Mae Cistanche Glycoside yn Dadreoleiddio Bmi1 Ac yn Hyrwyddo Ymlediad Bôn-gelloedd Sbermatogonaidd Llygoden Trwy Lwybr Signalau Akt

Amcan: Ymchwilio i effaith hyrwyddo a mecanweithiau cysylltiedig Cistanche glycosides ar doreth o fôn-gelloedd sbermatogonial llygoden. Dull: Defnyddiwyd assay MTT ac assay amlhau celloedd EdU i ganfod effaith glycoside Cistanche ar allu amlhau bôn-gelloedd sbermatogonial llygoden; defnyddiwyd dull blot y Gorllewin i ganfod mynegiant proteinau Bmi1, p-Akt, ac Akt gan cistanche glycoside; Canfu'r arbrawf RT-PCR ganlyniadau mynegiant genynnau cysylltiedig, ac yn olaf dangosodd y berthynas reoleiddiol i fyny'r afon ac i lawr yr afon rhwng proteinau p-Akt a Bmi1 trwy atalyddion a siRNA. Canlyniad: O'i gymharu â'r grŵp rheoli, 0.5-1 µ Roedd Cistanche glycoside yn hybu toreth o fôn-gelloedd sbermatogonial llygoden (P<0.05); Compared with the control group, the expression levels of p-Akt and Bmi1 proteins in the 0.5-1 µ M Cistanche glycoside treated group increased (P<0.05); Akt inhibitors downregulated the levels of p-Akt and Bmi proteins (P<0.05); SiBmi1 had no significant effect on Akt mRNA levels (P>0.05). Casgliad: Mae Cistanche glycoside yn actifadu llwybr signalau Akt ac yn uwchreoleiddio mynegiant Bmi1, gan hyrwyddo toreth o fôn-gelloedd sbermatogonial llygoden.

Geiriau allweddol: Cistanche glycoside; Bôn-gelloedd sbermatogonial llygoden; Bmi1; amlhau celloedd

Mae anffrwythlondeb wedi dod yn broblem fyd-eang sy'n rhwystro datblygiad cymdeithas ddynol [1-2]. Yn ôl ystadegau epidemiolegol, mae tua 15 y cant -20 y cant o gyplau ledled y byd yn dioddef o glefydau anffrwythlondeb, gyda chamweithrediad gwrywaidd yn achosi mwy na 50 y cant o symptomau anffrwythlondeb [3]. Felly, mae dod o hyd i ddulliau triniaeth effeithiol ar gyfer anffrwythlondeb gwrywaidd wedi dod yn bwnc ymchwil poeth ym maes iechyd atgenhedlol yn ddomestig ac yn rhyngwladol.

Cistanche manteision gwrywaidd-Tonifying aren

Cliciwch yma i weld Cistanche ar gyfer cynhyrchion clefyd yr arennau

【Gofyn am fwy】 E-bost:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Gall y cymhleth atalydd protein polycomb 1 (PRC1) sy'n cynnwys safle integreiddio firws lewcemia llygoden Moroni-benodol B 1 (Bmi1) atal heneiddio cynamserol a chynnal gallu hunan-adnewyddu bôn-gelloedd [4]. Mae Protein kinase B (Akt) yn ymwneud ag amlhau a gwahaniaethu celloedd [5], ac mae Akt wedi'i actifadu yn cymryd rhan mewn amrywiol weithgareddau biolegol pwysig [6-7].

Mae Cistanche glycoside I (C27H30O11, pwysau moleciwlaidd: 530.52) yn hydrolyzate o glycoside Cistanche wedi'i ynysu o feddyginiaeth draddodiadol Tsieineaidd Cistanche glycoside, sydd â gweithgareddau ffarmacolegol a biolegol amrywiol [8-9]. Yn ôl adroddiadau, gall Cistanche glycoside gael effaith therapiwtig benodol ar osteoporosis [10]. Fodd bynnag, nid yw effaith Cistanche glycoside I ar swyddogaeth atgenhedlu gwrywaidd yn glir eto. Bôn-gelloedd sbermatogenig (SSCs) yw’r grŵp sberm mwyaf cyntefig sydd â’r gallu i hunan-adnewyddu a gwahaniaethu, gan chwarae rôl anadferadwy wrth gynnal swyddogaeth atgenhedlu gwrywaidd. Felly, defnyddiodd yr astudiaeth hon SSCs llygoden fel model in vitro i archwilio effaith glycoside Cistanche ar allu amlhau SSCs llygoden a'u mecanwaith gweithredu.

