Haniaethol

Cefndir: Cyfansoddion ffytocemegol a gweithgareddau biolegol Rosa rugosa Thunb. var. plena Ymchwiliwyd i sudd celloedd blodau brenhinol (RFCS).

Yn ôl astudiaethau perthnasol,cistancheyn llysieuyn cyffredin sy'n cael ei adnabod fel "y llysieuyn gwyrthiol sy'n ymestyn bywyd". Ei brif gydran ywcistanoside, sydd ag effeithiau amrywiol megisgwrthocsidiol, gwrthlidiol, ahyrwyddo swyddogaeth imiwnedd. Mae'r mecanwaith rhwng cistanche a gwynnu croen yn gorwedd yn effaith gwrthocsidiol cistancheglycosidau. Mae melanin mewn croen dynol yn cael ei gynhyrchu gan ocsidiad tyrosin sy'n cael ei gataleiddio gantyrosinase, ac mae'r adwaith ocsideiddio yn gofyn am gyfranogiad ocsigen, felly mae'r radicalau di-ocsigen yn y corff yn dod yn ffactor pwysigeffeithio ar gynhyrchu melanin. Mae cistanche yn cynnwys cistanoside, sy'n gwrthocsidydd a gall leihau'r genhedlaeth o radicalau rhydd yn y corff, fellyatal cynhyrchu melanin.

Cliciwch Ar Buddion Tabledi Cistanche

Am fwy o wybodaeth:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

Dulliau:Nodwyd cyfansoddion anweddol, megis linalool, alcohol ffenylethyl, citronellol, a -bisabolol, gan GCMS. Pennwyd cynnwys hyperosid, kaempferol-3-O-rutinosid, rutin, a luteolin yn ogystal â chyfanswm cynnwys flavonoid yn RFCS gan HPLC a HPLC-MS. Gwerthuswyd cyfanswm y cynnwys polyphenol gan ddull lliwimetrig Folin-Ciocalteu. Gwerthuswyd gweithgareddau gwrthocsidiol RFCS a'r safonau gan brofion sborion radical DPPH ac ABTS. Pennwyd gweithgareddau ataliol tyrosinase y samplau rhosyn a'r sylwedd safonol gan ddull sbectroffotometrig. Gwerthuswyd effeithiau gwrthficrobaidd RFCs o ran crynodiadau ataliol lleiaf (MICs) ac isafswm crynodiadau bactericidal (MBCs) neu grynodiadau Ffwngladdol lleiaf (MFCs).

Canlyniadau:Roedd y ffracsiwn rhosyn yn arddangos cynnwys uchel o gynhwysion biolegol weithgar. Cyfanswm cynnwys cyfansoddion anweddol yn RFCS oedd tua 48.21 ± 2.76 ng/mL. Cyfanswm y cynnwys asid ffenolig a chyfanswm y cynnwys flavonoid oedd 0.31 ± 0.01 mg/mL a 0.43 ± 0.01 mg/mL, yn y drefn honno. Ei werth IC50 yn yr assay DPPH oedd 1120 ± 42 ug/mL, a'i werth IC50 ar gyfer gweithgaredd sborionu radical ABTS oedd 1430 ± 42 ug/mL. Roedd RFCS yn atal ocsidiad L-tyrosine yn gryf gyda gwerth IC50 o 570 ± 21 ± 21 . Roedd pob cyfansoddyn a nodwyd yn RFCS yn arddangos gweithgaredd gwrthficrobaidd sbectrwm eang. F. niwcleatwm oedd fwyaf agored i RFCS gyda MIC o 64 ug/mL a MBC o 250 ug/mL.

Casgliadau:Oherwydd ei arogl tebyg i rosyn, gellir cyfuno alcohol ffenylethyl â linalool i'w ddefnyddio fel asiant gwyngalchu croen naturiol ac ychwanegyn gofal croen yn y diwydiannau fferyllol.

Geiriau allweddol:RFCS, cyfansoddion Ffytocemegol, Gwrthocsidiol, Gwrthficrobaidd, gweithgareddau ataliol Tyrosinase

Cefndir

Blodyn Rosa rugosa Thunb. var. Mae plena Regal nid yn unig yn cael ei ddefnyddio wrth gynhyrchu persawr ond mae hefyd wedi cael ei ddefnyddio fel bwyd iechyd a meddyginiaeth mewn gwledydd Asiaidd ers miloedd o flynyddoedd. Yn ogystal, mae rhosod yn cynnwys deunyddiau gweithredol, fel olewau hanfodol, polyffenolau, flavonoidau, ac anthocyanin, sy'n adnabyddus am eu gweithgareddau gwrthficrobaidd, gwrthlidiol, hypoglycemig a gwrthocsidiol [1-4]. Gellir bwyta rhosod mewn sawl ffurf, fel te rhosyn, cwcis rhosyn, ac olewau rhosyn. Mae cynhyrchu te rhosyn neu betalau blodau sych trwy sychu blodau rhosyn ar dymheredd isel (Rosa rugosa cv. Plena) yn cynhyrchu cyddwysiad o'r enw "nodd gell blodau rhosyn" (RFCS). Mae gwaredu RFCS yn cynrychioli gwastraff mawr o adnoddau oherwydd ei gynnwys uchel o polyffenolau ac olew hanfodol rhosyn, sydd â gweithgaredd biolegol uchel iawn. Yn ogystal, gall llygredd amgylcheddol gael ei achosi gan waredu RFCS yn amhriodol oherwydd ei fod yn anodd ei ddadelfennu. Yn ogystal, mae olewau hanfodol a polyffenolau yn gynhwysion gweithredol yn y diwydiannau fferyllol, cosmetig a bwyd. Gall sychu 1 kg o betalau rhosyn amrwd neu ddeunydd blagur blodau gynhyrchu tua 0.2 L o gyddwysiad. Defnyddir tua 40,000 kg o blagur blodau rhosyn ac 20,000 kg o betalau fesul cylchred o sychu microdon diwydiannol ym Mhingyin yn unig. Hyd yn hyn, nid oes unrhyw astudiaethau wedi nodi dull addas ar gyfer gwaredu RFCS a'r cyfansoddion bioactif a gynhwysir ynddo.

