j.psyneuen.2017.02.014 PMID:28259042

43.Bercik P, Verdu EF, Foster JA, Macri J, Potter M, Huang X, Malinowski P, Jackson W, Blennerhassett P, Neufeld KA, Lu J, Khan WI, Corthesy-Theulaz I, et al. Mae llid gastroberfeddol cronig yn achosi ymddygiad tebyg i bryder ac yn newid biocemeg y system nerfol ganolog mewn llygod. Gastroenteroleg. 2010; 139:2102–2112.e1. https://doi.org/10.1053/j.gastro.2010.06.063 PMID:20600016

44.Yoshimoto S, Mitsuyama E, Yoshida K, Odamaki T, Xiao JZ. Metabolion cyfoethog a allai hyrwyddo clefydau sy'n gysylltiedig ag oedran mewn pobl â microbiota perfedd henoed. Microbau perfedd. 2021; 13:1-11. https://doi.org/10.1080/19490976.2020.1865705 PMID:33430687

45.Chatterjee P, Cheong YJ, Bhatnagar A, Goozee K, Wu Y, McKay M, Martins IJ, Lim WL, Pedrini S, Tegg M, Villemagne VL, Asih PR, Dave P, et al. Metabolion plasma sy'n gysylltiedig â thystiolaeth biofarciwr o niwroddirywiad mewn oedolion hŷn gwybyddol normal. J Neurochem. 2020. [Epub o flaen llaw]. https://doi.org/10.1111/jnc.15128 PMID:32679614

46. ​​Mahajan UV, Varma VR, Griswold ME, Blackshear CT, An Y, Oommen AC, Varma S, Troncoso JC, Pletnikova O, O'Brien R, Hohman TJ, Legido-Quigley C, Thambisetty M. Dysregulation o rwydweithiau metabolaidd lluosog yn ymwneud â llwybrau trawsmethylation yr ymennydd a polyamine mewn clefyd Alzheimer: Astudiaeth metabolomeg ac trawsgrifiad wedi'i thargedu. PLoS Med. 2020; 17:e1003012. https://doi.org/10.1371/journal.pmed.1003012 PMID:31978055

47.Duerkop BA, Vaishnava S, Hooper LV. Ymatebion imiwnedd i'r microbiota ar yr wyneb mwcosol berfeddol. Imiwnedd. 2009; 31:368-76. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2009.08.009 PMID:19766080

48. Forsythe P, Bienenstock J. Imiwnofodiwleiddio gan facteria commensal a probiotig. Buddsoddiad Immunol. 2010; 39:429–48. https://doi.org/10.3109/08820131003667978 PMID: 20450286

49. Sternberg EM. Rheoleiddio niwral o imiwnedd cynhenid: ymateb gwesteiwr amhenodol cydgysylltiedig i bathogenau. Nat Parch Immunol. 2006; 6:318-28. https://doi.org/10.1038/nri1810 PMID: 16557263

50.Colonna M, Butovsky O. Swyddogaeth Microglia yn y System Nerfol Ganolog Yn ystod Iechyd a Niwroddirywiad. Annu Parch Immunol. 2017; 35:441–68. https://doi.org/10.1146/annurev-immunol-051116- 052358 PMID:28226226

51. El Khoury J. Niwroddirywiad a'r system niwroimiwn. Nat Med. 2010; 16:1369-70. https://doi.org/10.1038/nm1210-1369 PMID:21135838

52. Fu W, Vukojevic V, Patel A, Soudy R, MacTavish D, Westaway D, Kaur K, Goncharuk V, Jhamandas J. Rôl derbynyddion amylin microglial wrth gyfryngu beta amyloid (A)-llid a achosir. J Niwro-fflamiad. 2017; 14:199. https://doi.org/10.1186/s12974-017-0972-9 PMID:28985759

53. Yang X, Zeng Q, Tezel G. Rheoleiddio swyddogaethau caspase - 8 gwahanol mewn celloedd ganglion retinol ac astroglia mewn glawcoma arbrofol. Neurobiol Dis. 2021; 150:105258. https://doi.org/10.1016/j.nbd.2021.105258 PMID:33434617

54. Ashok A, Singh N, Chaudhary S, Bellamkonda V, Kritikos AE, Wise AS, Rana N, McDonald D, Ayyagari R. Dirywiad Retinol a Chlefyd Alzheimer: Cyswllt Esblygol. Int J Mol Sci. 2020; 21:7290. https://doi.org/10.3390/ijms21197290 PMID:33023198

55. Ruediger S, Vittori C, Bednarek E, Genoud C, Strata P, Sacchetti B, Caroni P. Twf cysylltedd ataliol feedforward cysylltiedig â dysgu sy'n ofynnol ar gyfer trachywiredd cof. Natur. 2011; 473:514–18. https://doi.org/10.1038/nature09946 PMID: 21532590

56. Wood RA, Bauza M, Krupic J, Burton S, Delekate A, Chan D, O'Keefe J. Mae'r ddrysfa diliau yn darparu prawf newydd i astudio llywio gofodol sy'n ddibynnol ar hippocampal. Natur. 2018; 554:102–05. https://doi.org/10.1038/natur25433