Anialwch ginseng-Tonifying aren

1 Deunydd a Dulliau

1.1 Diwylliant Cell

Yn yr astudiaeth hon, defnyddiwyd bôn-gelloedd sbermatogonial llygoden (C18-4). Daeth y celloedd o grŵp ymchwil yr Athro He Zuping a chawsant eu gwahanu, eu puro, a'u nodi yn unol â'r manylebau. Ychwanegwyd bôn-gelloedd sbermatogonial y llygoden 10 y cant o serwm buchol ffetws (Gibco) ac 1 y cant penisilin / streptomycin yn DMEM / F12 (Gibco), a'u meithrin yn ganolig (37 gradd, 5 y cant CO2)

1.2 arbrawf MTT

Brechu C18-4 gyda swm o 5000 o gelloedd fesul ffynnon i mewn i 96-blat ffynnon i sicrhau brechiad cell unffurf. Ar ôl adlyniad celloedd, dewiswch y cyffuriau a'r crynodiadau cyffuriau gofynnol ar gyfer triniaeth. Ar ôl 72 awr o gaeth i gyffuriau, ychwanegwyd 50 µ L o glas thiazole parod (MTT) at y ffynnon lle cafodd y celloedd eu brechu, a gosodwyd y 96 o blatiau ffynnon mewn deorydd cell am 4-5 awr. Ar ôl deori, taflwch yr hydoddiant meithrin o'r 96 o blatiau ffynnon, ychwanegwch 150 µ L o sylfocsid dimethyl (DMSO) i bob ffynnon, ac yn olaf mesurwch yr amsugnedd gan ddefnyddio assay immunosorbent sy'n gysylltiedig ag ensymau (Biotek) ar donfedd o 490 nm.

Powdr Cistanche - Tonifying aren

1.3 amlhau celloedd EdU

Brechu celloedd yn gyfartal ar blât ffynnon (6.0 × 103/wel), ar ôl i'r celloedd gadw at y wal, ychwanegu cyffuriau am 24 awr yn ôl yr anghenion arbrofol, ac yna defnyddio 100 μ LDMEM/ Mae F12 yn cynnwys 20 µ L EdU yn lle'r cyfrwng meithrin gwreiddiol ac yna caiff potensial amlhau celloedd ei brofi yn unol â chyfarwyddiadau pecyn prawf EdU.

1.4 Blot gorllewinol

Rhannwyd y sampl protein celloedd wedi'i storio ymlaen llaw gan gel SDS PAGE ac yna'i drosglwyddo i'r bilen PVDF ar ôl electrofforesis. Cafodd ei selio â 5 y cant o laeth sgim am 1 awr. Fe'i cyfunwyd â gwrthgorff cynradd penodol ar 4 gradd dros nos: gwrthgorff p-Akt gwrth-lygoden cwningen (1 ∶ 2000) (CST), gwrthgorff Akt (1 ∶ 1000) (CST), GAPDH (1 ∶ 5000) (Abcam), Bmi1 (1 ∶ 5000) (Abcam). Ar yr ail ddiwrnod, rhwymwch â gwrthgorff eilaidd cwningen ar dymheredd yr ystafell am 1 awr. Canfuwyd y proteinau cyfatebol gan ddefnyddio'r pecyn Chemiluminescence Liquid (ECL) (Bio-Rad), ac yn olaf, gwelwyd yr adwaith antigen-gwrthgorff gan ddefnyddio'r system ChemiDoc (Bio-Rad).