Mae dŵr gwastraff distyllu olew rhosyn (RODW) yn sgil-gynnyrch arall o ddistyllu stêm blodau rhosyn sych i gynhyrchu olew rhosyn. Mewn astudiaethau blaenorol, mae RODW wedi'i ganolbwyntio i gynhyrchu gweddillion wedi'u cyfoethogi â polyphenol sy'n cynnwys cyfansoddion ffenolig nad ydynt yn anweddol [5]. Ar ben hynny, gall y ffracsiwn polyphenol o RODW atal tyrosinase madarch yn gryf (gwerth IC50 o 0.41 ug/mL) [6]. Felly, gellir defnyddio'r polyphenolau yn RODW fel sylwedd bioactif i leddfu hyperpigmentation.

Mae bacteria pathogenig sy'n gysylltiedig â bwyd yn achosi salwch a gludir gan fwyd mewn miliynau o bobl a hyd yn oed cannoedd o farwolaethau bob blwyddyn yn UDA yn unig, ac mae cyfanswm y gost gysylltiedig oddeutu $2.4 biliwn [7]. Felly, mae'r galw cynyddol am gyfryngau gwrthficrobaidd iach, diwenwyn ac effeithiol wedi ysbrydoli ymchwil ar ychwanegion bwyd amlswyddogaethol, a gynhyrchir yn naturiol. Er bod olew rhosyn yn bennaf yn cynnwys olewau hanfodol sy'n adnabyddus am eu gweithgareddau gwrth-ficrobaidd [8], nid yw effeithiau gwrthficrobaidd RFCs wedi cael eu hymchwilio.

Mae gan y cyfansoddion ffenolig a sylweddau anweddol mewn blodau weithgareddau biolegol cryf fel effeithiau ataliol gwrthocsidiol a thyrosinase [9]. Mae datblygu dulliau ychwanegol ar gyfer atal gweithgaredd tyrosinase yn faes ymchwil gweithredol yn y diwydiannau colur swyddogaethol a bwyd oherwydd effaith gwynnu tyrosinase a'r gallu i reoli brownio [10, 11]. Gall gwrthocsidyddion leihau risgiau pryderon iechyd megis canser, heneiddio, ac atherosglerosis trwy leihau lefel y rhywogaethau ocsigen adweithiol (ROS) [12]. Mae rhai gwrthocsidyddion, fel asid ascorbig, hefyd wedi cael eu hadrodd i gael effeithiau gwynnu [11].

Yn ein prawf rhagarweiniol, gwrthficrobaidd, gwrthocsidiol, a gweithgareddau ataliol tyrosinase o RODW o Rosa rugosa Thunb. var. plena Gwerthuswyd Regal [13]. Fodd bynnag, nid oes unrhyw adroddiadau yn y llenyddiaeth sy'n ymchwilio i gyfansoddiad ffytocemegol a gweithgareddau biolegol RFCs o Rosa rugosa cv. Plena. Yn yr astudiaeth hon, (1) ymchwiliwyd i gynnwys cyfanswm y ffenoligau, flavonoidau, cynnwys cwbl solet ac anweddol; (2) archwiliwyd gweithgaredd gwrthfacterol (chwe straen) a gwrth-ffwngaidd (un straen), gwrthocsidiol, a gweithgareddau ataliol tyrosinase pob cyfansoddyn gweithredol a RFCS. Bydd ein canlyniadau yn helpu i wella gwerth rhosod ym meysydd cynhyrchion meddyginiaethol a chosmetig [13-16].

Dulliau

Cemegau

Prynwyd alcohol ffenylethyl, -bisabolol, -terpineol, citronellol, miconazole nitrad, hydroclorid tetracycline, menthol, a chamffor gan J&K Scientific Ltd. (Beijing). Prynwyd asid Kojic, hyperoside, quercetin, asid galig, kaempferol-3-O-acetylglucosylrhamnoside, a kaempferol-3-O-glucoside gan Sigma (Shanghai, Tsieina). Cafwyd cyfrwng sylfaen agar gwaed anaerobig (CDC), cyfrwng cawl actinomycete (broth GAM), cawl trwyth calon yr ymennydd (BHI), ac agar maetholion gan Suolaibao Biotech Co, Ltd (Beijing, Tsieina). Roedd y cemegau sy'n weddill yn radd ddadansoddol neu gromatograffig.

Paratoi sampl 

RFCS o Rosa rugosa Thunb. var. plena Cafwyd Regal gan Fragrant Rose Biological Technology Co, LTD ym Mhingyin. Cafodd y samplau eu hidlo trwy bilen microhidlo 0.42 μm cyn dadansoddiadau. Gwerthuswyd cyfanswm cynnwys solet RFCS trwy rewi-sychu. Adnabod Rosa rugosa Thunb. var. plena Nodwyd Regal gan yr uwch agronomegydd Guo a'i gadarnhau mewn sampl taleb (Ser. No. 0712) a adneuwyd yn Herbarium, Sefydliad Gwyddorau Rhosyn Pingyin.

Dadansoddiadau HPLC

Pennwyd crynodiad cyfansoddion polyphenol yn y dyfyniad gan ddadansoddiadau HPLC ac UV. Roedd y cyfarpar HPLC yn system LC-20A HPLC (Shimadzu Corporation, Kyoto, Japan), ac roedd ganddo golofn Ultrasphere 5 C18 (4.6 mm × 250 mm, Ultrasphere Co., Ltd., Berkshire, UK ). Roedd y cyfnod symudol yn eliwiad graddiant o ddŵr (A) ac acetonitrile (B) ac fe'i rhaglennwyd fel a ganlyn: gan ddechrau gyda 10 y cant B am 10 munud, 10-25 y cant B rhwng 15 ac 20 munud, 25-30 y cant B rhwng 20 munud. a 25 mun, 30-60 y cant B rhwng 25 a 50 munud, 60-10 y cant B rhwng 50 a 51 munud, a 10 y cant B rhwng 51 a 55 munud. Cynhaliwyd cyfradd llif y cyfnod symudol ar 1 mL / min, gosodwyd tonfedd y synhwyrydd ar 350 nm, gosodwyd popty'r golofn ar 25 gradd, a chyfaint pigiad y sampl oedd 10 μL.