1.5 RT-PCR

Yr adweithydd a ddefnyddir yn y broses echdynnu RNA gyfan yw adweithydd TRIzol (Invitrogen), a cheir cDNA yn unol â chyfarwyddiadau pecyn trawsgrifio gwrthdro cDNA llinyn cyntaf (Vazyme). Perfformiwyd RT PCR gan ddefnyddio mynegiant genynnau TaqMan Master Mix (Bio-Rad) yn ôl y cyfarwyddiadau, gan ddefnyddio ΔΔ Mae'r dull Ct yn cyfrifo'r newid mewn lluosrifau cymharol mynegiant mRNA, gyda gwerth o 2 − ΔΔ Ct. Tabl dilyniant cysefin yn (Tabl 1)

1.6 trawsnewidiad siRNA

Prynwyd siRNA Bmi 1 mRNA o Ribobio ac mae'r rhestr dilyniant yn Nhabl 2. Defnyddiwyd yr adweithydd trawslifiad Lipofectamine 6000 (Invitrogen). Cafodd celloedd (2.0 × 105/wel) eu meithrin dros nos yn DMEM/F 12 wedi'i ategu gan serwm buchol ffetws 10 y cant ar blât ffynnon 6-. Yn ôl canllawiau'r gwneuthurwr, cymysgwyd Lipofectamine 6000 yn drylwyr â siRNA rheoli a Bmi1 siRNA, yn y drefn honno, a'i drawsosod am 5 awr mewn cyfrwng diwylliant heb serwm buchol ffetws. Ar ôl golchi gyda PBS, disodlwyd y cyfrwng diwylliant gwreiddiol â serwm buchol ffetws 10 y cant DMEM/F12. Ar ôl 24 awr, casglwyd celloedd i ganfod newidiadau mynegiant amrywiol broteinau a genynnau cyfatebol.

Tabl 1 RT PCR dilyniannau paent preimio mwy

Tabl 2 dilyniant siRNA Bmi1

1.7 Dadansoddiad Ystadegol

Dadansoddwyd yr holl ddata gan ddefnyddio meddalwedd SPSS 16.0 a GraphPad Prism 8. Yn seiliedig ar y gwahaniaethau mewn gwerthoedd cymedrig rhwng dau neu fwy o grwpiau, dewiswyd prawf t Myfyrwyr a phrawf ANOVA un ffordd i'w cymharu. Gwahaniaeth o P<0.05 was considered statistically significant.

2 Canlyniadau

2.1 Effeithiau glycosidau Cistanche ar fôn-gelloedd sbermatogonaidd

Er mwyn penderfynu a oes gan glycosid Epimedium I effaith lluosog ar fôn-gelloedd sbermatogonial llygoden, canfuwyd trwy arbrofion MTT y gall Cistanche glycoside I hyrwyddo toreth o fôn-gelloedd sbermatogonial llygoden mewn crynodiadau o {{0}}.5 ac 1 µ M (Ffigur 1A). Nesaf, er mwyn gwirio ymhellach effaith ymledol Cistanche glycoside I ar fôn-gelloedd sbermatogonial llygoden, fe wnaethom gadarnhau ymhellach trwy arbrofion amlhau celloedd EdU y gall Cistanche glycoside I hefyd hyrwyddo toreth o fôn-gelloedd sbermatogonial llygoden ar grynodiadau o 0.5 ac 1 µM (Ffigur 1B).

Anial byw cistanche-Tonifying aren

2.2 Mae glycoside Cistanche yn dadreoleiddio mynegiant Bmi1

Mae astudiaethau labordy blaenorol wedi dangos bod Bmi1 wedi'i fynegi'n fawr mewn meinwe ceilliau o'i gymharu â meinweoedd organau eraill, ac fe'i mynegir yn bennaf yng nghnewyllyn bôn-gelloedd sbermatogonial llygoden. Mae astudiaethau diweddar wedi dangos bod Bmi1 yn arwyddocaol iawn o ran cynnal toreth o fôn-gelloedd sbermatogonaidd [12]. Felly, rydym yn dyfalu bod Cistanche glycoside I yn cael effaith reoleiddiol ar Bmi1, a thrwy hynny hyrwyddo toreth o fôn-gelloedd sbermatogonial llygoden. Dangosodd canlyniadau blot y gorllewin fod Cistanche glycoside I wedi dadreoleiddio mynegiant protein Bmi1 yn sylweddol (Ffigur 2).

2.3 Mae glycoside Cistanche yn actifadu llwybr signalau Akt

Yn ôl adroddiadau, mae Akt ffosfforylated yn perthyn yn agos i amlhau a gwahaniaethu celloedd [13]. Felly, gwnaethom ymchwilio i effaith icariin I ar ffosfforyleiddiad Akt. Canfuom fod glycosidau Cistanche wedi uwchreoleiddio mynegiant ffosfforyleiddiad Akt yn sylweddol ar grynodiadau o 0.5 ac 1 µ M (Ffigur 3).