Amodau HPLC-ESI-MS

Cofnodwyd data sbectrometreg màs (MS) ioneiddiad electrochwistrellu (ESI) ar offeryn Agilent-LC-1100 (Agilent, UDA). Roedd yr amodau HPLC ar gyfer y dadansoddiad HPLC-ESI-MS fel y disgrifir uchod. Roedd y paramedrau ESI fel a ganlyn: cynhaliwyd cyfradd llif y nwy gwrthdrawiad (N2) ar 10 mL / min, roedd y popty colofn yn 25 gradd, cafwyd data yn y modd ïon negyddol [MH] -, cynhaliwyd sganiau dros m / z 50 -2000, y foltedd chwistrellu oedd 4.5 kV, y foltedd capilari oedd 10 V, a thymheredd y capilari oedd 250 gradd. Nodwyd y cydrannau yn y sampl ar sail eu data sbectrol màs ac amser cadw.

Dadansoddiad GC/MS

Cafodd y cyfansoddion anweddol yn RFCS eu pennu gan fodel Shimadzu GC/MS QP2010 System Ultra wedi'i chyfarparu â Rtx-5MS (30 m × 0.25 mm, trwch ffilm 0.25 μm) colofn capilari. Roedd rhaglen y popty fel a ganlyn: gan ddechrau ar 60 gradd, gwresogi i 120 gradd ar gyfradd o 1.7 gradd C / mun, gwresogi i 200 gradd ar 2.5 gradd / mun, gwresogi i 260 gradd ar gyfradd o 8 gradd / mun, a yn olaf yn dal ar 260 gradd am 2 funud. Defnyddiwyd heliwm fel y nwy cludo, a'r gyfradd llif oedd 1.0 mL/munud. Cynhaliwyd tymheredd y chwistrellwr a'r synhwyrydd ar 250 gradd a 280 gradd, yn y drefn honno. Cynhaliwyd pigiad hollt mewn modd di-hollt. Tymheredd y ffynhonnell ïon oedd 250 gradd a'i egni ïoneiddio oedd 70 eV. Yr ystod màs oedd 35–500 Da. Nodwyd y cydrannau yn y sampl ar sail eu data sbectrol màs ac amser cadw.

Paratoi cromliniau safonol

Paratowyd atebion o alcohol ffenylethyl (2.23 mg), -bisabolol (2.1 mg), -terpineol (5.23 mg), citronellol (1.52 mg), menthol (1.32 mg), a chamffor ar wahân mewn 1 ml o asetonitrile. Nesaf, gwanhawyd yr atebion stoc gan ffactorau o ddeg mil i biliwn ag asetad ethyl, a dadansoddwyd 1 μL o bob sampl gan GS/MS. Paratowyd atebion o asid kojic (1.12 mg), hyperoside (1.07 mg), quercetin (1.07 mg), asid galig (1.29 mg), a kaempferol-3-O-acetylglucosylrhamnoside (1.15 mg) ar wahân mewn 1 mL o methyl alcohol. Gwanhawyd yr atebion stoc gan ffactorau o 2 ag alcohol methyl, a dadansoddwyd 10 μL o bob ateb gan HPLC. Dadansoddwyd pob crynodiad o'r datrysiad gweithio dair gwaith. Cafodd y cromliniau graddnodi eu plotio fel yr ardaloedd brig yn erbyn crynodiad pob safon. Cyfrifwyd cynnwys y sylwedd cyfeirio ym mhob sampl gan ddefnyddio'r cromliniau graddnodi.

Pennu cyfanswm ffenolig, flavonoidau, a chyfanswm cynnwys solet

Gwerthuswyd cyfanswm cynnwys ffenolig yr RFCS gan ddull lliwimetrig Folin-Ciocalteu [17]. Pennwyd cyfanswm cynnwys y sylwedd ffenolig o'i gymharu â chromlin safonol o asid galig. Gwerthuswyd cyfanswm cynnwys flavonoid y samplau RFCS gan HPLC, a ddarparodd gyfanswm yr holl gyfansoddion flavonoid a brofwyd. Cafodd sampl 10-ml o RFCS ei rhewi-sychu i ganfod cyfanswm y cynnwys solet. Gwnaed pob penderfyniad yn driphlyg.

Priodweddau gwrthocsidiol

Gweithgaredd sborionu radical DPPH

Gwerthuswyd gweithgaredd gwrthocsidiol RFCS a'r safonau gan weithgaredd chwilota radical DPPH gan ddefnyddio fersiwn wedi'i addasu ychydig o ddull a adroddwyd yn flaenorol [18]. Yn gryno, cymysgwyd 10 μL aliquots o'r samplau rhosyn (1000 ug/mL i 62.5 ug/mL) â 190 μL o 50 y cant ethanol yn cynnwys 0.4 mM DPPH a'u deor yn y tywyllwch ar gyfer 30 mun. Trosglwyddwyd aliquots (100 μL) o'r supernatants i mewn i 96-microplate ffynnon, a chofnodwyd amsugnedd pob un ar 517 nm gan ddefnyddio sbectroffotomedr UV-Vis Spectramax Plus384 (Dyfeisiau Moleciwlaidd, Sunnyvale, California, UDA). Defnyddiwyd asid asgorbig (1000 ug/mL i 0.05 ug/mL) fel rheolydd positif, a defnyddiwyd hydoddiant DPPH heb sampl fel y rheolydd negyddol. Penderfynwyd ar y gwerthoedd IC50, sy'n cynrychioli crynodiadau samplau rhosyn a sylwedd safonol lle cafodd 50 y cant o'r radical DPPH ei atal. Perfformiwyd y profion yn driphlyg, a chyfrifwyd canran y sborion DPPH gan ddefnyddio'r hafaliad canlynol.

Pennu sborion radical ABTS

Perfformiwyd assay ABTS o RFCS yn unol â fersiwn wedi'i addasu o ddull a adroddwyd yn flaenorol [19]. Yn gryno, cynhyrchwyd yr hydoddiannau stoc trwy gymysgu meintiau cyfartal o hydoddiant ABTS● plws 7.4 mM a hydoddiant persylffad potasiwm 2.6 mM, a deorwyd y cymysgedd ar dymheredd ystafell am 12 awr yn y tywyllwch. Yna, cafodd y datrysiad ei gydbwyso ag 1 ml o hydoddiant ABTS● plws gyda 57 y cant ethanol yn gweithredu fel rheolydd positif. Amsugnedd yr hydoddiant ar 734 nm oedd 1.17 ± {0.02 uned. Cymysgwyd aliwquots (10 μL) o'r samplau rhosyn (1000 ug/mL i 62.5 ug/mL) ag 1.0 ml o'r hydoddiant ABTS• plws gwanedig. Cymysgwyd y gymysgedd yn egnïol a'i ddeori ar 30 gradd am 30 munud. Yna mesurwyd yr amsugnedd ar 520 nm gyda thonfedd cyffro o 734 nm gan ddefnyddio'r sbectroffotomedr. Y safon gadarnhaol oedd Trolox (2000 ug/mL i 0.05 ug/mL).

Gwaharddiad( y cant )={(Amsugno'r gwag - Amsugno'r sampl)/Amsugno'r wag} × 100

Pennu gweithgaredd ataliol Tyrosinase

Penderfynwyd ar weithgareddau ataliol tyrosinase y samplau rhosyn a sylwedd safonol gan ddull sbectroffotometrig [17]. Yn gyntaf, gwanhawyd 300 μL aliquots o grynodiadau gwahanol (1000 ug/mL i 62.5 ug/mL) o bob sampl gyda 700 μL o 0.175 M byffer ffosffad sodiwm (pH 6.8), yna ychwanegwyd 1.0 ml o doddiant DOPA 10 mM ac 1.0 ml o tyrosinase madarch (220 uned / ml). Defnyddiwyd ethanol (300 μL, 50 y cant) ac asid kojic (2000 ug/mL i 0.1 ug/mL) fel cyfeirnod gwag a safon gadarnhaol, yn y drefn honno. Cafodd cymysgedd yr adwaith ei vortexed a'i gynnal ar 37 gradd am 15 munud, ac yna mesurwyd yr uchafswm amsugno o dopachrome (a osodwyd ar 479 nm) gan ddefnyddio darllenydd microplate (Molecular Devices, Sunnyvale, California, UDA). Perfformiwyd y profion yn driphlyg, a chyfrifwyd gwerth gweithgaredd atal tyrosinase fel y disgrifir uchod.

Priodweddau gwrthficrobaidd

Profion gwrthfacterol ac antifungal

Mesurwyd y gweithgaredd gwrthficrobaidd gan y dull a ddisgrifiwyd gan Xue [20]. Cafwyd yr holl fathau safonol o Ganolfan Ddiwylliant Microbioleg Guangdong (Guangzhou, Tsieina). Cafodd Listeria ivanovii (ATCC 19119) ei feithrin yn BHI, cafodd Salmonela enteritidis (ATCC 14028) Staphylococcus aureus (ATCC 25923), ac Escherichia coli (ATCC 25922) eu meithrin mewn agar maetholion (NA) am 24 h ac ar 37 gradd . Diwylliwyd Candida albicans (ATCC 10231) yn PHB ar 37 gradd am 24 h. Cafodd propionibacterium acnes (ATCC 6919) a Fusobacterium nuclear um (ATCC 10953) eu meithrin mewn agar CDC ar 37 gradd am 48 h mewn deorydd anaerobig YQX-II (Shanghai, Tsieina). Roedd y cyfrif celloedd terfynol mewn l mL o broth tua 106 o unedau ffurfio cytref (CFU/mL). Defnyddiwyd hydoddiant 10 mg/ml o nitrad miconazole a hydro clorid tetracycline mewn dŵr fel rheolaeth gadarnhaol yn erbyn ffyngau a bacteria, yn y drefn honno.

Pennu isafswm crynodiad ataliol (MIC) ac isafswm crynodiad bactericidal (MBC) neu isafswm crynodiad ffwngladdol (MFC)

Pennwyd gwerthoedd MIC a MBC neu MFC fel y disgrifiwyd yn flaenorol gan Xue. Yn fyr, roedd gwanediadau 100 μL (tua 100,000 CFU/mL) o Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Salmonella enteritidis, Fusobacterium nucleatum, a Candida albicans mewn cawl maethol a Listeria ivanovii a Propioni wedi'i blannu'n broth ac mewn micro-asgellau mewn broth M.A. platiau. Yna, ychwanegwyd aliquots 100 μL o hydoddiannau'r cyfansoddyn prawf ar ôl gwanhau cyfresol deublyg gyda broth maetholion (o 2 mg / mL i 3 ug / mL). Defnyddiwyd brothau gyda 5 y cant (v/v) DMSO fel rheolaethau. Deorwyd y dysglau Petri ar 37 gradd am 24 h ac eithrio Propionibacterium acnes a Fusobacterium nucleatum, a gafodd eu deor ar 37 gradd am 48 h. Cofnodwyd yr MIC fel y crynodiad isaf o'r sampl yn dangos dim twf canfyddadwy. Er mwyn pennu gwerthoedd MBC neu MFC ar gyfer dim twf bacteriol neu ffwng, cafodd 10 μL o grynodiadau is-ataliol o'r cyfansoddion prawf eu deor ar blatiau agar CDC neu GMA am 24 neu 48 h. Gwnaed pob penderfyniad yn driphlyg.

Dadansoddi data

Cyflwynir data fel cymedr tri atgynhyrchiad ± gwyriad safonol. Defnyddiwyd ANOVA unffordd gyda phrawf amrediad lluosog Duncan i ddadansoddi'r canlyniadau gyda SPSS 13.0 a Sigma Plot 10.0, yn y drefn honno, gan ddefnyddio cyfrifiadur (Lenovo, Yangtian B 41) wedi'i gyfarparu â system weithredu Win 7. Penderfynwyd bod gwerth-p o < 0.05 yn ystadegol arwyddocaol.

Canlyniadau a thrafodaeth

Cynnwys sylwedd anweddol

Gan fod gan samplau RFCS arogl rhosyn penodol, fe wnaethom ddadansoddi a chymharu cydrannau anweddol ei echdyniad ethyl asetad. Pennwyd cynnwys cydrannau anweddol dyfyniad asetad ethyl RFCS gan GC/MS a'u dadansoddi o'u cymharu â phedair cromlin safonol, a mynegir y canlyniadau fel ng/mL.