2.4 Atal is-reoleiddio Akt Bmi1

Yn ôl adroddiadau ymchwil blaenorol [14], fe wnaethom ddewis atalydd Akt (MK-2206) mewn crynodiad o 10 (µ M) a chanfod bod atal p-Akt yn atal Bmi1 yn sylweddol. Mae'r canlyniad hwn yn dangos bod mynegiant Bmi1 yn cael ei reoleiddio gan Akt (Ffigur 4)

Ffigur 1: Effaith Cistanche glycoside I ar fôn-gelloedd sbermatogonial llygoden

A. Defnyddiwyd assay MTT i ganfod effaith triniaeth Cistanche glycoside I am 3 diwrnod ar hyfywedd bôn-gelloedd sbermatogonial llygoden; B. Defnyddiwyd arbrawf amlhau celloedd EdU i ganfod toreth o fôn-gelloedd sbermatogonial llygoden ar ôl 3 diwrnod o driniaeth â glycosidau Cistanche, yn ogystal â'r siart dadansoddi ystadegol; *P<0.05, * * P<0.01 compared to the control group, n=3.

Ffigur 2: Effaith glycoside Cistanche I ar brotein Bmi1

Defnyddiwyd assay blot gorllewinol i ganfod effaith triniaeth Cistanche deserticola glycoside I ar fynegiant Bmi1 mewn bôn-gelloedd sbermatogonial llygoden ar ôl 24 awr, a chyflwynwyd y map ystadegol hefyd* P<0.05, compared to the control group, n=3.

Ffigur 3: Effaith glycoside Cistanche I ar lwybr signalau Akt

Defnyddiwyd assay blot gorllewinol i ganfod mynegiant ffosfforyleiddiad Akt ac Akt mewn bôn-gelloedd sbermatogonial llygoden ar ôl 24 awr o driniaeth gyda Cistanche Cistanche glycoside I, a chyflwynwyd y map ystadegol hefyd** P<0.01, compared to the control group, n=3.

Ffigur 4: Effaith atalydd Akt ar Bmi1. Defnyddiwyd arbrawf blot gorllewinol i ganfod mynegiant Akt a Bmi1 ffosfforylaidd mewn bôn-gelloedd sbermatogonial llygoden ar ôl 24 awr o driniaeth atalydd Akt, a chyflwynwyd y diagram ystadegol* P<0.05 * * P<0.01, compared to the control group, n=3.

2.5 Nid yw distawrwydd Bmi1 yn effeithio ar fynegiant Akt

Er mwyn dilysu ymhellach y berthynas i fyny'r afon-i lawr yr afon rhwng Bmi1 ac Akt, gwnaethom dawelu Bmi1 ac arsylwi ar newidiadau mewn mynegiant cell Akt. Yn gyntaf, trosglwyddwyd siRNAs o wahanol ddilyniannau o Bmi1 i gelloedd llygoden i archwilio eu heffeithlonrwydd trawsgludiad. Dangosodd canlyniadau arbrawf RT PCR fod siBmi1-1, siBmi1-2, a siBmi1-3 i gyd wedi lleihau mynegiant Bmi1 yn sylweddol, gyda siBmi1-2 a siBmi1-3 cael effeithiau gwell (Ffigur 5A). Cadarnhaodd Western Blot ymhellach y gall siBmi1-2 a siBmi1-3 leihau lefelau protein Bmi1 yn sylweddol (Ffigur 5B), felly dewiswyd siBmi1-2 a siBmi{1-3 ar gyfer ymchwil dilynol. Yn ddiddorol, dangosodd RT-PCR nad oedd tawelu Bmi1 yn effeithio ar fynegiant Akt (Ffigur 5C). Mae'r canlyniadau uchod yn dangos bod Akt wedi'i leoli i fyny'r afon o Bmi1.

Ffigur 5: Effaith tawelu Bmi1 ar Akt

A. Dadansoddiad RT-PCR o effeithiau tri dilyniant tawelu ar fynegiant y genyn Bmi1; B. Defnyddiwyd arbrawf blot gorllewinol i ganfod effaith tri dilyniant siRNA gwahanol ar dawelu protein Bmi1 o'i gymharu â siCtrl, a pherfformiwyd dadansoddiad ystadegol; C. Dadansoddiad RT-PCR o effaith tawelu Bmi1 ar genyn Akt** P<0.01, * * * P<0.001 compared to the control group, n=3.