Nodwyd chwe phrif gydran ar yr un pryd yn ôl eu hamseroedd cadw safonol a darnau ïon MS. Dangosir cromatogramau GC y sylwedd cyfeirio mewn RFCs yn Ffig. 1. Cyflwynir cynnwys pob elfen ym mhob sampl yn Nhabl 1. Fel y dangosir yn Ffig. 1, gwahanwyd chwe chyfansoddyn yn llwyddiannus o dan y rhaglen tymheredd graddiant. Cyfanswm cynnwys cyfansoddion anweddol yn RFCS oedd tua 48.21 ± 2.76 ng/mL, a chwe phrif fath o gyfansoddion anweddol, gan gynnwys alcohol ffenylethyl (40.48 ± 2.24 ng/mL), citronellol (7.83 ± {{{{}). 16}}.77 ng/mL), -bisabolol (0.08 ± 0.01 ng/mL) ac asetad ffenylethyl (11.20 ± 0.89 ng/mL) wedi'u nodi (dau frig heb eu nodi a nodwyd ac mae cynnwys linalool yn brin). Mewn astudiaethau blaenorol ar y cyfansoddion anweddol yn RODW, GC-MS, yn fwy penodol HS-SPME/GC/MS, defnyddiwyd technegau'n eang [13, 21-24]. Mewn cyferbyniad â'r astudiaethau blaenorol hyn, mae ein hastudiaeth yn adrodd ar gynnwys absoliwt y cydrannau. Er bod ystod eang o gyfansoddion anweddol, nid oedd unrhyw wahaniaethau yn y cydrannau dominyddol. Y prif gyfansoddion anweddol yn RFCS oedd alcoholau monoterpene (citronellol, linalool, ac alcohol ffenylethyl, sy'n benodol i rosod bach). Mae'r mathau o gydrannau dominyddol mewn RFCs yn debyg i rai RODW, ond mae gwahaniaeth sylweddol yng nghynnwys y cydrannau [13]. Un rheswm posibl dros y gwahaniaethau hyn yw bod y rhan fwyaf o'r cydrannau anweddol wedi'u colli yn y broses sychu te rhosyn.

Cyfanswm cynnwys ffenolig, flavonoid, a solet

Dangosir y flavonoidau, eu hamseroedd cadw, a chromliniau graddnodi cyfansoddion safonol yn RFCS, fel y'u pennwyd gan ddefnyddio HPLC, yn Ffig. 2. Gwahanwyd pedwar cyfansoddyn yn llwyddiannus o dan y rhaglen tymheredd graddiant, fel y dangosir yn Ffig. 2. Llinoledd dangoswyd cromliniau graddnodi a chyfernodau atchweliad flavonoidau yn Nhabl 2. Canfuwyd bod y cyfansoddion cyfeirio yn dangos llinoledd da (R2 Yn fwy na neu'n hafal i 0.997). Canfuwyd bod RFCS yn cynnwys tair prif gydran, sef, hyperosid (0.18 ± 0.01 mg/mL), kaempferol{{10}}O -rutinoted (0.12 ± 0.{{20}}1 mg/mL), a rutin (0.23 ± 0. 01 mg/mL). Cyfanswm y cynnwys ffenolig a chyfanswm y cynnwys flavonoid oedd 0.31 ± 0.01 mg / mL a 0.43 ± 0.01 mg / mL, yn y drefn honno. Cyfanswm y cynnwys solet yn RFCS oedd 1.45 ± 0.04 mg/mL.

Mae astudiaethau blaenorol wedi nodi mai'r cyfansoddion ffenolig a flavonoid amlycaf mewn te rhosyn rugosa oedd asid gallic, catechin, epicatechin, a quercetin a chyfanswm y cynnwys polyphenol a chynnwys flavonoid yn echdyniad polyphenol te Rosa rugosa oedd 875.2 mg/g a 610.3 mg/g , yn y drefn honno [1]. Yn ogystal, canfuwyd rutin, mulflorin B, hyperoside, kaempferol, ac asid ellagic hefyd yn ffracsiynau resin RODW [6]. Ar ben hynny, yn wahanol i astudiaethau blaenorol, er bod ein hastudiaeth wedi defnyddio HPLC-MS i bennu'r cyfansoddion ffenol a flavonoid yn RODW, dim ond un o'r cyfansoddion amlycaf, kaempferol-3-O-rutinosid, a ddarganfuwyd yn yr astudiaeth hon ac astudiaethau blaenorol [6 , 13]. Ni chanfuwyd yr un o'r cyfansoddion ffe nol yn RFCS gan HPLC yn bennaf oherwydd bod y crynodiadau o ffenolau a flavonoidau yn RFCS yn isel iawn, ac felly nid oes modd eu canfod gan HPLC. Roedd y solidau hynny yn RFCS yn gymysgedd o foleciwlau bach.

Gallu gwrthocsidiol 

Mae Tabl 3 yn cyflwyno gwerthoedd DPPH IC50 RFCS a'r cyfansoddion safonol. Y flavonoidau gyda gwerthoedd IC50 < 1 ug/mL, gan gynnwys hyperosid (gwerth IC50 o 0.695 ± 0.021 ug/mL ), kaempferol-3-O-rutinoside (IC50 gwerth 0.808 ± 0.024 ug/mL) , rutin (gwerth IC50 o 0.715 ± {{60}}.017 ug/mL), a luteolin (gwerth IC50 o 0.507 ± 0.015 ug/mL), yn dangos gweithgareddau sborionu radical DPPH cryfach na RFCS (gwerth IC50 o 1120 ± 42 ug/mL). Roedd cyfansoddion anweddol sengl, megis linalool, alcohol ffenylethyl, citronellol, a -bisabolol, yn dangos gweithgarwch sborionu radical gwan gyda gwerthoedd IC50 o > 10,000 ug/mL. Mewn adroddiadau blaenorol, mae gweithgareddau gwrthocsidiol amrywiol gynhyrchion naturiol, gan gynnwys y rhai o rhosyn, wedi'u priodoli i gynnwys cyfansoddion ffenolig [25, 26]. Defnyddir assay radical ABTS hefyd i werthuso gweithgaredd chwilota radical gwrthocsidyddion sy'n rhoi hydrogen a thorri cadwyn mewn llawer o gynhyrchion naturiol [27, 28]. Fel y dangosir yn Nhabl. 3, mynegir gweithgareddau sborionu radical ABTS cyfansoddion sengl a RFCS fel ug/mL. Yn gyson â gweithiau blaenorol, roedd flavonoidau yn arddangos gweithgareddau gwrth-radical sylweddol uwch a chynhwysedd gwrthocsidiol na chyfansoddion anweddol [8, 13]. Yn yr astudiaeth bresennol, roedd canlyniadau sborion ABTS yn debyg i rai DPPH; cyfansoddion flavonoid gyda gwerthoedd IC50 < 1 ug/mL, gan gynnwys hyperosid (gwerth IC50 o 0.526 ± 0.014 ug/mL), kaempferol-3-O-rutinoside (gwerth IC50 o 0.719 ± 0.016 tinug/mL gwerth), gwerth tinug/mL o 0.621 ± 0.024 ug/mL), a luteolin (gwerth IC50 o 0.436 ± 0.026 ug/mL), yn dangos gweithgareddau sborionu radical ABTS cryfach na RFCS (gwerth IC50 o 1430 ± 49 ug/mL). Roedd cyfansoddion anweddol sengl, megis linalool, alcohol ffenylethyl, citronellol, a -bisabolol, yn arddangos gweithgareddau gwrthradical gwan (gwerthoedd IC50 o > 10,000 ug/mL).