3 Trafodaeth

Mae anffrwythlondeb yn llesteirio datblygiad cynaliadwy cymdeithas ddynol yn ddifrifol, gydag anffrwythlondeb gwrywaidd yn cyfrif am 50 y cant o gleifion anffrwythlondeb. Gyda datblygiad parhaus technoleg feddygol, mae lefel triniaeth glinigol anffrwythlondeb gwrywaidd wedi gwella'n sylweddol. Fodd bynnag, mae gan ddulliau triniaeth lawfeddygol presennol, megis technoleg atgenhedlu â chymorth, anfanteision megis cost uchel a chyfradd llwyddiant isel ac mae ganddynt ystod fach o fuddiolwyr. Maent yn addas ar gyfer cleifion sydd ag azoospermia cyflawn yn ystod adalw sberm micro y ceilliau, sydd â chlefydau genetig clir, ac nad ydynt yn barod i dderbyn triniaeth am wahanol resymau [16]. Felly, gwnaed ymdrechion domestig a rhyngwladol i ddatblygu dulliau trin mwy diogel a mwy dibynadwy ar gyfer anffrwythlondeb gwrywaidd, ac mae therapi cyffuriau wedi dod yn fan cychwyn ymchwil ym maes anffrwythlondeb gwrywaidd [17]. Mae ymarfer clinigol presennol wedi dangos bod gan feddyginiaeth Tsieineaidd draddodiadol yn Tsieina effeithiolrwydd a diogelwch da wrth drin anffrwythlondeb gwrywaidd [18].

Cistanche deserticola effeithiolrwydd - Tonifying aren

Mae Cistanche glycoside yn bwnc llosg wrth drin anffrwythlondeb gwrywaidd mewn meddygaeth draddodiadol Tsieineaidd yn y blynyddoedd diwethaf. Mae gan ei brif gydran, Cistanche glycoside, weithgareddau ffarmacolegol amrywiol, gan gynnwys gwella swyddogaeth imiwnedd [19], gwella swyddogaeth atgenhedlu gwrywaidd [20], gwrthocsidyddion [21], a gwrth-osteoporosis [22]. Er mwyn egluro ymhellach fecanwaith gweithredu Cistanche glycoside ar ôl iddo fynd i mewn i'r corff dynol, dewisodd yr astudiaeth hon Cistanche glycoside, hydrolyzate o glycoside Cistanche, fel gwrthrych yr ymchwil i archwilio'r mecanwaith penodol y mae'r hydrolysad yn cael ei effaith ffarmacolegol. Yn gyntaf, canfuom y gall Cistanche glycoside I hyrwyddo toreth o fôn-gelloedd sbermatogonial llygoden. Mae'n werth nodi nad oedd Cistanche glycoside I yn hyrwyddo toreth o fôn-gelloedd sbermatogonial llygoden mewn modd sy'n dibynnu ar ganolbwyntio, sy'n nodi bod gan Cistanche glycoside I ystod dos-ddiogel. Nesaf, canfuom fod Cistanche glycoside I wedi uwch-reoleiddio lefel mynegiant protein Bmi1 sy'n perthyn yn agos i swyddogaeth atgenhedlu gwrywaidd. Yn ddiweddar, mae ymchwilwyr wedi canfod y gall absenoldeb Bmi1 effeithio'n ddifrifol ar swyddogaeth atgenhedlu llygod gwrywaidd, a amlygir yn bennaf mewn oligospermia ac ehangu ceilliau [23]. Yn y cyfamser, cadarnhaodd astudiaeth arall gan ein grŵp ymchwil hefyd y gall atal Bmi1 effeithio'n ddifrifol ar allu amlhau bôn-gelloedd sbermatogonaidd. Felly, rydym yn dyfalu y gallai Cistanche glycoside I sy'n hyrwyddo toreth o fôn-gelloedd sbermatogonial llygoden fod yn gysylltiedig â rheoleiddio mynegiant Bmi1. Yn ôl adroddiadau, mae p-Akt yn perthyn yn agos i amlhau a gwahaniaethu celloedd [14]. Felly, gwnaethom brofi'r newidiadau mewn protein p-Akt a achosir gan Cistanche glycoside I a chanfod bod Cistanche glycoside I hefyd wedi dadreoleiddio p-Akt. Yn olaf, archwiliwyd y berthynas i fyny'r afon ac i lawr yr afon rhwng Akt a Bmi1. Mae'n werth nodi bod gwahaniaethau yng nghanlyniadau ymchwil y berthynas i fyny'r afon ac i lawr yr afon rhwng Bmi1 ac Akt a gafwyd gan wahanol labordai [24-25]. Mae canlyniadau'r astudiaeth hon yn dangos bod atalyddion Akt-benodol yn is-reoleiddio Bmi1 tra nad yw tawelu Bmi1 yn effeithio ar lefelau Akt mRNA, gan nodi y gallai Akt fod i fyny'r afon o Bmi1, sy'n cael ei reoleiddio gan Akt. Yn yr astudiaeth o effaith tawelu Bmi1 ar Akt, dim ond ar lefel mRNA y gwnaethom ei archwilio. Gan fod Bmi1 yn atalydd trawsgrifio, rydym yn dyfalu y gallai fod rhyngweithio rhwng y protein Bmi1 a'r protein Akt. Fodd bynnag, nid oes tystiolaeth gyflawn ar hyn o bryd i gadarnhau'r berthynas i fyny'r afon ac i lawr yr afon rhwng Akt a Bmi1. Felly, byddwn yn ychwanegu at hyn ac yn ei wella yn y dyfodol.

Effeithiau Cistanche-Tonifying aren

I grynhoi, canfu'r astudiaeth hon am y tro cyntaf bod Cistanche glycoside I yn cael yr effaith o hyrwyddo toreth o fôn-gelloedd sbermatogonial, gan ddatgelu mecanwaith newydd o glycoside Cistanche I hyrwyddo toreth o fôn-gelloedd sbermatogonial ar y lefel gellog, gan gyfoethogi'r sail ddamcaniaethol. ar gyfer cymhwyso Cistanche glycoside mewn triniaeth glinigol anffrwythlondeb gwrywaidd.

cyfeiriad

［1］ Dutta S, Biswas A, Sengupta P. Gordewdra, aflonyddwch endocrin ac anffrwythlondeb gwrywaidd ［J］. Atgynhyrchiad Pac J Asiaidd, 2019, 8(5): 195.

［2］ Zhang F, Liu M, Gao J. Newidiadau mewn genynnau codio cymhleth synaptonemaidd ac anffrwythlondeb dynol ［J］. Int J Biol Sci, 2022, 18(5): 1933-1943.

［3］ Serrano R, Garcia-Marin LJ, Bragado MJ. Ffosffoproteom sberm: Datrys Anffrwythlondeb Gwryw ［J］. Bioleg (Basel), 2022, 11(5): 659.

［4］ Yang D, Pencadlys Liu, Yang Z, et al. BMI1 yn y galon: Swyddogaethau newydd y tu hwnt i tumorigenesis ［J］. EBioMeddygaeth, 2021, 63: 103193.

［5］ Abeyrathna P, Su Y. Rôl hanfodol Akt mewn swyddogaeth gardiofasgwlaidd ［J］. Vascul Pharmacol, 2015, 74: 38-48.

［6］ Peltier J, O'Neill A, Schaffer DV. Mae PI3K/Akt a CREB yn rheoleiddio amlder a gwahaniaethu epil hipocampal niwral oedolion ［J］. Dev Neurobiol, 2007, 67(10): 1348-1361.

［7］ Rafalski VA, Brunet A. Metabolaeth egni mewn tynged bôn-gelloedd niwral oedolion ［J］. Rhaglen Neurobiol, 2011, 93:182–203.

［8］Liu Zichen, Xu Ying, Chen Shizhong Pharmacokinetics a dosbarthiad meinwe o Cistanche glycoside I mewn llygod mawr [J] Chinese Journal of Pharmacy, 2008 (11): 848-851

. 4}}

［10］Zi Hui, Fan Ying, Jiang Ning, et al Astudiaeth arbrofol ar hyrwyddo gwahaniaethu osteogenig o fôn-gelloedd mesenchymal mêr esgyrn llygod mawr trwy lwybr signalau BMP/Runx2/Osx gan Cistanche glycoside I a Cistanche glycoside II [J] Chinese Journal of Osteoporosis, 2019, 25 (05): 690-695

［11］ Zhou S, Dong J, Xiong M, et al. Mae UHRF1 yn rhyngweithio â snRNAs ac yn rheoleiddio splicing amgen mewn bôn-gelloedd sbermatogonial llygoden ［J］. Adroddiadau Bôn-gelloedd, 2022, 17(8): 1859-1873.