Gweithgareddau ataliol Tyrosinase

Mae Tyrosinase yn ensym amlswyddogaethol sy'n cynnwys copr a geir mewn ffyngau, mamaliaid a phlanhigion [29]. Mae gan Tyrosinase ddau weithgaredd ensym gwahanol, sef, gweithgaredd monophenolase a gweithgaredd diphenolase [30]. Fe wnaethom gynnal astudiaeth gychwynnol o weithgareddau ataliol tyrosinase tyrosinase madarch. Yn unol â'r assay hwn, dangosodd RFCS weithgareddau ataliol tyrosinase cryf gyda gwerth IC50 o 570 ± 21 ug/ mL (Tabl 3). Roedd y cyfansoddion anweddol, gan gynnwys linalool, alcohol ffenylethyl, citronellol, a -bisabolol, hefyd yn dangos effeithiau ataliol tyrosinase sy'n dibynnu ar ddos ​​gyda gwerthoedd IC50 o 730 ± 44 ug/mL, 315 ± 13 ug/mL, 825 ± 31 ug/mL 635 ± 22 ug/mL, yn y drefn honno. Roedd yr holl gyfansoddion flavonoid, sef, hyperosid, kaempferol-3-O-rutinosid, a hyd yn oed rutin yn gryfach nag asid kojic (80 ± 17 ug/mL), ac roedd gan bob un ohonynt werthoedd IC50 o dan 1 ug/mL. Yn debyg i'r adroddiad gan Solimine, mae'r ffracsiwn wedi'i gyfoethogi â polyphenol o RODW, sy'n cynnwys cyfansoddion flavonoid, yn arddangos gweithgaredd ataliol tyrosinase amlwg gyda gwerth IC50 o 0.41 ± 0.01 ug/mL [6]. Yn y cyfamser, mae effeithiau ataliol tyrosinase RFCS yn gryfach na RODW o Pingyin [13]. Mae'r cynnwys flavonoid yn cyfrannu at effaith ataliol tyrosinase cyffredinol RODW.

Gweithgareddau gwrthficrobaidd

Cyflwynir canlyniadau'r astudiaethau gweithgaredd gwrthficrobaidd o'r gwahanol ffracsiynau rhosyn, RFCS, a'r gwrthfiotigau safonol (tetracycline a hydroclorid) yn Nhabl 4. Roedd F. nucleatum yn fwyaf agored i RFCS a dangosodd MIC o 64 ug/mL a MBC o 250 ug/ml. Y gwerthoedd MIC ar gyfer RFCS yn erbyn P. acnes a S. awrëws oedd 125 ug/mL. Y gwerthoedd MIC yn erbyn bacteria eraill oedd 250 ug/mL. Penderfynwyd ar werthoedd MIC a MBC neu MFC o naw cydran RFCS i nodi'r cyfansoddion sy'n gyfrifol am effeithiau gwrth-microbaidd RFCS. Canfuwyd mai L. ivanovii ac F. nucleatum oedd y rhai mwyaf agored i -bisabolol, a dangosasant werthoedd MIC o 8 ug/mL a gwerthoedd MBC o 32 ug/mL yn erbyn y rhywogaethau hyn (Tabl 4). Ar ôl -bisabolol, dangosodd alcohol ffenylethyl y gwerthoedd MIC a MBC neu MFC isaf ymhlith holl gyfansoddion RFCS. Ar y cyfan, chwaraeodd y cyfansoddion anweddol rôl bwysicach na'r cyfansoddion flavonoid yng ngweithgaredd gwrthficrobaidd RFCS.

Mae ymchwiliadau blaenorol i effeithiau gwrthficrobaidd y ffracsiynau amrywiol o rosyn wedi nodi canlyniadau tebyg [8, 28, 31]. Mae'r olew hanfodol a darnau amrywiol o rosyn, gan gynnwys y dyfyniad dyfrllyd, echdyniad ethanol, dyfyniad clorofform, ffracsiwn asetad ethyl, a ffracsiwn butanol, yn arddangos gweithgareddau gwrthficrobaidd sbectrwm eang. Ac eithrio'r ffracsiwn asetad ethyl, mae olew hanfodol rhosyn yn gymharol fwy gweithgar yn erbyn y bacteria a brofwyd [28]. Mae olewau absoliwt a hanfodol rhosyn yn cynnwys lefelau uchel o polyffenolau ac alcohol ffenylethyl, sy'n arwain at briodweddau gwrthficrobaidd rhagorol [8]. Oherwydd bod cynnwys olew anweddol yn RODW yn uwch na RFCS, mae effaith gwrthficrobaidd RODW yn well na RFCS [13]. Gallai'r ffracsiwn wedi'i gyfoethogi â polyphenolic o de ru gosa atal synhwyro cworwm Escherichia coli a Pseudomonas aeruginosa a fformatiosignificancen biofilm [1]. Mae effeithiau gwrthficrobaidd rhai o gynhwysion gweithredol olew rhosyn fel linalool, citronellol, a geraniol wedi'u cadarnhau [32, 33]. Hyd yn hyn, nid yw gweithgaredd gwrthficrobaidd RFCS o R. Fenghua wedi'i werthuso. Mae'r canlyniad hwn yn cefnogi'n benodol y ffaith bod cynnwys uchel alcohol ffenylethyl a chydrannau anweddol eraill yn cyfrannu at weithgareddau gwrthficrobaidd RFCS [34].

Casgliadau

Dangosodd ein hastudiaeth weithgareddau atal gwrthocsidiol, gwrth-ficrobaidd a thyrosinase cryf RFCS. Oherwydd arogl tebyg i rosyn o alcohol ffenylethyl ar y cyd â'r gweithgareddau ataliol tyrosinase a'r effaith gwrthficrobaidd yn erbyn isrywogaeth S. enteritidis enteritidis, C. albicans, a P. acnes, gellir defnyddio RFCS fel ychwanegyn croen-gwyno a gofal croen naturiol yn y diwydiant colur. Yn ogystal, oherwydd ei weithgareddau gwrthocsidiol ac effeithiau gwrthficrobaidd yn erbyn L. ivanovii, S. isrywogaeth, E. coli, a S. awrëws, gellir defnyddio RFCS fel cyffeithydd naturiol ac asiant gwrthficrobaidd yn y diwydiannau bwyd a fferyllol.

Diolchiadau

Diolch i Fragrant Rose Biological Technology Co, LTD ym Mhingyin am ddarparu'r RFCS.

Ariannu

Cefnogwyd y gwaith hwn gan Gasgliad ac Arloesi Adnoddau Plannu Ginseng (Rhif 20151FDA31290).

Argaeledd data a deunyddiau

Mae'r setiau data a ddefnyddiwyd a/neu a ddadansoddwyd yn ystod yr astudiaeth gyfredol ar gael gan yr awdur cyfatebol ar gais rhesymol.

Cyfraniadau awduron

GR, GZ, a PX a greodd yr astudiaeth. GR a GZ oedd yn gyfrifol am gasglu data a mewnbynnu data. Dadansoddodd PX a XS ddata ac ysgrifennodd y llawysgrif. Darllenodd a chymeradwywyd y llawysgrif derfynol gan bob awdur.

Cymeradwyaeth foesegol a chaniatâd i gymryd rhan

Nid yw'r bennod hon yn cynnwys unrhyw astudiaethau gyda chyfranogwyr dynol neu anifeiliaid a berfformiwyd gan unrhyw un o'r awduron ac nid oes unrhyw ganiatâd gwybodus dan sylw.

Caniatâd i gyhoeddi

Ddim yn berthnasol.

Diddordebau cystadleuol

Mae'r awduron yn datgan nad oes ganddynt unrhyw fuddiannau cystadleuol.

Nodyn y Cyhoeddwr

Mae Springer Nature yn parhau i fod yn niwtral ynghylch hawliadau awdurdodaeth mewn mapiau cyhoeddedig a chysylltiadau sefydliadol.

Cyfeiriadau

1. Zhang JM, Rui X, Wang L, Guan Y, Sul XM, Dong MS. Mae dyfyniad polyphenolig o de Rosa rugosa yn atal synhwyro cworwm bacteriol a ffurfio biofilm. Rheoli Bwyd. 2014; 42: 125-31.

2. Tursun X, Zhao YX, Talat Z, Xin XL, Tursun A, Abdulla R, Akber AH. Effaith gwrthlidiol dyfyniad blodau Rosa rugosa mewn macroffagau RAW264.7 wedi'u hysgogi gan lipopolysaccharide. Biomol Ther. 2016; 24: 184-90.

3. Thao NP, Luyen BTT, Tai BH, Yang SY, Jo SH, Cuong NX, Nam NH, Kwon YI, Minh CV, Kim YH. Ataliad swcras berfeddol llygod mawr o gyfansoddion o wreiddiau Rosa rugosa Thunb. Bioorg Med Chem Lett. 2014; 24: 1192-6.

4. Lee HJ, Ahn JW, Lee BJ, Moon SG, Seo Y. Gweithgaredd gwrthocsidiol Rosa rugosa. Ksbb J. 2004; 19:67–71.

5. Kovacheva N, Rusanov K, Atanassov I. Amaethu diwydiannol o olew-dwyn rhosyn a rhosyn cynhyrchu olew ym Mwlgaria yn ystod yr 21ain ganrif, cyfarwyddiadau a heriau. Biotechnol Biotec Eq. 2010; 24: 1793-8.

6. Solimine J, Garo E, Wedler J, Rusanov K, Fertig O, Hamburger M, Atanassov I, Butterweck V. Tyrosinase-cyfansoddion atal o ffracsiwn cyfoethogi polyphenol o ddŵr gwastraff distyllu olew rhosyn. Ffitotherapi. 2016; 108:13-9.

7. Callaway TR, Edrington TS, Anderson RC, Byrd JA, Nisbet DJ. Ecoleg ficrobaidd gastroberfeddol a diogelwch ein cyflenwad bwyd mewn perthynas â salmonela. J Anim Sci. 2008;86:163–72.

8. Shohayeb M, Abdel-Hameed ESS, Bazaid SA, Maghrabi I. Gweithgaredd gwrthfacterol ac antifungal o Rosa damascena MILL.Essential olew, darnau gwahanol o betalau rhosyn. J Pharmac Byd-eang. 2014; 8:01–7.

9. Kim S, Lee S, Gwak K, Lee J, Choi I. Effaith gwynnu a gweithgaredd gwrthocsidiol olewau hanfodol o Cryptomeria japonica. Med Planta. 2011; 77: 1301.

10. Baek SH, Nam IJ, Kwak HS, Kim KC, Lee SH. Effeithiau gwrth-melanogenig cellog echdyniad hadau Euryale ferox ffracsiwn asetad ethyl trwy'r peiriannau diraddio lysosomaidd. Int J Mol Sci. 2015; 16:9217-35.

11. Roh JS, Han JY, Kim JH, Hwang JK. Effeithiau ataliol cyfansoddion gweithredol wedi'u hynysu o hadau safflwr (Carthamus tinctorius L.) ar gyfer melanogenesis. Tarw Pharm Biol. 2004; 27: 1976–8.