［12］ Yu J, Shen C, Lin M, et al. Mae BMI1 yn hyrwyddo cynnal a chadw bôn-gelloedd sbermatogonaidd trwy atal signalau Wnt10b/ -catenin ［J］ yn epigenetig. Int J Biol Sci, 2022, 18(7): 2807-2820 .

［13］ Chen Z, Li L, Wu W, et al. Mae ymarfer corff yn amddiffyn celloedd lloeren cyhyrau ymledol rhag blinder trwy echel Igfbp7-Akt-mTOR ［J］. Theranostics, 2020, 10(14): 6448-6466.

［14］ Ma Y, Anfonwr S, Sekora A, et al. Mae'r Ymateb Ataliol i Atalyddion Llwybr PI3K/AKT MK-2206 a Buparlisib Yn Perthynol i Wahaniaethau Genetig mewn Llinellau Cell Adenocarsinoma Dwyfol Pancreatig ［J］. Int J Mol Sci, 2022, 23(8): 4295.

［15］ Carson SA, Kallen AN. Diagnosis a Rheoli Anffrwythlondeb: Adolygiad ［J］. JAMA, 2021, 326(1): 65-76.

［16］ Bosch E, De Vos M, Humaidan P. Dyfodol Cryocadwraeth mewn Technolegau Atgenhedlu a Gynorthwyir ［J］. Endocrinol blaen (Lausanne), 2020, 11:67.

［17］ Wang M, Wang Q, Du Y, et al. Fitaminau wedi'u cyfuno â meddygaeth Tsieineaidd draddodiadol ar gyfer anffrwythlondeb gwrywaidd: Adolygiad systematig a meta-ddadansoddiad ［J］. Andrology, 2020, 8(5): 1038-1050.

［18］ Zhang Z, Yang J, Kong T, et al. Elfennau syndrom Meddygaeth Tsieineaidd Traddodiadol o anffrwythlondeb gwrywaidd a ddatgelir gan ddadansoddiad cudd model coed ［J］. J Tradit Chin Med, 2018, 38(6): 926-935.

［19］Ji Xin Cynnydd ymchwil ar effaith immunomodulatory glycosides Cistanche [J] Hebei Fferyllol, 2016, 38 (05): 753-756

［20］Li Kangmei, Li Mingxing, Chen Minqi, et al Cynnydd ymchwil ar effeithiau glycosidau Cistanche ar y system atgenhedlu [J] Meddygaeth Tsieineaidd Traddodiadol y Gorllewin, 2022, 35 (04): 143-146

［21］Zhang Pan, Shi Juan, Liu Li, et al Astudiaeth ar weithgaredd gwrthocsidiol glycosidau Cistanche a'u deilliadau [J] Ychwanegion Bwyd Tsieina, 2016, (02): 85-88

［22］Zhang Hao, Zheng Yuling, Ding Hui Cynnydd ymchwil ar lwybrau cysylltiedig glycosid cistanche wrth drin osteoporosis [J] Journal of Tianjin University of Traditional Chinese Medicine, 2022, 41 (04): 531-538

［23］ Dai X, Zhang Q, Yu Z, et al. Bmi1 Llygod Diffygiol Arddangos Anffrwythlondeb Gwryw［J］. Int J Biol Sci, 2018, 14(3): 358-368.

［24］ Yang W, Wu Z, Yang K, et al. Mae BMI1 yn hyrwyddo ffibrosis cardiaidd mewn methiant y galon a achosir gan isgemia trwy lwybr signalau PTEN-PI3K/Akt-mTOR［J］. Am J Physiol Heart Circ Physiol, 2019, 316(1): H61-H69.

［25］ Su Z, Yang Z, Xu Y, et al. Apoptosis, awtophagi, necroptosis, a metastasis canser［J］. Canser Mol, 2015, 14:48 .