12. Takaki A, Yamamoto K. Rheoli straen ocsideiddiol mewn carcinoma hepatocellular: defnyddiol neu niweidiol? Byd J Hepatol. 2015; 7: 968-79.

13. Xue P, Sul XY, Zhang WY, Wang QC, Ren GX. Cyfansoddion ffytocemegol, gwrthocsidiol, gwrthficrobaidd, gweithgareddau ataliol Tyrosinase o RODW. Technoleg Gwyddor Bwyd Modern. 2017; 33: 105-10.

14. Briehl MM. Ocsigen mewn iechyd dynol o fywyd i farwolaeth - dull o ddysgu bioleg rhydocs a signalau i fyfyrwyr graddedig a meddygol. Redox Bio. 2015; 5:124–39.

15. Ellisworth DC. Arsenig, ocsigen adweithiol, a chamweithrediad endothelaidd. J Pharmacol Exp Ther. 2015; 353:458-64.

16. Balaguer A, Chisvert A, Salvador A. LC sy'n gyfeillgar i'r amgylchedd ar gyfer pennu asid asgorbig ar yr un pryd a'i ddeilliadau mewn colur gwynnu croen. J Medi Sci. 2008; 31:229–36.

17. Fawole OA, Makunga NP, Opara UL. Gweithgareddau gwrthfacterol, gwrthocsidiol, a thyrosinase-atal o ffrwythau pomgranad dyfyniad methanolic croen. Med Altern Ategol BMC. 2012; 12:1-11.

18. Parc KM, Kwon KM, Lee SH. Gwerthusiad o'r gweithgareddau gwrthocsidiol a phriodweddau ataliol tyrosinase o ddetholiadau Mycelium Culture. Compl Alt Med. 2015; 2015: 616298-304.

19. Thaipong K, Boonprakob U, Crosby K. Cymharu profion ABTS, DPPH, FRAP, ac ORAC ar gyfer amcangyfrif gweithgaredd gwrthocsidiol o echdynion ffrwythau guava. J Cyfansoddion Bwyd Rhefrol. 2006; 19:669–75.

20. Xue P, Yao Y, Yang XS, Feng J, Ren GX. Gwell effaith gwrthficrobaidd dyfyniad ginseng trwy drawsnewid gwres. J Gins Res. 2016; 41: 180-7.

21. Rusanov KE, Kovacheva NM, Atanassov II. Dadansoddiad gc/ms cymharol o flodyn rhosyn ac anweddolion olew distyllog y rhosyn sy'n dwyn olew. Biotechnol Biotec Eq. 2014; 25: 2210-6.

22. Koksal N, Saribas R, Kafkas E, Aslancan H, Sadighazadi S. Pennu cyfansoddion anweddol yr olew rhosyn cyntaf a'r dŵr rhosyn cyntaf trwy dechnegau hs-spme/GC/ms. Afr J Tradit Ategu Alt Med. 2015; 1212: 145-50.

23. Mahboubifar M, Shahabipour S, Javidnia K. Gwerthusiad o'r cydrannau ocsigenedig gwerthfawr mewn dŵr rhosyn Iran. Intern Int J Chemtech Res. 2014; 6:4782–8.

24. Lei G, Wang L, Liu X, Zhang A. Meintioli alcohol ffenylethyl yn gyflym mewn dŵr rhosyn a phroffiliau cemegol dŵr rhosyn ac olew o Dde-ddwyrain Tsieina ac oddi yno. J Liq Chromatogr Rela Tech. 2015; 38:823-32.

25. Wong PY, Kitts DD. Astudiaethau ar briodweddau gwrthocsidiol a gwrthfacterol deuol darnau persli (Petroselinum crispum) a cilantro (Coriandrum sativum). Cemegydd Bwyd. 2006; 97:505–15.

26. Li L, Ham H, Sung J, Kim Y, Lee H. Gweithgareddau gwrthocsidiol o echdynion methanolig o bedwar cyltifar rhosyn gwahanol. J Bwyd Nutr Res. 2014; 2: 69-73.

27. Netzel M, Strass G, Bitsch I, Konitz R, Christmann M, Bitsch R. Effaith prosesu grawnwin ar ffenoligau gwrthocsidiol dethol mewn gwin coch. J Bwyd Eng. 2003; 56:223-8.

28. Joo SS, Kim YB, Lee DI. Priodweddau gwrthficrobaidd a gwrthocsidiol metabolion eilaidd o'r blodyn rhosyn gwyn. Pathol Planhigion J. 2010;26:57–62.

29. Saanchez-Ferrer A, Rodríguez-López JN, García-Cánova F, García-Carmona F. Tyrosinase: adolygiad cynhwysfawr o'i fecanwaith. Bioch Et Biophy Acta. 1995; 1247: 1-11.

30. Kim YJ, atalyddion Uyama H. ​​Tyrosinase o ffynonellau naturiol a synthetig: strwythur, mecanwaith atal a phersbectif ar gyfer y dyfodol. Cell Mol Life Sci. 2005; 62: 1707-23.

31. Dywedodd BOS, Haddadi-Guemghar H, Boulekbache-Makhlouf L, Rigou P, Remini H, Adjaoud A. Cyfansoddiad olewau hanfodol, gweithgareddau gwrthfacterol a gwrthocsidiol hydrodistillation dyfyniad o ffrwythau globulus ewcalyptws. Cynnyrch Cnwd Ind. 2016; 89: 167-75.

32. Aridogan BC, Baydar H, Kaya S, Demirci M, Mumcum E. Gweithgaredd gwrthficrobaidd a chyfansoddiad cemegol rhai olewau hanfodol. Arch Pharm Res. 2002;25:860–4.

33. Gochev V, Wlcek K, Buchbauer G, Stoyanova A, Dobreva A, Schmidt E, Jirovetz L. Gwerthusiad cymharol o weithgaredd gwrthficrobaidd a chyfansoddiad olewau rhosyn o wahanol darddiad daearyddol, yn enwedig olew rhosyn Bwlgareg. Cymmun Nat Prod. 2008; 3: 1063-8.

34. Etschmann MMW, Bluemke W, Sell D, Schrader J. Cynhyrchu biotechnolegol 2-phenylethanol. Appl Biot Microbiol. 2002; 59:1–8.